CN114727642A - 处理生物质以生产寡糖的方法和相关组合物 - Google Patents

处理生物质以生产寡糖的方法和相关组合物 Download PDF

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Abstract

本文提供了形成用于人食用的成分的方法。该方法可包括从生物质中分离一种或多种可溶性多糖、从生物质产生一种或多种寡糖、以及将一种或多种分离的可溶性多糖与产生的寡糖结合以形成成分。还提供了预处理生物质的方法。该方法可包括对生物质施用物理预处理、对经物理预处理的生物质施用温和预处理、以及对经温和预处理的生物质施用强预处理。还提供了用于人食用的成分。

Description

处理生物质以生产寡糖的方法和相关组合物
交叉引用
本申请要求2019年8月16日提交的英国专利申请号1911762.1、2019年8月16日提交的英国专利申请号1911764.7和2020年2月19日提交的英国专利申请号2002315.6的权益,其全部内容通过引用并入本文。
背景技术
含糖食物和饮料是全世界文化和生活习惯的重要组成部分,但其中所含的糖与人们的肥胖、糖尿病、牙齿健康不良和破坏性行为有关。由于这些原因,消费者的偏好已经从含糖食物中转移出来,并且政府越来越多地实施法规以鼓励减少糖的食用。
因此,几十年来,业界一直在寻找合适的低热量甜味剂来代替食物和饮料中的糖。遗憾的是,许多糖替代品都是由非天然资源生产的,并且常常伴随其甜味略带有苦味或其他令人讨厌的味道,这两种味道无法吸引消费者。此外,虽然许多甜味剂能够模拟食物和饮料中糖的甜味,但很少有甜味剂能够模拟糖在食物中所起到的宽泛作用,诸如增加体积、调节质地、提供结构、充当防腐剂以及通过焦糖化和Maillard反应调节颜色和风味。此外,许多能够模拟糖的这些物理特性的增量型甜味剂均具有胃肠道耐受性问题,这将其使用量限制在远低于标准西方饮食中替代糖所需的水平。
膳食纤维是积极饮食的重要组成部分,且有助于维持消化系统的健康和肠道菌群的良好调节。这种纤维包括不同链长和类型的糖类。除了天然存在于各种各样的食物中,纤维还可以单独生产,并在生产过程中添加到其他食物中。
发明内容
本公开内容的其他方面和优点将通过以下详细描述对于本领域技术人员变得显而易见,其中仅示出和描述了本公开内容的说明性实施方案。如将认识到的,本公开内容能够具有其他不同的实施方案,并且其若干细节能够在各个明显的方面进行修改,所有这些均不背离本公开内容。因此,附图和描述应被认为本质上是说明性的,而非限制性的。
在一些实施方案中,本文描述了生产用于人食用的成分的方法。一种生产用于人食用的成分的方法可以包括:(a)从生物质中分离一种或多种可溶性多糖;(b)使剩余的生物质与一种或多种酶接触以形成一种或多种寡糖;(c)分离一种或多种寡糖;和(d)将来自步骤(a)的一种或多种可溶性多糖的一部分与来自步骤(c)的一种或多种寡糖的一部分结合以形成所述成分。
在一些情况下,所述方法可包括纯化经分离的一种或多种可溶性多糖。
在一些情况下,所述方法可包括纯化经分离的一种或多种寡糖。
在一些情况下,所述方法可包括处理生物质以溶解一种或多种可溶性多糖。
在一些情况下,所述方法可包括纯化经分离的一种或多种可溶性多糖。
在一些情况下,所述处理包括热化学处理。
在一些情况下,所述热化学处理包括热水处理或热碱处理中的至少一种。
在一些情况下,热碱处理使用pH为10至14的碱。
在一些情况下,热碱处理使用氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸钙、氢氧化钙、硫酸铵、氢氧化铵或氨水中的至少一种。
在一些情况下,所述处理可以在30℃至180℃的温度下进行。
在一些情况下,所述处理可进行10分钟至24小时。
在一些情况下,在步骤(d)之前干燥一种或多种可溶性多糖和/或一种或多种寡糖。
在一些情况下,在步骤(d)之后干燥一种或多种可溶性多糖和/或一种或多种寡糖。
在一些情况下,所述成分在水中可溶解。
在一些情况下,所述成分在水中的溶解度可以是在50℃下每100g水至少80g所述成分。
在一些情况下,所述方法包括将所述成分与液体组合以形成液体成分。
在一些情况下,液体成分的粘度可以类似于玉米糖浆的粘度。
在一些情况下,液体成分的粘度可以类似于高果糖玉米糖浆的粘度。
在一些情况下,所述液体成分的每克卡路里比玉米糖浆或高果糖玉米糖浆更低。
在一些情况下,所述液体成分的血糖指数比玉米糖浆或高果糖玉米糖浆更低。
在一些情况下,液体包含水。
在一些情况下,所述液体成分包含至少20%干重的至少一种寡糖和至少2%干重的至少一种多糖。
在一些情况下,所述液体成分的粘度为5cps至100,000cps、8,000cps至100,000cps、10,000cps至50,000cps或15,000cps至25,000cps。
在一些情况下,所述液体成分包含至少2%干重的木聚糖。
在一些情况下,所述液体成分包含至少2%干重的甘露聚糖。
在一些情况下,所述液体成分包含至少2%干重的纤维素衍生物。
在一些情况下,液体成分的多糖浓度为0.1%至50%w/v。
在一些情况下,所述液体成分包含多糖和寡糖的量的比例为1:100至1:1。
在一些情况下,所述一种或多种可溶性多糖包含甘露聚糖、木聚糖、混合键葡聚糖、木质纤维素、半纤维素、纤维素衍生物、壳聚糖或木葡聚糖中的至少一种。
在一些情况下,纤维素衍生物包含乙酸纤维素、羟乙基纤维素或羟甲基纤维素中的至少一种。
在一些情况下,所述生物质包含甘蔗生物质、玉米生物质、小麦生物质、硬木生物质或软木生物质中的至少一种。
在一些情况下,所述一种或多种寡糖包含以下中的至少一种:i)聚合度(DP)为2至6的纤维寡糖;ii)DP为2至12的木寡糖;iii)DP为3至15的阿拉伯木寡糖;iv)DP为2至12的甘露寡糖;v)DP为2至5的混合键葡聚糖寡糖;vi)DP为4至12的木葡聚糖寡糖;或vii)DP为2至12的壳寡糖。
在一些情况下,所述成分包含(i)至(vii)中列出的寡糖中的至少两种。
在一些情况下,所述成分包含相对于彼此比例为1:9至1:1的至少两种寡糖。
在一些实施方案中,本文描述了用于人食用的组合物。用于人食用的组合物可包含:可溶性多糖;和寡糖,该寡糖可以包含以下中的至少一种:(i)聚合度(DP)为2至6的纤维寡糖;(ii)DP为2至12的木寡糖;(iii)DP为2至12的甘露寡糖;(iv)DP为3至15的阿拉伯木寡糖;(v)DP为2至5的混合键葡聚糖寡糖;或(vi)DP为2至12的壳寡糖,其中所述组合物包含少于5%干重的不溶性多糖。
在一些情况下,所述组合物可以基本上不含不溶性多糖。
在一些情况下,所述组合物可以在水中可溶解。
在一些情况下,所述组合物在水中的溶解度可以是在50℃下每100g水至少80g所述组合物。
在一些情况下,所述组合物还包含液体,从而形成液体成分。
在一些情况下,液体可以是水。
在一些情况下,所述液体成分包含至少20%干重的至少一种寡糖和至少2%干重的至少一种多糖。
在一些情况下,所述液体成分的粘度为5cps至100,000cps、8,000cps至100,000cps、10,000cps至50,000cps或15,000cps至25,000cps。
在一些情况下,所述液体成分包含至少2%干重的木聚糖。
在一些情况下,所述液体成分包含至少2%干重的甘露聚糖。
在一些情况下,所述液体成分包含至少2%干重的纤维素衍生物。
在一些情况下,液体成分的多糖浓度为0.1%至50%w/v。
在一些情况下,所述液体成分包含多糖和寡糖的量的比例为1:100至1:1。
在一些情况下,所述一种或多种可溶性多糖包含甘露聚糖、木聚糖、混合键葡聚糖、木质纤维素、半纤维素、纤维素衍生物、壳聚糖或木葡聚糖中的至少一种。
在一些情况下,纤维素衍生物包含乙酸纤维素、羟乙基纤维素或羟甲基纤维素中的至少一种。
在一些情况下,所述生物质包含甘蔗生物质、玉米生物质、小麦生物质、硬木生物质或软木生物质中的至少一种。
在一些情况下,所述一种或多种寡糖包含以下中的至少一种:i)聚合度(DP)为2至6的纤维寡糖;ii)DP为2至12的木寡糖;iii)DP为3至15的阿拉伯木寡糖;iv)DP为2至12的甘露寡糖;v)DP为2至5的混合键葡聚糖寡糖;vi)DP为4至12的木葡聚糖寡糖;或vii)DP为2至12的壳寡糖。
在一些情况下,组合物包含(i)至(vii)中列出的寡糖中的至少两种。
在一些情况下,所述成分包含相对于彼此比例为1:9至1:1的至少两种寡糖。
在一些实施方案中,本文描述了生产用于人食用的成分的方法。生产用于人食用的成分的方法可包括:(a)对生物质施用物理预处理以减小生物质的平均尺寸;(b)对经物理预处理的生物质施用温和预处理,所述温和预处理可以包括:(i)在水溶液中温育经物理预处理的生物质以溶解来自经物理预处理的生物质的单糖和/或二糖;和(ii)从水溶液中除去溶解的单糖和/或二糖一部分;(c)对经温和预处理的生物质施用强预处理以提高生物质的消化性;(d)在溶液或悬浮液中,使一种或多种多糖切割酶与经强预处理的生物质接触以形成一种或多种寡糖;和(e)富集溶液或悬浮液以增加一种或多种寡糖的浓度以形成所述成分。
在一些情况下,所述温和预处理可以是温育循环。
在一些情况下,强预处理可以是热化学处理,热化学处理可以包括在酸性溶液或碱性溶液之一中温育温和预处理的生物质。
在一些情况下,所述方法还可以包括在步骤(b)(ii)中从温育溶液中除去至少25%或50%的溶解的单糖和/或二糖。
在一些情况下,步骤(c)后经强预处理的生物质组合物包含少于10%w/w的单糖。
在一些情况下,所述方法还可以包括从溶液或悬浮液中纯化一种或多种寡糖。
在一些情况下,步骤(c)后经强预处理的生物质组合物包含少于20%w/w的单糖。
在一些情况下,所述方法还可以包括重复步骤(b)。
在一些情况下,将步骤(b)可以进行两次、三次、四次或五次。
在一些情况下,所述方法还可以包括重复步骤(c)。
在一些情况下,将步骤(c)可以进行两次、三次、四次或五次。
在一些情况下,所述方法还可以包括浓缩步骤(b)中除去的溶解的单糖和/或二糖的一部分。
在一些情况下,所述方法还可以包括弃去在步骤(b)中除去的溶解的单糖和/或二糖的一部分。
在一些情况下,在步骤(b)中除去的溶解的单糖和/或二糖的一部分可以不与步骤(e)的一种或多种寡糖的一部分组合以形成所述成分。
在一些情况下,所述成分包含少于15%干重的单糖。
在一些情况下,所述成分包含少于50%干重的二糖。
在一些情况下,所述成分可以基本上不含单糖。
在一些情况下,所述成分可以基本上不含二糖。
在一些情况下,所述一种或多种寡糖包含以下中的至少一种:i)聚合度(DP)为2至6的纤维寡糖;ii)DP为2至12的木寡糖;iii)DP为3至15的阿拉伯木寡糖;iv)DP为2至12的甘露寡糖;v)DP为2至5的混合键葡聚糖寡糖;vi)DP为4至12的木葡聚糖寡糖;或vii)DP为2至12的壳寡糖。
在一些情况下,所述成分包含(i)至(vii)中列出的寡糖中的至少两种。
在一些情况下,所述成分包含相对于彼此比例为1:9至1:1的至少两种寡糖。
在一些情况下,所述成分包含占i-vii的全部寡糖的总干重w/w的小于50%总干重w/w的蔗糖、麦芽糖、乳糖、葡萄糖、果糖或半乳糖中的至少一种。
在一些情况下,单糖和/或二糖包含蔗糖、麦芽糖、乳糖、葡萄糖、果糖或半乳糖中的至少一种。
在一些情况下,除了单糖和/或二糖之外,步骤(b)还溶解一种或多种有机酸。
在一些情况下,所述一种或多种有机酸包含草酸、酒石酸、琥珀酸、甲酸、柠檬酸、苹果酸、乳酸或乙酸中的至少一种。
在一些情况下,草酸、酒石酸、琥珀酸、甲酸、柠檬酸、苹果酸、乳酸和乙酸的总重量可大于步骤b中溶解和除去的部分中的蔗糖、麦芽糖、乳糖、葡萄糖、果糖和半乳糖的总重量的10%。
在一些情况下,步骤(a)的物理预处理包括对生物质进行切削、砍碎、碾磨、球磨、研磨、修整或混合中的至少一种。
在一些情况下,步骤(b)的温和预处理在包含水的水溶液中进行。
在一些情况下,步骤(b)的温和预处理在5℃至150℃的温度下进行。
在一些情况下,步骤(b)的温和预处理可以进行15分钟至1小时。
在一些情况下,步骤(c)的强预处理包括在酸性溶液或碱性溶液中加热经温和预处理的生物质。
在一些情况下,所述加热可以在50℃至150℃的温度下进行。
在一些情况下,所述加热可以进行30分钟至4小时。
在一些情况下,步骤(c)包括在pH为8至11的碱性溶液中处理经温和预处理的生物质。
在一些情况下,所述碱性溶液包含氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸钙、氨水、硫酸铵或氢氧化铵中的至少一种。
在一些情况下,步骤(c)包括在pH为4至6的酸性溶液中处理经温和预处理的生物质。
在一些情况下,所述酸性溶液包含硫酸、盐酸、硝酸、磷酸、乙酸、马来酸、富马酸或草酸中的至少一种。
在一些情况下,所述生物质包含甘蔗、玉米秸秆、玉米芯、麦麸、麦秸、硬木或软木中的至少一种。
在一些情况下,所述生物质包含纤维素、甲壳素、壳聚糖、木聚糖、木葡聚糖、混合键葡聚糖、甘露聚糖或木质纤维素中的至少一种。
在一些情况下,所述一种或多种多糖切割酶包含纤维素酶、木聚糖酶、木葡聚糖酶、内切葡聚糖酶、纤维二糖水解酶、甘露聚糖酶、地衣聚糖酶或裂解多糖单加氧酶(LPMO)中的至少一种。
在一些情况下,所述一种或多种多糖切割酶包含AA9、AA10、AA11、AA13、AA14或AA15中的至少一种。
在一些情况下,所述一种或多种多糖切割酶可由丝状真菌(诸如里氏木霉(Trichoderma reesei))制备。
在一些情况下,所述一种或多种多糖切割酶可以可操作地连接到催化模块。
在一些情况下,所述一种或多种多糖切割酶可以可操作地连接到非催化模块。
在一些情况下,所述非催化模块可以是碳水化合物结合模块。
在一些情况下,一种用于人食用的水溶性组合物可以包含以下寡糖中的至少一种:i)聚合度(DP)为2至6的纤维寡糖;ii)DP为2至12的木寡糖;iii)DP为3至15的阿拉伯木寡糖;iv)DP为2至12的甘露寡糖;v)DP为2至5的混合键葡聚糖寡糖;vi)DP为4至12的木葡聚糖寡糖;或vii)DP为2至12的壳寡糖;和以下单糖或二糖中的至少一种:蔗糖、麦芽糖、乳糖、果糖或半乳糖,其中所述单糖或二糖的总干重占DP为2至12的寡糖的总干重的小于10%。
在一些情况下,所述成分可以包含(i)至(vii)中列出的寡糖中的至少两种。在一些情况下,所述成分还可包含以下有机酸中的至少一种:草酸、酒石酸、琥珀酸、甲酸、柠檬酸、苹果酸、乳酸或乙酸。在一些情况下,所述成分可以包含所述有机酸中的至少两种。在一些情况下,所述成分可以包含(i)至(vii)中列出的相对于彼此比例为1:9至1:1的寡糖中的至少两种。
在一些情况下,组合物可以包含选自以下的至少一种单糖或二糖:葡萄糖、果糖或蔗糖;选自以下的至少一种有机酸:草酸、酒石酸、琥珀酸、甲酸、柠檬酸、苹果酸、乳酸或乙酸,其中所述有机酸的总重量大于单糖或二糖总重量的10%。
在一些情况下,一种生产用于人食用的成分的方法可以包括:(a)对生物质施用物理预处理以减小生物质的平均尺寸;(b)对经物理预处理的生物质施用温和预处理,所述温和预处理包括:(i)在水溶液中温育经物理预处理的生物质以溶解来自经物理预处理的生物质的单糖和/或二糖;和(ii)从水溶液中除去溶解的单糖和/或二糖的一部分;(c)对经温和预处理的生物质施用强预处理以溶解多糖并增加植物生物质的消化性;(d)从生物质中分离一种或多种溶解的多糖;(e)使剩余的生物质与一种或多种酶接触以形成一种或多种寡糖;(f)分离一种或多种寡糖;和(g)将来自步骤(d)的一种或多种可溶性多糖的一部分与来自步骤(f)的一种或多种寡糖的一部分结合以形成所述成分。
附图说明
本发明的新颖特征在所附权利要求书中具体阐述。通过参考以下对其中利用了本发明的原理的说明性实施方案加以阐述的详细描述和附图,将会获得对本发明的特征和优点的更好理解,在附图(本文中也称为“图”)中:
图1描绘了薄层色谱(TLC)分析的结果,示出了1-5个洗涤循环(温育预处理)后所示生物质的单糖和二糖含量。
图2描绘了TLC分析的结果,比较了当进行(+)和未进行(-)洗涤(温育预处理)时酶水解产物混合物中单糖和二糖的水平。
图3描绘了用本公开内容的组合物和对比组合物制备浆汁(glaze)的结果。
图4描绘了使用本公开内容的液体成分的烘焙产品。
图5描绘了样品4的高效阴离子交换色谱法(HPAEC)分析。
图6描绘了使用本公开内容的液体成分生产的谷物棒产品。
图7描绘了玉米芯水洗后糖类的HPAEC色谱图。
图8是描述根据本公开内容的一些实施方案的处理生物质的方法的简化流程图。
图9是描绘根据本公开内容的一些实施方案的处理生物质的另一种方法的简化流程图。
图10A是描绘处理生物质的方法的图。
图10B描述了多个样品中糖类的测量。
图10C描绘了多个样品中有机酸的测量。
图10D描绘了根据图10A的方法处理的样品的目视观察。
图11A说明了使用可溶性多糖制成的谷物棒与使用不溶性多糖制成的谷物棒之间的比较。
图11B描绘了使用渗透测试的图11A的谷物棒的硬度和粘性。
图11C描绘了使用切割测试的图11A的谷物棒的硬度。
具体实施方式
引言
本文提供了生成一种或多种成分的方法。该方法可包括从生物质或原料(例如植物生物质)中分离一种或多种可溶性多糖。然后,可以将剩余的生物质与一种或多种酶接触或使用一种或多种酶处理以形成一种或多种寡糖,并且可以富集或分离所述一种或多种寡糖。此外,从生物质中分离的一种或多种可溶性多糖的至少一部分可以与一种或多种富集或分离的寡糖的一部分结合以形成所述成分。
成分的质地可以是连续且光滑的。此外,该成分可以具有某些特性,使得该成分可以用作甜味剂和/或糖替代品。该成分的性质可以包括甜味、光滑质地、合意的口感、粘合能力、上浆能力或形成浆汁的能力、湿润度、粘度、膨松能力和/或焦糖化能力。与玉米糖浆或高果糖玉米糖浆相比,该成分还可以具有更低的卡路里、降低的血糖指数、降低的血糖负荷、增加的纤维和/或减少的糖分。
本文还提供了生产用于掺入食品、营养品和/或化妆品的成分的方法,其中所述方法可以包括对生物质进行一个或多个预处理步骤。例如,该方法可以包括对生物质进行的第一预处理步骤、第二预处理步骤、第三预处理步骤或额外的预处理步骤。预处理步骤可以以指定的顺序进行。
用于生产一种或多种寡糖的生物质可以是植物生物质。植物生物质的实例包括但不限于:甘蔗、玉米秸秆、玉米芯、麦麸、麦秸、硬木或软木。在一些情况下,生物质可以包含纤维素、甲壳素、壳聚糖、木聚糖、木葡聚糖、混合键葡聚糖、甘露聚糖或木质纤维素。
生物质可以被消化成一种或多种寡糖。生物质消化可以酶促进行。酶消化可以在一个或多个预处理步骤之后执行。可以执行一个或多个预处理步骤以减小生物质的尺寸和/或增加可用于消化的生物质的表面积。一个或多个预处理步骤可以包括一个或多个洗涤步骤、溶解步骤或预消化处理。在一些情况下,可以执行一个或多个预处理步骤以减少生物质中存在的单糖和/或二糖。在一些情况下,可以执行一个或多个预处理步骤以从生物质中回收可溶性多糖级分。
在一个或多个预处理步骤期间,可以从起始材料(例如生物质)中去除单糖和/或二糖。换言之,可以在一个或多个预处理步骤期间从生物质中去除单糖和/或二糖。因此,在一个或多个预处理步骤完成后,可以不产生或基本上不产生单糖和/或二糖。也就是说,经预处理的生物质可以不包含或基本上不包含单糖和/或二糖。这可以提高用于生产如本文所提供的掺入食品、营养品和/或化妆品中的成分的方法的效率。例如,由于在一个或多个预处理步骤期间已经从生物质中去除一部分单糖和/或二糖,因此可能需要较少的成分纯化(例如,以除去单糖和/或二糖)。具体而言,在纯化期间可能需要较少的过滤步骤或较不严格的过滤步骤以产生如本文所公开的成分。
第一预处理步骤(预处理步骤1)可以包括物理处理生物质(例如,将生物质切削)。第二预处理步骤(预处理步骤2或温和预处理)可以包括使经物理处理的生物质经受温育循环或洗涤循环。温育循环可包括在水溶液中温育经物理处理的生物质(来自预处理步骤1)以从经物理处理的生物质中溶解单糖和/或二糖。温育循环还可包括从水溶液中去除一部分溶解的单糖和/或二糖。在一些情况下,水溶液可以包括水。在一些其他情况下,温育循环可以在约25℃下进行约30分钟至约1.5小时的时间段。预处理步骤2可以是温和预处理步骤。例如,预处理步骤2的条件(例如,溶液、温度、时间等)可以比如下文进一步详细描述的预处理步骤3的条件更温和。
第三预处理步骤(预处理步骤3或强预处理)可以包括在酸性溶液或碱性溶液之一中处理来自预处理步骤2的经温育的生物质。预处理步骤3可以提高生物质的消化性(例如,通过酶)。预处理步骤3还可以提高酶对生物质的进入。在各种情况下,预处理步骤3可以在高于室温的温度(例如,约90℃至约110℃)的碱溶液(例如,1%w/v NaOH溶液)中发生。此外,预处理步骤3可以通过在所需温度下保持约30分钟至1小时来进行。例如,有效温度——在本实施例中为90℃——保持1小时(这可以根据所需的特性改变)。可以保留第三预处理步骤中的溶液。换言之,当经处理的生物质从预处理步骤移至如下文进一步详细描述的预处理步骤之后的步骤时,可以不弃去溶液。在一些情况下,预处理步骤3可以包括热化学处理。即,可以在酸性或碱性溶液中执行预处理步骤3和/或可以在高于室温的温度下执行预处理步骤3。
在各种情况下,在一个或多个预处理步骤之后,用于生产用于人食用的成分的方法可以包括在溶液或悬浮液中使一种或多种多糖切割酶与来自预处理步骤3的生物质接触以形成一种或多种寡糖。该方法还可包括富集溶液或悬浮液以增加一种或多种寡糖的浓度以形成该成分(例如,用于人食用的成分)。
与一些其他方法相比,预处理步骤可以提高该方法的效率。因为可能需要较少的下游加工,因此效率可以提高。在一些情况下,下游加工可以包括从经预处理的生物质中去除单糖和/或二糖的工艺。在一些实施方案中,可能难以单独去除二糖,例如从由酶消化法产生的中间溶液或级分中。因此,在预处理步骤期间去除二糖可能更有效。
下游加工的步骤可以包括离子交换色谱法、超滤、微滤、纳滤等。纳滤步骤的部分作用可以是从寡糖混合物中去除过量的单糖。该纳过可以执行多次以达到所需的单糖水平。当经预处理的生物质中的单糖较少时(例如,当单糖已通过洗涤或温育去除时),可以减少所述纳滤步骤的数量。此外,超滤通常不能区分所需的二糖(例如纤维二糖)和不需要的二糖。因此,在预处理期间去除不需要的二糖并在酶处理步骤期间产生所需的二糖还可以减少下游加工期间涉及或需要的步骤的数量。
虽然在本文中已经示出和描述了本发明的各种实施方案,但是对于本领域技术人员显而易见的是,这些实施方案仅作为示例提供。在不背离本发明的情况下,本领域技术人员可以进行许多变化、改变和替换。应当理解,可以采用本文所述的本发明实施方案的各种替代方案。
如说明书和权利要求书所用,单数形式“一”、“一个”和“该”包括复数引用,除非上下文另有明确规定。例如,术语“样品”还包括多个样品,包括其混合物。
如本文所用,术语“约”可表示在1个或多于1的标准偏差内。或者,“约”可以表示给定值的至多10%、至多5%或至多1%的范围。例如,约可以表示给定值的至多±10%、±9%、±8%、±7%、±6%、±5%、±4%、±3%、±2%或±1%。
如本文所用,“食物”和“食品”通常指任何供食用的物品,其可由人或任何其他动物食用。其可以是食物、饲料、饮料或用于生产上述任一项的成分。
如本文所用,“营养品”通常指为了向人或其他动物提供营养而通过摄取、注射、吸收或任何其他方法引入人或其他动物中的任何组合物。这样的营养品的使用可采取添加膳食纤维的饮料、益生素添加剂、药丸或其他胶囊或任何其他合适的用途的形式。
如本文所用,“化妆品(cosmetic)”通常指旨在用于人或其他动物以增加其美学吸引力或防止将来丧失美学吸引力的任何组合物,以及一般称为化妆品的任何其他组合物。美学吸引力不仅限于视觉美学,而且还适用于结构上或任何其他方面的吸引力。化妆品可以是睫毛膏、粉底、唇彩、眼影膏、眼线膏、妆前乳、口红、腮红、指甲油、古铜色化妆品(bronzer)或任何其他化妆品(makeup);洗发水、护发素、定型摩丝、定型凝胶、发胶、染发剂、发蜡或任何其他发用产品;保湿剂、去角质剂、防晒霜、清洁剂、牙膏、乳霜、洗剂、软膏或有效地以某种美学方式修饰牙齿、皮肤、头发或身体其他部位的任何其他组合物。此外,化妆品可以是用作面膜、刷子、卷发器、其他造型装置、其他固体结构的组分的组合物,或任何其他合适的组合物。
如本文所用,“成分”通常指适合掺入食品、化妆品或营养制品中的任何组合物,其可包括直接用作产品本身的那些。其可以是干燥的成分或液体的成分,除非其特别被称为“干燥的”或“液体的”。这包括在本公开内容的方法期间可视为中间体的组合物,诸如在任何进一步纯化、优化、干燥、溶解或任何其他此类步骤之前,组合一种或多种寡糖和一种或多种可溶性多糖之后形成的组合物,以及包括从所述方法获得的最终组合物。
如本文所用,“多糖”通常指任何长度大于约20个残基的糖聚合物。多糖可以高度支化、轻度支化或无支化。多糖可以包含任何组合的任意类型的糖苷键、任何数目的例如α或β键,以及单体类型(诸如葡萄糖、葡萄糖胺、甘露糖、木糖、半乳糖、岩藻糖、果糖、葡糖醛酸、阿拉伯糖或它们的衍生物)的任何组合,诸如修饰有乙酰基或其他基团的以上单体的任何组合。多糖可以是纤维素或半纤维素聚合物,设想的半纤维素聚合物包括木聚糖、葡糖醛酸木聚糖、阿拉伯木聚糖、葡甘露聚糖和木葡聚糖。在一些实施方案中,纤维素聚合物可以是纤维素。
如本文所用,“木质纤维素”通常指包含多糖的聚集体,其是植物细胞壁材料或源自植物细胞壁材料。例如,它们可以包含缔合在一起的以下多糖中的一种或多种:纤维素、木聚糖、甘露聚糖和混合键葡聚糖。
如本文所用,“高度支化”、“轻度支化”和“无支化”通常指糖中每条主链的侧链的数目。高度支化的糖的每10个主链残基平均具有4至10个侧链,轻度支化的糖的每10个主链残基平均具有1至3个侧链,无支化的糖仅有一个主链且没有侧链。通过将糖中侧链的数目除以主链残基的数目来计算平均值。
如本文所用,“糖”通常指任何多糖和/或寡糖,例如单糖和/或二糖。
如本文所用,“寡糖”通常指链长小于或等于约20个糖残基的糖聚合物。寡糖可以高度支化、轻度支化或无支化;并且可以包含任何组合中的糖苷键、任何数目的α或β键,以及单体类型(诸如葡萄糖、葡萄糖胺、甘露糖、木糖、半乳糖、岩藻糖、果糖、葡糖醛酸、阿拉伯糖或它们的衍生物)的任何组合。合适的衍生物包括包含乙酰基或其他基团的上述单体。
如本文所用,“单糖”和“二糖”通常指分别由一个或两个残基组成的糖化合物。单糖是化合物,诸如葡萄糖、葡萄糖胺、木糖、半乳糖、岩藻糖、果糖、葡糖醛酸、阿拉伯糖、半乳糖醛酸;或它们的差向异构体或其他衍生物。合适的衍生物包括乙酰基或其他基团。二糖是由通过任何糖苷键连接的两个单糖组成的化合物。
如本文所用,“纤维寡糖”通常指由通过β-1,4-糖苷键连接的一个或多个葡萄糖残基组成的寡糖,并且可以通过氧化、还原、酯化、差向异构化或另一种化学修饰与之化学相关。
如本文所用,“木寡糖”通常指主要由木糖残基(通常通过β-1,4-糖苷键连接)组成的寡糖,并且还可以包含葡糖醛酸残基和/或阿拉伯糖残基和/或乙酰基和/或任何其他修饰,并且可以通过氧化、还原、酯化、差向异构化、进一步的糖基化或另一种化学修饰与之化学相关。
如本文所用,“阿拉伯木寡糖”通常指由木糖残基(通常通过被阿拉伯糖侧链取代的β-(1→4)-键连接、通常通过(1→2)-键或(1→3)-键连接)组成的寡糖,并且可以通过氧化、还原、酯化、差向异构化、进一步的糖基化或另一种化学修饰与之化学相关。
如本文所用,“混合键葡聚糖-寡糖”通常指由通过至少一个β-1,3-糖苷键和至少一个β-1,4-糖苷键连接的一个或多个葡萄糖残基组成的寡糖,并且可以通过氧化、还原、酯化、差向异构化或另一种化学修饰与之化学相关。
如本文所用,“甘露寡糖”通常指由一个或多个甘露糖残基组成并且任选地包含一个或多个葡萄糖和/或半乳糖残基的寡糖,并且可以通过氧化、还原、酯化、差向异构化或另一种化学修饰与之化学相关;
如本文所用,“壳寡糖”通常指由一个或多个葡萄糖胺和/或N-乙酰基-葡萄糖胺残基组成的寡糖,并且可以通过氧化、还原、酯化、差向异构化或另一种化学修饰与之化学相关。
如本文所用,“纤维素”通常指由通过β-1,4-糖苷键连接的葡萄糖残基组成的多糖及其衍生物。如本文所用,“木聚糖”通常指由木糖残基的骨架组成的多糖,并且还可以包含葡糖醛酸残基和/或阿拉伯糖残基和/或乙酰基和/或任何其他修饰。如本文所用,“混合键葡聚糖”通常指由通过β-1,3-糖苷键和β-1,4-糖苷键连接的葡萄糖残基组成的多糖。如本文所用,“甘露聚糖”通常指由大于40%的甘露糖残基组成并且任选地包含葡萄糖和/或半乳糖残基的多糖。如本文所用,“甲壳素”或“壳聚糖”通常指由葡萄糖胺和/或N-乙酰基-葡萄糖胺残基组成的多糖。纤维素、木聚糖、混合键葡聚糖、甘露聚糖、甲壳素或壳聚糖的多糖可包括已通过氧化、还原、酯化、差向异构化或另一种化学修饰进行修饰的化学变体。
如本文所用,“可溶性”、“溶解度”及其语法变体通常指在水溶液(例如,水)中的溶解度。如本文所用,“溶解”通常指将固体掺入水溶液或液体中以形成溶液。
如本文所用,“悬浮液”通常指包含至少两种不混溶相(例如,固相和液相)的组合物,其中固相的重量可为约0.5%至约30%、约1%至约20%、约2%至约15%或约3%至约10%,以组合物重的量百分比计。悬浮液可以包含合适的溶剂,该溶剂可以是水。
如本文所用,“粘度”通常指表示流体中内摩擦的大小的量,通过单位面积抵抗均匀流动的力所测量的。粘度可以通过多种方法测量,但是除非另有说明,本文给出的值是指通过使用标准测试方法使用Brookfield HDB VE旋转粘度计获得的值,按照制造商关于范围的说明书来操作,并在高型烧杯中采集400mL样品,以确保不会发生容器效应。
如本文所用,“溶解的”通常指固体掺入液体中以形成溶液。
I.预处理
物理预处理
可以对生物质执行机械或物理预处理,以将生物质消化成一种或多种寡糖。机械和/或物理预处理可以是生物质消化过程中的第一个预处理步骤。可替代地,机械或物理预处理步骤可以在另一个预处理步骤之后执行。例如,机械或物理预处理步骤可以在另一个预处理步骤(诸如洗涤预处理步骤)之后执行。
可以对生物质进行机械或物理预处理以减小生物质的尺寸。机械或物理预处理步骤的实例包括但不限于:生物质的切削、砍碎、碾磨、球磨、研磨、修整、混合和/或蒸汽喷发。可以对生物质执行多于一种物理预处理。
溶解步骤
生物质可以经受溶解步骤。溶解步骤可以是温和预处理步骤或温和预处理步骤的一部分,溶解步骤溶解来自生物质的多糖级分或单糖和/或二糖级分。溶解预处理步骤可以是洗涤步骤、温育步骤、热化学步骤或化学处理步骤。溶解预处理可以在物理或机械预处理步骤之前执行。溶解预处理可以在物理或机械预处理步骤之后执行。
在一些实施方案中,可执行溶解步骤以去除一部分可溶性多糖。可溶性多糖可以添加到一种或多种寡糖中,例如,在可溶性多糖纯化后。可溶性多糖级分可用于生产具有所需味道、质地、质量、粘性和气味的食品类型。溶解性多糖的存在也可有助于生产质量更好的产品,该产品不会在食品中产生沉淀物(或颗粒状)。
溶解步骤可以是生物质的化学或热化学处理。化学或热化学处理可包括一种或多种水溶液。所述水溶液可包含一种或多种盐、酸、碱或离子。所述水溶液可以包括氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸钙、氢氧化钙、硫酸铵、氢氧化铵、氨水、稀硫酸、稀乙酸、稀盐酸或稀磷酸中的一种或多种。
水溶液可以是pH为10至14的碱溶液。水溶液可以是pH为10至11、10至12、10至13、10至14、11至12、11至13、11至14、12至13、12至14,或13至14的碱溶液。水溶液可以是pH为2至6的酸溶液。水溶液可以是pH为2至3、2至4、2至5、2至6、3至4、3至5、3至6、4至5、4至6或5至6的酸溶液。
溶解步骤可以在30℃至180℃的温度下执行。溶解步骤可以在至少30℃的温度下执行。溶解步骤可以在至多180℃的温度下执行。溶解步骤可以在以下温度下执行:30℃至60℃、30℃至90℃、30℃至120℃、30℃至150℃、30℃至180℃、60℃至90℃、60℃至120℃、60℃至150℃、60℃至180℃、90℃至120℃、90℃至150℃、90℃至180℃、120℃至150℃、120℃至180℃或150℃至180℃。溶解步骤可以在至少30℃、60℃、90℃、120℃、150℃或180℃的温度下执行。
可根据所使用的生物质、所需的可溶性多糖组分和/或所需的可溶性多糖的复杂性来改变溶解步骤的持续时间。溶解步骤可以执行约10分钟至约24小时。溶解步骤可以执行至少10分钟。溶解步骤可执行至多60分钟。溶解步骤可执行10分钟至30分钟、10分钟至60分钟或30分钟至60分钟。溶解步骤可以执行至少10分钟、30分钟,或60分钟。溶解步骤可以执行1小时至24小时。溶解步骤可以进行至少1小时。溶解步骤可以执行至多24小时。溶解步骤可以执行1小时至4小时、1小时至8小时、1小时至12小时、1小时至16小时、1小时至20小时、1小时至24小时、4小时至8小时、4小时至12小时、4小时至16小时、4小时至20小时、4小时至24小时、8小时至12小时、8小时至16小时、8小时至20小时、8小时至24小时、12小时至16小时、12小时至20小时、12小时至24小时、16小时至20小时、16小时至24小时,或20小时至24小时。溶解步骤可以执行至少1小时、4小时、8小时、12小时、16小时、20小时或24小时。
可溶性多糖可在溶解步骤后从溶液中除去。可以从溶解性级分中去除一部分溶解性多糖。在一些情况下,可以去除和/或纯化至少5%的溶解性多糖。在一些情况下,可以去除和/或纯化至多100%的溶解性多糖。在一些情况下,可以去除和/或纯化5%至10%、5%至20%、5%至30%、5%至40%、5%至60%、5%至80%、5%至90%、5%至100%、10%至20%、10%至30%、10%至40%、10%至60%、10%至80%、10%至90%、10%至100%、20%至30%、20%至40%、20%至60%、20%至80%、20%至100%、30%至40%、30%至60%、30%至80%、30%至100%、40%至60%、40%至80%、40%至100%、60%至80%或60%至100%的溶解性多糖。在一些情况下,可以去除和/或纯化至少约5%、10%、20%、30%、40%、60%、80%或100%的溶解性多糖。
温和预处理
生物质可以经受温和预处理步骤。温和预处理步骤可以从生物质中溶解多糖级分或单糖和/或二糖级分。在一些情况下,温和预处理步骤可以包括溶解步骤的至少一部分或全部。换言之,溶解步骤可以是温和预处理步骤的一部分或子步骤。温和预处理步骤可以是洗涤步骤、温育步骤、热化学步骤或化学处理步骤。温和预处理可以在物理或机械预处理步骤之前执行。温和预处理可以是在物理或机械预处理步骤之后执行。温和预处理可以与物理或机械预处理步骤同时执行。温和预处理步骤可以执行一次或多次。温和预处理可以进行2、3、4、5、6、7、8、9或10次。
温和预处理步骤可以是温育步骤或洗涤步骤。生物质(物理处理的或未处理的)可以在水溶液中温育。水溶液可以是水,或水溶液可以包含盐、酸、碱、离子、醇和/或其他化学品。水溶液的pH可以为6.2至8.5。水溶液的pH可以为至少6.2。水溶液的pH可以为至多8.5。水溶液的pH值可以为6.2至6.5、6.2至7、6.2至7.2、6.2至7.5、6.2至7.7、6.2至8、6.2至8.2、6.2至8.5、6.5至7、6.5至7.2、6.5至7.5、6.5至7.7、6.5至8、6.5至8.2、6.5至8.5、7至7.2、7至7.5、7至7.7、7至8、7至8.2、7至8.5、7.2至7.5、7.2至7.7、7.2至8、7.2至8.2、7.2至8.5、7.5至7.7、7.5至8、7.5至8.2、7.5至8.5、7.7至8、7.7至8.2、7.7至8.5、8至8.2、8至8.5或8.2至8.5。水溶液的pH可以为6.2、6.5、7、7.2、7.5、7.7、8、8.2或8.5。
水溶液的pH可以是9至12。水溶液的pH可以是至少9。水溶液的pH可以是至多12。水溶液的pH可以为9至9.5、9至10、9至10.5、9至11、9至11.5、9至12、9.5至10、9.5至10.5、9.5至11、9.5至11.5、9.5至12、10至10.5、10至11、10至11.5、10至12、10.5至11、10.5至11.5、10.5至12、11至11.5、11至12或11.5至12。水溶液的pH可以为9、9.5、10、10.5、11、11.5或12。
所述温育步骤可以进行15分钟至60分钟。所述温育步骤可以执行至少15分钟。所述温育步骤可以执行至多60分钟。所述温育步骤可以执行15分钟至30分钟、15分钟至45分钟、15分钟至60分钟、30分钟至45分钟、30分钟至60分钟或45分钟至60分钟。所述温育步骤可以执行至少15分钟、30分钟、45分钟或60分钟。所述温育步骤可以执行1小时至24小时。所述温育步骤可以执行至少1小时。所述温育步骤可以执行至多24小时。所述温育步骤可以执行1小时至4小时、1小时至8小时、1小时至12小时、1小时至16小时、1小时至20小时、1小时至24小时、4小时至8小时、4小时至12小时、4小时至16小时、4小时至20小时、4小时至24小时、8小时至12小时、8小时至16小时、8小时至20小时、8小时至24小时、12小时至16小时、12小时至20小时、12小时至24小时、16小时至20小时、16小时至24小时,或20小时至24小时。所述温育步骤可以执行至少1小时、4小时、8小时、12小时、16小时、20小时或24小时。
在温和预处理步骤之后,可从水溶液中去除溶解的多糖、单糖和/或二糖。在一些情况下,在温和预处理步骤之后可以从水溶液中去除单糖和/或二糖。
可溶性多糖可以在温和预处理步骤后从溶液中去除。至少一部分溶解的多糖可以从溶解的级分中去除。在一些情况下,可以去除和/或纯化至少5%的溶解的多糖。在一些情况下,可以去除和/或纯化至多100%的溶解的多糖。在一些情况下,可以去除和/或纯化5%至10%、5%至20%、5%至30%、5%至40%、5%至60%、5%至80%、5%至100%、10%至20%、10%至30%、10%至40%、10%至60%、10%至80%、10%至100%、20%至30%、20%至40%、20%至60%、20%至80%、20%至100%、30%至40%、30%至60%、30%至80%、30%至100%、40%至60%、40%至80%、40%至100%、60%至80%或60%至100%的溶解多糖。在一些情况下,在温和预处理步骤后,可以去除和/或纯化至少约5%、10%、20%、30%、40%、60%、80%或100%的溶解的多糖。
在温和预处理步骤之后,可以从溶液中去除单糖和/或二糖。可在温育步骤之后从水溶液中除去一部分溶解的单糖和/或二糖。在一些情况下,可以去除至少5%的溶解的单糖和/或二糖。在一些情况下,可以去除至多100%的溶解的单糖和/或二糖。在一些情况下,可以去除5%至10%、5%至20%、5%至30%、5%至40%、5%至60%、5%至80%、5%至100%、10%至20%、10%至30%、10%至40%、10%至60%、10%至80%、10%至100%、20%至30%、20%至40%、20%至60%、20%至80%、20%至100%、30%至40%、30%至60%、30%至80%、30%至100%、40%至60%、40%至80%、40%至100%或60%至100%的溶解的单糖和/或二糖。在一些情况下,在温和预处理步骤之后,可以去除和/或纯化至少约5%、10%、20%、30%、40%、60%、80%或100%的溶解的单糖和/或二糖。在温育步骤之后,可以弃去单糖和/或二糖部分。在某些情况下,在该步骤中去除的溶解的单糖和/或二糖的部分可不与生物质处理中产生的一种或多种寡糖的部分结合。
在温和预处理步骤之后,可以从生物质中去除水溶液。在温和预处理步骤之后,可以从生物质中去除一部分水溶液。在温和预处理步骤之后,可以从生物质中去除5%至100%的水溶液。在温和预处理步骤之后,可以从生物质中去除至少5%的水溶液。在温和预处理步骤之后,可以从生物质中去除至多98%的水溶液。在温和预处理步骤之后,可以从生物质中去除5%至10%、5%至20%、5%至40%、5%至50%、5%至60%、5%至80%、5%至90%、5%至98%、10%至20%、10%至40%、10%至50%、10%至60%、10%至80%、10%至90%、10%至98%、20%至40%、20%至50%、20%至60%、20%至80%、20%至90%、20%至98%、40%至50%、40%至60%、40%至80%、40%至90%、40%至98%、50%至60%、50%至80%、50%至90%、50%至98%、60%至80%、60%至90%、60%至98%、80%至90%、80%至98%或90%至98%的水溶液。在温和预处理步骤之后,可以从生物质中去除至少5%、10%、20%、40%、50%、60%、80%、90%或98%的水溶液。可以使用压滤、离心、沉降、过滤和/或任何其他合适的方法除去一部分水溶液。
强预处理
生物质可以经受强预处理步骤。强预处理步骤可以从生物质中溶解多糖级分或单糖级分和/或二糖级分。可以执行强预处理步骤以使生物质更容易被酶消化。强预处理可有助于破坏生物质中的氢键。强预处理步骤可以是洗涤步骤、热化学步骤或化学处理步骤。强预处理可以在物理或机械预处理步骤之前执行。强预处理步骤可以在物理或机械预处理步骤之后执行。强预处理步骤可以在温和预处理步骤之前执行。强预处理步骤可以在温和预处理步骤之后执行。强预处理步骤可以执行一次或多次。强预处理可以执行2、3、4、5、6、7、8、9或10次。
强预处理步骤可以是热化学处理。化学或热化学处理可包括一种或多种水溶液。水溶液可包含一种或多种盐、酸、碱或离子。水溶液可以是碱性溶液,该碱性溶液包含氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸钙、氢氧化钙、硫酸铵、氢氧化铵或氨水的一种或多种。水溶液可以是酸性溶液,该酸性溶液包含硫酸、盐酸、硝酸、磷酸、乙酸、马来酸、富马酸或草酸中的至少一种。在一些实施方案中,在完成一个或多个强预处理步骤后,可以保留水溶液。换言之,水溶液可能不弃去或丢弃。
热化学预处理可以在约2至6.5的pH下执行。热化学预处理可以在至少2的pH下执行。热化学预处理可以在至多6.5的pH下执行。热化学预处理可以在以下pH下执行:2至2.5、2至3、2至3.5、2至4、2至4.5、2至5、2至5.5、2至6、2至6.5、2.5至3、2.5至3.5、2.5至4、2.5至4.5、2.5至5、2.5至5.5、2.5至6、2.5至6.5、3至3.5、3至4、3至4.5、3至5、3至5.5、3至6、3至6.5、3.5至4、3.5至4.5、3.5至5、3.5至5.5、3.5至6、3.5至6.5、4至4.5、4至5、4至5.5、4至6、4至6.5、4.5至5、4.5至5.5、4.5至6、4.5至6.5、5至5.5、5至6、5至6.5、5.5至6、5.5至6.5或6至6.5。热化学预处理可以在约2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、5.5、6或6.5的pH下执行。
热化学预处理可以在7.5至12的pH下执行。热化学预处理可以在至少7.5的pH下执行。热化学预处理可以在至多12的pH下执行。热化学预处理可以在以下pH下执行:7.5至8、7.5至8.5、7.5至9、7.5至9.5、7.5至10、7.5至10.5、7.5至11、7.5至11.5、7.5至12、8至8.5、8至9、8至9.5、8至10、8至10.5、8至11、8至11.5、8至12、8.5至9、8.5至9.5、8.5至10、8.5至10.5、8.5至11、8.5至11.5、8.5至12、9至9.5、9至10、9至10.5、9至11、9至11.5、9至12、9.5至10、9.5至10.5、9.5至11、9.5至11.5、9.5至12、10至10.5、10至11、10至11.5、10至12、10.5至11、10.5至11.5、10.5至12、11至11.5、11至12或11.5至12。热化学预处理可以在约7.5、8、8.5、9、9.5、10、10.5、11、11.5或12的pH下执行。
热化学预处理可以在50℃至150℃的温度下执行。热化学预处理可以在至少50℃的温度下执行。热化学预处理可以在至多150℃的温度下执行。热化学预处理可以在以下温度下执行:50℃至75℃、50℃至80℃、50℃至90℃、50℃至100℃、50℃至120℃、50℃至130℃、50℃至150℃、75℃至80℃、75℃至90℃、75℃至100℃、75℃至120℃、75℃至130℃、75℃至150℃、80℃至90℃、80℃至100℃、80℃至120℃、80℃至130℃、80℃至150℃、90℃至100℃、90℃至120℃、90℃至130℃、90℃至150℃、100℃至120℃、100℃至130℃、100℃至150℃、120℃至130℃、120℃至150℃或130℃至150℃。热化学预处理可以在至少50℃、75℃、80℃、90℃、100℃、120℃、130℃或150℃的温度下执行。
热化学处理可以执行0.5小时至4小时。热化学处理可以执行至少0.5小时。热化学处理最多可执行4小时。热化学处理可以执行0.5小时至0.75小时、0.5小时至1小时、0.5小时至1.5小时、0.5小时至2小时、0.5小时至2.5小时、0.5小时至3小时、0.5小时至3.5小时、0.5小时至4小时、0.75小时至1小时、0.75小时至1.5小时、0.75小时至2小时、0.75小时至2.5小时、0.75小时至3小时、0.75小时至3.5小时、0.75小时至4小时、1小时至1.5小时、1小时至2小时、1小时至2.5小时、1小时至3小时、1小时至3.5小时、1小时至4小时、1.5小时至2小时、1.5小时至2.5小时、1.5小时至3小时、1.5小时至3.5小时、1.5小时至4小时、2小时至2.5小时、2小时至3小时、2小时至3.5小时、2小时至4小时、2.5小时至3小时、2.5小时至3.5小时、2.5小时至4小时、3小时至3.5小时、3小时至4小时或3.5小时至4小时。热化学处理可以执行至少0.5小时、0.75小时、1小时、1.5小时、2小时、2.5小时、3小时、3.5小时或4小时。
热化学处理的生物质可包含小于1%w/w至30%w/w的单糖。热化学处理的生物质可包含少于1%w/w至2%w/w、1%w/w至5%w/w、1%w/w至10%w/w、1%w/w至15%w/w、1%w/w至20%w/w、1%w/w至25%w/w、1%w/w至30%w/w、2%w/w至5%w/w、2%w/w至10%w/w、2%w/w至15%w/w、2%w/w至20%w/w、2%w/w至25%w/w、2%w/w至30%w/w、5%w/w至10%w/w、5%w/w至15%w/w、5%w/w至20%w/w、5%w/w至25%w/w、5%w/w至30%w/w、10%w/w至15%w/w、10%w/w至20%w/w、10%w/w至25%w/w、10%w/w至30%w/w、15%w/w至20%w/w、15%w/w至25%w/w、15%w/w至30%w/w、20%w/w至25%w/w、20%w/w至30%w/w或25%w/w至30%w/w的单糖。热化学处理的生物质可包含少于1%w/w、2%w/w、5%w/w、10%w/w、15%w/w、20%w/w、25%w/w或30%w/w的单糖。
热化学处理的生物质可以包含5%w/w至50%w/w的二糖。热化学处理的生物质可以包含5%w/w至10%w/w、5%w/w至15%w/w、5%w/w至20%w/w、5%w/w至25%w/w、5%w/w至30%w/w、5%w/w至35%w/w、5%w/w至40%w/w、5%w/w至50%w/w、10%w/w至15%w/w、10%w/w至20%w/w、10%w/w至25%w/w、10%w/w至30%w/w、10%w/w至35%w/w、10%w/w至40%w/w、10%w/w至50%w/w、15%w/w至20%w/w、15%w/w至25%w/w、15%w/w至30%w/w、15%w/w至35%w/w、15%w/w至40%w/w、15%w/w至50%w/w、20%w/w至25%w/w、20%w/w至30%w/w、20%w/w至35%w/w、20%w/w至40%w/w、20%w/w至50%w/w、25%w/w至30%w/w、25%w/w至35%w/w、25%w/w至40%w/w、25%w/w至50%w/w、30%w/w至35%w/w、30%w/w至40%w/w、30%w/w至50%w/w、35%w/w至40%w/w、35%w/w至50%w/w或40%w/w至50%w/w的二糖。热化学处理的生物质可以包含少于5%w/w、10%w/w、15%w/w、20%w/w、25%w/w、30%w/w、35%w/w、40%w/w或50%w/w的二糖。
II.酶处理和下游加工
本公开内容的方法还可包括在溶液或悬浮液中使一种或多种多糖切割酶与热化学处理的生物质接触以形成一种或多种寡糖。此外,这些方法可以包括富集溶液或悬浮液以增加一种或多种寡糖的浓度以形成所述成分。可以从本文提供的溶液或悬浮液中纯化一种或多种寡糖。
形成或制造组合物的方法的一个或多个步骤可以是酶促反应,其中将一种或多种酶与一种或多种原料或生物质(例如,植物生物质)和合适的溶剂一起置于合适的反应容器中,该一种或多种原料或生物质可溶于或不溶于水。如本文所用,除非另有说明,否则术语“植物生物质”可替换为术语“原料”或“生物质”(例如,非源自植物的生物质)。
多种酶可适用于酶促反应。当作用于含多糖的原料时产生寡糖的任何酶都是合适的。例如,酶促反应可以包含纤维素酶、内切葡聚糖酶、纤维二糖水解酶、裂解多糖单加氧酶(LPMO)、地衣聚糖酶、木葡聚糖内切葡聚糖酶(XEG)、甘露聚糖酶、甲壳质酶、木聚糖酶和/或一种或多种合适的酶。
在各种情况下,酶促反应可以包含来自物种(诸如里氏木霉)的纤维素分解制剂,该纤维素分解制剂可以被纯化和/或预处理和/或可以补充有一种或多种额外的酶,例如添加β-葡聚糖酶、β-木聚糖酶和纤维二糖水解酶;β-葡聚糖酶、β-木聚糖酶、LPMO和纤维二糖水解酶;LPMO和木聚糖酶;或LPMO、木聚糖酶和地衣聚糖酶。各种酶可以作为纯化酶、源自一些天然来源或实验室生长的培养物的半纯化混合物、经工程化以产生酶的微生物菌株的形式或以任何其他合适形式提供给酶促反应。还设想了这些酶与其他酶或与非酶模块(诸如碳水化合物结合模块(carbohydrate-binding module,CBM))的融合。例如,可使用与CBM融合的LPMO、与CBM融合的木聚糖酶或与LPMO融合的木聚糖酶。
有氧条件可用于一种或多种酶促反应。有氧条件可以包括添加氧气,这可以通过用含氧气体(诸如空气)对底物混合物进行曝气来提供。可以通过各种系统(诸如空气喷射器、曝气筛板(aeration frit)、膜系统或内循环气升反应器),将含氧气泡引入含水底物混合物中来进行曝气。在一些情况下,酶促反应中的分子氧浓度可以为约4mg/L至约14mg/L。
另一示例性酶是地衣聚糖酶,该地衣聚糖酶可以选自GH5、GH7、GH8、GH9、GH12、GH16、GH17或GH26家族,例如,可以使用诸如源自枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的GH16酶的GH16酶。该酶可以作用于例如混合键葡聚糖(其是包含β-1,3键和β-1,4键的混合物的葡聚糖),并且可以在β-1,4糖苷键处切割它们。在其中地衣聚糖酶作用于混合键葡聚糖的情况中,所产生的β-葡聚糖可主要落在3至约7个残基的大小范围内,因此它们特别适用于食品、化妆品和营养品行业。混合键葡聚糖在草和马尾草家族的成员中含量丰富,因此,草类原料(如稻草)通常具有高水平的混合键葡聚糖,并且可被地衣聚糖酶有效地起作用。地衣聚糖酶可包括源自枯草芽孢杆菌的GH5地衣聚糖酶。
另一种可替选酶是木聚糖酶,该木聚糖酶可以作用于例如包含木聚糖骨架的原料。木聚糖酶可以是例如葡糖醛酸木聚糖酶、阿拉伯木聚糖酶或葡糖醛酸阿拉伯木聚糖酶。该酶可以作用于具有木聚糖骨架的多种聚合物,诸如葡糖醛酸木聚糖、阿拉伯木聚糖和葡糖醛酸阿拉伯木聚糖。这些聚合物通常在各种植物来源的原料中很丰富,例如,硬木和软木都可以包含合适的多糖,其中硬木通常包含葡糖醛酸木聚糖,而软木通常包含阿拉伯葡糖醛酸木聚糖(arabinoglucuronoxylan)。木聚糖酶可包括来自热纤梭菌(Ruminiclostridium thermocellum)和层出节水霉(Gonapodya prolifera)的GH5木聚糖酶,以及来自菊欧文氏菌(Dickeya chrysanthemi)、枯草芽孢杆菌、卵形拟杆菌(Bacteroides ovatus)和里氏木霉的GH30木聚糖酶。
另一种可替选酶是甘露聚糖酶,该甘露聚糖酶可以作用于例如包含甘露聚糖骨架的原料。甘露聚糖酶可以是,例如,甘露聚糖酶、葡甘露聚糖酶、半乳甘露聚糖酶或半乳葡甘露聚糖酶。该酶可以对具有甘露聚糖主链的多种聚合物,例如甘露聚糖、葡甘露聚糖、半乳甘露聚糖或半乳葡甘露聚糖(galactoglucomannan)具有活性。这些聚合物通常在各种植物来源的原料中很丰富,例如,硬木和软木都可以包含合适的多糖。合适的甘露聚糖酶可包括源自里氏木霉和黑曲霉(Aspergillus niger)的GH5甘露聚糖酶,以及源自黑曲霉的GH26甘露聚糖酶。
其他酶可以包括木葡聚糖酶和木葡聚糖内切葡聚糖酶(XEG),其是由许多生物体(包括植物致病性微生物)产生的。木葡聚糖酶和XEG可以能够作用于木葡聚糖,其是高等植物初级细胞壁中含量丰富的半纤维素β-1,4葡聚糖链,其用木糖修饰,一些木糖残基还用其他残基(例如半乳糖)修饰。当适当的木葡聚糖酶或XEG作用于木葡聚糖时,产物可包含具有在食品、化妆品和营养品行业中有用的长度主链的木葡聚糖寡糖。合适的木葡聚糖酶可包括源自卵形拟杆菌的GH5木葡聚糖酶和源自里氏木霉的GH74木葡聚糖酶。
酶促反应可以在溶液和/或悬浮液中进行。酶促反应可以在合适的反应容器中进行。在一些情况下,酶促反应可以在适合酶和原料的特定组合的温度或温度方案下进行,可以允许反应进行一定量的时间(例如,预定量的时间),直到产品已达到所需浓度或直到满足一些其他要求。
为了确保酶和原料之间的最佳接触,可以连续或间歇地搅拌反应混合物。搅拌可以采取以下形式:(i)使整个反应容器有节奏地运动,(ii)鼓风机或其他搅拌装置,(iii)气泡喷射,或(iv)任何其他合适的搅拌方法。
酶促反应可以是微生物发酵。温度和反应时间可适合所用微生物的生长。可以对微生物进行基因改变以产生适合于生产寡糖组合物的酶。微生物可以是细菌,例如大肠杆菌(Escherichia coli),或真菌,诸如酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)或里氏木霉。
在一些实施方案中,可以使用适合于修饰主题微生物的表达载体,使得其产生如本文别处所述的酶或酶混合物。如果需要,表达载体可以是质粒或能够诱导酶产生的任何其他核酸。在一些情况下,表达载体可以包含一种或多种以下调控序列以控制外源酶的表达:热休克基因的调控序列、毒性基因的调控序列、孢子形成基因的调控序列,或任何其他合适的调控序列。
酶促反应可以在适于所用酶和底物的温度或温度方案下进行。例如,酶促反应可以在10℃至100℃、20℃至80℃或40℃至60℃的恒定温度下进行。在一些情况下,如果酶促反应采用微生物发酵的形式,其中温度可适合于此。例如,酶促反应可以包括大肠杆菌的生长,和/或温度可以基本上恒定并且为约37℃。
溶液或悬浮液的pH值可影响酶的活性。pH的控制可以帮助确保酶促反应以合适的速率进行。酶促反应可以在2至10、3至8、或4至6的pH范围内进行。
可以允许酶促反应持续一定时间段,然后将其淬灭并将产物分离或以其他方式收集。该时间段可为1分钟至6天、0.5天至5天,或16小时至96小时。可替选地,可以使反应进行直到没有进一步的催化发生。
添加到酶促反应中的一种或多种原料可以包含多糖。这样的多糖可以已经通过在反应容器中同时或基本同时进行的单独反应来生产。酶促反应中存在的多糖可被酶部分地切割成有用的寡糖、留下部分切割或未切割的多糖,其可包括但不限于纤维素、木聚糖(诸如葡糖醛酸木聚糖、阿拉伯木聚糖或葡糖醛酸阿拉伯木聚糖)、甘露聚糖(诸如葡甘露聚糖、半乳甘露聚糖或半乳葡甘露聚糖)、混合键葡聚糖、木葡聚糖甲壳素、壳聚糖或木质纤维素。
可以允许酶促反应继续进行,直到有5%至75%、5%至70%、5%至65%、5%至55%或10%至50%的含未消化多糖的原料剩余。其可以通过还原末端测定法(诸如蒽酮测定法)和/或色谱法(诸如薄层色谱法和/或高效阴离子交换色谱法)进行监测或检查。
包含适当多糖的任何物质都可以形成原料的一部分。由于食品、化妆品和营养品行业通常使用各种各样的寡糖,因此适合参与酶促反应的多糖不受特别限制。适用于产生寡糖谱的原料可以包括例如,纤维素、木质纤维素、甲壳素、壳聚糖、木聚糖(诸如葡糖醛酸木聚糖、阿拉伯木聚糖和葡糖醛酸阿拉伯木聚糖)和/或甘露聚糖(诸如葡甘露聚糖、半乳甘露聚糖或半乳葡甘露聚糖),然而,设想了可以适当地起作用的任何原料。原料可包括甘蔗、玉米秸秆、玉米芯、麦麸、麦秸、硬木、软木或任何其他合适的生物质或植物生物质。
包含这样的多糖的原料也没有特别限制,因为大多数植物物质富含这样的聚合物。因此,原料可以包括植物生物质,诸如谷物、谷壳、豆荚、种皮和/或其他种子材料;海藻;玉米秸秆、稻草、甘蔗渣、芒草、高粱渣、柳枝稷、竹子和/或其他单子叶植物组织;水葫芦、叶组织、根和/或其他植物物质;硬木、硬木片、硬木木浆、软木、软木片、软木木浆、纸、纸浆、硬纸板和/或其他木质原料;蟹壳、鱿鱼生物质、虾壳和/或其他海洋生物质,和/或适当原料的任何组合。原料可包括麦秸或木材。由于任何给定的天然原料都可能包含不同多糖的混合物,因此有时不同酶的混合物将是有益的。这样的混合物可以包含如本文所讨论的一种或多种任何合适的酶。例如,这样的混合物可以包含LPMO与内切葡聚糖酶、木聚糖酶与地衣聚糖酶、纤维二糖水解酶与甘露聚糖酶或内切葡聚糖酶与纤维二糖水解酶。在一些实施方案中,酶配偶体可以以例如1:100至100:1的摩尔比存在。另外,由于许多合适的原料是难降解的,因此预想对原料进行预处理。
在酶促反应进行到期望的点之后,可以从酶促反应混合物中分离出一种或多种寡糖和一种或多种多糖。取决于所使用的生物质的组成和所使用的酶的特异性,可以以多种方式来执行该过程。由于反应混合物通常包含可溶性寡糖和不溶性多糖的混合物,因此可以过滤反应混合物以除去不溶性物质并制备所得的可溶性寡糖以用于进一步加工。
也可以以多种方式将寡糖从多糖中分离出来。可以基于溶解度分离寡糖,从而仅提取可溶性糖类的组合物用于进一步加工,并且/或者通过色谱分离以产生具有较窄的寡糖链长带的组合物。例如,分离可以基于沉淀、尺寸排阻色谱法、离子交换色谱法或过滤、超滤、微滤和纳滤。在进行基于溶解度的分离的情况下,所分离的组合物中存在的糖类的分布将通常取决于原始的酶促反应,因为不同的多糖通常以不同的速率随长度而降低溶解度。
还设想在掺入食品、化妆品或营养品之前进一步处理所产生的全部或一部分寡糖以产生进一步的产物。该进一步处理可包括任何化学、物理或酶促步骤,例如还原,例如适当时还原胺化;氧化、焦糖化、用席夫碱或通过美拉德反应或通过这些步骤的任何组合进行改性,并且可以提供针对所需目的实现或改进性能的不同产品。例如,可以修改焦糖化特性、热值、风味和颜色。寡糖也可以被纯化,例如通过沉淀、尺寸排阻色谱、离子交换色谱、过滤、超滤、微滤或纳滤。
还设想了在掺入食品、化妆品或营养品之前进一步处理全部或部分所产生的多糖级分以产生具有改善的性质的产品。这种进一步处理可以包括任何化学、物理或酶促步骤,例如烷基化或酸处理。多糖也可以例如通过沉淀、尺寸排阻色谱、离子交换色谱、过滤、超滤、微滤或纳滤来纯化。
在某些情况下,在寡糖级分和多糖级分的修饰和/或纯化之后,全部级分或部分级分然后可以以1:100至1:1的多糖:寡糖的比例重组,例如,1:10至1:1、1:90至1:2、1:80至1:3、1:70至1:4或1:60至1:5。具体的比例可取决于最终成分的所需特性以及已应用于级分的修饰和纯化。可以不需要从酶促反应中分离出的所有寡糖和多糖进行重组。
级分可以以多种方式重组,例如通过混合包含全部或部分寡糖级分的溶液和包含全部或部分多糖级分的溶液和/或悬浮液,其可以进一步干燥、冻干或以其他方式浓缩。还可以通过将包含通过干燥、冻干或以某种其他方式浓缩产生的全部或部分寡糖级分的干燥形式与包含通过干燥、冻干或以某种其他方式浓缩产生的全部或部分多糖级分的干燥形式混合来重组级分。
最终组合物的寡糖组分可以包含一种或多种任何类型的寡糖。例如,寡糖组分可以包括纤维寡糖、木寡糖(xylo-oligosaccharide)、混合键葡聚糖寡糖、甘露寡糖、木葡聚糖寡糖、壳寡糖、阿拉伯木寡糖,或任何上述寡糖的衍生物。
任何这样的干燥或液体组合物都可以被认为是适合在该过程的任何阶段掺入食品、化妆品或营养品中的成分。这包括在该方法期间可被视为中间体的组合物,诸如在任何进一步的纯化、优化、干燥、溶解或任何其他此类步骤之前,将寡糖和多糖级分重组后形成的组合物,以及包括从该方法获得的最终组合物。
如本文所描述的,干燥组合物可以通过干燥和/或冻干形成。可以将干燥的组合物溶解在包括水、糖浆剂、糊剂、溶剂、醇等的各种液体的溶液中,以形成适于掺入食品、化妆品或营养品中的液体组合物成分。液体组合物尤其可用于需要丝滑质构的食品,例如糖果、巧克力和酸奶。
在一些实施方案中,在寡糖级分和多糖级分的修饰和/或纯化之后,全部或部分级分然后可以以1:100至1:1多糖:寡糖的比例重组,例如1:10至1:1、1:90至1:2、1:80至1:3、1:70至1:4或1:60至1:5。具体的比例可能取决于最终成分的所需特性以及已应用于级分的修饰和纯化。
获得适合所考虑的应用的寡糖产品的组合物之后,可以进行进一步的处理和/或分离。从该组合物衍生食品、化妆品或营养品可以提供广泛的潜在用途。如本文所述的成分可用于常规使用寡糖、糖、膨松甜味剂、低强度甜味剂或其他相关食品成分的应用中。
多糖切割酶可以是以下之一:纤维素酶、木聚糖酶、木葡聚糖酶、内切葡聚糖酶、纤维二糖水解酶、甘露聚糖酶、地衣聚糖酶或裂解多糖单加氧酶(LPMO),例如,选自AA9、AA10、AA11、AA13、AA14和AA15。多糖切割酶可以由里氏木霉真菌制备,和/或酶促反应进行直到5-75%、5-65%或5-50%未消化的含多糖的原料剩余。
多糖切割酶可以有效地连接到催化或非催化模块,例如其中多糖切割酶可以有效地连接到非催化模块。并且非催化模块是碳水化合物结合模块。
在各种实施方案中,在一种或多种寡糖和一种或多种多糖分离后,一种或多种寡糖和一种或多种多糖可以是:纯化的;和/或经受化学、物理或酶处理,诸如还原、氧化、焦糖化或美拉德反应;和/或可以通过将干燥的寡糖粉末与干燥的多糖粉末混合来重组。
在一些实施方案中,成分可以包含三种或更多种不同分子量的寡糖,其中方法可包括通过酶促反应形成所述三种或更多种寡糖,其中所述酶促反应包括以下步骤:在溶液或悬浮液中,使一种或多种多糖切割酶和一种或多种原料接触。
III.食品、化妆品或营养品成分
组合物
组合物的多糖组分可以包含一种或多种任何类型的多糖。例如,多糖可包括纤维素、木质纤维素、木聚糖、混合键葡聚糖,甘露聚糖、木葡聚糖、甲壳素、壳聚糖,或任何上述多糖的衍生物。
组合物或成分可以包含各种寡糖。组合物可以包括不同量的寡糖,例如,取决于期望的组合物性质。在一些情况下,组合物可以包含按干重计为至少20%、例如按干重计为至少30%的聚合度为2至6的纤维寡糖,和/或组合物可以包含按干重计为至少20%、例如按干重计为至少30%的聚合度为2至12的木寡糖,和/或组合物可以包含按干重计为至少20%、例如按干重计为至少30%的聚合度为2至5的混合键葡聚糖寡糖,和/或组合物可以包含按干重计为至少20%、例如按干重计为至少30%的聚合度为2至12的甘露寡糖,和/或组合物可以包含按干重计为至少20%、例如按干重计为至少30%的聚合度为4至12的木葡聚糖寡糖,和/或组合物可以包含按干重计为至少20%、例如按干重计为至少30%的聚合度为2至12的壳寡糖,和/或该组合物可以包含按干重计为至少20%、例如按干重计为至少30%的聚合度为3至15的阿拉伯木寡糖。在某些实施方案中,可以理解组合物可包含按干重计最多为100%的上述寡糖,因此上述实施方案(其中寡糖按干重计为至少20%存在)不包含所有七种类型的寡糖。
在各种实施方案中,组合物或成分可包含约5%至约50%w/w的聚合度为2至6的纤维寡糖。在某些实施方案中,组合物或成分可包含约5%至约50%、约10%至约40%、约15%至约35%w/w的聚合度为2至6的纤维寡糖。组合物或成分可包含至少5%、8%、10%、15%、20%或25%w/w的聚合度为2至6的纤维寡糖。在一些实施方案中,组合物或成分可包含约20%至约90%w/w的聚合度为2至6的纤维寡糖。在某些实施方案中,组合物或成分可包含约5%至约95%、约10%至约92.5%、约30%至约80%、约40%至约70%、或约50%至约60%w/w的聚合度为2至6的纤维寡糖。
在各种实施方案中,组合物或成分可包含约20%至约90%w/w的聚合度为2至5的木寡糖。在某些实施方案中,组合物或成分可包含约5%至约95%、约10%至约92.5%、约30%至约80%、约40%至约70%或约50%至约60%w/w的聚合度为2至5的木寡糖。例如,组合物可包含至少30%w/w的聚合度为2至5的木寡糖。组合物或成分可包含至少5%、8%、10%、15%、20%或25%w/w的聚合度为2至5的木糖寡。
在某些实施方案中,组合物或成分可包含约0.1%至约15%w/w的聚合度为3至12的阿拉伯木寡糖。组合物或成分可包含至少0.1%、0.3%、0.5%、0.8%、1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%或15%w/w的聚合度为3至12的阿拉伯木寡糖。在各种实施方案中,组合物或成分可包含约0.5%至约25%w/w的聚合度为3至15的阿拉伯木寡糖。组合物或成分可包含至少0.1%、0.3%、0.5%、0.8%、1%、2%、3%、4%、5%、10%、15%、20%、25%、30%、或35%w/w的聚合度为3至15的阿拉伯木寡糖。
在一些实施方案中,本文提供了寡糖混合物在形成食品、化妆品或营养品中的用途,其中所述寡糖混合物包含选自以下列表的两种寡糖:
i)聚合度为2至6的纤维寡糖;
ii)聚合度为2至12的木寡糖;
iii)聚合度为2至5的混合键葡聚糖寡糖;
iv)聚合度为2至12的甘露寡糖;
v)聚合度为4至10的木葡聚糖寡糖;
vi)聚合度为2至12的壳寡糖;和/或
vii)聚合度为3至15的阿拉伯木寡糖,其中两种寡糖相对于彼此可以以1:9至9:1、1:4至4:1或2:3至3:2的比例存在。
在某些情况下,阿拉伯木寡糖可以包含至少0.1%的阿拉伯糖残基。阿拉伯木寡糖可以包含至少0.1%、0.2%、0.5%、1%、5%或10%的阿拉伯糖残基。
每种寡糖的量可以根据所得食品、化妆品或营养品的期望性质而变化。例如,两种寡糖可以相对于彼此以1:9至1:1、1:2至1:1、或2:3至1:1的比例存在。
寡糖混合物还可以包含第三寡糖。寡糖混合物可以包含第三寡糖和第四寡糖。寡糖混合物可以包含第三寡糖、第四寡糖和第五寡糖。寡糖混合物还可以包含第三寡糖、第四寡糖、第五寡糖和第六寡糖。寡糖混合物还可以包含第三寡糖、第四寡糖、第五寡糖、第六寡糖和第七寡糖。这些寡糖可以选自与以上提供的至少两种寡糖相同的列表。
至少两种寡糖的寡糖混合物可以包含纤维寡糖,例如纤维寡糖与木寡糖的组合。可选的组合物可以包含纤维寡糖和甘露寡糖的组合。在一些实施方案中,寡糖混合物可以包括彼此组合的纤维寡糖、木寡糖和阿拉伯木寡糖。
至少两种寡糖的寡糖混合物可另外包含多糖,例如纤维素多糖,诸如纤维素;或多糖衍生物,例如纤维素衍生物,诸如羧甲基纤维素;或多糖聚集体,例如木质纤维素生物质的一部分。在一些情况下,组合中的比例可以是1:100至1:1多糖/多糖衍生物/多糖聚集体:寡糖,例如1:90至1:2、1:80至1:3、1:70至1:4、或1:60至1:5。这样,第一寡糖、第二寡糖和多糖之间的比例可以为2:2:1至30:30:1,例如约3:3:1。
寡糖的组合
组合物可以包含一种或多种寡糖的混合物。寡糖的混合物可包含两种形式或类型的寡糖,例如,纤维寡糖和木寡糖。寡糖混合物可包含三种形式的寡糖,例如,纤维寡糖、甘露寡糖和木寡糖。寡糖混合物可包含四种形式的寡糖,例如,纤维寡糖、甘露寡糖、混合键葡聚糖寡糖和壳寡糖。
寡糖混合物可包含两种形式的寡糖,例如,第一寡糖和第二寡糖。寡糖混合物可包含约5%w/w的第一寡糖和约95%w/w的第二寡糖。寡糖混合物可包含约10%w/w的第一寡糖和约90%w/w的第二寡糖。寡糖混合物可包含约15%w/w的第一寡糖和约85%w/w的第二寡糖。寡糖混合物可包含约20%w/w的第一寡糖和约80%w/w的第二寡糖。寡糖混合物可包含约25%w/w的第一寡糖和约75%w/w的第二寡糖。寡糖混合物可包含约30%w/w的第一寡糖和约70%w/w的第二寡糖。寡糖混合物可包含约35%w/w的第一寡糖和约65%w/w的第二寡糖。寡糖混合物可包含约40%w/w的第一寡糖和约50%w/w的第二寡糖。寡糖混合物可包含45%w/w的第一寡糖和55%w/w的第二寡糖。寡糖混合物可包含50%w/w的第一寡糖和50%w/w的第二寡糖。寡糖混合物可包含55%w/w的第一寡糖和45%w/w的第二寡糖。寡糖混合物可包含60%w/w的第一寡糖和30%w/w的第二寡糖。寡糖混合物可包含65%w/w的第一寡糖和35%w/w的第二寡糖。寡糖混合物可包含70%w/w的第一寡糖和30%w/w的第二寡糖。寡糖混合物可以包含75%w/w的第一寡糖和25%w/w的第二寡糖。寡糖混合物可以包含80%w/w的第一寡糖和20%w/w的第二寡糖。寡糖混合物可包含85%w/w的第一寡糖和15%w/w的第二寡糖。寡糖混合物可包含90%w/w的第一寡糖和10%w/w的第二寡糖。寡糖混合物可以包含95%w/w的第一寡糖和5%w/w的第二寡糖。在一些情况下,第一寡糖可以是纤维寡糖,且第二寡糖可以是木寡糖。在一些情况下,第一寡糖可以是纤维寡糖,且第二寡糖可以是甘露寡糖。在一些实施方案中,第一寡糖可以是木寡糖,且第二寡糖可以是甘露寡糖。第一寡糖和第二寡糖的其他组合也在本公开内容的范围内。
寡糖混合物可包含三种形式的寡糖,例如第一寡糖、第二寡糖和第三寡糖。寡糖混合物可包含约20%w/w的第一寡糖、40%w/w的第二寡糖和40%w/w的第三寡糖。寡糖混合物可包含约30%w/w的第一寡糖、30%w/w的第二寡糖和40%w/w的第三寡糖。寡糖混合物可包含约10%w/w的第一寡糖、10%w/w的第二寡糖和80%w/w的第三寡糖。寡糖混合物可包含约20%w/w的第一寡糖、20%w/w的第二寡糖和60%w/w的第三寡糖。寡糖混合物可包含约20%w/w的第一寡糖、30%w/w的第二寡糖和50%w/w的第三寡糖。在一些示例中,第一寡糖可以是甘露寡糖,第二寡糖可以是木寡糖,且第三寡糖可以是纤维寡糖。在一些示例中,第一寡糖可以是木葡聚糖-寡糖,第二寡糖可以是木寡糖,并且第三寡糖可以是纤维寡糖。第一寡糖、第二寡糖和第三寡糖的其他组合也在本公开内容的范围内。
寡糖混合物可包含两种或更多种寡糖,第一寡糖和不同于第一寡糖的第二寡糖。例如,第一寡糖可以是木寡糖或纤维寡糖或甘露寡糖或本文所提供的其他寡糖,而第二寡糖可以是不用作第一寡糖的木寡糖或纤维寡糖或甘露寡糖或其他寡糖。换句话说,第一寡糖可以不同于第二寡糖(例如,第一寡糖可以是与第二寡糖不同类型的寡糖)。混合物中第一寡糖与第二寡糖的比例可为约1:1、1:2、1:3、1:4、1:5、1:6、1:7、1:8或1:9。
混合物中的第一寡糖与第二寡糖的比例可为约2:1、2:3、2:5、2:7或2:9。寡糖可以是本文提供的纤维寡糖、甘露寡糖、木寡糖、木葡聚糖-寡糖、混合键寡糖、壳寡糖、阿拉伯木寡糖或其他寡糖,其中第一寡糖被选择为与第二寡糖不同的寡糖。换句话说,第一寡糖可以是与第二寡糖不同类型的寡糖。
混合物中的第一寡糖与第二寡糖的比例可为约3:1、3:2、3:4、3:5、3:7或3:8。寡糖可以是本文提供的纤维寡糖、甘露寡糖、木寡糖、木葡聚糖-寡糖、混合键寡糖、壳寡糖、阿拉伯木寡糖或其他寡糖,其中第一寡糖被选择为与第二寡糖不同的寡糖。
在包含两种或更多种寡糖的寡糖混合物中,第一寡糖与第二寡糖的比例可为1:9至9:1、1:4至4:1、1:3至3:1、或2:3至3:2。寡糖可以是本文提供的纤维寡糖、甘露寡糖、木寡糖、木葡聚糖-寡糖、混合键寡糖、壳寡糖、阿拉伯木寡糖或其他寡糖,其中第一寡糖被选择为与第二寡糖不同的寡糖。
在一些情况下,组合物或成分可以包括至少1%w/w、2%w/w、3%w/w、4%w/w、5%w/w、10%w/w、15%w/w、20%w/w、25%w/w、30%w/w或更多的纤维二糖、木二糖、甘露二糖(例如,Man-β-1,4-Man)、Glc-β-1,4-Man、Man-β-1,4-Glc、海带二糖、龙胆二糖、槐糖、麦芽糖、乳糖或蔗糖。在某些情况下,组合物或成分可以包括至少1%w/w、2%w/w、3%w/w、4%w/w、5%w/w、10%w/w、15%w/w、20%w/w、25%w/w、30%w/w或更多的纤维三糖、木三糖、单阿拉伯糖基化木二糖、单葡糖醛酸化木二糖、麦芽三糖、甘露三糖(例如,Man-β-1,4-Man-β-1,4-Man、Glc-β-1,4-Man-β-1,4-Man、Man-β-1,4-Glc-β-1,4-Man、Man-β-1,4-Man-β-1,4-Glc、Man-β-1,4-Glc-β-1,4-Glc、Glc-β-1,4-Man-β-1,4-Glc、Glc-β-1,4-Glc-β-1,4-Man、Glc-β-1,3-Glc-β-1,4-Glc或Glc-β-1,4-Glc-β-1,3-Glc)。在某些情况下,组合物或成分可以包括至少1%w/w、2%w/w、3%w/w、4%w/w、5%w/w、10%w/w、15%w/w、20%w/w、25%w/w、30%w/w或更多的木四糖、纤维四糖、单阿拉伯糖基化木三糖、单葡糖醛酸基化木三糖、二阿拉伯糖基化木二糖、二葡糖醛酸基化木二糖、麦芽四糖、甘露四糖(例如,Man-β-1,4-Man-β-1,4-Man-β-1,4-Man、Glc-β-1,4-Man-β-1,4-Man-β-1,4-Man、Man-β-1,4-Glc-β-1,4-Man-β-1,4-Man、Man-β-1,4-Man-β-1,4-Glc-β-1,4-Man、Man-β-1,4-Man-β-1,4-Man-β-1,4-Glc、Glc-β-1,4-Glc-β-1,4-Man-β-1,4-Man、Man-β-1,4-Glc-β-1,4-Glc-β-1,4-Man、Man-β-1,4-Man-β-1,4-Glc-β-1,4-Glc、Glc-β-1,4-Man-β-1,4-Glc-β-1,4-Man、Glc-β-1,4-Man-β-1,4-Man-β-1,4-Glc、Man-β-1,4-Glc-β-1,4-Man-β-1,4-Glc、Glc-β-1,3-Glc-β-1,4-Glc-1,4-Glc、Glc-β-1,4-Glc-β-1,3-Glc-1,4-Glc、Glc-β-1,4-Glc-β-1,4-Glc-1,3-Glc、或Glc-β-1,3-Glc-β-1,4-Glc-1,3-Glc。在某些情况下,组合物或成分可以包括至少0.01%w/w、0.05%w/w、0.1%w/w、0.5%w/w、1%w/w、2%w/w、5%w/w、10%w/w、15%w/w、20%w/w或更多的木五糖、纤维五糖、单阿拉伯糖基化木四糖、单葡糖醛酸基化木四糖、二阿拉伯糖基化木三糖、二葡糖醛酸基化木三糖、麦芽五糖、甘露五糖(例如,Man-β-1,4-Man-β-1,4-Man-β-1,4-Man-β-1,4-Man)、混合键葡聚糖衍生的五糖或甘露聚糖衍生的五糖。
组合物或成分可以包括1%至50%、5%至40%、10%至30%或15%至25%w/w的纤维二糖。组合物或成分可以包括2.5%至90%、5%至80%、10%至70%、或20%至60%w/w的木二糖。组合物或成分可以包括2.5%至75%、5%至50%、10%至40%或20%至30%w/w的木三糖。
具有不同聚合度的寡糖组合物
组合物中寡糖的平均聚合度可以为1至50、1.5至25、2至15、2.1至10、2.1至7,或2.2至5。
在木寡糖混合物中聚合度为2的木寡糖的浓度可为约2%至约80%w/w。聚合度为2的木寡糖的浓度可为至少2%、4%、6%、8%、10%、12%、15%、18%、20%、25%或30%w/w。在一些情况下,聚合度为2的木寡糖的浓度可能更高,例如,高达35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%或80%w/w。
在木寡糖混合物中聚合度为3的木寡糖的浓度可为约2%至约20%w/w。聚合度为3的木寡糖的浓度可为至少2%、4%、6%、8%、10%、12%、15%、18%或20%w/w。
在木寡糖混合物中聚合度为4的木寡糖的浓度可为约5%至约20%w/w。聚合度为4的木寡糖的浓度可为至少5%、8%、10%、12%、15%、18%或20%w/w。
在木寡糖混合物中聚合度为5的木寡糖的浓度可为约5%至约20%w/w。聚合度为5的木寡糖的浓度可为至少5%、7%、8%、10%、12%、15%、18%或20%w/w。
在木寡糖混合物中聚合度为6的木寡糖的浓度可为约5%至约25%w/w。聚合度为6的木寡糖的浓度可为至少5%、8%、10%、12%、15%、18%、20%或25%w/w。
在木寡糖混合物中聚合度为7的木寡糖的浓度可为约2%至约20%w/w。聚合度为7的木寡糖的浓度可为至少2%、4%、6%、8%、10%、12%、15%、17%或20%w/w。
在木寡糖混合物中聚合度为8的木寡糖的浓度可为约1%至约15%w/w。聚合度为8的木寡糖的浓度可为至少1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%或15%w/w。
在木寡糖混合物中聚合度为9的木寡糖的浓度可为约2%至约15%w/w。聚合度为9的木寡糖的浓度可为至少1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%或15%w/w。
在木寡糖混合物中聚合度为10的木寡糖的浓度可为约2%至约15%w/w。聚合度为10的木寡糖的浓度可为至少1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%或15%w/w。
在木寡糖混合物中聚合度为11的木寡糖的浓度可为约2%至约15%w/w。聚合度为11的木寡糖的浓度可为至少1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%或15%w/w。
在木寡糖混合物中聚合度为12的木寡糖的浓度可为约2%至约15%w/w。聚合度为12的木寡糖的浓度可为至少1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%或15%w/w。
在纤维寡糖混合物中聚合度为2的纤维寡糖的浓度可为约2%至约80%w/w。聚合度为2的纤维寡糖的浓度可为至少2%、4%、6%、8%、10%、12%、15%、18%、20%、25%或30%w/w。在一些情况下,聚合度为2的纤维寡糖的浓度可能更高,例如,至少35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%或80%w/w。
在纤维寡糖混合物中聚合度为3的纤维寡糖的浓度可为约2%至约20%w/w。聚合度为3的纤维寡糖的浓度可为至少2%、4%、6%、8%、10%、12%、15%、18%或20%w/w。
在纤维寡糖混合物中聚合度为4的纤维寡糖的浓度可为约5%至约20%w/w。聚合度为4的纤维寡糖的浓度可为至少5%、8%、10%、12%、15%、18%或20%w/w。
在纤维寡糖混合物中聚合度为5的纤维寡糖的浓度可为约5%至约20%w/w。聚合度为5的纤维寡糖的浓度可为至少5%、7%、8%、10%、12%、15%、18%或20%w/w。
在纤维寡糖混合物中聚合度为6的纤维寡糖的浓度可为约5%至约25%w/w。聚合度为6的纤维寡糖的浓度可为至少5%、8%、10%、12%、15%、18%、20%或25%w/w。
在甘露寡糖混合物中聚合度为2的甘露寡糖的浓度可为约2%至约30%w/w。聚合度为2的甘露寡糖的浓度可为至少2%、4%、6%、8%、10%、12%、15%、18%、20%、25%或30%w/w。
在甘露寡糖混合物中聚合度为3的甘露寡糖的浓度可为约2%至约20%w/w。聚合度为3的甘露寡糖的浓度可为至少2%、4%、6%、8%、10%、12%、15%、18%或20%w/w。
在甘露寡糖混合物中聚合度为4的甘露寡糖的浓度可为约5%至约20%w/w。聚合度为4的甘露寡糖的浓度可为至少5%、8%、10%、12%、15%、18%或20%w/w。
在甘露寡糖混合物中聚合度为5的甘露寡糖的浓度可为约5%至约20%w/w。聚合度为5的甘露寡糖的浓度可为至少5%、7%、8%、10%、12%、15%、18%或20%w/w。
在甘露寡糖混合物中聚合度为6的甘露寡糖的浓度可为约5%至约25%w/w。聚合度为6的甘露寡糖的浓度可为至少5%、8%、10%、12%、15%、18%、20%或25%w/w。
在甘露寡糖混合物中聚合度为7的甘露寡糖的浓度可为约2%至约20%w/w。聚合度为7的甘露寡糖的浓度可为至少2%、4%、6%、8%、10%、12%、15%、17%或20%w/w。
在甘露寡糖混合物中聚合度为8的甘露寡糖的浓度可为约1%至约15%w/w。聚合度为8的甘露寡糖的浓度可为至少1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%或15%w/w。
在甘露寡糖混合物中聚合度为9的甘露寡糖的浓度可为约2%至约15%w/w。聚合度为9的甘露寡糖的浓度可为至少1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%或15%w/w。
在甘露寡糖混合物中聚合度为10的甘露寡糖的浓度可为约2%至约15%w/w。聚合度为10的甘露寡糖的浓度可为至少1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%或15%w/w。
在甘露寡糖混合物中聚合度为11的甘露寡糖的浓度可为约2%至约15%w/w。聚合度为11的甘露寡糖的浓度可为至少1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%或15%w/w。
在甘露寡糖混合物中聚合度为12的甘露寡糖的浓度可为约2%至约15%w/w。聚合度为12的甘露寡糖的浓度可为至少1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%或15%w/w。
在木葡聚糖寡糖混合物中聚合度为4的木葡聚糖寡糖的浓度可为约5%至约20%w/w。聚合度为4的木葡聚糖寡糖的浓度可为至少5%、8%、10%、12%、15%、18%或20%w/w。
在木葡聚糖寡糖混合物中聚合度为5的木葡聚糖寡糖的浓度可为约5%至约20%w/w。聚合度为5的木葡聚糖寡糖的浓度可为至少5%、7%、8%、10%、12%、15%、18%或20%w/w。
在木葡聚糖寡糖混合物中聚合度为6的木葡聚糖寡糖的浓度可为约5%至约25%w/w。聚合度为6的木葡聚糖寡糖的浓度可为至少5%、8%、10%、12%、15%、18%、20%或25%w/w。
在木葡聚糖寡糖混合物中聚合度为7的木葡聚糖寡糖的浓度可为约2%至约20%w/w。聚合度为7的木葡聚糖寡糖的浓度可为至少2%、4%、6%、8%、10%、12%、15%、17%或20%w/w。
在木葡聚糖寡糖混合物中聚合度为8的木葡聚糖寡糖的浓度可为约1%至约15%w/w。聚合度为8的木葡聚糖寡糖的浓度可为至少1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%或15%w/w。
在木葡聚糖寡糖混合物中聚合度为9的木葡聚糖寡糖的浓度可为约2%至约15%w/w。聚合度为9的木葡聚糖寡糖的浓度可为至少1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%或15%w/w。
在木葡聚糖寡糖混合物中聚合度为10的木葡聚糖寡糖的浓度可为约2%至约15%w/w。聚合度为10的木葡聚糖寡糖的浓度可为至少1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%或15%w/w。
在混合键葡聚糖寡糖混合物中聚合度为2的混合键葡聚糖寡糖的浓度可为约2%至约30%w/w。聚合度为2的混合键葡聚糖寡糖的浓度可为至少2%、4%、6%、8%、10%、12%、15%、18%、20%、25%或30%w/w。
在混合键葡聚糖寡糖混合物中聚合度为3的混合键葡聚糖寡糖的浓度可为约2%至约20%w/w。聚合度为3的混合键葡聚糖寡糖的浓度可为至少2%、4%、6%、8%、10%、12%、15%、18%或20%w/w。
在混合键葡聚糖寡糖混合物中聚合度为4的混合键葡聚糖寡糖的浓度可为约5%至约20%w/w。聚合度为4的混合键葡聚糖寡糖的浓度可为至少5%、8%、10%、12%、15%、18%或20%w/w。
在混合键葡聚糖寡糖混合物中聚合度为5的混合键葡聚糖寡糖的浓度可为约5%至约20%w/w。聚合度为5的混合键葡聚糖寡糖的浓度可为至少5%、7%、8%、10%、12%、15%、18%或20%w/w。
在壳寡糖混合物中聚合度为2的壳寡糖的浓度可为约2%至约30%w/w。聚合度为2的壳寡糖的浓度可为至少2%、4%、6%、8%、10%、12%、15%、18%、20%、25%或30%w/w。
在壳寡糖混合物中聚合度为3的壳寡糖的浓度可为约2%至约20%w/w。聚合度为3的壳寡糖的浓度可为至少2%、4%、6%、8%、10%、12%、15%、18%或20%w/w。
在壳寡糖混合物中聚合度为4的壳寡糖的浓度可为约5%至约20%w/w。聚合度为4的壳寡糖的浓度可为至少5%、8%、10%、12%、15%、18%或20%w/w。
在壳寡糖混合物中聚合度为5的壳寡糖的浓度可为约5%至约20%w/w。聚合度为5的壳寡糖的浓度可为至少5%、7%、8%、10%、12%、15%、18%或20%w/w。
在壳寡糖混合物中聚合度为6的壳寡糖的浓度可为约5%至约25%w/w。聚合度为6的壳寡糖的浓度可为至少5%、8%、10%、12%、15%、18%、20%或25%w/w。
在壳寡糖混合物中聚合度为7的壳寡糖的浓度可为约2%至约20%w/w。聚合度为7的壳寡糖的浓度可为至少2%、4%、6%、8%、10%、12%、15%、17%或20%w/w。
在壳寡糖混合物中聚合度为8的壳寡糖的浓度可为约1%至约15%w/w。聚合度为8的壳寡糖的浓度可为至少1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%或15%w/w。
在壳寡糖混合物中聚合度为9的壳寡糖的浓度可为约2%至约15%w/w。聚合度为9的壳寡糖的浓度可为至少1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%或15%w/w。
在壳寡糖混合物中聚合度为10的壳寡糖的浓度可为约2%至约15%w/w。聚合度为10的壳寡糖的浓度可为至少1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%或15%w/w。
在壳寡糖混合物中聚合度为11的壳寡糖的浓度可为约2%至约15%w/w。聚合度为11的壳寡糖的浓度可为至少1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%或15%w/w。
在壳寡糖混合物中聚合度为12的壳寡糖的浓度可为约2%至约15%w/w。聚合度为12的壳寡糖的浓度可为至少1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%或15%w/w。
在阿拉伯木寡糖混合物中聚合度为3的阿拉伯木寡糖的浓度可为约2%至约20%w/w。聚合度为3的阿拉伯木寡糖的浓度可为至少2%、4%、6%、8%、10%、12%、15%、18%或20%w/w。
在阿拉伯木寡糖混合物中聚合度为4的阿拉伯木寡糖的浓度可为约5%至约20%w/w。聚合度为4的阿拉伯木寡糖的浓度可为至少5%、8%、10%、12%、15%、18%或20%w/w。
在阿拉伯木寡糖混合物中聚合度为5的阿拉伯木寡糖的浓度可为约5%至约20%w/w。聚合度为5的阿拉伯木寡糖的浓度可为至少5%、7%、8%、10%、12%、15%、18%或20%w/w。
在阿拉伯木寡糖混合物中聚合度为6的阿拉伯木寡糖的浓度可为约5%至约25%w/w。聚合度为6的阿拉伯木寡糖的浓度可为至少5%、8%、10%、12%、15%、18%、20%或25%w/w。
在阿拉伯木寡糖混合物中聚合度为7的阿拉伯木寡糖的浓度可为约2%至约20%w/w。聚合度为7的阿拉伯木寡糖的浓度可为至少2%、4%、6%、8%、10%、12%、15%、17%或20%w/w。
在阿拉伯木寡糖混合物中聚合度为8的阿拉伯木寡糖的浓度可为约1%至约15%w/w。聚合度为8的阿拉伯木寡糖的浓度可为至少1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%或15%w/w。
在阿拉伯木寡糖混合物中聚合度为9的阿拉伯木寡糖的浓度可为约2%至约15%w/w。聚合度为9的阿拉伯木寡糖的浓度可为至少1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%或15%w/w。
在阿拉伯木寡糖混合物中聚合度为10的阿拉伯木寡糖的浓度可为约2%至约15%w/w。聚合度为10的阿拉伯木寡糖的浓度可为至少1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%或15%w/w。
在阿拉伯木寡糖混合物中聚合度为11的阿拉伯木寡糖的浓度可为约2%至约15%w/w。聚合度为11的阿拉伯木寡糖的浓度可为至少1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%或15%w/w。
在阿拉伯木寡糖混合物中聚合度为12的阿拉伯木寡糖的浓度可为约2%至约15%w/w。聚合度为12的阿拉伯木寡糖的浓度可为至少1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%或15%w/w。
在阿拉伯木寡糖混合物中聚合度为13的阿拉伯木寡糖的浓度可为约2%至约15%w/w。聚合度为13的阿拉伯木寡糖的浓度可为至少1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%或15%w/w。
在阿拉伯木寡糖混合物中聚合度为14的阿拉伯木寡糖的浓度可为约2%至约15%w/w。聚合度为14的阿拉伯木寡糖的浓度可为至少1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%或15%w/w。
在阿拉伯木寡糖混合物中聚合度为15的阿拉伯木寡糖的浓度可为约2%至约15%w/w。聚合度为15的阿拉伯木寡糖的浓度可为至少1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%或15%w/w。
在阿拉伯木寡糖混合物中聚合度为3至12的阿拉伯木寡糖的浓度可为约0.1%至约15%w/w。聚合度为3至12的阿拉伯木寡糖的浓度可为至少0.1%、0.3%、0.5%、0.8%、1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%或15%w/w。
具有单糖、多糖和/或寡糖组合的组合物
在一些实施方案中,组合物或成分(例如,用于人食用的成分)可溶于水。成分在水中的溶解度可以是在50℃下每100g水至少80g成分。
成分可以与液体组合以形成液体成分。在一些情况下,液体成分的粘度可以与玉米糖浆的粘度相当或相似。在一些其他情况下,液体成分的粘度可以与高果糖玉米糖浆的粘度相当或相似。例如,液体成分的粘度可为5cps至100,000cps、8,000cps至100,000cps、10,000cps至50,000cps或15,000cps至25,000cps。此外,液体成分的每克卡路里比玉米糖浆或高果糖玉米糖浆更低。液体成分的升糖指数比玉米糖浆或高果糖玉米糖浆更低。
在一些实施方案中,液体可以包括水或任何其他合适的液体。液体成分可以包括至少5%、10%、20%、30%、40%或50%干重的至少一种寡糖。此外,液体成分可以包含至少0.2%、0.5%、1%、2%、3%、5%或10%干重的至少一种多糖。例如,液体成分可以包含至少20%干重的至少一种寡糖和至少2%干重的至少一种多糖。至少一种寡糖和至少一种多糖的其他组合也在本公开内容的范围内。
液体成分包含至少0.2%、0.5%、1%、2%、3%、5%或10%干重的木聚糖。液体成分可以包含至少0.2%、0.5%、1%、2%、3%、5%或10%干重的甘露聚糖。液体成分可以包含至少0.2%、0.5%、1%、2%、3%、5%或10%干重的纤维素衍生物。
在各种情况下,液体成分的多糖浓度可为0.1%至50%、0.1%至40%、0.1%至30%、0.1%至20%、0.1%至10%、0.5%至50%或1%至50%w/v。例如,液体成分的多糖浓度可为0.1%至50%w/v。液体成分可以包含一定量的多糖和寡糖,多糖和寡糖的比例为1:200至1:1、1:150至1:1、1:125至1:1 1:100至1:1、1:90至1:1、1:80至1:1、1:70至1:1、1:60至1:1、1:50至1:1、1:25至1:1,或1:10至1:1。例如,液体成分可以包含多糖和寡糖的量的比例为1:100至1:1。
一种或多种可溶性多糖可包含甘露聚糖、木聚糖、混合键葡聚糖、木质纤维素、半纤维素、纤维素衍生物、壳聚糖、木葡聚糖或任何其他合适的可溶性多糖中的一种或多种。纤维素衍生物可以包括乙酸纤维素、羟乙基纤维素、羟甲基纤维素或任何其他合适的纤维素衍生物中的至少一种。
生物质可以包含甘蔗生物质、玉米生物质、小麦生物质、硬木生物质、软木生物质或任何其他合适的生物质中的至少一种。
在某些情况下,用于人食用的组合物可包括可溶性多糖和寡糖,该寡糖包含以下至少一种:(i)聚合度(DP)为2至6的纤维寡糖;(ii)DP为2至12的木寡糖;(iii)DP为2至12的甘露寡糖;(iv)DP为3至15的阿拉伯木寡糖;(v)DP为2至5的混合键葡聚糖寡糖;或(vi)DP为2至12的壳寡糖。组合物可包括少于5%干重的可溶性多糖。在一些情况下,组合物可包括少于1%、2%、5%、7.5%、10%或20%干重的可溶性多糖。在一些实施方案中,组合物可以不含或基本上不含不溶性多糖。
组合物可以包含多糖和寡糖的组合。在一些实施方案中,组合物可以包含寡糖和可溶性多糖的组合。此类组合物中的多糖(或可溶性多糖)来源可包含纤维素,诸如生物质,例如部分消化的生物质的未消化组分,例如来自与产生寡糖的反应相同的反应的未消化的生物质。未消化的生物质中的多糖可包括木质素、多酚、纤维素、木质纤维素或本文所述的任何其他合适的多糖。可以在寡糖混合物中添加多糖(例如,可溶性多糖)以提高寡糖混合物的胃肠道耐受性。寡糖食用可能引起胃肠道不适,包括腹泻、不适感和腹胀。与可商购的糖组合物或主要包含单糖和/或二糖的糖组合物相比,本文所述的组合物可具有改善的胃肠道耐受性,例如更少或没有不适感、腹胀、腹泻或胃肠道不适。例如,与如果或当对象摄入商购糖组合物或主要包含单糖和/或二糖的糖组合物相比,摄入本文提供的一种或多种组合物的对象可具有改善的胃肠道耐受性,例如较少或没有不适、腹胀、腹泻或胃肠道不适。
组合物中未消化的生物质的浓度可为1%至50%w/w。组合物中未消化的生物质的浓度可为1%至5%、1%至10%、1%至15%、1%至20%、1%至25%、1%至30%、1%至35%、1%至40%、1%至45%、1%至50%、5%至10%、5%至15%、5%至20%、5%至25%、5%至30%、5%至35%、5%至40%、5%至45%、5%至50%、10%至15%、10%至20%、10%至25%、10%至30%、10%至35%、10%至40%、10%至45%、10%至50%、15%至20%、15%至25%、15%至30%、15%至35%、15%至40%、15%至45%、15%至50%、20%至25%、20%至30%、20%至35%、20%至40%、20%至45%、20%至50%、25%至30%、25%至35%、25%至40%、25%至45%、25%至50%、30%至35%、30%至40%、30%至45%、30%至50%、35%至40%、35%至45%、35%至50%、40%至45%、40%至50%或45%至50%w/w。组合物中未消化的生物质的浓度可为约1%、5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%或50%w/w。组合物中未消化的生物质的浓度可为至少1%、5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%或45%w/w。组合物中未消化的生物质的浓度可为至多5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%或50%w/w。
组合物中可溶性多糖的浓度可为1%至50%w/w。组合物中可溶性多糖的浓度可为1%至5%、1%至10%、1%至15%、1%至20%、1%至25%、1%至30%、1%至35%、1%至40%、1%至45%、1%至50%、5%至10%、5%至15%、5%至20%、5%至25%、5%至30%、5%至35%、5%至40%、5%至45%、5%至50%、10%至15%、10%至20%、10%至25%、10%至30%、10%至35%、10%至40%、10%至45%、10%至50%、15%至20%、15%至25%、15%至30%、15%至35%、15%至40%、15%至45%、15%至50%、20%至25%、20%至30%、20%至35%、20%至40%、20%至45%、20%至50%、25%至30%、25%至35%、25%至40%、25%至45%、25%至50%、30%至35%、30%至40%、30%至45%、30%至50%、35%至40%、35%至45%、35%至50%、40%至45%、40%至50%或45%至50%w/w。组合物中可溶性多糖的浓度可为约1%、5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%或50%w/w。组合物中可溶性多糖的浓度可为至少1%、5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%或45%w/w。组合物中可溶性多糖的浓度可为至多5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%或50%w/w。
组合物中木寡糖的浓度可为1%至50%w/w。组合物中木寡糖的浓度可为1%至5%、1%至10%、1%至15%、1%至20%、1%至25%、1%至30%、1%至35%、1%至40%、1%至45%、1%至50%、5%至10%、5%至15%、5%至20%、5%至25%、5%至30%、5%至35%、5%至40%、5%至45%、5%至50%、10%至15%、10%至20%、10%至25%、10%至30%、10%至35%、10%至40%、10%至45%、10%至50%、15%至20%、15%至25%、15%至30%、15%至35%、15%至40%、15%至45%、15%至50%、20%至25%、20%至30%、20%至35%、20%至40%、20%至45%、20%至50%、25%至30%、25%至35%、25%至40%、25%至45%、25%至50%、30%至35%、30%至40%、30%至45%、30%至50%、35%至40%、35%至45%、35%至50%、40%至45%、40%至50%或45%至50%w/w。组合物中木寡糖的浓度可为约1%、5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%或50%w/w。组合物中木寡糖的浓度可为至少1%、5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%或45%w/w。组合物中木寡糖的浓度可为至多5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%或50%w/w。
组合物中纤维寡糖的浓度可为1%至50%w/w。组合物中纤维寡糖的浓度可为1%至5%、1%至10%、1%至15%、1%至20%、1%至25%、1%至30%、1%至35%、1%至40%、1%至45%、1%至50%、5%至10%、5%至15%、5%至20%、5%至25%、5%至30%、5%至35%、5%至40%、5%至45%、5%至50%、10%至15%、10%至20%、10%至25%、10%至30%、10%至35%、10%至40%、10%至45%、10%至50%、15%至20%、15%至25%、15%至30%、15%至35%、15%至40%、15%至45%、15%至50%、20%至25%、20%至30%、20%至35%、20%至40%、20%至45%、20%至50%、25%至30%、25%至35%、25%至40%、25%至45%、25%至50%、30%至35%、30%至40%、30%至45%、30%至50%、35%至40%、35%至45%、35%至50%、40%至45%、40%至50%或45%至50%w/w。组合物中纤维寡糖的浓度可为约1%、5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%或50%w/w。组合物中纤维寡糖的浓度可为至少1%、5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%或45%w/w。组合物中纤维寡糖的浓度可为至多5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%或50%w/w。
在一些实施方案中,组合物可以包含至少5%w/w的纤维寡糖和至少5%w/w的第二寡糖(例如,至少5%w/w的木寡糖、甘露寡糖、混合键葡聚糖寡糖、木葡聚糖寡糖、壳寡糖、阿拉伯木寡糖,或任何其他合适的寡糖)。
组合物中甘露寡糖的浓度可以为1%至50%w/w。组合物中甘露寡糖的浓度可以为1%至5%、1%至10%、1%至15%、1%至20%、1%至25%、1%至30%、1%至35%、1%至40%、1%至45%、1%至50%、5%至10%、5%至15%、5%至20%、5%至25%、5%至30%、5%至35%、5%至40%、5%至45%、5%至50%、10%至15%、10%至20%、10%至25%、10%至30%、10%至35%、10%至40%、10%至45%、10%至50%、15%至20%、15%至25%、15%至30%、15%至35%、15%至40%、15%至45%、15%至50%、20%至25%、20%至30%、20%至35%、20%至40%、20%至45%、20%至50%、25%至30%、25%至35%、25%至40%、25%至45%、25%至50%、30%至35%、30%至40%、30%至45%、30%至50%、35%至40%、35%至45%、35%至50%、40%至45%、40%至50%或45%至50%w/w。组合物中甘露寡糖的浓度可为约1%、5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%或50%w/w。组合物中甘露寡糖的浓度可为至少1%、5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%或45%w/w。组合物中甘露寡糖的浓度可为至多5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%或50%w/w。
组合物中壳寡糖的浓度可以为1%至50%w/w。组合物中壳寡糖的浓度可以为1%至5%、1%至10%、1%至15%、1%至20%、1%至25%、1%至30%、1%至35%、1%至40%、1%至45%、1%至50%、5%至10%、5%至15%、5%至20%、5%至25%、5%至30%、5%至35%、5%至40%、5%至45%、5%至50%、10%至15%、10%至20%、10%至25%、10%至30%、10%至35%、10%至40%、10%至45%、10%至50%、15%至20%、15%至25%、15%至30%、15%至35%、15%至40%、15%至45%、15%至50%、20%至25%、20%至30%、20%至35%、20%至40%、20%至45%、20%至50%、25%至30%、25%至35%、25%至40%、25%至45%、25%至50%、30%至35%、30%至40%、30%至45%、30%至50%、35%至40%、35%至45%、35%至50%、40%至45%、40%至50%或45%至50%w/w。组合物中壳寡糖的浓度可为约1%、5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%或50%w/w。组合物中壳寡糖的浓度可为至少1%、5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%或45%w/w。组合物中壳寡糖的浓度可为至多5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%或50%w/w。
组合物中木葡聚糖寡糖的浓度可以为1%至50%w/w。组合物中木葡聚糖寡糖的浓度可以为1%至5%、1%至10%、1%至15%、1%至20%、1%至25%、1%至30%、1%至35%、1%至40%、1%至45%、1%至50%、5%至10%、5%至15%、5%至20%、5%至25%、5%至30%、5%至35%、5%至40%、5%至45%、5%至50%、10%至15%、10%至20%、10%至25%、10%至30%、10%至35%、10%至40%、10%至45%、10%至50%、15%至20%、15%至25%、15%至30%、15%至35%、15%至40%、15%至45%、15%至50%、20%至25%、20%至30%、20%至35%、20%至40%、20%至45%、20%至50%、25%至30%、25%至35%、25%至40%、25%至45%、25%至50%、30%至35%、30%至40%、30%至45%、30%至50%、35%至40%、35%至45%、35%至50%、40%至45%、40%至50%或45%至50%w/w。组合物中木葡聚糖寡糖的浓度可为约1%、5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%或50%w/w。组合物中木葡聚糖寡糖的浓度可为至少1%、5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%或45%w/w。组合物中木葡聚糖寡糖的浓度可为至多5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%或50%w/w。
组合物中混合键葡聚糖寡糖的浓度可以为1%至50%w/w。组合物中混合键葡聚糖寡糖的浓度可以为1%至5%、1%至10%、1%至15%、1%至20%、1%至25%、1%至30%、1%至35%、1%至40%、1%至45%、1%至50%、5%至10%、5%至15%、5%至20%、5%至25%、5%至30%、5%至35%、5%至40%、5%至45%、5%至50%、10%至15%、10%至20%、10%至25%、10%至30%、10%至35%、10%至40%、10%至45%、10%至50%、15%至20%、15%至25%、15%至30%、15%至35%、15%至40%、15%至45%、15%至50%、20%至25%、20%至30%、20%至35%、20%至40%、20%至45%、20%至50%、25%至30%、25%至35%、25%至40%、25%至45%、25%至50%、30%至35%、30%至40%、30%至45%、30%至50%、35%至40%、35%至45%、35%至50%、40%至45%、40%至50%或45%至50%w/w。组合物中混合键葡聚糖寡糖的浓度可为约1%、5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%或50%w/w。组合物中混合键葡聚糖寡糖的浓度可以为至少1%、5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%或45%w/w。组合物中混合键葡聚糖寡糖的浓度可以为至多5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%或50%w/w。
组合物中阿拉伯木寡糖的浓度可以为1%至50%w/w。组合物中阿拉伯木寡糖的浓度可以为1%至5%、1%至10%、1%至15%、1%至20%、1%至25%、1%至30%、1%至35%、1%至40%、1%至45%、1%至50%、5%至10%、5%至15%、5%至20%、5%至25%、5%至30%、5%至35%、5%至40%、5%至45%、5%至50%、10%至15%、10%至20%、10%至25%、10%至30%、10%至35%、10%至40%、10%至45%、10%至50%、15%至20%、15%至25%、15%至30%、15%至35%、15%至40%、15%至45%、15%至50%、20%至25%、20%至30%、20%至35%、20%至40%、20%至45%、20%至50%、25%至30%、25%至35%、25%至40%、25%至45%、25%至50%、30%至35%、30%至40%、30%至45%、30%至50%、35%至40%、35%至45%、35%至50%、40%至45%、40%至50%或45%至50%w/w。组合物中阿拉伯木寡糖的浓度可为约1%、5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%或50%w/w。组合物中阿拉伯木寡糖的浓度可以为至少1%、5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%或45%w/w。组合物中阿拉伯木寡糖的浓度可以为至多5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%或50%w/w。
组合物可包含一种或多种多糖(例如,一种或多种可溶性多糖)和一种或多种寡糖。组合物可以包含多糖和一种类型的寡糖。组合物可以包含多糖或多种多糖和两种形式的寡糖。组合物可以包含多糖或多种多糖和三种形式的寡糖。组合物可以包含多糖或多种多糖和四种形式的寡糖。组合物可以包含多糖或多种多糖和五种形式的寡糖。寡糖可以是木寡糖、纤维寡糖、甘露寡糖、混合键葡聚糖寡糖、木葡聚糖寡糖、壳寡糖、阿拉伯木寡糖,或本文描述的任何其他合适的寡糖。
组合物可包含约1%至50%w/w的多糖(诸如以未消化的生物质或提取的可溶性多糖的类型),和约5%至约95%w/w的寡糖。多糖的组成可为至少约1%、2%、2.5%、3%、4%、5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%或50%w/w。此类混合物中的寡糖可以大于5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%或95%w/w存在。寡糖可以是一种或多种寡糖的混合物。例如,如本文其他地方所述,组合物可包含5%w/w未消化的生物质和50%w/w寡糖混合物。在另一种情况下,如本文其他地方所述,组合物可包含2.5%w/w的可溶性多糖和50%w/w的寡糖混合物。
组合物可包含约5%w/w的多糖(诸如以未消化的生物质类型),和约5%至约95%w/w的寡糖。此类混合物中的寡糖可以大于5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%或95%w/w存在。寡糖可以是一种或多种寡糖的混合物。例如,如本文其他地方所述,组合物可包含5%w/w未消化的生物质和50%w/w寡糖混合物。在另一种情况下,如本文其他地方所述,组合物可包含5%w/w可溶性多糖和50%w/w寡糖混合物。
组合物可包含约7%w/w的多糖(诸如以未消化的生物质类型),和约5%至约93%w/w的寡糖。寡糖可形成此类混合物中的至少5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%或93%w/w。寡糖可以是一种或多种寡糖的混合物。例如,如本文其他地方所述,组合物可包含7%w/w未消化的生物质和50%w/w寡糖混合物。在另一种情况下,如本文其他地方所述,组合物可包含7%w/w可溶性多糖和50%w/w寡糖混合物。
组合物可包含约10%w/w的多糖(诸如以未消化的生物质类型),和约5%至约90%w/w的寡糖。寡糖可形成此类混合物的至少5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%或90%w/w。寡糖可以是一种或多种寡糖的混合物。例如,如本文其他地方所述,组合物可包含10%w/w未消化的生物质和50%w/w寡糖混合物。在另一种情况下,如本文其他地方所述,组合物可包含10%w/w多糖和50%w/w寡糖混合物。
组合物可包含约12%w/w的多糖(诸如以未消化的生物质类型),和约5%至约95%w/w的寡糖。寡糖可形成此类混合物的至少5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%或88%w/w。寡糖可以是一种或多种寡糖的混合物。例如,如本文其他地方所述,组合物可包含12%w/w的未消化的生物质和50%w/w的寡糖混合物。在另一种情况下,如本文其他地方所述,组合物可包含12%w/w可溶性多糖和50%w/w寡糖混合物。
组合物可包含约15%w/w的多糖(诸如以未消化的生物质类型),和约5%至约85%w/w的寡糖。寡糖可形成此类混合物的至少5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%或85%w/w。寡糖可以是一种或多种寡糖的混合物。例如,如本文其他地方所述,组合物可包含15%w/w的未消化的生物质和50%w/w的寡糖混合物。在另一种情况下,如本文其他地方所述,组合物可包含15%w/w可溶性多糖和50%w/w寡糖混合物。
组合物可包含约20%w/w的多糖(诸如以未消化的生物质类型),和约5%至约80%w/w的寡糖。寡糖可形成此类混合物的至少5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%或80%w/w。寡糖可以是一种或多种寡糖的混合物。例如,如本文其他地方所述,组合物可包含20%w/w的未消化的生物质和50%w/w的寡糖混合物。在另一种情况下,如本文其他地方所述,组合物可包含20%w/w可溶性多糖和50%w/w寡糖混合物。
组合物可包含约25%w/w的多糖(诸如以未消化的生物质类型),和约5%至约75%w/w的寡糖。寡糖可形成此类混合物的至少5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%或75%w/w。寡糖可以是一种或多种寡糖的混合物。例如,如本文其他地方所述,组合物可包含25%w/w的未消化的生物质和50%w/w的寡糖混合物。在另一种情况下,如本文其他地方所述,组合物可包含25%w/w可溶性多糖和50%w/w寡糖混合物。
组合物可包含约30%w/w的多糖(诸如以未消化的生物质类型),和约5%至约70%w/w的寡糖。寡糖可形成此类混合物的至少5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%或70%w/w。寡糖可以是一种或多种寡糖的混合物。例如,如本文其他地方所述,组合物可包含30%w/w的未消化的生物质和50%w/w的寡糖混合物。在另一种情况下,如本文其他地方所述,组合物可包含30%w/w可溶性多糖和50%w/w寡糖混合物。
组合物可包含约40%w/w的多糖(诸如以未消化的生物质类型),和约5%至约60%w/w的寡糖。寡糖可形成此类混合物的至少5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%或60%w/w。寡糖可以是一种或多种寡糖的混合物。例如,如本文其他地方所述,组合物可包含40%w/w的未消化的生物质和50%w/w的寡糖混合物。在另一种情况下,如本文其他地方所述,组合物可包含40%w/w可溶性多糖和50%w/w寡糖混合物。
组合物可包含约50%w/w的多糖(诸如未消化的生物质类型)和约5%至约50%w/w的寡糖。寡糖至少可以形成此类混合物的至少5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%或50%w/w。寡糖可以是一种或多种寡糖的混合物。例如,如本文其他地方所述,组合物可包含50%w/w未消化的生物质和50%w/w的寡糖混合物。在另一种情况下,如本文其他地方所述,组合物可包含50%w/w的可溶性多糖和50%w/w的寡糖混合物。
在一些实施方案中,组合物或成分可包含少于1%、5%、10%、15%、20%、25%、30%或40%w/w单糖。例如,组合物可以包含少于20%w/w单糖。组合物可以包括10%至40%、15%至30%、18%至25%或约20%w/w单糖。在一些实施方案中,组合物或成分可包含少于1%、5%、10%、15%、20%、25%、30%或40%w/w葡萄糖。例如,组合物可以包含少于10%w/w葡萄糖。组合物可以包括10%至40%、15%至30%、18%至25%或约20%w/w葡萄糖。在一些实施方案中,组合物或成分可包含少于1%、5%、10%、15%、20%、25%、30%或40%w/w木糖。例如,组合物可以包含少于10%w/w木糖。组合物可以包括10%至40%、15%至30%、18%至25%或约20%w/w木糖。
在某些情况下,组合物或成分内的葡萄糖残基与木糖残基(例如,葡萄糖:木糖)的比例可以为1:1至1:9、1:1至1:7、1:1至1:5、1:1至1:3或1:1至1:2。
在某些实施方案中,组合物可以包含少于30%、40%、50%、60%、65%、70%、75%或80%w/w二糖。例如,组合物可以包含少于70%w/w二糖。组合物可以包括10%至95%、15%至90%、20%至80%、30%至70%或40%至60%w/w二糖。组合物可以包含5%至95%、10%至92.5%、15%至90%、20%至70%、30%至60%或40%至50%二糖。在各种实施方案中,组合物可以包含至少0.5%、1%、2.5%、5%、7.5%、10%、15%或20%w/w三糖。例如,组合物可以包含至少5%w/w三糖。在各种实施方案中,组合物可以包含至少0.5%、1%、2.5%、5%、7.5%、10%、15%或20%w/w三糖。例如,组合物可以包含至少5%w/w三糖。组合物可以包含1%至75%、2.5%至60%、5%至50%、10%至40%或20%至30%三糖。在一些情况下,组合物可以包含至少0.1%、0.5%、1%、2.5%、5%、7.5%、10%、15%或20%w/w四糖。例如,组合物可以包含至少1%w/w四糖。在各种情况下,组合物可以包含至少0.01%、0.05%、0.1%、0.2%、0.3%、0.5%、0.5%、1%、2.5%、5%、7.5%或w/w五糖。例如,组合物可以包含至少0.1%w/w五糖。
组合物作为成分的用途
在一些实施方案中,组合物是成分(例如在食品中)。在某些实施方案中,成分包含按干重计为至少50%、60%、70%、80%、90%、95%、99%或99.5%存在的糖。成分可以基本上由糖组成。例如,成分可以具有按干重计为小于0.5%、0.3%或0.1%的其他物质。
如本文其他地方所述,成分可包含寡糖混合物。成分可以包含至少两种寡糖。例如,成分可以包含三种寡糖。成分可以包含四种寡糖。成分可以包含五种寡糖。成分可以包含六种寡糖。成分可以包含七种寡糖。
在一些实施方案中,成分包含纤维寡糖,例如纤维寡糖与木寡糖的组合。可替选成分可包含纤维寡糖与甘露寡糖的组合。
成分可用于制备最终产品。还可以在掺入食品、化妆品或营养品之前或期间以一些物理或化学方式对成分进行处理。成分可以直接掺入产品中,或者成分可以掺入例如面团、蛋糕混合物、巧克力混合物或其他食品前体中;化妆品基础组合物中;或掺入营养品中,并例如进行蒸煮或以可引起化学修饰、质构变化、颜色变化或其他修饰的其他方式进行处理。
食品、化妆品或营养品可以由本文所述的成分生产。例如,在食品行业中,通过当前方法生产的糖制剂可以用作甜味剂、膨松剂、添加的膳食纤维或保湿剂。成分可用作糖替代品。成分可以掺入蛋糕、面包或其他烘焙食品中,或掺入巧克力或其他糖果中,诸如太妃糖、软糖、蛋白霜、果酱、果冻或焦糖;或掺入饮料中,例如,以提供良好的味道或颜色特性或增加膳食纤维含量。在某些情况下,成分可以例如作为分离的成分或通过直接利用酶反应混合物作为原料掺入动物饲料中。
在化妆品行业中,糖可以用作成分,因为它们可以改善质构和保湿,充当紫外线吸收分子,保持凝胶或乳霜结构和/或充当膨松剂。可以将本文描述的组合物掺入营养品组合物中,因为它们提供的膳食纤维可以促进消化健康、良好调节肠道菌群以及对健康的其他益处。在这种情况下,它们还可以用作益生菌饮料或其他益生元或益生菌制剂中的成分。
本文所述的组合物或成分可用于改变最终产品的一种或多种性质。这样的性质包括但不限于甜度、质构、口感、粘合性、上光性(glazing)、光滑度、湿润性、粘度、颜色、吸湿性、风味、膨松性、保水性、焦糖化、表面质构、结晶、结构性质和溶解性。
在一些情况下,与主要包含单糖和/或二糖的糖混合物所提供的同一性质相比,本文所述的组合物和/或成分可以为最终产品提供可比较的或更好的性质。对照组合物可以是通常在消耗品中使用的糖,例如单糖组合物,诸如葡萄糖、果糖等;二糖组合物,诸如蔗糖或人工糖组合物。对照组合物可以是食糖、玉米糖浆、高果糖玉米糖浆或任何其他合适的组合物。如本文所用,术语“可比较的”通常意指两种组合物可以具有多达100%、多达95%、多达90%、或多达80%的同一性。例如,可比较可以是指该组合物与对照组合物具有多达90%的同一性。
在一些情况下,本文所述的组合物可用作甜味剂组合物。甜味剂组合物可以单独使用或作为最终产品中的成分使用。与相同量的对照组合物相比,本文所述的组合物可提供大约相同的甜度水平或更高的甜度,其中所述对照组合物主要包含单糖和/或二糖。本文所述的组合物可用于代替对照组合物作为最终产品中的甜味剂。在一些情况下,组合物的甜度可以比相同量的对照组合物高5%、10%、15%、20%、30%、40%、50%、70%、80%、90%或100%。
与相同量的对照组合物相比,本文所述的组合物可以提供可比较的风味谱或更好的风味谱,其中所述对照组合物主要包含单糖和/或二糖。本文所述的组合物可用于代替对照组合物作为最终产品中的增味剂。在一些情况下,组合物的风味可以比相同量的对照组合物超出5%、10%、15%、20%、30%、40%、50%、70%、80%、90%或100%。
与相同量的对照组合物相比,本文所述的组合物可以提供可比较的质构谱或更好的质构谱,其中所述对照组合物主要包含单糖和/或二糖。本文所述的组合物可用于代替对照组合物作为最终产品中的质构增强剂。
与相同量的对照组合物相比,本文所述的组合物可以提供可比较的粘合谱或更好的粘合谱,其中所述对照组合物主要包含单糖和/或二糖。本文所述的组合物可用于代替对照组合物作为最终产品中的粘合增强剂。
与相同量的对照组合物相比,本文所述的组合物可以提供可比较的上光谱或更好的上光谱,其中所述对照组合物主要包含单糖和/或二糖。本文所述的组合物可用于代替对照组合物作为最终产品中的上光增强剂。
与相同量的对照组合物相比,本文所述的组合物可以提供可比较的湿度或更好的湿度,其中所述对照组合物主要包含单糖和/或二糖。本文所述的组合物可用于代替对照组合物以在最终产品中提供湿度。
与相同量的对照组合物相比,本文所述的组合物可以提供可比较的颜色谱或更好的颜色谱,其中所述对照组合物主要包含单糖和/或二糖。本文所述的组合物可用于代替对照组合物作为最终产品中的颜色增强剂。
与相同量的对照组合物相比,本文所述的组合物可以提供可比较的溶出度谱或更好的溶出度谱,其中所述对照组合物主要包含单糖和/或二糖。本文所述的组合物可用于代替对照组合物作为最终产品中的溶出度增强剂。在一些情况下,组合物的溶出度可以比相同量的对照组合物高5%、10%、15%、20%、30%、40%、50%、70%、80%、90%或100%。
与相同量的对照组合物相比,本文所述的组合物可以提供可比较的口感或更好的口感,其中所述对照组合物主要包含单糖和/或二糖。
与相同量的对照组合物相比,本文所述的组合物可以提供可比较的粘度或更好的粘度,其中所述对照组合物主要包含单糖和/或二糖。
与相同量的对照组合物相比,本文所述的组合物可以提供可比较的吸湿性或更好的吸湿性,其中所述对照组合物主要包含单糖和/或二糖。在一些情况下,组合物的吸湿性可以比相同量的对照组合物高5%、10%、15%、20%、30%、40%、50%、70%、80%、90%或100%。
与相同量的对照组合物相比,本文所述的组合物可以提供可比较的保水性或更好的保水性,其中所述对照组合物主要包含单糖和/或二糖。在一些情况下,组合物的保水性可以比相同量的对照组合物高5%、10%、15%、20%、30%、40%、50%、70%、80%、90%或100%。
与相同量的对照组合物相比,本文所述的组合物可以提供更低的卡路里组合物,其中所述对照组合物主要包含单糖和/或二糖。在一些情况下,组合物的卡路里数可以比相同量的对照组合物低5%、10%、15%、20%、30%、40%、50%、70%、80%、90%或100%。
与相同量的对照组合物相比,本文所述的组合物可以提供更低的血糖指数,其中所述对照组合物主要包含单糖和/或二糖。在一些情况下,组合物的血糖指数可以比相同量的对照组合物低5%、10%、15%、20%、30%、40%、50%、70%、80%、90%或100%。
与相同量的对照组合物相比,本文所述的组合物可以提供可比较的膨松性或更好的膨松性,其中所述对照组合物主要包含单糖和/或二糖。
与相同量的对照组合物相比,本文所述的组合物可以提供可比较的焦糖化或更好的焦糖化,其中所述对照组合物主要包含单糖和/或二糖。
与相同量的对照组合物相比,本文所述的组合物可以提供可比较的表面质构或更好的表面质构,其中所述对照组合物主要包含单糖和/或二糖。
与相同量的对照组合物相比,本文所述的组合物可以提供可比较的结晶化或更好的结晶化,其中所述对照组合物主要包含单糖和/或二糖。
与相同量的对照组合物相比,本文所述的组合物可以提供可比较的结构性质,其中所述对照组合物主要包含单糖和/或二糖。
与相同量的对照组合物相比,本文所述的组合物可以提供更少的余味,其中所述对照组合物主要包含单糖和/或二糖。
与单独使用的寡糖相比,不同的寡糖组合物可具有改善的溶出谱、吸湿性谱和味道谱。
本文所述的组合物或成分可用于增加诸如食品或营养品的最终产品的纤维含量。与相同量的对照组合物相比,组合物可以在最终产品中提供更高水平的纤维,其中所述对照组合物主要包含单糖和/或二糖。在一些情况下,组合物可以改善最终产品的纤维含量,而不会负面或基本负面影响任何其他性质,例如味道、甜度、口感、质构、粘合性或本文所述的任何其他性质。在一些情况下,组合物的纤维含量可以比相同量的对照组合物高5%、10%、15%、20%、30%、40%、50%、70%、80%、90%或100%。
成分可用于改变最终产品,诸如食品或营养品或化妆品的性质。为了改变最终产品的性质,最终产品可以另外包含多糖,例如纤维素多糖,诸如纤维素;或多糖衍生物,例如纤维素衍生物,诸如羧甲基纤维素;或多糖聚集体,例如木质纤维素生物质的一部分。在一些情况下,最终产品可以包含按干重计大于0%至40%的多糖、多糖衍生物或多糖聚集体,例如,按干重计大于1%至30%的多糖、多糖衍生物或多糖聚集体,例如按干重计大于5%至25%的多糖、多糖衍生物或多糖聚集体,例如按干重计大于10%至20%的多糖、多糖衍生物或多糖聚集体。
最终产品中包含多糖和寡糖混合物的组合物的浓度可为0.1%至40%w/w之间的任何值。最终产品中包含多糖和寡糖混合物的组合物的浓度可为约0.1%至约0.5%、约0.1%至约1%、约0.1%至约5%、约0.1%至约10%、约0.1%至约15%、约0.1%至约20%、约0.1%至约25%、约0.1%至约30%、约0.1%至约35%、约0.1%至约40%、约0.5%至约1%、约0.5%至约5%、约0.5%至约10%、约0.5%至约15%、约0.5%至约20%、约0.5%至约25%、约0.5%至约30%、约0.5%至约35%、约0.5%至约40%、约1%至约5%、约1%至约10%、约1%至约15%、约1%至约20%、约1%至约25%、约1%至约30%、约1%至约35%、约1%至约40%、约5%至约10%、约5%至约15%、约5%至约20%、约5%至约25%、约5%至约30%、约5%至约35%、约5%至约40%、约10%至约15%、约10%至约20%、约10%至约25%、约10%至约30%、约10%至约35%、约10%至约40%、约15%至约20%、约15%至约25%、约15%至约30%、约15%至约35%、约15%至约40%、约20%至约25%、约20%至约30%、约20%至约35%、约20%至约40%、约25%至约30%、约25%至约35%、约25%至约40%、约30%至约35%、约30%至约40%或约35%至约40%w/w。最终产品中包含多糖和寡糖混合物的组合物的浓度可为约0.1%、约0.5%、约1%、约5%、约10%、约15%、约20%、约25%、约30%、约35%或约40%w/w。最终产品中包含多糖和寡糖混合物的组合物的浓度可为至少0.1%、0.5%、1%、5%、10%、15%、20%、25%、30%或35%w/w。最终产品中包含多糖和寡糖混合物的组合物的浓度可为至多0.5%、1%、5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%或40%w/w。
在一些情况下,寡糖混合物(例如,纤维寡糖和木寡糖)可形成至少20%、30%、40%、50%、60%或70%w/w可食用组合物或成分。例如,50%w/w的纤维寡糖和木寡糖的组合可形成可食用组合物或成分。
在一些情况下,成分可包括玉米芯提取物(maize cob extract,MCE)。MCE可以是主要由阿拉伯木寡糖、木寡糖、纤维寡糖和纤维素构成的寡糖混合物。在某些情况下,寡糖可以是不可消化的或基本上不可消化的。阿拉伯木寡糖可以是由木糖主链通过被阿拉伯糖侧链取代的β-(1→4)-键连接的低聚物。阿拉伯木寡糖可以是不可消化的。阿拉伯木寡糖可以通过水解阿拉伯木聚糖(阿拉伯糖侧链取代的β-(1→4)-键合木糖单元的多糖)产生。此外,阿拉伯木寡糖的聚合度(DP)可为3至15。
在各种情况下,木寡糖可以是木糖主链通过β-(1→4)-键连接的低聚物。木寡糖可以是不可消化的。木寡糖可以通过水解阿拉伯木聚糖产生。此外,木寡糖的DP可为2至8。
在某些情况下,纤维寡糖可以是葡萄糖主链通过β-(1→4)-键连接的寡聚物。纤维寡糖可以是不可消化的。纤维寡糖可以通过纤维素(β-(1→4)-键合的葡萄糖单元的多糖)的水解产生。此外,纤维寡糖的DP可为2至4,其中大多数的DP为2。
IV.示例性实施方案
提取可溶性多糖用于随后与产生的寡糖结合的示例性方法
图8是示出了提取可溶性多糖用于随后与产生的寡糖组合以形成成分的方法的实施方案的简化流程图。
在所示方法中,在酶处理150之前提取或去除至少一部分可溶性多糖140可以确保保留或保存至少一部分可溶性多糖以与产生的寡糖结合144,以形成成分105。在一些其他方法(未示出)中,可溶性多糖可以被一种或多种酶消化,因为在酶处理之前不提取可溶性多糖。所示方法的成分105可以是甜味剂或糖替代品,其可以保持基本上可溶或完全可溶。因此,成分105可以作为糖浆状产品(例如,粘性液体)递送。在一些情况下,成分105可以是以下的替代品或部分替代品:糖浆食品中的玉米糖浆、高果糖玉米糖浆、枫糖浆、蜂蜜、蜜糖、金糖浆、糖蜜、葡萄糖浆、果葡糖浆、龙舌兰糖浆、枣糖浆、糙米糖浆、椰子糖浆、玉米糖浆或其他合适的液体甜味剂。
如所描绘的,生物质107(例如,玉米芯或任何其他合适的生物质)可以进行物理预处理110(例如,通过切削或物理预处理生物质的任何其他合适的方法)。然后,物理处理的生物质112可以经历或经受热化学预处理130(例如,可以在1%w/v NaOH中加热15%w/v切削的玉米芯1小时)。在一些实施方案中,热化学预处理130之后可以是中和步骤(未示出),然后从物理预处理的生物质112中提取可溶性化合物或材料140。可溶性化合物或材料140的提取可以包括去除物理预处理的生物质112的液体部分(例如,上清液)。液体部分可以包括来自物理预处理的生物质112的可溶性化合物146。可溶性化合物146可以包括可溶性多糖。在某些实施方案中,然后可以从热化学预处理的生物质112中提取或去除15%的液体部分(包括可溶性化合物或材料146)。然后,包括可溶性化合物或材料146(例如,可溶性多糖)的提取部分可以经历一个或多个纯化步骤142b(例如,超滤)以富集可溶性多糖147。
此外,在步骤140中未提取的液体部分可以包括可溶性化合物或材料146和不溶性化合物或材料148。例如,在如上所述提取15%的液体部分的情况下,物理预处理的生物质112的剩余部分(包括85%的液体部分)可以包括可溶性多糖和不溶性多糖。然后,包括可溶性化合物或材料146和不溶性化合物或材料148的溶液可以经历或经受酶处理150,如本文所公开的。例如,可以将一种或多种多糖切割酶添加到包括可溶性化合物或材料146和不溶性化合物或材料148的溶液中至0.5%w/v,并在50℃温育24小时。然后,可以处理(例如,过滤)152酶处理的生物质151,以去除至少一部分未消化的生物质。在某些情况下,去除的未消化的生物质可以被处置或丢弃。然后,可以使经消化的生物质141经历或经受纯化142a(例如,离子交换色谱法、纳滤、微滤、超滤或任何其他合适的纯化方法),以富集本文所述的寡糖154。提取的、分离的和/或纯化的寡糖154和提取的、分离的和/或纯化的可溶性多糖147可以结合、混合和/或喷雾干燥以形成成分105。
预处理生物质以去除单糖和/或二糖的示例性方法
图9是示出在酶处理之前预处理生物质以去除单糖和/或二糖的方法的实施方案的简化流程图。
图9的实施方案可以包括某方面类似于图8的实施方案的组分或步骤的组分或步骤。例如,图9的实施方案包括可以类似于图8的物理预处理210的物理预处理步骤110。应理解,所示实施方案可以具有类似的特征。因此,相似的特征用相似的附图标记表示,其中添加前导数字以将每个附图标记增加100。例如,物理预处理在图8中表示为“110”;类似的物理预处理在图9中表示为“210”。因此,上述关于类似识别特征的相关公开内容在下文中可能不再重复。此外,图9所示的方法和相关组分或步骤的具体特征在附图中可能未示出或未通过附图标记标识,或未在随后的书面描述中具体讨论。然而,所述特征显然可以与在其他实施方案中描绘和/或关于所述实施方案描述的特征相同或基本相同。因此,这些特征的相关描述同样适用于图9的方法和相关组分或步骤的特征。关于图8所示的方法所描述的特征的任何适当组合及其变体可以用于图9的方法和组分或步骤,反之亦然。该公开模式同样适用于随后的附图中描绘和/或在下文中描述的其他实施方案。
如图所示,物理预处理的生物质212的温和预处理220(例如,本文提供的洗涤或温育循环)可以包括去除224可溶性化合物246。在某些情况下,可溶性化合物246可以包括单糖和/或二糖。然后,可以弃去和/或丢弃除去的可溶性单糖和/或二糖。因此,可以进行或执行温和预处理220以从生物质207中去除可溶性单糖和/或二糖。
可以对生物质207进行物理预处理210(例如,切削),然后可以使物理预处理的生物质212经历或经受温和预处理220,例如洗涤或温育(例如,在25℃的水中30分钟)。然后,可以从包括温和预处理的生物质226的溶液中去除可溶性糖246(例如,可溶性单糖和/或二糖)。然后,可以使温和预处理的生物质226经历或经受强预处理230。在某些情况下,强预处理230可以是热化学预处理。例如,温和预处理的生物质226可以在1%w/v NaOH中在100℃下处理60分钟。在一些实施方案中,在酶处理250之前,强预处理230之后可以是中和步骤(未示出)。然后,如本文所讨论的,可以用酶250处理强预处理的生物质232。此外,然后可以对酶处理的生物质251进行下游加工260以产生成分205。
提取可溶性多糖以与寡糖组合的其他示例性实施方案
在一些情况下,本公开内容涉及处理植物生物质材料以生产食品、化妆品或营养保健品成分的新方法。
含糖食品和饮料是全世界文化和生活习惯的重要组成部分,但是它们所含的糖与人们的肥胖、糖尿病、牙齿健康不良和破坏行为有关。由于这些原因,消费者的偏好已经从含糖食品转移出来,并且政府越来越多地实施法规以鼓励少糖的食用。
因此,几十年来,业界一直在寻找合适的低热量甜味剂来替代食物和饮料中的糖。不幸的是,许多糖替代品都是由非天然资源生产,并且常常伴随甜味略带有苦味或其他令人讨厌的味道,这两种味道无法吸引消费者。此外,虽然许多甜味剂能够模拟食物和饮料中糖的甜味,但很少有甜味剂能够模拟糖在食物和饮料中的宽泛作用,例如增加体积、调节质地、提供结构、充当防腐剂,以及通过焦糖化和美拉德反应调节颜色和风味。
膳食纤维是积极饮食的重要组成部分,有助于维持消化系统健康和肠道菌群的良好调节。这种纤维包含不同链长和类型的糖。除了天然存在于各种各样的食物中,纤维还可以单独生产,并在制造过程中到添加到其他食物中。
生物质是糖类的良好来源,可用于替代糖并向食品中添加纤维。然而,仍然需要优化从生物质中获得这些糖并将这些糖加工成可用作食品、化妆品或营养品成分的组合物的方法。
首先,糖通常需要通过受控分解生产。成分中不同数量的不同大小的糖可影响其营养价值,以及诸如吸湿性等其他特性,这反过来影响诸如使用该成分制成的产品的质地的特性。还期望成分包括多糖,因为多糖可以提高胃肠道耐受性。然而,由于一些特别理想的多糖在先前已知方法的酶促反应期间分解的速度,这些理想的多糖难以分离然后掺入成分中。
此外,需要光滑质地的食品(诸如糖果、巧克力和酸奶)通常要求所述成分可溶以实现光滑质地。包含不溶性聚合物材料的成分可产生颗粒状质地。然而,由于某些多糖的不溶性,可能难以制备包含完全可溶的多糖的组合物,特别是在一锅法中由单片生物质制备。通常,可溶性多糖比不溶性多糖分解得更快,因此在将植物生物质暴露于酶之后,如先前已知的方法,可溶性多糖被完全分解并且仅留下不溶性多糖。
令人惊讶的是,本文已经确定了可以允许分离多糖并将其掺入包含寡糖的可溶性食品、化妆品或营养品成分中的方法,从而保持增加该成分的胃肠道耐受性的益处以及允许其用于光滑质地的食品中。多糖可以从相同的植物生物质中分离出,而其他所需的糖可以通过提供高效和流水线生产方法获得。
因此,在本公开内容的第一方面,提供了一种用于生产食品、化妆品或营养品成分的方法,该方法包括以下步骤:
a)提供包含一种或多种可溶性多糖和一种或多种不溶性多糖的植物生物质;
b)处理所述植物生物质以溶解所述一种或多种可溶性多糖;
c)去除一部分溶解的一种或多种可溶性多糖;
d)使剩余的植物生物质与一种或多种酶反应以形成一种或多种寡糖;e)去除所述一种或多种寡糖;和
f)将来自步骤(c)的溶解的一种或多种可溶性多糖的一部分与来自步骤(e)的一种或多种寡糖结合以形成成分。
因此,还提供了可通过本公开内容的方法获得的食品、化妆品或营养品成分。
在本公开内容的另一个方面,提供了一种食品、化妆品或营养品液体成分,该成分包含选自以下的至少一种寡糖:
i)聚合度为2至6的纤维寡糖;
ii)聚合度为2至12的木寡糖;
iii)聚合度为2至12的甘露寡糖;
iv)聚合度为2至5的混合键葡聚糖寡糖;
v)聚合度为4至12的木葡聚糖寡糖;和
vi)聚合度为2至12的壳寡糖;
和选自下列的至少一种多糖:
i)木聚糖;
ii)甘露聚糖;
iii)纤维素衍生物;
iv)混合键葡聚糖;
v)木葡聚糖;和
vi)壳聚糖;
其中所述液体成分包含至少20%干重的至少一种寡糖和至少2%干重的至少一种多糖,并且其中所述液体成分的粘度为5至100,000cps。
以本文提供的方式制备食品、化妆品或营养品成分可以通过掺入来自相同生物质来源的低聚和聚合材料以制备可溶性成分来允许生物质的有效使用。此外,这些方法可以允许纯化、衍生化或其他修饰,以及控制低聚和多聚的比例,这可以改善成分的功能特性、营养特性和耐受性。
任何包含合适多糖的物质都可以是植物生物质。由于食品、化妆品和营养品工业使用多种寡糖,因此适用于该方法的多糖没有特别限制。适用于生产本公开内容的寡糖谱的植物生物质可以包括例如纤维素、木质纤维素、甲壳素、壳聚糖、木聚糖(诸如葡糖醛酸木聚糖、阿拉伯木聚糖和葡糖醛酸阿拉伯木聚糖)、木葡聚糖、混合键葡聚糖和/或甘露聚糖(诸如,葡甘聚糖、半乳甘露聚糖或半乳葡甘露聚糖),然而,设想了可以适当地作用的任何植物生物质。植物生物质包含的一种或多种可溶性多糖可包括以下任何一种:甘露聚糖、混合键葡聚糖、木质纤维素、半纤维素、某些纤维素衍生物(诸如,乙酸纤维素、羟乙基纤维素和羟甲基纤维素),以及壳聚糖。在一些实施方案中,植物生物质包含半纤维素。在某些实施方案中,半纤维素包含木聚糖和/或甘露聚糖。
因此,植物生物质可以是谷物、谷壳、豆荚、种皮和/或其他种子材料;海藻;玉米秸秆、稻草、甘蔗渣、芒草、高粱渣、柳枝稷、竹子和/或其他单子叶组织;水葫芦、叶组织、根和/或其他植物物质;和/或合适的植物生物质的任何组合。在一些情况下,植物生物质包括以下或适当地由以下构成:甘蔗生物质(诸如甘蔗渣)、玉米生物质(诸如玉米芯或玉米秸秆)、小麦生物质(诸如麦秸或麦麸)、硬木或软木。在某些情况下,植物生物质包括玉米芯、甘蔗渣、麦秸或稻草。
在各种情况下,在步骤(b)中,“处理”是植物生物质的热化学处理。如本文所用,“热化学”通常指将化学物质中的植物生物质加热至室温以上(室温可为约20℃至22℃),诸如在包含水、碱或离子溶剂的溶液中加热。热化学步骤可以物理和化学修饰植物生物质的化学成分。例如,来自水或碱的游离氢氧根离子可以断裂糖之间的氢键,从而使某些类型的糖(例如,半纤维素)溶解,并且可以更好地使后续步骤中的酶更容易分解糖。这些断裂的氢键可能位于同一糖链的单体之间,这有助于链的三级结构。断裂的氢键也可能位于不同糖链的单体之间,这有助于多于一条链的四级结构。随后,该处理可以产生一种或多种多糖可溶(即,特别易于断裂氢氧根离子的多糖,尤其是例如半纤维素)以溶出到所用的化学物质中。一种或多种不溶性多糖(诸如纤维素)不溶出于所述化学物质。
处理步骤(b)的加热可以在一定温度范围内,适当地为30℃至180℃、50℃至150℃或70℃至120℃。更高的温度可以有助于可溶性多糖更快地溶出,然而,过高的温度可能更难以以高效和成本有效的方式实现,并且可以化学改性生物质组分,包括糖(例如,以不希望的方式)。
加热可以在一定的时间尺度范围内进行,特别是大量的生物质可以暴露于加热更长的时间段,这可以相应地进行调节。例如,植物生物质的加热可以为1分钟至72小时、10分钟至24小时、20分钟至12小时或25分钟至8小时。
在一些情况下,热化学处理可包括在水中加热植物生物质,即在约pH 7的中性pH下。
在某些情况下,热化学处理可包括在pH为8至14、9至14或10至14的碱性溶液中加热植物生物质。该溶液可包含选自以下的碱的任一种、或适当地由以下碱的任一种构成:氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸钙、氢氧化钙、硫酸铵、氢氧化铵和氨水。在各种情况下,碱可以是氢氧化钠。还设想了所列碱的组合。
还设想了多个不同的连续热化学处理步骤。例如,可以有两个连续的热化学处理,可以有三个连续的热化学处理,或可以有四个或更多个连续的热化学处理。在一些情况下,生物质可以在中性水溶液中进行热化学处理,然后在碱性水溶液中进行热化学处理。
在处理步骤之后,步骤(c)可以包括去除一部分溶出的一种或多种可溶性多糖。该步骤的目的可以是从植物生物质中分离和去除可溶性多糖,使它们不会被分解并从而在随后的酶促反应中丢失。这可以在后续步骤中形成成分时能够使用这些多糖。取决于最终成分中所需的量,可以去除所有溶出的多糖或溶出的多糖的一部分。可溶性多糖可以使用简单的步骤去除,例如过滤其中溶出有可溶性多糖的化学物质。
步骤d)包括使剩余的植物生物质(其可以是溶液和/或悬浮液的形式)与一种或多种酶反应以形成一种或多种寡糖。存在于剩余的植物生物质溶液和/或悬浮液中的可溶性和不溶性多糖可被一种或多种酶部分或完全切割成寡糖(例如有用的寡糖),可能留下部分切割或未切割的多糖,该多糖可包括纤维素、木聚糖(诸如,葡糖醛酸木聚糖、阿拉伯木聚糖或葡糖醛酸阿拉伯木聚糖)、甘露聚糖(诸如葡甘聚糖、半乳甘露聚糖或半乳葡甘露聚糖)、混合键葡聚糖、木葡聚糖、甲壳素、壳聚糖或木质纤维素。
酶反应可以在合适的反应容器中在溶液和/或悬浮液中进行。酶反应可以在适于酶和植物生物质的特定组合的温度或温度方案下进行,可以允许反应进行一段时间,直到产物达到所需浓度,或直到已满足一些其他要求。
为了确保酶和植物生物质之间的最佳接触,可以连续地或间断地搅动反应混合物。搅拌可以采用以下形式:使整个反应容器有节奏地运动、鼓风机或其他搅拌装置、气泡喷射或任何其他搅拌方法。
酶促反应可以是微生物发酵。温度和反应时间可以适于所用微生物的生长。微生物有机体可以被基因改变以产生适于产生本公开内容的寡糖的酶。微生物可以是例如细菌(诸如大肠杆菌)、或真菌(诸如酿酒酵母、黑曲霉或里氏木霉)。
在本公开内容中进一步体现的是一种表达载体,该表达载体适用于修饰主题微生物,使该微生物产生本公开内容的酶或酶混合物。如果需要,表达载体可以是质粒或能够诱导酶产生的任何其他核酸,表达载体可以包含一种或多种以下调节序列以控制外源酶的表达:热休克基因的调控序列、毒性基因的调控序列和孢子形成基因的调控序列。
酶促反应可以在适于所用酶和底物的温度或温度方案下进行。例如,酶促反应可以在约10℃至约100℃、约20℃至约70℃或约30℃至约60℃范围内的恒定温度下进行。如果酶促反应采取微生物发酵的形式,则温度可能适于此,例如,酶促反应可以包括大肠杆菌的生长和/或温度可以是恒定的并且为约37℃。
溶液或悬浮液的pH值可影响酶的活性。控制pH可以确保酶促反应以合适的速率进行。本公开内容的酶促反应可以在约2至约10、约3至约8或约4至约6范围内的pH下进行。
可以允许酶促反应持续一段时间,然后淬灭,并且分离或以其他方式收集产物。该时间段可为约1分钟至约6天、约0.5天至约5天、或约16小时至约96小时。可替代地,可以允许该反应进行直到不再发生催化。
可以允许酶促反应继续进行,直到剩余的未消化的含多糖的植物生物质少于75%、少于70%、少于65%、少于55%或少于50%。这可以通过还原末端测定法(诸如蒽酮测定法)和/或色谱法(例如薄层色谱法和高效阴离子交换色谱法)来监测或检查。该反应可以进行直到所有多糖都转化为寡糖。
有许多酶适用于本方法的酶促反应。例如,“裂解多糖单加氧酶”和“LPMO”,该裂解多糖单加氧酶和LPMO是指能够使用含铜部分并使用氧源(诸如双氧分子、过氧化物或任何其他氧源);以及合适的还原剂氧化切割多糖的一类酶。因此,当使用LPMO时,酶促反应可在有氧条件下进行。合适的还原剂没有特别限制,但示例包括抗坏血酸、没食子酸、半胱氨酸、NADH、NADPH、焦性没食子酸、二硫苏糖醇、氰基硼氢化物、硼氢化物、光合色素、木质素、木质醇以及纤维二糖和纤维二糖脱氢酶的组合。可以使用多种光合色素。在一些实施方案中,可以使用类囊体和纯化级分或叶绿酸,并且可以提供光。LPMO可以选自以下家族:AA9、AA10、AA11、AA13、AA14和AA15。在各种情况下,LPMO可以是PaLPMO9E(SEQ ID NO:1),其是一种最初从子囊菌真菌(鹅柄孢壳菌(Podospora anserina))中分离出来的AA9 LPMO,或LPMO可以是来自里氏木霉的AA9LPMO(SEQ ID NO:23)。
有氧条件可以包括添加氧气,其可以通过用含氧气体(诸如空气)向底物混合物曝气来提供。可以通过各种系统(诸如空气注射器、曝气筛板(aeration frit)、膜系统或内循环气升式反应器)将含氧气泡引入水性底物混合物中来进行曝气。酶促反应中分子氧的浓度可以为约4mg/L至约14mg/L。
另一种可以用于该方法的酶为“纤维素酶”,其对纤维素具有水解活性,例如,内切-1,4-β-葡聚糖酶、纤维二糖水解酶和/或β-葡萄糖苷酶活性。所述酶能够切割一种或多种形式的纤维素(包括在植物生物质中发现的纤维素)中的糖苷键。在此过程中,纤维素产生包括葡萄糖和纤维寡糖的产品。在某些情况下,β-葡聚糖酶可包括选自GH5、GH7和GH12酶的酶,诸如源自黑曲霉(SEQ ID NO:12、13和14)和里氏木霉(SEQ ID NO:24和25)的那些。
另一种酶为“纤维二糖水解酶”,其对纤维素具有水解活性并且主要产生纤维二糖作为产物。纤维二糖是一种二糖,并且是一种纤维寡糖。此类酶能够切割一种或多种形式的纤维素(包括在植物生物质中发现的纤维素)中的糖苷键。在各种情况下,纤维二糖水解酶可以来自于GH6和GH7家族、源自里氏木霉的Cel6A或Cel7A酶(分别SEQ ID NO:10和11)。
另一种酶是“β-葡萄糖苷酶”,其对纤维素具有水解活性,并且主要产生葡萄糖作为产物。此类酶能够切割一种或多种形式的纤维素(包括在植物生物质中发现的纤维素)中的糖苷键。在一些实施方案中,β-葡糖苷酶可以包括GH3β-葡糖苷酶,诸如源自里氏木霉的一种酶(SEQ ID NO:22)。
另一类酶是地衣聚糖酶,其可以选自GH5、GH7、GH8、GH9、GH12、GH16、GH17或GH26家族。在一些实施方案中,地衣聚糖酶可以为GH16酶、例如源自枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)的GH16酶(SEQ ID NO:2)。该酶能够作用于例如混合键葡聚糖(其是包含β-1,3键和β-1,4键的混合物的葡聚糖),并且可以在β-1,4糖苷键处切割它们。在其中地衣聚糖酶作用于混合键葡聚糖的情况中,所产生的β-葡聚糖可主要落在约3至约7个残基的大小范围内,因此它们特别用于食品、化妆品和营养品行业。混合键葡聚糖在草和马尾草家族的成员中含量丰富,因此,草类生物质(诸如稻草)具有高水平的混合键葡聚糖,并且可被地衣聚糖酶有效地起作用。
另一类酶是木聚糖酶,其作用于例如包含木聚糖主链的植物生物质。木聚糖酶可以是例如葡糖醛酸木聚糖酶、阿拉伯木聚糖酶或葡糖醛酸阿拉伯木聚糖酶。酶可以对多种具有木聚糖主链的聚合物有活性,诸如葡糖醛酸木聚糖、阿拉伯木聚糖和葡糖醛酸阿拉伯木聚糖。这些聚合物在各种植物生物质中含量丰富,例如硬木和软木都可以包含合适的多糖,其中硬木通常包含葡糖醛酸木聚糖并且软木通常包含阿拉伯葡糖醛酸木聚糖。在一些情况下,木聚糖酶可包括源自热纤梭菌(SEQ ID NO:3)和层出节水霉(SEQ ID NO:4)的GH5木聚糖酶,以及源自菊欧文氏菌(SEQ ID NO:5)、枯草芽孢杆菌(SEQ ID NO:6)、卵形拟杆菌(SEQ ID NO:7)和里氏木霉(SEQ ID NO:15)的GH30木聚糖酶。
本公开内容中有用的其他酶可以包括木葡聚糖酶和木葡聚糖内切葡聚糖酶(XEG),其由多种生物体(包括植物致病性微生物)产生的。木葡聚糖酶和木葡聚糖内切葡聚糖酶能够作用于木葡聚糖,其是高等植物的初级细胞壁中含量丰富的半纤维素β-1,4葡聚糖链,其被木糖修饰,一些木糖残基进一步被其他残基(如半乳糖)修饰。当合适的木葡聚糖酶或XEG作用于木葡聚糖时,产物包含具有可在食品、化妆品和营养品业界中使用的长度主链的木葡聚糖寡糖。在一些情况下,木葡聚糖酶可包括源自卵形拟杆菌的GH5木葡聚糖酶(SEQ ID NO:8)和源自里氏木霉的GH74木葡聚糖酶。
由于任何给定的天然植物生物质都可能包含不同多糖的混合物,因此有时不同酶的混合物可能是有益的。这种混合物可以包含一种或多种任何其他酶。例如,这种混合物可包含LPMO和内切葡聚糖酶、木聚糖酶和地衣聚糖酶、纤维二糖水解酶和甘露聚糖酶或内切葡聚糖酶和纤维二糖水解酶,其中酶配偶体以例如1:100至100:1的摩尔比存在。
在某些情况下,一种或多种酶可以是不同酶的混合物,例如粗酶制剂或半粗酶制剂。如本文所用,术语“粗酶制剂”通常指从微生物发酵物中提取的可溶性制剂,其在提取后经受最少的加工,例如通常制剂可以仅经受过滤以去除不溶性成分。如本文所用,术语“半粗酶制剂”通常指从微生物发酵物中提取的可溶性制剂,在提取后经受一些处理,例如制剂可以经受过滤以去除不溶性成分,增加酶浓度,和/或纳滤以去除小分子量化合物。
在某些情况下,粗酶制剂或半粗酶制剂可以来自细菌或真菌。在一些实施方案中,粗酶制剂或半粗酶制剂可以来自真菌,诸如丝状纤维素分解真菌,诸如来自木霉属或曲霉属物种。在某些实施方案中,酶可以是来自里氏霉木菌株的粗酶制剂或半粗酶制剂。
在步骤(e)中,除去在步骤(d)中形成的一种或多种寡糖,这可以以多种方式进行。其可以基于溶解度进行分离,使得仅提取可溶性糖的组合物用于进一步加工,和/或通过色谱分离以产生具有寡糖链长度的较窄带的组合物。分离可以例如基于沉淀、尺寸排阻色谱、离子交换色谱、过滤、超滤、微滤或纳滤。在进行基于溶解度的分离的情况下,存在于分离的组合物中的糖谱可取决于最初的酶促反应,因为不同的糖的溶解度随着长度以不同的速率降低。
在本公开内容的范围内还设想的是,进一步处理全部或部分的所去除的一种或多种寡糖以产生进一步的产物,然后将它们与一种或多种溶解的多糖结合以形成成分。该进一步处理可包括任何化学、物理或酶促步骤,例如还原,例如合适地方进行的还原性胺化;氧化、焦糖化、用席夫碱或通过美拉德反应或通过这些步骤的任何组合进行改性,并且可以提供具有为所需目的而改进性能的不同产品。例如,可以修改焦糖化特性、热值、风味和颜色。还可使寡糖例如通过沉淀、尺寸排阻色谱、离子交换色谱、过滤、超滤、微滤或纳滤进行纯化。
在本公开内容的范围内还设想的是,进一步处理全部或部分溶解的一种或多种可溶性多糖以产生具有改进性质的产品,然后与一种或多种去除的寡糖结合以形成成分。该进一步处理可以包括任何化学、物理或酶促步骤,例如烷基化或酸处理。多糖也可以例如通过沉淀、尺寸排阻色谱、离子交换色谱、过滤、超滤、微滤或纳滤进行纯化。
在某些情况下,在寡糖和多糖的修饰和/或纯化之后,将寡糖和多糖的全部或部分结合,如在步骤(f)中,多糖:寡糖的比例可为1:100至1:1、1:10至1:1、1:90至1:2、1:80至1:3、1:70至1:4或1:60至1:5。具体比例可取决于最终成分的所需特性以及已应用于糖的修饰和纯化。在某些实施方案中,不需要重组所有去除的寡糖和多糖。
在步骤(f)中,可以多种方式进行结合,例如,通过混合包含全部或部分一种或多种可溶性多糖的溶液和包含全部或部分可溶性多糖的溶液和/或悬浮液,其可以进一步喷雾干燥,冻干或以其他方式浓缩。可溶性多糖和去除的寡糖也可以通过使包含(在步骤(e)中将其去除之后)通过喷雾干燥、冻干或以某种其他方式浓缩产生的一种或多种去除的寡糖的全部或部分的干燥形式、与包含(在步骤(c)中将其去除之后)通过喷雾干燥、冻干或以某种其他方式缩合产生的一种或多种去除的多糖的全部或部分的干燥形式混合。可替代地,(i)一种或多种可溶性多糖或(ii)去除的寡糖中的一种可以是干燥形式,而另一种在它们结合时为溶液形式。
当成分是干燥形式时,所述方法还可以包括将成分混合并溶出在液体中以形成液体成分的步骤(g)。在各种情况下,液体可以是水溶液,例如水。
本公开内容的第二方面在步骤(f)中形成的成分和在步骤(g)中形成的液体成分可以包含各种寡糖,并且取决于所需的性质包含不同的量。在一些情况下,成分和液体成分可以包含至少20%干重或至少30%干重的聚合度为2至6的纤维寡糖,所述成分可以包含至少20%干重或至少30%干重的聚合度为2至12的木寡糖,所述成分可以包含至少20%干重或至少30%干重的聚合度为2至5的混合键葡聚糖寡糖,所述成分可以包含至少20%干重或至少30%干重的聚合度为2至12的甘露寡糖,所述成分可以包含至少20%干重或至少30%干重的聚合度为4至12的木葡聚糖寡糖,和/或所述成分可以包含至少20%干重或至少30%干重的聚合度为2至12的壳寡糖。在一些情况下,该成分可以包含最多100%干重的上述寡糖和本文所述的多糖,因此其中寡糖以至少20%干重存在的上述实施方案不包含五种或六种类型的寡糖。
成分和液体成分可以包含至少50%、60%、70%、80%、90%、95%、99%或99.5%干重存在的糖。成分和液体成分可以基本上由糖构成。例如,该成分可具有小于0.5%干重或小于0.3%干重、例如0.1%干重的其他物质。
在某些情况下,液体成分的粘度可以为5至100,000cps、10至80,000cps、20至60,000cps、30至40,000cps、40至20,000cps或50至10,000cps。当液体成分将包含在饮料中时,可能需要低糖浆粘度,诸如约20至300cps、50至200cps或100至150cps。在诸如巧克力制造等应用中可能需要更高的粘度值,因此当液体成分需要在糖浆中时,其粘度可为约8,000至100,000、约10,000至50,000cps或约15,000至25,000cps。粘度值与使用Brookfield HDBVE旋转粘度计、使用标准测试程序(其中在高型烧杯中取400mL样品以确保不发生容器效应)进行的测试一致。该仪器按照制造商关于范围的说明进行操作(使用主轴代码61的旋转粘度计,主轴速度100rpm,在22℃下)。
在一些情况下,液体成分的流速可为100至350秒、150至300秒或200至250秒。如本文所用,“流速”通常指每单位时间通过的流体体积。除非另有说明,否则本文中规定的流速值通过以下步骤测定:在室温下在重力作用下测量来自填充有20mL测试液体的垂直立式注射器(BD Plastipak 300613)的5mL液体成分的流速的计时。
在各种情况下,液体成分的寡糖浓度可为1至200%w/v、10至150%w/v、20至140%w/v、30至130%w/v、40至120%w/v、50至115%w/v或60至110%w/v。
在一些情况下,液体成分的多糖浓度可为0.1至50%w/v、0.2至40%w/v、0.3至30%w/v、0.5至20%w/v或1至20%w/v。
在某些情况下,液体成分的寡糖和多糖的总浓度可以为1至200%w/v、10至160%w/v、20至150%w/v、30至140%w/v、40至130%w/v、50至120%w/v或60至110%w/v。在各种情况下,液体中寡糖和多糖的浓度越高,液体可变得越稠和越粘。液体成分可以是均匀溶液。
在另一个方面,成分和液体成分可以包含至少两种寡糖。每种寡糖的量可以根据所得食品、化妆品或营养品的所需性质变化。两种寡糖可以以1:9至9:1或1:2至2:1的比例存在。此外,成分和液体成分可以包含三种寡糖,它们可以包含四种寡糖,它们可以包含五种寡糖,或它们可以包含六种寡糖。
成分和液体成分可以包含纤维寡糖,例如纤维寡糖与木寡糖的组合。可替代地,成分和液体成分可以包含纤维寡糖与甘露寡糖的组合。
成分中的一种或多种可溶性多糖可特别溶于水或碱。例如,本公开内容中使用的可溶性多糖可以包括半纤维素,诸如木聚糖、甘露聚糖、混合键葡聚糖和某些纤维素衍生物(诸如乙酸纤维素、羟乙基纤维素和羟甲基纤维素)以及壳聚糖。在一些实施方案中,一种或多种可溶性多糖可以包含半纤维素。在某些实施方案中,半纤维素可以包含木聚糖和/或甘露聚糖。
在一些情况下,成分和液体成分可以包含至少2%干重或至少3%干重的木聚糖。在各种情况下,成分和液体成分可以包含至少2%干重或至少3%干重的甘露聚糖。在某些情况下,成分和液体成分可以包含至少2%干重或至少3%干重的纤维素衍生物。在一些情况下,成分和液体成分可以包含至少2%干重或至少3%干重的混合键葡聚糖。在各种情况下,成分和液体成分可以包含至少2%干重或至少3%干重的木葡聚糖。在某些情况下,成分和液体成分可以包含至少2%干重或至少3%干重的壳聚糖。
在某些情况下,成分和液体成分可以包含2至40%干重的一种或多种可溶性多糖(其中包括多糖衍生物)、3至30%干重的一种或多种可溶性多糖、5至25%干重的一种或多种可溶性多糖或8至20%干重的一种或多种可溶性多糖。
在一些情况下,成分和液体成分的多糖:寡糖的比例为1:100至1:1、1:10至1:1、1:90至1:2、1:80至1:3、1:70至1:4或1:60至1:5。
所生产的成分和液体成分可用于常规使用的寡糖、糖、蓬松甜味剂、低强度甜味剂或其他相关食品成分的应用。例如,作为甜味剂、蓬松剂、添加膳食纤维或保湿剂。特别值得注意的是在食品中使用还原蔗糖。它可以掺入蛋糕、面包或其他烘焙食品;巧克力或其他糖果,诸如太妃糖、软糖、蛋白霜、果酱、果冻或焦糖;或掺入饮料,例如以提供良好的味道或颜色特征或增加膳食纤维含量。或者,该成分可以例如作为分离成分或通过直接利用酶促反应混合物作为原材料而掺入动物饲料中。
如本文所述的组合物或成分可用于改变最终产品的一种或多种性质。此类特性包括但不限于甜度、质构、口感、粘合性、上光性、光滑度、湿润度、粘度、颜色、吸湿性、风味、蓬松性、保水性、焦糖化、表面质构、结晶、结构特性、降低卡路里、降低升糖指数、降低血糖负荷、增加纤维、降低糖分和溶解性。这些可为对目前使用不同类型的糖、糖替代物和/或其他此类化合物的可能的改进。
在化妆品行业,该成分可以改善质构和保湿性、充当紫外线吸收分子、保持凝胶或乳霜结构,和/或充当蓬松剂。此外,该成分和液体成分可用于营养组合物中,因为已证明它们提供的膳食纤维可以促进消化健康、良好调节肠道菌群和对健康的其他益处。在这种情况下,本文提供的成分还可用作益生菌饮料或其他益生元或益生菌制剂中的成分。
参考以下编号的实施方案进一步补充详细描述。1)一种用于生产食品、化妆品或营养品成分的方法,所述食品、化妆品或营养品成分包含一种或多种寡糖和一种或多种可溶性多糖,所述方法包括以下步骤:(a)提供包含一种或多种可溶性多糖和一种或多种不溶性多糖的植物生物质;(b)处理所述植物生物质以溶解所述一种或多种可溶性多糖;(c)去除一部分溶解的一种或多种可溶性多糖;(d)使剩余的植物生物质与一种或多种酶反应以形成一种或多种寡糖;(e)去除所述一种或多种寡糖;和(f)将来自步骤(c)的溶解的一种或多种可溶性多糖的一部分与来自步骤(e)的一种或多种寡糖结合以形成成分。2)根据编号实施方案1所述的方法,其中步骤(b)中的处理为热化学处理。3)根据编号实施方案2所述的方法,其中所述热化学处理为热水处理或热碱处理。4)根据编号实施方案3所述的方法,其中碱处理使用pH为10至14的碱。5)根据编号实施方案3或4所述的方法,其中碱处理使用氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸钙、氢氧化钙、硫酸铵、氢氧化铵和氨水。6)根据任何前述编号实施方案所述的方法,其中步骤(b)中的处理在30℃至180℃的温度下进行。7)根据任何前述编号实施方案所述的方法,其中步骤(b)中的处理进行10分钟至24小时。8)根据任何前述编号实施方案所述的方法,其中在去除一种或多种寡糖后,所述一种或多种寡糖和/或溶解的一种或多种可溶性多糖进行化学、物理或酶促处理,例如还原、氧化、焦糖化或美拉德反应。9)根据任何前述编号实施方案所述的方法,其中所述溶解的一种或多种可溶性多糖和/或所述一种或多种寡糖进行干燥,然后在步骤(f)中结合在一起。10)根据编号实施方案9所述的方法,其中所述方法进一步包括以下步骤:(g)将所述成分混合并溶解在液体中以形成液体成分,其中所述液体成分的粘度为5至100,000cps。11)根据编号实施方案的方法10,其中液体成分中的寡糖和多糖的浓度为1至200%w/v。12)根据任何前述编号实施方案所述的方法,其中所述一种或多种可溶性多糖包含选自以下的至少一种:甘露聚糖、混合键葡聚糖、木质纤维素、半纤维素,某些纤维素衍生物(例如乙酸纤维素、羟乙基纤维素和羟甲基纤维素)以及壳聚糖。13)根据编号实施方案12所述的方法,其中所述半纤维素包含木聚糖和/或甘露聚糖。14)根据任何前述编号实施方案所述的方法,其中所述植物生物质包含甘蔗生物质、玉米生物质、小麦生物质、硬木或软木。15)一种通过任何前述编号实施方案所述的方法获得的食品、化妆品或营养品成分。16)一种食品、化妆品或营养液体成分,其包含选自以下的至少一种寡糖:i)聚合度为2至6的纤维寡糖;ii)聚合度为2至12的木寡糖;iii)聚合度为2至12的甘露寡糖;iv)聚合度为2至5的混合键葡聚糖寡糖;v)聚合度为4至12的木葡聚糖寡糖;和vi)聚合度为2至12的壳寡糖;和选自下列的至少一种多糖:i)木聚糖;ii)甘露聚糖;iii)纤维素衍生物;iv)混合键葡聚糖;v)木葡聚糖;和vi)壳聚糖;其中所述液体成分包含至少20%干重的至少一种寡糖和至少2%干重的至少一种多糖,并且其中所述液体成分的粘度为5至100,000cps、8,000至100,000cps、10,000至50,000cps或15,000至25,000cps。17)根据编号实施方案16所述的液体成分,其中所述液体成分包含(i)至(vi)中列出的寡糖中的至少两种。18)根据编号实施方案16或17所述的液体成分,其中所述液体成分包含至少20%干重的聚合度为2至6的纤维寡糖。19)根据编号实施方案16至18中任一项所述的液体成分,其中所述液体成分包含至少20%干重的聚合度为2至12的木寡糖。20)根据编号实施方案16至19中任一项所述的液体成分,其中所述液体成分包含至少20%干重的聚合度为2至12的甘露寡糖。21)根据编号实施方案16至20中任一项所述的液体成分,其中所述液体成分包含至少2%干重的木聚糖。22)根据编号实施方案16至21中任一项所述的液体成分,其中所述液体成分包含至少2%干重的甘露聚糖。23)根据编号实施方案16至22中任一项所述的液体成分,其中所述液体成分包含至少2%干重的纤维素衍生物。24)根据编号实施方案16至23中任一项所述的液体成分,其中液体成分的多糖浓度为0.1至50%(w/v)。25)根据编号实施方案16至24中任一项所述的液体成分,其中液体成分的寡糖浓度为1至200%(w/v)。26)根据编号实施方案16至25中任一项所述的液体成分,其中液体成分的多糖和寡糖浓度为1-200%(w/v)。27)根据编号实施方案16至26中任一项所述的液体成分,其中所述液体成分包含多糖和寡糖的量的比例为1:100至1:1。28)根据编号实施方案16至27中任一项所述的液体成分,其中所述液体成分包含两种寡糖的比例为1:9至9:1。29)编号实施方案16至28中任一项所述的液体成分在食品、化妆品或营养制品中的用途。
预处理生物质以去除单糖和/或二糖的其他示例性实施方案
在一些情况下,本公开内容涉及物理和热化学处理植物生物质材料以生产食品、化妆品或营养品成分的新方法。
含糖食品和饮料是全世界文化和生活习惯的重要组成部分,但它们所含的糖与人们肥胖、糖尿病、牙齿健康不良和破坏性行为有关。由于这些原因,消费者的偏好已经从含糖食品转移出来,并且政府越来越多地实施法规以鼓励少糖的食用。
因此,几十年来,业界一直在寻找合适的低热量甜味剂来替代食物和饮料中的糖。不幸的是,许多糖替代品都是由非天然资源生产的,并且常常伴随其甜味略带有苦味或其他令人讨厌的味道,这两种味道无法吸引消费者。此外,虽然许多甜味剂能够模拟食物和饮料中糖的甜味,但很少有甜味剂能够模拟糖在食物中的宽泛作用,例如增加体积、调节质地、提供结构、充当防腐剂、通过焦糖化和美拉德反应调节颜色和风味。
膳食纤维是积极饮食的重要组成部分,有助于维持消化系统健康和肠道菌群的良好调节。这种纤维包含不同链长和类型的糖。除天然存在于各种各样的食物中,纤维还可以单独生产,并在制造期间添加到其他食物中。
生物质是糖的良好来源,可用于替代糖和向食品中添加纤维。已经提供了由原料制成的组合物。然而,仍然需要优化从生物质中获得这些糖并将这些糖加工成可在大规模和商业规模上用作食品、化妆品或营养品成分的组合物的方法。大量植物生物质的酶分解可需要相当长的时间。此外,糖通常需要通过受控分解生产。为此,需要酶分解,因为可以精确控制产品大小,确保不产生和/或产生很少的单糖。
如本文所提供的方法可以经济且有效地从植物生物质起始材料生产食品、化妆品或营养品成分,其比先前使用的方法更快,产生更纯的最终产品,并且可以用于大规模和商业规模。该方法可以通过以下来进行:执行预洗涤步骤以从生物质中去除内源性单糖和/或二糖,并采用热化学预处理步骤来确保制造成分可需要的糖的受控分解和释放来实现。总之,这些步骤可以确保在酶前加工过程中不产生和/或产生很少的单糖。这可以最大限度地提高效率并限制所需的反应后纯化的量。
因此,在本公开内容的另一方面,提供了一种用于生产食品、化妆品或营养品成分的方法,所述成分包含一种或多种寡糖,其中所述方法包括以下步骤:
a)包含单糖和/或二糖的植物生物质的物理预处理;
b)洗涤循环(在本文中也称为温育循环),其包括以下步骤:(i)洗涤(例如,温育)植物生物质以溶解至少一部分单糖和/或二糖,和(ii)除去至少一部分单糖和/或二糖;
c)植物生物质的热化学预处理;
d)通过酶促反应形成一种或多种寡糖,所述酶促反应包括在溶液或悬浮液中使一种或多种多糖切割酶与植物生物质接触的步骤;
e)从酶促反应混合物中分离(在本文中也称为富集或分开)一种或多种寡糖,并使用所述一种或多种寡糖形成成分。
以本文提供的方式制备食品、化妆品或营养品成分可以允许:通过结合来自相同生物质源的寡聚材料和聚合材料、纯化、衍生化或其他改性以及控制寡聚材料和聚合材料的比例、以有效地使用生物质,这可以改善成分的功能特性、营养特性和耐受性。
本公开内容的方法的步骤(a)、(b)和(c)都是在植物生物质起始材料上执行“预处理”的步骤。如本文所用,“预处理”通常指在植物生物质上执行的步骤,然后使多糖切割酶与植物生物质接触。
步骤(a)是植物生物质的物理预处理,其目的可以为物理分解植物生物质以准备用于后续步骤。物理步骤可以有助于加速整个方法,因为它可以增加植物生物质的可用表面积,使后续步骤中使用的化学物质能够例如同时对更多的植物生物质具有活性。物理预处理步骤可以包括植物生物质的切削、砍碎、碾磨、球磨、研磨、修整、混合或其组合。
包含合适多糖的任何物质可以是植物生物质。由于食品、化妆品和营养品业界使用多种寡糖,因此适用于该方法的多糖没有特别限制。适用于产生本公开内容的寡糖谱的植物生物质可以包括例如纤维素、木质纤维素、甲壳素、壳聚糖、木聚糖(诸如,葡糖醛酸木聚糖、阿拉伯木聚糖和葡糖醛酸阿拉伯木聚糖)、木葡聚糖以及混合键葡聚糖,和/或甘露聚糖(诸如,葡甘聚糖、半乳甘露聚糖,或半乳葡甘露聚糖)。然而,设想了可以适当地作用于其上的任何植物生物质。
因此,植物生物质可以是谷物、谷壳、豆荚、种皮和/或其他种子材料;海藻;玉米秸秆、稻草、甘蔗渣、芒草、高粱渣、柳枝稷、竹子和/或其他单子叶组织;水葫芦、叶组织、根和/或其他植物物质;和/或合适的植物生物质的任何组合。在一些实施方案中,植物生物质可以包括甘蔗、玉米秸秆、玉米芯、麦麸、麦秸、硬木或软木。在某些实施方案中,植物生物质可以包括玉米芯。
步骤(b)是可以在物理预处理步骤之后进行的植物生物质的洗涤循环(或温育循环)预处理。步骤(b)的目的可以是从生物质中溶解和去除单糖和/或二糖。例如,单糖和/或二糖可以包括但不限于游离的蔗糖、麦芽糖、乳糖、葡萄糖、果糖或半乳糖。诸如蔗糖的游离二糖的去除可能是有意义的,因为二糖随后不能轻易地从寡糖级分中去除,例如可以使用过滤方法但通常导致其他二糖的等量损失。
步骤(i)的洗涤循环可在温度范围内进行,例如,5至150℃、10至100℃或15至50℃。在一些情况下,洗涤循环可以在室温下进行,例如约15至25℃或约20至22℃。较高的温度可以使单糖和/或二糖更快地溶解,然而,温度过高可能更难以以有效且划算的方式实现,并且可能会损坏生物质化合物或溶解不希望在该步骤中溶解的化合物。
步骤(i)的洗涤循环可以发生在一定时间范围内,例如大量的生物质可以暴露于该步骤更长的时间,这可以相应地进行调整。例如,时间可以是0.5分钟至72小时、1分钟至12小时、5分钟至24小时或10分钟至3小时。在某些实施方案中,该步骤可以分批或连续进行。
在一些实施方案中,步骤(i)的洗涤循环可包括在室温下在水(即以约pH为7的中性pH供应的水)中洗涤植物生物质。在另一方面,步骤(i)的洗涤循环可包括在水(即以约pH为7的中性pH供应的水)中加热植物生物质。在洗涤循环期间,供应的中性水可随着单糖和/或二糖溶解而变成微酸性。
在某些实施方案中,步骤(i)的洗涤循环可以包括在pH为7.1至14、7.5至12或8至11的碱性溶液中加热植物生物质。该溶液可以包含选自以下的任一种或适当地由其组成:氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸钙、氢氧化钙、硫酸铵、氢氧化铵、氨水。在各种实施方案中,碱可以是氢氧化钠。还设想了所列碱的组合。
在各种情况下,步骤(i)的洗涤循环可以包括在pH为1至6.9、2至6.5或4至6的酸性溶液中加热植物生物质。该溶液可以包含任何有机酸或无机酸或适当地由其组成,诸如选自以下的一种酸:硫酸、盐酸、硝酸、磷酸、乙酸、马来酸、富马酸和草酸。在某些情况下,酸可以是硫酸。还设想了所列酸的组合。
在某些情况下,植物生物质中的部分或全部单糖和/或二糖在步骤(b)期间被溶解和去除。在该步骤期间还可以去除其他污染物,诸如其他可溶性糖和矿物质。
可以重复步骤(b)以去除在洗涤循环期间没有从植物生物质中去除的单糖和/或二糖。在各种情况下,步骤(b)可以执行至少两次、至少三次、至少四次或至少五次。步骤(c)是可以在物理洗涤预处理步骤之后进行的植物生物质的热化学预处理。如本文所用,“热化学”通常指将植物生物质在化学物质中加热到高于室温(室温是例如约15至25℃或约20至22℃),诸如在水、酸或碱溶液中加热。热化学步骤的目的可以是有助于加快整个方法,因为它可以对植物生物质的化学成分进行化学修饰,例如它可以断裂糖之间的氢键,后续步骤中的酶能够更容易的分解糖。
加热可以在例如50至150℃、60至130℃、65至120℃或70至110℃的温度范围内。更高的温度可以允许更快的化学和/或物理改性,然而,温度过高可能更难以以有效且划算的方式实现。
加热可以在一定的时间范围内发生,特别是大量的生物质可以在更长的时间段内暴露于加热,这可以相应地进行调整。例如,植物生物质的加热可以为5分钟至72小时、15分钟至24小时、30分钟至12小时或1小时至4小时。
在一些实施方案中,热化学预处理可以包括在水(即在约pH为7的中性pH下)中加热植物生物质。
在某些实施方案中,热化学处理可以包括在pH为7.1至14、9至13或10至13的碱性溶液中加热植物生物质。该溶液可包含选自以下的任一种碱或适当地由其组成:氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸钙、氢氧化钙、硫酸铵、氢氧化铵和氨水。在各种实施例中,碱可以是氢氧化钠。还设想了所列碱的组合。
在一些情况下,热化学处理可包括在pH为1至6.9、2至6.5或4至6的酸性溶液中加热植物生物质。该溶液可包含任何有机或无机酸或适当地由其组成,诸如选自以下的一种酸:硫酸、盐酸、硝酸、磷酸、乙酸、马来酸、富马酸和草酸。在某些情况下,酸可以是硫酸。还设想了所列酸的组合。
对于步骤(c),还设想了多个不同的连续热化学处理步骤。例如,步骤(c)可以执行至少两次、至少三次、至少四次或至少五次。
在某些情况下,步骤(b)的洗涤可以在水中进行,而步骤(c)的预处理可以在碱中进行。
在预处理步骤之后,步骤(d)可以包括由植物生物质形成一种或多种寡糖的酶促反应。存在于植物生物质中的多糖可通过酶部分切割成寡糖(例如,有用的寡糖),留下部分切割或未切割的多糖,其可包括纤维素、木聚糖(例如,葡糖醛酸木聚糖、阿拉伯木聚糖或葡糖醛酸阿拉伯木聚糖)、甘露聚糖(例如,葡甘聚糖、半乳甘露聚糖或半乳葡甘露聚糖)、混合键葡聚糖、木葡聚糖、甲壳素、壳聚糖或木质纤维素。
反应可以在溶液和/或悬浮液中进行。反应可以在合适的反应容器中进行。在一些情况下,反应可以在适于酶和植物生物质的特定组合的温度或温度方案下进行,可以允许所述反应进行一定的时间,直到产品达到所需浓度或直到满足一些其他要求,并且分离产品或以其他方式收集产品。该时间段可为约1分钟至约6天、约0.5天至约5天或约16小时至约96小时。可替代地,可以允许所述反应进行直到不再发生催化。
为了确保酶和植物生物质之间的最佳接触,可以连续地或间断地搅拌反应混合物。搅拌可以采取以下形式:使整个反应容器有节奏地运动、鼓风机或其他搅拌装置、气泡喷射或任何其他搅拌方法。
酶促反应可以是微生物发酵。温度和反应时间可以适于所用微生物的生长。微生物有机体可以进行基因改变,以产生适用于产生本公开内容的寡糖的酶。微生物可以是例如细菌(例如大肠杆菌),或真菌,例如酿酒酵母或里氏木霉。
在本公开内容中还体现了适于修饰主题微生物的表达载体,使得其产生本公开内容的酶或酶混合物。如果需要,表达载体可以是质粒或能够诱导酶产生的任何其他核酸,表达载体可以包含一种或多种以下调节序列以控制外源酶的表达:热休克基因的调控序列、毒性基因的调控序列和孢子形成基因的调控序列。
酶促反应可以在适于所用酶和底物的温度或温度方案下进行。例如,酶促反应可以在约10℃至约100℃、约20℃至约70℃或约30℃至约40℃的恒定温度下进行。如果酶促反应采用微生物发酵的形式,则温度可以适合于此,例如酶促反应可以包括大肠杆菌的生长和/或温度可以是恒定的并且为约37℃。
溶液或悬浮液的pH可影响酶的活性。pH的控制可以确保酶促反应以合适的速率进行。本公开内容的酶促反应可在pH为约2至约10、约3至约8或约4至约6的范围内进行。
可以允许酶促反应继续进行,直到剩余5-75%、5-70%、5-65%、5-55%、更多或10-50%的未消化的含多糖的植物生物质。这可以通过还原末端测定法(例如,蒽酮测定法)和/或色谱法(例如,薄层色谱法和高效阴离子交换色谱法)监测或检查。
多种酶可适用于本方法的酶促反应。例如,“裂解多糖单加氧酶”和“LPMO”,该“裂解多糖单加氧酶”和“LPMO”是指能够使用含铜部分并使用氧源(诸如双氧分子、过氧化物或任何其他氧源);以及合适的还原剂氧化切割多糖的一类酶。因此,当使用LPMO时,酶促反应可在有氧条件下进行。合适的还原剂没有特别限制,但示例包括抗坏血酸、没食子酸、半胱氨酸、NADH、NADPH、焦性没食子酸、二硫苏糖醇、氰基硼氢化物、硼氢化物、光合色素、木质素、木质醇以及纤维二糖和纤维二糖脱氢酶的组合。可以使用多种光合色素,例如类囊体和纯化级分或叶绿酸,并且可以提供光。LPMO可以选自以下家族:AA9、AA10、AA11、AA13、AA14和AA15。LPMO可以是PaLPMO9E(SEQ ID NO:1),其是一种最初从子囊菌真菌(鹅柄孢壳菌(Podospora anserina))中分离出来的AA9 LPMO。LPMO可以是来自里氏木霉的AA9 LPMO(SEQ ID NO:23)。
有氧条件可以包括添加氧气,其可以通过用含氧气体(诸如空气)向底物混合物曝气来提供。可以通过各种系统(诸如空气注射器、曝气筛板(aeration frit)、膜系统或内循环气升式反应器)将含氧气泡引入水性底物混合物中来进行曝气。酶促反应中分子氧的浓度可以为约4mg/L至约14mg/L。
另一种可以用于该方法的酶为“纤维素酶”,其对纤维素具有水解活性,例如,内切-1,4-β-葡聚糖酶、纤维二糖水解酶和/或β-葡萄糖苷酶活性。所述酶能够切割一种或多种形式的纤维素(包括在植物生物质中发现的纤维素)中的糖苷键。在此过程中,纤维素产生包括葡萄糖和纤维寡糖的产品。β-葡聚糖酶包括选自GH5、GH7和GH12酶的酶,诸如源自黑曲霉(SEQ ID NO:12、13和14)和里氏木霉(SEQ ID NO:24和25)。
另一种酶为“纤维二糖水解酶”,其对纤维素具有水解活性并且主要产生纤维二糖作为产物。纤维二糖是一种二糖,并且是一种纤维寡糖。所述酶能够切割一种或多种形式的纤维素(包括在植物生物质中发现的纤维素)中的糖苷键。纤维二糖水解酶可以来自于GH6和GH7家族、源自里氏木霉的Cel6A或Cel7A酶(SEQ ID NO:10和11)。
另一种酶是“β-葡萄糖苷酶”,其对纤维素具有水解活性,并且主要产生葡萄糖作为产物。此类酶能够切割一种或多种形式的纤维素(包括在植物生物质中发现的纤维素)中的糖苷键。β-葡糖苷酶可以包括GH3β-葡糖苷酶,诸如源自里氏木霉(SEQ ID NO:22)。
另一类酶是地衣聚糖酶,其可以选自GH5、GH7、GH8、GH9、GH12、GH16、GH17或GH26家族。在一些情况下,地衣聚糖酶可以为GH16酶。GH16酶可以源自枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)(SEQ ID NO:2)。该酶能够作用于例如混合键葡聚糖(其是包含β-1,3键和β-1,4键的混合物的葡聚糖),并且可以在β-1,4糖苷键处切割它们。在其中地衣聚糖酶作用于混合键葡聚糖的情况中,所产生的β-葡聚糖可主要落在约3至约7个残基的大小范围内,因此它们可以用于食品、化妆品和营养品行业。混合键葡聚糖在草和马尾草家族的成员中含量丰富,因此,草类生物质(诸如稻草)具有高水平的混合键葡聚糖,并且可被地衣聚糖酶有效地起作用。
另一种酶是木聚糖酶,其作用于例如包含木聚糖主链的植物生物质。木聚糖酶可以是例如葡糖醛酸木聚糖酶、阿拉伯木聚糖酶或葡糖醛酸阿拉伯木聚糖酶。该酶可以对多种具有木聚糖主链的多种聚合物具有活性,诸如葡糖醛酸木聚糖、阿拉伯木聚糖和葡糖醛酸阿拉伯木聚糖。这些聚合物在各种植物生物质中含量丰富,例如硬木和软木都可以包含合适的多糖,其中硬木通常包含葡糖醛酸木聚糖,软木通常包含葡阿拉伯葡糖醛酸木聚糖。在一些实施方案中,木聚糖酶可包括源自热纤梭菌(SEQ ID NO:3)和层出节水霉(SEQ IDNO:4)的GH5木聚糖酶,以及源自菊欧文氏菌(SEQ ID NO:5)、枯草芽孢杆菌(SEQ ID NO:6)、卵形拟杆菌(SEQ ID NO:7)和里氏木霉(SEQ ID NO:15)的GH30木聚糖酶。
本公开内容中有用的其他酶可以包括木葡聚糖酶和木葡聚糖内切葡聚糖酶(XEGs),其由多种生物体(包括植物病原微生物)产生的。木葡聚糖酶和木葡聚糖内切葡聚糖酶能够作用于木葡聚糖,其是高等植物的初级细胞壁中含量丰富的半纤维素β-1,4葡聚糖链,其被木糖修饰,一些木糖残基进一步被其他残基(如半乳糖)修饰。当合适的木葡聚糖酶或XEG作用于木葡聚糖时,产物包含可在食品、化妆品和营养品业界使用的长度主链的木葡聚糖寡糖。木葡聚糖酶可包括源自卵形拟杆菌的GH5木葡聚糖酶(SEQ ID NO:8)和源自里氏木霉的GH74木葡聚糖酶。
由于任何给定的天然植物生物质都可能包含不同多糖的混合物,因此有时不同酶的混合物可能是有益的。这种混合物可以包含一种或多种任何其他酶。例如,这种混合物可包含LPMO和内切葡聚糖酶、木聚糖酶和地衣聚糖酶、纤维二糖水解酶和甘露聚糖酶、或内切葡聚糖酶和纤维二糖水解酶,其中酶配偶体以1:100至100:1的摩尔比存在。
在一些情况下,一种或多种酶可以是不同酶的混合物,例如粗酶制剂或半粗酶制剂。如本文所用,术语“粗酶制剂”通常指从微生物发酵物中提取的可溶性制剂,其在提取后经受最少的加工。例如,通常制剂可以仅经受过滤以去除不溶性成分。如本文所用,术语“半粗酶制剂”通常指从微生物发酵物中提取的可溶性制剂,在提取后经受一些处理,例如制剂可以经受过滤以去除不溶性成分,增加酶浓度,和/或纳滤以去除小分子量化合物。
在一些情况下,粗酶制剂或半粗制酶制剂可以来自细菌或真菌。例如,该制剂可以来自真菌,诸如丝状纤维素分解真菌,诸如来自木霉属或曲霉属物种。该酶可以是来自里氏木霉菌株的粗酶制剂或半粗酶制剂。
在步骤(e)中,可以以多种方式从酶促反应混合物中分离出寡糖。其可以基于溶解度进行分离,使得仅提取可溶性糖的组合物用于进一步加工,和/或通过色谱分离以产生具有寡糖链长度较窄带的组合物。分离可以例如基于沉淀、尺寸排阻色谱、离子交换色谱、过滤、超滤、微滤或纳滤。在进行基于溶解度的分离的情况下,存在于分离的组合物中的糖谱可取决于最初的酶促反应,因为不同的糖的溶解度随着长度以不同的速率降低。
在本公开内容的范围内还设想的是,进一步处理全部或部分的所产生的寡糖以产生进一步的产物,然后将其掺入食品、化妆品或营养品中。该进一步处理可包括任何化学、物理或酶促步骤,例如还原,例如合适地方进行的还原性胺化;氧化、焦糖化、用席夫碱或通过美拉德反应或通过这些步骤的任何组合进行改性,并且可以提供具有为所需目的而改进性能的不同产品。例如,可以修改焦糖化特性、热值、风味和颜色。还可使寡糖例如通过沉淀、尺寸排阻色谱、离子交换色谱、过滤、超滤、微滤或纳滤进行纯化。
在步骤(e)中形成的成分可以包含各种寡糖,并且取决于所需的性质包含不同的量。在各种情况下,所述成分可以包含至少20%干重或至少30%干重的聚合度为2至6的纤维寡糖,所述成分可以包含至少20%干重或至少30%干重的聚合度为2至12的木寡糖,所述成分可以包含至少20%干重或至少30%干重的聚合度为2至5的混合键葡聚糖寡糖,所述成分可以包含至少20%干重或至少30%干重的聚合度为2至12的甘露寡糖,所述成分可以包含至少20%干重或至少30%干重的聚合度为4至12的木葡聚糖寡糖,和/或所述成分可以包含至少20%干重或至少30%干重的聚合度为2至12的壳寡糖。在一些实施方案中,成分可包含最多100%干重的上述寡糖和本文所述的多糖,因此其中寡糖以至少20%干重存在的上述实施方案不包含所有六种类型的寡糖。
在一些情况下,成分可以包含至少50%、60%、70%、80%、90%、95%、99%或99.5%干重存在的糖。成分可以基本上由糖组成。例如,成分可具有小于0.5%干重或小于0.3%干重、例如0.1%干重的其他物质。
在各种情况下,成分可以包含至少两种寡糖。每种寡糖的量可以根据所得食品、化妆品或营养品的所需性质而变化。两种寡糖可以以1:9至9:1或1:2至2:1的比例存在。进一步地,成分可以包含三种寡糖、四种寡糖、五种寡糖或六种寡糖。
在一些实施方案中,成分可以包含纤维寡糖,例如纤维寡糖与木寡糖的结合。在某些实施方案中,成分可以包含纤维寡糖与甘露寡糖的结合。
所生产的成分可用于常规使用的寡糖、糖、蓬松甜味剂、低强度甜味剂或其他相关食品成分的应用。例如作为甜味剂、蓬松剂、添加膳食纤维或保湿剂。特别值得注意的是在食品中使用还原蔗糖。成分可以掺入蛋糕、面包或其他烘焙食品中;放入巧克力或其他糖果,诸如太妃糖、软糖、蛋白霜、果酱、果冻或焦糖;或掺入饮料,例如以提供良好的味道或颜色特征或增加膳食纤维含量。在一些情况下,该成分可以例如作为分离成分或通过直接利用酶促反应混合物作为原材料而掺入动物饲料中。
如本文所述的组合物或成分可用于改变最终产品的一种或多种特性。所述特性包括但不限于甜度、质构、口感、粘合性、上光性、光滑度、湿润度、粘度、颜色、吸湿性、风味、蓬松性、保水性、焦糖化、表面质构、结晶、结构特性、降低卡路里、降低升糖指数、降低血糖负荷、增加纤维、降低糖分和溶解性。这些可为对目前使用不同类型的糖、糖替代物和/或其他此类化合物的可能的改进。
在化妆品工业中,该成分可以改善质构和保湿性、充当紫外线吸收分子、保持凝胶或乳霜结构,和/或充当蓬松性剂。此外,该成分可用于营养品组合物中,因为已证明它们提供的膳食纤维可以促进消化健康、良好调节肠道菌群和对健康的其他益处。在这种情况下,本文的成分还可用作益生菌饮料或其他益生元或益生菌制剂中的成分。
详细描述将参考以下编号的实施方案进一步补充。1)一种生产食品、化妆品或营养品成分的方法,所述成分包含一种或多种寡糖,其中所述方法包括以下步骤:a)包含单糖和/或二糖的植物生物质的物理预处理;b)洗涤循环,其包括以下步骤:(i)洗涤植物生物质以溶解至少一部分单糖和/或二糖,和(ii)去除至少一部分单糖和/或二糖;c)植物生物质的热化学预处理;d)通过酶促反应形成一种或多种寡糖,所述酶促反应包括在溶液或悬浮液中使一种或多种多糖切割酶与植物生物质接触的步骤;e)从酶促反应混合物中分离一种或多种寡糖,并使用所述一种或多种寡糖形成成分。2)根据编号实施方案1所述的方法,其中物理预处理步骤包括对植物生物质进行切削、砍碎、碾磨、球磨、研磨、修整或混合。3)根据编号实施方案1或2所述的方法,其中步骤(i)的洗涤循环在水、酸或碱中进行。4)根据任何前述编号实施方案所述的方法,其中步骤(i)的洗涤循环在5至150℃、10至100℃或15至50℃的温度下进行。5)根据任何前述编号实施方案所述的方法,其中步骤(i)的洗涤循环进行的时间范围为0.5分钟至72小时、1分钟至12小时、5分钟至24小时或10分钟至3小时。6)根据前述编号实施方案中任一项所述的方法,其中热化学预处理包括在水、酸或碱的溶液中加热植物生物质。7)根据编号实施方案6所述的方法,其中植物生物质的加热在50至150℃、60至130℃、65至120℃或70至110℃的温度下进行。8)根据编号实施方案6或7所述的方法,其中植物生物质的加热进行5分钟至72小时、15分钟至24小时、30分钟至12小时或1小时至4小时。9)根据编号实施方案6至8中任一项所述的方法,其中溶液的pH为7.1至14、7.5至12或8至11。10)根据编号实施方案9所述的方法,其中溶液包含氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸钙、氨水、硫酸铵或氢氧化铵。11)根据编号实施方案6至8中任一项所述的方法,其中所述溶液的pH为1至6.9、2至6.5或4至6。12)根据编号实施方案11所述的方法,其中所述溶液包含硫酸、盐酸、硝酸、磷酸、乙酸、马来酸、富马酸或草酸。13)根据编号实施方案1至12中任一项所述的方法,其中所述植物生物质是甘蔗、玉米秸秆、玉米芯、麦麸、麦秸、硬木或软木。14)根据编号实施方案1至13中任一项所述的方法,其中所述植物生物质包含纤维素、甲壳素、壳聚糖、木聚糖、木葡聚糖、混合键葡聚糖、甘露聚糖或木质纤维素。15)根据编号实施方案1至14中任一项所述的方法,其中所述一种或多种多糖切割酶为以下的一种:纤维素酶、木聚糖酶、木葡聚糖酶、内切葡聚糖酶、纤维二糖水解酶、甘露聚糖酶、地衣聚糖酶或裂解多糖单加氧酶(LPMO),诸如选自AA9、AA10、AA11、AA13、AA14和AA15。16)根据编号实施方案1至15中任一项所述的方法,其中所述一种或多种多糖切割酶由里氏木霉真菌制备。17)根据编号实施方案1至16中任一项所述的方法,其中所述一种或多种寡糖包含β-葡聚糖、纤维寡糖、MLG寡糖、甘露寡糖或木寡糖。18)根据编号实施方案1至17中任一项所述的方法,其中所述多糖切割酶可操作地连接至催化模块或非催化模块,例如其中所述多糖切割酶可操作地连接至非催化模块并且所述非催化模块是碳水化合物结合模块。19)根据编号实施方案1至18中任一项所述的方法,其中在分离所述一种或多种寡糖后,所述一种或多种寡糖经受化学、物理或酶处理,例如还原、氧化、焦糖化或美拉德反应。
详细描述将参考以下编号的实施方案进一步补充。1)一种生产用于人食用的成分的方法,所述方法包括:(a)对植物生物质进行物理处理;(b)使经物理处理的植物生物质经受温育循环,所述温育循环包括:(i)在pH为6.6至7.4的温育溶液中温育经物理处理的植物生物质,以从经物理处理的植物生物质中溶解单糖和/或二糖;和(ii)从温育溶液中除去一部分溶解的单糖和/或二糖;(c)在以下之一的条件下对经温育的植物生物质进行热化学处理:(i)pH为2至6.5的酸性溶液,或(ii)pH为7.5至12的碱性溶液;(d)在溶液或悬浮液中使一种或多种多糖切割酶与经热化学处理的植物生物质接触以形成一种或多种寡糖;和(e)富集溶液或悬浮液以增加一种或多种寡糖的浓度以形成所述成分。2)根据编号实施方案1所述的方法,其还包括在步骤(b)(ii)中从温育溶液中去除至少一部分单糖和/或二糖。3)根据编号前述实施方案中任一项所述的方法,其中所述热化学处理的植物生物质不包含或基本上不包含单糖。4)根据任何前述编号实施方案所述的方法,其还包括从溶液或悬浮液中纯化一种或多种寡糖。5)根据任何前述编号实施方案所述的方法,其还包括重复步骤(b)。6)根据编号实施方案5所述的方法,其中步骤(b)进行两次、三次、四次或五次。7)根据任何前述编号实施方案所述的方法,其还包括重复步骤(c)。8)根据编号实施方案7所述的方法,其中步骤(c)进行两次、三次、四次或五次。9)根据任何前述编号实施方案所述的方法,其还包括弃去在步骤(b)中去除的溶解的单糖和/或二糖的一部分。10)根据任何前述编号实施方案所述的方法,其中在步骤(b)中去除的溶解的单糖和/或二糖的一部分不与步骤(e)的一种或多种寡糖的一部分组合以形成成分。11)根据任何前述编号实施方案所述的方法,其中所述成分基本上不含单糖。12)根据任何前述编号实施方案所述的方法,其中所述成分基本上不含二糖。13)根据任何前述编号实施方案所述的方法,其中所述一种或多种寡糖包含以下中的至少一种:i)聚合度(DP)为2至6的纤维寡糖;ii)DP为2至12的木寡糖;iii)DP为3至15的阿拉伯木寡糖;iv)DP为2至12的甘露寡糖;v)DP为2至5的混合键葡聚糖寡糖;vi)DP为4至12的木葡聚糖寡糖;或vii)DP为2至12的壳寡糖。14)根据编号实施方案13所述的方法,其中所述成分包含(i)至(vii)中列出的寡糖中的至少两种。15)根据编号实施方案14所述的方法,其中所述成分包含至少相对于彼此比例为1:9至1:1的两种寡糖。16)根据任何前述编号实施方案所述的方法,其中单糖和/或二糖包含蔗糖、葡萄糖、麦芽糖、乳糖、葡萄糖、果糖或半乳糖中的至少一种。17)根据任何前述编号实施方案所述的方法,其中步骤(a)的物理处理包括将植物生物质切削、砍碎、碾磨、球磨、研磨、修整或混合中的至少一种。18)根据任何前述编号实施方案所述的方法,其中步骤(b)的温育在包含水的温育溶液中进行。19)根据任何前述编号实施方案所述的方法,其中步骤(b)的温育在15℃至95℃的温度下进行。20)根据任何前述编号实施方案所述的方法,其中步骤(b)的温育进行15分钟至1小时。21)根据任何前述编号实施方案所述的方法,其中步骤(c)的热化学处理包括在酸性溶液或碱性溶液中加热物理处理的植物生物质。22)根据编号实施方案21所述的方法,其中所述加热在50℃至150℃的温度下进行。23)根据编号实施方案21或22所述的方法,其中加热进行30分钟至4小时。24)根据任何前述编号实施方案所述的方法,其中经温育的植物生物质在pH为8至11的碱性溶液中进行热化学处理。25)根据编号实施方案24所述的方法,其中所述碱性溶液包含氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸钙、氨水、硫酸铵或氢氧化铵中的至少一种。26)根据任何前述编号实施方案所述的方法,其中经温育的植物生物质在pH为4至6的酸性溶液中进行热化学处理。27)根据编号实施方案26所述的方法,其中所述酸性溶液包含硫酸、盐酸、硝酸、磷酸、乙酸、马来酸、富马酸或草酸中的至少一种。28)根据任何前述编号实施方案所述的方法,其中所述植物生物质包含甘蔗、玉米秸秆、玉米芯、麦麸、麦秸、硬木或软木中的至少一种。29)根据任何前述编号实施方案所述的方法,其中所述植物生物质包含纤维素、甲壳素、壳聚糖、木聚糖、木葡聚糖、混合键葡聚糖、甘露聚糖或木质纤维素中的至少一种。30)根据任何前述编号实施方案所述的方法,其中所述一种或多种多糖切割酶包含纤维素酶、木聚糖酶、木葡聚糖酶、内切葡聚糖酶、纤维二糖水解酶、甘露聚糖酶、地衣聚糖酶,或裂解多糖单加氧酶(LPMO)中的至少一种。31)根据任何前述编号实施方案所述的方法,其中所述一种或多种多糖切割酶包含AA9、AA10、AA11、AA13、AA14或AA15中的至少一种。32)根据任何前述编号实施方案所述的方法,其中所述一种或多种多糖切割酶由里氏木霉真菌制备。33)根据任何前述编号实施方案所述的方法,其中所述一种或多种多糖切割酶可操作地连接至催化模块。34)根据任何前述编号实施方案所述的方法,其中所述一种或多种多糖切割酶可操作地连接至非催化模块。35)根据编号实施方案34所述的方法,其中所述非催化模块是碳水化合物结合模块。36)一种生产用于人食用的成分的方法,所述方法包括:(a)对植物生物质进行预处理,其中所述预处理包括:(i)对植物生物质进行物理处理;(ii)在pH为6.6至7.4的温育溶液中温育植物生物质以溶解一部分单糖和/或二糖,并去除一部分溶解的单糖和/或二糖;和(iii)在以下之一中对植物生物质进行热化学处理:(i)pH为2至6.5的酸性溶液或(ii)pH值为7.5至12的碱溶液;(b)在溶液或悬浮液中使一种或多种多糖切割酶与经预处理的植物生物质接触以形成一种或多种寡糖;(c)分离所述一种或多种寡糖的一部分以形成所述成分。
实施例
以下说明性实施例代表本文所述的组合物和方法的实施方案,并不意味着以任何方式进行限制。
实施例1–示例性过程
可以执行以下步骤以产生本文提供的成分:
1.植物生物质的物理预处理:将100g碾碎的玉米芯与水混合至10%(w/w)的固体浓度,并在室温下混合60分钟。在60分钟结束时停止混合并滤除液体,同时保留固体。
2.将固体浓度为10%(w/w)的悬浮在水中重新悬浮固体。开始混合,加热至95℃,并在95℃下混合60分钟。
3.加热60分钟结束时,加入6g氢氧化钠(玉米芯重量的0.2-3%)并继续搅拌。加热至95℃并混合60分钟以分解玉米芯中存在的半纤维素。在60分钟结束时,停止加热并冷却至50℃。
4.水解:加入纤维素分解酶(如,来自里氏木霉),并在50℃下在pH为5.5下(用1mol/L硫酸和/或1mol/L氢氧化钠调节)温育72小时。
5.生物质的分离:水解结束时,通过固液分离器将液体从产物中分离。
6.酶水解后的酶分离:浆料中的液体级分包括需要分离的酶、寡糖、水和盐。使用10kDa中空纤维膜分离酶蛋白和其他大分子。
7.使用离子交换柱在≤45℃下去除盐分。
a.阳离子柱:强酸性阳离子交换树脂、交联聚苯乙烯基质、磺酸盐官能团、Na+抗衡离子。
b.阴离子柱:大孔、弱碱性阴离子交换树脂、交联聚苯乙烯基质、二甲基叔胺官能团、OH-抗衡离子。
8.寡糖浓缩:在室温下通过纳滤选择性浓缩所需寡糖。
9.浓缩:在60-80℃下将液体浓缩至40-75%。
10.喷雾干燥:喷雾干燥,其中入口温度130-160℃,出口温度65-85℃。
实施例2–通过洗涤循环(即,温育循环)去除可溶性糖
执行以下步骤以从植物生物质中去除可溶性糖:
1.向100mg的四类植物生物量(即,甘蔗、小麦、玉米芯和柳树)中加水至10%(w/v)的浓度,并在45℃下温育30分钟,然后将悬浮液离心并去除上清液。
2.步骤1重复5次。
3.用薄层色谱法(TLC)分析2.5μl各上清液级分。
图1的薄层色谱法示出了在五个连续洗涤循环或温育循环(1、2、3、4和5)中从四类植物生物质中洗涤出的可溶性糖的存在。不需要的单糖和二糖(诸如葡萄糖、蔗糖和麦芽糖)用箭头标示。TLC的结果表明,对于所有植物生物质,在第一次洗涤循环后去除的上清液具有丰富的单糖和二糖存在于其中。因此,洗涤循环成功地将单糖和二糖从植物生物质中去除。来自后续洗涤循环的上清液具有显著更少的单糖和二糖存在于其中(如果有的话),这表明植物生物质在如本文提供的洗涤循环之后具有最少的单糖和二糖残留于其中。
实施例3–酶水解中不存在经洗涤的可溶性糖
执行以下步骤以表明酶水解中不存在可溶性糖:
1.将来自实施例2的经洗涤的玉米芯和柳树植物生物质各自在1%(w/v)NaOH中在99℃下温育30分钟,然后冷却。100mg未洗涤的玉米芯和柳树生物质也各自在1%(w/v)NaOH中在99℃下温育30分钟,然后冷却。
2.将150μl所得悬浮液各自与150μl 1M乙酸铵(pH 5.5)和150μl的酶组合物混合,所述酶组合物包含β木聚糖酶和纤维二糖分解酶。然后将悬浮液在50℃下温育16小时,以使酶与植物生物质发生反应。
3.取2.5μl各上清液通过TLC进行分析。
图2的薄层色谱法示出了在实施例2中已洗涤(+)或未洗涤(-)的四类生物质的酶消化产物。结果表明,酶消化后、最终产物包括用于未洗涤的玉米芯和柳树植物生物质的葡萄糖、蔗糖和麦芽糖。然而,酶消化后的最终产物不包括用于经洗涤的玉米芯和柳树植物生物质的葡萄糖、蔗糖和麦芽糖。
实施例4–将聚合物添加到寡糖溶液中可使其干燥成硬浆汁(hard glaze)
执行了以下步骤以表明将聚合物添加到寡糖溶液中可以使它们干燥成硬浆汁:
1.将100μl 10-320mM(10、20、40、80、160和320mM)纤维二糖±1%w/v桦木木聚糖移液到玻璃板上。
2.样品在37℃下干燥。
3.用刀对样品进行刻痕,以测试成分是否沉入固体浆汁中。单独使用纤维二糖,没有形成牢固的浆汁,并且当用刀施加压力时,干燥的粉末容易破裂。相比之下,添加了1%w/v木聚糖和80mM或更少的纤维二糖的组合物,将组合物干燥以形成固体、灰白色、半透明的表面,其强度足以用刀刻痕留下痕迹但没有开裂。当纤维二糖浓度为160mM或更高(与木聚糖相比,5.5%w/v、或550%w/w)时,浆汁的形态恢复到没有木聚糖存在的状态。即,没有形成牢固的浆汁,并且当用刀施加压力时,干燥的粉末容易破裂(参见图3)。
实施例5–食品中包含两种寡糖和多糖的组合物的证实
执行以下步骤以证明在食品中包含两种寡糖和多糖的组合物:
1.将4g桦木木聚糖溶溶于75ml水中煮沸。
2.以3g的增量加入12g纤维二糖和24g木寡糖(主要聚合度(DP)为2-6)并溶解煮沸。
3.将混合物通过加热减少至50ml,形成浓溶液,其具有浑浊蜂蜜的稠度和外观,但甜度较低。
4.将10mL混合物与12g燕麦混合以制成烙饼棒/谷物棒混合物,另外将10mL混合物与6g水果和6g坚果混合以制成谷物棒混合物。
5.将样品在100℃下烘烤10分钟,然后放置冷却并干燥过夜。
如图4所示,小图A(烙饼棒/谷物棒)和小图B(水果棒和坚果棒),生产的烙饼和水果棒和坚果棒具有与通常用于烘焙的已知糖浆制成的烙饼棒/谷物棒和水果和坚果棒一致的理想质构和稠度。
对于烙饼棒/谷物棒,来自步骤3的浓稠溶液有助于将步骤4中的混合物粘合在一起。成分与燕麦特性的综合作用产生了与使用常规糖生产的烙饼棒/谷物棒一致的颗粒状表面质构。该成分生产紧实、耐嚼、湿润、粘稠质构,产生的口感与这些类型的食品所需的口感相符合,但单独燕麦并不存在这种口感。该产品略带甜味,不含苦味或异味,这可能是高强度甜味剂的特征。
对于水果棒和坚果棒,来自步骤3的浓溶液有助于将步骤4中的混合物粘合在一起。它还增加了光滑、有光泽的浆汁面,这是此类食品美学品质的核心部分,并且如果成分仅包含寡糖(即,不含多糖的寡糖),则不会产生上述浆汁面。该成分产生了紧实、耐嚼、湿润和粘稠质构,产生的口感与这些类型的食品所需的口感相符合,但单独的坚果或水果中都不存在这种口感。该产品略带甜味,不含苦味或异味,这可能是高强度甜味剂的特征。
实施例6–制备成分的过程
可以执行以下步骤以制备本文提供的成分:
1.在90℃下,将15%w/v的玉米芯(通过1mm孔径过滤器研磨)在1%w/v NaOH中加热1小时,从而溶解一部分生物质的聚合物成分。
2.用硫酸将pH调节至5.5。
3.提取仅包含占反应总体积15%的反应液体组分的体积(“可溶性聚合物”);保留反应的剩余85%体积,包括所有不溶性生物质级分(“剩余生物质”)。
4.向剩余的生物质中,加入纤维素分解酶混合物(例如,来自里氏木霉的酶混合物,包括纤维素酶、木纤维酶和阿拉伯呋喃糖酶(arabinofuranosidase)、LPMO等)至0.5%w/v并在50℃下温育24小时。
5.通过过滤将可溶性低聚反应产物与未消化的不溶性聚合物分离。
6.通过依次使用微滤、超滤和离子交换色谱法(例如,陶瓷膜上的错流过滤;过滤可以在进料压力最大为3bar、使用由TAMI工业提供的110 0,45μm截止的Inside Céram烛形过滤器(TiO2,
Figure BDA0003598428730001011
x L 1178mm HD 6mm,每个膜8个通道),来执行)纯化低聚反应产物。
7.通过使用超滤(例如,在Alfa Laval超滤装置上运行的10kDa螺旋缠绕膜(Snyder ST-2B-6338,PES,进料间隔厚度31mm))纯化可溶性聚合物。
8.重新组合步骤6和7中形成的溶液,并通过使用纳滤进一步纯化和浓缩以形成成分。
实施例7–不同溶液的粘度测量
执行以下步骤以测量不同溶液的粘度:
1.包含纤维二糖(Cell2)、主要DP-6的木寡糖(XOS)和聚合的山毛榉材木聚糖(beechwood xylan,BWX)的三种糖溶液通过在水中煮沸糖而制成。最终浓度为:
a.样品1:0.33g/ml Cell2、0.66g/ml XOS、0.13g/ml BWX;
b.样品2:0.17g/ml Cell2、0.33g/ml XOS、0.07g/ml BWX;
c.样品3:0.54g/ml Cell2、0.52g/ml XOS、0.07g/ml BWX。
2.使用标准测试程序使用Brookfield HDB VE旋转粘度计测试样品。在高型烧杯中取400mL样品,以确保不会发生容器效应。该仪器按照制造商的说明进行操作,范围如下:使用主轴代码61的旋转粘度测定法,主轴速度100rpm,在22℃下。
样品编号 粘度(cps)
1 393
2 13
3 26
样品1的稠度类似于需要混合以稀释成水溶液的浓稠蜂蜜。相比之下,样品2和3流动性更强,并且可以容易地混合到水溶液中。结果表明,多糖浓度对组合物粘度的影响比寡糖和多糖的总浓度更大。样品2和3的多糖浓度相同,但是样品3的总寡糖和多糖浓度是样品2的两倍。样品3的粘度是样品2的粘度的两倍,符合总浓度和粘度之间的线性关系。然而,随着多糖浓度增加,粘度值呈指数增加。样品1的多糖浓度是样品3的浓度的两倍,它们的总寡糖和多糖浓度相同,但样品1的粘度比样品3大十五(15)倍。
实施例8-水溶性液体产品/成分的制备
执行以下步骤以产生水溶性液体产品/成分(样品4):
1.将100g碾碎的玉米芯在1L含有2.5g亚氯酸钠的去离子水中在80℃下加热1.5小时,同时不断搅拌。通过加入200mL含有另外5g亚氯酸钠的去离子水,将残余体积重配至900mL,并在80℃下持续搅拌加热1小时。
2.将溶液通过2mm孔径陶瓷过滤漏斗在真空下过滤,直到滤液澄清。
3.保留的固体在1L 0.5M氢氧化钠0.1%(w/v)硼氢化钠中在50℃和115rpm振摇下温育17小时。
4.然后用浓硫酸将pH调节至7,并在12,000道尔顿截止透析管中透析自来水24小时。
5.将透析管的内容物转移到2-L烧杯中,使不溶级分通过重力沉降。
6.将上清液倒出两次,并在80℃下蒸发浓缩至体积为120mL。
7.加入3体积的乙醇后,通过离心沉淀水溶性聚合物。弃去所得上清液,将沉淀物在室温下风干至恒重。
8.将寡糖添加到最终10%w/w纤维二糖、75%w/w木寡糖、15%提取的水溶性聚合物中,并在Waring Xtreme混合器中以最低功率设置混合至均匀。从混合器中回收到94g固体。
9.出乎意料的是,所有94g固体在50℃下溶解在60mL水中,温和恒定搅拌(约100rpm),表明溶解度大于150g/100g。
生成的样本(例如,在上述步骤8和9处)称为样本4。
实施例9–实施例8的水溶性液体产品的理化性质
流动特性:实施例8中描述的根据本公开内容的水溶性液体产品(样品4)的流动特性与水、20%w/v葡萄糖、40%w/v葡萄糖、60%w/v葡萄糖、80%w/v葡萄糖和≥99%甘油(Fisher G/0650/17供应)的对比组合物一起在表1中详述。通过分别称取6g、12g、18g和24gD-葡萄糖并用90℃水配制30mL来制备葡萄糖溶液。流动特性通过计时5mL的流速测量,并且在合适的情况下,来自垂直放置的注射器(BDP lastipak 300613)中的20mL液体,该注射器在室温下在重力下填充有20mL测试液体。
表1:流量特性
样品 5mL流动的时间(秒) 20mL流动的时间(秒)
2 13
20%w/v葡萄糖 2.3 13.5
40%w/v葡萄糖 2.5 15
60%w/v葡萄糖 3 20
80%w/v葡萄糖 5 38
≥99%甘油 256 未测定
样品4 237 未测定
样品流出注射器底部所需的时间增加(即,具有较低的流速)与样品粘度增加有关。流速越低,液体样品越像糖浆/粘稠和粘度。样品4的测得流速与甘油相似,低于所有测试的葡萄糖溶液。样品4的该特性使其比葡萄糖溶液和水更适合作为食品(如谷物棒)中的粘合剂,并为产品提供甜味。
颜色:样品4的颜色对应于标准参考方法(SRM)中的第30号,SRM是美国酿造化学家协会(the American Society of Brewing Chemists)推荐方法(ASBC Methods ofAnalysis,Beer 10.Spectrophotometric Color Method Approved 1958,rev.2015.American Society of Brewing Chemists,St.Paul,MN,U.S.A)。简而言之,样品的吸光度在430nm波长下、路径长度为1cm的池中测量。所得吸光度值乘以12.7以产生颜色值。鉴于样品4的混浊度,无法测量吸光度,并通过与SRM No.30(深红色/棕色)的光学比较进行评估。
阴离子交换色谱:使用装有CarboPac PA200分析柱(3x250mm)和CarboPac PA200G保护柱(3x 50mm)以及Dionex ED电化学检测器的Thermo Fisher Scientific DIONEXICS-6000系统、通过高性能阴离子交换色谱(high-performance anion exchangechromatography,HPAEC)对样品4进行分析。使用Chromeleon 7软件获取数据。
洗脱液A(超纯水)、B(250mM NaOH)和C(250mM NaOH+1M乙酸钠)用于制备具有表2中所示梯度特性的流动相。
表2:梯度特性
时间(min) 流动(ml/min) %A %B %C
0 0.5 75 25 0
3 0.5 75 25 0
6 0.5 50 50 0
15 0.5 50 42.5 7.5
20 0.5 0 0 100
23 0.5 75 25 0
26 0.5 75 25 0
通过将样品4稀释100倍并通过0.45μm注射器过滤器制备用于分析的样品,分析物的进样量为10μl。
HPAEC分析(参见图5)证实样品4是由葡萄糖和木糖组成的单糖、二糖和其他寡糖的混合物。这与食品工业中通常使用的糖浆(例如主要含有葡萄糖和果糖的单糖的玉米糖浆和高果糖玉米糖浆)形成对照。因此,与玉米糖浆和/或高果糖玉米糖浆相比,样品4中的产品在用于食品时预计具有更少的卡路里、更低的升糖指数并含有纤维。
实施例10–冷压水果谷物棒
冷压水果谷物棒如下制备:
1.将来自实施例8的120g样品4与30g椰子油一起加热,并加入四分之一(1/4)茶匙肉桂。
2.起泡后,将混合物从热源上移开,加入40g燕麦、40g干枣、10g脆米和10g种子。
3.将成分充分混合,直到所有成分都被包覆,然后将混合物转移到冷冻袋中并放入冷冻室。将袋的内容物卷成7-10mm的厚度,并在4℃下冷冻过夜,然后切成矩形。
所得产品(如图6所示)是耐嚼、粘稠的谷物棒,其松散地凝固,并含有燕麦和脆米以及由样品4和切碎的枣递送的可感知甜味。
实施例11–在大规模制造工艺中生产成分
以下步骤可用于在大规模制造工艺中生产该成分:
1.植物生物质的物理预处理:在悬浮液中,将100kg碾碎的玉米芯与水以15%(w/w)的固体浓度混合。开始混合并加热至95℃,并在95℃下混合60分钟。加入6kg氢氧化钠(以玉米芯重量计0.2-3%)并继续搅拌。加热至95℃并混合60分钟以释放玉米芯中存在的半纤维素。在60分钟结束时,冷却至50℃并用硫酸将pH调节至5.5。
2.去除部分可溶性多糖:去除部分可溶相,相当于总木聚糖的5-30%。用硫酸中和并通过超滤浓缩和纯化。去除任何沉淀的聚合物。
3.水解:在碾碎的玉米芯混合物中加入纤维素分解酶(例如,来自里氏木霉),在约50℃下温育12-72小时。
4.生物质的分离:在水解结束时,通过固液分离器(例如,压滤机或倾析离心机)将液体与产物分离。
5.酶水解后的酶分离:来自浆料的液体级分含有需要分离的酶、寡糖、水和盐。使用3kDa或10kDa中空纤维膜分离酶蛋白和其他大分子。
6.在≤45℃下使用离子交换柱去除盐。
a.阳离子柱:强酸性阳离子交换树脂、交联聚苯乙烯基质、磺酸盐官能团和Na+抗衡离子。
b.阴离子柱:大孔、弱碱性阴离子交换树脂、交联聚苯乙烯基质、二甲基叔胺官能团和OH-抗衡离子。
7.寡糖浓缩:在室温下通过纳滤选择性浓缩所需的寡糖。
8.浓缩:可选择在60-80℃下将液体浓缩至40-75%。
9.重组:将纯化的可溶性聚合物与酶产生的低聚物以5:95-20:80的干重比组合。
10.喷雾干燥:将所得溶液喷雾干燥,其中入口温度为130-160℃,出口温度为65-85℃。
实施例12-液体成分在制造挤出谷物棒中的用途
可以执行以下步骤以使用本文提供的液体成分来制造挤出谷物棒:
1.将含有10.5kg木聚糖、57kg木寡糖和7.5kg纤维二糖的120kg溶液与130kg椰子油一起加热并转移到高速混合器中。加入200kg燕麦片和25kg切碎的枣/葡萄干混合物并充分混合。这通过面团机进行脉冲并通过面团进料系统设定在20psi。
2.将混合物通过传送带和提升管末端装置(ramshorn)传送并在180℃下烘焙20分钟。然后,产品通过烤箱移动器转移到饼干切割线上,然后在冷却至<5℃时进入可变形式填充和密封包装。
3.所得产品是松散且充满燕麦的柔软、粘稠的谷物棒。甜味由含有10.5kg木聚糖、57kg木寡糖、7.5kg纤维二糖和切碎的枣的液体溶液递送的。包含10.5kg木聚糖、57kg木寡糖、7.5kg纤维二糖的液体溶液和椰子油均充当粘合剂,将棒中的其他成分保持在一起并赋予棒结构。
实施例13–液体成分在制造挤出早餐麦片中的用途
可以执行以下步骤以使用本文提供的液体成分制造挤出早餐谷物:
1.将谷物粉(约85-75%w/v)与每100g水包含22.5g木聚糖、30g纤维二糖和97.5g木寡糖的溶液(约15-25%v/v)以及用于强化的任何添加剂(诸如防腐剂、维生素和矿物质)混合以形成面团。这使用双螺杆挤出机挤出,该挤出机使用热量和加湿和/或蒸汽和机械剪切的组合来烹饪产品,通过将产品推过喷嘴形成产品的形状。然后,将产品膨化至质构轻盈且呈金黄色并冷却。
2.得到轻盈、酥脆、成型的早餐麦片产品。包含22.5g木聚糖、30g纤维二糖和97.5g木寡糖的液体溶液赋予产品甜味并有助于在挤出前形成面团的结构。
实施例14-液体成分在制造番茄酱中的用途
可以执行以下步骤以使用本文提供的液体成分制造番茄酱:
1.将4个洋葱和250g芹菜在食品加工机中混合至切碎。它们用5汤匙植物油小火煎5分钟。加入4瓣大蒜,再煮5分钟。加入1茶匙芫荽粉(ground coriander)、1根短肉桂棒、1茶匙甜胡椒(all spice)、半(1/2)茶匙黑胡椒粉和2茶匙芹菜盐,再煮一分钟。
2.向混合物中加入2kg熟的切碎番茄、3汤匙番茄酱、半(1/2)茶匙辣椒酱、200mL白葡萄酒醋和285mL包含每100g水22.5g木聚糖、30g纤维二糖和97.5g木寡糖的溶液。将混合物重新煮沸,不盖盖子1小时,直到西红柿变软。弃去肉桂棒,将酱汁混合物混合至光滑,然后过筛。
3.所得产品为光滑、浓郁的番茄酱。包含22.5g木聚糖、30g纤维二糖和97.5g木寡糖的液体溶液使产品变甜,并将本体(body)添加至酱汁,有助于使酱汁变稠并使酱汁膨大。
实施例15-玉米芯洗涤后水中糖的HPAEC色谱
玉米芯在室温水中以100g/L的浓度温育(表3中的“洗涤”),然后将水倒出。将水加入到原始总体积中,并加热至90℃保持60分钟(表3中的“润湿”),然后在90℃下在稀NaOH中加热60分钟(表3中的“预处理”)。
对洗涤、润湿和预处理样品执行HPAEC,并鉴定了糖的峰(参见图7,例如来自“洗涤”的色谱图)。如表3所示,在该过程开始时,约2%的玉米芯为可以洗出的葡萄糖,并且可能洗出更多的葡萄糖。还注意到洗涤步骤后的pH降至4.5。
表3
步骤 葡萄糖(g/l)
洗涤 2.43g/l
润湿 1.43g/l
预处理 0.02g/l
实施例16–量化糖和有机酸
为了量化预洗涤步骤对工艺的影响,根据图10A中概述的程序、分别处理三批玉米芯。样品通过HPLC分析的糖(图10B),并且HPLC分析有机酸(图10C)。从不同样品(样品A-E和5分钟(1/12小时)至4小时)分离的糖和有机酸组合物的差异表明洗涤的影响。如果每次洗涤的600mL中取出超过150mL,则预洗涤的影响可能更大。因此,这些数据表明洗涤可以采取的方向,而不是洗涤的极限。
如图所示,葡萄糖、果糖和蔗糖都随着预洗涤而降低。果糖和葡萄糖在NaOH处理期间大部分被分解,但是蔗糖对NaOH处理具有抗性。因为蔗糖通常不能通过过滤从其他二糖中去除,因此通过洗涤可以有效的去除蔗糖。表4示出了样品Ds中糖的比较(“无洗涤”和“两次洗涤”),表5示出了4小时样品中的糖的比较(“无洗涤”和“两次洗涤”)。
表4
Figure BDA0003598428730001091
表5
Figure BDA0003598428730001092
在“碱煮”步骤(例如,热化学步骤)开始之前,预洗涤导致减少约50%的葡萄糖和果糖以及约80%的蔗糖。在水解结束时,预洗涤导致小糖的微小差异。木糖类糖的浓度似乎增加(由负变化证明),而葡萄糖和纤维二糖的浓度降低。
检测到的大量有机酸不是洗涤产物,而是预处理产物。然而,与两次洗涤的材料相比,未洗涤的生物质似乎具有更高的有机酸总负载量。
对于引起预处理阶段的步骤,经洗涤的生物质的酸浓度似乎也较低。表6示出了样品Ds的比较,表7显示了四小时样品的比较。
表6
Figure BDA0003598428730001101
表7
Figure BDA0003598428730001102
洗涤对有机酸含量的影响在润湿阶段结束时(样品D)和水解反应结束时(4小时样品)都很明显,如“变化”所示(由“无洗涤”减去“两次洗涤”计算)(参见例如表6和7)。在润湿阶段结束时(样品D),检测了除乳酸和甲酸(n/d)之外的所有其他酸,并且对于已洗涤两次的材料,其处于较低浓度。
在水解结束时,乙酸盐含量较高(水解释放乙酸盐)。经洗涤的生物质的其他酸仍低于未洗涤的(乳酸除外,其以低浓度存在)。
样品的肉眼观察显示在图10D中。两次洗涤后,玉米芯释放的较少的有色化合物,液汁较淡。不受任何一种特定理论的束缚,有色化合物可能是洗涤期间释放的酚和有机酸。
实施例17–冷压谷物棒的比较
根据之前的配方制备冷压谷物棒(参见实施例10)。
在谷物棒中使用可溶性多糖和不溶性多糖进行比较。可溶性和不溶性多糖如下:
可溶性多糖:60mL水,含有94g干成分,所述干成分的组成为10%干w/w纤维二糖、75%木糖寡和15%提取的水溶性聚合物(如上文实施例8中所述的样品4)。
不溶性多糖:60mL水,含有94g干成分,所述干成分的组成为10%干w/w纤维二糖、75%木寡糖和15%微晶纤维素。
参考如图11A所示,尽管用不溶性多糖制成的谷物棒在置于桌上时看起来像固体棒,然而由于它们柔软质构且成分没有很好地结合在一起,当它们从桌上拿在手中时即开始散开。相比之下,用可溶性多糖制成的谷物棒可以轻松处理并保持其形状。
使用TA-XTPlusC质构分析仪(Stable Micro systems,UK)、使用“ExponentC”软件测量谷物棒的硬度和粘性。将尺寸为9.6cm x 3.8cm x 1cm(L x W x H)的样品置于探针下方中央。直径为6mm的铝制圆柱形探针用于“恢复至开始”模式和30kg称重传感器的渗透测试。一旦探针在表面上触发,其以2mm/s的速度穿透样品2mm的距离。在该点(2mm深度),记录力值并将力值作为样品“硬度”的量度。然后探针从样品中退出,此时记录最大的退出力或“粘性”。测试前速度为1mm/s,测试后速度为10mm/s。
结果表明,最硬的棒为用可溶性成分制成的棒,而对于不溶性成分、获得较低的值(图11B)。同样地,含可溶性多糖的棒具有较高的粘性,而含不溶性多糖的棒具有较低的粘性。这些结果证实了视觉和触觉观察。
表8:结果
样品 硬度(g) 黏性(g)
可溶性多糖制成的谷物棒 169.19 -20.33
不溶性多糖制成的谷物棒 47.43 -11.24
表9:质构分析仪设置
模式 测量压缩力
选项: 恢复至开始
测试前速度: 1mm/s
测试速度 2mm/s
测试后速度 10.0mm/s
距离: 2mm
触发类型: 自动-20g
称皮重模式: 自动
数据获取速率: 400pps
使用TA-XTPlusC质构分析仪(Stable Micro systems,UK)、使用“ExponentC”软件进一步测量谷物棒的硬度。尺寸为9.6cm x 3.8cm x1cm(L x W x H)的样品放置在刀下方的中央。在切割测试中使用了刀锋,“恢复至开始”模式和30kg称重传感器。一旦刀在表面触发,其以2mm/s的测试速度穿透样品5mm。在切割测试期间测得的最大力记录为样品的硬度。测试前速度为1.5mm/s,测试后速度为10mm/s。
使用切割方法获得的结果证实了使用上述穿透方法获得的结果。结果表明,最硬的棒为用可溶性多糖制成的棒,而对于含不溶性多糖的棒获得较低的值,含不溶性多糖的棒更软(图11C)。
表10:结果
样品 硬度(kg)
可溶性多糖制成的谷物棒 0.73
不溶性多糖制成的谷物棒 0.34
表11:质构分析仪设置
模式 测量压缩力
选项: 返回开始
测试前速度: 1.5mm/s
测试速度 2.5mm/s
测试后速度 10.0mm/s
距离: 5mm
触发类型: 自动-25g
称皮重模式: 自动
数据获取速率: 400pps
实施例18–含有不溶性多糖的糖组合物与含有可溶性多糖的糖组合物的粘度
制备以下样品:
样品1:60mL水,含有94g干成分,所述干成分的组成为10%干w/w纤维二糖、75%木寡糖和15%提取的水溶性聚合物。
样品2:60mL水,含有94g干成分,所述干成分的组成为10%干w/w纤维二糖、75%木寡糖和15%微晶纤维素。
实施例8的“样品4”、实施例17的“可溶性多糖”和实施例18的“样品1”基本上相同和/或可互换。此外,实施例18的“样品2”和实施例17的“不溶性多糖”基本上相同和/或可互换。
分析样品的流动特性,如实施例9中所述。数据证实可溶性多糖调节寡糖组合物的粘度(表12)。这可以以单独使用寡糖通常不能实现的方式进行溶液粘度特性微调。
表12
Figure BDA0003598428730001141
序列表
LPMO
来自鹅柄孢壳菌的AA9 LPMO(SEQ ID NO:1)。
基因库ID CAP67740
1 mkgllsvaal slavsevsah yifqqlstgs tkhgvfqyir qntnynspvt dlssndlrcn
61 eggasgantq tvtvragdsf tfhldtpvyh qgpvsvylsk apgsassydg sgtwfkikdw
121 gptfpggqwt lagsytaqlp scitdgeyll riqslgihnp ypagtpqfyi scaqikvtgg
181 gsvnpsgvai pgafkatdpg ytaniysnfn sytvpgpsvf scgsngggss pvepqpqptt
241 tlvtstrapv atqpagcava kwgqcggngw tgcttcaags tcntqnayyh qcv
地衣聚糖酶
来自枯草芽孢杆菌亚属种枯草杆菌菌株168的GH16地衣聚糖酶(SEQ ID NO:2)。
基因库ID CAA86922.1
1 mpylkrvlll lvtglfmslf avtatasaqt ggsffdpfng ynsgfwqkad gysngnmfnc
61 twrannvsmt slgemrlalt spaynkfdcg enrsvqtygy glyevrmkpa kntgivssff
121 tytgptdgtp wdeidieflg kdttkvqfny ytngagnhek ivdlgfdaan ayhtyafdwq
181 pnsikwyvdg qlkhtatnqi pttpgkimmn lwngtgvdew lgsyngvnpl yahydwvryt
241 kk
木聚糖酶
来自热纤梭菌的GH5阿拉伯木聚糖酶(SEQ ID NO:3)。
基因库ID ABN53395.1
1 mgasiktsik irtvafvsii aialsilsfi pnrayaspqr grprlnaart tfvgdngqpl
61 rgpytstewt aaapydqiar vkelgfnavh lyaecfdpry papgskapgy avneidkive
121 rtrelglylv itignganng nhnaqwardf wkfyapryak ethvlyeihn epvawgppys
181 sstanppgav dmeidvyrii rtyapetpvl lfsyavfggk ggaaealkdi rafnkavfgn
241 enavwtneav afhgyagwqe ttiaveellk agypcfmtey aggawgsgmg gldveltyel
301 erlgvswltf qyipptgvsd dvtkpeyfsa lvensglswt pdygnwpaar gvygngglar
361 etatwinnfl tgttrieaed fdwggngvsy ydtdsvnvgg qyrpdegvdi ektsdtgggy
421 nvgwisegew leytirvrnp gyynlslrva gisgsrvqvs fgnqdktgvw elpatggfqt
481 wttatrqvfl gaglqklrin alsggfnlnw ielspistgt ipdgtykfln rangktlqev
541 tgnnsiitad ykgiteqhwk iqhigggqyr issagrgwnw nwwmgfgtvg wwgtgsstcf
601 iisptgdgyy rivlvgdgtn lqissgdpsk iegkafhgga nqqwailpvs apafptglsa
661 vldssgntan ltwnaapgan synvkrstks ggpyttiatn itstnytdtg vatgtkyyyv
721 vsavsngvet lnsaeailqy pkltgtvigt qgswnnignt ihkafdgdln tffdgptang
781 cwlgldfgeg vrnvitqikf cprsgyeqrm iggifqgank edfsdavtlf titslpgsgt
841 ltsvdvdnpt gfryvrylsp dgsngniael qffgtpagee nddvhlgdin ddgninstdl
901 qmlkrhllrs irltekqlln adtnrdgrvd stdlallkry ilrvittl
来自层出节水霉的GH5木聚糖酶(SEQ ID NO:4)。
基因库ID KXS18720.1
1 marlsslial vlafvavsap alaargrprl ngktfvadsg vplrgpftst ewtpavpaan
61 ianmrnynfn aihlyaetfd pnypaagsqk pgyaatrvdq ivaatkaanm yvvivlanga
121 nngkfnlnya kdfwsfyaar yknethviye ihnepvqwgp pyisstqspg avsmnadcyk
181 iiravapdtp vllftyasig ggssaagavk daqsfntavf gnanaqwtne aiaihgywga
241 qgasdaakal naagfsvvlt efaaatspts pnggqdtvlt gfmeqqgvsw ltflhvpptg
301 vsgdvtdpnq ytnrmtaagi gfdrdpglna vgggqaapvp vpapapvpsp vpapvpavpa
361 vrtttarpap spspvpapvp apapvpapvp apvpapvpap vpapvpaspa atttrrhrtr
421 pprtttapav papppaatpk vcg
来自菊欧文氏菌的GH30木聚糖酶(SEQ ID NO:5)。
基因库ID AAB53151.1
1 mngnvslwvr hclhaalfvs atagsfsvya dtvkidanvn yqiiqgfggm sgvgwindlt
61 teqintaygs gvgqiglsim rvridpdssk wniqlpsarq avslgakima tpwsppaymk
121 snnslinggr llpanysayt shlldfskym qtngaplyai siqnepdwkp dyescewsgd
181 efksylksqg skfgslkviv aeslgfnpal tdpvlkdsda skyvsiiggh lygttpkpyp
241 laqnagkqlw mtehyvdskq sannwtsaie vgtelnasmv snysayvwwy irrsygllte
301 dgkvskrgyv msqyarfvrp galriqaten pqsnvhltay kntdgkmviv avntndsdqm
361 lslnisnanv tkfekystsa slnveyggss qvdssgkatv wlnplsvttf vsk
来自枯草芽孢杆菌枯草杆菌菌株168的GH30木聚糖酶(SEQ ID NO:6)。
基因库ID CAA97612.1
1 miprikktic vllvcftmls vmlgpgatev laasdvtvnv saekqvirgf ggmnhpawag
61 dltaaqreta fgngqnqlgf silrihvden rnnwykevet aksavkhgai vfaspwnpps
121 dmvetfnrng dtsakrlkyn kyaayaqhln dfvtfmknng vnlyaisvqn epdyahewtw
181 wtpqeilrfm renagsinar viapesfqyl knlsdpilnd pqalanmdil gthlygtqvs
241 qfpyplfkqk gagkdlwmte vyypnsdtns adrwpealdv sqhihnamve gdfqayvwwy
301 irrsygpmke dgtiskrgyn mahfskfvrp gyvridatkn pnanvyvsay kgdnkvviva
361 inksntgvnq nfvlqngsas nvsrwitsss snlqpgtnlt vsgnhfwahl paqsvttfvv
421 nr
来自卵形拟杆菌的GH30木聚糖酶(SEQ ID NO:7)。
基因库ID SDY64378.1
1 mknitllfcl flanillgac sggedekkem degkgayalf lkksitvstg esqtdvvvew
61 aktsweitlg egdivksvtp tsggsntgek qytkvrvscg anstmkkrtq tihlfdktne
121 ttvdllveqe ppfksvtltv dpsvkyqpvv gfggmynpki wcgdnlisas qldkmygagg
181 lgysilrlmi ypnesdwsad veaakaaqan gaiifacpwd ctdaladkit vngkemkhlk
241 kenyeayanh liryvtfmke kgvnlyaisv qnepdmefty wtpsevvdfv kqygariret
301 gvklmspeac gmqpeytdpi innaeafaqt dilaghlyqg ftdlssgyvk nrhdyicgvy
361 sriqgktwwm tehlfndgen sddsskwefl kwqyslnhlg keihmcmegy csayiywylk
421 rfyglmgdtd krsptsegei tkngyimahy aqyatettri kvvtnneevc ataywdektg
481 evtivllnln gasqwleipl agikkasave tnetknmevi dtglmesaeg itvllsansi
541 tsvrltf
木葡聚糖酶
来自卵形拟杆菌的GH5木葡聚糖酶(SEQ ID NO:8)。
基因库ID ALJ47680.1
1 mekqsfsdgl fsplgikrvi fmlvllttsf iscsnsdekg gslevaqeyr nlefdargsr
61 qtiqidgpae whistseswc ksshtigegk qyvnitvean dtqkertatv tvsasgapdi
121 iinvkqslys vpaydeyiap dntgmrdlts mqlsalmkag vnvgntfeav ivgndgslsg
181 detcwgnptp nkvlfegika agfdvvripv ayshqfedaa tykiksawmd kveaavkaal
241 daglyviini hweggwlnhp vdankealde rleamwkqia lrfrdyddrl lfagtnevnn
301 ddangaqpte enyrvqngfn qvfvntvrat ggrnhyrhli vqayntdvak avahftmpld
361 ivqnriflec hyydpydfti mpndenfksq wgaafaggdv satgqegdie atlsslnvfi
421 nnnvpviige ygptlrdqlt gealenhlks rndyieyvvk tcvknklvpl ywdagytekl
481 fdrttgqphn aasiaaimkg ln
来自里氏木霉的GH74木葡聚糖酶(SEQ ID NO:9)
基因库ID AAP57752.1
1 mkvsrvlalv lgavipahaa fswknvklgg gggfvpgiif hpktkgvaya rtdigglyrl
61 naddswtavt dgiadnagwh nwgidavald pqddqkvyaa vgmytnswdp sngaiirssd
121 rgatwsftnl pfkvggnmpg rgagerlavd pansniiyfg arsgnglwks tdggvtfskv
181 ssftatgtyi pdpsdsngyn sdkqglmwvt fdstssttgg atsrifvgta dnitasvyvs
241 tnagstwsav pgqpgkyfph kaklqpaeka lyltysdgtg pydgtlgsvw rydiaggtwk
301 ditpvsgsdl yfgfgglgld lqkpgtlvva slnswwpdaq lfrstdsgtt wspiwawasy
361 ptetyyysis tpkapwiknn fidvtsesps dglikrlgwm iesleidptd snhwlygtgm
421 tifgghdltn wdtrhnvsiq sladgieefs vqdlasapgg sellaavgdd ngftfasrnd
481 lgtspqtvwa tptwatstsv dyagnsvksv vrvgntagtq qvaissdgga twsidyaadt
541 smnggtvays adgdtilwst assgvqrsqf qgsfasvssl pagaviasdk ktnsvfyags
601 gstfyvskdt gssftrgpkl gsagtirdia ahpttagtly vstdvgifrs tdsgttfgqv
661 staltntyqi algvgsgsnw nlyafgtgps garlyasgds gaswtdiqgs qgfgsidstk
721 vagsgstagq vyvgtngrgv fyaqgtvggg tggtssstkq sssstssass sttlrssvvs
781 ttrastvtss rtssaagptg sgvaghyaqc ggigwtgptq cvapyvcqkq ndyyyqcv
纤维二糖水解酶
来自里氏木霉的GH7 Cel7A纤维二糖水解酶(SEQ ID NO:10)
基因库ID CAH10320.1
1 myrklavisa flataraqsa ctlqsethpp ltwqkcssgg tctqqtgsvv idanwrwtha
61 tnsstncydg ntwsstlcpd netcaknccl dgaayastyg vttsgnslsi gfvtqsaqkn
121 vgarlylmas dttyqeftll gnefsfdvdv sqlpcglnga lyfvsmdadg gvskyptnta
181 gakygtgycd sqcprdlkfi ngqanvegwe pssnnantgi gghgsccsem diweansise
241 altphpcttv gqeicegdgc ggtysdnryg gtcdpdgcdw npyrlgntsf ygpgssftld
301 ttkkltvvtq fetsgainry yvqngvtfqq pnaelgsysg nelnddycta eeaefggssf
361 sdkggltqfk katsggmvlv mslwddyyan mlwldstypt netsstpgav rgscstssgv
421 paqvesqspn akvtfsnikf gpigstgnps ggnppggnrg ttttrrpatt tgsspgptqs
481 hygqcggigy sgptvcasgt tcqvlnpyys qcl
来自里氏木霉的GH6 Cel6A纤维二糖水解酶(SEQ ID NO:11)
基因库ID AAA34210.1
1 mivgilttla tlatlaasvp leerqacssv wgqcggqnws gptccasgst cvysndyysq
61 clpgaassss straasttsr vspttsrsss atpppgsttt rvppvgsgta tysgnpfvgv
121 tpwanayyas evsslaipsl tgamataaaa vakvpsfmwl dtldktplme qtladirtan
181 knggnyagqf vvydlpdrdc aalasngeys iadggvakyk nyidtirqiv veysdirtll
241 viepdslanl vtnlgtpkca naqsayleci nyavtqlnlp nvamyldagh agwlgwpanq
301 dpaaqlfanv yknasspral rglatnvany ngwnitspps ytqgnavyne klyihaigpl
361 lanhgwsnaf fitdqgrsgk qptgqqqwgd wcnvigtgfg irpsantgds lldsfvwvkp
421 ggecdgtsds saprfdshca lpdalqpapq agawfqayfv qlltnanpsf l
eglA-黑曲霉GH12的内切葡聚糖酶A(SEQ ID NO:12)
1 mklpvtlaml aatamgqtmc sqydsasspp ysvnqnlwge yqgtgsqcvy vdklsssgas
61 whtewtwsgg egtvksysns gvtfnkklvs dvssiptsve wkqdntnvna dvaydlftaa
121 nvdhatssgd yelmiwlary gniqpigkqi atatvggksw evwygsttqa gaeqrtysfv
181 sespinsysg dinaffsylt qnqgfpassq ylinlqfgte aftggpatft vdnwtasvn
黑曲霉内切-β-1,4-葡聚糖酶GH5,CBM1(SEQ ID NO:13)
1 mrisnlivaa saasmvsalp srqmkkrdsg fkwvgtsesg aefgsalpgt lgtdytwpet
61 skiqvlrnkg mnifripflm erltpdglts sfastylsdl kstvefvtns gayavldphn
121 ygrfdgsiit stsdfktwwk nvatefadnd kvifdtnney hdmeqslvld lnqaaingir
181 aagattqyif vegnaytgaw dwttyndnls gltdsedkii yemhqyldsd ssgtsetcvs
241 stigqerlek atewlktnnk qgivgefagg vnsvceeave gmlaymsens dvwvgaswws
301 agpwwgtymy sleptdgtay stylpileky fpsgdasass sasvsvaaat stastttaaf
361 eqtttpatqg psatnsagev nqyyqcggin wtgptvcasp ytckvqndyy yqcvae
黑曲霉内切-β-1,4-葡聚糖酶B GH5(SEQ ID NO:14)
1 mkfqstllla aaagsalavp hgsghkkras vfewfgsnes gaefgtnipg vwgtdyifpd
61 pstistligk gmnffrvqfm merllpdsmt gsydeeylan lttvvkavtd ggahalidph
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181 raagasqyif vegnswtgaw twvdvndnmk nltdpedkiv yemhqyldsd gsgtsetcvs
241 gtigkeritd atqwlkdnkk vgfigeyagg sndvcrsavs gmleymannt dvwkgaswwa
301 agpwwgdyif sleppdgtay tgmldilety l
来自里氏木霉的GH30木聚糖酶(SEQ ID NO:15)
1 mkssisvvla llghsaawsy atksqyrani kinarqtyqt migggcsgaf giacqqfgss
61 glspenqqkv tqilfdenig glsivrndig sspgttilpt cpatpqdkfd yvwdgsdncq
121 fnltktalky npnlyvyada wsapgcmktv gtenlggqic gvrgtdckhd wrqayadylv
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301 wnstwdysgq laeglqwaly mhnafvnsdt sgythwwcaq ntngdnalir ldrdsyevsa
361 rlwafaqyfr farpgsvrig atsdvenvyv tayvnkngtv aipvinaahf pydltidleg
421 ikkrklseyl tdnshnvtlq srykvsgssl kvtvepramk tfwle
黑曲霉内切-β-1,4-木聚糖酶1GH11(SEQ ID NO:16)
1 mkvtaafagl lvtafaapvp epvlvsrsag inyvqnyngn lgdftydesa gtfsmywedg
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181 qhgfgnsdfn yqvmaveaws gagsasvtis s
来自里氏木霉的GH5甘露聚糖酶(SEQ ID NO:17)
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61 nhadvdstfs hisssglkvv rvwgfndvnt qpspgqiwfq klsatgstin tgadglqtld
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181 ryanstaifa welgneprcn gcstdvivqw atsvsqyvks ldsnhlvtlg deglglstgd
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301 feeygaqqnp ctneapwqtt slttrgmggd mfwqwgdtfa ngaqsnsdpy tvwynssnwq
361 clvknhvdai nggtttpppv ssttttssrt sstppppggs csplygqcgg sgytgptcca
421 qgtciysnyw ysqclnt
黑曲霉内切-β-1,4-甘露聚糖酶GH26(SEQ ID NO:18)
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61 swnwveknig vapailgsdf tyyspsavah ggkshavedv iqhagrngin alvwhwyapt
121 clldtakepw ykgfyteatc fnvseavndh gngtnyklll rdidaiaaqi krldqakvpi
181 lfrplhepeg gwfwwgaqgp apfkklwdil ydritryhnl hnmvwvcnta dpawypgndk
241 cdiatidhyp avgdhgvaad qykklqtvtn nervlamaev gpipdpdkqa renvnwaywm
301 vwsgdfiedg kqnpnqflhk vyndtrvval nwega
黑曲霉β-甘露聚糖酶GH5(SEQ ID NO:19)
1 mklsnalltl aslalanvst alpkaspaps tsssaastsf astsglqfti dgetgyfagt
61 nsywigfltd nadvdlvmgh lkssglkilr vwgfndvtsq pssgtvwyql hqdgkstint
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181 yqtyiktvve rysnssavfa welaneprcp scdtsvlynw iektskfikg ldadrmvcig
241 degfglnids dgsypyqfse glnftmnlgi dtidfgtlhl ypdswgtsdd wgngwitahg
301 aackaagkpc lleeygvtsn hcsvegswqk talsttgvga dlfwqygddl stgkspddgn
361 tiyygtsdyq clvtdhvaai gsa
黑曲霉纤维二糖水解酶A GH7(SEQ ID NO:20)
1 mhqrallfsa lltavraqqa gtlteevhps ltwqkctseg scteqsgsvv idsnwrwths
61 vndstncytg ntwdatlcpd detcaancal dgadyestyg vttdgdsltl kfvtgsnvgs
121 rlylmdtsde gyqtfnllda eftfdvdvsn lpcglngaly ftamdadggv skypankaga
181 kygtgycdsq cprdlkfidg qanvdgweps snndntgign hgsccpemdi weankistal
241 tphpcdsseq tmcegndcgg tysddryggt cdpdgcdfnp yrmgndsfyg pgktidtgsk
301 mtvvtqfitd gsgslseikr yyvqngnvia nadsnisgvt gnsittdfct aqkkafgded
361 ifaehnglag isdamssmvl ilslwddyya smewldsdyp enatatdpgv argtcdsesg
421 vpatvegahp dssvtfsnik fgpinstfsa sa
黑曲霉纤维二糖水解酶B GH7,CBM1(SEQ ID NO:21)
1 mssfqiyraa lllsilatan aqqvgtytte thpsltwqtc tsdgscttnd gevvidanwr
61 wvhstssatn cytgnewdts ictddvtcaa ncaldgatye atygvttsgs elrlnfvtqg
121 ssknigsrly lmsddsnyel fkllgqeftf dvdvsnlpcg lngalyfvam dadggtseys
181 gnkagakygt gycdsqcprd lkfingeanc dgwepssnnv ntgvgdhgsc caemdvwean
241 sisnaftahp cdsvsqtmcd gdscggtysa sgdrysgtcd pdgcdynpyr lgntdfygpg
301 ltvdtnspft vvtqfitddg tssgtlteik rlyvqngevi angastyssv ngssitsafc
361 esektlfgde nvfdkhggle gmgeamakgm vlvlslwddy aadmlwldsd ypvnssastp
421 gvargtcstd sgvpatveae spnayvtysn ikfgpigsty ssgsssgsgs sssssstttk
481 atsttlktts ttssgsssts aaqaygqcgg qgwtgpttcv sgytctyena yysqcl
来自里氏木霉的GH3β-葡糖苷酶(SEQ ID NO:22)
1 mryrtaaala latgpfarad shstsgasae avvppagtpw gtaydkakaa laklnlqdkv
61 givsgvgwng gpcvgntspa skisypslcl qdgplgvrys tgstaftpgv qaastwdvnl
121 irergqfige evkasgihvi lgpvagplgk tpqggrnweg fgvdpyltgi amgqtingiq
181 svgvqatakh yilneqelnr etissnpddr tlhelytwpf adavqanvas vmcsynkvnt
241 twacedqytl qtvlkdqlgf pgyvmtdwna qhttvqsans gldmsmpgtd fngnnrlwgp
301 altnavnsnq vptsrvddmv trilaawylt gqdqagypsf nisrnvqgnh ktnvraiard
361 givllkndan ilplkkpasi avvgsaaiig nharnspscn dkgcddgalg mgwgsgavny
421 pyfvapydai ntrassqgtq vtlsntdnts sgasaargkd vaivfitads gegyitvegn
481 agdrnnldpw hngnalvqav agansnvivv vhsvgaiile qilalpqvka vvwaglpsqe
541 sgnalvdvlw gdvspsgklv ytiakspndy ntrivsggsd sfseglfidy khfddanitp
601 ryefgyglsy tkfnysrlsv lstaksgpat gavvpggpsd lfqnvatvtv diansgqvtg
661 aevaqlyity pssaprtppk qlrgfaklnl tpgqsgtatf nirrrdlsyw dtasqkwvvp
721 sgsfgisvga ssrdirltst lsva
来自里氏木霉的AA9 LPMO(SEQ ID NO:23)
1 miqklsnllv talavatgvv ghghindivi ngvwyqaydp ttfpyesnpp ivvgwtaadl
61 dngfvspday qnpdiichkn atnakghasv kagdtilfqw vpvpwphpgp ivdylancng
121 dcetvdkttl effkidgvgl lsggdpgtwa sdvlisnnnt wvvkipdnla pgnyvlrhei
181 ialhsagqan gaqnypqcfn iavsgsgslq psgvlgtdly hatdpgvlin iytsplnyii
241 pgptvvsglp tsvaqgssaa tatasatvpg ggsgptsrtt ttarttqass rpsstppatt
301 sapaggptqt lygqcggsgy sgptrcappa tcstlnpyya qcln
来自里氏木霉的GH7β-葡聚糖酶(EGI)(SEQ ID NO:24)
基因库:AAA34212.1
1 mapsvtlplt tailaiarlv aaqqpgtstp evhpklttyk ctksggcvaq dtsvvldwny
61 rwmhdanyns ctvnggvntt lcpdeatcgk ncfiegvdya asgvttsgss ltmnqympss
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241 cdsagcgfnp ygsgyksyyg pgdtvdtskt ftiitqfntd ngspsgnlvs itrkyqqngv
301 dipsaqpggd tisscpsasa ygglatmgka lssgmvlvfs iwndnsqymn wldsgnagpc
361 sstegnpsni lannpnthvv fsnirwgdig sttnstappp ppassttfst trrssttsss
421 psctqthwgq cggigysgck tctsgttcqy sndyysqcl
来自里氏木霉的GH5β-葡聚糖酶(EGII)(SEQ ID NO:25)
基因库:ABA64553.1
1 mnksvaplll aasilyggav aqqtvwgqcg gigwsgptnc apgsacstln pyyaqcipga
61 ttittstrpp sgpttttrat stssstppts sgvrfagvni agfdfgcttd gtcvtskvyp
121 plknftgsnn ypdgigqmqh fvnedgmtif rlpvgwqylv nnnlggnlds tsiskydqlv
181 qgclslgayc ivdihnyarw nggiigqggp tnaqftslws qlaskyasqs rvwfgimnep
241 hdvnintwaa tvqevvtair nagatsqfis lpgndwqsag afisdgsaaa lsqvtnpdgs
301 ttnlifdvhk yldsdnsgth aecttnnidg afsplatwlr qnnrqailte tgggnvqsci
361 qdmcqqiqyl nqnsdvylgy vgwgagsfds tyvltetptg sgnswtdtsl vssclark
尽管已经在本文中示出和描述了本发明的优选实施方案,但是对于本领域技术人员而言显而易见的是,这些实施方案仅作为示例提供。在不脱离本发明的情况下,本领域技术人员现在将想到许多变化、改变和替换。应该理解的是,本文描述的本发明的实施方案的各种可替选方案可以用于实施本发明。
本说明书中提及的所有出版物、专利申请、已授权专利和其他文件均通过引用并入本文,其程度犹如每个单独的出版物、专利申请、已授权专利或其他文件具体且单独地通过引用整体并入。只要通过引用并入的文本中包含的定义与本公开内容中的定义相抵触,则其被排除在外。

Claims (105)

1.一种形成用于人食用的成分的方法,所述方法包括:
(a)从生物质中分离一种或多种可溶性多糖;
(b)使剩余的生物质与一种或多种酶接触以形成一种或多种寡糖;
(c)分离所述一种或多种寡糖;和
(d)将来自步骤(a)的一种或多种可溶性多糖的一部分与来自步骤(c)的一种或多种寡糖的一部分结合以形成所述成分。
2.根据权利要求1所述的方法,还包括纯化经分离的一种或多种可溶性多糖。
3.根据权利要求1或权利要求2所述的方法,还包括纯化经分离的一种或多种寡糖。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法,还包括处理所述生物质以溶解所述一种或多种可溶性多糖。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法,还包括纯化经分离的一种或多种可溶性多糖。
6.根据权利要求4所述的方法,其中所述处理包括热化学处理。
7.根据权利要求6所述的方法,其中所述热化学处理包括热水处理或热碱处理中的至少一种。
8.根据权利要求7所述的方法,其中所述热碱处理使用pH为10至14的碱。
9.根据权利要求7或权利要求8所述的方法,其中所述热碱处理使用氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸钙、氢氧化钙、硫酸铵、氢氧化铵或氨水中的至少一种。
10.根据权利要求4至9中任一项所述的方法,其中所述处理在30℃至180℃的温度下进行。
11.根据权利要求4至10中任一项所述的方法,其中所述处理进行10分钟至24小时。
12.根据权利要求1至11中任一项所述的方法,其中在步骤(d)之前干燥所述一种或多种可溶性多糖和/或所述一种或多种寡糖。
13.根据权利要求1至11中任一项所述的方法,其中在步骤(d)之后干燥所述一种或多种可溶性多糖和/或所述一种或多种寡糖。
14.根据权利要求1至13中任一项所述的方法,其中所述成分在水中可溶解。
15.根据权利要求14所述的方法,其中所述成分在水中的溶解度为在50℃下每100g水至少80g所述成分。
16.根据权利要求1至15中任一项所述的方法,还包括将所述成分与液体组合以形成液体成分。
17.根据权利要求16所述的方法,其中所述液体成分的粘度类似于玉米糖浆的粘度。
18.根据权利要求16所述的方法,其中所述液体成分的粘度类似于高果糖玉米糖浆的粘度。
19.根据权利要求16至18中任一项所述的方法,其中所述液体成分的每克卡路里比玉米糖浆或高果糖玉米糖浆更低。
20.根据权利要求16至19中任一项所述的方法,其中所述液体成分的血糖指数比玉米糖浆或高果糖玉米糖浆更低。
21.根据权利要求16至20中任一项所述的方法,其中所述液体包含水。
22.根据权利要求16至21中任一项所述的方法,其中所述液体成分包含至少20%干重的所述至少一种寡糖和至少2%干重的所述至少一种多糖。
23.根据权利要求16至22中任一项所述的方法,其中所述液体成分的粘度为5cps至100,000cps、8,000cps至100,000cps、10,000cps至50,000cps或15,000cps至25,000cps。
24.根据权利要求16至23中任一项所述的方法,其中所述液体成分包含至少2%干重的木聚糖。
25.根据权利要求16至24中任一项所述的方法,其中所述液体成分包含至少2%干重的甘露聚糖。
26.根据权利要求16至25中任一项所述的方法,其中所述液体成分包含至少2%干重的纤维素衍生物。
27.根据权利要求16至26中任一项所述的方法,其中所述液体成分的多糖浓度为0.1%至50%w/v。
28.根据权利要求16至27中任一项所述的方法,其中所述液体成分包含多糖和寡糖的量的比例为1:100至1:1。
29.根据权利要求1至28中任一项所述的方法,其中所述一种或多种可溶性多糖包含甘露聚糖、木聚糖、混合键葡聚糖、木质纤维素、半纤维素、纤维素衍生物、壳聚糖或木葡聚糖中的至少一种。
30.根据权利要求29所述的方法,其中所述纤维素衍生物包含乙酸纤维素、羟乙基纤维素或羟甲基纤维素中的至少一种。
31.根据权利要求1至30中任一项所述的方法,其中所述生物质包含甘蔗生物质、玉米生物质、小麦生物质、硬木生物质或软木生物质中的至少一种。
32.根据权利要求1至31中任一项所述的方法,其中所述一种或多种寡糖包含以下中的至少一种:
i)聚合度(DP)为2至6的纤维寡糖;
ii)DP为2至12的木寡糖;
iii)DP为3至15的阿拉伯木寡糖;
iv)DP为2至12的甘露寡糖;
v)DP为2至5的混合键葡聚糖寡糖;
vi)DP为4至12的木葡聚糖寡糖;或
vii)DP为2至12的壳寡糖。
33.根据权利要求32所述的方法,其中所述成分包含(i)至(vii)中列出的寡糖中的至少两种。
34.根据权利要求33所述的方法,其中所述成分包含相对于彼此比例为1:9至1:1的至少两种寡糖。
35.一种用于人食用的组合物,其包含:
可溶性多糖;和
寡糖,所述寡糖包含以下中的至少一种:
(i)聚合度(DP)为2至6的纤维寡糖;
(ii)DP为2至12的木寡糖;
(iii)DP为2至12的甘露寡糖;
(iv)DP为3至15的阿拉伯木寡糖;
(v)DP为2至5的混合键葡聚糖寡糖;或
(vi)DP为2至12的壳寡糖,
其中所述组合物包含低于5%干重的可溶性多糖。
36.根据权利要求35所述的组合物,其中所述组合物基本上不含不溶性多糖。
37.根据权利要求35或权利要求36所述的组合物,其中所述组合物在水中可溶解。
38.根据权利要求37所述的组合物,其中所述组合物在水中的溶解度为在50℃下每100g水至少80g所述组合物。
39.根据权利要求35至38中任一项所述的组合物,其中所述组合物还包含液体,从而形成液体成分。
40.根据权利要求39所述的组合物,其中所述液体是水。
41.根据权利要求39或权利要求40所述的组合物,其中所述液体成分包含至少20%干重的所述至少一种寡糖和至少2%干重的所述至少一种多糖。
42.根据权利要求39至41中任一项所述的组合物,其中所述液体成分的粘度为5cps至100,000cps、8,000cps至100,000cps、10,000cps至50,000cps或15,000cps至25,000cps。
43.根据权利要求39至42中任一项所述的组合物,其中所述液体成分包含至少2%干重的木聚糖。
44.根据权利要求39至43中任一项所述的组合物,其中所述液体成分包含至少2%干重的甘露聚糖。
45.根据权利要求39至44中任一项所述的组合物,其中所述液体成分包含至少2%干重的纤维素衍生物。
46.根据权利要求39至45中任一项所述的组合物,其中所述液体成分的多糖浓度为0.1%至50%w/v。
47.根据权利要求39至46中任一项所述的组合物,其中所述液体成分包含多糖和寡糖的量的比例为1:100至1:1。
48.根据权利要求35至47中任一项所述的组合物,其中所述一种或多种可溶性多糖包含甘露聚糖、木聚糖、混合键葡聚糖、木质纤维素、半纤维素、纤维素衍生物、壳聚糖或木葡聚糖中的至少一种。
49.根据权利要求48所述的组合物,其中所述纤维素衍生物包含乙酸纤维素、羟乙基纤维素或羟甲基纤维素中的至少一种。
50.根据权利要求35至49中任一项所述的组合物,其中所述生物质包含甘蔗生物质、玉米生物质、小麦生物质、硬木生物质或软木生物质中的至少一种。
51.根据权利要求35至50中任一项所述的组合物,其中所述一种或多种寡糖包含以下中的至少一种:
i)聚合度(DP)为2至6的纤维寡糖;
ii)DP为2至12的木寡糖;
iii)DP为3至15的阿拉伯木寡糖;
iv)DP为2至12的甘露寡糖;
v)DP为2至5的混合键葡聚糖寡糖;
vi)DP为4至12的木葡聚糖寡糖;或
vii)DP为2至12的壳寡糖。
52.根据权利要求51所述的组合物,其中所述组合物包含(i)至(vii)中列出的所述寡糖中的至少两种。
53.根据权利要求52所述的组合物,其中所述成分包含相对于彼此比例为1:9至1:1的至少两种寡糖。
54.一种生产用于人食用的成分的方法,所述方法包括:
(a)对生物质施用物理预处理以减小所述生物质的平均尺寸;
(b)对经物理预处理的生物质施用温和预处理,所述温和预处理包括:
(i)在水溶液中温育经物理预处理的生物质以溶解来自经物理预处理的生物质的单糖和/或二糖;和
(ii)从所述水溶液中除去溶解的单糖和/或二糖的一部分;
(c)对经温和预处理的生物质施用强预处理以提高所述生物质的消化性;
(d)在溶液或悬浮液中,使一种或多种多糖切割酶与经强预处理的生物质接触以形成一种或多种寡糖;和
(e)富集所述溶液或悬浮液以增加所述一种或多种寡糖的浓度以形成所述成分。
55.根据权利要求54所述的方法,其中所述温和预处理为温育循环。
56.根据权利要求54或权利要求55所述的方法,其中所述强预处理是热化学处理,所述热化学处理包括在酸性溶液或碱性溶液之一中温育所述经温和预处理的生物质。
57.根据权利要求54至56中任一项所述的方法,其还包括在步骤(b)(ii)中从温育溶液中除去至少25%或50%的溶解的单糖和/或二糖。
58.根据权利要求54至57中任一项所述的方法,其中步骤(c)后所述经强预处理的生物质组合物包含少于10%w/w的单糖。
59.根据权利要求54至58中任一项所述的方法,其还包括从所述溶液或悬浮液中纯化所述一种或多种寡糖。
60.根据权利要求54至57所述的方法,其中步骤(c)后所述经强预处理的生物质组合物包含少于20%w/w的单糖。
61.根据权利要求54至60中任一项所述的方法,其还包括重复步骤(b)。
62.根据权利要求61所述的方法,其中将步骤(b)进行两次、三次、四次或五次。
63.根据权利要求54至62中任一项所述的方法,其还包括重复步骤(c)。
64.根据权利要求63所述的方法,其中将步骤(c)进行两次、三次、四次或五次。
65.根据权利要求54至64中任一项所述的方法,其还包括浓缩步骤(b)中除去的溶解的单糖和/或二糖的一部分。
66.根据权利要求54至64中任一项所述的方法,其还包括弃去在步骤(b)中除去的溶解的单糖和/或二糖的一部分。
67.根据权利要求54至66中任一项所述的方法,其中在步骤(b)中除去的溶解的单糖和/或二糖的一部分不与步骤(e)的所述一种或多种寡糖的一部分组合以形成成分。
68.根据权利要求54至67中任一项所述的方法,其中所述成分包含少于15%干重的单糖。
69.根据权利要求54至68中任一项所述的方法,其中所述成分包含少于50%干重的二糖。
70.根据权利要求54至69中任一项所述的方法,其中所述成分基本上不含单糖。
71.根据权利要求54至70中任一项所述的方法,其中所述成分基本上不含二糖。
72.根据权利要求54至71中任一项所述的方法,其中所述一种或多种寡糖包含以下中的至少一种:
i)聚合度(DP)为2至6的纤维寡糖;
ii)DP为2至12的木寡糖;
iii)DP为3至15的阿拉伯木寡糖;
iv)DP为2至12的甘露寡糖;
v)DP为2至5的混合键葡聚糖寡糖;
vi)DP为4至12的木葡聚糖寡糖;或
vii)DP为2至12的壳寡糖。
73.根据权利要求72所述的方法,其中所述成分包含(i)至(vii)中列出的所述寡糖中的至少两种。
74.根据权利要求73所述的方法,其中所述成分包含相对于彼此比例为1:9至1:1的至少两种寡糖。
75.根据权利要求70至74中任一项所述的方法,其中所述成分包含占i-vii的全部寡糖的总干重w/w的小于50%总干重w/w的蔗糖、麦芽糖、乳糖、葡萄糖、果糖或半乳糖中的至少一种。
76.根据权利要求54至74中任一项所述的方法,其中所述单糖和/或二糖包含蔗糖、麦芽糖、乳糖、葡萄糖、果糖或半乳糖中的至少一种。
77.根据权利要求53至76中任一项所述的方法,其中除所述单糖和/或二糖之外,步骤(b)还溶解一种或多种有机酸。
78.根据权利要求77所述的方法,其中所述一种或多种有机酸包含草酸、酒石酸、琥珀酸、甲酸、柠檬酸、苹果酸、乳酸或乙酸中的至少一种。
79.根据权利要求78所述的方法,其中草酸、酒石酸、琥珀酸、甲酸、柠檬酸、苹果酸、乳酸和乙酸的总重量大于步骤b中溶解和除去的部分中的蔗糖、麦芽糖、乳糖、葡萄糖、果糖和半乳糖的总重量的10%。
80.根据权利要求54至76中任一项所述的方法,其中步骤(a)的所述物理预处理包括对所述生物质进行切削、砍碎、碾磨、球磨、研磨、修整或混合中的至少一种。
81.根据权利要求54至80中任一项所述的方法,其中步骤(b)的所述温和预处理在包含水的水溶液中进行。
82.根据权利要求54至81中任一项所述的方法,其中步骤(b)的所述温和预处理在5℃至150℃的温度下进行。
83.根据权利要求54至82中任一项所述的方法,其中步骤(b)的所述温和预处理进行15分钟至1小时。
84.根据权利要求54至83中任一项所述的方法,其中步骤(c)的所述强预处理包括在酸性溶液或碱性溶液中加热经温和预处理的生物质。
85.根据权利要求84所述的方法,其中所述加热在50℃至150℃的温度下进行。
86.根据权利要求84或权利要求85所述的方法,其中所述加热进行30分钟至4小时。
87.根据权利要求54至86中任一项所述的方法,其中步骤(c)包括在pH为8至11的碱性溶液中处理经温和预处理的生物质。
88.根据权利要求87所述的方法,其中所述碱性溶液包含氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸钙、氨水、硫酸铵或氢氧化铵中的至少一种。
89.根据权利要求54至88中任一项所述的方法,其中步骤(c)包括在pH为4至6的酸性溶液中处理经温和预处理的生物质。
90.根据权利要求89所述的方法,其中所述酸性溶液包含硫酸、盐酸、硝酸、磷酸、乙酸、马来酸、富马酸或草酸中的至少一种。
91.根据权利要求54至90中任一项所述的方法,其中所述生物质包含甘蔗、玉米秸秆、玉米芯、麦麸、麦秸、硬木或软木中的至少一种。
92.根据权利要求54至91中任一项所述的方法,其中所述生物质包含纤维素、甲壳素、壳聚糖、木聚糖、木葡聚糖、混合键葡聚糖、甘露聚糖或木质纤维素中的至少一种。
93.根据权利要求54至92中任一项所述的方法,其中所述一种或多种多糖切割酶包含纤维素酶、木聚糖酶、木葡聚糖酶、内切葡聚糖酶、纤维二糖水解酶、甘露聚糖酶、地衣聚糖酶,或裂解多糖单加氧酶(LPMO)中的至少一种。
94.根据权利要求54至92中任一项所述的方法,其中所述一种或多种多糖切割酶包含AA9、AA10、AA11、AA13、AA14或AA15中的至少一种。
95.根据权利要求54至92中任一项所述的方法,其中所述一种或多种多糖切割酶由丝状真菌诸如里氏木霉制备。
96.根据权利要求54至95中任一项所述的方法,其中所述一种或多种多糖切割酶可操作地连接到催化模块。
97.根据权利要求54至95中任一项所述的方法,其中所述一种或多种多糖切割酶可操作地连接到非催化模块。
98.根据权利要求97所述的方法,其中所述非催化模块为碳水化合物结合模块。
99.一种用于人食用的水溶性组合物,其包含以下寡糖中的至少一种:
i)聚合度(DP)为2至6的纤维寡糖;
ii)DP为2至12的木寡糖;
iii)DP为3至15的阿拉伯木寡糖;
iv)DP为2至12的甘露寡糖;
v)DP为2至5的混合键葡聚糖寡糖;
vi)DP为4至12的木葡聚糖寡糖;或
vii)DP为2至12的壳寡糖;和
以下单糖或二糖中的至少一种:蔗糖、麦芽糖、乳糖、果糖或半乳糖,
其中所述单糖或二糖的总干重占DP为2至12的寡糖的总干重的小于10%。
100.根据权利要求99所述的组合物,其中所述成分包含(i)至(vii)中列出的所述寡糖中的至少两种。
101.根据权利要求99或权利要求100所述的组合物,其中所述成分还包含以下有机酸中的至少一种:草酸、酒石酸、琥珀酸、甲酸、柠檬酸、苹果酸、乳酸或乙酸。
102.根据权利要求101所述的组合物,其中所述成分包含所述有机酸中的至少两种。
103.根据权利要求99至102中任一项所述的组合物,其包含(i)至(vii)中列出的相对于彼此比例为1:9至1:1的所述寡糖中的至少两种。
104.一种组合物,其包含选自以下的至少一种单糖或二糖:葡萄糖、果糖或蔗糖;选自以下的至少一种有机酸:草酸、酒石酸、琥珀酸、甲酸、柠檬酸、苹果酸、乳酸或乙酸,其中所述有机酸的总重量大于所述单糖或二糖总重量的10%。
105.一种生产用于人食用的成分的方法,所述方法包括:
(a)对生物质施用物理预处理以减小所述生物质的平均尺寸;
(b)对经物理预处理的生物质施用温和预处理,所述温和预处理包括:
(i)在水溶液中温育经物理预处理的生物质以溶解来自经物理预处理的生物质的单糖和/或二糖;和
(ii)从所述水溶液中除去溶解的单糖和/或二糖的一部分;
(c)对经温和预处理的生物质施用强预处理以溶解多糖并增加植物生物质的消化性;
(d)从所述生物质中分离一种或多种溶解的多糖;
(e)使剩余的生物质与一种或多种酶接触以形成一种或多种寡糖;
(f)分离所述一种或多种寡糖;和
(g)将来自步骤(d)的一种或多种可溶性多糖的一部分与来自步骤(f)的一种或多种寡糖的一部分结合以形成所述成分。
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