CN114058559B

CN114058559B - 表皮葡萄球菌及其应用

Info

Publication number: CN114058559B
Application number: CN202210046943.2A
Authority: CN
Inventors: 陈奕兴; 孙夏慧; 杨雨; 靖培培; 王熠; 郭青青
Original assignee: Shandong Jinli Bioengineering Co ltd
Current assignee: Shandong Jinli Bioengineering Co ltd
Priority date: 2022-01-17
Filing date: 2022-01-17
Publication date: 2022-04-08
Anticipated expiration: 2042-01-17
Also published as: CN114058559A

Abstract

本发明涉及微生物技术领域，尤其涉及表皮葡萄球菌及其应用。本发明提供了保藏编号为CCTCC NO:M 20211348的表皮葡萄球菌，该表皮葡萄球菌能够抑制金黄色葡萄球菌，维持皮肤菌群平衡。并且，该菌株具有修复、抗炎、抗氧化等功能，在医药品、化妆品等领域拥有极大应用潜力。

Description

表皮葡萄球菌及其应用

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，尤其涉及表皮葡萄球菌及其应用。

背景技术

皮肤屏障一般是指角质层、角质层间脂质以及其他物质等。其中角质间结构性脂质神经酰胺，在基底层向角质分化过程中含量逐渐增加，到达角质层排至细胞间隙，构成防止水分丢失的屏障。皮肤屏障是由角质层的表皮形成细胞和角质间的脂质形成的结构性的屏障。皮肤屏障防止人体过多水分释放，并防止如化学物质或微生物的有害物质进入我们的身体。组成死亡的角质细胞的表面的角质细胞外皮在细胞间脂质的稳定性中起重要作用。皮肤屏障受损将引起皮肤干燥, 皮肤老化、色素沉着异位性皮炎、湿疹、银屑病、鱼鳞病、日光性皮炎等皮肤敏感、刺激性皮炎、激素依赖性皮炎等皮肤油腻, 皮脂溢出性疾病,如痤疮、酒糟鼻、脂溢性皮炎。

皮肤作为人体最大的器官生活着广泛的微生物，皮肤构成了陷入部、经特化的间隙等多样形态的栖息地，帮助分布广泛的微生物能够生存。微生物与作为宿主的人构成了共生关系，皮肤微生物群在宿主中发挥重要而有用的功能，不仅因为它有能力抵抗皮肤病原体的粘附和发展，还因为它有能力与免疫系统对话和相互作用。微生物和皮肤环境之间的平衡一旦被打破，本来无害的微生物将由健康状态变为致病状态，就会引起各种皮肤疾病；反之，皮肤疾病也会导致皮肤微生物结构异常和菌群失调，所以很多皮肤问题都与皮肤微生态失衡有着密切关系。以青春痘为例，青春期毛囊皮脂腺排出大量皮脂，如果遇到毛孔堵塞的现象，皮脂形成的厌氧环境使得痤疮丙酸杆菌大量生长，激活皮肤的免疫反应，导致痤疮。

现有技术中，对于皮肤疾病（例如痤疮、皮炎等）的治疗或改善往往采用抗菌药物，甚至是抗生素。但这些物质的使用往往进一步影响了微生物与皮肤环境之间的平衡。而压制皮肤有害菌群，同时促进有益菌群生长以恢复菌群平衡则成为治疗皮肤问题的重要手段，而且皮肤有益菌群的相关代谢物质也有改善皮肤问题的巨大潜力。但如何在抑制有害菌群同时改善有益菌群，从而改善皮肤环境尚是本领域亟待解决的问题。

发明内容

有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供表皮葡萄球菌及其应用。

本发明提供了保藏编号为CCTCC NO:M 20211348的表皮葡萄球菌。

本发明还提供了保藏编号为CCTCC NO:M 20211348的表皮葡萄球菌在制备护肤的产品中的应用。

本发明中，所述护肤包括如下I）~V）中的至少一项：

I）、抗炎；

II）、抗氧化；

III）、保湿；

IV）、调节人体皮肤微生物菌群；

V）、修复皮肤屏障。

本发明中，所述抗炎包括下调炎症因子IL-8和/或NO的水平。

一些实施例中，所述抗炎是抗由LPS诱导的炎症。具体的，是抗由LPS诱导的表皮细胞的炎症。所述表皮细胞为角质形成细胞。

本发明中，所述抗氧化包括清除羟自由基和/或ABTS自由基。

本发明中，所述保湿包括上调保湿相关基因水平。

一些实施例中，所述保湿相关基因包括AQP3。具体的，所述保湿基因为表皮细胞的保湿相关基因。所述表皮细胞为角质形成细胞。

本发明中，所述调节人体皮肤微生物菌群包括抑制有害菌生长和/或促进有益菌增殖。

一些实施例中，所述有害菌包括金黄色葡萄球菌、变异链球菌、人葡萄球菌、溶血葡萄球菌、痤疮丙酸杆菌或铜绿假单胞菌中的一种或几种。

一些实施例中，所述有益菌包括表皮葡萄球菌。

本发明中，所述修复皮肤屏障包括修复皮肤细胞和/或上调屏障修复相关基因水平。

一些实施例中，所述屏障修复相关基因包括FLG、IVL、OCLN或OVOL1中的一种或几种。一些具体实施例中，所述屏障修复相关基因为表皮细胞的屏障修复相关基因。所述表皮细胞为角质形成细胞。

本发明中，所述修复皮肤细胞包括在SDS诱导条件下保护皮肤细胞的存活率。一些实施例中，所述皮肤细胞为角质形成细胞。

本发明还提供了一种护肤的产品，其原料包括保藏编号为CCTCC NO:M 20211348的表皮葡萄球菌。

本发明中，所述护肤的产品为化妆品或药物。

本发明中，所述产品的为外用制剂。

一些实施例中，本发明所述产品中包括如下i）~iv）中至少一种：

i）、保藏编号为CCTCC NO:M 20211348的表皮葡萄球菌的活菌；

ii）、灭活的保藏编号为CCTCC NO:M 20211348的表皮葡萄球菌；

iii）、保藏编号为CCTCC NO:M 20211348的表皮葡萄球菌的培养物；

iv）、保藏编号为CCTCC NO:M 20211348的表皮葡萄球菌的提取物。

本发明中，所述培养物包括培养获得的培养液，或者所述培养液经分离获得的上清液或菌体，或培养液经细胞破碎后获得的悬浮液。

本发明中，所述的提取物包括对培养物提取获得的多糖、蛋白或其他次生代谢产物。

本发明还提供了一种护肤的方法，其为给予本发明所述的护肤的产品。

本发明中，所述护肤方法中，所述给予的方式包括喷雾、涂抹、贴敷和/或导入。

本发明提供了保藏编号为CCTCC NO: M 20211348的表皮葡萄球菌，该表皮葡萄球菌能够抑制金黄色葡萄球菌，维持皮肤菌群平衡。并且，该菌株具有修复、抗炎、抗氧化等功能，在医药品、化妆品等领域拥有极大应用潜力。

生物保藏证明

表皮葡萄球菌SEUNEU-160 Staphylococcus epidermidis SELTNEU-160，于2021年11月01日保藏在中国典型培养物保藏中心，地址为:中国，武汉，武汉大学，保藏编号为CCTCC NO: M 20211348。

附图说明

图1示SEUNEU-160病原菌抑菌率；

图2示SEUNEU-160降低Raw264.7细胞NO释放率；

图3示SEUNEU-160下调炎症因子IL-8的相对表达；

图4示SEUNEU-160 促进HaCaT细胞修复；

图5示SEUNEU-160上清液上调修护相关基因表达；

图6示SEUNEU-160灭活菌体上调修护相关基因表达；

图7示SEUNEU-160上调保湿相关基因AQP3的表达；

图8示SEUNEU-160 清除自由基能力。

具体实施方式

本发明提供了表皮葡萄球菌及其应用，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。

表皮葡萄球菌存在于几乎所有健康人的体表，是正常皮肤表面绝对优势常驻菌，从脸部、手脚到躯干，甚至鼻道，都能发现它们的踪迹。它们帮助宿主的免疫系统发育成熟，是健康皮肤菌群的重要成员。本发明提供的表皮葡萄球菌菌株（Staphylococcus epidermidis）SEUNEU-160，来源于健康幼儿面部皮肤，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO: M 20211348。该菌株革兰氏阳性，显微镜下呈球状；在BHI平板上生长，可形成表面光滑不透明的圆形菌落，白色，边缘整齐；在肉汤液体培养基中呈均匀浑浊生长，久置菌体呈、白色沉淀，最适生长温度37℃。

研究表明，本发明提供的表皮葡萄球菌具有抑制金黄色葡萄球菌，维持皮肤菌群平衡，并具有修复、抗炎、抗氧化等功能，在医药品、化妆品等领域拥有极大应用潜力。

进一步的，本发明提供的保藏编号为CCTCC NO: M 20211348的表皮葡萄球菌在应用中的存在形式为存活的或灭活的，或为裂解物或提取物的形式，或为细菌产物的形式，或为上清液形式，或衍生物形式。所述衍生物形式包括但不限于：代谢产物、代谢生物产物、益生素、细胞壁或其相关成分、胞外多糖、或含有免疫原性成分的化合物。本发明实施例中，以保藏编号为CCTCC NO: M 20211348的表皮葡萄球菌的培养上清液、菌体或灭活菌体为受试物进行实验验证。

体外抑菌试验表明：本发明的表皮葡萄球菌SEUNEU-160具有抑制金黄色葡萄球菌、变异链球菌、人葡萄球菌、溶血葡萄球菌、痤疮丙酸杆菌、铜绿假单胞菌等病原菌生长的作用，抑菌率10%-65%。

体外抑菌试验表明：本发明的表皮葡萄球菌SEUNEU-160具有促进表皮葡萄球菌模式菌株CGMCC 1.4260增殖的作用，促进率12%-24%。

体外细胞实验表明：本发明的表皮葡萄球菌SEUNEU-160具有抗炎作用，能够下调金黄色葡萄球菌诱导的HaCaT细胞炎症因子IL-8表达表达，与对照相比可下调24%-35%；能够降低LPS诱导的Raw264.7细胞NO释放量，与对照组比可降低10%-35%；

体外细胞实验表明：本发明的表皮葡萄球菌SEUNEU-160具有促进表皮细胞修复的作用，SEUNEU-160提升SDS损伤的HaCaT细胞存活率10%-33%。SEUNEU-160具有上调细胞修复相关因子外皮蛋白（Involucrin）IVL、丝聚合蛋白（Filaggrin)FLG、人紧密连接蛋白(HumanOccludin)OCLN、Ovo样转录因子1（Ovo Like Transcriptional Repressor 1）OVOL1表达的作用，基因表达量上调1.5-3.9倍。

体外细胞实验表明：本发明的表皮葡萄球菌SEUNEU-160具有上调保湿因子水通道蛋白3（Aquaporin 3）AQP3的表达的功能，基因表达量上调5.0-6.9倍。

体外清除自由基实验表明，本发明的表皮葡萄球菌SEUNEU-160具有清除自由基抗氧化的功能，自由基清除率15%-21%。

本发明中，所述药物为外用制剂，其剂型包括溶液剂、洗剂、乳剂、粉剂、软膏、糊剂。其中，所述洗剂包括水粉剂或混悬剂。

本发明中，所述化妆品可分为：清洁类化妆品、护理类化妆品及美容/修饰类化妆品。所述清洁类化妆品是指以涂抹、喷洒或其他类似方法，施于人体表面(如表皮、毛发、指甲、口唇等)，起到清洁卫生作用或消除不良气味的化妆品。所述护理类化妆品是指以涂抹、喷洒或其他类似方法，施于人体表面(如表皮、毛发、指甲、口唇等)，起到保养作用的化妆品。所述美容/修饰类化妆品是指以涂抹、喷洒或其他类似方法，施于人体表面(如表皮、毛发、指甲、口唇等)，起到美容、修饰、增加人体魅力作用的化妆品。

皮肤适用的清洁类化妆品包括：洗面奶、卸妆水(乳)、清洁霜(蜜)、面膜、花露水、痒子粉、爽身粉或浴液；皮肤适用的护理类化妆品包括护肤膏霜、乳液或化妆水；皮肤适用的美容/修饰类化妆品包括：粉饼、胭脂、眼影、眼线笔(液)、眉笔、香水或古龙水；毛发适用清洁类化妆品包括洗发液、洗发膏或剃须膏；毛发适用的护理类化妆品包括护发素、发乳、发油/发蜡或焗油膏；毛发适用的美容/修饰类化妆品包括：定型摩丝/发胶、染发剂、烫发剂、睫毛液(膏)、生发剂或脱毛剂；指甲适用的清洁类化妆品包括洗甲液；指甲适用的护理类化妆品包括护甲水（霜）、指甲硬化剂；指甲适用的美容/修饰类化妆品包括指甲油；口唇适用的清洁类化妆品包括唇部卸妆液；口唇适用的护理类化妆品包括润唇膏；口唇适用的及美容/修饰类化妆品包括：唇膏、唇彩或唇线笔。

本发明采用的试材皆为普通市售品，皆可于市场购得。下面结合实施例，进一步阐述本发明：

实施例1：SEUNEU-160的分离

将无菌棉签蘸取生理盐水于23月龄健康男婴面部皮肤采样。剪取棉签头于10ml生理盐水中震荡混匀，取上清划线于BHI平板，37℃恒温培养36h后，挑取白色菌落反复接种筛选，直至得到均匀的单个菌落，命名为SEUNEU-160。

革兰氏染色镜检：菌株SEUNEU-160为G+，显微镜下呈球状；在BHI平板上生长，可形成白色、表面光滑圆润不透明圆形小菌落，边缘整齐；在BHI液体培养基中呈均匀浑浊生长，久置菌体呈白色沉淀。

实施例2：SEUNEU-160的核酸鉴定

16s rRNA基因序列分析：挑取单菌落置BHI离心管中，37℃培养过夜后，离心收集菌体，按照DNA提取试剂盒步骤进行操作。引物用细菌通用引物27F,1492R，PCR扩增体系为50μL体系，95℃预变性5min；94℃ 15sec，57℃ 15sec，72℃ 40sec，35个循环；72℃延伸10min。

结果表明：PCR产物测序结果与GenBank中已发表的标准序列进行同源性比较后得出SEUNEU-160菌株为表皮葡萄球菌（Staphylococcus epidermidis）。

实施例3：SEUNEU-160致病菌抑菌实验-菌液浓度变化

1.表皮葡萄球菌SEUNEU-160菌液制备：

将活化的表皮葡萄球菌SEUNEU-160菌液以BHI液体培养基培养于37℃培养箱静置培养17h，检测并调整OD₆₀₀=2.0，121℃，30min灭活，离心取上清液，0.22μm滤膜过滤，得待测样品。

2、病原菌菌液制备：

将病原菌以BHI培养基37℃培养18h，检测OD₆₀₀测定菌数，调整病原菌菌液浓度为1×10⁸ cells/ml。

3、抑制病原菌实验

将待测样品以10%体积分数加入病原菌中，37℃培养2h，以菌液浓度（OD₆₀₀）降低百分比评价对病原菌生长影响。结果如表1：

结果显示SEUNEU-160对金黄色葡萄球菌、变异链球菌、人葡萄球菌、溶血葡萄球菌、痤疮丙酸杆菌、铜绿假单胞菌等病原菌均具有抑制作用。SEUNEU-160病原菌抑菌率结果见图1。

实施例4：SEUNEU-160促进表皮葡萄球菌生长实验

将活化的表皮葡萄球菌SEUNEU-160菌液以BHI液体培养基培养于37℃培养箱静置培养16-18h，检测OD₆₀₀测定菌数，调整OD₆₀₀=2.0，121℃，30min灭活，离心取上清，0.22μm滤膜过滤得灭活上清液。

灭活上清液以10%体积分数加入初始OD₆₀₀=0.2的表皮葡萄球菌（模式菌株CGMCC1.4260）菌液中，37℃静置2h，以相对菌液浓度（样品OD₆₀₀与对照比值）评价SEUNEU-160对表皮葡萄球菌生长的影响。结果如表2：

结果显示，SEUNEU-160灭活上清液对表皮葡萄球菌CGMCC 1.4260生长具有促进作用。

实施例5：SEUNEU-160降低LPS诱导的Raw264.7细胞NO释放实验

1、表皮葡萄球菌样品制备

将表皮葡萄球菌SEUNEU-160用BHI培养基培养过夜，检测OD600，调整菌液浓度至1×10⁸cells/mL，离心后，菌体用1×PBS重悬后121℃高压灭菌30min得灭活菌体，离心上清用0.22μm滤膜过滤得上清液。

2、细胞制备

将Raw264.7细胞消化后，以每孔2×10⁵ cells/孔接种至24孔板，5%二氧化碳培养箱37℃培养过夜。

3、SEUNEU-160添加及LPS刺激

实验分为三组，

LPS对照组：受试细胞中不添加SEUNEU-160成分，

受试组1：受试细胞中添加SEUNEU-160上清液5%（体积分数）；

受试组2：受试细胞中添加SEUNEU-160灭活菌体10%（质量分数）。

各组细胞于5%二氧化碳培养箱37℃孵育2h，然后每孔加入100ngLPS诱导Raw264.7发炎，20h后取细胞培养上清，用NO含量检测试剂盒检测NO含量，共进行三批实验，每次3个复孔。

结果如表3：

与LPS对照组相比，SEUNEU-160上清液与灭活菌体对LPS诱导的Raw264.7细胞产生的NO均具有抑制作用，因此SEUNEU-160具有抗炎的作用。SEUNEU-160降低Raw264.7细胞NO释放结果见图2。

实施例6：SEUNEU-160降低金黄色葡萄球菌诱导的HaCaT炎症因子IL-8表达量

1、表皮葡萄球菌萄球菌样品制备

将表皮葡萄球菌萄球菌用BHI培养过夜，检测OD₆₀₀，调整菌液浓度至1×10⁸cells/ml，离心后，菌体121℃高压灭菌30min得菌体，离心上清用0.22μm滤膜过滤得上清液。

2、细胞制备

将HaCaT细胞消化后以4×10⁵ cells/孔接种至24孔板，5%二氧化碳培养箱37℃培养过夜。

3、金黄色葡萄球菌制备及添加

金黄色葡萄球菌接入肉汤培养基，37℃摇床培养过夜，用MEM无血清培养基调整菌液浓度至3×10⁹ cells/mL，每孔100μl添加入培养过夜的HaCaT细胞中，刺激细胞产生炎症因子，3h后弃去细胞培养基，PBS清洗5次，每孔重新加入1ml MEM无血清培养基。

4、SEUNEU-160样品添加

将上清液液5%加入金黄色葡萄球菌刺激过的HaCaT细胞中，每组3个复孔，培养过夜，实验另设不添加SEUNEU-160成分的对照组。

5、检测炎症因子IL-8表达量

将上述HaCaT细胞弃去培养基后，用RNA提取试剂盒提取RNA，检测RNA浓度及纯度，将所有样品调整至1000ng进行反转录及qPCR（GAPDH作为内参）。结果如表4：

表皮葡萄球菌SEUNEU-160能够下调金黄色葡萄球菌诱导的HaCaT炎症因子IL-8表达量，本发明的表皮葡萄球菌萄球菌具有抗炎作用。SEUNEU-160下调炎症因子IL-8的表达结果见图3。

实施例7：SEUNEU-160促进SDS诱导的HaCaT细胞损伤修复实验

接种HaCaT细胞（5×10⁵cells/孔）至96孔板，过夜培养至细胞贴壁。配制50μg/mlSDS，每孔加入100μL，孵育8h。

实验分为三组，对照组不添加含有SEUNEU-160的成分，受试组1加入5vol%SEUNEU-160的灭活上清液，受试组2加入10wt% SEUNEU-160的灭活菌体。

然后各组继续孵育24h。加入10μLCCK-8溶液，孵育4h，检测450nm处吸光值。

细胞存活率=（A实验组-A空白对照组）/（A阴性对照组-A空白对照组）。

结果如表5：

SEUNEU-160上清液及灭活菌体均对HaCaT细胞SDS损伤具有修复作用。SEUNEU-160促进HaCaT细胞修复结果见图4。

实施例8：SEUNEU-160促进HaCaT屏障修复相关基因表达实验

接种人永生化角质形成细胞HaCaT细胞（5×10⁵ cells/孔）至6孔板，过夜培养至细胞贴壁。实验分为三组，control的孔中不加入受试物，受试组1的细胞中加入SEUNEU-160菌株灭活上清液5vol%，受试组2加入灭活菌体10wt%。各组分别培养24h后，加入裂解液，提取细胞总RNA，并反转为cDNA，进行qPCR检测FLG、IVL、OCLN、OVOL1基因的表达。根据公式进行计算表达变化倍数。

公式：F=2^-ΔΔCT

结果如表6~7：

结果显示加入SEUNEU-160具有促进皮肤屏障修护的作用。SEUNEU-160上调修复相关基因表达结果见图5、图6。

实施例9：SEUNEU-160上调HaCaT保湿相关基因表达实验

接种人永生化角质形成细胞HaCaT细胞（5×10⁵ cells/mL）至6孔板，过夜培养至细胞贴壁。实验分为二组，control的孔中不加入受试物受试组加入灭活菌体10wt%。各组分别培养24h后，加入裂解液，提取细胞总RNA，并反转录为cDNA，进行qPCR检测保湿相关基因水通道蛋白AQP3的表达。根据公式进行计算表达变化倍数。

公式：F=2^-ΔΔCT

结果如表8：

结果显示加入SEUNEU-160灭活菌体孵育后，保湿相关基因水通道蛋白AQP3基因表达上调，SEUNEU-160上调6.3倍，因此SEUNEU-160具有保湿的作用。SEUNEU-160灭活菌体上调保湿基因AQP3表达结果见图7。

实施例10： SEUNEU-160自由基清除能力检测

1.表皮葡萄球菌SEUNEU-160菌液制备：

将活化的表皮葡萄球菌SEUNEU-160菌液以BHI液体培养基培养于37℃培养箱静置培养16-18h，检测并调整OD₆₀₀=2.0，121℃，30min灭活，离心取上清液，0.22μm滤膜过滤获得待测样品。

2.羟自由基清除能力检测

试剂配制和检测方法按照索莱宝羟自由基清除能力检测试剂盒说明书进行。测定各样品536nm吸光度，求平均值并计算各样品清除率，公式如下：

羟自由基清除率 D%=[（A测定-A对照）÷（A空白-A对照）]×100%

3.ABTS自由基清除能力检测

试剂配制和检测方法按照索莱宝羟自由基清除能力检测试剂盒说明书进行。测定各样品405nm吸光度，求平均值并计算各样品清除率，公式如下：

ABTS自由基清除率 D%=[A空白-（A测定-A对照）]÷A空白×100%

结果如表9：

结果显示，SEUNEU-160对羟自由基、ABTS自由基均具有清除作用，因此SEUNEU-160具有自由基清除能力。SEUNEU-160 清除自由基结果见图8。

以上仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims

1.保藏编号为CCTCC NO:M 20211348的表皮葡萄球菌。

2.权利要求1所述的表皮葡萄球菌在制备护肤的产品中的应用。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述护肤包括如下I）~V）中的至少一项：

I）、抗炎；

II）、抗氧化；

III）、保湿；

IV）、调节人体皮肤微生物菌群；

V）、修复皮肤屏障。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述抗炎为下调炎症因子IL-8和/或NO的水平。

5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述抗氧化为清除羟自由基和/或ABTS自由基。

6.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述保湿为上调保湿基因水平，所述保湿基因为AQP3。

7.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述调节人体皮肤微生物菌群为抑制有害菌生长和/或促进有益菌增殖；

所述有害菌为金黄色葡萄球菌、变异链球菌、人葡萄球菌、溶血葡萄球菌、痤疮丙酸杆菌或铜绿假单胞菌中的一种或几种；

所述有益菌为表皮葡萄球菌。

8.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述修复皮肤屏障为修复皮肤细胞和/或上调屏障修复基因水平；所述屏障修复基因为FLG、IVL、OCLN或OVOL1中的一种或几种。

9.一种护肤的产品，其特征在于，其原料包括权利要求1所述的表皮葡萄球菌。

10.根据权利要求9所述的产品，其特征在于，其包括权利要求1所述的表皮葡萄球菌的灭活上清液和/或灭活菌株。