CN113968912A - 靶向g-蛋白偶联受体的嵌合抗原受体及其用途 - Google Patents
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Abstract
本发明公开的主题提供用于治疗多发性骨髓瘤的方法和组合物。本发明公开的主题涉及特异性地靶向G‑蛋白偶联受体(例如，G‑蛋白偶联受体C家族5组D成员(GPRC5D))的嵌合抗原受体(CAR)和包含此类CAR的免疫应答细胞。本发明公开的靶向G‑蛋白偶联受体(例如GPRC5D)的CAR具有增强的免疫活化性能，包括抗肿瘤活性。
Description
本申请是2017年8月4日提交到中华人民共和国国家知识产权局 的发明名称为“靶向G-蛋白偶联受体的嵌合抗原受体及其用途”、申请 号为“201580075557.4”的发明专利申请的分案申请。
相关申请的交叉引用
本申请要求2014年12月5日提交的序列号为62/088,286的美国 临时专利申请的优先权，其全部内容引入本文以供参考，并要求其优 先权。
技术领域
本发明公开的主题提供用于治疗癌症的方法和组合物。其涉及特 异性地靶向G-蛋白偶联受体(例如，G-蛋白偶联受体C家族5组D成 员(GPRC5D))的嵌合抗原受体(CAR)、包含此类CAR的免疫应答 细胞、和使用此类细胞用于治疗癌症(例如，多发性骨髓瘤)的方法。
背景技术
基于细胞的免疫疗法是对癌症治疗具有治愈潜力的疗法。T细胞和 其它免疫细胞通过引入编码针对抗原的人工或合成受体的遗传物质被 修饰为靶向肿瘤抗原，所述受体称为嵌合抗原受体(CAR)，其对所选 择的抗原具有特异性。使用CAR的靶向T细胞疗法已经显示最近在治 疗血液恶性肿瘤中获得临床成功。
多发性骨髓瘤(MM)是第二常见的血液恶性肿瘤。9大约25％的 患者具有高危细胞遗传学，这预示中位生存期低于2年。10,11尽管已 经取得了近期的进展，但无论细胞遗传学如何，该疾病仍然被认为是 在同种异体移植的免疫治疗性移植物抗骨髓瘤(GvM)效应之外的不 治之症。然而，同种异体移植受到条件不符(ineligibility)和高比率的 移植相关发病率和死亡率的限制。12与GvM效应相似，可以通过自体 过继性T细胞疗法以最小的毒性实现潜在的治愈性T细胞效应。
骨髓瘤可能是检测过继性T细胞疗法的理想疾病。第一，如上所 述，同种异体移植物证明，T细胞可以是治愈性治疗，即使比如在非清 髓移植或移植后供体淋巴细胞输注之后使用最少或没有伴随的化学疗 法。第二，条件化学疗法(conditioning chemotherapy)，可能是通过消 耗调节性T细胞(Tregs)的机制，增强过继性T细胞疗法的效力，5,13这样，立即的自体移植后期间可以是施用T细胞的最佳时间，并且骨 髓瘤是其中自体干细胞移植是护理标准的少数几种疾病之一。第三， 免疫调节药物来那度胺可以改善基于CAR的疗法，如已经在小鼠中所 示，14并且来那度胺通常用于治疗MM。第四，与实体瘤或髓外CLL 相比，5过继性T细胞疗法在骨髓主要疾病如ALL中最有效，7,8并且 与ALL类似，骨髓瘤是骨髓的疾病。
尽管有各种理由预期过继性T细胞疗法可能在MM中发挥作用， 但将过继性T细胞疗法推至骨髓瘤也产生独特的挑战。与其他B细胞 恶性肿瘤不同，仅在2％的骨髓瘤患者中见到CD19的表达。15此外， 与CD19不同，骨髓瘤中常见的细胞外免疫表型标志物(CD138、CD38 和CD56)都在其他基本细胞类型上共表达，并且我们预测针对任意这 些靶标的CAR会导致不可接受的“肿瘤脱靶、靶标中靶(off tumor,on target)”毒性7，这即使在抗体耐受性良好的靶标中也可能是致命的， 如使用靶向HER2的CAR的情况。16为了解决这些挑战，我们已经鉴 定了具有预测的高MM表达和基本正常组织有限表达的细胞外靶标， 其可以是用于MM的过继性T细胞疗法的最佳靶标。因此，需要新型 治疗策略来设计靶向在MM细胞中高度表达并且在正常组织中有限表 达的抗原的CAR，用于治疗多发性骨髓瘤，这种策略能够以最小的毒 性和免疫原性诱导有效的肿瘤根除。
发明内容
本发明公开的主题总体提供特异性地靶向G-蛋白偶联受体的嵌合 抗原受体(CAR)、包含此类CAR的免疫应答细胞、以及这些CAR和 免疫应答细胞用于治疗多发性骨髓瘤的用途。
本发明公开的主题提供CAR。在一个非限制性实例中，CAR包含 细胞外抗原结合结构域、跨膜结构域和细胞内结构域，其中细胞外抗 原结合结构域特异性地结合G-蛋白偶联受体。在某些实施方式中，G- 蛋白偶联受体是G-蛋白偶联受体C家族5组D成员(GPRC5D)。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域以约1x10-9M至约3x10-6M 的结合亲和力(KD)特异性地结合GPRC5D。在某些实施方式中，细 胞外抗原结合结构域是单链可变区片段(scFv)。在某些实施方式中， 细胞外抗原结合结构域是鼠scFv。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是人scFv。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是任 选交联的Fab。在某些实施方式中，细胞外结合结构域是F(ab)2。在某 些实施方式中，任何前述分子可以包含在具有异源序列的融合蛋白中 以形成细胞外抗原结合结构域。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含含有与选自SEQ ID NO:1、5、9、13、17、21、25、29、33、37、41、45、49、53、57、 61、65、69、73、77、81、85、89、93、302、314、326、338、350、 362、374和386的氨基酸序列至少约80％、约81％、约82％、约83％、 约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、约89％、约90％、约91％、 约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％ 同源的氨基酸序列的重链可变区。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含含有与选自SEQ ID NO:2、6、10、14、18、22、26、30、34、38、42、46、50、54、 58、62、66、70、74、78、82、86、90、94、303、315、327、339、 351、363、375和387的氨基酸序列至少约80％、约81％、约82％、 约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、约89％、约90％、 约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％ 或约99％同源的氨基酸序列的轻链可变区。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含(a)含有与选自 SEQ ID NO:1、5、9、13、17、21、25、29、33、37、41、45、49、 53、57、61、65、69、73、77、81、85、89、93、302、314、326、338、 350、362、374和386的氨基酸序列至少约80％、约81％、约82％、 约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、约89％、约90％、 约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％ 或约99％同源的氨基酸序列的重链可变区；和(b)含有与选自SEQ ID NO:2、6、10、14、18、22、26、30、34、38、42、46、50、54、58、 62、66、70、74、78、82、86、90、94、303、315、327、339、351、 363、375和387的氨基酸序列至少约80％、约81％、约82％、约83％、 约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、约89％、约90％、约91％、 约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％ 同源的氨基酸序列的轻链可变区。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含含有选自SEQ ID NO:1、5、9、13、17、21、25、29、33、37、41、45、49、53、57、 61、65、69、73、77、81、85、89、93、302、314、326、338、350、 362、374和386的氨基酸序列及其保守修饰的重链可变区。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含含有选自SEQ ID NO:2、6、10、14、18、22、26、30、34、38、42、46、50、54、58、 62、66、70、74、78、82、86、90、94、303、315、327、339、351、 363、375和387的氨基酸序列及其保守修饰的轻链可变区。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含(a)含有选自SEQ ID NO:1、5、9、13、17、21、25、29、33、37、41、45、49、53、57、 61、65、69、73、77、81、85、89、93、302、314、326、338、350、 362、374和386的氨基酸序列及其保守修饰的重链可变区，和(b)含 有选自SEQID NO:2、6、10、14、18、22、26、30、34、38、42、46、 50、54、58、62、66、70、74、78、82、86、90、94、303、315、327、 339、351、363、375和387的氨基酸序列及其保守修饰的轻链可变区。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含重链可变区，其 包含具有选自SEQ ID NO:1、5、9、13、17、21、25、29、33、37、 41、45、49、53、57、61、65、69、73、77、81、85、89、93、302、 314、326、338、350、362、374和386的序列的氨基酸。在某些实施 方式中，细胞外抗原结合结构域包含轻链可变区，其包含具有选自SEQ ID NO:2、6、10、14、18、22、26、30、34、38、42、46、50、54、 58、62、66、70、74、78、82、86、90、94、303、315、327、339、 351、363、375和387的序列的氨基酸。在某些实施方式中，细胞外抗 原结合结构域包含重链可变区，其包含具有SEQ ID NO:53所示序列 的氨基酸。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含重链可变 区，其包含具有SEQ ID NO:57所示序列的氨基酸。在某些实施方式 中，细胞外抗原结合结构域包含重链可变区，其包含具有SEQ ID NO: 61所示序列的氨基酸。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包 含重链可变区，其包含具有SEQ ID NO:65所示序列的氨基酸。在某 些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含重链可变区，其包含具有 SEQ ID NO:69所示序列的氨基酸。在某些实施方式中，细胞外抗原结 合结构域包含轻链可变区，其包含具有SEQ ID NO:54所示序列的氨 基酸。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含轻链可变区， 其包含具有SEQ ID NO:58所示序列的氨基酸。在某些实施方式中， 细胞外抗原结合结构域包含轻链可变区，其包含具有SEQ ID NO:62 所示序列的氨基酸。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含 轻链可变区，其包含具有SEQ ID NO:66所示序列的氨基酸。在某些 实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含轻链可变区，其包含具有SEQ IDNO:70所示序列的氨基酸。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结 构域包含：(a)包含具有SEQ ID NO:1所示序列的氨基酸的重链可变 区，和包含具有SEQ ID NO:2所示序列的氨基酸的轻链可变区；(b) 包含具有SEQ ID NO:5所示序列的氨基酸的重链可变区，和包含具有SEQ ID NO:6所示序列的氨基酸的轻链可变区；(c)包含具有SEQ ID NO:9所示序列的氨基酸的重链可变区，和包含具有SEQ ID NO:10所 示序列的氨基酸的轻链可变区；(d)包含具有SEQ ID NO:13所示序 列的氨基酸的重链可变区，和包含具有SEQ ID NO:14所示序列的氨 基酸的轻链可变区；(e)包含具有SEQ ID NO:17所示序列的氨基酸的 重链可变区，和包含具有SEQ ID NO:18所示序列的氨基酸的轻链可 变区；(f)包含具有SEQ ID NO:21所示序列的氨基酸的重链可变区， 和包含具有SEQ ID NO:22所示序列的氨基酸的轻链可变区；(g)包 含具有SEQ ID NO:25所示序列的氨基酸的重链可变区，和包含具有 SEQ ID NO:26所示序列的氨基酸的轻链可变区；(h)包含具有SEQ ID NO:29所示序列的氨基酸的重链可变区，和包含具有SEQ ID NO:30 所示序列的氨基酸的轻链可变区；(i)包含具有SEQ IDNO:33所示序 列的氨基酸的重链可变区，和包含具有SEQ ID NO:34所示序列的氨 基酸的轻链可变区；(j)包含具有SEQ ID NO:37所示序列的氨基酸的 重链可变区，和包含具有SEQID NO:38所示序列的氨基酸的轻链可 变区；(k)包含具有SEQ ID NO:41所示序列的氨基酸的重链可变区， 和包含具有SEQ ID NO:42所示序列的氨基酸的轻链可变区；(l)包含 具有SEQ ID NO:45所示序列的氨基酸的重链可变区，和包含具有SEQ ID NO:46所示序列的氨基酸的轻链可变区；(m)包含具有SEQ ID NO: 49所示序列的氨基酸的重链可变区，和包含具有SEQ ID NO:50所示 序列的氨基酸的轻链可变区；(n)包含具有SEQ ID NO:53所示序列的氨基酸的重链可变区，和包含具有SEQ ID NO:54所示序列的氨基 酸的轻链可变区；(o)包含具有SEQ ID NO:57所示序列的氨基酸的 重链可变区，和包含具有SEQ ID NO:58所示序列的氨基酸的轻链可 变区；(p)包含具有SEQ ID NO:61所示序列的氨基酸的重链可变区， 和包含具有SEQ ID NO:62所示序列的氨基酸的轻链可变区；(q)包 含具有SEQ ID NO:65所示序列的氨基酸的重链可变区，和包含具有 SEQ ID NO:66所示序列的氨基酸的轻链可变区；(r)包含具有SEQ ID NO:69所示序列的氨基酸的重链可变区，和包含具有SEQ IDNO:70 所示序列的氨基酸的轻链可变区；(s)包含具有SEQ ID NO:73所示序 列的氨基酸的重链可变区，和包含具有SEQ ID NO:74所示序列的氨 基酸的轻链可变区；(t)包含具有SEQID NO:77所示序列的氨基酸的 重链可变区，和包含具有SEQ ID NO:78所示序列的氨基酸的轻链可 变区；(u)包含具有SEQ ID NO:81所示序列的氨基酸的重链可变区， 和包含具有SEQ ID NO:82所示序列的氨基酸的轻链可变区；(v)包 含具有SEQ ID NO:85所示序列的氨基酸的重链可变区，和包含具有 SEQ ID NO:86所示序列的氨基酸的轻链可变区；(w)包含具有SEQ ID NO:89所示序列的氨基酸的重链可变区，和包含具有SEQ ID NO:90 所示序列的氨基酸的轻链可变区；(x)包含具有SEQ ID NO:93所示 序列的氨基酸的重链可变区，和包含具有SEQ ID NO:94所示序列的 氨基酸的轻链可变区，(y)包含具有SEQ ID NO:302所示序列的氨基 酸的重链可变区，和包含具有SEQ ID NO:303所示序列的氨基酸的轻 链可变区；(z)包含具有SEQ ID NO:314所示序列的氨基酸的重链可 变区，和包含具有SEQ IDNO:315所示序列的氨基酸的轻链可变区； (aa)包含具有SEQ ID NO:326所示序列的氨基酸的重链可变区，和 包含具有SEQ ID NO:327所示序列的氨基酸的轻链可变区；(ab)包含 具有SEQ ID NO:338所示序列的氨基酸的重链可变区，和包含具有 SEQ ID NO:339所示序列的氨基酸的轻链可变区；(ac)包含具有SEQ ID NO:350所示序列的氨基酸的重链可变区，和包含具有SEQ ID NO: 351所示序列的氨基酸的轻链可变区；(ad)包含具有SEQ ID NO:362所示序列的氨基酸的重链可变区，和包含具有SEQ ID NO:363所示序 列的氨基酸的轻链可变区；(ae)包含具有SEQ ID NO:374所示序列的 氨基酸的重链可变区，和包含具有SEQ IDNO:375所示序列的氨基酸 的轻链可变区；或(af)包含具有SEQ ID NO:386所示序列的氨基酸 的重链可变区，和包含具有SEQ ID NO:387所示序列的氨基酸的轻链 可变区。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有 SEQ ID NO:53所示序列的氨基酸的重链可变区；和包含具有SEQ ID NO:54所示序列的氨基酸的轻链可变区。在某些实施方式中，细胞外 抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:57所示序列的氨基酸的 重链可变区；和包含具有SEQ ID NO:58所示序列的氨基酸的轻链可 变区。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:61所示序列的氨基酸的重链可变区；和包含具有SEQID NO: 62所示序列的氨基酸的轻链可变区。在另一个实施方式中，细胞外抗 原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:65所示序列的氨基酸的重 链可变区；和包含具有SEQ ID NO:66所示序列的氨基酸的轻链可变 区。在又一个实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:69所示序列的氨基酸的重链可变区；和包含具有SEQ ID NO: 70所示序列的氨基酸的轻链可变区。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含所述重链和轻链 两者，任选地具有在重链可变区和轻链可变区之间的接头序列，例如 接头肽。例如，在某些非限制性实施方式中，细胞外抗原结合结构域 包含：(i)包含具有SEQ ID NO:57所示序列的氨基酸的重链可变区和 (ii)包含具有SEQ ID NO:58所示序列的氨基酸的轻链可变区，任选 地具有(iii)在重链可变区和轻链可变区之间的接头序列，例如接头肽。 在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：(i)包含具有SEQ ID NO:61所示序列的氨基酸的重链可变区和(ii)包含具有SEQ ID NO:62 所示序列的氨基酸的轻链可变区，任选地具有(iii)在重链可变区和轻 链可变区之间的接头序列，例如接头肽。在某些实施方式中，细胞外 抗原结合结构域包含：(i)包含具有SEQ ID NO:53所示序列的氨基酸 的重链可变区和(ii)包含具有SEQ ID NO:54所示序列的氨基酸的轻 链可变区，任选地具有(iii)在重链可变区和轻链可变区之间的接头序 列，例如接头肽。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：(i)包含具有SEQ ID NO:61所示序列的氨基酸的重链可变区和(ii)包含 具有SEQ ID NO:62所示序列的氨基酸的轻链可变区，任选地具有(iii) 在重链可变区和轻链可变区之间的接头序列，例如接头肽。在某些实 施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：(i)包含具有SEQ IDNO:65 所示序列的氨基酸的重链可变区和(ii)包含具有SEQ ID NO:66所示 序列的氨基酸的轻链可变区，任选地具有(iii)在重链可变区和轻链可 变区之间的接头序列，例如接头肽。在某些实施方式中，细胞外抗原 结合结构域包含：(i)包含具有SEQ ID NO:69所示序列的氨基酸的重 链可变区和(ii)包含具有SEQ ID NO:70所示序列的氨基酸的轻链可 变区，任选地具有(iii)在重链可变区和轻链可变区之间的接头序列， 例如接头肽。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含(a)包含选自SEQ ID NO:126、132、138、144、150、156、162、168、174、180、186、 192、198、204、210、216、222、228、234、240、246、252、258、 264、306、318、330、342、354、366、378和390的氨基酸序列的重 链可变区CDR3；和(b)包含选自SEQ ID NO:129、135、141、147、 153、159、165、171、177、183、189、195、201、207、213、219、 225、231、237、243、249、255、261、267、309、321、333、345、 357、369、381和393的氨基酸序列的轻链可变区CDR3。
在某些实施方式中，重链可变区CDR2包含选自SEQ ID NO:125、 131、137、143、149、155、161、167、173、179、185、191、197、 203、209、215、221、227、233、239、245、251、257、263、305、 317、329、341、353、365、377和389的氨基酸序列及其保守修饰； 并且(b)轻链可变区CDR2包含选自SEQ ID NO:128、134、140、146、 152、158、164、170、176、182、188、194、200、206、212、218、224、230、236、242、248、254、260、266、308、320、332、344、 356、368、380和392的氨基酸序列及其保守修饰。
在某些实施方式中，重链可变区CDR1包含选自SEQ ID NO:124、 130、136、142、148、154、160、166、172、178、184、190、196、 202、208、214、220、226、232、238、244、250、256、262、304、 316、328、340、352、364、376和388的氨基酸序列及其保守修饰； 并且(b)轻链可变区CDR1包含选自127、133、139、145、151、157、 163、169、175、181、187、193、199、205、211、217、223、229、 235、241、247、253、259、265、307、319、331、343、355、367、 379和391的氨基酸序列及其保守修饰。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：(a)包含选自 SEQ ID NO:124、130、136、142、148、154、160、166、172、178、 184、190、196、202、208、214、220、226、232、238、244、250、 256、262、304、316、328、340、352、364、376和388的氨基酸序列 的重链可变区CDR1；(b)包含选自SEQ ID NO:125、131、137、143、 149、155、161、167、173、179、185、191、197、203、209、215、 221、227、233、239、245、251、257、263、305、317、329、341、 353、365、377和389的氨基酸序列的重链可变区CDR2；(c)包含选 自SEQ ID NO:126、132、138、144、150、156、162、168、174、180、 186、192、198、204、210、216、222、228、234、240、246、252、 258、264、306、318、330、342、354、366、378和390的氨基酸序列 的重链可变区CDR3；(d)包含选自127、133、139、145、151、157、 163、169、175、181、187、193、199、205、211、217、223、229、235、241、247、253、259、265、307、319、331、343、355、367、 379和391的氨基酸序列的轻链可变区CDR1；(e)包含选自SEQ ID NO: 128、134、140、146、152、158、164、170、176、182、188、194、 200、206、212、218、224、230、236、242、248、254、260、266、 308、320、332、344、356、368、380和392的氨基酸序列的轻链可变 区CDR2；和(f)包含选自SEQ ID NO:129、135、141、147、153、 159、165、171、177、183、189、195、201、207、213、219、225、 231、237、243、249、255、261、267、309、321、333、345、357、369、381和393的氨基酸序列的轻链可变区CDR3。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含(a)包含具有SEQ ID NO:124所示序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区CDR1；包含 具有SEQ ID NO:125所示序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区 CDR2；和包含具有SEQ ID NO:126所示序列或其保守修饰的氨基酸 的重链可变区CDR3；(b)包含具有SEQ ID NO:130所示序列或其保 守修饰的氨基酸的重链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:131所示 序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:132所示序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区CDR3；(c)包 含具有SEQ ID NO:136所示序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区 CDR1；包含具有SEQ ID NO:137所示序列或其保守修饰的氨基酸的 重链可变区CDR2；和包含具有SEQ IDNO:138所示序列或其保守修 饰的氨基酸的重链可变区CDR3；(d)包含具有SEQ ID NO:142所示 序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO: 143所示序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区CDR2；和包含具有 SEQ ID NO:144所示序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区CDR3； (e)包含具有SEQ ID NO:148所示序列或其保守修饰的氨基酸的重链 可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:149所示序列或其保守修饰的氨 基酸的重链可变区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:150所示序列或其 保守修饰的氨基酸的重链可变区CDR3；(f)包含具有SEQ ID NO:154 所示序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:155所示序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区CDR2；和包 含具有SEQ ID NO:156所示序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区 CDR3；(g)包含具有SEQ IDNO:160所示序列或其保守修饰的氨基 酸的重链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:161所示序列或其保守 修饰的氨基酸的重链可变区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:162所示 序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区CDR3；(h)包含具有SEQ ID NO:166所示序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区CDR1；包含具 有SEQ ID NO:167所示序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区 CDR2；和包含具有SEQ ID NO:168所示序列或其保守修饰的氨基酸 的重链可变区CDR3；(i)包含具有SEQ ID NO:172所示序列或其保 守修饰的氨基酸的重链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:173所示 序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:174所示序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区CDR3；(j)包 含具有SEQ ID NO:178所示序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区 CDR1；包含具有SEQ ID NO:179所示序列或其保守修饰的氨基酸的 重链可变区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:180所示序列或其保守修 饰的氨基酸的重链可变区CDR3；(k)包含具有SEQ ID NO:184所示 序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO: 185所示序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区CDR2；和包含具有 SEQ ID NO:186所示序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区CDR3； (l)包含具有SEQ ID NO:190所示序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:191所示序列或其保守修饰的氨 基酸的重链可变区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:192所示序列或其 保守修饰的氨基酸的重链可变区CDR3；(m)包含具有SEQ ID NO:196 所示序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:197所示序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区CDR2；和包 含具有SEQ IDNO:198所示序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区 CDR3；(n)包含具有SEQ ID NO:202所示序列或其保守修饰的氨基 酸的重链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:203所示序列或其保守 修饰的氨基酸的重链可变区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:204所示 序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区CDR3；(o)包含具有SEQ ID NO:208所示序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区CDR1；包含具 有SEQ ID NO:209所示序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区 CDR2；和包含具有SEQ ID NO:210所示序列或其保守修饰的氨基酸 的重链可变区CDR3；(p)包含具有SEQ ID NO:214所示序列或其保 守修饰的氨基酸的重链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:215所示 序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:216所示序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区CDR3；(q)包 含具有SEQ IDNO:220所示序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区 CDR1；包含具有SEQ ID NO:221所示序列或其保守修饰的氨基酸的 重链可变区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:222所示序列或其保守修 饰的氨基酸的重链可变区CDR3；(r)包含具有SEQ ID NO:226所示 序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO: 227所示序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区CDR2；和包含具有 SEQ ID NO:228所示序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区CDR3； (s)包含具有SEQ ID NO:232所示序列或其保守修饰的氨基酸的重链 可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:233所示序列或其保守修饰的氨 基酸的重链可变区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:234所示序列或其 保守修饰的氨基酸的重链可变区CDR3；(t)包含具有SEQ ID NO:238 所示序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:239所示序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区CDR2；和包 含具有SEQ ID NO:240所示序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区 CDR3；(u)包含具有SEQ ID NO:244所示序列或其保守修饰的氨基 酸的重链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:245所示序列或其保守 修饰的氨基酸的重链可变区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:246所示 序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区CDR3；(v)包含具有SEQ ID NO:250所示序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区CDR1；包含具 有SEQ ID NO:251所示序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:252所示序列或其保守修饰的氨基酸 的重链可变区CDR3；(w)包含具有SEQ ID NO:256所示序列或其保 守修饰的氨基酸的重链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:257所示 序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区CDR2；和包含具有SEQ IDNO:258所示序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区CDR3；(x)包 含具有SEQ ID NO:262所示序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区 CDR1；包含具有SEQ ID NO:263所示序列或其保守修饰的氨基酸的 重链可变区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:264所示序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区CDR3；(y)包含具有SEQ ID NO:304所示 序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO: 305所示序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区CDR2；和包含具有 SEQ ID NO:306所示序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区CDR3； (z)包含具有SEQ ID NO:316所示序列或其保守修饰的氨基酸的重链 可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:317所示序列或其保守修饰的氨 基酸的重链可变区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:318所示序列或其 保守修饰的氨基酸的重链可变区CDR3；(aa)包含具有SEQ IDNO:328 所示序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:329所示序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区CDR2；和包 含具有SEQ ID NO:330所示序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区 CDR3；(ab)包含具有SEQ ID NO:340所示序列或其保守修饰的氨基 酸的重链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:341所示序列或其保守 修饰的氨基酸的重链可变区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:342所示 序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区CDR3；(ac)包含具有SEQ ID NO:352所示序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区CDR1；包含 具有SEQ ID NO:353所示序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区 CDR2；和包含具有SEQ ID NO:354所示序列或其保守修饰的氨基酸 的重链可变区CDR3；(ad)包含具有SEQ ID NO:364所示序列或其保 守修饰的氨基酸的重链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:365所示 序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:366所示序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区CDR3；(ae) 包含具有SEQ ID NO:376所示序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变 区CDR1；包含具有SEQ ID NO:377所示序列或其保守修饰的氨基酸 的重链可变区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:378所示序列或其保守 修饰的氨基酸的重链可变区CDR3；或(af)包含具有SEQ ID NO:388 所示序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:389所示序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区CDR2；和包 含具有SEQ ID NO:390所示序列或其保守修饰的氨基酸的重链可变区 CDR3。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:202所示序列的氨基酸的重链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:203所示序列的氨基酸的重链可变区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:204所示序列的氨基酸的重链可变区CDR3。在某些实施方式中， 细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:208所示序列的氨 基酸的重链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:209所示序列的氨基 酸的重链可变区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:210所示序列的氨基 酸的重链可变区CDR3。在另一个非限制性实施方式中，细胞外抗原 结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:214所示序列的氨基酸的重链 可变区CDR1；包含具有SEQID NO:215所示序列的氨基酸的重链可 变区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:216所示序列的氨基酸的重链可 变区CDR3。在又一个非限制性实施方式中，细胞外抗原结合结构域包 含：包含具有SEQ ID NO:220所示序列的氨基酸的重链可变区CDR1； 包含具有SEQ ID NO:221所示序列的氨基酸的重链可变区CDR2；和 包含具有SEQ ID NO:222所示序列的氨基酸的重链可变区CDR3。在 另一个实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:226所示序列的氨基酸的重链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:227 所示序列的氨基酸的重链可变区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:228 所示序列的氨基酸的重链可变区CDR3。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：(a)包含具有 SEQ ID NO:127所示序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR1； 包含具有SEQ ID NO:129所示序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变 区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:130所示序列或其保守修饰的氨基 酸的轻链可变区CDR3；(b)包含具有SEQ ID NO:133所示序列或其 保守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:134所 示序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR2；和包含SEQ ID NO: 135或其保守修饰的轻链可变区CDR3；(c)包含具有SEQ IDNO:139 所示序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:140所示序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR2；和包 含具有SEQ ID NO:141所示序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变区 CDR3；(d)包含具有SEQ ID NO:145所示序列或其保守修饰的氨基 酸的轻链可变区CDR1；包含SEQ ID NO:146或其保守修饰的轻链可 变区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:147所示序列或其保守修饰的氨 基酸的轻链可变区CDR3；(e)包含具有SEQ ID NO:151所示序列或 其保守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR1；包含具有SEQ IDNO:152 所示序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:153所示序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR3；(f) 包含具有SEQ ID NO:157所示序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变 区CDR1；包含具有SEQ ID NO:158所示序列或其保守修饰的氨基酸 的轻链可变区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:159所示序列或其保守 修饰的氨基酸的轻链可变区CDR3；(g)包含具有SEQ ID NO:163所 示序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:164所示序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR2；和包含 具有SEQ ID NO:165所示序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变区 CDR3；(h)包含具有SEQ ID NO:169所示序列或其保守修饰的氨基 酸的轻链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:170所示序列或其保守 修饰的氨基酸的轻链可变区CDR2；和包含SEQ ID NO:171或其保守 修饰的轻链可变区CDR3；(i)包含具有SEQ ID NO:175所示序列或 其保守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:176 所示序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:177所示序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR3；(j) 包含具有SEQ ID NO:181所示序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变 区CDR1；包含具有SEQ ID NO:182所示序列或其保守修饰的氨基酸 的轻链可变区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:183所示序列或其保守 修饰的氨基酸的轻链可变区CDR3；(k)包含具有SEQ ID NO:187所 示序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:188所示序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR2；和包含 具有SEQ ID NO:189所示序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变区 CDR3；(l)包含具有SEQ ID NO:193所示序列或其保守修饰的氨基酸 的轻链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:194所示序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:195所示序 列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR3；(m)包含具有SEQ ID NO:199所示序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR1；包含具 有SEQ ID NO:200所示序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:201所示序列或其保守修饰的氨基酸 的轻链可变区CDR3；(n)包含具有SEQ ID NO:205所示序列或其保 守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:206所示 序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR2；和包含具有SEQ IDNO:207所示序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR3；(o)包 含具有SEQ ID NO:211所示序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:212所示序列或其保守修饰的氨基酸的 轻链可变区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:213所示序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR3；(p)包含具有SEQ ID NO:217所示 序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO: 218所示序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR2；和包含具有 SEQ ID NO:219所示序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR3； (q)包含具有SEQ ID NO:223所示序列或其保守修饰的氨基酸的轻 链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:224所示序列或其保守修饰的 氨基酸的轻链可变区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:225所示序列或 其保守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR3；(r)包含具有SEQ IDNO: 229所示序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR1；包含具有 SEQ ID NO:230所示序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR2； 和包含具有SEQ ID NO:231所示序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可 变区CDR3；(s)包含具有SEQ ID NO:235所示序列或其保守修饰的 氨基酸的轻链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:236所示序列或其 保守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:237 所示序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR3；(t)包含具有 SEQ ID NO:241所示序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR1； 包含具有SEQ ID NO:242所示序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变 区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:243所示序列或其保守修饰的氨基 酸的轻链可变区CDR3；(u)包含具有SEQ ID NO:247所示序列或其 保守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR1；包含具有SEQ IDNO:248所 示序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:249所示序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR3；(v) 包含具有SEQ ID NO:253所示序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变 区CDR1；包含具有SEQ ID NO:254所示序列或其保守修饰的氨基酸 的轻链可变区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:255所示序列或其保守 修饰的氨基酸的轻链可变区CDR3；(w)包含具有SEQ ID NO:259所 示序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:260所示序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR2；和包含 具有SEQ ID NO:261所示序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR3；(x)包含具有SEQ ID NO:265所示序列或其保守修饰的氨基 酸的轻链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:266所示序列或其保守 修饰的氨基酸的轻链可变区CDR2；和包含具有SEQ IDNO:267所示 序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR3；(y)包含具有SEQ ID NO:307所示序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR1；包含具 有SEQ ID NO:308所示序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含具有SEQ ID NO:309所示序列或其保守修饰的氨基酸 的轻链可变区CDR3；(z)包含具有SEQ ID NO:319所示序列或其保 守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:320所示 序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:321所示序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR3；(aa) 包含具有SEQ ID NO:331所示序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变 区CDR1；包含具有SEQ ID NO:332所示序列或其保守修饰的氨基酸 的轻链可变区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:333所示序列或其保守 修饰的氨基酸的轻链可变区CDR3；(ab)包含具有SEQ IDNO:343所 示序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:344所示序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR2；和包含 具有SEQ ID NO:345所示序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变区 CDR3；(ac)包含具有SEQ ID NO:355所示序列或其保守修饰的氨基 酸的轻链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:356所示序列或其保守 修饰的氨基酸的轻链可变区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:357所示 序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR3；(ad)包含具有SEQ ID NO:367所示序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR1；包含 具有SEQ ID NO:368所示序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含具有SEQ ID NO:369所示序列或其保守修饰的氨基酸 的轻链可变区CDR3；(ae)包含具有SEQ ID NO:379所示序列或其保 守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:380所示 序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:381所示序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变区CDR3；或(af) 包含具有SEQ ID NO:391所示序列或其保守修饰的氨基酸的轻链可变 区CDR1；包含具有SEQ ID NO:392所示序列或其保守修饰的氨基酸 的轻链可变区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:393所示序列或其保守 修饰的氨基酸的轻链可变区CDR3。在某些实施方式中，细胞外抗原结 合结构域包含：包含具有SEQID NO:205所示序列的氨基酸的轻链可 变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:206所示序列的氨基酸的轻链可变 区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:207所示序列的氨基酸的轻链可变 区CDR3。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有 SEQ ID NO:211所示序列的氨基酸的轻链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:212所示序列的氨基酸的轻链可变区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:213所示序列的氨基酸的轻链可变区CDR3。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:217所示序列 的氨基酸的轻链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:218所示序列的 氨基酸的轻链可变区CDR2；和包含具有SEQID NO:219所示序列的 氨基酸的轻链可变区CDR3。在另一个非限制性实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:223所示序列的氨基酸的 轻链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:224所示序列的氨基酸的轻 链可变区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:225所示序列的氨基酸的轻 链可变区CDR3。在又一个非限制性实施方式中，细胞外抗原结合结构 域包含：包含具有SEQ ID NO:229所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含具有SEQID NO:230所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含具有SEQ ID NO:231所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR3。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：(a)包含具有 SEQ ID NO:124所示序列的氨基酸的重链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:125所示序列的氨基酸的重链可变区CDR2；包含具有SEQ ID NO:126所示序列的氨基酸的重链可变区CDR3；包含具有SEQ IDNO: 127所示序列的氨基酸的轻链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:128 所示序列的氨基酸的轻链可变区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:129 所示序列的氨基酸的轻链可变区CDR3；(b)包含具有SEQ ID NO:130 所示序列的氨基酸的重链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:131所 示序列的氨基酸的重链可变区CDR2；包含具有SEQ ID NO:132所示 序列的氨基酸的重链可变区CDR3；包含具有SEQ ID NO:133所示序 列的氨基酸的轻链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:134所示序列 的氨基酸的轻链可变区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:135所示序列 的氨基酸的轻链可变区CDR3；(c)包含具有SEQ ID NO:136所示序 列的氨基酸的重链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:137所示序列 的氨基酸的重链可变区CDR2；包含具有SEQID NO:138所示序列的 氨基酸的重链可变区CDR3；包含具有SEQ ID NO:139所示序列的氨基酸的轻链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:140所示序列的氨基 酸的轻链可变区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:141所示序列的氨基 酸的轻链可变区CDR3；(d)包含具有SEQ IDNO:142所示序列的氨 基酸的重链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:143所示序列的氨基酸的重链可变区CDR2；包含具有SEQ ID NO:144所示序列的氨基酸 的重链可变区CDR3；包含具有SEQ ID NO:145所示序列的氨基酸的 轻链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:146所示序列的氨基酸的轻 链可变区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:147所示序列的氨基酸的轻链可变区CDR3；(e)包含具有SEQ ID NO:148所示序列的氨基酸的 重链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:149所示序列的氨基酸的重 链可变区CDR2；包含具有SEQ ID NO:150所示序列的氨基酸的重链 可变区CDR3；包含具有SEQ ID NO:151所示序列的氨基酸的轻链可 变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:152所示序列的氨基酸的轻链可变 区CDR2；和包含具有SEQID NO:153所示序列的氨基酸的轻链可变 区CDR3；(f)包含具有SEQ ID NO:154所示序列的氨基酸的重链可 变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:155所示序列的氨基酸的重链可变 区CDR2；包含具有SEQ ID NO:156所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含具有SEQ IDNO:157所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含具有SEQ ID NO:158所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含具有SEQ ID NO:159所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR3；(g)包含具有SEQ ID NO:160所示序列的氨基酸的重链可变 区CDR1；包含具有SEQ ID NO:161所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含具有SEQ ID NO:162所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含具有SEQ ID NO:163所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含具有SEQ ID NO:164所示序列的氨基酸的轻链可变区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:165所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR3；(h)包含具有SEQ ID NO:166所示序列的氨基酸的重链可变 区CDR1；包含具有SEQ ID NO:167所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含具有SEQID NO:168所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含具有SEQ ID NO:169所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含具有SEQ ID NO:170所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含具有SEQ ID NO:171所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR3；(i)包含具有SEQ IDNO:172所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR1；包含具有SEQ ID NO:173所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含具有SEQ ID NO:174所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含具有SEQ ID NO:175所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含具有SEQ ID NO:176所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含具有SEQ ID NO:177所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR3；(j)包含具有SEQ ID NO:178所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR1；包含具有SEQ ID NO:179所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含具有SEQ ID NO:180所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含具有SEQ ID NO:181所示序列的氨基酸的轻链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:182所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含具有SEQ IDNO:183所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR3；(k)包含具有SEQ ID NO:184所示序列的氨基酸的重链可变 区CDR1；包含具有SEQ ID NO:185所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含具有SEQ ID NO:186所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含具有SEQ ID NO:187所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含具有SEQ ID NO:188所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含具有SEQ ID NO:189所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR3；(l)包含具有SEQ ID NO:190所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR1；包含具有SEQ ID NO:191所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含具有SEQ ID NO:192所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含具有SEQ ID NO:193所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含具有SEQ IDNO:194所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含具有SEQ ID NO:195所示序列的氨基酸的轻链可变区CDR3；(m)包含具有SEQ ID NO:196所示序列的氨基酸的重链可变 区CDR1；包含具有SEQ ID NO:197所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含具有SEQ ID NO:198所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含具有SEQ ID NO:199所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含具有SEQ ID NO:200所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含具有SEQ ID NO:201所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR3；(n)包含具有SEQ ID NO:202所示序列的氨基酸的重链可变 区CDR1；包含具有SEQ ID NO:203所示序列的氨基酸的重链可变区CDR2；包含具有SEQ ID NO:204所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含具有SEQ IDNO:205所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含具有SEQ ID NO:206所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含具有SEQ ID NO:207所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR3；(o)包含具有SEQ ID NO:208所示序列的氨基酸的重链可变 区CDR1；包含具有SEQ ID NO:209所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含具有SEQ ID NO:210所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含具有SEQ ID NO:211所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含具有SEQ ID NO:212所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含具有SEQ ID NO:213所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR3；(p)包含具有SEQ ID NO:214所示序列的氨基酸的重链可变 区CDR1；包含具有SEQ ID NO:215所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含具有SEQ ID NO:216所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含具有SEQ ID NO:217所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含具有SEQ ID NO:218所示序列的氨基酸的轻链可变区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:219所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR3；(q)包含具有SEQID NO:220所示序列的氨基酸的重链可变 区CDR1；包含具有SEQ ID NO:221所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含具有SEQ ID NO:222所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含具有SEQ ID NO:223所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含具有SEQ ID NO:224所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含具有SEQ ID NO:225所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR3；(r)包含具有SEQ ID NO:226所示序列的氨基酸的重链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:227所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含具有SEQ ID NO:228所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含具有SEQ ID NO:229所示序列的氨基酸的轻链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:230所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含具有SEQ IDNO:231所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR3；(s)包含具有SEQ ID NO:232所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR1；包含具有SEQ ID NO:233所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含具有SEQ ID NO:234所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含具有SEQ ID NO:235所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含具有SEQ ID NO:236所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含具有SEQ ID NO:237所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR3；(t)包含具有SEQ ID NO:238所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR1；包含具有SEQ ID NO:239所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含具有SEQ ID NO:240所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含具有SEQ ID NO:241所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含具有SEQ IDNO:242所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含具有SEQ ID NO:243所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR3；(u)包含具有SEQ ID NO:244所示序列的氨基酸的重链可变 区CDR1；包含具有SEQ ID NO:245所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含具有SEQ IDNO:246所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含具有SEQ ID NO:247所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含具有SEQ ID NO:248所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含具有SEQ ID NO:249所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR3；(v)包含具有SEQ ID NO:250所示序列的氨基酸的重链可变 区CDR1；包含具有SEQ ID NO:251所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含具有SEQ ID NO:252所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含具有SEQ ID NO:253所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含具有SEQ ID NO:254所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含具有SEQ ID NO:255所示序列的氨基酸的轻链可变区CDR3；(w)包含具有SEQ ID NO:256所示序列的氨基酸的重链可变 区CDR1；包含具有SEQ IDNO:257所示序列的氨基酸的重链可变区CDR2；包含具有SEQ ID NO:258所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含具有SEQ ID NO:259所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含具有SEQ ID NO:260所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含具有SEQ ID NO:261所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR3；(x)包含具有SEQ ID NO:262所示序列的氨基酸的重链可变 区CDR1；包含具有SEQ ID NO:263所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含具有SEQ ID NO:264所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含具有SEQ ID NO:265所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含具有SEQ ID NO:266所示序列的氨基酸的轻链可变区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:267所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR3；(y)包含具有SEQID NO:304所示序列的氨基酸的重链可变 区CDR1；包含具有SEQ ID NO:305所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含具有SEQ ID NO:306所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含具有SEQ ID NO:307所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含具有SEQ ID NO:308所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含具有SEQ ID NO:309所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR3；(z)包含具有SEQ ID NO:316所示序列的氨基酸的重链可变 区CDR1；包含具有SEQ ID NO:317所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含具有SEQ ID NO:318所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含具有SEQ ID NO:319所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含具有SEQ ID NO:320所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含具有SEQID NO:321所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR3；(aa)包含具有SEQ ID NO:328所示序列的氨基酸的重链可变 区CDR1；包含具有SEQ ID NO:329所示序列的氨基酸的重链可变区CDR2；包含具有SEQ ID NO:330所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含具有SEQ IDNO:331所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含具有SEQ ID NO:332所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含具有SEQ ID NO:333所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR3；(ab)包含具有SEQ ID NO:340所示序列的氨基酸的重链可变 区CDR1；包含具有SEQ ID NO:341所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含具有SEQ ID NO:342所示序列的氨基酸的重链可变区CDR3；包含具有SEQ ID NO:343所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含具有SEQ ID NO:344所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含具有SEQ ID NO:345所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR3；(ac)包含具有SEQ ID NO:352所示序列的氨基酸的重链可变 区CDR1；包含具有SEQ ID NO:353所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含具有SEQ ID NO:354所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含具有SEQ ID NO:355所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含具有SEQ ID NO:356所示序列的氨基酸的轻链可变区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:357所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR3；(ad)包含具有SEQID NO:364所示序列的氨基酸的重链可变 区CDR1；包含具有SEQ ID NO:365所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含具有SEQ ID NO:366所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含具有SEQ ID NO:367所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含具有SEQ ID NO:368所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含具有SEQ ID NO:369所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR3；(ae)包含具有SEQ ID NO:376所示序列的氨基酸的重链可变 区CDR1；包含具有SEQ ID NO:377所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含具有SEQ ID NO:378所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含具有SEQ ID NO:379所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含具有SEQ ID NO:380所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含具有SEQID NO:381所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR3；或(af)包含具有SEQ ID NO:388所示序列的氨基酸的重链可 变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:389所示序列的氨基酸的重链可变区CDR2；包含具有SEQ ID NO:390所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含具有SEQ IDNO:391所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含具有SEQ ID NO:392所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含具有SEQ ID NO:393所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR3。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:202所示序列的氨基酸的重链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:203所示序列的氨基酸的重链可变区CDR2；包含具有SEQ ID NO: 204所示序列的氨基酸的重链可变区CDR3；包含具有SEQ ID NO:205 所示序列的氨基酸的轻链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:206所 示序列的氨基酸的轻链可变区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:207所 示序列的氨基酸的轻链可变区CDR3。在某些实施方式中，细胞外抗原 结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:208所示序列的氨基酸的重链 可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:209所示序列的氨基酸的重链可 变区CDR2；包含具有SEQ IDNO:210所示序列的氨基酸的重链可变 区CDR3；包含具有SEQ ID NO:211所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含具有SEQ ID NO:212所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含具有SEQ ID NO:213所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR3。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:214所示序列的氨基酸的重链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:215所示序列的氨基酸的重链可变区CDR2；包含具有SEQ ID NO: 216所示序列的氨基酸的重链可变区CDR3；包含具有SEQ ID NO:217 所示序列的氨基酸的轻链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:218所 示序列的氨基酸的轻链可变区CDR2；和包含具有SEQID NO:219所 示序列的氨基酸的轻链可变区CDR3。在另一个非限制性实施方式中， 细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:220所示序列的氨 基酸的重链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:221所示序列的氨基 酸的重链可变区CDR2；包含具有SEQ ID NO:222所示序列的氨基酸 的重链可变区CDR3；包含具有SEQ ID NO:223所示序列的氨基酸的 轻链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:224所示序列的氨基酸的轻 链可变区CDR2；和包含具有SEQ ID NO:225所示序列的氨基酸的轻 链可变区CDR3。在又一个非限制性实施方式中，细胞外抗原结合结构 域包含：包含具有SEQ ID NO:226所示序列的氨基酸的重链可变区CDR1；包含具有SEQ ID NO:227所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含具有SEQ IDNO:228所示序列的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含具有SEQ ID NO:229所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含具有SEQ ID NO:230所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含具有SEQ ID NO:231所示序列的氨基酸的轻链可变区 CDR3。在某些实施方式中，人scFv包含重链可变区、轻链可变区、 重链可变区和轻链可变区之间的接头肽，以及His-标签和HA-标签。 在某些实施方式中，His-标签和HA-标签的氨基酸序列包含SEQ ID NO： 275的氨基酸序列，其提供如下：
编码SEQ ID NO：275的核苷酸序列是SEQ ID NO：276，其提供如 下：
在某些实施方式中，GPRC5D包含SEQ ID NO：97所示的氨基酸 序列。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域结合一个、两个、 三个或四个选自下述的表位区域：包含SEQID NO：97的氨基酸1-27 的N-端区域中的表位区域、包含SEQ ID NO：97的氨基酸85-93的ECL1 区域中的表位区域、包含SEQ ID NO：97的氨基酸145-167的ECL2区 域中的表位区域、和包含SEQ ID NO：97的氨基酸226-239的ECL3区 中域的表位区域。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域结合包 含SEQ ID NO：97的氨基酸16-23的表位区域。在某些实施方式中，细 胞外抗原结合结构域结合包含SEQ ID NO：97的氨基酸15-23的表位区 域。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域结合包含SEQ ID NO：97 的氨基酸16-25的表位区域。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构 域结合包含SEQ ID NO：97的氨基酸10-17的表位区域。在某些实施方 式中，细胞外抗原结合结构域结合包含SEQ ID NO：97的氨基酸5-17 的表位区域。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域结合包含SEQ ID NO：97的氨基酸85-95的表位区域。在某些实施方式中，细胞外抗 原结合结构域结合包含SEQ ID NO：97的氨基酸157-164的表位区域。 在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域结合包含SEQ ID NO：97的 氨基酸157-167的表位区域。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构 域结合包含SEQ ID NO：97的氨基酸230-237的表位区域。在某些实施 方式中，细胞外抗原结合结构域结合包含SEQ ID NO：97的氨基酸 229-237的表位区域。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域结合 包含SEQ ID NO：97的氨基酸230-243的表位区域。在某些实施方式中， 细胞外抗原结合结构域结合包含SEQ ID NO：97的氨基酸227-237的表 位区域。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域结合一个、两个或三 个选自下述的表位区域：包含SEQ ID NO:97的氨基酸16-25的表位区 域、包含SEQ ID NO:97的氨基酸157-164的表位区域和包含SEQ ID NO:97的氨基酸229-237的表位区域。例如，细胞外抗原结合结构域包 含：包含具有SEQ ID NO:57所示序列的氨基酸的重链可变区和包含 具有SEQ IDNO:58所示序列的氨基酸的轻链可变区。例如，细胞外 抗原结合结构域包含：包含具有SEQID NO:208所示序列的氨基酸的 VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:209所示序列的氨基酸的VHCDR2、 包含具有SEQ ID NO:210所示序列的氨基酸的VH CDR3、包含具有 SEQ ID NO:211所示序列的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO: 212所示序列的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:213所示 序列的氨基酸的VL CDR3。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域结合一个、两个或三 个选自下述的表位区域：包含SEQ ID NO:97的氨基酸5-17的表位区 域、包含SEQ ID NO:97的氨基酸85-95的表位区域、和包含SEQ ID NO:97的氨基酸157-164的表位区域。例如，细胞外抗原结合结构域包 含：包含具有SEQ ID NO:61所示序列的氨基酸的重链可变区和包含 具有SEQ IDNO:62所示序列的氨基酸的轻链可变区。例如，细胞外 抗原结合结构域包含：包含具有SEQID NO:214所示序列的氨基酸的 VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:215所示序列的氨基酸的VHCDR2、 包含具有SEQ ID NO:216所示序列的氨基酸的VH CDR3、包含具有 SEQ ID NO:217所示序列的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO: 218所示序列的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:219所示 序列的氨基酸的VL CDR3。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域结合一个或两个选自 包含SEQ IDNO:97的氨基酸15-23的表位区域以及包含SEQ ID NO:97 的氨基酸230-243的表位区域中的表位区域。例如，细胞外抗原结合结 构域包含：包含具有SEQ ID NO:65所示序列的氨基酸的重链可变区 和包含具有SEQ ID NO:66所示序列的氨基酸的轻链可变区。例如， 细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:220所示序列的氨 基酸的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:221所示序列的氨基酸的VH CDR2、包含具有SEQ ID NO:222所示序列的氨基酸的VH CDR3、包 含具有SEQ ID NO:223所示序列的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO:224所示序列的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO: 225所示序列的氨基酸的VLCDR3。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域结合一个、两个或三 个选自包含SEQID NO:97的氨基酸10-17的表位区域、包含SEQ ID NO:97的氨基酸157-167的表位区域、和包含SEQ ID NO:97的氨基酸 227-237的表位区域中的表位区域。例如，细胞外抗原结合结构域包含： 包含具有SEQ ID NO:69所示序列的氨基酸的重链可变区和包含具有 SEQ IDNO:70所示序列的氨基酸的轻链可变区。例如，细胞外抗原结 合结构域包含：包含具有SEQID NO:226所示序列的氨基酸的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:227所示序列的氨基酸的VHCDR2、包 含具有SEQ ID NO:228所示序列的氨基酸的VH CDR3、包含具有SEQ ID NO:229所示序列的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO:230 所示序列的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:231所示序列 的氨基酸的VL CDR3。
根据本发明公开的主题，将细胞外抗原结合结构域共价结合至跨 膜结构域。细胞外抗原结合结构域可以包含共价结合至细胞外抗原结 合结构域的5’端的信号肽。在某些实施方式中，CAR的跨膜结构域包 含CD8多肽、CD28多肽、CD3ζ多肽、CD4多肽、4-1BB多肽、OX40 多肽、ICOS多肽、CTLA-4多肽、PD-1多肽、LAG-3多肽、2B4多肽、 BTLA多肽、合成肽(非基于与免疫应答相关的蛋白质)、或其组合。 在某些实施方式中，跨膜结构域包含CD8多肽。在某些实施方式中， 跨膜结构域包含CD28多肽。
根据本发明公开的主题，细胞内结构域包含CD3ζ多肽。在某些实 施方式中，细胞内结构域还包含至少一个信号传导区。在某些实施方 式中，所述至少一个信号传导区包含CD28多肽、4-1BB多肽、OX40 多肽、ICOS多肽、DAP-10多肽、PD-1多肽、CTLA-4多肽、LAG-3 多肽、2B4多肽、BTLA多肽、合成肽(非基于与免疫应答相关的蛋白 质)、或其组合。在某些实施方式中，信号传导区是共刺激信号传导区。 在某些实施方式中，共刺激信号传导区包含CD28多肽、4-1BB多肽、OX40多肽、ICOS多肽、DAP-10多肽、或其组合。在某些实施方式中， 所述至少一个共刺激信号传导区包含CD28多肽。在某些实施方式中， 所述至少一个共刺激信号传导区包含4-1BB多肽。在某些实施方式中， 跨膜结构域包含CD28多肽，细胞内结构域包含CD3ζ多肽，并且共刺 激信号传导结构域包含CD28多肽。
在某些实施方式中，CAR是重组表达的。CAR可以由载体表达。 在某些实施方式中，载体是γ-逆转录病毒载体。
本发明公开的主题还提供包含上述CAR的分离的免疫应答细胞。 在某些实施方式中，用CAR转导分离的免疫应答细胞，例如，CAR 在免疫应答细胞的表面上组成型表达。在某些实施方式中，用至少一 种共刺激配体进一步转导分离的免疫应答细胞使得免疫应答细胞表达 该至少一种共刺激配体。在某些实施方式中，至少一种共刺激配体选 自4-1BBL、CD80、CD86、CD70、OX40L、CD48、TNFRSF14、及其 组合。在某些实施方式中，用至少一种细胞因子进一步转导分离的免 疫应答细胞使得免疫应答细胞分泌该至少一种细胞因子。在某些实施 方式中，至少的细胞因子选自IL-2、IL-3、IL-6、IL-7、IL-11、IL-12、 IL-15、IL-17、IL-21、及其组合。在一些实施方式中，分离的免疫应答 细胞选自T细胞、自然杀伤(NK)细胞、细胞毒性T淋巴细胞(CTL)、 调节性T细胞、人胚胎干细胞、淋巴样祖细胞、T细胞前体细胞和可 分化成淋巴样细胞的多能干细胞。在某些实施方式中，免疫应答细胞 是T细胞。
本发明公开的主题还提供编码本发明公开的CAR的核酸分子、包 含该核酸分子的载体、和表达此类核酸分子的宿主细胞。在某些实施 方式中，核酸分子包含具有SEQ IDNO:397所示序列的核酸。在某些 实施方式中，核酸分子包含具有SEQ ID NO:398所示序列的核酸。在 某些实施方式中，核酸分子包含具有SEQ ID NO:399所示序列的核酸。 在某些实施方式中，核酸分子包含具有SEQ ID NO:400所示序列的核 酸。在某些实施方式中，核酸分子包含具有SEQ ID NO:401所示序列 的核酸。在某些实施方式中，核酸分子包含具有SEQID NO:402所示 序列的核酸。在某些实施方式中，核酸分子包含具有SEQ ID NO:403 所示序列的核酸。在某些实施方式中，核酸分子包含具有SEQ ID NO: 406所示序列的核酸。在某些实施方式中，核酸分子包含具有SEQ ID NO:407所示序列的核酸。在某些实施方式中，核酸分子包含具有SEQ ID NO:408所示序列的核酸。在某些实施方式中，载体是γ-逆转录病毒载体。在某些实施方式中，宿主细胞是T细胞。
此外，本发明公开的主题提供使用上述免疫应答细胞用于减少受 试者的肿瘤负荷的方法。例如，本发明公开的主题提供减少受试者的 肿瘤负荷的治疗方法，其中该方法包括将有效量的本发明公开的免疫 应答细胞施用于受试者，从而诱导受试者的肿瘤细胞死亡。在某些实 施方式中，该方法减少肿瘤细胞的数目。在另一个实施方式中，该方 法减少肿瘤尺寸。在又一个实施方式中，该方法根除受试者中的肿瘤。 在某些实施方式中，受试者是人。在某些实施方式中，免疫应答细胞 是T细胞。在某些实施方式中，肿瘤是多发性骨髓瘤或瓦氏巨球蛋白 血症(Waldenstrom’s Macroglobulinemia)。在某些实施方式中，肿瘤是 多发性骨髓瘤。
此外，本发明公开的主题提供使用上述免疫应答细胞用于增加或 延长患有瘤形成(neoplasia)的受试者的存活的方法。例如，本发明公 开的主题提供增加或延长患有瘤形成的受试者的存活的方法，其中该 方法包括将有效量的本发明公开的免疫应答细胞施用于受试者，从而 增加或延长受试者的存活。在某些实施方式中，瘤形成是多发性骨髓 瘤或瓦氏巨球蛋白血症。在某些实施方式中，瘤形成是多发性骨髓瘤。 在某些实施方式中，该方法减少或根除受试者的肿瘤负荷。
本发明公开的主题还提供用于产生结合G-蛋白偶联受体的免疫应 答细胞的方法。在一个非限制性实例中，该方法包括将编码嵌合抗原 受体(CAR)的核酸序列引入免疫应答细胞，该嵌合抗原受体(CAR) 包含细胞外抗原结合结构域、跨膜结构域和细胞内结构域，其中细胞 外抗原结合结构域特异性地结合G-蛋白偶联受体。在某些实施方式中， G-蛋白偶联受体是G-蛋白偶联受体C家族5组D成员(GPRC5D)。 在具体的非限制性实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv。
本发明公开的主题还提供包含有效量的本发明公开的免疫应答细 胞和药学上可接受的赋形剂的药物组合物。在某些实施方式中，药物 组合物用于治疗瘤形成。在某些实施方式中，瘤形成是多发性骨髓瘤 或瓦氏巨球蛋白血症。在某些实施方式中，瘤形成是多发性骨髓瘤。
本发明公开的主题还提供包含本发明公开的免疫应答细胞的用于 治疗瘤形成的试剂盒。在某些实施方式中，试剂盒还包括使用免疫应 答细胞用于治疗瘤形成的书面说明书。在某些实施方式中，瘤形成是 多发性骨髓瘤或瓦氏巨球蛋白血症。在某些实施方式中，瘤形成是多 发性骨髓瘤。
1.一种嵌合抗原受体(CAR)，其包含细胞外抗原结合结构域、 跨膜结构域和细胞内结构域，其中所述细胞外抗原结合结构域特异性 地结合G-蛋白偶联受体。
2.根据实施方式1所述的CAR，其中所述G蛋白受体是G-蛋 白偶联受体C家族5组D成员(GPRC5D)。
3.根据实施方式2所述的CAR，其中所述CAR的所述细胞外 抗原结合结构域以约1×10-9M至约3×10-6M的结合亲和力(Kd)结 合GPRC5D。
4.根据实施方式1所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结构 域是单链可变片段(scFv)。
5.根据实施方式4所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结构 域是鼠scFv。
6.根据实施方式4所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结构 域是人scFv。
7.根据实施方式1所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结构 域是任选交联的Fab。
8.根据实施方式1所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结构 域是F(ab)2。
9.根据实施方式2-8中任一项所述的CAR，所述scFv、Fab和 F(ab)2中的一个或多个与异源序列包含在融合蛋白中以形成所述细胞 外抗原结合结构域。
10.根据实施方式1-9中任一项所述的CAR，其中所述细胞外抗 原结合结构域包含重链可变区，所述重链可变区含有与选自SEQ ID NO:1、5、9、13、17、21、25、29、33、37、41、45、49、53、57、 61、65、69、73、77、81、85、89、93、302、314、326、338、350、362、374和386的氨基酸序列至少约80％、约81％、约82％、约83％、 约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、约89％、约90％、约91％、 约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％ 同源的氨基酸序列。
11.根据实施方式1-10中任一项所述的CAR，其中所述细胞外 抗原结合结构域包含：含有选自SEQ ID NO:1、5、9、13、17、21、 25、29、33、37、41、45、49、53、57、61、65、69、73、77、81、 85、89、93、302、314、326、338、350、362、374和386的氨基酸序 列及其保守修饰的重链可变区。
12.根据实施方式1-11中任一项所述的CAR，其中所述细胞外 抗原结合结构域包含：含有序列选自SEQ ID NO:1、5、9、13、17、 21、25、29、33、37、41、45、49、53、57、61、65、69、73、77、 81、85、89、93、302、314、326、338、350、362、374和386的氨基 酸的重链可变区。
13.根据实施方式12所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域包含重链可变区，所述重链可变区包含序列如SEQ ID NO:53所 示的氨基酸。
14.根据实施方式12所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域包含重链可变区，所述重链可变区包含序列如SEQ ID NO:57所 示的氨基酸。
15.根据实施方式12所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域包含重链可变区，所述重链可变区包含序列如SEQ ID NO:61所 示的氨基酸。
16.根据实施方式12所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域包含重链可变区，所述重链可变区包含序列如SEQ ID NO:65所 示的氨基酸。
17.根据实施方式12所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域包含重链可变区，所述重链可变区包含序列如SEQ ID NO:69所 示的氨基酸。
18.根据实施方式1-17中任一项所述的CAR，其中所述细胞外 抗原结合结构域包含轻链可变区，所述轻链可变区含有与选自SEQ ID NO:2、6、10、14、18、22、26、30、34、38、42、46、50、54、58、 62、66、70、74、78、82、86、90、94、303、315、327、339、351、 363、375和387的氨基酸序列至少约80％、约81％、约82％、约83％、 约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、约89％、约90％、约91％、 约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％ 同源的氨基酸序列。
19.根据实施方式1-18中任一项所述的CAR，其中所述细胞外 抗原结合结构域包含：含有选自SEQ ID NO:2、6、10、14、18、22、 26、30、34、38、42、46、50、54、58、62、66、70、74、78、82、 86、90、94、303、315、327、339、351、363、375和387的氨基酸序 列及其保守修饰的轻链可变区。
20.根据实施方式1-19中任一项所述的CAR，其中所述细胞外 抗原结合结构域包含：含有序列选自SEQ ID NO:2、6、10、14、18、 22、26、30、34、38、42、46、50、54、58、62、66、70、74、78、 82、86、90、94、303、315、327、339、351、363、375和387的氨基 酸的轻链可变区。
21.根据实施方式20所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域包含轻链可变区，所述轻链可变区包含序列如SEQ ID NO:54所 示的氨基酸。
22.根据实施方式20所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域包含轻链可变区，所述轻链可变区包含序列如SEQ ID NO:58所 示的氨基酸。
23.根据实施方式20所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域包含轻链可变区，所述轻链可变区包含序列如SEQ ID NO:62所 示的氨基酸。
24.根据实施方式20所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域包含轻链可变区，所述轻链可变区包含序列如SEQ ID NO:66所 示的氨基酸。
25.根据实施方式20所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域包含轻链可变区，所述轻链可变区包含序列如SEQ ID NO:70所 示的氨基酸。
26.根据实施方式1-25中任一项所述的CAR，其中所述细胞外 抗原结合结构域包含：(a)含有与选自SEQ ID NO:1、5、9、13、17、 21、25、29、33、37、41、45、49、53、57、61、65、69、73、77、 81、85、89、93、302、314、326、338、350、362、374和386的氨基 酸序列至少约80％、约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约 86％、约87％、约88％、约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、 约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序 列的重链可变区；和(b)含有与选自SEQ ID NO:2、6、10、14、18、 22、26、30、34、38、42、46、50、54、58、62、66、70、74、78、 82、86、90、94、303、315、327、339、351、363、375和387的氨基 酸序列至少约80％、约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约 86％、约87％、约88％、约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、 约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序 列的轻链可变区。
27.根据实施方式1-26中任一项所述的CAR，其中所述细胞外 抗原结合结构域包含：(a)含有选自SEQ ID NO:1、5、9、13、17、 21、25、29、33、37、41、45、49、53、57、61、65、69、73、77、 81、85、89、93、302、314、326、338、350、362、374和386的氨基 酸序列及其保守修饰的重链可变区，和(b)含有选自SEQ ID NO:2、 6、10、14、18、22、26、30、34、38、42、46、50、54、58、62、66、 70、74、78、82、86、90、94、303、315、327、339、351、363、375 和387的氨基酸序列及其保守修饰的轻链可变区。
28.根据实施方式1-27中任一项所述的CAR，其中所述细胞外 抗原结合结构域包含：(a)包含序列选自SEQ ID NO:1、5、9、13、 17、21、25、29、33、37、41、45、49、53、57、61、65、69、73、 77、81、85、89、93、302、314、326、338、350、362、374和386 的氨基酸的重链可变区；和(b)包含序列选自SEQ ID NO:2、6、10、 14、18、22、26、30、34、38、42、46、50、54、58、62、66、70、 74、78、82、86、90、94、303、315、327、339、351、363、375和 387的氨基酸的轻链可变区。
29.根据实施方式28所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域包含：
(a)包含序列如SEQ ID NO:1所示的氨基酸的重链可变区和包含 序列如SEQ IDNO:2所示的氨基酸的轻链可变区；
(b)包含序列如SEQ ID NO:5所示的氨基酸的重链可变区和包 含序列如SEQ IDNO:6所示的氨基酸的轻链可变区；
(c)包含序列如SEQ ID NO:9所示的氨基酸的重链可变区和包含 序列如SEQ IDNO:10所示的氨基酸的轻链可变区；
(d)包含序列如SEQ ID NO:13所示的氨基酸的重链可变区和包 含序列如SEQ IDNO:14所示的氨基酸的轻链可变区；
(e)包含序列如SEQ ID NO:17所示的氨基酸的重链可变区和包 含序列如SEQ IDNO:18所示的氨基酸的轻链可变区；
(f)包含序列如SEQ ID NO:21所示的氨基酸的重链可变区和包 含序列如SEQ IDNO:22所示的氨基酸的轻链可变区；
(g)包含序列如SEQ ID NO:25所示的氨基酸的重链可变区和包 含序列如SEQ IDNO:26所示的氨基酸的轻链可变区；
(h)包含序列如SEQ ID NO:29所示的氨基酸的重链可变区和包 含序列如SEQ IDNO:30所示的氨基酸的轻链可变区；
(i)包含序列如SEQ ID NO:33所示的氨基酸的重链可变区和包 含序列如SEQ IDNO:34所示的氨基酸的轻链可变区；
(j)包含序列如SEQ ID NO:37所示的氨基酸的重链可变区和包 含序列如SEQ IDNO:38所示的氨基酸的轻链可变区；
(k)包含序列如SEQ ID NO:41所示的氨基酸的重链可变区和包 含序列如SEQ IDNO:42所示的氨基酸的轻链可变区；
(l)包含序列如SEQ ID NO:45所示的氨基酸的重链可变区和包 含序列如SEQ IDNO:46所示的氨基酸的轻链可变区；
(m)包含序列如SEQ ID NO:49所示的氨基酸的重链可变区和包 含序列如SEQ IDNO:50所示的氨基酸的轻链可变区；
(n)包含序列如SEQ ID NO:53所示的氨基酸的重链可变区和包 含序列如SEQ IDNO:54所示的氨基酸的轻链可变区；
(o)包含序列如SEQ ID NO:57所示的氨基酸的重链可变区和包 含序列如SEQ IDNO:58所示的氨基酸的轻链可变区；
(p)包含序列如SEQ ID NO:61所示的氨基酸的重链可变区和包 含序列如SEQ IDNO:62所示的氨基酸的轻链可变区；
(q)包含序列如SEQ ID NO:65所示的氨基酸的重链可变区和包 含序列如SEQ IDNO:66所示的氨基酸的轻链可变区；
(r)包含序列如SEQ ID NO:69所示的氨基酸的重链可变区和包 含序列如SEQ IDNO:70所示的氨基酸的轻链可变区；
(s)包含序列如SEQ ID NO:73所示的氨基酸的重链可变区和包 含序列如SEQ IDNO:74所示的氨基酸的轻链可变区；
(t)包含序列如SEQ ID NO:77所示的氨基酸的重链可变区和包 含序列如SEQ IDNO:78所示的氨基酸的轻链可变区；
(u)包含序列如SEQ ID NO:81所示的氨基酸的重链可变区和包 含序列如SEQ IDNO:82所示的氨基酸的轻链可变区；
(v)包含序列如SEQ ID NO:85所示的氨基酸的重链可变区和包 含序列如SEQ IDNO:86所示的氨基酸的轻链可变区；
(w)包含序列如SEQ ID NO:89所示的氨基酸的重链可变区和包 含序列如SEQ IDNO:90所示的氨基酸的轻链可变区；
(x)包含序列如SEQ ID NO:93所示的氨基酸的重链可变区和包 含序列如SEQ IDNO:94所示的氨基酸的轻链可变区；
(y)包含序列如SEQ ID NO:302所示的氨基酸的重链可变区和 包含序列如SEQ IDNO:303所示的氨基酸的轻链可变区；
(z)包含序列如SEQ ID NO:314所示的氨基酸的重链可变区和包 含序列如SEQ IDNO:315所示的氨基酸的轻链可变区；
(aa)包含序列如SEQ ID NO:326所示的氨基酸的重链可变区和 包含序列如SEQID NO:327所示的氨基酸的轻链可变区；
(ab)包含序列如SEQ ID NO:338所示的氨基酸的重链可变区和 包含序列如SEQID NO:339所示的氨基酸的轻链可变区；
(ac)包含序列如SEQ ID NO:350所示的氨基酸的重链可变区和 包含序列如SEQID NO:351所示的氨基酸的轻链可变区；
(ad)包含序列如SEQ ID NO:362所示的氨基酸的重链可变区和 包含序列如SEQID NO:363所示的氨基酸的轻链可变区；
(ae)包含序列如SEQ ID NO:374所示的氨基酸的重链可变区和 包含序列如SEQID NO:375所示的氨基酸的轻链可变区；或
(af)包含序列如SEQ ID NO:386所示的氨基酸的重链可变区和 包含序列如SEQID NO:387所示序列的氨基酸的轻链可变区。
30.根据实施方式29所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域包含：包含序列如SEQ ID NO:53所示的氨基酸的重链可变区； 和包含序列如SEQ ID NO:54所示的氨基酸的轻链可变区。
31.根据实施方式29所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域包含：包含序列如SEQ ID NO:57所示的氨基酸的重链可变区； 和包含序列如SEQ ID NO:58所示的氨基酸的轻链可变区。
32.根据实施方式29所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域包含：包含序列如SEQ ID NO:61所示的氨基酸的重链可变区； 和包含序列如SEQ ID NO:62所示的氨基酸的轻链可变区。
33.根据实施方式29所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域包含：包含序列如SEQ ID NO:65所示的氨基酸的重链可变区； 和包含序列如SEQ ID NO:66所示的氨基酸的轻链可变区。
34.根据实施方式29所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域包含：包含序列如SEQ ID NO:69所示的氨基酸的重链可变区； 和包含序列如SEQ ID NO:70所示的氨基酸的轻链可变区。
35.根据实施方式1-34中任一项所述的CAR，其中所述细胞外 抗原结合结构域包含所述细胞外抗原结合结构域的重链可变区和轻链 可变区之间的接头。
36.根据实施方式1-35中任一项所述的CAR，其中所述细胞外 抗原结合结构域包含：(a)含有选自SEQ ID NO:126、132、138、144、 150、156、162、168、174、180、186、192、198、204、210、216、 222、228、234、240、246、252、258、264、306、318、330、342、 354、366、378和390的氨基酸序列及其保守修饰的重链可变区CDR3； 和(b)含有选自SEQ ID NO:129、135、141、147、153、159、165、 171、177、183、189、195、201、207、213、219、225、231、237、 243、249、255、261、267、309、321、333、345、357、369、381和 393的氨基酸序列及其保守修饰的轻链可变区CDR3。
37.根据实施方式36所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域包含：(a)包含选自SEQ ID NO:125、131、137、143、149、155、 161、167、173、179、185、191、197、203、209、215、221、227、 233、239、245、251、257、263、305、317、329、341、353、365、 377和389的氨基酸序列及其保守修饰的重链可变区CDR2；和(b) 包含选自SEQ ID NO:128、134、140、146、152、158、164、170、176、 182、188、194、200、206、212、218、224、230、236、242、248、 254、260、266、308、320、332、344、356、368、380和392的氨基 酸序列及其保守修饰的轻链可变区CDR2。
38.根据实施方式36或37所述的CAR，其中所述细胞外抗原结 合结构域包含：(a)包含选自SEQ ID NO:124、130、136、142、148、 154、160、166、172、178、184、190、196、202、208、214、220、 226、232、238、244、250、256、262、304、316、328、340、352、 364、376和388的氨基酸序列及其保守修饰的重链可变区CDR1；和 (b)包含选自SEQ ID NO:127、133、139、145、151、157、163、169、 175、181、187、193、199、205、211、217、223、229、235、241、 247、253、259、265、307、319、331、343、355、367、379和391 的氨基酸序列及其保守修饰的轻链可变区CDR1。
39.根据实施方式1-38中任一项所述的CAR，其中所述细胞外 抗原结合结构域包含：(a)含有选自SEQ ID NO:124、130、136、142、 148、154、160、166、172、178、184、190、196、202、208、214、 220、226、232、238、244、250、256、262、304、316、328、340、 352、364、376和388的氨基酸序列的重链可变区CDR1；(b)含有选 自SEQ ID NO:125、131、137、143、149、155、161、167、173、179、 185、191、197、203、209、215、221、227、233、239、245、251、 257、263、305、317、329、341、353、365、377和389的氨基酸序列 的重链可变区CDR2；(c)含有选自SEQ ID NO:126、132、138、144、 150、156、162、168、174、180、186、192、198、204、210、216、222、228、234、240、246、252、258、264、306、318、330、342、 354、366、378和390的氨基酸序列的重链可变区CDR3；(d)含有选 自SEQ ID NO:127、133、139、145、151、157、163、169、175、181、 187、193、199、205、211、217、223、229、235、241、247、253、259、265、307、319、331、343、355、367、379和391的氨基酸序列 的轻链可变区CDR1；(e)含有选自SEQ ID NO:128、134、140、146、 152、158、164、170、176、182、188、194、200、206、212、218、 224、230、236、242、248、254、260、266、308、320、332、344、 356、368、380和392的氨基酸序列的轻链可变区CDR2；和(f)含 有选自SEQ ID NO:129、135、141、147、153、159、165、171、177、 183、189、195、201、207、213、219、225、231、237、243、249、 255、261、267、309、321、333、345、357、369、381和393的氨基 酸序列的轻链可变区CDR3。
40.根据实施方式1-39中任一项所述的CAR，其中所述细胞外 抗原结合结构域包含：
(a)包含序列如SEQ ID NO:124所示的氨基酸或其保守修饰的重 链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:125所示的氨基酸或其保守 修饰的重链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:126所示的氨基 酸或其保守修饰的重链可变区CDR3；
(b)包含序列如SEQ ID NO:130所示的氨基酸或其保守修饰的 重链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:131所示的氨基酸或其保 守修饰的重链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:132所示的氨 基酸或其保守修饰的重链可变区CDR3；
(c)包含序列如SEQ ID NO:136所示的氨基酸或其保守修饰的重 链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:137所示的氨基酸或其保守 修饰的重链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:138所示的氨基 酸或其保守修饰的重链可变区CDR3；
(d)包含序列如SEQ ID NO:142所示的氨基酸或其保守修饰的 重链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:143所示的氨基酸或其保 守修饰的重链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:144所示的氨 基酸或其保守修饰的重链可变区CDR3；
(e)包含序列如SEQ ID NO:148所示的氨基酸或其保守修饰的重 链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:149所示的氨基酸或其保守 修饰的重链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:150所示的氨基 酸或其保守修饰的重链可变区CDR3；
(f)包含序列如SEQ ID NO:154所示的氨基酸或其保守修饰的重 链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:155所示的氨基酸或其保守 修饰的重链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:156所示的氨基 酸或其保守修饰的重链可变区CDR3；
(g)包含序列如SEQ ID NO:160所示的氨基酸或其保守修饰的 重链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:161所示的氨基酸或其保 守修饰的重链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:162所示的氨 基酸或其保守修饰的重链可变区CDR3；
(h)包含序列如SEQ ID NO:166所示的氨基酸或其保守修饰的 重链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:167所示的氨基酸或其保 守修饰的重链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:168所示的氨 基酸或其保守修饰的重链可变区CDR3；
(i)包含序列如SEQ ID NO:172所示的氨基酸或其保守修饰的重 链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:173所示的氨基酸或其保守 修饰的重链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:174所示的氨基 酸或其保守修饰的重链可变区CDR3；
(j)包含序列如SEQ ID NO:178所示的氨基酸或其保守修饰的重 链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:179所示的氨基酸或其保守 修饰的重链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:180所示的氨基 酸或其保守修饰的重链可变区CDR3；
(k)包含序列如SEQ ID NO:184所示的氨基酸或其保守修饰的 重链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:185所示的氨基酸或其保 守修饰的重链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:186所示的氨 基酸或其保守修饰的重链可变区CDR3；
(l)包含序列如SEQ ID NO:190所示的氨基酸或其保守修饰的重 链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:191所示的氨基酸或其保守 修饰的重链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:192所示的氨基 酸或其保守修饰的重链可变区CDR3；
(m)包含序列如SEQ ID NO:196所示的氨基酸或其保守修饰的 重链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:197所示的氨基酸或其保 守修饰的重链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:198所示的氨 基酸或其保守修饰的重链可变区CDR3；
(n)包含序列如SEQ ID NO:202所示的氨基酸或其保守修饰的 重链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:203所示的氨基酸或其保 守修饰的重链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:204所示的氨 基酸或其保守修饰的重链可变区CDR3；
(o)包含序列如SEQ ID NO:208所示的氨基酸或其保守修饰的 重链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:209所示的氨基酸或其保 守修饰的重链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:210所示的氨 基酸或其保守修饰的重链可变区CDR3；
(p)包含序列如SEQ ID NO:214所示的氨基酸或其保守修饰的 重链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:215所示的氨基酸或其保 守修饰的重链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:216所示的氨 基酸或其保守修饰的重链可变区CDR3；
(q)包含序列如SEQ ID NO:220所示的氨基酸或其保守修饰的 重链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:221所示的氨基酸或其保 守修饰的重链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:222所示的氨 基酸或其保守修饰的重链可变区CDR3；
(r)包含序列如SEQ ID NO:226所示的氨基酸或其保守修饰的重 链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:227所示的氨基酸或其保守 修饰的重链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:228所示的氨基 酸或其保守修饰的重链可变区CDR3；
(s)包含序列如SEQ ID NO:232所示的氨基酸或其保守修饰的重 链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:233所示的氨基酸或其保守 修饰的重链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:234所示的氨基 酸或其保守修饰的重链可变区CDR3；
(t)包含序列如SEQ ID NO:238所示的氨基酸或其保守修饰的重 链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:239所示的氨基酸或其保守 修饰的重链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:240所示的氨基 酸或其保守修饰的重链可变区CDR3；
(u)包含序列如SEQ ID NO:244所示的氨基酸或其保守修饰的 重链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:245所示的氨基酸或其保 守修饰的重链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:246所示的氨 基酸或其保守修饰的重链可变区CDR3；
(v)包含序列如SEQ ID NO:250所示的氨基酸或其保守修饰的 重链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:251所示的氨基酸或其保 守修饰的重链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:252所示的氨 基酸或其保守修饰的重链可变区CDR3；
(w)包含序列如SEQ ID NO:256所示的氨基酸或其保守修饰的 重链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:257所示的氨基酸或其保 守修饰的重链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:258所示的氨 基酸或其保守修饰的重链可变区CDR3；
(x)包含序列如SEQ ID NO:262所示的氨基酸或其保守修饰的 重链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:263所示的氨基酸或其保 守修饰的重链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:264所示的氨 基酸或其保守修饰的重链可变区CDR3；
(y)包含序列如SEQ ID NO:304所示的氨基酸或其保守修饰的 重链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:305所示的氨基酸或其保 守修饰的重链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:306所示的氨 基酸或其保守修饰的重链可变区CDR3；
(z)包含序列如SEQ ID NO:316所示的氨基酸或其保守修饰的重 链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:317所示的氨基酸或其保守 修饰的重链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:318所示的氨基 酸或其保守修饰的重链可变区CDR3；
(aa)包含序列如SEQ ID NO:328所示的氨基酸或其保守修饰的 重链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:329所示的氨基酸或其保 守修饰的重链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:330所示的氨 基酸或其保守修饰的重链可变区CDR3；
(ab)包含序列如SEQ ID NO:340所示的氨基酸或其保守修饰的 重链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:341所示的氨基酸或其保 守修饰的重链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:342所示的氨 基酸或其保守修饰的重链可变区CDR3；
(ac)包含序列如SEQ ID NO:352所示的氨基酸或其保守修饰的 重链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:353所示的氨基酸或其保 守修饰的重链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:354所示的氨 基酸或其保守修饰的重链可变区CDR3；
(ad)包含序列如SEQ ID NO:364所示的氨基酸或其保守修饰的 重链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:365所示的氨基酸或其保 守修饰的重链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:366所示的氨 基酸或其保守修饰的重链可变区CDR3；
(ae)包含序列如SEQ ID NO:376所示的氨基酸或其保守修饰的 重链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:377所示的氨基酸或其保 守修饰的重链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:378所示的氨 基酸或其保守修饰的重链可变区CDR3；或
(af)包含序列如SEQ ID NO:388所示的氨基酸或其保守修饰的 重链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:389所示的氨基酸或其保 守修饰的重链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:390所示的氨 基酸或其保守修饰的重链可变区CDR3。
41.根据实施方式40所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域包含：包含序列如SEQ ID NO:202所示的氨基酸的重链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:203所示的氨基酸的重链可变区 CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:204所示的氨基酸的重链可变区 CDR3。
42.根据实施方式40所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域包含：包含序列如SEQ ID NO:208所示的氨基酸的重链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:209所示的氨基酸的重链可变区 CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:210所示的氨基酸的重链可变区 CDR3。
43.根据实施方式40所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域包含：包含序列如SEQ ID NO:214所示的氨基酸的重链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:215所示的氨基酸的重链可变区 CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:216所示的氨基酸的重链可变区 CDR3。
44.根据实施方式40所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域包含：包含序列如SEQ ID NO:220所示的氨基酸的重链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:221所示的氨基酸的重链可变区 CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:222所示的氨基酸的重链可变区 CDR3。
45.根据实施方式40所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域包含：包含序列如SEQ ID NO:226所示的氨基酸的重链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:227所示的氨基酸的重链可变区 CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:228所示的氨基酸的重链可变区 CDR3；
46.根据实施方式1-45中任一项所述的CAR，其中所述细胞外 抗原结合结构域包含：
(a)包含序列如SEQ ID NO:127所示的氨基酸或其保守修饰的轻 链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:129所示的氨基酸或其保守 修饰的轻链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:130所示的氨基 酸或其保守修饰的轻链可变区CDR3；
(b)包含序列如SEQ ID NO:133所示的氨基酸或其保守修饰的 轻链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:134所示的氨基酸或其保 守修饰的轻链可变区CDR2；和包含SEQ IDNO:135或其保守修饰的 轻链可变区CDR3；
(c)包含序列如SEQ ID NO:139所示的氨基酸或其保守修饰的轻 链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:140所示的氨基酸或其保守 修饰的轻链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:141所示的氨基 酸或其保守修饰的轻链可变区CDR3；
(d)包含序列如SEQ ID NO:145所示的氨基酸或其保守修饰的 轻链可变区CDR1；包含SEQ ID NO:146或其保守修饰的轻链可变区 CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:147所示的氨基酸或其保守修饰的 轻链可变区CDR3；
(e)包含序列如SEQ ID NO:151所示的氨基酸或其保守修饰的轻 链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:152所示的氨基酸或其保守 修饰的轻链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:153所示的氨基 酸或其保守修饰的轻链可变区CDR3；
(f)包含序列如SEQ ID NO:157所示的氨基酸或其保守修饰的轻 链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:158所示的氨基酸或其保守 修饰的轻链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:159所示的氨基 酸或其保守修饰的轻链可变区CDR3；
(g)包含序列如SEQ ID NO:163所示的氨基酸或其保守修饰的 轻链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:164所示的氨基酸或其保 守修饰的轻链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:165所示的氨 基酸或其保守修饰的轻链可变区CDR3；
(h)包含序列如SEQ ID NO:169所示的氨基酸或其保守修饰的 轻链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:170所示的氨基酸或其保 守修饰的轻链可变区CDR2；和包含SEQ IDNO:171或其保守修饰的 轻链可变区CDR3；
(i)包含序列如SEQ ID NO:175所示的氨基酸或其保守修饰的轻 链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:176所示的氨基酸或其保守 修饰的轻链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:177所示的氨基 酸或其保守修饰的轻链可变区CDR3；
(j)包含序列如SEQ ID NO:181所示的氨基酸或其保守修饰的轻 链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:182所示的氨基酸或其保守 修饰的轻链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:183所示的氨基 酸或其保守修饰的轻链可变区CDR3；
(k)包含序列如SEQ ID NO:187所示的氨基酸或其保守修饰的 轻链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:188所示的氨基酸或其保 守修饰的轻链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:189所示的氨 基酸或其保守修饰的轻链可变区CDR3；
(l)包含序列如SEQ ID NO:193所示的氨基酸或其保守修饰的轻 链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:194所示的氨基酸或其保守 修饰的轻链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:195所示的氨基 酸或其保守修饰的轻链可变区CDR3；
(m)包含序列如SEQ ID NO:199所示的氨基酸或其保守修饰的 轻链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:200所示的氨基酸或其保 守修饰的轻链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:201所示的氨 基酸或其保守修饰的轻链可变区CDR3；
(n)包含序列如SEQ ID NO:205所示的氨基酸或其保守修饰的 轻链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:206所示的氨基酸或其保 守修饰的轻链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:207所示的氨 基酸或其保守修饰的轻链可变区CDR3；
(o)包含序列如SEQ ID NO:211所示的氨基酸或其保守修饰的 轻链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:212所示的氨基酸或其保 守修饰的轻链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:213所示的氨 基酸或其保守修饰的轻链可变区CDR3；
(p)包含序列如SEQ ID NO:217所示的氨基酸或其保守修饰的 轻链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:218所示的氨基酸或其保 守修饰的轻链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:219所示的氨 基酸或其保守修饰的轻链可变区CDR3；
(q)包含序列如SEQ ID NO:223所示的氨基酸或其保守修饰的 轻链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:224所示的氨基酸或其保 守修饰的轻链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:225所示的氨 基酸或其保守修饰的轻链可变区CDR3；
(r)包含序列如SEQ ID NO:229所示的氨基酸或其保守修饰的轻 链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:230所示的氨基酸或其保守 修饰的轻链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:231所示的氨基 酸或其保守修饰的轻链可变区CDR3；
(s)包含序列如SEQ ID NO:235所示的氨基酸或其保守修饰的轻 链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:236所示的氨基酸或其保守 修饰的轻链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:237所示的氨基 酸或其保守修饰的轻链可变区CDR3；
(t)包含序列如SEQ ID NO:241所示的氨基酸或其保守修饰的轻 链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:242所示的氨基酸或其保守 修饰的轻链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:243所示的氨基 酸或其保守修饰的轻链可变区CDR3；
(u)包含序列如SEQ ID NO:247所示的氨基酸或其保守修饰的 轻链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:248所示的氨基酸或其保 守修饰的轻链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:249所示的氨 基酸或其保守修饰的轻链可变区CDR3；
(v)包含序列如SEQ ID NO:253所示的氨基酸或其保守修饰的 轻链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:254所示的氨基酸或其保 守修饰的轻链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:255所示的氨 基酸或其保守修饰的轻链可变区CDR3；
(w)包含序列如SEQ ID NO:259所示的氨基酸或其保守修饰的 轻链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:260所示的氨基酸或其保 守修饰的轻链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:261所示的氨 基酸或其保守修饰的轻链可变区CDR3；
(x)包含序列如SEQ ID NO:265所示的氨基酸或其保守修饰的 轻链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:266所示的氨基酸或其保 守修饰的轻链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:267所示的氨 基酸或其保守修饰的轻链可变区CDR3；
(y)包含序列如SEQ ID NO:307所示的氨基酸或其保守修饰的 轻链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:308所示的氨基酸或其保 守修饰的轻链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:309所示的氨 基酸或其保守修饰的轻链可变区CDR3；
(z)包含序列如SEQ ID NO:319所示的氨基酸或其保守修饰的轻 链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:320所示的氨基酸或其保守 修饰的轻链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:321所示的氨基 酸或其保守修饰的轻链可变区CDR3；
(aa)包含序列如SEQ ID NO:331所示的氨基酸或其保守修饰的 轻链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:332所示的氨基酸或其保 守修饰的轻链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:333所示的氨 基酸或其保守修饰的轻链可变区CDR3；
(ab)包含序列如SEQ ID NO:343所示的氨基酸或其保守修饰的 轻链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:344所示的氨基酸或其保 守修饰的轻链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:345所示的氨 基酸或其保守修饰的轻链可变区CDR3；
(ac)包含序列如SEQ ID NO:355所示的氨基酸或其保守修饰的 轻链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:356所示的氨基酸或其保 守修饰的轻链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:357所示的氨 基酸或其保守修饰的轻链可变区CDR3；
(ad)包含序列如SEQ ID NO:367所示的氨基酸或其保守修饰的 轻链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:368所示的氨基酸或其保 守修饰的轻链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:369所示的氨 基酸或其保守修饰的轻链可变区CDR3；
(ae)包含序列如SEQ ID NO:379所示的氨基酸或其保守修饰的 轻链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:380所示的氨基酸或其保 守修饰的轻链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:381所示的氨 基酸或其保守修饰的轻链可变区CDR3；或
(af)包含序列如SEQ ID NO:391所示的氨基酸或其保守修饰的 轻链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:392所示的氨基酸或其保 守修饰的轻链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:393所示的氨 基酸或其保守修饰的轻链可变区CDR3。
47.根据实施方式46所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域包含：包含序列如SEQ ID NO:205所示的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:206所示的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:207所示的氨基酸的轻链可变区 CDR3。
48.根据实施方式46所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域包含：包含序列如SEQ ID NO:211所示的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:212所示的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:213所示的氨基酸的轻链可变区 CDR3。
49.根据实施方式46所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域包含：包含序列如SEQ ID NO:217所示的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:218所示的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:219所示的氨基酸的轻链可变区 CDR3。
50.根据实施方式46所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域包含：包含序列如SEQ ID NO:223所示的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:224所示的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:225所示的氨基酸的轻链可变区 CDR3。
51.根据实施方式46所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域包含：包含序列如SEQ ID NO:229所示的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:230所示的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:231所示的氨基酸的轻链可变区 CDR3。
52.根据实施方式1-51中任一项所述的CAR，其中所述细胞外 抗原结合结构域包含：
(a)包含序列如SEQ ID NO:124所示的氨基酸的重链可变区 CDR1；包含序列如SEQID NO:125所示的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含序列如SEQ ID NO:126所示的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含序列如SEQ ID NO:127所示的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:128所示的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:129所示的氨基酸的轻链可变区 CDR3；
(b)包含序列如SEQ ID NO:130所示的氨基酸的重链可变区 CDR1；包含序列如SEQID NO:131所示的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含序列如SEQ ID NO:132所示的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含序列如SEQ ID NO:133所示的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:134所示的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:135所示的氨基酸的轻链可变区 CDR3；
(c)包含序列如SEQ ID NO:136所示的氨基酸的重链可变区 CDR1；包含序列如SEQID NO:137所示的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含序列如SEQ ID NO:138所示的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含序列如SEQ ID NO:139所示的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:140所示的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:141所示的氨基酸的轻链可变区CDR3；
(d)包含序列如SEQ ID NO:142所示的氨基酸的重链可变区 CDR1；包含序列如SEQID NO:143所示的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含序列如SEQ ID NO:144所示的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含序列如SEQ ID NO:145所示的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:146所示的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:147所示的氨基酸的轻链可变区 CDR3；
(e)包含序列如SEQ ID NO:148所示的氨基酸的重链可变区 CDR1；包含序列如SEQID NO:149所示的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含序列如SEQ ID NO:150所示的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含序列如SEQ ID NO:151所示的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:152所示的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:153所示的氨基酸的轻链可变区 CDR3；
(f)包含序列如SEQ ID NO:154所示的氨基酸的重链可变区 CDR1；包含序列如SEQID NO:155所示的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含序列如SEQ ID NO:156所示的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含序列如SEQ ID NO:157所示的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:158所示的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:159所示的氨基酸的轻链可变区 CDR3；
(g)包含序列如SEQ ID NO:160所示的氨基酸的重链可变区 CDR1；包含序列如SEQID NO:161所示的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含序列如SEQ ID NO:162所示的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含序列如SEQ ID NO:163所示的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:164所示的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:165所示的氨基酸的轻链可变区 CDR3；
(h)包含序列如SEQ ID NO:166所示的氨基酸的重链可变区 CDR1；包含序列如SEQID NO:167所示的氨基酸的重链可变区CDR2；包含序列如SEQ ID NO:168所示的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含序列如SEQ ID NO:169所示的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:170所示的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:171所示的氨基酸的轻链可变区 CDR3；
(i)包含序列如SEQ ID NO:172所示的氨基酸的重链可变区 CDR1；包含序列如SEQID NO:173所示的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含序列如SEQ ID NO:174所示的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含序列如SEQ ID NO:175所示的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:176所示的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:177所示的氨基酸的轻链可变区 CDR3；
(j)包含序列如SEQ ID NO:178所示的氨基酸的重链可变区 CDR1；包含序列如SEQID NO:179所示的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含序列如SEQ ID NO:180所示的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含序列如SEQ ID NO:181所示的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:182所示的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:183所示的氨基酸的轻链可变区 CDR3；
(k)包含序列如SEQ ID NO:184所示的氨基酸的重链可变区 CDR1；包含序列如SEQID NO:185所示的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含序列如SEQ ID NO:186所示的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含序列如SEQ ID NO:187所示的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:188所示的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:189所示的氨基酸的轻链可变区 CDR3；
(l)包含序列如SEQ ID NO:190所示的氨基酸的重链可变区 CDR1；包含序列如SEQID NO:191所示的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含序列如SEQ ID NO:192所示的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含序列如SEQ ID NO:193所示的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:194所示的氨基酸的轻链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:195所示的氨基酸的轻链可变区 CDR3；
(m)包含序列如SEQ ID NO:196所示的氨基酸的重链可变区 CDR1；包含序列如SEQID NO:197所示的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含序列如SEQ ID NO:198所示的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含序列如SEQ ID NO:199所示的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:200所示的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:201所示的氨基酸的轻链可变区 CDR3；
(n)包含序列如SEQ ID NO:202所示的氨基酸的重链可变区 CDR1；包含序列如SEQID NO:203所示的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含序列如SEQ ID NO:204所示的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含序列如SEQ ID NO:205所示的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:206所示的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:207所示的氨基酸的轻链可变区 CDR3；
(o)包含序列如SEQ ID NO:208所示的氨基酸的重链可变区 CDR1；包含序列如SEQID NO:209所示的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含序列如SEQ ID NO:210所示的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含序列如SEQ ID NO:211所示的氨基酸的轻链可变区CDR1； 包含序列如SEQ ID NO:212所示的氨基酸的轻链可变区CDR2；和包 含序列如SEQ ID NO:213所示的氨基酸的轻链可变区CDR3；
(p)包含序列如SEQ ID NO:214所示的氨基酸的重链可变区 CDR1；包含序列如SEQID NO:215所示的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含序列如SEQ ID NO:216所示的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含序列如SEQ ID NO:217所示的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:218所示的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:219所示的氨基酸的轻链可变区 CDR3；
(q)包含序列如SEQ ID NO:220所示的氨基酸的重链可变区 CDR1；包含序列如SEQID NO:221所示的氨基酸的重链可变区CDR2；包含序列如SEQ ID NO:222所示的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含序列如SEQ ID NO:223所示的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:224所示的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:225所示的氨基酸的轻链可变区 CDR3；
(r)包含序列如SEQ ID NO:226所示的氨基酸的重链可变区 CDR1；包含序列如SEQID NO:227所示的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含序列如SEQ ID NO:228所示的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含序列如SEQ ID NO:229所示的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:230所示的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:231所示的氨基酸的轻链可变区 CDR3；
(s)包含序列如SEQ ID NO:232所示的氨基酸的重链可变区 CDR1；包含序列如SEQID NO:233所示的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含序列如SEQ ID NO:234所示的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含序列如SEQ ID NO:235所示的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:236所示的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:237所示的氨基酸的轻链可变区 CDR3；
(t)包含序列如SEQ ID NO:238所示的氨基酸的重链可变区 CDR1；包含序列如SEQID NO:239所示的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含序列如SEQ ID NO:240所示的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含序列如SEQ ID NO:241所示的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:242所示的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:243所示的氨基酸的轻链可变区 CDR3；
(u)包含序列如SEQ ID NO:244所示的氨基酸的重链可变区 CDR1；包含序列如SEQID NO:245所示的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含序列如SEQ ID NO:246所示的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含序列如SEQ ID NO:247所示的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:248所示的氨基酸的轻链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:249所示的氨基酸的轻链可变区 CDR3；
(v)包含序列如SEQ ID NO:250所示的氨基酸的重链可变区 CDR1；包含序列如SEQID NO:251所示的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含序列如SEQ ID NO:252所示的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含序列如SEQ ID NO:253所示的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:254所示的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:255所示的氨基酸的轻链可变区 CDR3；
(w)包含序列如SEQ ID NO:256所示的氨基酸的重链可变区 CDR1；包含序列如SEQID NO:257所示的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含序列如SEQ ID NO:258所示的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含序列如SEQ ID NO:259所示的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:260所示的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:261所示的氨基酸的轻链可变区 CDR3；
(x)包含序列如SEQ ID NO:262所示的氨基酸的重链可变区 CDR1；包含序列如SEQID NO:263所示的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含序列如SEQ ID NO:264所示的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含序列如SEQ ID NO:265所示的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:266所示的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:267所示的氨基酸的轻链可变区 CDR3；
(y)包含序列如SEQ ID NO:304所示的氨基酸的重链可变区 CDR1；包含序列如SEQID NO:305所示的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含序列如SEQ ID NO:306所示的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含序列如SEQ ID NO:307所示的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:308所示的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:309所示的氨基酸的轻链可变区 CDR3；
(z)包含序列如SEQ ID NO:316所示的氨基酸的重链可变区CDR1；包含序列如SEQID NO:317所示的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含序列如SEQ ID NO:318所示的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含序列如SEQ ID NO:319所示的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:320所示的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:321所示的氨基酸的轻链可变区 CDR3；
(aa)包含序列如SEQ ID NO:328所示的氨基酸的重链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:329所示的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含序列如SEQ ID NO:330所示的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含序列如SEQ ID NO:331所示的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:332所示的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:333所示的氨基酸的轻链可变区 CDR3；
(ab)包含序列如SEQ ID NO:340所示的氨基酸的重链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:341所示的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含序列如SEQ ID NO:342所示的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含序列如SEQ ID NO:343所示的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:344所示的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:345所示的氨基酸的轻链可变区 CDR3；
(ac)包含序列如SEQ ID NO:352所示的氨基酸的重链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:353所示的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含序列如SEQ ID NO:354所示的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含序列如SEQ ID NO:355所示的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:356所示的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:357所示的氨基酸的轻链可变区 CDR3；
(ad)包含序列如SEQ ID NO:364所示的氨基酸的重链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:365所示的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含序列如SEQ ID NO:366所示的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含序列如SEQ ID NO:367所示的氨基酸的轻链可变区CDR1；包含序列如SEQ ID NO:368所示的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:369所示的氨基酸的轻链可变区 CDR3；
(ae)包含序列如SEQ ID NO:376所示的氨基酸的重链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:377所示的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含序列如SEQ ID NO:378所示的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含序列如SEQ ID NO:379所示的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:380所示的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:381所示的氨基酸的轻链可变区 CDR3；或
(af)包含序列如SEQ ID NO:388所示的氨基酸的重链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:389所示的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含序列如SEQ ID NO:390所示的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含序列如SEQ ID NO:391所示的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:392所示的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:393所示的氨基酸的轻链可变区 CDR3。
53.根据实施方式52所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域包含：包含序列如SEQ ID NO:202所示的氨基酸的重链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:203所示的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含序列如SEQ ID NO:204所示的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含序列如SEQ ID NO:205所示的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:206所示的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:207所示的氨基酸的轻链可变区CDR3。
54.根据实施方式52所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域包含：包含序列如SEQ ID NO:208所示的氨基酸的重链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:209所示的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含序列如SEQ ID NO:210所示的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含序列如SEQ ID NO:211所示的氨基酸的轻链可变区CDR1； 包含序列如SEQ ID NO:212所示的氨基酸的轻链可变区CDR2；和包 含序列如SEQ ID NO:213所示的氨基酸的轻链可变区CDR3。
55.根据实施方式52所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域包含：包含序列如SEQ ID NO:214所示的氨基酸的重链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:215所示的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含序列如SEQ ID NO:216所示的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含序列如SEQ ID NO:217所示的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:218所示的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:219所示的氨基酸的轻链可变区CDR3。
56.根据实施方式52所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域包含：包含序列如SEQ ID NO:220所示的氨基酸的重链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:221所示的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含序列如SEQ ID NO:222所示的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含序列如SEQ ID NO:223所示的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:224所示的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:225所示的氨基酸的轻链可变区CDR3。
57.根据实施方式52所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域包含：包含序列如SEQ ID NO:226所示的氨基酸的重链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:227所示的氨基酸的重链可变区 CDR2；包含序列如SEQ ID NO:228所示的氨基酸的重链可变区 CDR3；包含序列如SEQ ID NO:229所示的氨基酸的轻链可变区 CDR1；包含序列如SEQ ID NO:230所示的氨基酸的轻链可变区 CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:231所示的氨基酸的轻链可变区CDR3。
58.根据实施方式1-57中任一项所述的CAR，其中所述细胞外 抗原结合结构域包含共价结合至所述细胞外抗原结合结构域的5’端的 信号肽。
59.根据实施方式2-58中任一项所述的CAR，其中所述GPRC5D 包含如SEQ ID NO:97所示的氨基酸序列。
60.根据实施方式59所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域结合一个、两个、三个或四个选自下述的表位区域：包含SEQ ID NO:97的氨基酸1-27的N-端区域中的表位区域、包含SEQ ID NO:97 的氨基酸85-93的ECL1区域中的表位区域、包含SEQ ID NO:97的氨 基酸145-167的ECL2区域中的表位区域、和包含SEQ ID NO:97的氨 基酸226-239的ECL3区域中的表位区域。
61.根据实施方式60所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域结合包含SEQID NO:97的氨基酸16-23的表位区域。
62.根据实施方式61所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域结合包含SEQID NO:97的氨基酸15-23的表位区域。
63.根据实施方式61所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域结合包含SEQID NO:97的氨基酸16-25的表位区域。
64.根据实施方式60所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域结合包含SEQID NO:97的氨基酸10-17的表位区域。
65.根据实施方式64所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域结合包含SEQID NO:97的氨基酸5-17的表位区域。
66.根据实施方式60所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域结合包含SEQID NO:97的氨基酸85-95的表位区域。
67.根据实施方式60所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域结合包含SEQID NO:97的氨基酸157-164的表位区域。
68.根据实施方式67所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域结合包含SEQID NO:97的氨基酸157-167的表位区域。
69.根据实施方式60所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域结合包含SEQID NO:97的氨基酸230-237的表位区域。
70.根据实施方式69所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域结合包含SEQID NO:97的氨基酸229-237的表位区域。
71.根据实施方式69所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域结合包含SEQID NO:97的氨基酸230-243的表位区域。
72.根据实施方式69所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域结合包含SEQID NO:97的氨基酸227-237的表位区域。
73.根据实施方式60所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域结合一个、两个或三个选自下述的表位区域：包含SEQ ID NO:97 的氨基酸16-25的表位区域、包含SEQ IDNO:97的氨基酸157-164的 表位区域和包含SEQ ID NO:97的氨基酸229-237的表位区域。
74.根据实施方式73所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域包含：包含序列如SEQ ID NO:57所示的氨基酸的重链可变区和 包含序列如SEQ ID NO:58所示的氨基酸的轻链可变区。
75.根据实施方式73或实施方式74所述的CAR，其中所述细胞 外抗原结合结构域包含：包含序列如SEQ ID NO:208所示的氨基酸的 VH CDR1、包含序列如SEQ ID NO:209所示的氨基酸的VH CDR2、包 含序列如SEQ ID NO:210所示的氨基酸的VH CDR3、包含序列如SEQ ID NO:211所示的氨基酸的VL CDR1、包含序列如SEQ ID NO:212所 示的氨基酸的VLCDR2、和包含序列如SEQ ID NO:213所示的氨基酸 的VL CDR3。
76.根据实施方式60所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域结合一个、两个或三个选自下述的表位区域：包含SEQ ID NO:97 的氨基酸5-17的表位区域、包含SEQ IDNO:97的氨基酸85-95的表位 区域、和包含SEQ ID NO:97的氨基酸157-164的表位区域。
77.根据实施方式76所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域包含：包含序列如SEQ ID NO:61所示的氨基酸的重链可变区和 包含序列如SEQ ID NO:62所示的氨基酸的轻链可变区。
78.根据实施方式76或实施方式77所述的CAR，其中所述细胞 外抗原结合结构域包含：包含序列如SEQ ID NO:214所示的氨基酸的 VH CDR1、包含序列如SEQ ID NO:215所示的氨基酸的VH CDR2、包 含序列如SEQ ID NO:216所示的氨基酸的VH CDR3、包含序列如SEQ ID NO:217所示的氨基酸的VL CDR1、包含序列如SEQ ID NO:218所 示的氨基酸的VLCDR2、和包含序列如SEQ ID NO:219所示的氨基酸 的VL CDR3。
79.根据实施方式60所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域结合一个或两个选自包含SEQ ID NO:97的氨基酸15-23的表位区 域和包含SEQ ID NO:97的氨基酸230-243的表位区域中的表位区域。
80.根据实施方式79所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域包含：包含序列如SEQ ID NO:65所示的氨基酸的重链可变区和 包含序列如SEQ ID NO:66所示的氨基酸的轻链可变区。
81.根据实施方式79或实施方式80所述的CAR，其中所述细胞 外抗原结合结构域包含：包含序列如SEQ ID NO:220所示的氨基酸的 VH CDR1、包含序列如SEQ ID NO:221所示的氨基酸的VH CDR2、包 含序列如SEQ ID NO:222所示的氨基酸的VH CDR3、包含序列如SEQ ID NO:223所示的氨基酸的VL CDR1、包含序列如SEQ ID NO:224所 示的氨基酸的VLCDR2、和包含序列如SEQ ID NO:225所示的氨基酸 的VL CDR3。
82.根据实施方式60所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域结合一个、两个或三个选自下述的表位区域：包含SEQ ID NO:97 的氨基酸10-17的表位区域、包含SEQ IDNO:97的氨基酸157-167的 表位区域、和包含SEQ ID NO:97的氨基酸227-237的表位区域。
83.根据实施方式82所述的CAR，其中所述细胞外抗原结合结 构域包含：包含序列如SEQ ID NO:69所示的氨基酸的重链可变区和 包含序列如SEQ ID NO:70所示的氨基酸的轻链可变区。
84.根据实施方式82或实施方式83所述的CAR，其中所述细胞 外抗原结合结构域包含：包含序列如SEQ ID NO:226所示的氨基酸的 VH CDR1、包含序列如SEQ ID NO:227所示的氨基酸的VH CDR2、包 含序列如SEQ ID NO:228所示的氨基酸的VH CDR3、包含序列如SEQ ID NO:229所示的氨基酸的VL CDR1、包含序列如SEQ ID NO:230所 示的氨基酸的VLCDR2、和包含序列如SEQ ID NO:231所示的氨基酸 的VL CDR3。
85.根据实施方式1-84中任一项所述的CAR，其中所述跨膜结 构域包含CD8多肽、CD28多肽、CD3ζ多肽、CD4多肽、4-1BB多 肽、OX40多肽、ICOS多肽、CTLA-4多肽、PD-1多肽、LAG-3多肽、 2B4多肽、BTLA多肽、合成肽(非基于与免疫应答相关的蛋白质)、 或其组合。
86.根据实施方式85所述的CAR，其中所述跨膜结构域包含 CD8多肽。
87.根据实施方式85所述的CAR，其中所述跨膜结构域包含 CD28多肽。
88.根据实施方式1-87中任一项所述的CAR，其中所述细胞内 结构域包含CD3ζ多肽。
89.根据实施方式1-88中任一项所述的CAR，其中所述细胞内 结构域还包含至少一个信号传导区。
90.根据实施方式89所述的CAR，其中所述至少一个信号传导 区包含CD28多肽、4-1BB多肽、OX40多肽、ICOS多肽、DAP-10多 肽、PD-1多肽、CTLA-4多肽、LAG-3多肽、2B4多肽、BTLA多肽、 合成肽(非基于与免疫应答相关的蛋白质)、或其组合。
91.根据实施方式89或实施方式90所述的CAR，其中所述信号 传导区是共刺激信号传导区。
92.根据实施方式91所述的CAR，其中所述至少一个共刺激信 号传导区包含CD28多肽、4-1BB多肽、OX40多肽、ICOS多肽、DAP-10 多肽、或其组合。
93.根据实施方式92所述的CAR，其中所述至少一个共刺激信 号传导区包含CD28多肽。
94.根据实施方式92所述的CAR，其中所述至少一个共刺激信 号传导区包含4-1BB多肽。
95.根据实施方式89-93中任一项所述的CAR，其中所述跨膜结 构域包含CD28多肽，所述细胞内结构域包含CD3ζ多肽，并且所述 信号传导结构域包含CD28多肽。
96.根据实施方式89-92和94中任一项所述的CAR，其中所述 跨膜结构域包含CD8多肽，所述细胞内结构域包含CD3ζ多肽，并且 所述信号传导结构域包含4-1BB多肽。
97.根据实施方式1-96中任一项所述的CAR，其中所述CAR是 重组表达的。
98.根据实施方式1-97中任一项所述的CAR，其中所述CAR由 载体表达。
99.根据实施方式98所述的CAR，其中所述载体是γ-逆转录病 毒载体。
100.一种分离的免疫应答细胞，其包含前述实施方式中任一 项所述的CAR。
101.根据实施方式100所述的分离的免疫应答细胞，其中所 述免疫应答细胞用所述CAR进行转导。
102.根据实施方式100或101所述的分离的免疫应答细胞，其 中所述CAR在所述免疫应答细胞的表面上组成型表达。
103.根据实施方式100-102中任一项所述的分离的免疫应答细 胞，其中所述分离的免疫应答细胞用至少一种共刺激配体进一步转导 使得所述免疫应答细胞表达所述至少一种共刺激配体。
104.根据实施方式103所述的分离的免疫应答细胞，其中所述 至少一种共刺激配体选自4-1BBL、CD80、CD86、CD70、OX40L、 CD48、TNFRSF14、及其组合。
105.根据实施方式100-104中任一项所述的分离的免疫应答细 胞，其中所述分离的免疫应答细胞用至少一种细胞因子进一步转导使 得所述免疫应答细胞分泌所述至少一种细胞因子。
106.根据实施方式105所述的分离的免疫应答细胞，其中所述 至少一种细胞因子选自IL-2、IL-3、IL-6、IL-7、IL-11、IL-12、IL-15、 IL-17、IL-21、及其组合。
107.根据实施方式100-106中任一项所述的分离的免疫应答细 胞，其中所述免疫应答细胞选自T细胞、自然杀伤(NK)细胞、细胞 毒性T淋巴细胞(CTL)、调节性T细胞、人胚胎干细胞、淋巴样祖细 胞、T细胞前体细胞和可分化成淋巴样细胞的多能干细胞。
108.根据实施方式107所述的分离的免疫应答细胞，其中所述 免疫应答细胞是T细胞。
109.一种分离的核酸分子，其编码根据实施方式1-99中任一项 所述的嵌合抗原受体(CAR)。
110.根据实施方式109所述的分离的核酸分子，其包含序列如 SEQ ID NO:397所示的核酸。
111.根据实施方式109所述的分离的核酸分子，其包含序列如 SEQ ID NO:398所示的核酸。
112.根据实施方式109所述的分离的核酸分子，其包含序列如 SEQ ID NO:399所示的核酸。
113.根据实施方式109所述的分离的核酸分子，其包含序列如SEQ ID NO:400所示的核酸。
114.根据实施方式109所述的分离的核酸分子，其包含序列如 SEQ ID NO:401所示的核酸。
115.根据实施方式109所述的分离的核酸分子，其包含序列如 SEQ ID NO:402所示的核酸。
116.根据实施方式109所述的分离的核酸分子，其包含序列如 SEQ ID NO:403所示的核酸。
117.根据实施方式109所述的分离的核酸分子，其包含序列如 SEQ ID NO:406所示的核酸。
118.根据实施方式109所述的分离的核酸分子，其包含序列如 SEQ ID NO:407所示的核酸。
119.根据实施方式109所述的分离的核酸分子，其包含序列如 SEQ ID NO:408所示的核酸。
120.一种载体，其包含根据实施方式109-119中任一项所述的分 离的核酸分子。
121.根据实施方式120所述的载体，其中所述载体是γ-逆转录 病毒载体。
122.一种宿主细胞，其表达根据实施方式109-119中任一项所述 的核酸分子。
123.根据实施方式122所述的宿主细胞，其中所述宿主细胞是T 细胞。
124.一种减少受试者的肿瘤负荷的方法，其包括将有效量的根 据实施方式100-108中任一项所述的免疫应答细胞施用于所述受试者， 从而诱导受试者的肿瘤细胞死亡。
125.根据实施方式124所述的方法，其中所述方法减少肿瘤细 胞的数目。
126.根据实施方式124所述的方法，其中所述方法减小肿瘤尺 寸。
127.根据实施方式124所述的方法，其中所述方法根除所述受 试者中的肿瘤。
128.根据实施方式124-127中任一项所述的方法，其中所述肿瘤 是多发性骨髓瘤或瓦氏巨球蛋白血症。
129.根据实施方式128所述的方法，其中所述肿瘤是多发性骨 髓瘤。
130.根据实施方式124-129中任一项所述的方法，其中所述受试 者是人。
131.根据实施方式124-130中任一项所述的方法，其中所述免疫 应答细胞是T细胞。
132.一种增加或延长患有瘤形成的受试者的存活的方法，其包 括将有效量的根据实施方式100-108中任一项所述的免疫应答细胞施 用于所述受试者，从而增加或延长所述受试者的存活。
133.根据实施方式132所述的方法，其中所述瘤形成是多发性 骨髓瘤或瓦氏巨球蛋白血症。
134.根据实施方式133所述的方法，其中所述瘤形成是多发性 骨髓瘤。
135.根据实施方式132-134中任一项所述的方法，其中所述方法 减小或根除所述受试者的肿瘤负荷。
136.一种用于制备结合G-蛋白偶联受体的免疫应答细胞的方法， 其包括向所述免疫应答细胞引入
一种核酸序列，其编码包含细胞外抗原结合结构域、跨膜结构域 和细胞内结构域的嵌合抗原受体(CAR)，其中所述细胞外抗原结合结 构域特异性地结合至G-蛋白偶联受体。
137.根据实施方式136所述的方法，其中所述G蛋白受体是G- 蛋白偶联受体C家族5组D成员(GPRC5D)。
138.一种药物组合物，其包含有效量的根据实施方式100-108 中任一项所述的免疫应答细胞和药学上可接受的赋形剂。
139.根据实施方式138所述的药物组合物，其中所述药物组合 物用于治疗瘤形成。
140.根据实施方式139所述的药物组合物，其中所述瘤形成是 多发性骨髓瘤或瓦氏巨球蛋白血症。
141.根据实施方式140所述的药物组合物，其中所述瘤形成是 多发性骨髓瘤。
142.一种用于治疗多发性骨髓瘤的试剂盒，其包含根据实施方 式100-108中任一项所述的免疫应答细胞。
143.根据实施方式142所述的试剂盒，其中所述试剂盒还包含 使用所述免疫应答细胞用于治疗患有瘤形成的受试者的书面说明书。
144.根据实施方式142或143所述的试剂盒，其中所述瘤形成 是多发性骨髓瘤或瓦氏巨球蛋白血症。
145.根据实施方式144所述的试剂盒，其中所述瘤形成是多发 性骨髓瘤。
附图说明
可以结合附图来理解下述具体实施方式，其以实例方式给出但并 非意在将本发明局限于所描述的具体实施方式。
图1示出根据本发明公开主题的一个非限制性实施方式的靶向G- 蛋白偶联受体的嵌合抗原受体。
图2描绘正常组织和人癌症细胞系中的人GPRC5D表达。
图3描绘本发明公开的GPRC5D CAR在人T细胞上的表达。
图4描绘本发明公开的GPRC5D对过表达GPRC5D的3T3细胞的 杀伤活性。
图5描绘本发明公开的GPRC5D对人多发性骨髓瘤细胞系的杀伤 活性。
图6示出根据本发明公开主题的一个非限制性实施方式的靶向 GPRC5D的嵌合抗原受体。
图7描绘根据本发明公开主题的一个非限制性实施方式的编码靶 向GPRC5D的CAR的核酸分子。
图8描绘根据本发明公开主题的一个非限制性实施方式的编码靶 向GPRC5D的CAR的核酸分子。
图9描绘根据本发明公开主题的一个非限制性实施方式的编码靶 向GPRC5D的CAR的核酸分子。
图10描绘靶向GPRC5D的CAR T细胞对人多发性骨髓瘤细胞系 的细胞毒性。
图11描绘靶向GPRC5D的CAR T细胞的细胞因子分泌的诱导。
图12描绘靶向GPRC5D的CAR T细胞的抗肿瘤活性。
图13A和图13B描绘靶向GPRC5D的CAR T细胞的杀伤活性。 (A)示出在时间0时的GFP+肿瘤细胞系的百分比。(B)示出在时间 36小时时杀伤GFP+肿瘤细胞系的百分比。
图14示出CLIPS技术。CLIPS反应在CLIPS支架的溴基团和半 胱氨酸的巯基侧链之间发生。反应在温和条件下是快速且特异性的。 使用这种巧妙的化学作用，将天然蛋白质序列转化成具有一系列结构 的CLIPS构建体。从左到右：两个不同的单T2环，T3双环，共轭T2 +T3环，稳定的β折叠和稳定的α螺旋(Timmerman等人，J.Mol. Recognit.2007；20:283-29)。
图15示出组合CLIPS文库筛选。含有不连续构象表位的靶蛋白 (左)被转化为矩阵文库(matrix library)(中间)。组合肽在专有的缩 微平片上合成，并经化学作用转化为空间限定的CLIPS构建体(右)。
图16描绘T3成环的CLIPSTM构建体。
图17A-17D示出热图技术。(A)组合肽的表格，其中两个子序列 表示为“环1”和“环2”。(B)展示为矩阵的A的数据。(C)热图表 示法的颜色条标示。(D)来自A的数据的热图可视化。
图18示出针对ET150-2记录的强度分布。在记录单肽的信号的高 度从该肽的起始残基到结束残基绘制线。
图19示出在高严格条件下针对ET150-5记录的数据的热图分析。
图20示出ET150-18记录的强度分布。
图21示出ET150-8记录的强度分布。
图22描绘包含七个跨膜螺旋(TM)和3个胞外区(ECL)的GPCR 的示意图。用彩色箭头描绘每个抗体的结合位点。
图23描绘对于每个样本记录的所有数据的散点图分析。斜线是统 计数据分布。
图24描绘抗-GPRC5D抗体的FACS分析。
图25描绘抗-GPRC5D抗体的FACS分析。
图26描绘根据本发明公开主题的一个非限制性实施方式的编码靶 向GPRC5D的CAR的核酸分子。
图27描绘根据本发明公开主题的一个非限制性实施方式的编码靶 向GPRC5D的CAR的核酸分子。
具体实施方式
本发明公开的主题总体提供靶向G-蛋白偶联受体(例如，G-蛋白 偶联受体C家族5组D成员(GPRC5D))的嵌合抗原受体(CAR)。 在一个非限制性实例中，CAR包含细胞外抗原结合结构域、跨膜结构 域和细胞内结构域，其中细胞外抗原结合结构域特异性地结合G-蛋白偶联受体。本发明公开的主题还提供表达靶向G-蛋白偶联受体的CAR 的免疫应答细胞(例如，T细胞、自然杀伤(NK)细胞、细胞毒性T 淋巴细胞(CTL)、调节性T细胞、人胚胎干细胞、淋巴样祖细胞、T 细胞前体细胞和可分化成淋巴样细胞的多能干细胞)、以及使用此类免 疫应答细胞用于治疗癌症例如多发性骨髓瘤的方法。
I.定义
除非另有定义，本文使用的所有技术和科学术语具有本发明所属 领域的技术人员通常理解的含义。以下参考文献为本领域技术人员提 供本发明中使用的许多术语的一般定义：Singleton等，Dictionary of Microbiology and Molecular Biology(第二版，1994)；The Cambridge Dictionary of Science and Technology(Walker编，1988)；TheGlossary of Genetics，第五版，R.Rieger等(编)，Springer Verlag(1991)；和Hale &Marham，The Harper Collins Dictionary of Biology(1991)。除非另有 说明，本文使用的以下术语具有下文给出的含义。
本文使用的术语“约”或“大约”是指在由本领域普通技术人员 确定的特定值的可接受误差范围内，这将部分地取决于如何测量或确 定该值，即测量系统的局限性。例如，根据本领域的惯例，“约”可以 指在3个或多于3个标准偏差内。或者，“约”可以表示给定值的高达 20％、优选高达10％、更优选高达5％、再更优选高达1％的范围。或 者，特别是关于生物系统或过程，该术语可以表示在数值的一个数量 级内、优选在5倍以内、更优选在2倍以内。
本文使用的术语“细胞群体”是指表达相似或不同表型的至少两 种细胞的组。在非限制性实例中，细胞群体可以包括至少约10个、至 少约100个、至少约200个、至少约300个、至少约400个、至少约500个、至少约600个、至少约700个、至少约800个、至少约900 个、至少约1000个表达相似或不同表型的细胞。
本文使用的术语“抗体”不仅指完整的抗体分子，而且指保留免 疫原结合能力的抗体分子片段。此类片段在本领域中也是众所周知的， 并且在体外和体内常规使用。因此，本文使用的术语“抗体”不仅指 完整的免疫球蛋白分子，而且指众所周知的活性片段F(ab′)2和Fab。缺 少完整抗体的Fc片段的F(ab′)2和Fab片段，更快地从循环中清除，并 且可能具有更少的完整抗体的非特异性组织结合(Wahl等，J.Nucl.Med. 24：316～325(1983))。本发明的抗体包括完整天然抗体、双特异性抗 体；嵌合抗体；Fab、Fab’、单链V区片段(scFv)、融合多肽和非常 规抗体。
本文使用的术语“单链可变片段”或“scFv”是免疫球蛋白(例 如小鼠或人)的重链(VH)和轻链(VL)的可变区的融合蛋白，其共 价连接形成VH：：VL异源二聚体。重链(VH)和轻链(VL)直接连接或 通过编码肽的接头(例如，10、15、20、25个氨基酸)连接，其将VH的N末端与VL的C-末端连接或将VH的C末端与VL的N末端连接。 接头通常富含用于柔性的甘氨酸，以及用于溶解性的丝氨酸或苏氨酸。 接头可以连接细胞外抗原结合结构域的重链可变区和轻链可变区。接 头的非限制性实例公开于Shen等人，Anal.Chem.80(6)：1910-1917 (2008)和WO 2014/087010，其全部内容并入本文以供参考。在某些实 施方式中，接头是G4S接头。
在非限制性实例中，接头包含具有如下文所提供的SEQ ID NO： 897所示序列的氨基酸。
GGGGSGGGGSGGGGS[SEQ ID NO：284]。在某些实施方式中， 编码SEQ ID NO：284的氨基酸序列的核酸序列示于SEQ ID NO：285 中，其提供如下：
在另一个非限制性实例中，接头包含具有如下文所提供的SEQ ID NO：98所示序列的氨基酸。
在某些实施方式中，编码SEQ ID NO：98的氨基酸序列的核酸序 列示于SEQ IDNO：99中，其提供如下：
尽管去除了恒定区并引入了接头，scFv蛋白保留了原始免疫球蛋 白的特异性。单链Fv多肽抗体可以由包含VH和VL编码序列的核酸表 达，如Huston等人所述(Proc.Nat.Acad.Sci.USA，85：5879～5883， 1988)。还可参见美国专利号5,091,513、5,132,405和4,956,778；以及 美国专利公开号20050196754和20050196754。具有抑制活性的拮抗 性scFv已有描述(参见，例如，Zhao等，Hyrbidoma(Larchmt)200827(6)： 455～51；Peter等，J Cachexia Sarcopenia Muscle 2012年8月12日；Shieh 等，J Imunol 2009183(4)：2277～85；Giomarelli等，Thromb Haemost 2007 97(6)：955～63；Fife等，J ClinInvst 2006116(8)：2252～61；Brocks等， Immunotechnology 19973(3)：173～84；Moosmayer等，Ther Immunol 19952(10：31～40)。具有刺激活性的激动性scFv已有描述(参见，例 如，Peter等，J Bioi Chem 200325278(38)：36740～7；Xie等，Nat Biotech 199715(8)：768～71；Ledbetter等，Crit Rev Immunol 199717(5-6)： 427～55；Ho等，BioChimBiophys Acta 20031638(3)：257～66)。
本文使用的“F(ab)”是指结合抗原但是是单价的并且不具有Fc部 分的抗体结构的片段，例如，由木瓜蛋白酶消化的抗体产生两个F(ab) 片段和一个Fc片段(例如，重(H)链恒定区；不结合抗原的Fc区)。
本文使用的“F(ab′)2”是指由胃蛋白酶消化完整IgG抗体产生的抗 体片段，其中该片段具有两个抗原结合(ab′)(二价)区，其中每个(ab′) 区包含两条分开的氨基酸链，H链的一部分通过S-S键与轻(L)链连 接用于结合抗原，其中H链的剩余部分连接在一起。“F(ab′)2”片段可 以分裂成两个单独的Fab′片段。
本文使用的术语“载体”是指任何遗传元件，比如质粒、噬菌体、 转座子、粘粒、染色体、病毒、病毒粒子等，其当关联有适当的控制 元件时能够复制，并且其可以将基因序列转移到细胞中。因此，该术 语包括克隆和表达载体，以及病毒载体和质粒载体。
本文使用的术语“表达载体”是指一种重组核酸序列，即重组DNA 分子，其含有期望编码序列和在特定宿主生物体中表达可操作连接的 编码序列所必需的适当的核酸序列。用于在原核生物中表达所必需的 核酸序列通常包括启动子、操纵子(可选的)和核糖体结合位点，通 常伴随其它序列。已知真核细胞利用启动子、增强子和终止子及聚腺 苷酸化信号。
本文使用的“CDR”定义为抗体的互补决定区氨基酸序列，其为 免疫球蛋白重链和轻链的高变区。参见例如Kabat等人，Sequences of Proteins of ImmunologicalInterest,4th U.S.Department of Health and Human Services,National Institutesof Health(1987)。通常，抗体在可变 区中包含三个重链和三个轻链CDR或CDR区。CDR为抗体与抗原或 表位结合提供多数接触残基。在某些实施方式中，使用Kabat系统 (Kabat,E.A.,等人(1991)Sequences of Proteins of Immunological Interest,Fifth Edition,U.S.Department of Health and Human Services, NIH Publication No.91-3242)描述CDR区。
本文使用的术语“亲和力”(affinity)是指结合强度的量度。不受 理论的束缚，亲和力取决于抗体结合位点和抗原决定簇之间的立体化 学配合的紧密程度、它们之间接触区域的大小以及带电和疏水基团的 分布。亲和力还包括术语“亲合力”(avidity)，其是指形成可逆复合物 后抗原-抗体键的强度。用于计算抗体对抗原的亲和力的方法在本领域是已知的，包括使用结合实验来计算亲和力。功能试验(例如，流式 细胞术试验)中的抗体活性也反映抗体亲和力。可以使用功能试验(例 如，流式细胞术试验)对抗体进行表型鉴定并比较亲和力。
本发明的方法中有用的核酸分子包括任何编码本发明多肽或其片 段的核酸分子。此类核酸分子不需要与内源核酸序列100％相同，但通 常表现出基本同一性。与内源序列具有“基本同一性”的多核苷酸通 常能够与双链核酸分子的至少一条链杂交。“杂交”是指在各种严格条 件下，在互补多核苷酸序列(例如，本文所述的基因)或其部分之间 配对以形成双链分子。(参见，例如，Wahl，G.M.和S.L.Berger(1987) Methods Enzymol，152：399；Kimmel，A.R.(1987)Methods Enzymol， 152：507)。
例如，严格的盐浓度通常小于约750mM NaCl和75mM柠檬酸三 钠，优选小于约500mM NaCl和50mM柠檬酸三钠，更优选小于约250mM NaCl和25mM柠檬酸三钠。低严格杂交可以在不存在有机溶 剂例如甲酰胺的情况下获得，而高严格杂交可以在至少约35％甲酰胺、 更优选至少约50％甲酰胺的存在下获得。严格温度条件通常包括至少 约30℃、更优选至少约37℃、最优选至少约42℃的温度。改变其它参 数，例如杂交时间、洗涤剂例如十二烷基硫酸钠(SDS)的浓度、以及 载体DNA的包含或排除，对本领域技术人员来说是熟知的。通过根据 需要组合这些不同条件来实现各种严格的水平。在优选的实施方式中， 杂交将在30℃下在750mM NaCl、75mM柠檬酸三钠和1％SDS中发 生。在更优选的实施方式中，杂交将在37℃下在500mM NaCl、50mM 柠檬酸三钠、1％SDS、35％甲酰胺和100μg/ml变性鲑鱼精子DNA (ssDNA)中发生。在最优选的实施方式中，杂交将在42℃下在250mM NaCl、25mM柠檬酸三钠、1％SDS、50％甲酰胺和200μg/ml ssDNA 中发生。这些条件的可用变化对于本领域技术人员将是显而易见的。
对于大多数应用，杂交后的洗涤步骤也将在严格性上变化。洗涤 严格性条件可以通过盐浓度和温度来定义。如上文，可以通过降低盐 浓度或通过升高温度来提高洗涤严格性。例如，洗涤步骤的严格的盐 浓度优选小于约30mM NaCl和3mM柠檬酸三钠，最优选小于约15 mM NaCl和1.5mM柠檬酸三钠。洗涤步骤的严格温度条件通常包括 至少约25℃、更优选至少约42℃、甚至更优选至少约68℃的温度。在 优选的实施方式中，洗涤步骤将在25℃下在30mM NaCl、3mM柠檬 酸三钠和0.1％SDS中发生。在更优选的实施方式中，洗涤步骤将在 42℃下在15mM NaCl、1.5mM柠檬酸三钠和0.1％SDS中发生。在 更优选的实施方式中，洗涤步骤将在68℃下在15mM NaCl、1.5mM 柠檬酸三钠和0.1％SDS中发生。这些条件的另外的变化对于本领域 技术人员将是显而易见的。杂交技术是本领域技术人员熟知的，并且 描述于例如Benton和Davis(Science 196：180，1977)；Grunstein和 Rogness(Proc.Natl.Acad.Sci.，USA 72：3961，1975)；Ausubel等 (Current Protocols inMolecular Biology，Wiley Interscience，New York， 2001)；Berger和Kimmel(Guide toMolecular Cloning Techniques，1987， Academic Press，New York)；和Sambrook等，Molecular Cloning：A Laboratory Manual，Cold Spring Harbor Laboratory Press，NewYork。
“基本同一性”是指与参照氨基酸序列(例如，本文所述的任何 一种氨基酸序列)或核酸序列(例如，本文所述的任何一种核酸序列) 表现出至少50％同一性的多肽或核酸分子。优选地，此类序列在氨基 酸水平或核酸与用于比较的序列至少60％、更优选80％或85％、更优 选90％、95％或甚至99％相同。
序列同一性通常使用序列分析软件(例如，Sequence Analysis SoftwarePackage of the Genetics Computer Group，University of Wisconsin BiotechnologyCenter，1710University Avenue，Madison，Wis. 53705、BLAST、BESTFIT、GAP或PILEUP/PRETTYBOX程序)测 定。此类软件通过对各种取代、缺失和/或其它修饰指定同源性程度来匹配相同或相似的序列。在确定同一性程度的示例性方法中，可以使 用BLAST程序，e-3和e-100之间的概率得分表示密切相关的序列。
本文使用的术语“类似物”是指结构相关的多肽或核酸分子，其 具有参照多肽或核酸分子的功能。
本文使用的术语“配体”是指结合受体的分子。特别地，配体结 合另一个细胞上的受体，允许细胞与细胞的识别和/或相互作用。
本文使用的术语“疾病”是指破坏或干扰细胞、组织或器官的正 常功能的任何病症或障碍。疾病的实例包括瘤形成或细胞的病原体感 染。
本文使用的术语“有效量”是指足以具有治疗效果的量。在某些 实施方式中，“有效量”是足以阻止、改善或抑制瘤形成的持续增殖、 生长或转移(例如，侵袭或迁移)的量。
本文使用的术语“异源核酸分子或多肽”是指并非正常存在于细 胞中或由细胞获得的样品中的核酸分子(例如，cDNA、DNA或RNA 分子)或多肽。该核酸可以来自另一生物体，或者其可以是例如细胞 或样品中并非正常表达的mRNA分子。
本文使用的术语“免疫应答细胞”是指在免疫应答中起作用的细 胞、或其祖细胞、或其子代。
本文使用的术语“调节”是指正或负地改变。示例性调节包括约 1％、约2％、约5％、约10％、约25％、约50％、约75％或约100％ 的变化。
本文使用的术语“增加”是指正向地改变至少约5％，包括但不限 于正向地改变约5％、约10％、约25％、约30％、约50％、约75％ 或约100％。
本文使用的术语“减少”是指负向地改变至少约5％，包括但不限 于负向地改变约5％、约10％、约25％、约30％、约50％、约75％ 或约100％。
本文使用的术语“分离的细胞”是指与天然伴随细胞的分子和/或 细胞组分分离开的细胞。
本文使用的术语“分离的”、“纯化的”或“生物纯的”是指不同 程度地游离于在其天然状态中发现的正常伴随的组分之外的物质。“分 离”表示从原始来源或环境分开的程度。“纯化”表示比分离更高的分 开程度。“纯化的”或“生物纯的”蛋白质与其它物质充分分离，使得 任何杂质不会实质上影响蛋白质的生物学性质或引起其他不良后果。 也就是说，如果本发明的核酸或肽在通过重组DNA技术产生时基本上 不含细胞物质、病毒物质或培养基，或化学合成时基本上不含化学前 体或其它化学品，则其是纯化的。纯度和均一性通常使用分析化学技 术例如聚丙烯酰胺凝胶电泳或高效液相色谱法测定。术语“纯化的” 可以表示核酸或蛋白质在电泳凝胶中产生基本上一条带。对于可以进 行修饰(例如磷酸化或糖基化)的蛋白质，不同的修饰可以产生不同 的分离的蛋白质，其可以单独纯化。
本文使用的术语“分泌的”是指多肽通过内质网、高尔基体的分 泌通路从细胞中释放，以及作为在细胞质膜瞬时融合的囊泡将蛋白质 释放到细胞外。
本文使用的术语“特异性地结合”或“特异性地结合到”或“特 异性靶向”是指多肽或其片段识别并结合目的生物分子(例如多肽)， 但其基本上不识别结合样品中的其他分子，例如天然地包括本发明多 肽的生物样品中的其他分子。
本文使用的术语“治疗(treating、treatment)”是指试图改变所治 疗的个体或细胞的疾病过程的临床干预，并且可以用于预防或者在临 床病理过程期间进行。治疗的治疗效果包括但不限于防止疾病的发生 或复发、症状的缓解、疾病的任何直接或间接病理学后果的减少、防 止转移、降低疾病进展的速度、减轻或缓和疾病状态、以及缓解或改 善的预后。通过防止疾病或病症的进展，治疗可以防止受影响或经诊 断的受试者或疑似患有病症的受试者中病症引起的恶化，而且治疗可 以防止具有病症风险或疑似患有病症的受试者中病症的发作或病症症 状。
本文使用的术语“受试者”是指任何动物(例如哺乳动物)，包括 但不限于人、非人灵长类动物、啮齿动物等(例如，其将是特定治疗 的受者、或从其中收获细胞)。
II.G-蛋白偶联受体
G蛋白偶联受体(“GPR”)也称为七跨膜结构域受体、7TM受体、 七螺旋受体、蛇型受体和G蛋白连接的受体，其构成感知细胞外分子 并激活内部信号转导通路且最终激活细胞应答的大类蛋白受体家族。 GPCR可以根据序列同源性和功能相似性分为六类：A类(视紫红质 样)、B类(分泌素受体家族)、C类(代谢型谷氨酸/信息素)、D类(真 菌交配信息素受体)、E类(环AMP受体)和F类(卷曲/平滑 (Frizzled/Smoothened))。在某些实施方式中，GRP是C类GRP。在 某些非限制性实施方式中，C类GRP是G蛋白偶联受体C家族5组D 成员。
G蛋白偶联受体C家族5组D成员(GPRC5D)是在人类中没有 已知配体或功能的孤独受体。它是视黄酸诱导型G蛋白偶联受体家族 的成员。它在多发性骨髓瘤(MM)细胞中过表达，并且在任何其他细 胞类型、良性或恶性肿瘤中都不表达或以显著更低的水平表达，如图2 所示。几个研究组已经通过将原发性MM细胞的基因表达分析与正常 组织1或其他血液恶性肿瘤2-4相比较而鉴定出该基因高度差异性表达。 已经表明，更高的mRNA表达与更差的总体存活率相关。1来自MM 患者的骨髓抽吸物的表面染色显示浆细胞特异性染色。4根据发明人的 了解，这是首次通过任何治疗靶向GPRC5D。此外，根据本发明人的 了解，这是首次产生靶向任何G蛋白偶联受体的CAR。
在某些非限制性实施方式中，GPRC5D是具有SEQ ID NO:97所 示的氨基酸序列的人GPRC5D，或其片段。
SEQ ID NO:97提供如下：
人GPRC5D的N端区域具有SEQ ID NO:97的氨基酸1-27。人 GPRC5D的胞外环1(ECL1)区域具有SEQ ID NO:97的氨基酸85-93。 人GPRC5D的胞外环2(ECL2)区域具有SEQID NO:97的氨基酸 145-167。人GPRC5D的胞外环3(ECL3)区域具有SEQ ID NO:97的 氨基酸226-239。
III.嵌合抗原受体(CAR)
嵌合抗原受体(CAR)是工程化的受体，其将感兴趣的特异性移 植或赋予到免疫效应细胞。CAR可以用于通过逆转录病毒载体促进其 编码序列的转移将单克隆抗体的特异性移植到T细胞上。
有三代CAR。“第一代”CAR通常由细胞外抗原结合结构域(例 如单链可变片段(scFv))与跨膜结构域融合，再与T细胞受体链的胞 质/细胞内结构域融合而组成。“第一代”CAR通常具有来自CD3ζ链 的细胞内结构域，其是来自内源性TCR的信号的主要传递者。“第一 代”CAR可以提供重新的抗原识别并且通过在单个融合分子中的CD3ζ 链信号传导结构域激活CD4+和CD8+T细胞，而不依赖HLA介导的抗 原递呈。“第二代”CAR将来自各种共刺激分子(例如CD28、4-1BB、 ICOS、OX40)的细胞内结构域添加到CAR的胞质尾部，以向T细胞 提供额外的信号。“第二代”CAR包括既提供共刺激(例如CD28或 4-1BB)又提供激活(CD3ζ)的那些CAR。临床前研究表明，“第二代” CAR可以提高T细胞的抗肿瘤活性。例如，在慢性淋巴细胞白血病 (CLL)和急性淋巴细胞白血病(ALL)患者中，靶向CD19分子的临 床试验证实了“第二代”CAR修饰的T细胞的强烈功效。“第三代” CAR包括提供多种共刺激(例如CD28和4-1BB)和激活(CD3ζ)的 那些CAR。
根据本发明公开的主题，CAR包含细胞外抗原结合结构域、跨膜 结构域和细胞内结构域，其中细胞外抗原结合结构域结合G-蛋白偶联 受体。在某些实施方式中，G-蛋白偶联受体是GPRC5D。在具体的非 限制性实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv。在具体的非限制 性实施方式中，细胞外抗原结合结构域是任选交联的Fab。在具体的非 限制性实施方式中，细胞外结合结合域是F(ab)2。在具体的非限制性实 施方式中，任何前述分子可以包含在具有异源序列的融合蛋白中以形 成细胞外抗原结合结构域。
在某些非限制性实施方式中，本发明公开的CAR的细胞外抗原结 合结构域对G-蛋白偶联受体(例如，GPRC5D)具有高结合特异性以 及高结合亲和力。例如，在此类实施方式中，CAR的细胞外抗原结合 结构域(例如，以scFv或其类似物实施)结合GPRC5D的解离常数(KD) 为约3×10-6M或更小。在某些实施方式中，KD为约1×10-6M或更小、 约1×10-7M或更小、约1×10-8M或更小、或约1×10-9M或更小、 约1×10-10M或更小、或约1×10-11M或更小。在某些实施方式中， KD为约1×10-8M或更小。在某些实施方式中，KD为约1×10-11M至 约3×10- 6M，比如约1×10-11M至约1×10-10M、约1×10-10M至约 1×10-9M、约1×10-9M至约1×10-8M、约1×10-8M至约1×10-7M、 或约1×10-7M至约1×10-6M、或约1×10-6M至约3×10-6M。在某 些实施方式中，KD为约1×10-9M至约1×10-8M。在某些实施方式中， KD为约1×10-9M至约1.5×10-9M。在某些实施方式中，KD为约1.2× 10-9M。在某些实施方式中，KD为约4×10-9M至约5×10-9M。在某 些实施方式中，KD为约5×10-9M。在某些实施方式中，KD为约4.8× 10-9M。在某些实施方式中，KD为约8×10-9M至约9×10-9M。在某 些实施方式中，KD为约8×10-9M。在某些实施方式中，KD为约8.1× 10-9M。
本发明公开的CAR的细胞外抗原结合结构域(例如以scFv或其 类似物的实施方式)与G-蛋白偶联受体(例如，GPRC5D)的结合可 以通过例如酶联免疫吸附法(ELISA)、放射免疫法(RIA)、FACS分 析、生物检测法(例如，生长抑制)或Western Blot检测来确认。这些试验中的每一种通常通过使用对目的复合物特异的标记试剂(例如， 抗体或scFv)来检测特定目的蛋白质-抗体复合物的存在。例如，scFv 可以放射性标记并用于放射免疫法(RIA)(见例如Weintraub，B.， Principles of Radioimmunoassays，Seventh Training Courseon Radioligand Assay Techniques，The Endocrine Society，1986年3月，其 引入本文以供参考)。放射性同位素可以通过比如使用γ计数器或闪烁 计数器或通过放射自显影术的方法检测。在某些实施方式中，用荧光 标记物标记GPRC5D靶向的细胞外抗原结合结构域。荧光标记物的非 限制性实例包括绿色荧光蛋白(GFP)、蓝色荧光蛋白(例如EBFP、 EBFP2、Azurite和mKalama1)、青色荧光蛋白(例如ECFP、Cerulean 和CyPet)和黄色荧光蛋白(例如YFP、Citrine、Venus和YPet)。在 某些实施方式中，靶向GPRC5D的人scFv是用GFP标记的。
在某些实施方式中，本发明公开的CAR的细胞外抗原结合结构域 包含单链可变区片段(scFv)。在一个特定的实施方式中，本发明公开 的CAR的细胞外抗原结合结构域包含特异性地结合人GPRC5D的人 scFv。在另一个特定的实施方式中，本发明公开的CAR的细胞外抗原 结合结构域包含特异性地结合人GPRC5D的鼠scFv。在某些实施方式 中，通过用表达GPRC5D的细胞(例如，3T3细胞)筛选scFv噬菌体 文库进行鉴定。
CAR的细胞外抗原结合结构域
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域(例如，scFv)包含 重链可变区，其包含具有选自SEQ ID NO:1、5、9、13、17、21、25、 29、33、37、41、45、49、53、57、61、65、69、73、77、81、85、 89和93的序列的氨基酸。编码SEQ ID NO:1、5、9、13、17、21、 25、29、33、37、41、45、49、53、57、61、65、69、73、77、81、 85、89和93的氨基酸序列的核酸序列分别为SEQ IDNO:3、7、11、 15、19、23、27、31、35、39、43、47、51、55、59、63、67、71、 75、79、83、87、91和95。在一些实施方式中，细胞外抗原结合结构 域(例如，scFv)包含轻链可变区，其包含具有选自SEQ ID NO:2、6、 10、14、18、22、26、30、34、38、42、46、50、54、58、62、66、 70、74、78、82、86、90和94的序列的氨基酸。编码SEQ ID NO:2、 6、10、14、18、22、26、30、34、38、42、46、50、54、58、62、66、 70、74、78、82、86、90和94的氨基酸序列的核酸序列分别为SEQ ID NO:4、8、12、16、20、24、28、32、36、40、44、48、52、56、60、 64、68、72、76、80、84、88、92和96。SEQ IDNO:1-96的序列记 载于下表1-24中。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域(例如，scFv)包含 含有与本文所述的和表1-24中所公开的氨基酸序列同源的氨基酸序列 的重链可变区和轻链可变区。例如，并且并非通过限制的方式，细胞 外抗原结合结构域(例如，scFv)包含含有与选自SEQ ID NO:1、5、 9、13、17、21、25、29、33、37、41、45、49、53、57、61、65、69、 73、77、81、85、89、93、302、314、326、338、350、362、374和 386的氨基酸序列至少约80％、约81％、约82％、约83％、约84％、 约85％、约86％、约87％、约88％、约89％、约90％、约91％、约92％、 约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％同源的 氨基酸序列的重链可变区。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域(例如，scFv)包含 含有与选自SEQ IDNO:2、6、10、14、18、22、26、30、34、38、42、 46、50、54、58、62、66、70、74、78、82、86、90、94、303、315、 327、339、351、363、375和387的氨基酸序列至少约80％、约81％、 约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、约89％、 约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、 约98％或约99％同源的氨基酸序列的轻链可变区。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域(例如，scFv)包含 (a)含有与选自SEQID NO:1、5、9、13、17、21、25、29、33、37、 41、45、49、53、57、61、65、69、73、77、81、85、89、93、302、 314、326、338、350、362、374和386的氨基酸序列至少约80％、约 81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、 约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、 约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的重链可变区；和(b)含 有与选自SEQ ID NO:2、6、10、14、18、22、26、30、34、38、42、 46、50、54、58、62、66、70、74、78、82、86、90、94、303、315、 327、339、351、363、375和387的氨基酸序列至少约80％、约81％、 约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、约89％、 约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、 约98％或约99％同源的氨基酸序列的轻链可变区。
本发明公开的主题还提供包含重链可变区和轻链可变区CDR例如 CDR1、CDR2和CDR3的细胞外抗原结合结构域(例如，scFv)，如本 文表1-24中所公开。使用Kabat系统(Kabat,E.A.,等人(1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest,FifthEdition,U.S. Department of Health and Human Services,NIH Publication No.91-3242) 描述CDR区。本发明公开的主题还提供包含本文公开的抗体序列的保 守修饰的细胞外抗原结合结构域(例如，scFv)。例如，并且并非通过 限制的方式，本发明公开主题的细胞外抗原结合结构域(例如，scFv) 包含含有CDR1、CDR2和CDR3序列的重链可变区以及含有CDR1、 CDR2和CDR3序列的轻链可变区，其中这些CDR序列中的一个或多 个包含本文公开的指定氨基酸序列或其保守修饰，并且其中细胞外抗 原结合结构域保留所需的功能性质。
在某些实施方式中，本发明公开的主题提供的细胞外抗原结合结 构域(例如，scFv)包含重链可变区，其中重链可变区包含：(a)包含 选自SEQ ID NO:124、130、136、142、148、154、160、166、172、 178、184、190、196、202、208、214、220、226、232、238、244、 250、256、262、304、316、328、340、352、364、376和388的氨基 酸序列及其保守修饰的CDR1；(b)包含选自SEQ ID NO:125、131、 137、143、149、155、161、167、173、179、185、191、197、203、209、215、221、227、233、239、245、251、257、263、305、317、 329、341、353、365、377和389的氨基酸序列及其保守修饰的CDR2； 和(c)包含选自SEQ ID NO:126、132、138、144、150、156、162、 168、174、180、186、192、198、204、210、216、222、228、234、 240、246、252、258、264、306、318、330、342、354、366、378和 390的氨基酸序列及其保守修饰的CDR3。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域(例如，scFv)包含 轻链可变区，其中轻链可变区包含：(a)包含选自SEQ ID NO:127、 133、139、145、151、157、163、169、175、181、187、193、199、 205、211、217、223、229、235、241、247、253、259、265、307、319、331、343、355、367、379和391的氨基酸序列及其保守修饰的 CDR1；(b)包含选自SEQ ID NO:128、134、140、146、152、158、 164、170、176、182、188、194、200、206、212、218、224、230、 236、242、248、254、260、266、308、320、332、344、356、368、 380和392的氨基酸序列及其保守修饰的CDR2；和(c)包含选自SEQ ID NO:129、135、141、147、153、159、165、171、177、183、189、 195、201、207、213、219、225、231、237、243、249、255、261、 267、309、321、333、345、357、369、381和393的氨基酸序列及其 保守修饰的CDR3。
本发明公开的主题提供包含含有CDR1、CDR2和CDR3序列的重 链可变区以及含有CDR1、CDR2和CDR3序列的轻链可变区的细胞外 抗原结合结构域(例如，scFv)，其中：(a)重链可变区CDR3包含选 自SEQ ID NO:126、132、138、144、150、156、162、168、174、180、 186、192、198、204、210、216、222、228、234、240、246、252、 258、264、306、318、330、342、354、366、378和390的氨基酸序列 及其保守修饰；并且(b)轻链可变区CDR3包含选自SEQ ID NO:129、135、141、147、153、159、165、171、177、183、189、195、201、 207、213、219、225、231、237、243、249、255、261、267、309、 321、333、345、357、369、381和393的氨基酸序列及其保守修饰； 其中细胞外抗原结合结构域特异性地结合GPRC5D多肽(例如，人 GPRC5D多肽)。在某些实施方式中，重链可变区CDR2包含选自SEQ ID NO:125、131、137、143、149、155、161、167、173、179、185、 191、197、203、209、215、221、227、233、239、245、251、257、 263、305、317、329、341、353、365、377和389的氨基酸序列及其 保守修饰；并且(b)轻链可变区CDR2包含选自SEQ IDNO:128、134、 140、146、152、158、164、170、176、182、188、194、200、206、 212、218、224、230、236、242、248、254、260、266、308、320、 332、344、356、368、380和392的氨基酸序列及其保守修饰；其中细 胞外抗原结合结构域特异性地结合GPRC5D多肽(例如，人GPRC5D 多肽)。在某些实施方式中，重链可变区CDR1包含选自SEQ ID NO: 124、130、136、142、148、154、160、166、172、178、184、190、196、202、208、214、220、226、232、238、244、250、256、262、 304、316、328、340、352、364、376和388的氨基酸序列及其保守修 饰；并且(b)轻链可变区CDR1包含选自SEQ ID NO:127、133、139、 145、151、157、163、169、175、181、187、193、199、205、211、217、223、229、235、241、247、253、259、265、307、319、331、 343、355、367、379和391的氨基酸序列及其保守修饰；其中细胞外 抗原结合结构域特异性地结合GPRC5D多肽(例如，人GPRC5D多肽)。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含SEQ ID NO:100的氨基酸序列并且特异性地结合GPRC5D多肽(例如，具有 SEQ ID NO:97的氨基酸序列的GPRC5D多肽，或其片段)，该scFv命 名为ET150-153 scFv(也称为“ET150-3 scFv”)。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含：包 含具有SEQ IDNO:1所示序列的氨基酸的重链可变区和包含具有SEQ ID NO:2所示序列的氨基酸的轻链可变区，任选地具有(iii)在重链可 变区和轻链可变区之间的接头序列，例如接头肽。在某些实施方式中， 接头包含具有SEQ ID NO:98所示序列的氨基酸。在某些实施方式中， 细胞外抗原结合结构域是scFv-Fc融合蛋白或全长人IgG，其VH和VL区或CDR选自表1。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含 含有与SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列至少约80％、约81％、约82％、 约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、约89％、约90％、 约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％ 或约99％同源的氨基酸序列的VH，如表1中所示。在某些实施方式中， 细胞外抗原结合结构域包含VH，其包含具有SEQ IDNO:1所示序列的 氨基酸，如表1中所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域 包含含有与SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列至少约80％、约81％、约 82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、约89％、 约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、 约98％或约99％同源的氨基酸序列的VL，如表1中所示。在某些实施 方式中，细胞外抗原结合结构域包含VL，其包含具有SEQ ID NO:2 所示序列的氨基酸，如表1中所示。在某些实施方式中，细胞外抗原 结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:1所示序列的氨基酸VH和包 含具有SEQ ID NO:2所示序列的氨基酸的VL，如表1中所示。在某些 实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:124 所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO: 125所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR2、和包含具有SEQ ID NO:126所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR3，如表1中所示。 在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO: 127所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO: 128所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:129所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR3，如表1中所示。 在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO: 124所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO: 125所示序列或其保守修饰的氨基酸的VHCDR2、包含具有SEQ ID NO: 126所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR3、包含具有SEQID NO: 127所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO: 128所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:129所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR3，如表1中所示。 在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO: 124所示序列的氨基酸的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:125所示序 列的氨基酸的VH CDR2、包含具有SEQ ID NO:126所示序列的氨基酸 的VH CDR3、包含具有SEQ IDNO:127所示序列的氨基酸的VL CDR1、 包含具有SEQ ID NO:128所示序列的氨基酸VL CDR2、和包含具有 SEQ ID NO:129所示序列的氨基酸的VL CDR3。
表1
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含SEQ ID NO:101的氨基酸序列并且特异性地结合GPRC5D多肽(例如，具有 SEQ ID NO:97的氨基酸序列的GPRC5D多肽，或其片段)，该scFv命 名为ET150-166 scFv(也称为“ET150-16 scFv”)。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含：包 含具有SEQ IDNO:5所示序列的氨基酸的重链可变区和包含具有SEQ ID NO:6所示序列的氨基酸的轻链可变区，任选地具有(iii)在重链可 变区和轻链可变区之间的接头序列，例如接头肽。在某些实施方式中， 接头包含具有SEQ ID NO:98所示序列的氨基酸。在某些实施方式中， 细胞外抗原结合结构域是scFv-Fc融合蛋白或全长人IgG，其VH和VL区或CDR选自表2。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是人 scFv。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含含有与SEQ ID NO:5所示的氨基酸序列至少约80％、约81％、约82％、约83％、约 84％、约85％、约86％、约87％、约88％、约89％、约90％、约91％、 约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％ 同源的氨基酸序列的VH，如表2中所示。在某些实施方式中，细胞外 抗原结合结构域包含VH，其包含具有SEQ ID NO:5所示序列的氨基 酸，如表2中所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含 含有与SEQ ID NO:6所示的氨基酸序列至少约80％、约81％、约82％、 约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、约89％、约90％、 约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％ 或约99％同源的氨基酸序列的VL，如表2中所示。在某些实施方式中， 细胞外抗原结合结构域包含VL，其包含具有SEQ ID NO:6所示序列的 氨基酸，如表2中所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域 包含：包含具有SEQ ID NO:5所示序列的氨基酸的VH和包含具有SEQ ID NO:6所示序列的氨基酸的VL，如表2中所示。在某些实施方式中， 细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:130所示序列或其 保守修饰的氨基酸的VH CDR1、包含具有SEQ IDNO:131所示序列或 其保守修饰的氨基酸的VH CDR2、和包含具有SEQ ID NO:132所示序 列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR3，如表2中所示。在某些实施方 式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:133所示序 列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO:134所示 序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:135所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR3，如表2中所示。在某些 实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:130 所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO: 131所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR2、包含具有SEQ IDNO: 132所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR3、包含具有SEQ ID NO: 133所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO: 134所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:135所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR3，如表2中所示。 在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO: 130所示序列的氨基酸的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:131所示序 列的氨基酸的VH CDR2、包含具有SEQ ID NO:132所示序列的氨基酸 的VH CDR3、包含具有SEQ ID NO:133所示序列的氨基酸的VL CDR1、 包含具有SEQ ID NO:134所示序列的氨基酸的VL CDR2、和包含具有 SEQ IDNO:135所示序列的氨基酸的VL CDR3。
表2
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含SEQ ID NO:102的氨基酸序列并且特异性地结合GPRC5D多肽(例如，具有 SEQ ID NO:97的氨基酸序列的GPRC5D多肽，或其片段)，该scFv命 名为ET150-170 scFv(也称为“ET150-20 scFv”)。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含：包 含具有SEQ IDNO:9所示序列的氨基酸的重链可变区和包含具有SEQ ID NO:10所示序列的氨基酸的轻链可变区，任选地具有(iii)在重链 可变区和轻链可变区之间的接头序列，例如接头肽。在某些实施方式 中，接头包含具有SEQ ID NO:98所示序列的氨基酸。在某些实施方 式中，细胞外抗原结合结构域是scFv-Fc融合蛋白或全长人IgG，其 VH和VL区或CDR选自表3。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结 构域包含含有与SEQ ID NO:9所示的氨基酸序列至少约80％、约81％、 约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、约89％、 约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、 约98％或约99％同源的氨基酸序列的VH，如表3所示。在某些实施方 式中，细胞外抗原结合结构域包含VH，其包含具有SEQID NO:9所示 序列的氨基酸，如表3所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结 构域包含含有与SEQ ID NO:10所示的氨基酸序列至少约80％、约 81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、 约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、 约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VL，如表3所示。在某 些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VL，其包含具有SEQ ID NO: 10所示序列的氨基酸，如表3所示。在某些实施方式中，细胞外抗原 结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:9所示序列的氨基酸的VH和 包含具有SEQ ID NO:10所示序列的氨基酸的VL，如表3所示。在某 些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:136 所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO: 137所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR2、和包含具有SEQ ID NO:138所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR3，如表3所示。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO: 139所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO: 140所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:141所示序列或其保守修饰的氨基酸的VLCDR3，如表3所示。 在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:136所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO: 137所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR2、包含具有SEQ ID NO: 138所示序列或其保守修饰的氨基酸的VHCDR3、包含具有SEQ ID NO: 139所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQID NO: 140所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:141所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR3，如表3所示。 在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO: 136所示序列的氨基酸的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:137所示序 列的氨基酸的VH CDR2、包含具有SEQ ID NO:138所示序列的氨基酸 的VH CDR3、包含具有SEQ ID NO:139所示序列的氨基酸的VL CDR1、 包含具有SEQ ID NO:140所示序列的氨基酸的VL CDR2、和包含具有 SEQ ID NO:141所示序列的氨基酸的VL CDR3。
表3
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含SEQ ID NO:103的氨基酸序列并且特异性地结合GPRC5D多肽(例如，具有 SEQ ID NO:97的氨基酸序列的GPRC5D多肽，或其片段)，该scFv命 名为ET150-171 scFv(也称为“ET150-21 scFv”)。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含：包 含具有SEQ IDNO:13所示序列的氨基酸的重链可变区和包含具有 SEQ ID NO:14所示序列的氨基酸的轻链可变区，任选地具有(iii)在 重链可变区和轻链可变区之间的接头序列，例如接头肽。在某些实施 方式中，接头包含具有SEQ ID NO:98所示序列的氨基酸。在某些实 施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv-Fc融合蛋白或全长人IgG， 其VH和VL区或CDR选自表4。在某些实施方式中，细胞外抗原结合 结构域包含含有与SEQ ID NO:13所示的氨基酸序列至少约80％、约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、 约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、 约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VH，如表4所示。在某 些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VH，其包含具有SEQID NO: 13所示序列的氨基酸，如表4所示。在某些实施方式中，细胞外抗原 结合结构域包含含有与SEQ ID NO:14所示的氨基酸序列至少约80％、 约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、 约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、 约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VL，如表4所示。在某 些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VL，其包含具有SEQ ID NO: 14所示序列的氨基酸，如表4所示。在某些实施方式中，细胞外抗原 结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:13所示序列的氨基酸的VH和 包含具有SEQ ID NO:14所示序列的氨基酸的VL，如表4所示。在某 些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:142 所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO: 143所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR2、和包含具有SEQ ID NO:144所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR3，如表4所示。 在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO: 145所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO: 146所示序列或其保守修饰的氨基酸的VLCDR2、和包含具有SEQ ID NO:147所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR3，如表4所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO: 142所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO: 143所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR2、包含具有SEQ ID NO: 144所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR3、包含具有SEQ ID NO: 145所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO: 146所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:147所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR3，如表4所示。 在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO: 142所示序列的氨基酸的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:143所示序 列的氨基酸的VH CDR2、包含具有SEQ ID NO:144所示序列的氨基酸 的VH CDR3、包含具有SEQ IDNO:145所示序列的氨基酸的VL CDR1、 包含具有SEQ ID NO:146所示序列的氨基酸的VLCDR2、和包含具有 SEQ ID NO:147所示序列的氨基酸的VL CDR3。
表4
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含SEQ ID NO:104的氨基酸序列并且特异性地结合GPRC5D多肽(例如，具有 SEQ ID NO:97的氨基酸序列的GPRC5D多肽，或其片段)，该scFv命 名为ET150-175 scFv(也称为“ET150-25 scFv”)。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含：包 含具有SEQ IDNO:17所示序列的氨基酸的重链可变区和包含具有SEQ ID NO:18所示序列的氨基酸的轻链可变区，任选地具有(iii)在 重链可变区和轻链可变区之间的接头序列，例如接头肽。在某些实施 方式中，接头包含具有SEQ ID NO:98所示序列的氨基酸。在某些实 施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv-Fc融合蛋白或全长人IgG， 其VH和VL区或CDR选自表5。在某些实施方式中，细胞外抗原结合 结构域包含含有与SEQ ID NO:17所示的氨基酸序列至少约80％、约 81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、 约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、 约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VH，如表5所示。在某 些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VH，其包含具有SEQID NO: 17所示序列的氨基酸，如表5所示。在某些实施方式中，细胞外抗原 结合结构域包含含有与SEQ ID NO:18所示的氨基酸序列至少约80％、 约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、 约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、 约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VL，如表5所示。在某 些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VL，其包含具有SEQ ID NO: 18所示序列的氨基酸，如表5所示。在某些实施方式中，细胞外抗原 结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:17所示序列的氨基酸的VH和 包含具有SEQ ID NO:18所示序列的氨基酸的VL，如表5所示。在某 些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:148 所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO: 149所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR2、和包含具有SEQ ID NO:150所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR3，如表5所示。 在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO: 151所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO: 152所示序列或其保守修饰的氨基酸的VLCDR2、和包含具有SEQ ID NO:153所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR3，如表5所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO: 148所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO: 149所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR2、包含具有SEQ ID NO: 150所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR3、包含具有SEQ ID NO: 151所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO: 152所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:153所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR3，如表5所示。 在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO: 148所示序列的氨基酸的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:149所示序 列的氨基酸的VH CDR2、包含具有SEQ ID NO:150所示序列的氨基酸 的VH CDR3、包含具有SEQ IDNO:151所示序列的氨基酸的VL CDR1、 包含具有SEQ ID NO:152所示序列的氨基酸的VLCDR2、和包含具有 SEQ ID NO:153所示序列的氨基酸的VL CDR3。
表5
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含SEQ ID NO:105的氨基酸序列并且特异性地结合GPRC5D多肽(例如，具有 SEQ ID NO:97的氨基酸序列的GPRC5D多肽，或其片段)，该scFv命 名为ET150-154 scFv(也称为“ET150-4 scFv”)。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含：包 含具有SEQ IDNO:21所示序列的氨基酸的重链可变区和包含具有 SEQ ID NO:22所示序列的氨基酸的轻链可变区，任选地具有(iii)在 重链可变区和轻链可变区之间的接头序列，例如接头肽。在某些实施 方式中，接头包含具有SEQ ID NO:98所示序列的氨基酸。在某些实 施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv-Fc融合蛋白或全长人IgG， 其VH和VL区或CDR选自表6。在某些实施方式中，细胞外抗原结合 结构域包含含有与SEQ ID NO:21所示的氨基酸序列至少约80％、约 81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、 约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、 约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VH，如表6所示。在某 些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VH，其包含具有SEQID NO: 21所示序列的氨基酸，如表6所示。在某些实施方式中，细胞外抗原 结合结构域包含含有与SEQ ID NO:22所示的氨基酸序列至少约80％、 约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、 约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、 约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VL，如表6所示。在某 些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VL，其包含具有SEQ ID NO: 22所示序列的氨基酸，如表6所示。在某些实施方式中，细胞外抗原 结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:21所示序列的氨基酸的VH和 包含具有SEQ ID NO:22所示序列的氨基酸的VL，如表6所示。在某 些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:154 所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO: 155所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR2、和包含具有SEQ ID NO:156所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR3，如表6所示。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO: 157所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO: 158所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:159所示序列或其保守修饰的氨基酸的VLCDR3，如表6所示。 在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:154所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO: 155所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR2、包含具有SEQ ID NO: 156所示序列或其保守修饰的氨基酸的VHCDR3、包含具有SEQ ID NO: 157所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQID NO: 158所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:159所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR3，如表6所示。 在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO: 154所示序列的氨基酸的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:155所示序 列的氨基酸的VH CDR2、包含具有SEQ ID NO:156所示序列的氨基酸 的VH CDR3、包含具有SEQ ID NO:157所示序列的氨基酸的VL CDR1、 包含具有SEQ ID NO:158所示序列的氨基酸的VL CDR2、和包含具有 SEQ ID NO:159所示序列的氨基酸的VL CDR3。
表6
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含SEQ ID NO:106的氨基酸序列并且特异性地结合GPRC5D多肽(例如，具有 SEQ ID NO:97的氨基酸序列的GPRC5D多肽，或其片段)，该scFv命 名为ET150-156 scFv(也称为“ET150-6 scFv”)。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含：包 含具有SEQ IDNO:25所示序列的氨基酸的重链可变区和包含具有 SEQ ID NO:26所示序列的氨基酸的轻链可变区，任选地具有(iii)在 重链可变区和轻链可变区之间的接头序列，例如接头肽。在某些实施 方式中，接头包含具有SEQ ID NO:98所示序列的氨基酸。在某些实 施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv-Fc融合蛋白或全长人IgG， 其VH和VL区或CDR选自表7。在某些实施方式中，细胞外抗原结合 结构域包含含有与SEQ ID NO:25所示的氨基酸序列至少约80％、约 81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、 约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、 约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VH，如表7所示。在某 些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VH，其包含具有SEQID NO: 25所示序列的氨基酸，如表7所示。在某些实施方式中，细胞外抗原 结合结构域包含含有与SEQ ID NO:26所示的氨基酸序列至少约80％、 约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、 约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、 约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VL，如表7所示。在某 些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VL，其包含具有SEQ ID NO: 26所示序列的氨基酸，如表7所示。在某些实施方式中，细胞外抗原 结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:25所示序列的氨基酸的VH和 包含具有SEQ ID NO:26所示序列的氨基酸的VL，如表7所示。在某 些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:160 所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO: 161所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR2、和包含具有SEQ ID NO:162所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR3，如表7所示。 在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO: 163所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO: 164所示序列或其保守修饰的氨基酸的VLCDR2、和包含具有SEQ ID NO:165所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR3，如表7所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO: 160所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO: 161所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR2、包含具有SEQ ID NO: 162所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR3、包含具有SEQ ID NO: 163所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO: 164所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:165所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR3，如表7所示。 在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO: 160所示序列的氨基酸的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:161所示序 列的氨基酸的VH CDR2、包含具有SEQ ID NO:162所示序列的氨基酸 的VH CDR3、包含具有SEQ IDNO:163所示序列的氨基酸的VL CDR1、 包含具有SEQ ID NO:164所示序列的氨基酸的VLCDR2、和包含具有 SEQ ID NO:165所示序列的氨基酸的VL CDR3。
表7
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含SEQ ID NO:107的氨基酸序列并且特异性地结合GPRC5D多肽(例如，具有 SEQ ID NO:97的氨基酸序列的GPRC5D多肽，或其片段)，该scFv命 名为ET150-157 scFv(也称为“ET150-7 scFv”)。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含：包 含具有SEQ IDNO:29所示序列的氨基酸的重链可变区和包含具有 SEQ ID NO:30所示序列的氨基酸的轻链可变区，任选地具有(iii)在 重链可变区和轻链可变区之间的接头序列，例如接头肽。在某些实施 方式中，接头包含具有SEQ ID NO:98所示序列的氨基酸。在某些实 施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv-Fc融合蛋白或全长人IgG， 其VH和VL区或CDR选自表8。在某些实施方式中，细胞外抗原结合 结构域包含含有与SEQ ID NO:29所示的氨基酸序列至少约80％、约 81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、 约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、 约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VH，如表8所示。在某 些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VH，其包含具有SEQID NO: 29所示序列的氨基酸，如表8所示。在某些实施方式中，细胞外抗原 结合结构域包含含有与SEQ ID NO:30所示的氨基酸序列至少约80％、 约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、 约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、 约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VL，如表8所示。在某 些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VL，其包含具有SEQ ID NO: 30所示序列的氨基酸，如表8所示。在某些实施方式中，细胞外抗原 结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:29所示序列的氨基酸的VH和 包含具有SEQ ID NO:30所示序列的氨基酸的VL，如表8所示。在某 些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:166 所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO: 167所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR2、和包含具有SEQ ID NO:168所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR3，如表8所示。 在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO: 169所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO: 170所示序列或其保守修饰的氨基酸的VLCDR2、和包含具有SEQ ID NO:171所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR3，如表8所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO: 166所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO: 167所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR2、包含具有SEQ ID NO: 168所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR3、包含具有SEQ ID NO: 169所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO: 170所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:171所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR3，如表8所示。 在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO: 166所示序列的氨基酸的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:167所示序 列的氨基酸的VH CDR2、包含具有SEQ ID NO:168所示序列的氨基酸 的VH CDR3、包含具有SEQ IDNO:169所示序列的氨基酸的VL CDR1、 包含具有SEQ ID NO:170所示序列的氨基酸的VLCDR2、和包含具有 SEQ ID NO:171所示序列的氨基酸的VL CDR3。
表8
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含SEQ ID NO:108的氨基酸序列并且特异性地结合GPRC5D多肽(例如，具有 SEQ ID NO:97的氨基酸序列的GPRC5D多肽，或其片段)，该scFv命 名为ET150-159 scFv(也称为“ET150-9 scFv”)。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含：包 含具有SEQ IDNO:33所示序列的氨基酸的重链可变区和包含具有 SEQ ID NO:34所示序列的氨基酸的轻链可变区，任选地具有(iii)在 重链可变区和轻链可变区之间的接头序列，例如接头肽。在某些实施 方式中，接头包含具有SEQ ID NO:98所示序列的氨基酸。在某些实 施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv-Fc融合蛋白或全长人IgG， 其VH和VL区或CDR选自表9。在某些实施方式中，细胞外抗原结合 结构域包含含有与SEQ ID NO:33所示的氨基酸序列至少约80％、约 81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、 约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、 约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VH，如表9所示。在某 些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VH，其包含具有SEQID NO: 33所示序列的氨基酸，如表9所示。在某些实施方式中，细胞外抗原 结合结构域包含含有与SEQ ID NO:34所示的氨基酸序列至少约80％、 约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、 约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、 约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VL，如表9所示。在某 些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VL，其包含具有SEQ ID NO: 34所示序列的氨基酸，如表9所示。在某些实施方式中，细胞外抗原 结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:33所示序列的氨基酸的VH和 包含具有SEQ ID NO:34所示序列的氨基酸的VL，如表9所示。在某 些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:172 所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO: 173所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR2、和包含具有SEQ ID NO:174所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR3，如表9所示。 在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO: 175所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO: 176所示序列或其保守修饰的氨基酸的VLCDR2、和包含具有SEQ ID NO:177所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR3，如表9所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO: 172所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO: 173所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR2、包含具有SEQ ID NO: 174所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR3、包含具有SEQ ID NO: 175所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO: 176所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:177所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR3，如表9所示。 在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO: 172所示序列的氨基酸的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:173所示序 列的氨基酸的VH CDR2、包含具有SEQ ID NO:174所示序列的氨基酸 的VH CDR3、包含具有SEQ IDNO:175所示序列的氨基酸的VL CDR1、 包含具有SEQ ID NO:176所示序列的氨基酸的VLCDR2、和包含具有 SEQ ID NO:177所示序列的氨基酸的VL CDR3。
表9
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含SEQ ID NO:109的氨基酸序列并且特异性地结合GPRC5D多肽(例如，具有 SEQ ID NO:97的氨基酸序列的GPRC5D多肽，或其片段)，该scFv命 名为ET150-160 scFv(也称为“ET150-10 scFv”)。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含：包 含具有SEQ IDNO:37所示序列的氨基酸的重链可变区和包含具有 SEQ ID NO:38所示序列的氨基酸的轻链可变区，任选地具有(iii)在 重链可变区和轻链可变区之间的接头序列，例如接头肽。在某些实施 方式中，接头包含具有SEQ ID NO:98所示序列的氨基酸。在某些实 施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv-Fc融合蛋白或全长人IgG， 其VH和VL区或CDR选自表10。在某些实施方式中，细胞外抗原结 合结构域包含含有与SEQ ID NO:37所示的氨基酸序列至少约80％、 约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、 约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、 约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VH，如表10所示。在 某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VH，其包含具有SEQID NO:37所示序列的氨基酸，如表10所示。在某些实施方式中，细胞外 抗原结合结构域包含含有与SEQ ID NO:38所示的氨基酸序列至少约 80％、约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、 约88％、约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、 约96％、约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VL，如表10 所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VL，其包含具 有SEQ ID NO:38所示序列的氨基酸，如表10所示。在某些实施方式 中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:37所示序列 的氨基酸的VH和包含具有SEQ ID NO:38所示序列的氨基酸的VL， 如表10所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含 具有SEQ ID NO:178所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR1、包 含具有SEQ ID NO:179所示序列或其保守修饰的氨基酸的VHCDR2、 和包含具有SEQ ID NO:180所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR3，如表10所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包 含：包含具有SEQ ID NO:181所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO:182所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:183所示序列或其保守修饰的氨基 酸的VL CDR3，如表10所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结 构域包含：包含具有SEQ ID NO:178所示序列或其保守修饰的氨基酸 的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:179所示序列或其保守修饰的氨基 酸的VH CDR2、包含具有SEQ ID NO:180所示序列或其保守修饰的氨 基酸的VH CDR3、包含具有SEQ ID NO:181所示序列或其保守修饰的 氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO:182所示序列或其保守修饰 的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:183所示序列或其保守 修饰的氨基酸的VL CDR3，如表10所示。在某些实施方式中，细胞外 抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:178所示序列的氨基酸的 VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:179所示序列的氨基酸的VH CDR2、 包含具有SEQ ID NO:180所示序列的氨基酸的VH CDR3、包含具有 SEQ ID NO:181所示序列的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO: 182所示序列的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:183所示 序列的氨基酸的VL CDR3。
表10
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含SEQ ID NO:110的氨基酸序列并且特异性地结合GPRC5D多肽(例如，具有 SEQ ID NO:97的氨基酸序列的GPRC5D多肽，或其片段)，该scFv命 名为ET150-161 scFv(也称为“ET150-11 scFv”)。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含：包 含具有SEQ IDNO:41所示序列的氨基酸的重链可变区和包含具有 SEQ ID NO:42所示序列的氨基酸的轻链可变区，任选地具有(iii)在 重链可变区和轻链可变区之间的接头序列，例如接头肽。在某些实施 方式中，接头包含具有SEQ ID NO:98所示序列的氨基酸。在某些实 施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv-Fc融合蛋白或全长人IgG， 其VH和VL区或CDR选自表11。在某些实施方式中，细胞外抗原结 合结构域包含含有与SEQ ID NO:41所示的氨基酸序列至少约80％、 约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、 约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、 约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VH，如表11所示。在 某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VH，其包含具有SEQID NO:41所示序列的氨基酸，如表11所示。在某些实施方式中，细胞外 抗原结合结构域包含含有与SEQ ID NO:42所示的氨基酸序列至少约 80％、约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、 约88％、约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、 约96％、约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VL，如表11 所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VL，其包含具 有SEQ ID NO:42所示序列的氨基酸，如表11所示。在某些实施方式 中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:41所示序列 的氨基酸的VH和包含具有SEQ ID NO:42所示序列的氨基酸的VL， 如表11所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含 具有SEQ ID NO:184所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR1、包 含具有SEQ ID NO:185所示序列或其保守修饰的氨基酸的VHCDR2、 和包含具有SEQ ID NO:186所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR3，如表11所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包 含：包含具有SEQ ID NO:187所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO:188所示序列或其保守修饰的氨基酸的 VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:189所示序列或其保守修饰的氨基 酸的VL CDR3，如表11所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结 构域包含：包含具有SEQ ID NO:184所示序列或其保守修饰的氨基酸 的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:185所示序列或其保守修饰的氨基 酸的VH CDR2、包含具有SEQ ID NO:186所示序列或其保守修饰的氨 基酸的VH CDR3、包含具有SEQ ID NO:187所示序列或其保守修饰的 氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ IDNO:188所示序列或其保守修饰 的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:189所示序列或其保守 修饰的氨基酸的VL CDR3，如表11所示。在某些实施方式中，细胞外 抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:184所示序列的氨基酸的 VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:185所示序列的氨基酸的VH CDR2、 包含具有SEQ ID NO:186所示序列的氨基酸的VH CDR3、包含具有 SEQ ID NO:187所示序列的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO: 188所示序列的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:189所示 序列的氨基酸的VL CDR3。
表11
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含SEQ ID NO:111的氨基酸序列并且特异性地结合GPRC5D多肽(例如，具有 SEQ ID NO:97的氨基酸序列的GPRC5D多肽，或其片段)，该scFv命 名为ET150-162 scFv(也称为“ET150-12 scFv”)。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含：包 含具有SEQ IDNO:45所示序列的氨基酸的重链可变区和包含具有 SEQ ID NO:46所示序列的氨基酸的轻链可变区，任选地具有(iii)在 重链可变区和轻链可变区之间的接头序列，例如接头肽。在某些实施 方式中，接头包含具有SEQ ID NO:98所示序列的氨基酸。在某些实 施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv-Fc融合蛋白或全长人IgG， 其VH和VL区或CDR选自表12。在某些实施方式中，细胞外抗原结 合结构域包含含有与SEQ ID NO:45所示的氨基酸序列至少约80％、 约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、 约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、 约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VH，如表12所示。在 某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VH，其包含具有SEQID NO:45所示序列的氨基酸，如表12所示。在某些实施方式中，细胞外 抗原结合结构域包含含有与SEQ ID NO:46所示的氨基酸序列至少约80％、约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、 约88％、约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VL，如表12 所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VL，其包含具 有SEQ ID NO:46所示序列的氨基酸，如表12所示。在某些实施方式 中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:45所示序列的氨基酸的VH和包含具有SEQ ID NO:46所示序列的氨基酸的VL， 如表12所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含 具有SEQ ID NO:190所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR1、包 含具有SEQ ID NO:191所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR2、和包含具有SEQ ID NO:192所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR3，如表12所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包 含：包含具有SEQ ID NO:193所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO:194所示序列或其保守修饰的氨基酸的 VLCDR2、和包含具有SEQ ID NO:195所示序列或其保守修饰的氨基 酸的VL CDR3，如表12所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结 构域包含：包含具有SEQ ID NO:190所示序列或其保守修饰的氨基酸 的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:191所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR2、包含具有SEQ ID NO:192所示序列或其保守修饰的氨 基酸的VH CDR3、包含具有SEQ ID NO:193所示序列或其保守修饰的 氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO:194所示序列或其保守修饰 的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:195所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR3，如表12所示。在某些实施方式中，细胞外 抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:190所示序列的氨基酸的 VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:191所示序列的氨基酸的VH CDR2、 包含具有SEQ ID NO:192所示序列的氨基酸的VH CDR3、包含具有 SEQID NO:193所示序列的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO: 194所示序列的氨基酸的VLCDR2、和包含具有SEQ ID NO:195所示 序列的氨基酸的VL CDR3。
表12
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含SEQ ID NO:112的氨基酸序列并且特异性地结合GPRC5D多肽(例如，具有 SEQ ID NO:97的氨基酸序列的GPRC5D多肽，或其片段)，该scFv命 名为ET150-163 scFv(也称为“ET150-13 scFv”)。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含：包 含具有SEQ IDNO:49所示序列的氨基酸的重链可变区和包含具有 SEQ ID NO:50所示序列的氨基酸的轻链可变区，任选地具有(iii)在 重链可变区和轻链可变区之间的接头序列，例如接头肽。在某些实施 方式中，接头包含具有SEQ ID NO:98所示序列的氨基酸。在某些实 施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv-Fc融合蛋白或全长人IgG， 其VH和VL区或CDR选自表13。在某些实施方式中，细胞外抗原结 合结构域包含含有与SEQ ID NO:49所示的氨基酸序列至少约80％、 约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、 约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、 约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VH，如表13所示。在 某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VH，其包含具有SEQID NO:49所示序列的氨基酸，如表13所示。在某些实施方式中，细胞外 抗原结合结构域包含含有与SEQ ID NO:50所示的氨基酸序列至少约 80％、约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、 约88％、约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、 约96％、约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VL，如表13 所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VL，其包含具 有SEQ ID NO:50所示序列的氨基酸，如表13所示。在某些实施方式 中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:49所示序列 的氨基酸的VH和包含具有SEQ ID NO:50所示序列的氨基酸的VL， 如表13所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含 具有SEQ ID NO:196所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR1、包 含具有SEQ ID NO:197所示序列或其保守修饰的氨基酸的VHCDR2、 和包含具有SEQ ID NO:198所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR3，如表13所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包 含：包含具有SEQ ID NO:199所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO:200所示序列或其保守修饰的氨基酸的 VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:201所示序列或其保守修饰的氨基 酸的VL CDR3，如表13所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结 构域包含：包含具有SEQ ID NO:196所示序列或其保守修饰的氨基酸 的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:197所示序列或其保守修饰的氨基 酸的VH CDR2、包含具有SEQ ID NO:198所示序列或其保守修饰的氨 基酸的VH CDR3、包含具有SEQ ID NO:199所示序列或其保守修饰的 氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ IDNO:200所示序列或其保守修饰 的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:201所示序列或其保守 修饰的氨基酸的VL CDR3，如表13所示。在某些实施方式中，细胞外 抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:196所示序列的氨基酸的 VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:197所示序列的氨基酸的VH CDR2、 包含具有SEQ ID NO:198所示序列的氨基酸的VH CDR3、包含具有 SEQ ID NO:199所示序列的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO: 200所示序列的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:201所示 序列的氨基酸的VL CDR3。
表13
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含SEQ ID NO:113的氨基酸序列并且特异性地结合GPRC5D多肽(例如，具有 SEQ ID NO:97的氨基酸序列的GPRC5D多肽，或其片段)，该scFv命 名为ET150-151 scFv(也称为“ET150-1 scFv”)。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:53所示序列的氨基酸的重链可变区和包含具有SEQ ID NO:54所 示序列的氨基酸的轻链可变区，任选地具有(iii)在重链可变区和轻链 可变区之间的接头序列，例如接头肽。在某些实施方式中，接头包含 具有SEQ ID NO:98所示序列的氨基酸。在某些实施方式中，细胞外 抗原结合结构域是scFv-Fc融合蛋白或全长人IgG，其VH和VL区或 CDR选自表14。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含含有 与SEQ ID NO:53所示的氨基酸序列至少约80％、约81％、约82％、 约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、约89％、约90％、 约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％ 或约99％同源的氨基酸序列的VH，如表14所示。在某些实施方式中， 细胞外抗原结合结构域包含VH，其包含具有SEQ IDNO:53所示序列 的氨基酸，如表14所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域 包含含有与SEQ ID NO:54所示的氨基酸序列至少约80％、约81％、 约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、约89％、 约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、 约98％或约99％同源的氨基酸序列的VL，如表14所示。在某些实施 方式中，细胞外抗原结合结构域包含VL，其包含具有SEQ ID NO:54 所示序列的氨基酸，如表14所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结 合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:53所示序列的氨基酸的VH和包 含具有SEQ ID NO:54所示序列的氨基酸的VL，如表14所示。在某些 实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:202 所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO: 203所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR2、和包含具有SEQ ID NO:204所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR3，如表14所示。 在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO: 205所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO: 206所示序列或其保守修饰的氨基酸的VLCDR2、和包含具有SEQ ID NO:207所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR3，如表14所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO: 202所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO: 203所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR2、包含具有SEQ ID NO: 204所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR3、包含具有SEQ ID NO: 205所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO: 206所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:207所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR3，如表14所示。 在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO: 202所示序列的氨基酸的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:203所示序 列的氨基酸的VH CDR2、包含具有SEQ ID NO:204所示序列的氨基酸 的VH CDR3、包含具有SEQID NO:205所示序列的氨基酸的VL CDR1、 包含具有SEQ ID NO:206所示序列的氨基酸的VLCDR2、和包含具有 SEQ ID NO:207所示序列的氨基酸的VL CDR3。
表14
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含SEQ ID NO:114的氨基酸序列并且特异性地结合GPRC5D多肽(例如，具有 SEQ ID NO:97的氨基酸序列的GPRC5D多肽，或其片段)，该scFv命 名为ET150-152 scFv(也称为“ET150-2 scFv”)。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含：包 含具有SEQ IDNO:57所示序列的氨基酸的重链可变区和包含具有 SEQ ID NO:58所示序列的氨基酸的轻链可变区，任选地具有(iii)在 重链可变区和轻链可变区之间的接头序列，例如接头肽。在某些实施 方式中，接头包含具有SEQ ID NO:98所示序列的氨基酸。在某些实 施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv-Fc融合蛋白或全长人IgG， 其VH和VL区或CDR选自表15。在某些实施方式中，细胞外抗原结 合结构域包含含有与SEQ ID NO:57所示的氨基酸序列至少约80％、 约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、 约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、 约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VH，如表15所示。在 某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VH，其包含具有SEQID NO:57所示序列的氨基酸，如表15所示。在某些实施方式中，细胞外 抗原结合结构域包含含有与SEQ ID NO:58所示的氨基酸序列至少约 80％、约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、 约88％、约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、 约96％、约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VL，如表15 所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VL，其包含具 有SEQ ID NO:58所示序列的氨基酸，如表15所示。在某些实施方式 中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:57所示序列 的氨基酸的VH和包含具有SEQ ID NO:58所示序列的氨基酸的VL， 如表15所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含 具有SEQ ID NO:208所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR1、包 含具有SEQ ID NO:209所示序列或其保守修饰的氨基酸的VHCDR2、 和包含具有SEQ ID NO:210所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR3，如表15所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包 含：包含具有SEQ ID NO:211所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO:212所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:213所示序列或其保守修饰的氨基 酸的VL CDR3，如表15所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结 构域包含：包含具有SEQ ID NO:208所示序列或其保守修饰的氨基酸 的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:209所示序列或其保守修饰的氨基 酸的VH CDR2、包含具有SEQ ID NO:210所示序列或其保守修饰的氨 基酸的VH CDR3、包含具有SEQ ID NO:211所示序列或其保守修饰的 氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO:212所示序列或其保守修饰 的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:213所示序列或其保守 修饰的氨基酸的VL CDR3，如表15所示。在某些实施方式中，细胞外 抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:208所示序列的氨基酸的 VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:209所示序列的氨基酸的VH CDR2、 包含具有SEQ ID NO:210所示序列的氨基酸的VH CDR3、包含具有 SEQ ID NO:211所示序列的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO: 212所示序列的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:213所示 序列的氨基酸的VL CDR3。
表15
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含SEQ ID NO:115的氨基酸序列并且特异性地结合GPRC5D多肽(例如，具有 SEQ ID NO:97的氨基酸序列的GPRC5D多肽，或其片段)，该scFv命 名为ET150-155 scFv(也称为“ET150-5 scFv”)。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含：包 含具有SEQ IDNO:61所示序列的氨基酸的重链可变区和包含具有 SEQ ID NO:62所示序列的氨基酸的轻链可变区，任选地具有(iii)在 重链可变区和轻链可变区之间的接头序列，例如接头肽。在某些实施 方式中，接头包含具有SEQ ID NO:98所示序列的氨基酸。在某些实 施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv-Fc融合蛋白或全长人IgG， 其VH和VL区或CDR选自表16。在某些实施方式中，细胞外抗原结 合结构域包含含有与SEQ ID NO:61所示的氨基酸序列至少约80％、 约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、 约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、 约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VH，如表16所示。在 某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VH，其包含具有SEQID NO:61所示序列的氨基酸，如表16所示。在某些实施方式中，细胞外 抗原结合结构域包含含有与SEQ ID NO:62所示的氨基酸序列至少约 80％、约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、 约88％、约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、 约96％、约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VL，如表16 所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VL，其包含具 有SEQ ID NO:62所示序列的氨基酸，如表16所示。在某些实施方式 中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:61所示序列 的氨基酸的VH和包含具有SEQ ID NO:62所示序列的氨基酸的VL， 如表16所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含 具有SEQ ID NO:214所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR1、包 含具有SEQ ID NO:215所示序列或其保守修饰的氨基酸的VHCDR2、 和包含具有SEQ ID NO:216所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR3，如表16所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包 含：包含具有SEQ ID NO:217所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO:218所示序列或其保守修饰的氨基酸的 VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:219所示序列或其保守修饰的氨基 酸的VL CDR3，如表16所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结 构域包含VH CDR1包含：包含具有SEQ IDNO:214所示序列或其保 守修饰的氨基酸的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:215所示序列或其 保守修饰的氨基酸的VH CDR2、包含具有SEQ ID NO:216所示序列或 其保守修饰的氨基酸的VH CDR3、包含具有SEQ ID NO:217所示序列 或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO:218所示序 列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:219所 示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR3，如表16所示。在某些实施 方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:214所示 序列的氨基酸的VH CDR1、包含具有SEQID NO:215所示序列的氨基 酸的VH CDR2、包含具有SEQ ID NO:216所示序列的氨基酸的VHCDR3、包含具有SEQ ID NO:217所示序列的氨基酸的VL CDR1、包 含具有SEQ ID NO:218所示序列的氨基酸的VL CDR2、和包含具有 SEQ ID NO:219所示序列的氨基酸的VL CDR3。
表16
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含SEQ ID NO:116的氨基酸序列并且特异性地结合GPRC5D多肽(例如，具有 SEQ ID NO:97的氨基酸序列的GPRC5D多肽，或其片段)，该scFv命 名为ET150-158 scFv(也称为“ET150-8 scFv”)。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含：包 含具有SEQ IDNO:65所示序列的氨基酸的重链可变区和包含具有 SEQ ID NO:66所示序列的氨基酸的轻链可变区，任选地具有(iii)在 重链可变区和轻链可变区之间的接头序列，例如接头肽。在某些实施 方式中，接头包含具有SEQ ID NO:98所示序列的氨基酸。在某些实 施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv-Fc融合蛋白或全长人IgG， 其VH和VL区或CDR选自表17。在某些实施方式中，细胞外抗原结 合结构域包含含有与SEQ ID NO:65所示的氨基酸序列至少约80％、 约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、 约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、 约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VH，如表17所示。在 某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VH，其包含具有SEQID NO:65所示序列的氨基酸，如表17所示。在某些实施方式中，细胞外 抗原结合结构域包含含有与SEQ ID NO:66所示的氨基酸序列至少约 80％、约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、 约88％、约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、 约96％、约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VL，如表17 所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VL，其包含具 有SEQ ID NO:66所示序列的氨基酸，如表17所示。在某些实施方式 中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:65所示序列 的氨基酸的VH和包含具有SEQ ID NO:66所示序列的氨基酸的VL， 如表17所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含 具有SEQ ID NO:220所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR1、包 含具有SEQ ID NO:221所示序列或其保守修饰的氨基酸的VHCDR2、 和包含具有SEQ ID NO:222所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR3，如表17所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包 含：包含具有SEQ ID NO:223所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO:224所示序列的氨基酸或其保守修饰的 VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:225所示序列或其保守修饰的氨基 酸的VL CDR3，如表17所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结 构域包含：包含具有SEQ ID NO:220所示序列或其保守修饰的氨基酸 的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:221所示序列或其保守修饰的氨基 酸的VH CDR2、包含具有SEQ ID NO:222所示序列或其保守修饰的氨 基酸的VH CDR3、包含具有SEQ ID NO:223所示序列或其保守修饰的 氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ IDNO:224所示序列的氨基酸或 其保守修饰的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:225所示序列或其保 守修饰的氨基酸的VL CDR3，如表17所示。在某些实施方式中，细胞 外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:220所示序列的氨基酸 的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:221所示序列的氨基酸的VH CDR2、包含具有SEQ ID NO:222所示序列的氨基酸的VH CDR3、包含具有SEQ ID NO:223所示序列的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO:224所示序列的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO: 225所示序列的氨基酸的VL CDR3。
表17
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含SEQ ID NO:117的氨基酸序列并且特异性地结合GPRC5D多肽(例如，具有 SEQ ID NO:97的氨基酸序列的GPRC5D多肽，或其片段)，该scFv命 名为ET150-168 scFv(也称为“ET150-18 scFv”)。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含：包 含具有SEQ IDNO:69所示序列的氨基酸的重链可变区和包含具有 SEQ ID NO:70所示序列的氨基酸的轻链可变区，任选地具有(iii)在 重链可变区和轻链可变区之间的接头序列，例如接头肽。在某些实施 方式中，接头包含具有SEQ ID NO:98所示序列的氨基酸。在某些实 施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv-Fc融合蛋白或全长人IgG， 其VH和VL区或CDR选自表18。在某些实施方式中，细胞外抗原结 合结构域包含含有与SEQ ID NO:69所示的氨基酸序列至少约80％、 约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、 约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、 约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VH，如表18所示。在 某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VH，其包含具有SEQID NO:69所示序列的氨基酸，如表18所示。在某些实施方式中，细胞外 抗原结合结构域包含含有与SEQ ID NO:70所示的氨基酸序列至少约 80％、约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、 约88％、约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、 约96％、约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VL，如表18 所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VL，其包含具 有SEQ ID NO:70所示序列的氨基酸，如表18所示。在某些实施方式 中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:69所示序列 的氨基酸的VH和包含具有SEQ ID NO:70所示序列的氨基酸的VL， 如表18所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含 具有SEQ ID NO:226所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR1、包 含具有SEQ ID NO:227所示序列或其保守修饰的氨基酸的VHCDR2、 和包含具有SEQ ID NO:228所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR3，如表18所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包 含：包含具有SEQ ID NO:229所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO:230所示序列或其保守修饰的氨基酸的 VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:231所示序列或其保守修饰的氨基 酸的VL CDR3，如表18所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结 构域包含：包含具有SEQ ID NO:226所示序列或其保守修饰的氨基酸 的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:227所示序列或其保守修饰的氨基 酸的VH CDR2、包含具有SEQ ID NO:228所示序列或其保守修饰的氨 基酸的VH CDR3、包含具有SEQ ID NO:229所示序列或其保守修饰的 氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ IDNO:230所示序列或其保守修饰 的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:231所示序列或其保守 修饰的氨基酸的VL CDR3，如表18所示。在某些实施方式中，细胞外 抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:226所示序列的氨基酸的 VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:227所示序列的氨基酸的VH CDR2、 包含具有SEQ ID NO:228所示序列的氨基酸的VH CDR3、包含具有 SEQ ID NO:229所示序列的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO: 230所示序列的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:231所示 序列的氨基酸的VL CDR3。
表18
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含SEQ ID NO:118的氨基酸序列并且特异性地结合GPRC5D多肽(例如，具有 SEQ ID NO:97的氨基酸序列的GPRC5D多肽，或其片段)，该scFv命 名为ET150-164 scFv(也称为“ET150-14 scFv”)。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含：包 含具有SEQ IDNO:73所示序列的氨基酸的重链可变区和包含具有 SEQ ID NO:74所示序列的氨基酸的轻链可变区，任选地具有(iii)在 重链可变区和轻链可变区之间的接头序列，例如接头肽。在某些实施 方式中，接头包含具有SEQ ID NO:98所示序列的氨基酸。在某些实 施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv-Fc融合蛋白或全长人IgG， 其VH和VL区或CDR选自表19。在某些实施方式中，细胞外抗原结 合结构域包含含有与SEQ ID NO:73所示的氨基酸序列至少约80％、 约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、 约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、 约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VH，如表19所示。在 某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VH，其包含具有SEQID NO:73所示序列的氨基酸，如表19所示。在某些实施方式中，细胞外 抗原结合结构域包含含有与SEQ ID NO:74所示的氨基酸序列至少约 80％、约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、 约88％、约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、 约96％、约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VL，如表19 所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VL，其包含具 有SEQ ID NO:74所示序列的氨基酸，如表19所示。在某些实施方式 中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:73所示序列 的氨基酸的VH和包含具有SEQ ID NO:74所示序列的氨基酸的VL， 如表19所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含 具有SEQ ID NO:232所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR1、包 含具有SEQ ID NO:233所示序列或其保守修饰的氨基酸的VHCDR2、 和包含具有SEQ ID NO:234所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR3，如表19所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包 含：包含具有SEQ ID NO:235所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO:236所示序列或其保守修饰的氨基酸的 VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:237所示序列或其保守修饰的氨基 酸的VL CDR3，如表19所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结 构域包含：包含具有SEQ ID NO:232所示序列或其保守修饰的氨基酸 的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:233所示序列或其保守修饰的氨基 酸的VH CDR2、包含具有SEQ ID NO:234所示序列或其保守修饰的氨 基酸的VH CDR3，包含具有SEQ ID NO:235所示序列或其保守修饰的 氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ IDNO:236所示序列或其保守修饰 的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:237所示序列或其保守 修饰的氨基酸的VL CDR3，如表19所示。在某些实施方式中，细胞外 抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:232所示序列的氨基酸的 VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:233所示序列的氨基酸的VH CDR2、 包含具有SEQ ID NO:234所示序列的氨基酸的VH CDR3，包含具有 SEQ ID NO:235所示序列的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO: 236所示序列的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:237所示 序列的氨基酸的VL CDR3。
表19
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含SEQ ID NO:119的氨基酸序列并且特异性地结合GPRC5D多肽(例如，具有 SEQ ID NO:97的氨基酸序列的GPRC5D多肽，或其片段)，该scFv命 名为ET150-165 scFv(也称为“ET150-15 scFv”)。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含：包 含具有SEQ IDNO:77所示序列的氨基酸的重链可变区和包含具有 SEQ ID NO:78所示序列的氨基酸的轻链可变区，任选地具有(iii)在 重链可变区和轻链可变区之间的接头序列，例如接头肽。在某些实施 方式中，接头包含具有SEQ ID NO:98所示序列的氨基酸。在某些实 施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv-Fc融合蛋白或全长人IgG， 其VH和VL区或CDR选自表20。在某些实施方式中，细胞外抗原结 合结构域包含含有与SEQ ID NO:77所示的氨基酸序列至少约80％、 约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、 约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、 约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VH，如表20所示。在 某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VH，其包含具有SEQID NO:77所示序列的氨基酸，如表20所示。在某些实施方式中，细胞外 抗原结合结构域包含含有与SEQ ID NO:78所示的氨基酸序列至少约 80％、约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、 约88％、约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、 约96％、约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VL，如表20 所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VL，其包含具 有SEQ ID NO:78所示序列的氨基酸，如表20所示。在某些实施方式 中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:77所示序列 的氨基酸的VH和包含具有SEQ ID NO:78所示序列的氨基酸的VL， 如表20所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含 具有SEQ ID NO:238所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR1、包 含具有SEQ ID NO:239所示序列或其保守修饰的氨基酸的VHCDR2、 和包含具有SEQ ID NO:240所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR3，如表20所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包 含：包含具有SEQ ID NO:241所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO:242所示序列或其保守修饰的氨基酸的 VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:243所示序列或其保守修饰的氨基 酸的VL CDR3，如表20所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结 构域包含：包含具有SEQ ID NO:238所示序列或其保守修饰的氨基酸 的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:239所示序列或其保守修饰的氨基 酸的VH CDR2、包含具有SEQ ID NO:240所示序列或其保守修饰的氨 基酸的VH CDR3、包含具有SEQ ID NO:241所示序列或其保守修饰的 氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ IDNO:242所示序列或其保守修饰 的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:243所示序列或其保守 修饰的氨基酸的VL CDR3，如表20所示。在某些实施方式中，细胞外 抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:238所示序列的氨基酸的 VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:239所示序列的氨基酸的VH CDR2、 包含具有SEQ ID NO:240所示序列的氨基酸的VH CDR3、包含具有 SEQ ID NO:241所示序列的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO: 242所示序列的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:243所示 序列的氨基酸的VL CDR3。
表20
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含SEQ ID NO:120的氨基酸序列并且特异性地结合GPRC5D多肽(例如，具有 SEQ ID NO:97的氨基酸序列的GPRC5D多肽，或其片段)，该scFv命 名为ET150-167 scFv(也称为“ET150-17 scFv”)。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含：包 含具有SEQ IDNO:81所示序列的氨基酸的重链可变区和包含具有 SEQ ID NO:82所示序列的氨基酸的轻链可变区，任选地具有(iii)在 重链可变区和轻链可变区之间的接头序列，例如接头肽。在某些实施 方式中，接头包含具有SEQ ID NO:98所示序列的氨基酸。在某些实 施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv-Fc融合蛋白或全长人IgG， 其VH和VL区或CDR选自表21。在某些实施方式中，细胞外抗原结 合结构域包含含有与SEQ ID NO:81所示的氨基酸序列至少约80％、 约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、 约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、 约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VH，如表21所示。在 某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VH，其包含具有SEQID NO:81所示序列的氨基酸，如表21所示。在某些实施方式中，细胞外 抗原结合结构域包含含有与SEQ ID NO:82所示的氨基酸序列至少约 80％、约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、 约88％、约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、 约96％、约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VL，如表21 所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VL，其包含具 有SEQ ID NO:82所示序列的氨基酸，如表21所示。在某些实施方式 中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:81所示序列 的氨基酸的VH和包含具有SEQ ID NO:82所示序列的氨基酸的VL， 如表21所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含 具有SEQ ID NO:244所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR1、包 含具有SEQ ID NO:245所示序列或其保守修饰的氨基酸的VHCDR2、 和包含具有SEQ ID NO:246所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR3，如表21所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包 含：包含具有SEQ ID NO:247所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO:248所示序列或其保守修饰的氨基酸的 VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:249所示序列或其保守修饰的氨基 酸的VL CDR3，如表21所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结 构域包含：包含具有SEQ ID NO:244所示序列或其保守修饰的氨基酸 的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:245所示序列或其保守修饰的氨基 酸的VH CDR2、包含具有SEQ ID NO:246所示序列或其保守修饰的氨 基酸的VH CDR3、包含具有SEQ ID NO:247所示序列或其保守修饰的 氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ IDNO:248所示序列或其保守修饰 的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:249所示序列或其保守 修饰的氨基酸的VL CDR3，如表21所示。在某些实施方式中，细胞外 抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:244所示序列的氨基酸的 VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:245所示序列的氨基酸的VH CDR2、 包含具有SEQ ID NO:246所示序列的氨基酸的VH CDR3、包含具有 SEQ ID NO:247所示序列的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO: 248所示序列的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:249所示 序列的氨基酸的VL CDR3。
表21
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含SEQ ID NO:121的氨基酸序列并且特异性地结合GPRC5D多肽(例如，具有 SEQ ID NO:97的氨基酸序列的GPRC5D多肽，或其片段)，该scFv命 名为ET150-169 scFv(也称为“ET150-19 scFv”)。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含：包 含具有SEQ IDNO:85所示序列的氨基酸的重链可变区和包含具有 SEQ ID NO:86所示序列的氨基酸的轻链可变区，任选地具有(iii)在 重链可变区和轻链可变区之间的接头序列，例如接头肽。在某些实施 方式中，接头包含具有SEQ ID NO:98所示序列的氨基酸。在某些实 施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv-Fc融合蛋白或全长人IgG， 其VH和VL区或CDR选自表22。在某些实施方式中，细胞外抗原结 合结构域包含含有与SEQ ID NO:85所示的氨基酸序列至少约80％、 约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、 约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、 约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VH，如表22所示。在 某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VH，其包含具有SEQID NO:85所示序列的氨基酸，如表22所示。在某些实施方式中，细胞外 抗原结合结构域包含含有与SEQ ID NO:86所示的氨基酸序列至少约80％、约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、 约88％、约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VL，如表22 所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VL，其包含具 有SEQ ID NO:86所示序列的氨基酸，如表22所示。在某些实施方式 中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:85所示序列的氨基酸的VH和包含具有SEQ ID NO:86所示序列的氨基酸的VL， 如表22所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含 具有SEQ ID NO:250所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR1、包 含具有SEQ ID NO:251所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR2、和包含具有SEQ ID NO:252所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR3，如表22所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包 含：包含具有SEQ ID NO:253所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO:254所示序列或其保守修饰的氨基酸的 VLCDR2、和包含具有SEQ ID NO:255所示序列或其保守修饰的氨基 酸的VL CDR3，如表22所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结 构域包含：包含具有SEQ ID NO:250所示序列或其保守修饰的氨基酸 的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:251所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR2、包含具有SEQ ID NO:252所示序列或其保守修饰的氨 基酸的VH CDR3、包含具有SEQ ID NO:253所示序列或其保守修饰的 氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO:254所示序列或其保守修饰 的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:255所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR3，如表22所示。在某些实施方式中，细胞外 抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:250所示序列的氨基酸的 VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:251所示序列的氨基酸的VH CDR2、 包含具有SEQ ID NO:252所示序列的氨基酸的VH CDR3、包含具有 SEQID NO:253所示序列的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO: 254所示序列的氨基酸的VLCDR2、和包含具有SEQ ID NO:255所示 序列的氨基酸的VL CDR3。
表22
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含SEQ ID NO:122的氨基酸序列并且特异性地结合GPRC5D多肽(例如，具有 SEQ ID NO:97的氨基酸序列的GPRC5D多肽，或其片段)，该scFv命 名为ET150-172 scFv(也称为“ET150-22 scFv”)。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含：包 含具有SEQ IDNO:89所示序列的氨基酸的重链可变区和包含具有 SEQ ID NO:90所示序列的氨基酸的轻链可变区，任选地具有(iii)在 重链可变区和轻链可变区之间的接头序列，例如接头肽。在某些实施 方式中，接头包含具有SEQ ID NO:98所示序列的氨基酸。在某些实 施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv-Fc融合蛋白或全长人IgG， 其VH和VL区或CDR选自表23。在某些实施方式中，细胞外抗原结 合结构域包含含有与SEQ ID NO:89所示的氨基酸序列至少约80％、 约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、 约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、 约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VH，如表23所示。在 某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VH，其包含具有SEQID NO:89所示序列的氨基酸，如表23所示。在某些实施方式中，细胞外 抗原结合结构域包含含有与SEQ ID NO:90所示的氨基酸序列至少约 80％、约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、 约88％、约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、 约96％、约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VL，如表23 所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VL，其包含具 有SEQ ID NO:90所示序列的氨基酸，如表23所示。在某些实施方式 中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:89所示序列 的氨基酸的VH和包含具有SEQ ID NO:90所示序列的氨基酸的VL， 如表23所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含 具有SEQ ID NO:256所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR1、包 含具有SEQ ID NO:257所示序列或其保守修饰的氨基酸的VHCDR2、 和包含具有SEQ ID NO:258所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR3，如表23所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包 含：包含具有SEQ ID NO:259所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO:260所示序列或其保守修饰的氨基酸的 VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:261所示序列或其保守修饰的氨基 酸的VL CDR3，如表23所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结 构域包含：包含具有SEQ ID NO:256所示序列或其保守修饰的氨基酸 的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:257所示序列或其保守修饰的氨基 酸的VH CDR2、包含具有SEQ ID NO:258所示序列或其保守修饰的氨 基酸的VH CDR3、包含具有SEQ ID NO:259所示序列或其保守修饰的 氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ IDNO:260所示序列或其保守修饰 的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:261所示序列或其保守 修饰的氨基酸的VL CDR3，如表23所示。在某些实施方式中，细胞外 抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:256所示序列的氨基酸的 VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:257所示序列的氨基酸的VH CDR2、 包含具有SEQ ID NO:258所示序列的氨基酸的VH CDR3、包含具有 SEQ ID NO:259所示序列的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO: 260所示序列的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:261所示 序列的氨基酸的VL CDR3。
表23
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含SEQ ID NO:123的氨基酸序列并且特异性地结合GPRC5D多肽(例如，具有SEQ ID NO:97的氨基酸序列的GPRC5D多肽，或其片段)，该scFv命 名为ET150-173 scFv(也称为“ET150-23 scFv”)。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含：包 含具有SEQ IDNO:93所示序列的氨基酸的重链可变区和包含具有 SEQ ID NO:94所示序列的氨基酸的轻链可变区，任选地具有(iii)在 重链可变区和轻链可变区之间的接头序列，例如接头肽。在某些实施 方式中，接头包含具有SEQ ID NO:98所示序列的氨基酸。在某些实 施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv-Fc融合蛋白或全长人IgG， 其VH和VL区或CDR选自表24。在某些实施方式中，细胞外抗原结 合结构域包含含有与SEQ ID NO:93所示的氨基酸序列至少约80％、 约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、 约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、 约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VH，如表24所示。在 某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VH，其包含具有SEQID NO:93所示序列的氨基酸，如表24所示。在某些实施方式中，细胞外 抗原结合结构域包含含有与SEQ ID NO:94所示的氨基酸序列至少约 80％、约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、 约88％、约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、 约96％、约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VL，如表24 所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VL，其包含具 有SEQ ID NO:94所示序列的氨基酸，如表24所示。在某些实施方式 中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:93所示序列 的氨基酸的VH和包含具有SEQ ID NO:94所示序列的氨基酸的VL， 如表24所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含 具有SEQ ID NO:262所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR1、包 含具有SEQ ID NO:263所示序列或其保守修饰的氨基酸的VHCDR2、 和包含具有SEQ ID NO:264所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR3，如表24所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包 含：包含具有SEQ ID NO:265所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO:266所示序列或其保守修饰的氨基酸的 VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:267所示序列或其保守修饰的氨基 酸的VL CDR3，如表24所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结 构域包含：包含具有SEQ ID NO:262所示序列或其保守修饰的氨基酸 的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:263所示序列或其保守修饰的氨基 酸的VH CDR2、包含具有SEQ ID NO:264所示序列或其保守修饰的氨 基酸的VH CDR3、包含具有SEQ ID NO:265所示序列或其保守修饰的 氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ IDNO:266所示序列或其保守修饰 的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:267所示序列或其保守 修饰的氨基酸的VL CDR3，如表24所示。在某些实施方式中，细胞外 抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:262所示序列的氨基酸的 VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:263所示序列的氨基酸的VH CDR2、 包含具有SEQ ID NO:264所示序列的氨基酸的VH CDR3、包含具有 SEQ ID NO:265所示序列的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO: 266所示序列的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:267所示 序列的氨基酸的VL CDR3。
表24
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含SEQ ID NO:301的氨基酸序列并且特异性地结合GPRC5D多肽(例如，具有 SEQ ID NO:97的氨基酸序列的GPRC5D多肽，或其片段)，该scFv命 名为ET150-024 scFv(也称为“ET150-174 scFv”)。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含：包 含具有SEQ IDNO:302所示序列的氨基酸的重链可变区和包含具有 SEQ ID NO:303所示序列的氨基酸的轻链可变区，任选地具有(iii) 在重链可变区和轻链可变区之间的接头序列，例如接头肽。在某些实 施方式中，接头包含具有SEQ ID NO:98所示序列的氨基酸。在某些 实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv-Fc融合蛋白或全长人IgG， 其VH和VL区或CDR选自表25。在某些实施方式中，细胞外抗原结 合结构域包含含有与SEQ ID NO:302所示的氨基酸序列至少约80％、 约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、 约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、 约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VH，如表25所示。在 某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VH，其包含具有SEQ ID NO:302所示序列的氨基酸，如表25所示。在某些实施方式中，细胞 外抗原结合结构域包含含有与SEQ ID NO:303所示的氨基酸序列至少 约80％、约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、 约88％、约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、 约96％、约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VL，如表25 所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VL，其包含具 有SEQ ID NO:303所示序列的氨基酸，如表25所示。在某些实施方 式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ IDNO:302所示序 列的氨基酸的VH和包含具有SEQ ID NO:303所示序列的氨基酸的VL， 如表25所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含 具有SEQ ID NO:304所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR1、包 含具有SEQ ID NO:305所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR2、 和包含具有SEQ ID NO:306所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR3，如表25所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包 含：包含具有SEQ ID NO:307所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO:308所示序列或其保守修饰的氨基酸的 VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:309所示序列或其保守修饰的氨基 酸的VLCDR3，如表25所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结 构域包含：包含具有SEQ ID NO:304所示序列或其保守修饰的氨基酸 的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:305所示序列或其保守修饰的氨基 酸的VH CDR2、包含具有SEQ ID NO:306所示序列或其保守修饰的氨 基酸的VH CDR3、包含具有SEQ ID NO:307所示序列或其保守修饰的 氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO:308所示序列或其保守修饰 的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:309所示序列或其保守 修饰的氨基酸的VL CDR3，如表25所示。在某些实施方式中，细胞外 抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:304所示序列的氨基酸的 VH CDR1、包含具有SEQ IDNO:305所示序列的氨基酸的VH CDR2、 包含具有SEQ ID NO:306所示序列的氨基酸的VHCDR3、包含具有 SEQ ID NO:307所示序列的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO: 308所示序列的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:309所示 序列的氨基酸的VL CDR3。
表25
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含SEQ ID NO:313的氨基酸序列并且特异性地结合GPRC5D多肽(例如，具有 SEQ ID NO:97的氨基酸序列的GPRC5D多肽，或其片段)，该scFv命 名为ET150-026 scFv(也称为“ET150-176 scFv”)。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含：包 含具有SEQ IDNO:314所示序列的氨基酸的重链可变区和包含具有 SEQ ID NO:315所示序列的氨基酸的轻链可变区，任选地具有(iii) 在重链可变区和轻链可变区之间的接头序列，例如接头肽。在某些实 施方式中，接头包含具有SEQ ID NO:98所示序列的氨基酸。在某些 实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv-Fc融合蛋白或全长人IgG， 其VH和VL区或CDR选自表26。在某些实施方式中，细胞外抗原结 合结构域包含含有与SEQ ID NO:314所示的氨基酸序列至少约80％、 约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、 约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、 约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VH，如表26所示。在 某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VH，其包含具有SEQ ID NO:314所示序列的氨基酸，如表26所示。在某些实施方式中，细胞 外抗原结合结构域包含含有与SEQ ID NO:315所示的氨基酸序列至少 约80％、约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、 约88％、约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、 约96％、约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VL，如表26 所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VL，其包含具 有SEQ ID NO:315所示序列的氨基酸，如表26所示。在某些实施方 式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ IDNO:314所示序 列的氨基酸VH和包含具有SEQ ID NO:315所示序列的氨基酸的VL， 如表26所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含 具有SEQ ID NO:316所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR1、包 含具有SEQ ID NO:317所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR2、 和包含具有SEQ ID NO:318所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR3，如表26所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包 含：包含具有SEQ ID NO:319所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO:320所示序列或其保守修饰的氨基酸的 VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:321所示序列或其保守修饰的氨基 酸的VL CDR3，如表26所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结 构域包含：包含具有SEQ ID NO:316所示序列或其保守修饰的氨基酸 的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:317所示序列或其保守修饰的氨基 酸的VH CDR2、包含具有SEQ ID NO:318所示序列或其保守修饰的氨 基酸的VHCDR3、包含具有SEQ ID NO:319所示序列或其保守修饰的 氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQID NO:320所示序列或其保守修饰 的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:321所示序列或其保守 修饰的氨基酸的VL CDR3，如表26所示。在某些实施方式中，细胞外 抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:316所示序列的氨基酸的 VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:317所示序列的氨基酸的VH CDR2、 包含具有SEQ ID NO:318所示序列的氨基酸的VH CDR3、包含具有 SEQ ID NO:319所示序列的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO: 320所示序列的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:321所示 序列的氨基酸的VL CDR3。
表26
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含SEQ ID NO:325的氨基酸序列并且特异性地结合GPRC5D多肽(例如，具有 SEQ ID NO:97的氨基酸序列的GPRC5D多肽，或其片段)，该scFv命 名为ET150-028 scFv(也称为“ET150-178 scFv”)。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含：包 含具有SEQ IDNO:326所示序列的氨基酸的重链可变区和包含具有 SEQ ID NO:327所示序列的氨基酸的轻链可变区，任选地具有(iii) 在重链可变区和轻链可变区之间的接头序列，例如接头肽。在某些实 施方式中，接头包含具有SEQ ID NO:98所示序列的氨基酸。在某些 实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv-Fc融合蛋白或全长人IgG， 其VH和VL区或CDR选自表27。在某些实施方式中，细胞外抗原结 合结构域包含含有与SEQ ID NO:325所示的氨基酸序列至少约80％、 约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、 约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、 约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VH，如表27所示。在 某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VH，其包含具有SEQ ID NO:325所示序列的氨基酸，如表27所示。在某些实施方式中，细胞 外抗原结合结构域包含含有与SEQ ID NO:326所示的氨基酸序列至少 约80％、约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、 约88％、约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、 约96％、约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VL，如表27 所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VL，其包含具 有SEQ ID NO:326所示序列的氨基酸，如表27所示。在某些实施方 式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ IDNO:325所示序 列的氨基酸的VH和包含具有SEQ ID NO:327所示序列的氨基酸的VL， 如表27所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含 具有SEQ ID NO:328所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR1、包 含具有SEQ ID NO:329所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR2、 和包含具有SEQ ID NO:330所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR3，如表27所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包 含：包含具有SEQ ID NO:331所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO:332所示序列或其保守修饰的氨基酸的 VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:333所示序列或其保守修饰的氨基 酸的VLCDR3，如表27所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结 构域包含：包含具有SEQ ID NO:328所示序列或其保守修饰的氨基酸 的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:329所示序列或其保守修饰的氨基 酸的VH CDR2、包含具有SEQ ID NO:330所示序列或其保守修饰的氨 基酸的VH CDR3、包含具有SEQ ID NO:331所示序列或其保守修饰的 氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO:332所示序列或其保守修饰 的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:333所示序列或其保守 修饰的氨基酸的VL CDR3，如表27所示。在某些实施方式中，细胞外 抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:328所示序列的氨基酸的 VH CDR1、包含具有SEQ IDNO:329所示序列的氨基酸的VH CDR2、 包含具有SEQ ID NO:330所示序列的氨基酸的VHCDR3、包含具有 SEQ ID NO:331所示序列的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO: 332所示序列的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:333所示 序列的氨基酸的VL CDR3。
表27
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含SEQ ID NO:337的氨基酸序列并且特异性地结合GPRC5D多肽(例如，具有 SEQ ID NO:97的氨基酸序列的GPRC5D多肽，或其片段)，该scFv命 名为ET150-029 scFv(也称为“ET150-179 scFv”)。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含：包 含具有SEQ IDNO:338所示序列的氨基酸的重链可变区和包含具有 SEQ ID NO:339所示序列的氨基酸的轻链可变区，任选地具有(iii) 在重链可变区和轻链可变区之间的接头序列，例如接头肽。在某些实 施方式中，接头包含具有SEQ ID NO:98所示序列的氨基酸。在某些 实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv-Fc融合蛋白或全长人IgG， 其VH和VL区或CDR选自表28。在某些实施方式中，细胞外抗原结 合结构域包含含有与SEQ ID NO:338所示的氨基酸序列至少约80％、 约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、 约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、 约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VH，如表28所示。在 某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VH，其包含具有SEQ ID NO:338所示序列的氨基酸，如表28所示。在某些实施方式中，细胞 外抗原结合结构域包含含有与SEQ ID NO:339所示的氨基酸序列至少 约80％、约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、 约88％、约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、 约96％、约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VL，如表28 所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VL，其包含具 有SEQ ID NO:339所示序列的氨基酸，如表28所示。在某些实施方 式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ IDNO:338所示序 列的氨基酸的VH和包含具有SEQ ID NO:339所示序列的氨基酸的VL， 如表28所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含 具有SEQ ID NO:340所示序列或其保守修饰的氨基酸VH CDR1、包含 具有SEQ ID NO:341所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR2、和 包含具有SEQ ID NO:342所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR3，如表28所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包 含：包含具有SEQ ID NO:343所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO:344所示序列或其保守修饰的氨基酸的 VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:345所示序列或其保守修饰的氨基 酸的VL CDR3，如表28所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结 构域包含：包含具有SEQ ID NO:340所示序列或其保守修饰的氨基酸 VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:341所示序列或其保守修饰的氨基酸 的VH CDR2、包含具有SEQ ID NO:342所示序列或其保守修饰的氨基 酸的VHCDR3、包含具有SEQ ID NO:343所示序列或其保守修饰的氨 基酸的VL CDR1、包含具有SEQID NO:344所示序列或其保守修饰的 氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:345所示序列或其保守修 饰的氨基酸的VL CDR3，如表28所示。在某些实施方式中，细胞外抗 原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:340所示序列的氨基酸VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:341所示序列的氨基酸的VH CDR2、包 含具有SEQ ID NO:342所示序列的氨基酸的VH CDR3、包含具有SEQ ID NO:343所示序列的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO:344 所示序列的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:345所示序列 的氨基酸的VL CDR3。
表28
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含SEQ ID NO:349的氨基酸序列并且特异性地结合GPRC5D多肽(例如，具有 SEQ ID NO:97的氨基酸序列的GPRC5D多肽，或其片段)，该scFv命 名为ET150-030 scFv(也称为“ET150-180 scFv”)。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含：包 含具有SEQ IDNO:350所示序列的氨基酸的重链可变区和包含具有 SEQ ID NO:351所示序列的氨基酸的轻链可变区，任选地具有(iii) 在重链可变区和轻链可变区之间的接头序列，例如接头肽。在某些实 施方式中，接头包含具有SEQ ID NO:98所示序列的氨基酸。在某些 实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv-Fc融合蛋白或全长人IgG， 其VH和VL区或CDR选自表29。在某些实施方式中，细胞外抗原结 合结构域包含含有与SEQ ID NO:350所示的氨基酸序列至少约80％、 约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、 约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、 约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VH，如表29所示。在 某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VH，其包含具有SEQ ID NO:350所示序列的氨基酸，如表29所示。在某些实施方式中，细胞 外抗原结合结构域包含含有与SEQ ID NO:351所示的氨基酸序列至少 约80％、约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、 约88％、约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、 约96％、约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VL，如表29 所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VL，其包含具 有SEQ ID NO:351所示序列的氨基酸，如表29所示。在某些实施方 式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ IDNO:350所示序 列的氨基酸的VH和包含具有SEQ ID NO:351所示序列的氨基酸的VL， 如表29所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含 具有SEQ ID NO:352所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR1、包 含具有SEQ ID NO:353所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR2、 和包含具有SEQ ID NO:354所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR3，如表29所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包 含：包含具有SEQ ID NO:355所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO:356所示序列或其保守修饰的氨基酸的 VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:357所示序列或其保守修饰的氨基 酸的VLCDR3，如表29所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结 构域包含：包含具有SEQ ID NO:352所示序列或其保守修饰的氨基酸 的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:353所示序列或其保守修饰的氨基 酸的VH CDR2、包含具有SEQ ID NO:354所示序列或其保守修饰的氨 基酸的VH CDR3、包含具有SEQ ID NO:355所示序列或其保守修饰的 氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO:356所示序列或其保守修饰 的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:357所示序列或其保守 修饰的氨基酸的VL CDR3，如表29所示。在某些实施方式中，细胞外 抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:352所示序列的氨基酸的 VH CDR1、包含具有SEQ IDNO:353所示序列的氨基酸的VH CDR2、 包含具有SEQ ID NO:354所示序列的氨基酸的VHCDR3、包含具有 SEQ ID NO:355所示序列的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO: 356所示序列的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:357所示 序列的氨基酸的VL CDR3。
表29
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含SEQ ID NO:361的氨基酸序列并且特异性地结合GPRC5D多肽(例如，具有 SEQ ID NO:97的氨基酸序列的GPRC5D多肽，或其片段)，该scFv命 名为ET150-031 scFv(也称为“ET150-181 scFv”)。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含：包 含具有SEQ IDNO:362所示序列的氨基酸的重链可变区和包含具有 SEQ ID NO:363所示序列的氨基酸的轻链可变区，任选地具有(iii) 在重链可变区和轻链可变区之间的接头序列，例如接头肽。在某些实 施方式中，接头包含具有SEQ ID NO:98所示序列的氨基酸。在某些 实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv-Fc融合蛋白或全长人IgG， 其VH和VL区或CDR选自表30。在某些实施方式中，细胞外抗原结 合结构域包含含有与SEQ ID NO:362所示的氨基酸序列至少约80％、 约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、 约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、 约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VH，如表30所示。在 某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VH，其包含具有SEQ ID NO:362所示序列的氨基酸，如表30所示。在某些实施方式中，细胞 外抗原结合结构域包含含有与SEQ ID NO:363所示的氨基酸序列至少 约80％、约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、 约88％、约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、 约96％、约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VL，如表30 所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VL，其包含具 有SEQ ID NO:363所示序列的氨基酸，如表30所示。在某些实施方 式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ IDNO:362所示序 列的氨基酸的VH和包含具有SEQ ID NO:363所示序列的氨基酸的VL， 如表30所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含 具有SEQ ID NO:364所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR1、包 含具有SEQ ID NO:365所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR2、 和包含具有SEQ ID NO:366所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR3，如表30所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包 含：包含具有SEQ ID NO:367所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO:368所示序列或其保守修饰的氨基酸的 VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:369所示序列或其保守修饰的氨基 酸的VLCDR3，如表30所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结 构域包含：包含具有SEQ ID NO:364所示序列或其保守修饰的氨基酸 的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:365所示序列或其保守修饰的氨基 酸的VH CDR2、包含具有SEQ ID NO:366所示序列或其保守修饰的氨 基酸的VH CDR3、包含具有SEQ ID NO:367所示序列或其保守修饰的 氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO:368所示序列或其保守修饰 的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:369所示序列或其保守 修饰的氨基酸的VL CDR3，如表30所示。在某些实施方式中，细胞外 抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:364所示序列的氨基酸的 VH CDR1、包含具有SEQ IDNO:365所示序列的氨基酸的VH CDR2、 包含具有SEQ ID NO:366所示序列的氨基酸的VHCDR3、包含具有 SEQ ID NO:367所示序列的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO: 368所示序列的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:369所示 序列的氨基酸的VL CDR3。
表30
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含SEQ ID NO:373的氨基酸序列并且特异性地结合GPRC5D多肽(例如，具有 SEQ ID NO:97的氨基酸序列的GPRC5D多肽，或其片段)，该scFv命 名为ET150-032 scFv(也称为“ET150-182 scFv”)。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含：包 含具有SEQ IDNO:374所示序列的氨基酸的重链可变区和包含具有 SEQ ID NO:375所示序列的氨基酸的轻链可变区，任选地具有(iii) 在重链可变区和轻链可变区之间的接头序列，例如接头肽。在某些实 施方式中，接头包含具有SEQ ID NO:98所示序列的氨基酸。在某些 实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv-Fc融合蛋白或全长人IgG， 其VH和VL区或CDR选自表31。在某些实施方式中，细胞外抗原结 合结构域包含含有与SEQ ID NO:374所示的氨基酸序列至少约80％、 约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、 约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、 约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VH，如表31所示。在 某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VH，其包含具有SEQ ID NO:374所示序列的氨基酸，如表31所示。在某些实施方式中，细胞 外抗原结合结构域包含含有与SEQ ID NO:375所示的氨基酸序列至少 约80％、约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、 约88％、约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、 约96％、约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VL，如表31 所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VL，其包含具 有SEQ ID NO:375所示序列的氨基酸，如表31所示。在某些实施方 式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ IDNO:374所示序 列的氨基酸的VH和包含具有SEQ ID NO:375所示序列的氨基酸的VL， 如表31所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含 具有SEQ ID NO:376所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR1、包 含具有SEQ ID NO:377所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR2、 和包含具有SEQ ID NO:378所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR3，如表31所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包 含：包含具有SEQ ID NO:379所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO:380所示序列或其保守修饰的氨基酸的 VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:381所示序列或其保守修饰的氨基 酸的VLCDR3，如表31所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结 构域包含：包含具有SEQ ID NO:376所示序列或其保守修饰的氨基酸 的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:377所示序列或其保守修饰的氨基 酸的VH CDR2、包含具有SEQ ID NO:378所示序列或其保守修饰的氨 基酸的VH CDR3、包含具有SEQ ID NO:379所示序列或其保守修饰的 氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO:380所示序列或其保守修饰 的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:381所示序列或其保守 修饰的氨基酸的VL CDR3，如表31所示。在某些实施方式中，细胞外 抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:376所示序列的氨基酸的 VH CDR1、包含具有SEQ IDNO:377所示序列的氨基酸的VH CDR2、 包含具有SEQ ID NO:378所示序列的氨基酸的VHCDR3、包含具有 SEQ ID NO:379所示序列的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO: 380所示序列的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:381所示 序列的氨基酸的VL CDR3。
表31
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含SEQ ID NO:385的氨基酸序列并且特异性地结合GPRC5D多肽(例如，具有 SEQ ID NO:97的氨基酸序列的GPRC5D多肽，或其片段)，该scFv命 名为ET150-033 scFv(也称为“ET150-183 scFv”)。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv，其包含：包 含具有SEQ IDNO:386所示序列的氨基酸的重链可变区和包含具有 SEQ ID NO:387所示序列的氨基酸的轻链可变区，任选地具有(iii) 在重链可变区和轻链可变区之间的接头序列，例如接头肽。在某些实 施方式中，接头包含具有SEQ ID NO:98所示序列的氨基酸。在某些 实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv-Fc融合蛋白或全长人IgG， 其VH和VL区或CDR选自表32。在某些实施方式中，细胞外抗原结 合结构域包含含有与SEQ ID NO:386所示的氨基酸序列至少约80％、 约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、 约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、 约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VH，如表32所示。在 某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VH，其包含具有SEQ ID NO:386所示序列的氨基酸，如表32所示。在某些实施方式中，细胞 外抗原结合结构域包含含有与SEQ ID NO:387所示的氨基酸序列至少 约80％、约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、 约88％、约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、 约96％、约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VL，如表32 所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VL，其包含具 有SEQ ID NO:387所示序列的氨基酸，如表32所示。在某些实施方 式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ IDNO:386所示序 列的氨基酸的VH和包含具有SEQ ID NO:387所示序列的氨基酸的VL， 如表32所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含 具有SEQ ID NO:388所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR1、包 含具有SEQ ID NO:389所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR2、 和包含具有SEQ ID NO:390所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR3，如表32所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包 含：包含具有SEQ ID NO:391所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO:392所示序列或其保守修饰的氨基酸的 VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:393所示序列或其保守修饰的氨基 酸的VLCDR3，如表32所示。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结 构域包含：包含具有SEQ ID NO:388所示序列或其保守修饰的氨基酸 的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:389所示序列或其保守修饰的氨基 酸的VH CDR2、包含具有SEQ ID NO:390所示序列或其保守修饰的氨 基酸的VH CDR3、包含具有SEQ ID NO:391所示序列或其保守修饰的 氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO:392所示序列或其保守修饰 的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:393所示序列或其保守 修饰的氨基酸的VL CDR3，如表32所示。在某些实施方式中，细胞外 抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:388所示序列的氨基酸的 VH CDR1、包含具有SEQ IDNO:389所示序列的氨基酸的VH CDR2、 包含具有SEQ ID NO:390所示序列的氨基酸的VHCDR3、包含具有 SEQ ID NO:391所示序列的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO: 392所示序列的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:393所示 序列的氨基酸的VL CDR3。
表32
包含与上述序列的VH和VL区具有高(即，80％或更大)同源性 的VH和/或VL区的细胞外抗原结合结构域(例如，scFv)可以通过诱 变(例如，定点或PCR介导的诱变)获得，然后使用本文所述的结合 测定法来测试所编码的改变的scFv的保留功能(即，结合亲和力)。在某些实施方式中，相对于参照序列，具有至少约80％、约81％、约 82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、约89％、 约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、 约98％或约99％同源性的VH序列包含取代(例如，保守取代以产生序 列的保守修饰)、插入或缺失，但包含该序列的细胞外抗原结合结构域 (例如，scFv)保留结合GPRC5D多肽的能力。在某些实施方式中， 相对于参照序列，具有至少约80％、约81％、约82％、约83％、约84％、 约85％、约86％、约87％、约88％、约89％、约90％、约91％、约92％、 约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％同源性 的VL序列包含取代(例如，保守取代)、插入或缺失，但包含该序列 的细胞外抗原结合结构域(例如，scFv)保留结合GPRC5D多肽的能 力。在某些实施方案中，在所公开的序列中总共约1至约10个氨基酸 被取代、插入和/或缺失。例如，并且并非通过限制的方式，VH序列或 VL序列可以有至多约一个、至多约两个、至多约三个、至多约四个、 至多约五个、至多约六个、至多约七个、至多约八个、至多约九个或 至多约十个被修饰和/或取代的氨基酸残基。保守修饰的非限制性实例 提供如下，例如，在表33中。
本文使用的术语“保守序列修饰”是指不显著影响或改变包含氨 基酸序列的本发明公开的CAR(例如，细胞外抗原结合结构域)的结 合特征的氨基酸修饰。这种保守修饰包括氨基酸取代、添加和缺失。 可以通过本领域已知的标准技术，比如定点诱变和PCR介导的诱变， 将修饰引入本发明公开主题的人scFv中。可以根据其物理化学性质如 电荷和极性将氨基酸分组。保守性氨基酸取代是其中氨基酸残基被相 同组内的氨基酸替代的取代。例如，氨基酸可以通过电荷分类：带正 电荷的氨基酸包括赖氨酸、精氨酸、组氨酸，带负电荷的氨基酸包括 天冬氨酸、谷氨酸，中性电荷氨基酸包括丙氨酸、天冬酰胺、半胱氨 酸、谷氨酰胺、甘氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、 脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸和缬氨酸。此外，氨基酸 可以通过极性分类：极性氨基酸包括精氨酸(碱性极性)、天冬酰胺、 天冬氨酸(酸性极性)、谷氨酸(酸性极性)、谷氨酰胺、组氨酸(碱 性极性)、赖氨酸(碱性极性)、丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸；非极性氨 基酸包括丙氨酸、半胱氨酸、甘氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、 苯丙氨酸、脯氨酸、色氨酸和缬氨酸。因此，CDR区内的一个或多个氨基酸残基可以被来自相同组的其他氨基酸残基替换，并且可以使用 本文所述的功能试验检测改变的抗体的保留功能(即，以上(c)至(l) 中所述的功能)。在某些实施方式中，在特定序列或CDR区内改变不 超过一个、不超过两个、不超过三个、不超过四个、不超过五个残基。 示例性保守氨基酸取代在表33中示出。
表33
在某些非限制性实施方式中，CAR的细胞外抗原结合结构域可包 含连接细胞外抗原结合结构域的重链可变区和轻链可变区的接头。本 文使用的术语“接头”是指共价连接两个或多个多肽或核酸使得它们 彼此连接的官能团(例如，化学的或多肽)。本文使用的“肽接头”是 指用于将两种蛋白质偶联在一起(例如，偶联VH和VL结构域)的一 个或多个氨基酸。肽接头的非限制性实例公开于Shen等人,Anal.Chem. 80(6):1910-1917(2008)和WO2014/087010中。
在一个非限制性实例中，接头是包含具有SEQ ID NO:98所示序 列的氨基酸的G4S接头。在某些实施方式中，编码SEQ ID NO:98的 氨基酸序列的核苷酸序列如SEQ ID NO:99所示。在一个非限制性实例 中，接头包含具有SEQ ID NO:284所示序列的氨基酸。在某些实施方 式中，编码SEQ ID NO:307的氨基酸序列的核苷酸序列如SEQ ID NO：285所示。
在某些实施方式中，接头包含具有如下文所提供的SEQ ID NO： 286所示序列的氨基酸。
在某些实施方式中，接头包含具有如下文所提供的SEQ ID NO： 287所示序列的氨基酸。
在某些实施方式中，接头包含具有如下文所提供的SEQ ID NO： 288所示序列的氨基酸。
在某些实施方式中，接头包含具有如下文所提供的SEQ ID NO： 289所示序列的氨基酸。
在某些实施方式中，接头包含具有如下文所提供的SEQ ID NO： 290所示序列的氨基酸。
在某些实施方式中，接头包含具有如下文所提供的SEQ ID NO： 291所示序列的氨基酸。
在某些实施方式中，接头包含具有如下文所提供的SEQ ID NO： 292所示序列的氨基酸。
在某些实施方式中，接头包含具有如下文所提供的SEQ ID NO： 293所示序列的氨基酸。
在某些实施方式中，接头包含具有如下文所提供的SEQ ID NO： 294所示序列的氨基酸。
在某些实施方式中，接头包含具有如下文所提供的SEQ ID NO：295所示序列的氨基酸。
在某些实施方式中，接头包含具有如下文所提供的SEQ ID NO： 296所示序列的氨基酸。
GGGGSGGGSEPKSCDKTHTCPPCP[SEQ ID NO：296]。
在某些实施方式中，接头包含具有如下文所提供的SEQ ID NO： 297所示序列的氨基酸。
在某些实施方式中，接头包含具有如下文所提供的SEQ ID NO： 298所示序列的氨基酸。
GSGSGS[SEQ ID NO：298]。
在某些实施方式中，接头包含具有如下文所提供的SEQ ID NO： 299所示序列的氨基酸。
此外，细胞外抗原结合结构域能够包含将新生蛋白质导入内质网 的前导序列或信号肽。如果CAR将被糖基化并锚定在细胞膜中，信号 肽或前导序列可能是必需的。信号序列或前导序列可以是存在于新合 成的蛋白质的N端的肽序列(约5、约10、约15、约20、约25或约 30个氨基酸长度)，其指导蛋白质进入分泌通路。在非限制性实例中， 信号肽共价连接到细胞外抗原结合结构域的5’端。在某些实施方式中， 信号肽包含CD8多肽，其包含具有如下文所提供的SEQ ID NO：268所 示序列的氨基酸。
编码SEQ ID NO：268的氨基酸序列的核苷酸序列如SEQ ID NO：269所示，其提供如下：
在某些实施方式中，信号肽包含具有如下文所提供的SEQ ID NO： 282所示序列的氨基酸。
编码SEQ ID NO：282的氨基酸序列的核苷酸序列如SEQ ID NO：283所示，其提供如下：
在某些实施方式中，人scFv包含重链可变区、轻链可变区、重链 可变区和轻链可变区之间的接头肽，以及His-标签和HA-标签。在某 些实施方式中，His-标签和HA-标签的氨基酸序列包含SEQ ID NO：409 的氨基酸序列，其提供如下：
TSGQAGQHHHHHHGAYPYDVPDYAS[SEQ ID NO：409]
编码SEQ ID NO：409的核苷酸序列为SEQ ID NO：410，其提供如 下：
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域结合包含SEQ ID NO： 97所示的氨基酸序列的人GPRC5D多肽。在某些实施方式中，细胞外 抗原结合结构域结合N-端区域(SEQID NO：97的氨基酸1-27)、ECL1 区域(SEQ ID NO：97的氨基酸85-93)、ECL2区域(SEQ IDNO：97的 氨基酸145-167)和ECL3区域(SEQ ID NO：97的氨基酸226-239)中 的一个、两个、三个或四个。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结 构域结合N-端区域中的表位区域，包括但不限于，包含SEQ ID NO：97 的氨基酸16-23的表位区域，和包含SEQ ID NO：97的氨基酸10-17的 表位区域。在某些实施方式中，N-端区域中的表位区域包含SEQ ID NO：97的氨基酸15-23。在某些实施方式中，N-端区域中的表位区域包 含SEQ ID NO：97的氨基酸16-25。在某些实施方式中，N-端区域中的 表位区域包含SEQ ID NO：97的氨基酸10-17。在某些实施方式中，N- 端区域中的表位区域包含SEQ ID NO：97的氨基酸5-17。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域结合ECL1区域中的 表位区域，包括但不限于，包含SEQ ID NO：97的氨基酸85-95的表位 区域。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域结合ECL2区域中的 表位区域，包括但不限于，包含SEQ ID NO：97的氨基酸157-164的表 位区域。在某些实施方式中，ECL2区域中的表位区域包含SEQ ID NO：97的氨基酸157-164。在某些实施方式中，ECL2区域中的表位区域包含SEQ ID NO：97的氨基酸157-167。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域结合ECL3区域中的 表位区域，包括但不限于，包含SEQ ID NO：97的氨基酸230-237的表 位区域。在某些实施方式中，ECL3区域中的表位区域包含SEQ ID NO：97的氨基酸229-237。在某些实施方式中，ECL3区域中的表位区域包含SEQ ID NO：97的氨基酸230-243。在某些实施方式中，ECL3 区域中的表位区域包含SEQ ID NO：97的氨基酸227-237。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域结合一个、两个或三 个选自下述的表位区域：包含SEQ ID NO：97的氨基酸16-25的表位区 域、包含SEQ ID NO：97的氨基酸157-164的表位区域和包含SEQ ID NO：97的氨基酸229-237的表位区域。例如，细胞外抗原结合结构域包 含：包含具有SEQ ID NO：57所示序列的氨基酸的重链可变区和包含 具有SEQ IDNO：58所示序列的氨基酸的轻链可变区，任选地具有(iii) 在重链可变区和轻链可变区之间的接头序列，例如接头肽。在某些实 施方式中，接头包含具有SEQ ID NO：98所示序列的氨基酸。在某些 实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv。在某些实施方式中，细 胞外抗原结合结构域是scFv-Fc融合蛋白或全长人IgG，其VH和VL区或CDR选自表15。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含 含有与SEQ ID NO：57所示的氨基酸序列至少约80％、约81％、约82％、 约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、约89％、约90％、 约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％ 或约99％同源的氨基酸序列的VH。在某些实施方式中，细胞外抗原结 合结构域包含VH，其包含具有SEQ ID NO：57所示序列的氨基酸。在 某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含含有与SEQ ID NO：58 所示的氨基酸序列至少约80％、约81％、约82％、约83％、约84％、 约85％、约86％、约87％、约88％、约89％、约90％、约91％、约92％、 约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％同源的 氨基酸序列的VL。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VL， 其包含具有SEQ ID NO：58所示序列的氨基酸。在某些实施方式中， 细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO：57所示序列的氨 基酸的VH和包含具有SEQ ID NO：58所示序列的氨基酸的VL。在某 些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:208所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO: 209所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR2、和包含具有SEQ ID NO:210所示序列或其保守修饰的氨基酸的VHCDR3。在某些实施方 式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:211所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO:212所示 序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:213 所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR3。在某些实施方式中，细 胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:208所示序列或其保 守修饰的氨基酸的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:209所示序列或其 保守修饰的氨基酸的VH CDR2、包含具有SEQ ID NO:210所示序列或 其保守修饰的氨基酸的VH CDR3、包含具有SEQ ID NO:211所示序列 或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO:212所示序 列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:213所 示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR3。在某些实施方式中，细胞 外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ IDNO:208所示序列的氨基酸 的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:209所示序列的氨基酸的VHCDR2、包含具有SEQ ID NO:210所示序列的氨基酸的VH CDR3、包 含具有SEQ ID NO:211所示序列的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO:212所示序列的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO: 213所示序列的氨基酸的VL CDR3。在某些实施方式中，细胞外抗原 结合结构域是ET150-2 scFv(或ET150-152 scFv)。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域结合一个、两个或三 个选自下述的表位区域：包含SEQ ID NO:97的氨基酸5-17的表位区 域、包含SEQ ID NO:97的氨基酸85-95的表位区域、和包含SEQ ID NO:97的氨基酸157-164的表位区域。例如，细胞外抗原结合结构域包 含：包含具有SEQ ID NO:61所示序列的氨基酸的重链可变区和包含 具有SEQ IDNO:62所示序列的氨基酸的轻链可变区，任选地具有(iii) 在重链可变区和轻链可变区之间的接头序列，例如接头肽。在某些实 施方式中，接头包含具有SEQ ID NO:98所示序列的氨基酸。在某些 实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv。在某些实施方式中，细 胞外抗原结合结构域是scFv-Fc融合蛋白或全长人IgG，其VH和VL区或CDR选自表16。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含 含有与SEQ ID NO:61所示的氨基酸序列至少约80％、约81％、约82％、 约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、约89％、约90％、 约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％ 或约99％同源的氨基酸序列的VH。在某些实施方式中，细胞外抗原结 合结构域包含VH，其包含具有SEQ ID NO:61所示序列的氨基酸。在 某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含含有与SEQ ID NO:62 所示的氨基酸序列至少约80％、约81％、约82％、约83％、约84％、 约85％、约86％、约87％、约88％、约89％、约90％、约91％、约92％、 约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％同源的 氨基酸序列的VL。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VL， 其包含具有SEQ ID NO:62所示序列的氨基酸。在某些实施方式中， 细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:61所示序列的氨 基酸的VH和包含具有SEQ ID NO:62所示序列的氨基酸的VL。在某 些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:214所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO: 215所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR2、和包含具有SEQ ID NO:216所示序列或其保守修饰的氨基酸的VHCDR3。在某些实施方 式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:217所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO:218所示 序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:219 所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR3。在某些实施方式中，细 胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:214所示序列或其保 守修饰的氨基酸的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:215所示序列或其 保守修饰的氨基酸的VH CDR2、包含具有SEQ ID NO:216所示序列或 其保守修饰的氨基酸的VH CDR3，包含具有SEQ ID NO:217所示序列 或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO:218所示序 列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:219所 示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR3。在某些实施方式中，细胞 外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ IDNO:214所示序列的氨基酸 的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:215所示序列的氨基酸的VHCDR2、包含具有SEQ ID NO:216所示序列的氨基酸的VH CDR3、包 含具有SEQ ID NO:217所示序列的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO:218所示序列的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO: 219所示序列的氨基酸的VL CDR3。在某些实施方式中，细胞外抗原 结合结构域是ET150-155 scFv(或ET150-5 scFv)。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域结合一个或两个选自 下述的表位区域：包含SEQ ID NO:97的氨基酸15-23的表位区域、和 包含SEQ ID NO:97的氨基酸230-243的表位区域。例如，细胞外抗原 结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:65所示序列的氨基酸的重链 可变区和包含具有SEQ ID NO:66所示序列的氨基酸的轻链可变区， 任选地具有(iii)在重链可变区和轻链可变区之间的接头序列，例如接 头肽。在某些实施方式中，接头包含具有SEQ ID NO:98所示序列的 氨基酸。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv。在某些 实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv-Fc融合蛋白或全长人IgG， 其VH和VL区或CDR选自表17。在某些实施方式中，细胞外抗原结 合结构域包含含有与SEQ IDNO:65所示的氨基酸序列至少约80％、 约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、 约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、 约97％、约98％或约99％同源的氨基酸序列的VH。在某些实施方式中， 细胞外抗原结合结构域包含VH，其包含具有SEQ ID NO:65所示序列 的氨基酸。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含含有与SEQ ID NO:66所示的氨基酸序列至少约80％、约81％、约82％、约83％、 约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、约89％、约90％、约91％、 约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％ 同源的氨基酸序列的VL，如表17所示。在某些实施方式中，细胞外抗 原结合结构域包含VL，其包含具有SEQ ID NO:66所示序列的氨基酸。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO: 65所示序列的氨基酸的VH和包含具有SEQ ID NO:66所示序列的氨基 酸的VL。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有 SEQ ID NO:220所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR1、包含具 有SEQ ID NO:221所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR2、和包 含具有SEQ IDNO:222所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR3。 在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO: 223所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO: 224所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:225所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR3。在某些实施方 式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:220所示序 列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR1、包含具有SEQID NO:221所示 序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR2、包含具有SEQ ID NO:222所 示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR3、包含具有SEQ ID NO:223 所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO: 224所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:225所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR3。在某些实施方 式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:220所示序 列的氨基酸的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:221所示序列的氨基酸 的VH CDR2、包含具有SEQ ID NO:222所示序列的氨基酸的VH CDR3、包含具有SEQ ID NO:223所示序列的氨基酸的VL CDR1、包 含具有SEQ IDNO:224所示序列的氨基酸的VL CDR2、和包含具有 SEQ ID NO:225所示序列的氨基酸的VLCDR3。在某些实施方式中， 细胞外抗原结合结构域是ET150-8 scFv(或ET150-158 scFv)。
在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域结合一个、两个或三 个选自下述的表位区域：包含SEQ ID NO:97的氨基酸10-17的表位区 域、包含SEQ ID NO:97的氨基酸157-167的表位区域、和包含SEQ ID NO:97的氨基酸227-237的表位区域。例如，细胞外抗原结合结构域包 含：包含具有SEQ ID NO:69所示序列的氨基酸的重链可变区和包含具 有SEQ IDNO:70所示序列的氨基酸的轻链可变区，任选地具有(iii) 在重链可变区和轻链可变区之间的接头序列，例如接头肽。在某些实 施方式中，接头包含具有SEQ ID NO:98所示序列的氨基酸。在某些 实施方式中，细胞外抗原结合结构域是scFv。在某些实施方式中，细 胞外抗原结合结构域是scFv-Fc融合蛋白或全长人IgG，其VH和VL区或CDR选自表18。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含 含有与SEQ ID NO:69所示的氨基酸序列至少约80％、约81％、约82％、 约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、约89％、约90％、 约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％ 或约99％同源的氨基酸序列的VH。在某些实施方式中，细胞外抗原结 合结构域包含VH，其包含具有SEQ ID NO:69所示序列的氨基酸。在 某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含含有与SEQ ID NO:70 所示的氨基酸序列至少约80％、约81％、约82％、约83％、约84％、 约85％、约86％、约87％、约88％、约89％、约90％、约91％、约92％、 约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％同源的 氨基酸序列的VL。在某些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含VL， 其包含具有SEQ ID NO:70所示序列的氨基酸。在某些实施方式中， 细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:69所示序列的氨 基酸的VH和包含具有SEQ ID NO:70所示序列的氨基酸的VL。在某 些实施方式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:226所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO: 227所示序列或其保守修饰的氨基酸的VH CDR2、和包含具有SEQ ID NO:228所示序列或其保守修饰的氨基酸的VHCDR3。在某些实施方 式中，细胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:229所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO:230所示 序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:231 所示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR3。在某些实施方式中，细 胞外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ ID NO:226所示序列或其保 守修饰的氨基酸的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:227所示序列或其 保守修饰的氨基酸的VH CDR2、包含具有SEQ ID NO:228所示序列或 其保守修饰的氨基酸的VH CDR3、包含具有SEQ ID NO:229所示序列 或其保守修饰的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO:230所示序 列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO:231所 示序列或其保守修饰的氨基酸的VL CDR3。在某些实施方式中，细胞 外抗原结合结构域包含：包含具有SEQ IDNO:226所示序列的氨基酸 的VH CDR1、包含具有SEQ ID NO:227所示序列的氨基酸的VHCDR2、包含具有SEQ ID NO:228所示序列的氨基酸的VH CDR3、包 含具有SEQ ID NO:229所示序列的氨基酸的VL CDR1、包含具有SEQ ID NO:230所示序列的氨基酸的VL CDR2、和包含具有SEQ ID NO: 231所示序列的氨基酸的VL CDR3。在某些实施方式中，细胞外抗原 结合结构域是ET150-18 scFv(或ET150-168 scFv)。
CAR的跨膜结构域
在某些非限制性实施方式中，CAR的跨膜结构域包含跨越膜的至 少一部分的疏水性α螺旋。不同的跨膜结构域产生不同的受体稳定性。 在抗原识别之后，受体簇和信号被传递到细胞。根据本发明公开的主 题，CAR的跨膜结构域包含CD8多肽、CD28多肽、CD3ζ多肽、CD4 多肽、4-1BB多肽、OX40多肽、ICOS多肽、CTLA-4多肽、PD-1多 肽、LAG-3多肽、2B4多肽、BTLA多肽、合成肽(非基于与免疫应 答相关的蛋白质)、或其组合。
在某些实施方式中，本发明公开的CAR的跨膜结构域包含CD28 多肽。CD28多肽可具有与NCBI参考编号为P10747或NP_006130的 序列(SEQ ID NO:270)或其片段至少约85％、约90％、约95％、约 96％、约97％、约98％、约99％或100％同源的氨基酸序列，和/或可 任选地包含至多一个或至多两个或至多三个保守氨基酸取代。在非限 制性实施方式中，CD28多肽的氨基酸序列可以是SEQ ID NO:270的连 续部分，其长度为至少20、或至少30、或至少40、或至少50，并且 至多220个氨基酸。或者，或另外，在非限制性的各种实施方式中， CD28多肽的氨基酸序列为SEQ ID NO:270的氨基酸1～220、1～50、 50～100、100～150、150～200或200～220。在某些实施方式中，本发明 公开的CAR包含含有CD28多肽的跨膜结构域和包含含有含CD28多 肽的共刺激信号传导区的细胞内结构域。在某些实施方式中，包含在 跨膜结构域和胞内结构域中的CD28多肽的氨基酸序列为SEQ ID NO:270的氨基酸114～220。
SEQ ID NO:270提供如下：
根据本发明公开的主题，“CD28核酸分子”是指编码CD28多肽 的多核苷酸。在某些实施方式中，编码本发明公开的CAR的跨膜结构 域和细胞内结构域(例如，共刺激信号传导区)中所包含的CD28多 肽(SEQ ID NO:270的氨基酸114～220)的CD28核酸分子包含具有如下文所提供的SEQ ID NO:271所示序列的核酸。
在某些实施方式中，本发明公开的CAR的跨膜结构域包含CD8 多肽。CD8多肽可以具有与NCBI参考编号为AAH25715的序列(SEQ ID NO:404)或其片段至少约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、 约98％、约99％或100％同源的氨基酸序列，和/或可以任选地包含至 多一个或至多两个或至多三个保守氨基酸取代。在非限制性实施方式 中，CD8多肽的氨基酸序列可以是SEQ ID NO:404的连续部分，其长 度为至少20个、或至少30个、或至少40个、或至少50个、或至少 70个、或至少100个、或至少150个、或至少200各并且至多235个 氨基酸。或者，或另外，在非限制性的各种实施方式中，CD28多肽具 有SEQ ID NO:404的氨基酸1～235、1～50、50～100、100～150、150～200、 130～210或200～235的氨基酸序列。在某些实施方式中，跨膜结构域中 包含的CD8多肽具有SEQ ID NO:404的氨基酸137～207的氨基酸序 列。
SEQ ID NO:226提供如下：
根据本发明公开的主题，“CD8核酸分子”是指编码CD8多肽的 多核苷酸。在某些实施方式中，编码本发明公开的CAR的跨膜结构域 中的CD8多肽(SEQ ID NO:404的氨基酸137～207)的CD8核酸分子 包含具有如下文所提供的SEQ ID NO:405所示序列的核酸。
在某些非限制性实施方式中，CAR还可包含将细胞外抗原结合结 构域连接至跨膜结构域的间隔区(spacer region)。间隔区可以是足够柔 性的，以允许抗原结合结构域在不同方向上定向，以利于抗原识别。 间隔区可以是来自IgG1的铰链区、或免疫球蛋白的CH2CH3区和CD3 的部分。
CAR的细胞内结构域
在某些非限制性实施方式中，CAR的细胞内结构域可以包含CD3ζ 多肽，其可以激活或刺激细胞(例如，淋巴谱系的细胞，例如，T细胞)。 CD3ζ包含三个ITAM，并且在抗原结合后向细胞(例如，淋巴谱系的 细胞，例如，T细胞)发送激活信号。CD3ζ多肽可以具有与SEQID NO:272所示的序列或其片段至少约85％、约90％、约95％、约96％、 约97％、约98％、约99％或约100％同源的氨基酸序列，和/或可以任 选地包含至多一个或至多两个或至多三个保守氨基酸取代。在非限制 性实施方式中，CD3ζ多肽的氨基酸序列可以是SEQ ID NO:272的连续 部分，其长度为至少20个、或至少30个、或至少40个、或至少50 个、并且至多163个氨基酸。或者，或另外，在非限制性的各种实施 方式中，CD3ζ多肽可以具有SEQ ID NO:272的氨基酸1～163、1～50、 50～100、100～150、或150～163的氨基酸序列。在某些实施方式中，本 发明公开的CAR的细胞内结构域中包含的CD3ζ多肽具有SEQ ID NO: 272的氨基酸52～163的氨基酸序列。
SEQ ID NO:272提供如下：
根据本发明公开的主题，“CD3ζ核酸分子”是指编码CD3ζ多肽的 多核苷酸。在某些实施方式中，编码本发明公开的CAR的细胞内结构 域中包含的CD3ζ多肽(SEQ ID NO:272的氨基酸52～163)的CD3ζ 核酸分子包含具有如下文所提供的SEQ ID NO:273所示序列的核酸。
在某些非限制性实施方式中，CAR的细胞内结构域还包含至少一 个信号传导区。至少一个信号传导区可以包含CD28多肽、4-1BB多肽、 OX40多肽、ICOS多肽、DAP-10多肽、PD-1多肽、CTLA-4多肽、 LAG-3多肽、2B4多肽、BTLA多肽、合成肽(非基于与免疫应答相 关的蛋白质)、或其组合。
在某些实施方式中，信号传导区是共刺激信号传导区。在某些实 施方式中，共刺激区包含至少一个可提供最佳淋巴细胞活化的共刺激 分子。本文使用的“共刺激分子”是指淋巴细胞对抗原的有效应答所 需的除抗原受体或其配体之外的细胞表面分子。至少一个共刺激信号 传导区可包含CD28多肽、4-1BB多肽、OX40多肽、ICOS多肽、DAP-10 多肽、或其组合。共刺激分子可以结合共刺激配体，共刺激配体是在 细胞表面上表达的蛋白质，其在结合其受体时产生共刺激应答，即实 现当抗原结合其CAR分子时所提供的刺激的细胞内应答。共刺激配体 包括但不限于CD80、CD86、CD70、OX40L、4-1BBL、CD48、TNFRSF14 和PD-L1。作为一个实例，4-1BB配体(即4-1BBL)可结合4-1BB(也 称为“CD137”)以提供细胞内信号，其与CAR信号联合诱导CAR+T 细胞的效应细胞功能。U.S.7,446,190中公开了包含细胞内结构域的 CAR，其细胞内结构域包含含有4-1BB、ICOS或DAP-10的共刺激信 号传导区(例如，在US7,446,190中，编码4-1BB的核苷酸序列如SEQ ID NO:15所示，编码ICOS的核苷酸序列如SEQ ID NO:16所示，编 码DAP-10的核苷酸序列如SEQ ID NO:17所示)，其全部内容通过引 入本文以供参考。在某些实施方式中，CAR的细胞内结构域包含共刺 激信号传导区，其包含CD28多肽。在某些实施方式中，CAR的细胞 内结构域包含共刺激信号传导区，其包含两种共刺激分子：CD28和 4-1BB，或CD28和OX40。
4-1BB可以作为肿瘤坏死因子(TNF)配体并具有刺激活性。4-1BB 多肽具有与NCBI参考编号为P41273或NP_001552(SEQ ID NO:274) 的序列或其片段至少约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、 约98％、约99％或100％同源性的氨基酸序列，和/或可任选地包含至 多一个或至多两个或至多三个保守氨基酸取代。在某些实施方式中， 本发明公开的CAR的细胞内结构域中包含的4-1BB多肽具有SEQ ID NO:274的氨基酸214～255的氨基酸序列。SEQ ID NO:274提供如下：
根据本发明公开的主题，“4-1BB核酸分子”是指编码4-1BB多肽 的多核苷酸。在某些实施方式中，编码本发明公开的CAR的细胞内结 构域中所包含的4-1BB多肽(SEQ ID NO:274的氨基酸214～255)的 4-1BB核酸分子包含具有如下文所提供的SEQ ID NO:300所示序列的 核酸。
OX40多肽可具有与NCBI参考编号为P43489或NP_003318(SEQ ID NO:275)的序列或其片段至少约85％、约90％、约95％、约96％、 约97％、约98％、约99％或100％同源的氨基酸序列，和/或可任选地 包含至多一个或至多两个或至多三个保守氨基酸取代。
SEQ ID NO:275提供如下：
根据本发明公开的主题，“OX40核酸分子”是指编码OX40多肽 的多核苷酸。
ICOS多肽具有与NCBI参考编号为NP_036224(SEQ ID NO:276) 的序列或其片段至少约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、 约98％、约99％或100％同源的氨基酸序列，和/或可任选地包含至多 一个或至多两个或至多三个保守氨基酸取代。
SEQ ID NO:276提供如下：
根据本发明公开的主题，“ICOS核酸分子”是指编码ICOS多肽的 多核苷酸。
CTLA-4是由活化的T细胞表达的抑制性受体，其在被相应的配体 (分别为CD80和CD86；B7-1和B7-2)接合时介导活化的T细胞抑 制或无反应性(anergy)。在临床前和临床研究中，通过系统性抗体输 注引起的CTLA-4阻断尽管增强了内源性抗肿瘤应答，但在临床环境 中具有显著的未预见的毒性。
CTLA-4包含细胞外V结构域、跨膜结构域和胞质尾区。已经表 征了编码不同亚型的替代剪接变体。膜结合亚型作为通过二硫键互连 的同源二聚体起作用，而可溶性亚型则作为单体起作用。细胞内结构 域类似于CD28的结构域，因为其没有内在的催化活性并且包含能够 结合PI3K、PP2A和SHP-2的一个YVKM基序和一个能够结合包含 SH3的蛋白质的富含脯氨酸的基序。CTLA-4在抑制T细胞应答中的一 种作用似乎直接通过TCR-近端信号传导蛋白比如CD3和LAT的 SHP-2和PP2A去磷酸化。CTLA-4也可通过与CD28竞争CD80/86结 合而间接影响信号传导。CTLA-4也已示出与PI3K、CD80、AP2M1 和PPP2R5A结合和/或相互作用。
根据本发明公开的主题，CTLA-4多肽可具有与 UniProtKB/Swiss-Prot参考号P16410.3(SEQ ID NO:277)或其片段至 少约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％、约99％或 约100％同源的(本文中的同源性可使用标准软件如BLAST或FASTA 确定)氨基酸序列，和/或可任选地包含至多一个或至多两个或至多三 个保守氨基酸取代。
SEQ ID NO:277提供如下：
根据本发明公开的主题，“CTLA-4核酸分子”是指编码CTLA-4 多肽的多核苷酸。
PD-1是与在内源性巨噬细胞和树突细胞上表达的其相应配体 PD-L1和PD-L2接合时的活化T细胞的负免疫调节剂。PD-1是268个 氨基酸的I型膜蛋白。PD-1具有两种配体PD-L1和PD-L2，它们是B7 家族的成员。该蛋白质的结构包含细胞外IgV结构域，其后是跨膜区和细胞内尾区。细胞内尾区包含位于免疫受体基于酪氨酸的抑制基序 和免疫受体基于酪氨酸的开关基序的两个磷酸化位点，PD-1负调节 TCR信号。SHP-1和SHP-2磷酸酶在配体结合时结合PD-1的细胞质 尾部。PD-L1的上调是肿瘤细胞逃避宿主免疫系统的一种机制。在临 床前和临床试验中，通过拮抗性抗体引起的PD-1阻断诱导通过宿主内 源性免疫系统介导的抗肿瘤反应。
根据本发明公开的主题，PD-1多肽可具有与NCBI参考号 NP_005009.2(SEQ IDNO:278)或其片段至少约85％、约90％、约 95％、约96％、约97％、约98％、约99％或约100％同源的氨基酸序 列，和/或可任选地包含至多一个或至多两个或至多三个保守氨基酸取代。
SEQ ID NO:278提供如下：
根据本发明公开的主题，“PD-1核酸分子”是指编码PD-1多肽的 多核苷酸。
淋巴细胞活化蛋白3(LAG-3)是免疫细胞的负免疫调节剂。LAG-3 属于免疫球蛋白(Ig)超家族，并且含有4个胞外Ig样结构域。LAG3 基因含有8个外显子。序列数据、外显子/内含子组成和染色体定位都 表明LAG3与CD4的密切关系。LAG3也被称为CD223(分化簇223)。
根据本发明公开的主题，LAG-3多肽可具有与 UniProtKB/Swiss-Prot参考号P18627.5(SEQ ID NO:279)或其片段至 少约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％、约99％或 约100％同源的氨基酸序列，和/或可任选地包含至多一个或至多两个 或至多三个保守氨基酸取代。
SEQ ID NO:279提供如下：
根据本发明公开的主题，“LAG-3核酸分子”是指编码LAG-3多 肽的多核苷酸。
自然杀伤细胞受体2B4(2B4)介导NK细胞和T细胞亚群上的非 MHC限制性细胞杀伤。到目前为止，2B4的功能仍在研究中，其中 2B4-S亚型被认为是激活受体，2B4-L亚型被认为是免疫细胞的负免疫 调节剂。2B4在结合其高亲和力配体CD48时变得契合。2B4含有基于 酪氨酸的开关基序，一种允许蛋白质与各种磷酸酶结合的分子开关。 2B4也被称为CD244(分化簇244)。
根据本发明公开的主题，2B4多肽可具有与UniProtKB/Swiss-Prot 参考号Q9BZW8.2(SEQ ID NO:280)或其片段至少约85％、约90％、 约95％、约96％、约97％、约98％、约99％或约100％同源的氨基 酸序列，和/或可任选地包含至多一个或至多两个或至多三个保守氨基 酸取代。
SEQ ID NO:280提供如下：
根据本发明公开的主题，“2B4核酸分子”是指编码2B4多肽的多 核苷酸。
在T细胞激活期间诱导B和T淋巴细胞衰减子(BTLA)表达， 并且BTLA保持在Th1细胞上表达而不在Th2细胞上表达。与PD1和 CTLA4一样，BTLA与B7同源物B7H4相互作用。然而，与PD-1和 CTLA-4不同的是，BTLA通过与肿瘤坏死家族受体(TNF-R)的相互 作用表现T细胞抑制，而不仅仅是细胞表面受体的B7家族。BTLA是 肿瘤坏死因子(受体)超家族成员14(TNFRSF14)的配体，也称为 疱疹病毒侵入介体(HVEM)。BTLA-HVEM复合物负调节T细胞免疫应答。已示出BTLA活化抑制人CD8+癌症特异性T细胞的功能。BTLA 也称为CD272(分化簇272)。
根据本发明公开的主题，BTLA多肽可具有与 UniProtKB/Swiss-Prot参考号Q7Z6A9.3(SEQ ID NO:281)或其片段 至少约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％、约99％ 或约100％同源的氨基酸序列，和/或可任选地包含至多一个或至多两 个或至多三个保守氨基酸取代。
SEQ ID NO:281提供如下：
根据本发明公开的主题，“BTLA核酸分子”是指编码BTLA多肽 的多核苷酸。
在某些实施方式中，CAR包含特异性地结合G-蛋白偶联受体(例 如，GPRC5D)的细胞外抗原结合区、包含CD28多肽的跨膜结构域、 和包含CD3ζ多肽的细胞内结构域以及包含CD28多肽的共刺激信号传 导区，如图1所示。如图1所示，CAR还包含共价结合至细胞外抗原结合结构域的5’端的信号肽或前导序列。在某些实施方式中，信号肽 包含具有SEQ ID NO:282所示序列的氨基酸。
在某些实施方式中，CAR包含特异性地结合G-蛋白偶联受体(例 如，GPRC5D)的细胞外抗原结合区、包含CD8多肽的跨膜结构域、 和包含CD3ζ多肽的细胞内结构域以及包含4-1BB多肽的共刺激信号 传导区，如图6所示。如图6所示，CAR还包含共价结合至细胞外抗原结合结构域的5’端的信号肽或前导序列。在某些实施方式中，信号 肽包含具有SEQ IDNO:所示序列的氨基酸282。
在一些实施方式中，本发明公开的主题的CAR可进一步包含用于 在人细胞中表达核酸序列的诱导型启动子。用于表达CAR基因的启动 子是组成型启动子，例如泛素C(UbiC)启动子。
本发明公开的主题还提供分离的核酸分子，其编码本文所述的靶 向G-蛋白偶联受体(例如，GPRC5D)的CAR或其功能部分。在某些 实施方式中，分离的核酸分子编码本发明公开的靶向G-蛋白偶联受体 (例如，GPRC5D)的CAR，所述CAR包含特异性地结合人GPRC5D的scFv、包含CD28多肽的跨膜结构域、和包含CD3ξ多肽的细胞内结 构域以及包含CD28多肽的共刺激信号传导区。在某些实施方式中， 该scFv是人scFv。在某些实施方式中，该scFv是鼠scFv。在一个特 定的非限制性实例中，分离的核酸分子包含具有下文所提供的SEQ IDNO:397所示序列的核酸：
在一个特定的非限制性实例中，分离的核酸分子包含具有下文所 提供的SEQ IDNO:398所示序列的核酸：
在一个特定的非限制性实例中，分离的核酸分子包含具有下文所 提供的SEQ IDNO:399所示序列的核酸：
在一个特定的非限制性实例中，分离的核酸分子包含具有下文所 提供的SEQ IDNO:400所示序列的核酸：
在一个特定的非限制性实例中，分离的核酸分子包含具有下文所 提供的SEQ IDNO:401所示序列的核酸：
在一个特定的非限制性实例中，分离的核酸分子包含具有下文所 提供的SEQ IDNO:402所示序列的核酸:
在一个特定的非限制性实例中，分离的核酸分子包含具有下文所 提供的SEQ IDNO:403所示序列的核酸:
在一个特定的非限制性实例中，分离的核酸分子包含具有下文所 提供的SEQ IDNO:406所示序列的核酸:
在一个特定的非限制性实例中，分离的核酸分子包含具有下文所 提供的SEQ IDNO:407所示序列的核酸:
在一个特定的非限制性实例中，分离的核酸分子包含具有下文所 提供的SEQ IDNO:408所示序列的核酸:
具有SEQ ID NO:406的核苷酸序列的分离的核酸分子编码靶向 GPRC5D的CAR(命名为GRPC5D 28z CAR1)，其包含人scFv(该scFv 包含：包含具有SEQ ID NO:53所示序列的氨基酸的重链可变区、包 含具有SEQ ID NO:54所示序列的氨基酸的轻链可变区、以及位于重 链可变区和轻链可变区之间的具有SEQ ID NO:98的氨基酸序列的接 头)、包含CD28多肽的跨膜结构域、和包含含有SEQ ID NO:272的氨 基酸52～163的CD3ξ多肽的细胞内结构域、以及包含CD28多肽的共 刺激信号传导区，其中跨膜结构域和共刺激信号传导区中包含的CD28 区包含SEQ ID NO:270的氨基酸114～220。
具有SEQ ID NO:397的核苷酸序列的分离的核酸分子编码靶向 GPRC5D的CAR(命名为GRPC5D 28z CAR2)，其包含人scFv(该scFv 包含：包含具有SEQ ID NO:57所示序列的氨基酸的重链可变区、包 含具有SEQ ID NO:58所示序列的氨基酸的轻链可变区、以及位于重链 可变区和轻链可变区之间的具有SEQ ID NO:98的氨基酸序列的接 头)、包含CD28多肽的跨膜结构域、和包含含有SEQ ID NO:272的氨 基酸52～163的CD3ξ多肽的细胞内结构域、以及包含CD28多肽的共 刺激信号传导区，其中跨膜结构域和共刺激信号传导区中包含的CD28 区包含SEQ ID NO:270的氨基酸114～220。
具有SEQ ID NO:398的核苷酸序列的分离的核酸分子编码靶向 GPRC5D的CAR(命名为GRPC5D 28z CAR5)，其包含人scFv(该scFv 包含：包含具有SEQ ID NO:61所示序列的氨基酸的重链可变区、包 含具有SEQ ID NO:62所示序列的氨基酸的轻链可变区、以及位于重 链可变区和轻链可变区之间的具有SEQ ID NO:98的氨基酸序列的接 头)、包含CD28多肽的跨膜结构域、和包含含有SEQ ID NO:272的氨 基酸52～163的CD3ξ多肽的细胞内结构域、以及包含CD28多肽的共 刺激信号传导区，其中跨膜结构域和共刺激信号传导区中包含的CD28 区包含SEQ ID NO:270的氨基酸114～220。
具有SEQ ID NO:399的核苷酸序列的分离的核酸分子编码靶向 GPRC5D的CAR(命名为GRPC5D 28z CAR8)，其包含人scFv(该scFv 包含：包含具有SEQ ID NO:65所示序列的氨基酸的重链可变区、包 含具有SEQ ID NO:66所示序列的氨基酸的轻链可变区、以及位于重 链可变区和轻链可变区之间的具有SEQ ID NO:98的氨基酸序列的接 头)、包含CD28多肽的跨膜结构域、和包含含有SEQ ID NO:272的氨 基酸52～163的CD3ξ多肽的细胞内结构域、以及包含CD28多肽的共 刺激信号传导区，其中跨膜结构域和共刺激信号传导区中包含的CD28 区包含SEQ ID NO:270的氨基酸114～220。
具有SEQ ID NO:400的核苷酸序列的分离的核酸分子编码靶向 GPRC5D的CAR(命名为GRPC5D 28z CAR18)，其包含人scFv(该 scFv包含：包含具有SEQ ID NO:69所示序列的氨基酸的重链可变区、 包含具有SEQ ID NO:70所示序列的氨基酸的轻链可变区、以及位于重链可变区和轻链可变区之间的具有SEQ ID NO:98的氨基酸序列的 接头)、包含CD28多肽的跨膜结构域、和包含含有SEQ ID NO:272 的氨基酸52～163的CD3ξ多肽的细胞内结构域、以及包含CD28多肽 的共刺激信号传导区，其中跨膜结构域和共刺激信号传导区中包含的CD28区包含SEQ ID NO:270的氨基酸114～220。
具有SEQ ID NO:401的核苷酸序列的分离的核酸分子编码靶向 GPRC5D的CAR(命名为GRPC5D BBz CAR1)，其包含人scFv(该 scFv包含：包含具有SEQ ID NO:53所示序列的氨基酸的重链可变区、 包含具有SEQ ID NO:54所示序列的氨基酸的轻链可变区、以及位于重链可变区和轻链可变区之间的具有SEQ ID NO:98的氨基酸序列的 接头)、包含具有SEQID NO:404的137～207的CD8多肽的跨膜结构 域、和包含含有SEQ ID NO:272的氨基酸52～163的CD3ξ多肽的细胞 内结构域、以及包含具有SEQ ID NO:274的氨基酸214-255的4-1BB多肽的共刺激信号传导区。SEQ ID NO:401的核苷酸序列6-856编码 人scFv。SEQ ID NO:401的核苷酸序列864-1076编码跨膜结构域中包 含的CD8多肽。SEQ ID NO:401的核苷酸序列1077-1202编码细胞内 结构域中包含的4-1BB多肽。SEQ ID NO:401的核苷酸序列1203-1541 编码细胞内结构域中包含的CD3ξ多肽。SEQ ID NO:401的其他部分 在表34中示出。
表34
具有SEQ ID NO:407的核苷酸序列的分离的核酸分子编码靶向 GPRC5D的CAR(命名为GRPC5D BBz CAR2)，其包含人scFv(该 scFv包含：包含具有SEQ ID NO:57所示序列的氨基酸的重链可变区、 包含具有SEQ ID NO:58所示序列的氨基酸的轻链可变区、以及位于重链可变区和轻链可变区之间的具有SEQ ID NO:98的氨基酸序列的 接头)、包含具有SEQID NO:404的137～207的CD8多肽的跨膜结构 域、和包含含有SEQ ID NO:272的氨基酸52～163的CD3ξ多肽的细胞 内结构域、以及包含具有SEQ ID NO:274的氨基酸214-255的4-1BB多肽的共刺激信号传导区。SEQ ID NO:402的核苷酸序列5-855编码 人scFv。SEQ ID NO:407的核苷酸序列15-812编码人scFv。SEQ ID NO: 407的核苷酸序列852-1064编码跨膜结构域中包含的CD8多肽。SEQ ID NO:407的核苷酸序列1065-1190编码细胞内结构域中包含的4-1BB 多肽。SEQ ID NO:407的核苷酸序列1191-1529编码细胞内结构域中 包含的CD3ξ多肽。SEQ ID NO:407的其他部分在表41中示出。
表41
具有SEQ ID NO:402的核苷酸序列的分离的核酸分子编码靶向 GPRC5D的CAR(命名为GRPC5D BBz CAR5)，其包含人scFv(该 scFv包含：包含具有SEQ ID NO:61所示序列的氨基酸的重链可变区、 包含具有SEQ ID NO:62所示序列的氨基酸的轻链可变区、以及位于重链可变区和轻链可变区之间的具有SEQ ID NO:98的氨基酸序列的 接头)、包含具有SEQID NO:404的137～207的CD8多肽的跨膜结构 域、和包含含有SEQ ID NO:272的氨基酸52～163的CD3ξ多肽的细胞 内结构域、以及包含具有SEQ ID NO:274的氨基酸214-255的4-1BB多肽的共刺激信号传导区。SEQ ID NO:402的核苷酸序列5-855编码 人scFv。SEQ ID NO:402的核苷酸序列863-1075编码跨膜结构域中包 含的CD8多肽。SEQ ID NO:402的核苷酸序列1076-1201编码细胞内 结构域中包含的4-1BB多肽。SEQ ID NO:402的核苷酸序列1202-1540 编码细胞内结构域中包含的CD3ξ多肽。SEQ ID NO:402的其他部分 在表35中示出。
表35
具有SEQ ID NO:408的核苷酸序列的分离的核酸分子编码靶向 GPRC5D的CAR(命名为GRPC5D BBz CAR8)，其包含人scFv(该 scFv包含：包含具有SEQ ID NO:65所示序列的氨基酸的重链可变区、 包含具有SEQ ID NO:66所示序列的氨基酸的轻链可变区、以及位于重链可变区和轻链可变区之间的具有SEQ ID NO:98的氨基酸序列的 接头)、包含具有SEQID NO:404的137～207的CD8多肽的跨膜结构 域、和包含含有SEQ ID NO:272的氨基酸52～163的CD3ξ多肽的细胞 内结构域、以及包含具有SEQ ID NO:274的氨基酸214-255的4-1BB多肽的共刺激信号传导区。SEQ ID NO:408的核苷酸序列15-824编码 人scFv。SEQ ID NO:408的核苷酸序列864-1076编码跨膜结构域中包 含的CD8多肽。SEQ ID NO:408的核苷酸序列1077-1202编码细胞内 结构域中包含的4-1BB多肽。SEQ ID NO:408的核苷酸序列1203-1541 编码细胞内结构域中包含的CD3ξ多肽。SEQ ID NO:408的其他部分 在表42中示出。
表42
具有SEQ ID NO:403的核苷酸序列的分离的核酸分子编码靶向 GPRC5D的CAR(命名为GRPC5D BBz CAR18)，其包含人scFv(该 scFv包含：包含具有SEQ ID NO:69所示序列的氨基酸的重链可变区、 包含具有SEQ ID NO:70所示序列的氨基酸的轻链可变区、以及位于重链可变区和轻链可变区之间的具有SEQ ID NO:98的氨基酸序列的 接头)、包含具有SEQID NO:404的137～207的CD8多肽的跨膜结构 域、和包含含有SEQ ID NO:272的氨基酸52～163的CD3ξ多肽的细胞 内结构域、以及包含具有SEQ ID NO:274的氨基酸214-255的4-1BB多肽的共刺激信号传导区。SEQ ID NO:403的核苷酸序列6-856编码 人scFv。SEQ ID NO:403的核苷酸序列864-1076编码跨膜结构域中包 含的CD8多肽。SEQ ID NO:403的核苷酸序列1077-1202编码细胞内 结构域中包含的4-1BB多肽。SEQ ID NO:403的核苷酸序列1203-1541 编码细胞内结构域中包含的CD3ξ多肽。SEQ ID NO:403的其他部分 在表36中示出。
表36
在某些实施方式中，分离的核酸分子编码本发明公开的靶向G-蛋 白偶联受体(例如，GPRC5D)的CAR的功能部分。本文使用的术语 “功能部分”是指本发明公开的靶向G-蛋白偶联受体(例如，GPRC5D) 的CAR的任何部分(portion)、局部(part)或片段，该部分(portion)、 局部(part)或片段保留靶向G-蛋白偶联受体(例如，GPRC5D)的 CAR(亲本CAR)的生物学活性。例如，功能部分包括本发明公开的 靶向G-蛋白偶联受体(例如，GPRC5D)的CAR的部分(portion)、 局部(part)或片段，其保留识别靶细胞的能力，以治疗疾病例如多发 性骨髓瘤，达到与亲本CAR相似、相同或甚至更高的程度。在某些实 施方式中，编码本发明公开的靶向G-蛋白偶联受体(例如，GPRC5D) 的CAR的功能部分的分离的核酸分子可以编码包含亲本CAR的例如 约10％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、和95％、或更多的蛋白质。
III.免疫应答细胞
本发明公开的主题提供了表达包含细胞外抗原结合结构域、跨膜 结构域和细胞内结构域的CAR的免疫应答细胞，如上所述，其中细胞 外抗原结合结构域特异性地结合G-蛋白偶联受体(例如，GPRC5D)。 免疫应答细胞可以用本发明公开的CAR进行转导使得该细胞表达 CAR。本发明公开的主题还提供使用此类细胞治疗肿瘤例如多发性骨 髓瘤(MM)的方法。本发明公开的主题的免疫应答细胞可以是淋巴谱 系的细胞。淋巴谱系的细胞包含B、T和天然杀伤(NK)细胞，提供 抗体的产生、细胞免疫系统的调节、血液中外来物质的检测、对宿主 外源的细胞的检测等。淋巴谱系的免疫应答细胞的非限制性实例包括T 细胞、自然杀伤(NK)细胞、细胞毒性T淋巴细胞(CTL)、调节性T 细胞、胚胎干细胞和多能干细胞(例如，可分化成淋巴样细胞的多能 干细胞)。T细胞可以是在胸腺中成熟的淋巴细胞，并且主要负责细胞 介导的免疫。T细胞参与获得性免疫系统。本发明公开主题的T细胞 可以是任何类型的T细胞，包括但不限于T辅助细胞、细胞毒性T细 胞、记忆T细胞(包括中心记忆T细胞、干细胞样记忆T细胞(或干 样记忆T细胞)和两种类型的效应记忆T细胞(例如，TEM细胞和TEMRA细胞)、调节性T细胞(也称为抑制性T细胞)、自然杀伤T细胞、粘 膜相关恒定T细胞、和γδT细胞。在某些实施方式中，表达CAR的T 细胞表达Foxp3以实现和维持T调节表型。自然杀伤(NK)细胞可以 是作为细胞介导的免疫的一部分并且在先天免疫应答期间起作用的淋 巴细胞。NK细胞不需要预先活化以便对靶细胞发挥其细胞毒性作用。 细胞毒性T细胞(CTL或杀伤T细胞)是能够诱导受感染的体细胞或 肿瘤细胞死亡的T淋巴细胞的子集。
本发明公开主题的免疫应答细胞可以表达特异性地结合G-蛋白偶 联受体(例如，GPRC5D)的细胞外抗原结合结构域(例如scFV、任 选交联的Fab或F(ab)2)，用于治疗多发性骨髓瘤。此类免疫应答细胞 可以施用于有此需要的受试者(例如人受试者)，用于治疗多发性骨髓 瘤。在某些实施方式中，免疫应答细胞是T细胞。T细胞可以是CD4+ T细胞或CD8+T细胞。在某些实施方式中，T细胞是CD4+T细胞。 在某些实施方式中，T细胞是CD8+T细胞。
本发明公开的免疫应答细胞可以进一步用至少一种共刺激性配体 进行转导，使得免疫应答细胞共表达或被诱导以共表达靶向G-蛋白偶 联受体(例如，GPRC5D)的CAR和至少一种共刺激性配体。靶向G- 蛋白偶联受体(例如，GPRC5D)的CAR和至少一种共刺激配体之间 的相互作用提供了对于免疫应答细胞(例如，T细胞)的完全激活而言 重要的非抗原特异性信号。共刺激配体包括但不限于肿瘤坏死因子 (TNF)超家族成员和免疫球蛋白(Ig)超家族配体。TNF是参与全身 炎症并刺激急性期反应的细胞因子。它的主要作用是调节免疫细胞。 TNF超家族的成员具有许多共同的特征。大多数TNF超家族成员被合 成作为包含短胞质区段和相对长的细胞外区的II型跨膜蛋白(细胞外 C末端)。TNF超家族成员包括但不限于神经生长因子(NGF)、CD40L (CD40L)/CD154、CD137L/4-1BBL、TNF-α、CD134L/OX40L/CD252、 CD27L/CD70、Fas配体(FasL)、CD30L/CD153、肿瘤坏死因子β(TNFβ) /淋巴毒素-α(LTα)、淋巴毒素-β(LTβ)、CD257/B细胞激活因子(BAFF) /Blys/THANK/Tall-1、糖皮质激素诱导的TNF受体配体(GITRL)和 TNF相关性细胞凋亡诱导配体(TRAIL)、LIGHT(TNFSF14)。免疫 球蛋白(Ig)超家族是参与细胞识别、结合或粘附过程的大量细胞表面 的可溶性蛋白质。这些蛋白质与免疫球蛋白共享结构特征——它们具 有免疫球蛋白结构域(折叠)。免疫球蛋白超家族配体包括但不限于 CD80和CD86、CD28的配体、PD-1的配体PD-L1/(B7-H1)。在一些 实施方式中，至少一种共刺激配体选自4-1BBL、CD80、CD86、CD70、 OX40L、CD48、TNFRSF14、PD-L1，及其组合。在某些实施方式中， 免疫应答细胞用4-1BBL作为一个共刺激配体进行转导。在某些实施方 式中，免疫应答细胞用4-1BBL和CD80作为两个共刺激配体进行转导。 用至少一种共刺激配体转导的CAR描述于美国专利第8,389,282号， 其全部内容并入本文以供参考。
此外，本发明公开的免疫应答细胞还可以用至少一种细胞因子进 行转导，使得免疫应答细胞分泌至少一种细胞因子以及表达靶向G-蛋 白偶联受体(例如，GPRC5D)的CAR。在某些实施方式中，至少一 种细胞因子选自IL-2、IL-3、IL-6、IL-7、IL-11、IL-12、IL-15、IL-17 和IL-21。在某些实施方式中，细胞因子是IL-12。
G-蛋白偶联受体(例如，GPRC5D)-特异性的或靶向的人淋巴细 胞可以用于外周供体淋巴细胞，例如在以下公开的：Sadelain,M.等， 2003Nat Rev Cancer 3：35～45(公开了经基因修饰以表达CAR的外周 供体淋巴细胞)；Morgan,R.A.等2006Science 314：126～129(公开了 经基因修饰以表达包含α和β异源二聚体的全长肿瘤抗原识别T细胞 受体复合物的外周供体淋巴细胞)；Panelli,M.C.等2000J Immunol 164：495～504；Panelli,M.C.等2000J Immunol 164：4382～4392(公开 了肿瘤活检中源自肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)的淋巴细胞培养物)；和 Dupont,J.等2005Cancer Res 65：5417～5427；Papanicolaou,G.A.等2003 Blood 102：2498～2505(公开了使用人工抗原递呈细胞(AAPC)或脉 冲树突状细胞选择性体外扩增的抗原特异性外周血白细胞)。免疫应答 细胞(例如T细胞)可以是自体的、非自体的(例如同种异体的)、或 在体外衍生自工程化的祖细胞或干细胞。
在某些实施方式中，本发明公开的免疫应答细胞(例如T细胞) 表达约1至约4、约2至约4、约3至约4、约1至约2、约1至约3、 或约2至约3个载体拷贝数/细胞的本发明公开的靶向G-蛋白偶联受体 (例如，GPRC5D)的CAR。
未纯化的CTL的来源可以是任何本领域已知的，例如骨髓、胎儿、 新生儿或成人或其他造血细胞来源，例如胎肝、外周血或脐带血。可 以采用各种技术来分离细胞。例如，阴性选择方法可以初步除去非 CTL。单克隆抗体特别用于鉴定与特定细胞谱系和/或分化阶段相关的 标记用于阳性和阴性选择。
大部分终末分化的细胞可以通过相对粗糙的分离在初始除去。例 如，磁珠分离可以用于初始除去大量不相关的细胞。优选地，在细胞 分离之前，至少约80％、通常至少70％的总造血细胞将被除去。
分离步骤包括但不限于密度梯度离心；重调(resetting)；偶联至 改变细胞密度的颗粒；用抗体包被的磁珠进行磁性分离；亲和层析； 与mAb结合或联合使用的细胞毒试剂，包括但不限于补体和细胞毒素； 和用附着于例如板、芯片的固体基质的抗体淘选、淘洗或任何其他方 便的技术。
用于分离和分析的技术包括但不限于流式细胞术，其可具有不同 程度的复杂性，例如多个颜色通道、低角度和钝角光散射检测通道、 阻抗通道。
通过使用与死细胞相关的染料比如碘化丙啶(PI)，可以相对于死 细胞来选择细胞。优选地，将细胞收集在包含2％胎牛血清(FCS)或 0.2％牛血清白蛋白(BSA)或任何其它合适的，优选无菌的、等渗培 养基的培养基中。
IV.载体
免疫应答细胞(例如，T细胞、CTL细胞、NK细胞)的基因修饰 可以通过用重组DNA或RNA构建体转导基本上同源的细胞组合物来 实现。载体可以是逆转录病毒载体(例如，γ逆转录病毒)，其用于将 DNA或RNA构建体导入宿主细胞基因组。例如，编码G-蛋白偶联受 体(例如，GPRC5D)特异性的CAR的多核苷酸可以克隆到逆转录病 毒载体中，并且可以从其内源启动子、逆转录病毒长末端重复序列或 从替代的内部启动子驱动表达。
也可使用非病毒载体或RNA。可以使用随机染色体整合或靶向整 合(例如使用核酸酶、转录激活子样效应物核酸酶(TALEN)、锌指核 酸酶(ZFN)和/或规律成簇间隔短回文重复(CRISPR)或转基因表达 (例如使用天然或化学修饰的RNA)。
对于细胞的初始基因修饰以提供表达G-蛋白偶联受体(例如， GPRC5D)特异性的CAR的细胞，通常使用逆转录病毒载体进行转导， 然而可以使用任何其它合适的病毒载体或非病毒递送系统。对于细胞 的后续基因修饰以提供包含含有至少两种共刺激配体的抗原递呈复合 物的细胞，逆转录病毒基因转移(转导)同样证明是有效的。逆转录 病毒载体和合适的组装线的联合也是合适的，其中衣壳蛋白对于感染 人细胞是有功能的。已知各种产生双嗜性病毒的细胞系，包括但不限 于PA12(Miller等人(1985)Mol.Cell.Biol.5：431～437)；PA317(Miller 等人(1986)Mol.Cell.Biol.6：2895～2902)；和CRIP(Danos等人(1988) Proc.Natl.Acad.Sci.USA 85：6460～6464)。非嗜性颗粒也是合适的， 例如，用VSVG、RD114或GALV包衣假型包装的颗粒和本领域已知 的任何其它颗粒。
可能的转导方法还包括细胞与生产细胞的直接共培养，例如通过 Bregni等人(1992)Blood 80：1418～1422的方法，或者用单独的病毒 上清或具有或没有合适的生长因子和聚阳离子的浓缩载体储备液培 养，例如通过Xu等人(1994)Exp.Hemat.22：223～230；和Hughes 等人(1992)J.Clin.Invest.89：1817的方法。
转导病毒载体可用于在免疫应答细胞中表达共刺激配体(例如 4-1BBL和IL-12)。优选地，选择的载体表现出高的感染效率和稳定的 整合和表达(参见例如Cayouette等人，Human Gene Therapy 8：423～430，1997；Kido等人，Current Eye Research 15：833～844，1996； Bloomer等人，Journal of Virology 71：6641～6649，1997；Naldini等人， Science272：263～267，1996；和Miyoshi等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 94：10319，1997)。可以使用的其他病毒载体包括例如腺病毒、慢病 毒和腺相关病毒载体、牛痘病毒、牛乳头瘤病毒或疱疹病毒，比如 Epstein-Barr病毒(也参见例如，Miller，Human Gene Therapy 15-14，1990；Friedman，Science 244：1275～1281，1989；Eglitis等人， BioTechniques 6：608～614，1988；Tolstoshev等人，Current Opinion in Biotechnology 1：55～61，1990；Sharp，The Lancet 337：1277～1278,1991； Cornetta等人，Nucleic Acid Research andMolecular Biology 36： 311～322，1987；Anderson，Science 226：401～409，1984；Moen，Blood Cells 17：407～416，1991；Miller等，Biotechnology 7：980～990，1989； Le GalLa Salle等，Science 259：988～990，1993；和Johnson，Chest 107： 77S～83S，1995的载体)。逆转录病毒载体已充分开发，并已用于临床 环境中(Rosenberg等人，N.Engl.J.Med323：370，1990；Anderson 等人，美国专利号5,399,346)。
在某些非限制性实施方式中，表达本发明公开的G-蛋白偶联受体 (例如，GPRC5D)靶向的CAR的载体是逆转录病毒载体，例如， 293galv9逆转录病毒载体。
非病毒方法也可以用于在细胞中表达蛋白质。例如，可以通过在 脂质转染(Feigner等人，Proc.Nat’l.Acad.Sci.USA 84：7413，1987； Ono等人，NeuroscienceLetters 17：259，1990；Brigham等人，Am.J. Med.Sci.298：278，1989；Staubinger等人，Methods in Enzymology 101： 512，1983)、去唾液酸血清类粘蛋白-多聚赖氨酸缀合物(Wu等人， Journal of Biological Chemistry 263：14621，1988；Wu等人，Journal ofBiological Chemistry 264：16985，1989)的存在下施用核酸、或通过在 外科条件下的微注射(Wolff等人，Science 247：1465，1990)将核酸 分子引入细胞中。用于基因转移的其它非病毒方法包括体外使用磷酸 钙、DEAE葡聚糖、电穿孔和原生质体融合的转染。脂质体对于将DNA 递送到细胞中也可以是潜在有益的。正常基因移植到受试者的受影响 组织中也可以通过将正常核酸离体转移到可培养细胞类型(例如，自 体的或异源的原代细胞或其子代)中来实现，之后将细胞(或其子代) 注射到靶组织中或全身注射。重组受体也可以使用转座酶或靶向核酸 酶(例如锌指核酸酶、(兆碱基)大范围核酸酶或TALE核酸酶)获得 或得到。瞬时表达可以通过RNA电穿孔获得。
用于多核苷酸治疗方法的cDNA表达可以由任何合适的启动子(例 如，人巨细胞病毒(CMV)、猿猴病毒40(SV40)或金属硫蛋白启动 子)引导，并且受任何合适的哺乳动物调节元件或内含子(例如，延 伸因子1α增强子/启动子/内含子结构)调节。例如，如果需要，可以使用已知优先引导特定细胞类型中的基因表达的增强子来引导核酸的 表达。所使用的增强子可以包括但不限于特征为组织或细胞特异性增 强子的那些增强子。或者，如果使用基因组克隆作为治疗性构建体， 则调节可以通过同源调节序列介导，或如果需要，通过来自包括上述 任何启动子或调节元件的异源来源的调节序列介导。
所得细胞可以在类似于未修饰细胞的条件下生长，由此可以扩增 修饰的细胞并用于多种目的。
V.多肽及类似物和多核苷酸
本发明公开的主题中还包括特异性地结合G-蛋白偶联受体(例如， GPRC5D)的细胞外抗原结合结构域(例如scFv、Fab或(Fab)2)、CD3ζ、 CD8、CD28等多肽或其片段、以及编码其的多核苷酸，它们以当在免 疫应答细胞中表达时增强其抗肿瘤活性的方式被修饰。本发明公开的 主题提供了通过产生序列中的改变来优化氨基酸序列或核酸序列的方 法。此类改变包括某些突变、缺失、插入或翻译后修饰。本发明公开 的主题还包括本发明公开主题的任何天然存在的多肽的类似物。类似 物可以通过氨基酸序列差异、通过翻译后修饰或通过两者而不同于本 发明公开主题的天然存在的多肽。本发明公开主题的类似物通常可以 表现出与本发明公开主题的天然存在的氨基酸序列的全部或部分至少 约85％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约 96％、约97％、约98％、约99％或更高同一性。序列比较的长度为至 少5、10、15、20、25、50、75、100或更多个氨基酸残基。同样，在确定同一性程度的示例性方法中，可以使用BLAST程序，e-3和e-100之间的概率得分表示密切相关的序列。修饰包括多肽的体内和体外化 学衍生化，例如乙酰化、羧化、磷酸化或糖基化；此类修饰可以在多 肽合成或加工期间或在用分离的修饰酶处理之后发生。类似物还可以 通过一级序列的改变而不同于本发明公开主题的天然存在的多肽。这 些改变包括天然和诱导的遗传变异体(例如，产生自通过照射或暴露 于甲磺酸乙酯的随机诱变或通过如Sambrook，Fritsch和Maniatis， Molecular Cloning:A Laboratory Manual(第二版)CSHPress，1989， 或同上Ausubel等人所述的位点特异性诱变)。还包括环化肽、分子和 类似物，其包含除L-氨基酸外的残基，例如D-氨基酸或非天然存在的 或合成的氨基酸，例如β或γ氨基酸。
除了全长多肽之外，本发明公开的主题还提供本发明公开的主题 的多肽或肽结构域中任一者的片段。片段可以是至少5、10、13或15 个氨基酸。在某些实施方案中，片段是至少20个连续氨基酸、至少30 个连续氨基酸或至少50个连续氨基酸。在某些实施方案中，片段是至 少60至80、100、200、300或更多个连续氨基酸。本发明公开的主题 的片段可以通过本领域普通技术人员已知的方法产生，或者可以由正 常的蛋白质加工产生(例如从新生多肽中除去生物活性不需要的氨基 酸或通过备选mRNA剪接或备选蛋白质加工事件除去氨基酸)。
非蛋白质类似物可具有设计为模拟本发明蛋白质的功能活性的化 学结构。此类类似物根据本发明公开的主题的方法施用。此类类似物 可能超过原始多肽的生理活性。模拟设计的方法是本领域公知的，并 且可以根据这样的方法通过修饰化学结构来进行类似物的合成，使得 当在免疫应答细胞中表达时，所得的类似物增加原始多肽的抗肿瘤活 性。这些化学修饰包括但不限于取代替代的R基团和改变参考多肽的 特定碳原子的饱和度。蛋白质类似物可以对体内降解相对耐受，导致 施用时更长的治疗效果。用于测量功能活性的试验包括但不限于下文 实施例中描述的那些。
根据本发明公开的主题，编码特异性地结合G-蛋白偶联受体(例 如，GPRC5D)的细胞外抗原结合结构域(例如scFV、Fab或(Fab)2)、 CD3ζ、CD8、CD28)的多核苷酸可以通过密码子优化进行修饰。密码 子优化可以改变天然存在的和重组的基因序列，以在任何给定的表达 系统中实现最高可能水平的生产力。涉及蛋白质表达的不同阶段的因 子包括密码子适应性、mRNA结构以及转录和翻译中的各种顺式元件。 本领域技术人员已知的任何合适的密码子优化方法或技术可用于修饰 本发明公开主题的多核苷酸，包括但不限于OPTIMUMGENETM、Encor 优化和Blue Heron。
VI.施用
可以全身或直接向受试者提供本发明公开的主题的G-蛋白偶联受 体(例如，GPRC5D)特异性的CAR和表达它的免疫应答细胞，用于 治疗或预防瘤形成。在某些实施方案中，将G-蛋白偶联受体(例如， GPRC5D)特异性的CAR和表达它的免疫应答细胞直接注射到目标器 官(例如，受瘤形成影响的器官)中。或者或另外，将G-蛋白偶联受 体(例如，GPRC5D)特异性的CAR和表达它的免疫应答细胞通过例 如施用到循环系统中(例如，肿瘤血管系统)间接提供给目标器官。 可以在施用细胞和组合物之前、期间或之后提供扩增和分化剂，以增 加体外或体内T细胞的产生。
本发明公开主题的G-蛋白偶联受体(例如，GPRC5D)特异性的 CAR和表达它的免疫应答细胞可以以任何生理学可接受的手段施用， 通常是血管内施用，尽管它们也可以被引入骨或其他方便的位点，其 中细胞可以找到合适的再生和分化位点(例如，胸腺)。通常，可以施 用至少1×105个细胞，最终达到1×1010个或更多。包含表达G-蛋白 偶联受体(例如，GPRC5D)特异性的CAR的免疫应答细胞的细胞群 体可以包含纯化的细胞群体。本领域技术人员可以使用各种公知的方 法，比如荧光激活细胞分选(FACS)，容易地确定细胞群体中免疫应 答细胞的百分比。包含经遗传修饰的表达G-蛋白偶联受体(例如， GPRC5D)特异性的CAR的免疫应答细胞的细胞群体中的纯度范围可 以是约50％至约55％、约55％至约60％、约65％至约70％、约70％ 至约75％、约75％至约80％、约80％至约85％、约85％至约90％、约90％至约95％或约95至约100％。本领域技术人员可以容易地调整 剂量(例如，纯度的降低可能需要增加剂量)。免疫应答细胞可通过注 射、导管等引入。如果需要，还可以包含因子，包括但不限于白细胞 介素，例如IL-2、IL-3、IL 6、IL-11、IL-7、IL-12、IL-15、IL-21以及 其它白细胞介素，集落刺激因子，比如G-、M-和GM-CSF，干扰素， 例如γ-干扰素。
本发明公开主题的组合物包含药物组合物，其包含表达G-蛋白偶 联受体(例如，GPRC5D)特异性的CAR的免疫应答细胞和药学上可 接受的载体。施用可以是自体的或非自体的。例如，表达G-蛋白偶联 受体(例如，GPRC5D)特异性的CAR的免疫应答细胞和包含它的组 合物可以从一个受试者获得，并施用于相同受试者或不同的相容受试 者。可以通过局部注射，包括导管给药、全身注射、局部注射、静脉 内注射或胃肠外给药来施用本发明公开主题的外周血来源的T细胞或 其子代(例如，体内、离体或体外衍生的)。当施用本发明公开主题的 药物组合物(例如包含表达G-蛋白偶联受体(例如，GPRC5D)特异 性的CAR的免疫应答细胞的药物组合物)时，可以将其配制成单位剂 量可注射形式(溶液、悬浊液、乳浊液)。
VII.制剂
本发明公开主题的表达普遍G-蛋白偶联受体(例如，GPRC5D) 特异性的CAR的免疫应答细胞和包含其的组合物可以方便地作为无菌 液体制剂提供，例如等渗水溶液、悬浊液、乳浊液、分散液或粘性组 合物，其可以缓冲至选定的pH。液体制剂通常比凝胶、其它粘性组合 物和固体组合物更容易制备。此外，液体组合物更方便施用，特别是 通过注射。另一方面，粘性组合物可以在适当的粘度范围内配制，以 提供与特定组织的更长的接触时间。液体或粘性组合物可以包含载体， 其可以是包含例如水、盐水、磷酸盐缓冲盐水、多元醇(例如甘油、 丙二醇、液体聚乙二醇等)和合适的其混合物的溶剂或分散介质。
无菌可注射溶液可以通过将包含表达本发明公开主题的普遍G-蛋 白偶联受体(例如，GPRC5D)特异性的CAR的免疫应答细胞的组合 物掺入所需量的合适溶剂与如果需要的各种量的其它成分来制备。此 类组合物可以与合适的载体、稀释剂或赋形剂如无菌水、生理盐水、 葡萄糖、右旋糖等混合。组合物也可以是冻干的。根据给药途径和所 需制剂，组合物可以包含辅助物质，比如润湿剂、分散剂或乳化剂(例 如甲基纤维素)、pH缓冲剂、凝胶或增粘添加剂、防腐剂、调味剂、 着色剂等。可以参考标准教科书，比如引入本文以供参考的 “REMINGTON’S PHARMACEUTICAL SCIENCE”，第17版，1985， 来制备合适的制剂，而无需过多的实验。
可以加入增强组合物的稳定性和无菌性的各种添加剂，包括抗微 生物防腐剂、抗氧化剂、螯合剂和缓冲剂。可以通过各种抗细菌剂和 抗真菌剂，例如对羟基苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚、山梨酸等来确保防 止微生物的作用。可注射药物形式的延长吸收可以通过使用延迟吸收 的试剂，例如明矾单硬脂酸盐和明胶来实现。然而，根据本发明，使 用的任何载体、稀释剂或添加剂必须与表达本发明公开主题的普遍G- 蛋白偶联受体(例如，GPRC5D)特异性的CAR的免疫应答细胞相容。
组合物可以是等渗的，即它们可以具有与血液和泪液相同的渗透 压。本发明公开主题的组合物的所需等渗性可使用氯化钠或其它药学 上可接受的试剂比如右旋糖、硼酸、酒石酸钠、丙二醇或其它无机或 有机溶质来完成。特别优选氯化钠用于含有钠离子的缓冲液。
如果需要，组合物的粘度可以使用药学上可接受的增稠剂保持在 选定的水平。可以使用甲基纤维素，因为它容易购得且经济可行并且 易于操作。其它合适的增稠剂包括例如黄原胶、羧甲基纤维素、羟丙 基纤维素、卡波姆等。增稠剂的浓度可以取决于所选择的试剂。重要 的是使用将实现所选定的粘度的量。显然，合适的载体和其它添加剂 的选择将取决于确切的给药途径和特定剂型的性质，例如液体剂型(例 如，是否将组合物配制成溶液、悬浊液、凝胶或另一液体形式，比如 时间释放形式或液体填充形式)。
本领域技术人员将认识到，组合物的组分应当选择为化学惰性的， 并且不会影响如本发明公开主题中所述的免疫应答细胞的存活力或功 效。这对化学和药学原理的技术人员将不存在问题，或者可以从本发 明公开和本文引用的文献通过参考标准教科书或通过简单实验(不涉 及过多实验)，容易地避免问题。
关于本发明公开主题的免疫应答细胞的治疗用途的一个考虑是获 得最佳效果所必需的细胞的量。待施用的细胞的量将根据所治疗的受 试者而变化。在某些实施方案中，将约104至约1010、约105至约109或约106至约108个本发明公开主题的免疫应答细胞施用于受试者。更 有效的细胞可以以甚至更小的数量施用。在一些实施方案中，将至少 约1x108、约2x108、约3x108、约4x108和约5x108个本发明公开 主题的免疫应答细胞施用于人受试者。将被认为是有效剂量的精确确 定基于每个受试者个体的因素，包括其大小、年龄、性别、体重和特 定受试者的状况。剂量可以由本领域技术人员从本发明公开和本领域 的知识中容易地确定。
本领域技术人员可容易地确定组合物中细胞和任选的添加剂、媒 介物和/或载体的量，并且确定哪些在本发明公开的主题的方法中施用。 通常，任何添加剂(除了活性细胞和/或物质之外)在磷酸盐缓冲盐水 中以约0.001wt％至约50wt％的溶液的量存在，并且活性成分是以微 克至毫克的数量级，比如约0.0001wt％至约5wt％、约0.0001wt％至 约1wt％、约0.0001wt％至约0.05wt％、约0.001wt％至约20wt％、 约0.01wt％至约10wt％、或约0.05wt％至约5wt％存在。对于要施 用于动物或人的任何组合物，以及对于任何特定的施用方法，应当确 定毒性，比如通过在合适的动物模型例如啮齿动物比如小鼠中测定致死剂量(LD)和LD50；和引起合适的应答的组合物的剂量、其中组 分的浓度和施用组合物的时间。此类确定根据本领域技术人员的知识、 本发明公开和本文引用的文献并不需要过度实验。并且，可以在没有 过度实验的情况下确定顺序施用的时间。
VIII.治疗方法
肿瘤微环境。肿瘤具有敌对于宿主免疫应答的微环境，其涉及恶 性细胞的一连续机制以保护自身免于免疫识别和清除。这种“不利的 肿瘤微环境”包括多种免疫抑制因子，包括浸润性调节性CD4+T细胞 (Treg)、骨髓衍生抑制细胞(MDSC)、肿瘤相关巨噬细胞(TAM)、 包括IL-10和TGF-β的免疫抑制性细胞因子，以及靶向由活化T细胞 (CTLA-4和PD-1)表达的免疫抑制性受体的配体的表达。这些免疫 抑制机制在维持耐受性和抑制不适当的免疫应答中起作用，然而在肿 瘤微环境内，这些机制阻止有效的抗肿瘤免疫应答。总之，这些免疫 抑制因子可以诱导过继转移的CAR修饰的T细胞在遇到靶向的肿瘤细 胞时显著的无反应性或凋亡。
肿瘤免疫学的挑战。有效的肿瘤免疫需要肿瘤抗原识别和免疫效 应细胞的无对抗的肿瘤清除。肿瘤抗原必须包含由肿瘤递呈并且可以 被特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)识别的肽表位。引发的CTL必 须扩增到足够数量并迁移到肿瘤位点，在其中它们成熟为效应物以实 现其功能，这种功能通过辅助性T细胞增强并被Treg和抑制性巨噬细 胞抑制。
使用工程化T淋巴细胞的靶向T细胞治疗。T细胞工程是一个开 创性的战略，以潜在解决许多以前观察到的早期免疫治疗方法的缺点。 在过去一年中，研究人员报道了复发的17,18、耐药(chemorefractory) 白血病和转移性黑色素瘤19-21中的显著的完全缓解，其是使用靶向特 定抗原(分别为CD19和NY-ESO-1)的自体外周血T细胞获得的。
遗传方法的原理：细胞工程可以用于将T细胞重定向至肿瘤抗原 并增强T细胞功能。遗传性T细胞修饰的一个动力是增强T细胞存活 和扩增并抵消T细胞死亡、无反应性和免疫抑制的潜力。还可以改进T 细胞的遗传靶向以防止正常组织的不期望的破坏。
嵌合抗原受体(CAR)：可以通过转移编码CAR的基因产生肿瘤 特异性T细胞22-27。第二代CAR包含肿瘤抗原结合结构域，其融合到 能够激活T细胞的细胞内信号传导结构域，以及设计为增强T细胞效 能和持续性的共刺激结构域28。因此CAR设计可以协调抗原识别与信号传导，生理上由两个单独的复合物TCR异二聚体和CD3复合物承担 的两种功能。CAR的细胞外抗原结合结构域通常来源于鼠单克隆抗体 (mAb)或来自受体或其配体。因此，抗原识别是非MHC限制的29,30， 因此使用相同的CAR适用于表达靶抗原的任何患者。通过CAR的抗原结合触发细胞内结构域中基于免疫受体酪氨酸的激活基序(ITAM) 的磷酸化，启动细胞裂解诱导、细胞因子分泌和增殖所需的信号传导 级联。由于抗原识别的MHC限制被绕过，CAR靶向T细胞的功能不 受HLA下调或抗原加工装置中的缺陷的影响。
T细胞对于扩增和存活的要求：肿瘤特异性T细胞的增殖在离体 是需要的，并且在体内可以说是期望的。T细胞增殖必须伴随T细胞 存活以允许绝对T细胞扩增和持续。为了响应抗原而增殖，T细胞必 须接收两种信号。一种是由抗原递呈细胞(APC)的表面上展示的抗 原肽/MHC复合物的TCR识别所提供26。另一种由T细胞共刺激受体， 比如CD28或4-1BB受体所提供。虽然T细胞的细胞裂解活性不需要 伴随的共刺激，但是如先前所证明的，提供共刺激信号以维持过继转 移T细胞的抗肿瘤功能，存在关键需求24,28,31-33。
免疫监测：淋巴细胞是多功能“药物”，其在输注后表现出动态演 变效应。在遇到抗原时，肿瘤特异性T细胞活化和/或释放多种可以触 发肿瘤杀伤、T细胞增殖和其它免疫细胞的募集或免疫调节的蛋白质。 因此，测量哪些蛋白质从哪些细胞分泌、以什么数量和在什么时间点， 产生了针对特定患者为什么反应或不反应的深刻见解，并且为设计更 有效的试验提供关键反馈。这些试验系统将允许直接和有意义的临床 方法比较，从而有助于设计合理的下一代治疗策略。
对于治疗，施用的量是有效产生所需效果的量。可以在一次或系 列施用中提供有效量。可以在推注或通过连续灌注提供有效量。
“有效量”(或“治疗有效量”)是足以在治疗后实现有益或期望 的临床结果的量。可以以一个或多个剂量将有效量施用于受试者。在 治疗方面，有效量是足以减轻、改善、稳定、逆转或减缓疾病的进展 或以其它方式减少疾病的病理学后果的量。有效量通常由医生根据具 体情况确定，并且在本领域技术人员的技能范围内。当确定合适剂量 以达到有效量时，通常考虑几个因素。这些因素包括受试者的年龄、 性别和体重、所治疗的病症、病症的严重程度以及施用的免疫应答细 胞的剂型和有效浓度。
对于使用抗原特异性T细胞的过继免疫治疗，通常输注约106至约 1010(例如约109)范围内的细胞剂量。当将免疫应答细胞施用于受试 者并随后分化时，免疫应答细胞诱导为特异性针对一种特定抗原(例 如，G-蛋白偶联受体(例如，GPRC5D))。T细胞的“诱导”可以包括 比如通过缺失或无反应性实现的抗原特异性T细胞的失活。失活对于 建立或重建比如在自身免疫性疾病中的耐受性特别有用。本发明公开 主题的免疫应答细胞可以通过本领域已知的任何方法施用，包括但不 限于胸膜施用、静脉内施用、皮下施用、结内施用、肿瘤内施用、鞘 内施用、胸膜内施用、腹膜内施用和直接施用于胸腺。在某些实施方 案中，免疫应答细胞和包含它的组合物经静脉内施用于需要的受试者。
本发明公开的主题提供使用表达G-蛋白偶联受体(例如， GPRC5D)特异性的CAR的免疫应答细胞(例如，T细胞)的各种方 法。例如，本发明公开的主题提供减少受试者的肿瘤负荷的方法。在 一个非限制性实例中，减少肿瘤负荷的方法包括将有效量的本发明公 开的免疫应答细胞施用于受试者，从而在受试者中诱导肿瘤细胞死亡。 本发明公开的免疫应答细胞可以减少受试者中肿瘤细胞的数量、减小 肿瘤尺寸和/或根除肿瘤。合适的肿瘤的非限制性实例包括多发性骨髓 瘤、瓦氏巨球蛋白血症。在某些实施方式中，肿瘤是多发性骨髓瘤。
本发明公开的主题还提供增加或延长患有瘤形成的受试者的存活 的方法。在一个非限制性实例中，增加或延长患有瘤形成的受试者的 存活的方法包括将有效量的本发明公开的免疫应答细胞施用于受试 者，从而增加或延长受试者的存活。该方法可以减少或根除受试者中 的肿瘤负荷。本发明公开的主题还提供用于治疗或预防受试者中的瘤 形成的方法，包括将本发明公开的免疫应答细胞施用于受试者。
本文使用的术语“瘤形成”是指以细胞或组织的病理增殖及其随 后向其它组织或器官的迁移或侵袭为特征的疾病。瘤形成生长通常是 不受控制的和进行性的，并且在不会引起或将导致正常细胞增殖停止 的条件下发生。瘤形成可以影响多种细胞类型、组织或器官，包括但 不限于选自膀胱、结肠、骨、脑、乳腺、软骨、神经胶质、食管、输 卵管、胆囊、心脏、肠、肾脏、肝脏、肺、淋巴结、神经组织、卵巢、 胸膜、胰腺、前列腺、骨骼肌、皮肤、脊髓、脾、胃、睾丸、胸腺、 甲状腺、气管、泌尿生殖道、输尿管、尿道、子宫、和阴道的器官， 或其组织或细胞类型。瘤形成包括癌症，例如肉瘤(sarcomas)、癌 (carcinoma)或浆细胞瘤(浆细胞的恶性肿瘤)。
可使用本发明公开主题的免疫应答细胞抑制其生长的癌症包括通 常对免疫疗法应答的癌症。用于治疗的癌症的非限制性实例包括多发 性骨髓瘤和瓦氏巨球蛋白血症。在某些实施方式中，癌症是多发性骨 髓瘤。
另外，本发明公开的主题提供响应受试者中的癌细胞而增加免疫 激活细胞因子产生的方法。在一个非限制性实例中，该方法包括将本 发明公开的免疫应答细胞施用于受试者。免疫激活细胞因子可以是粒 细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、IFN-α、IFN-β、IFN-γ、TNF-α、 IL-2、IL-3、IL-6、IL-11、IL-7、IL-12、IL-15、IL-21、干扰素调节因 子7(IRF7)，及其组合。在某些实施方案中，本发明公开主题的包含G-蛋白偶联受体(例如，GPRC5D)特异性CAR的免疫应答细胞增加 GM-CSF、IFN-γ和/或TNF-α的产生。
进行治疗的合适的人受试者通常包括可以通过临床标准区分的两 个治疗组。具有“晚期疾病”或“高肿瘤负荷”的受试者是具有临床 可测量的肿瘤(例如，多发性骨髓瘤)的受试者。临床可测量的肿瘤 是可以基于肿瘤块检测的(例如通过触诊、CAT扫描、声波图、乳房 X线照片或X射线；阳性生物化学或组织病理学标记本身不足以鉴定 该群体)的肿瘤。将本发明公开主题所包含的药物组合物施用于这些 受试者以引起抗肿瘤反应，目的是减轻他们的病症。理想地，结果是 发生肿瘤块的减少，但是任何临床改善均构成益处。临床改善包括肿 瘤(例如，多发性骨髓瘤)的风险降低或进展速率降低或病理学后果 的减少。
第二组合适的受试者在本领域中称为“辅助组”。他们是具有瘤形 成(例如，多发性骨髓瘤)史但已对另一种治疗方式应答的个体。先 前的治疗可以包括但不限于手术切除、放射治疗和传统化疗。结果， 这些个体没有临床可测量的肿瘤。然而，他们被怀疑在原始肿瘤位点 附近或通过转移而处于疾病进展的风险中。该组可以进一步细分为高 风险和低风险个体。根据在初始治疗之前或之后观察到的特征进行细 分。这些特征在临床领域中是已知的，并且针对每种不同的瘤形成被 适当地定义。通常的高风险亚组的特征是其中肿瘤(例如，多发性骨 髓瘤)侵入邻近组织或示出淋巴结参与的那些。另一组具有瘤形成(例如，多发性骨髓瘤)的遗传易感性，但尚未证实瘤形成(例如，多发 性骨髓瘤)的临床表现。例如，对于在与乳腺癌相关的遗传突变的测 试为阳性但仍然处于育龄期的妇女，希望预防性地接受本文所述的一 种或多种抗原结合片段以预防性地防止瘤形成的发生，直到适合于进 行预防性手术。
受试者可以具有晚期形式的疾病(例如，多发性骨髓瘤)，在这种 情况下，治疗目标可以包括缓解或逆转疾病进展和/或减轻副作用。受 试者可以具有病史，针对疾病他们已经经过治疗，在这种情况下，治 疗目标通常包括复发风险的降低或延迟。
可以对表达G-蛋白偶联受体(例如，GPRC5D)特异性CAR的免 疫应答细胞(例如，T细胞)引入进一步修饰以避免或最小化免疫并发 症(称为“恶性T细胞转化”)的风险，例如移植物抗宿主病(GvHD)， 或当健康组织表达与肿瘤细胞相同的靶抗原时，导致与GvHD相似的 结果。这个问题的潜在解决方案是将自杀基因工程化到表达CAR的T 细胞中。合适的自杀基因包括但不限于单纯疱疹病毒胸苷激酶 (hsv-tk)、诱导型半胱天冬酶9自杀基因(iCasp-9)和截短的人表皮 生长因子受体(EGFRt)多肽。在某些实施方案中，自杀基因是EGFRt 多肽。EGFRt多肽可以通过施用抗EGFR单克隆抗体(例如西妥昔单 抗(cetuximab))来使T细胞能够清除。EGFRt可以共价连接到G-蛋 白偶联受体(例如，GPRC5D)特异性CAR的细胞内结构域的3’末端。 自杀基因可以包括在包含编码本发明公开的G-蛋白偶联受体(例如， GPRC5D)特异性CAR的核酸的载体中。以这种方式，施用一种设计 为在恶性T细胞转化期间(例如GVHD)活化自杀基因的前药(例如， 可以活化iCasp-9的前药如AP1903)引发自杀基因活化的表达CAR的 T细胞的凋亡。
IX.试剂盒
本发明公开的主题提供用于治疗或预防瘤形成(例如，多发性骨 髓瘤)的试剂盒。在某些实施方案中，试剂盒包含治疗或预防组合物， 其包含有效量的包含单位剂量形式的G-蛋白偶联受体(例如， GPRC5D)特异性CAR的免疫应答细胞。在具体实施方案中，细胞还表达至少一种共刺激配体。在某些实施方案中，试剂盒包含含有治疗 性或预防性疫苗的无菌容器；此类容器可以是盒、安瓿、瓶、小瓶、 管、袋、小袋、泡罩包装或本领域已知的其它合适的容器形式。此类 容器可以由塑料、玻璃、层压纸、金属箔或适合于保存药物的其它材料制成。
如果需要，免疫应答细胞与将细胞施用于具有瘤形成(例如，多 发性骨髓瘤)或处于发生风险的受试者的说明书一起提供。说明书通 常包括关于组合物用于治疗或预防瘤形成(例如，多发性骨髓瘤)的 用途的信息。在其它实施方案中，说明书包括以下中的至少一个：治 疗剂的说明；用于治疗或预防瘤形成(例如，多发性骨髓瘤)或其症 状的剂量方案和施用方法；注意事项；禁忌；适应症；非适应症；过 量信息；不良反应；动物药理学；临床研究；和/或参考文献。说明书 可以直接印在容器上(当存在时)、或作为标签贴到容器上、或作为单 独的页、小册子、卡片或折叠式印刷品，在容器中或与容器一起提供。
实施例
除非另有说明，本发明的实践采用分子生物学(包括重组技术)、 微生物学、细胞生物学、生物化学和免疫学的常规技术，其完全在本 领域技术人员的能力范围内。此类技术在文献中有充分解释，比如 “Molecular Cloning:A Laboratory Manual”，第二版(Sambrook，1989)； “Oligonucleotide Synthesis”(Gait，1984)；“Animal Cell Culture”(Freshney，1987)；“Methods in Enzymology”“Handbook of Experimental Immunology”(Weir，1996)；“Gene Transfer Vectors for Mammalian Cells”(Miller和Calos，1987)；“Current Protocols in Molecular Biology”(Ausubel，1987)；“PCR:The PolymeraseChain Reaction”，(Mullis，1994)；“Current Protocols in Immunology”(Coligan，1991)。这些技术适用于生产本发明的多核苷酸和多肽，并且因此可以 在制备和实施本发明时考虑。在下面的部分中将讨论用于具体实施方 式的特别有用的技术。
提出以下实施例以便为本领域普通技术人员提供如何进行和利用 本发明的试验、筛选和治疗方法的完全公开和描述，并且不意在限制 发明人认定作为他们的发明的范围。
实施例1.GPRC5D在不同组织中的表达
通过研究比如癌细胞系百科全书和BioGPS的数据库中的基因表 达谱，评价人GPRC5D在各种恶性和正常组织中的表达。如图2所示， 人GPRC5D在多发性骨髓瘤中高度表达，但在其他恶性组织中并非如 此。正常表达似乎限于浆细胞。根据发明人使用靶向CD19的CAR T 细胞的患者经验，潜在的靶向GPRC5D的CAR T细胞根除这种正常细 胞类型可能没有显著的不良反应。任何缺乏的生理性抗体产生可以用 静脉注射免疫球蛋白治疗进行解决。
实施例2.GPRC5D-特异性的28z CAR的构建
产生多种独特的针对GPRC5D的全人scFv，并且产生基于这些scFv的CAR。通过用表达GPRC5D的3T3细胞筛选全人scFv噬菌体 文库(>6×1010scFv)来鉴定多种scFv。用12个不同的噬菌体文库针 对过表达GPRC5D的3T3细胞进行4轮独立的淘洗，鉴定了80个阳 性克隆。通过FACS筛选，在80个克隆中鉴定出72个阳性克隆；阳 性克隆率为90％。测序后，在72个测序的阳性克隆中发现32个独特 的GPRC5D-3T3阳性结合克隆；独特的克隆率为45％。
使用ET150-151 scFv(或“ET150-1 scFv”)、ET150-152 scFv(或 “ET150-2scFv”)、ET150-155 scFv(或“ET150-5 scFv”)、ET150-158 (或“ET150-8 scFv”)scFv、和ET150-168 scFv(或“ET150-18 scFv”) 分别产生靶向GPRC5D的28z CAR 2、5、8和18。这些GPRC5D-靶 向的28z CAR具有相似的结构，例如，每个具有包含CD28多肽的跨 膜结构域、和包含CD3ξ多肽的细胞内结构域以及包含CD28多肽的共 刺激信号传导区，如图1所示。将这些GPRC5D-靶向的CAR中的每 个克隆入逆转录病毒载体。然后将这些病毒载体转导入HEK293galv9 病毒包装细胞中，以便产生用于产生CAR+T细胞的稳定包装系。
将人T细胞(来自健康供体的未经选择的(CD4和CD8)人T细 胞)用这些靶向GPRC5D的28z CAR中的每个进行转导，使得T细胞 表达这些靶向GPRC5D的CAR。
通过结合人GPRC5D来评估靶向GPRC5D的28z CAR18在人T 细胞上的细胞表面表达，并且通过流式细胞术验证细胞表面检测，如 图3所示。
实施例3.GPRC5D特异性的28z CAR的活性
评价本发明公开的GPRC5D特异性的28z CAR的抗肿瘤活性。体 外数据显示，GPRC5D特异性的CAR特异性地杀伤GPRC5D递呈细 胞，包括MM细胞系。例如，如图4所示，表达GPRC5D特异性的28z CAR18的T细胞杀伤过表达GPRC5D的3T3细胞(但不杀伤过表达其 他抗原的对照3T3)。如图5所示，表达GPRC5D特异性的28z CAR 2、 5、8和18的T细胞杀伤人MM细胞系。
实施例4.抗-GPRC5D抗体的筛选数据
FACS筛选：图24示出GPRC5D特异性的噬菌体抗体克隆 (ET150-1、ET150-2、ET150-5、ET150-8、ET150-18)的FACS分析。 将噬菌体克隆与3T3-GPRC5D细胞系孵育，然后用抗-M13小鼠抗体孵 育。最后，再次洗涤后，将APC标记的抗-小鼠IgG第二抗体加入反应 中。通过FACS测定结合，并表示为平均荧光强度(MFI)。细胞与M13 K07辅助噬菌体进行孵育，并且仅有细胞用作阴性对照。
实施例5.GPRC5D特异性的BBz CAR的构建
如实施例2所述，产生多种独特的针对GPRC5D的全人scFv，并 且产生基于这些scFv的CAR。使用ET150-151 scFv(或“ET150-1 scFv”)、ET150-152 scFv(或“ET150-2scFv”)、ET150-155 scFv(或 “ET150-5 scFv”)、ET150-158 scFv(或“ET150-8 scFv”)、和ET150-168 scFv(或“ET150-18 scFv”)分别产生靶向GPRC5D的BBz CAR 1、2、 5、8和18。这些靶向GPRC5D的BBz CAR具有相似的结构，例如， 每个具有包含CD8a多肽的跨膜结构域、和包含CD3ξ多肽的细胞内结 构域、以及包含4-1BB多肽的共刺激信号传导区，如图6所示。将这 些靶向GPRC5D的BBz CAR中的每个克隆入SFG逆转录病毒载体， 如图7-9、图26和图27所示。
实施例6.靶向GPRC5D的CAR T细胞的活性
如图10所示，与不相关地靶向的4h11-28z MUC16靶向的CAR T 细胞相比，GPRC5D28z CAR8裂解人MM细胞系L363、NCL-H929 和U266。观察GPRC5D 28z CAR8表现出的细胞毒性对GPRC5D是特 异性的，因为它没有裂解GPRC5D阴性的CD19阳性Raji Burkett淋巴 瘤细胞系，如图10所示。
实施例7.诱导靶向GPRC5D的CAR T细胞的细胞因子分泌
GPRC5D 28z CAR8 T细胞特异性地与MM细胞系的共培养诱导的 细胞因子分泌谱与T细胞活化一致。图11示出CAR T细胞与人肿瘤 细胞系(E:T比为1:1)共培养24小时后的IL-2分泌。只有与CD19 靶向的CAR T细胞(阳性对照)共培养的淋巴浆细胞淋巴瘤(CD19+GPRC5D-)和与GPRC5D靶向的28z CAR8 T细胞共培养的MM细胞 系显示增加的细胞因子产生。IFNg、IL-6、TNFa、sCD40L、GM-CSF 都具有相似的分泌谱(数据未显示)。
实施例8.靶向GPRC5D的CAR T细胞的抗肿瘤活性
靶向GPRC5D的28z CAR18 T细胞介导抗骨髓瘤免疫应答。在第0天将1×107的U266人骨髓瘤细胞系的细胞经IV注射入NSG小鼠。 在第4天，将1×106的靶向GPRC5D的或靶向CD19的第二代CAR T 细胞经IV注射。在第11天(在CAR T细胞注射后第7天)的成像显 示，不同于不相关的(CD19)靶向的CAR T细胞，GPRC5D A靶向的 28z CAR18 T细胞可以介导抗肿瘤应答。参见图12。
实施例9.靶向GPRC5D的CAR T细胞的活性
测试靶向GPRC5D的CAR T细胞特异性地裂解人骨髓瘤细胞系 (HMCL)的能力。将靶向CD19的CAR T细胞或靶向GPRC5D的28z CAR8 T细胞与表达GFP的肿瘤细胞系SET2(急性骨髓性白血病 (AML)，CD19-GPRC5D-)、BCWM1(淋巴浆细胞淋巴瘤(LPL)， CD19-GPRC5D-)、L363(多发性骨髓瘤(MM)，CD19-GPRC5D+) 进行孵育。在时间0，GFP+肿瘤系的百分比在图13A中示出。在36小 时时，阳性对照靶向CD19的CAR T细胞已经特异性地杀伤GFP+LPL 系，并且相似地，靶向GPRC5D的28z CAR8 T细胞已经特异性地杀 伤GFP+MM系。参见图13B。
实施例10.抗-GPRC5D抗体的表位图谱
四种抗-GPRC5D抗体：ET150-2、ET150-5、ET150-8和ET150-18 mIgG1。在所有实施例中使用的“mIgG1”表示可变区是全人的并且 Fc部分是小鼠IgG1。参见表37。
表37
| 名称 | 来源 | 浓度 | 位置 | 状态 |
| ET150-18mIgG1 | 小鼠Fc | 1.1mg/ml | +4℃/22 | 良好 |
| ET150-2mIgG1 | 小鼠Fc | 0.66mg/ml | +4℃/22 | 良好 |
| ET150-5mIgG1 | 小鼠Fc | 1.9mg/ml | +4℃/22 | 良好 |
| ET150-8mIgG1 | 小鼠Fc | 2.9mg/ml | +4℃/22 | 良好 |
靶蛋白是具有SEQ ID NO:97所示的氨基酸序列的人GPRC5D。 人GPRC5D的N端区域具有SEQ ID NO:97的氨基酸1-27。人GPRC5D 的胞外环1(ECL1)区域具有SEQ ID NO:97的氨基酸85-93。人 GPRC5D的胞外环2(ECL2)区域具有SEQ ID NO:97的氨基酸 145-167。人GPRC5D的胞外环3(ECL3)区域具有SEQ ID NO:97的 氨基酸226-239。
方法
CLIPS技术的原理——CLIPS技术在结构上将肽装配为确定的三 维结构。这导致甚至最复杂的结合位点的功能模拟。CLIPS技术现在 常用于将肽文库形成单、双或三环结构以及片状和螺旋状折叠(图14)。
组合CLIPS文库筛选细节——CLIPS文库筛选开始于使用组合矩 阵设计将靶蛋白转化为多达10,000个重叠肽构建体的文库。在固体载 体上，合成线性肽的矩阵，随后将其形成空间确定的CLIPS构建体(图 15)。表现出正确的构象中非连续表位的两部分的构建体以高亲和力结 合抗体，对亲和力进行检测并定量。呈现不完整表位的构建体以较低 的亲和力结合抗体，而不含表位的构建体根本不结合抗体。亲和力信 息用于反复筛选以详细地限定表位的序列和构象。
热图分析——热图是数据的图形表示，其中二维图中的变量取值 表示为颜色。对于双环CLIPS肽，可以从第一和第二环的独立序列导 出这样的二维图。例如，图17中描绘的16个CLIPS肽的序列实际是 环1中的4个独特子序列(图16中以蓝色着色)和环2中的4个独特 子序列(图16中以绿色着色)的排列。因此，所观察到的ELISA数据 (图17A中以红色着色)可以以4×4矩阵进行绘制，其中每个X坐 标对应于第一个环的序列，并且每个Y坐标对应于第二个环的序列。 例如，对于CLIPS肽CLSSERERVEDLFEYECELLTSEPIFHCRQEDC (在图17A中以箭头指示)观察到的ELISA值可以在图17B的第三行 第三列(用箭头和红色方形表示)找到。为了进一步促进可视化，ELISA 值可以用连续梯度的颜色代替。在这种情况下，极低的值以绿色着色， 极高的值以红色着色，且平均值以黑色着色(参见图17C)。对于上述实例，平均值为0.71。当将该颜色图应用于图17B中绘制的数据矩阵 时，获得彩色热图(参见图17D，为了额外的清晰度仍然指示原始数 据)。
肽的合成——为了重建靶分子的表位，合成肽文库。通过用专有 亲水性聚合物制剂接枝，然后使用二环己基碳二亚胺(DCC)与N羟 基苯并三唑(HOBt)，与叔丁氧羰基-六亚甲基二胺(BocHMDA)进 行反应，并随后使用三氟乙酸(TFA)裂解Boc-基团，获得氨基官能化的聚丙烯载体。使用标准的Fmoc-肽合成通过定制改良的JANUS液 体处理站(PerkinElmer)在氨基官能化的固体载体上合成肽。结构模 拟物的合成使用Pepscan专有的支架上化学连接肽(Chemically Linked Peptides on Scaffolds)(CLIPS)技术进行。CLIPS技术允许将肽结构转 化为单环、双环、三环、片状折叠、螺旋状折叠、及其组合。CLIPS 模板偶联至半胱氨酸残基。肽中的多个半胱氨酸的侧链偶联至一个或 两个CLIPS模板。例如，将P2CLIPS(2,6-双(溴甲基)吡啶)的0.5mM 溶液溶解在碳酸氢铵(20mM，pH 7.8)/乙腈(1:3(v/v))中。将该溶 液加入到肽阵列。CLIPS模板结合至肽阵列(455孔板，3μl孔)的固 相结合肽中存在的两个半胱氨酸的侧链。将肽阵列在被覆盖于溶液中 的同时在溶液中轻柔晃动30-60分钟。最后，将肽阵列用过量的H2O 充分洗涤，并于70℃在含有1％SDS/0.1％β-巯基乙醇的PBS(pH 7.2) 的断裂缓冲液(disrupt-buffer)中超声处理30分钟，然后在H2O中再 超声处理45分钟。携带肽的T3 CLIPS以类似的方式制备，但现在具 有三个半胱氨酸。
ELISA筛选——在基于PEPSCAN的ELISA中测试抗体与每种合 成肽的结合。将肽阵列与第一抗体溶液孵育(4℃过夜)。洗涤后，在 25℃将肽阵列与合适的抗体过氧化物酶缀合物(SBA)的1/1000稀释 液孵育1小时。洗涤后，加入过氧化物酶底物2,2’-连氮-二-3-乙基苯并 噻唑啉磺酸盐(ABTS)和2μl/ml的3％的H2O2。一小时后，测定显 色。用电荷耦合器(CCD)相机和图像处理系统对显色进行定量。
数据处理——从CCD相机获得的数值范围为0至3000mAU，类 似于标准的96孔板ELISA读数器。对结果进行定量并存储到Peplab 数据库中。偶然地含有气泡的孔导致假阳性值，手动检查卡片，并将 由气泡引起的任何数值均记为0。
合成质量控制——为了验证合成肽的质量，并行合成一组单独的 阳性和阴性对照肽。这些用抗体57.9进行筛选(参考Posthumus等人, J.Virology,1990,64:3304-3309)。
结果
筛选
抗体结合取决于多因素的组合，包括抗体的浓度以及ELISA缓冲 液中竞争蛋白的量和性质。此外，预包被条件(在与实验样品孵育之 前对肽阵列的特别处理)影响结合。这些细节总结在表38中。对于 Pepscan缓冲液和预处理(SQ)，数字表示竞争蛋白(马血清和卵清蛋 白的组合)的相对量。
表38——筛选条件
| 标签 | 稀释 | 样品缓冲液 | 预处理 |
| ET150-18mIgG1 | 1μg/ml | 1％SQ | 1％SQ |
| ET150-2mIgG1 | 1μg/ml | 10％SQ | 10％SQ |
| ET150-5mIgG1 | 1μg/ml | 10％SQ | 10％SQ |
| ET150-8mIgG1 | 3μg/ml | 10％SQ | 10％SQ |
抗体ET150-2
当在中等严格条件下测试时抗体ET150-2紧密结合来自所有组的 肽(图18)。累积数据分析显示，抗体识别由肽段16CDAEGPWGII25 (N端)、157MFVNMTPC164(ECL2)和229PQFQRQPQW237(ECL3) 组成的非连续表位，其中单独的肽段16CDAEGPWGII25和229PQFQRQPQW237足够用于结合。
抗体ET150-5
当在高度严格条件下测试时抗体ET150-5紧密结合来自所有组的 肽(图19)。累积数据分析显示，抗体识别由肽段5CIESTGDYFLLCD17 (N-端)、85NQQTAPVRYFL95(ECL1)和157MFVNMTPC164(ECL2) 组成的非连续表位，其中单独的肽段5CIESTGDYFLCD17足够用于结合。
抗体ET150-18
当在高度严格条件下测试时抗体ET150-18结合来自组4和组7的 肽，包含结构受限肽。在包含线性肽的组中没有记录到显著的结合(图 20)。累积数据分析显示，抗体识别由片段10GDYFLLCD17(N-端)、 157MFVNMTPCQLN167(ECL2)和227GNPQFQRQPQW237(ECL3)组 成的非连续表位。肽段10GDYFLLCD17和227GNPQFQRQPQW237表示 表位的核心，因为两个肽段分别足够用于结合。
抗体ET150-8
当在高度严格条件下测试时抗体ET150-8结合来自除了组2之外 的所有组的肽(图21)。累积数据分析显示，抗体识别由肽段 15LCDAEGPWG23(N-端)和230QFQRQPQWDDPVVC243(ECL3)组 成的非连续表位。其中肽段15LCDAEGPWG23是表位的显性部分，因 为其单独足够用于结合。此外，从第1组(线性)和第4组(环)获 得的比较结果表明，对表位模拟物引入结构性限制使肽的结合增强， 在包含序列230QFQRQPQWDDPVVC243的肽的情况下尤其如此。
结论
所研究的所有抗体均识别非连续表位，使用Pepscan阵列对其作 图。核心暂定表位列于表39中。所有抗体普遍识别在蛋白质的N-端和 来自一个或两个ECL的区域的重叠区域。两种抗体ET150-18和 ET150-8显示出对支持抗体结合的结构限制的要求，表明这两种抗体不 仅识别非连续表位，还识别构象表位。抗体ET150-2和ET150-5在肽 结合方面在线性和环状肽之间没有显示出显著的差异。
表39-表位的列表
| 抗体 | N-端 | ECL1 | ECL2 | ECL3 |
| ET150-2 | <sub>16</sub>CDAEGPWGII<sub>25</sub><sup>*)</sup> | - | <sub>157</sub>MFVNMTPC<sub>164</sub> | <sub>229</sub>PQFQRQPQW<sub>237</sub><sup>*)</sup> |
| ET150-5 | <sub>5</sub>CIESTGDYFLLCD<sub>17</sub><sup>*)</sup> | <sub>85</sub>NQQTAPVRYFL<sub>95</sub> | <sub>157</sub>MFVNMTPC<sub>164</sub> | - |
| ET150-8 | <sub>15</sub>LCDAEGPWG<sub>23</sub><sup>*)</sup> | - | - | <sub>230</sub>QFQRQPQWDDPVVC<sub>243</sub> |
| ET150-18 | <sub>10</sub>GDYFLLCD<sub>17</sub><sup>*)</sup> | - | <sub>157</sub>MFVNMTPCQLN<sub>167</sub> | <sub>227</sub>GNPQFQRQPQW<sub>237</sub><sup>*)</sup> |
*)显性部分
图22是关于GPCR整体结构的研究结果的说明。由于N-端是高 度灵活的和非结构化的，它可能与ECL瞬时相互作用形成非连续免疫 显性区域。
肽结合的差异和共性可以用图23中的散点图分析进行说明。左上 角和右下角的数据点表明结合的差异。尽管显著的表位重叠，单个抗 体的表位的细微特异性在很大程度上不同。
实施例11.抗-GPRC5D抗体的结合亲和力
图25示出GPRC5D-特异性的噬菌体抗体克隆(ET150-2、ET150-5、 ET150-8、ET150-18)的FACS分析。将每个抗体(ET150-2、ET150-5、 ET150-8、ET150-18)以10或1ug/mL与3T3或3T3-GPRC5D细胞孵 育，然后与抗-M13小鼠抗体孵育。最后将PE-标记的抗-小鼠IgG第二抗体加入到反应中。通过FACS测量该结合并且表示为平均荧光强度 (MFI)。将细胞与单独的第二抗体孵育，单独的ET901 mIgG1同种型 对照和细胞用作阴性对照。
尽管出于理解清楚的目的以例证和实施例的方式相当详细地描述 了前述的本发明公开的主题，但说明书和实施例不应被理解为限制本 发明公开主题的范围。本文引用的所有专利和科技文献的公开内容明 确地全部并入本文以供参考。
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从前面的描述中，显然可以对本文所述的本发明进行变化和修改， 以使它适用于各种用途和条件。这些实施方式也在所附权利要求的范 围内。
本说明书中提到的所有专利和出版物以及通过登录号或参考号提 到的序列均并入本文以供参考，其程度如同每个独立的专利和出版物 以及序列被具体地单独指明并入本文以供参考。
序列表
<110> 纪念斯隆-凯特琳癌症中心;
尤里卡治疗公司
<120> 靶向G-蛋白偶联受体的嵌合抗原受体及其用途
<130> 072734.0350
<140> PCT/US2015/064102
<141> 2015-12-04
<150> 62/088,286
<151> 2014-12-05
<160> 445
<170> PatentIn版本3.5
<210> 1
<211> 120
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 1
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Arg Val Ser Cys Thr Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Val Ile Asn Pro Asn Ala Gly Ser Thr Arg Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Ser Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Asp Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Met Tyr Arg Ser Leu Leu Phe Tyr Asp Pro Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 2
<211> 111
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 2
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Ala Ala Pro Gly Gln
1 5 10 15
Lys Val Thr Ile Pro Cys Ser Gly Ser Arg Ser Asn Val Gly Asn Tyr
20 25 30
Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu
35 40 45
Ile Tyr Asp Asn Asn Lys Arg Pro Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Thr Leu Gly Ile Thr Gly Leu Gln
65 70 75 80
Thr Gly Asp Glu Ala Asp Tyr Phe Cys Gly Thr Trp Asp Gly Ser Leu
85 90 95
Ser Ala His Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly
100 105 110
<210> 3
<211> 360
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 3
caggtgcagc tggtgcagtc tgggtctgag ttgaagaagc ctggggcctc agtcagagtc 60
tcctgcacgg cttctggata caccttcacc agttactata tgcactgggt gcgacaggcc 120
cctggacaag ggcttgagtg gatgggagta atcaacccta atgctggcag cacaagatac 180
gcacagaaat tccagggcag agtcaccatg agcactgaca cgtccacgag cacagcctac 240
atggacctga gcagtctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gcgcggtatg 300
taccgttctc tgctgttcta cgatccgtgg ggtcaaggta ctctggtgac cgtctcctca 360
<210> 4
<211> 333
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 4
cagtctgtgt tgacgcagcc gccctcagtg tctgcggccc caggacagaa ggtcaccatc 60
ccctgctctg gaagccgttc caacgttggg aattattatg tgtcctggta ccagcaactc 120
ccaggaacag cccccaaact cctcatttat gacaataata agcgaccctc agggattcct 180
gaccgattct ctggctccaa gtctggcacg tcagccaccc tgggcatcac cggactccag 240
actggggacg aggccgatta tttctgcgga acatgggatg gcagcctgag tgcccatgtc 300
ttcggaactg ggaccaaggt caccgtccta ggt 333
<210> 5
<211> 116
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 5
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ala Ile Ser Gly Ser Gly Asn Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Gly Ser Val Arg Tyr Thr Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser
115
<210> 6
<211> 113
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 6
Asn Phe Met Leu Thr Gln Pro His Ser Val Ser Glu Ser Pro Gly Lys
1 5 10 15
Thr Val Ser Ile Ser Cys Thr Arg Thr Ser Gly Ala Ile Ala Gly Ala
20 25 30
Tyr Val Gln Trp Phe Gln Gln Arg Pro Gly Ser Ala Pro Thr Thr Val
35 40 45
Ile Tyr Asp Asp Asn Lys Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Ile Asp Lys Ser Ser Asn Ser Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly
65 70 75 80
Leu Lys Thr Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Tyr
85 90 95
Asp Ser Ser Asn Val Leu Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105 110
Gly
<210> 7
<211> 348
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 7
gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60
tcctgtgcag cctctggatt cacctttagc aactatgcca tgagttgggt ccgccaggct 120
ccagggaagg gactggagtg ggtctcagct attagtggta gtggtaacac atactacgca 180
gactccgtga agggccggtt caccatctcc agagacaatt ccaagaacac gctgtatctg 240
caaatgaaca gcctgagagc cgaggacacg gccgtatatt actgtgcgcg cggttctgtt 300
cgttacactg atatctgggg tcaaggtact ctggtgaccg tctcctca 348
<210> 8
<211> 339
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 8
aattttatgc tgactcagcc ccactcagtg tcggagtctc cggggaagac ggtaagcatc 60
tcctgcaccc gcaccagtgg cgccattgcc ggcgcctatg tgcagtggtt ccagcagcgc 120
ccgggcagtg cccccaccac tgtgatctat gacgataaca aaagaccctc tggggtccct 180
gatcggttct ctgggtccat cgacaagtcc tccaactctg cctccctcac catctctgga 240
ctgaagactg aggacgaggc tgactattat tgtcagtctt atgattatga tagcagcaat 300
gtgctattcg gcggagggac caagctgacc gtcctaggt 339
<210> 9
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 9
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Thr Ser Gly Phe Thr Phe Asn Asn Tyr
20 25 30
Trp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Asn Ile Lys Gln Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Ser
65 70 75 80
Leu Gln Leu Asn Asn Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Ser Met Ser Thr Ala Trp Gly Tyr Asp Glu Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 10
<211> 108
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 10
Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Ala Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Tyr Ser Val Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg
100 105
<210> 11
<211> 357
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 11
gaggtgcagc tggtgcagtc tgggggaggc ttggtccagc ctggggggtc cctgagactc 60
tcctgtgcaa cctctggatt cacctttaat aactattgga tgagttgggt ccgccaggct 120
ccagggaagg ggctggagtg ggtggccaac ataaagcaag atggaagtga gaaatactac 180
gcggactctg tgaggggccg attcaccatc tccagagaca acgccaagaa ctcactgtct 240
ctgcaattga acaacctgag agccgaggac acggccgtgt attactgtgc gcgctctatg 300
tctactgctt ggggttacga tgaatggggt caaggtactc tggtgaccgt ctcctca 357
<210> 12
<211> 324
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 12
gacatccagt tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtcggaga cagagtcacc 60
atcacttgcc gggcaagtca gagcattagc agctatttaa attggtatca acagaaacca 120
gggaaagccc ctaagctcct gatctatgct gcatccagtt tgcaaagtgg ggtcccatca 180
aggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240
gcagattttg caacttacta ctgtcaacag agttacagtg tcccgtacac ttttggccag 300
gggaccaagc tggagatcaa acgt 324
<210> 13
<211> 121
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 13
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ile Ile Asn Pro Ser Gly Gly Ser Thr Arg Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Ser Ser Arg Trp Gly Gly Trp Thr Gly Asp Tyr Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 14
<211> 111
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 14
Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr
20 25 30
Asn Phe Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Val
35 40 45
Met Ile Tyr Asp Val Ser Lys Arg Pro Ser Gly Ile Ser Asn Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Val Glu Asp Glu Ala Glu Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Thr
85 90 95
Arg Thr Val Ile Phe Ala Gly Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly
100 105 110
<210> 15
<211> 363
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 15
caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtt 60
tcctgcaagg catctggata caccttcacc agctactata tgcactgggt gcgacaggcc 120
cctggacaag ggcttgagtg gatgggaata atcaacccta gtggtggtag cacaaggtac 180
gcacagaagt tccagggcag agtcaccatg accagggaca cgtcaacgag cacagtctac 240
atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gcgcggttct 300
tctcgctggg gtggttggac tggtgattac tggggtcaag gtactctggt gaccgtctcc 360
tca 363
<210> 16
<211> 333
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 16
caatctgccc tgactcagcc tgcctccgtg tctgggtctc ctggacagtc gatcaccatc 60
tcctgcactg gaaccagcag tgacgttggt ggttataact ttgtctcctg gtaccaacag 120
cacccaggca aagcccccaa agtcatgatt tatgatgtca gtaagcggcc ctcagggatt 180
tctaatcgct tctctggctc caagtctggc aacacggcct ccctgaccat ctctgggctc 240
caggttgagg acgaggctga atattactgc agctcatata caagcactag aactgtgata 300
ttcgccggag ggaccaaggt caccgtccta ggt 333
<210> 17
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 17
Glu Val Gln Leu Val Glu Thr Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ser Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ala Ile Ser Gly Arg Gly Arg Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Tyr Lys Ser Ser Lys Asp His Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 18
<211> 111
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<220>
<221> MOD_RES
<222> (37)..(37)
<223> 任意氨基酸
<400> 18
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Leu Ser Gly Ala Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Arg Ser Asn Ile Gly Thr Asn
20 25 30
Tyr Val Ser Trp Xaa Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu
35 40 45
Ile Tyr Arg Asn His Gln Trp Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr
50 55 60
Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg
65 70 75 80
Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp Asn Leu
85 90 95
Ser Gly Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly
100 105 110
<210> 19
<211> 351
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 19
gaggtgcagc tggtggagac tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60
tcctgtgcag cctctggatc cacctttagc agctatgcca tgagctgggt ccgccaggct 120
ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attagtggtc gtggtcgtag cacatactac 180
gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240
ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gcgctactac 300
aaatcttcta aagatcattg gggtcaaggt actctggtga ccgtctcctc a 351
<210> 20
<211> 333
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<220>
<221> modified_base
<222> (109)..(109)
<223> a, c, t, g, 未知或其他
<400> 20
cagtctgtgt tgacgcagcc gccctcactg tctggggccc cagggcagag ggtcaccatc 60
tcttgttccg gaagcaggtc caacatcgga actaattatg tatcctggna ccagcaactc 120
ccaggaacgg cccccaaact cctcatctat aggaatcatc agtggccctc aggggtccct 180
gaccgattca ctggctccaa gtctggcacc tcagcctccc tggccatcag tgggctccgg 240
tccgaggatg aggctgatta ctactgtgca gcatgggatg acaatttgag tggtgtggtg 300
ttcggcggag ggaccaagct gaccgtccta ggt 333
<210> 21
<211> 121
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 21
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Gln Arg Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Arg Val Ser Cys Lys Ala Ile Ala Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Pro Glu Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Pro Lys Ser Gly Arg Thr Gln Tyr Ala Pro Lys Phe
50 55 60
Gln Asp Arg Val Thr Leu Ala Arg Glu Thr Pro Ile Ser Thr Ala Ser
65 70 75 80
Met Glu Leu Arg Gly Leu Thr Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Val Tyr Gly Tyr Ser Arg Trp Ser Gly Phe Asp Leu Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 22
<211> 111
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 22
Gln Ala Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn
20 25 30
Tyr Val Tyr Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu
35 40 45
Ile Tyr Arg Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg
65 70 75 80
Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu
85 90 95
Ser Gly Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly
100 105 110
<210> 23
<211> 363
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 23
caggtccagc tggtgcagtc tggggctgag gtgcagaggc ctggggcctc agtgagggtc 60
tcctgcaagg ctattgcgta caccttcacc gactactata tccactgggt gcgacaggcc 120
cctggacaag ggcctgagtg gatggggtgg atcaacccta aaagtggtcg cacacagtat 180
gcaccgaagt ttcaagacag ggtcaccctg gccagggaga cgcccatcag cacagcctcc 240
atggagctgc gcggactgac atctgacgac acggccgtgt attactgtgc gcgcgtttac 300
ggttactctc gttggtctgg tttcgatctg tggggtcaag gtactctggt gaccgtctcc 360
tca 363
<210> 24
<211> 333
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 24
caggctgtgc tgactcagcc accctcagcg tctgggaccc ccgggcagag ggtcaccatc 60
tcttgttctg gaagcagctc caacatcgga agtaattatg tatactggta ccagcagctc 120
ccaggaacgg cccccaaact cctcatctat aggaataatc agcggccctc aggggtccct 180
gaccgattct ctggctccaa gtctggcacc tcagcctccc tggccatcag tgggctccgg 240
tccgaggatg aggctgatta ttactgtgca gcatgggatg acagcctgag tggttatgtc 300
ttcggaactg ggaccaaggt caccgtccta ggt 333
<210> 25
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 25
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Gln Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Gln Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Thr Tyr
20 25 30
Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ile Ile Asn Pro Asn Gly Gly Gly Thr Phe Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Asp Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Gly Thr Val Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly His Lys Val Tyr Lys Ser His Pro Thr Gly Gly Tyr Asp
100 105 110
Arg Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 26
<211> 111
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 26
Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Arg Asp Val Gly Gly Tyr
20 25 30
Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln Tyr Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Met Ile Tyr Glu Val Ser Lys Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ser
85 90 95
Ser Thr Leu Asp Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly
100 105 110
<210> 27
<211> 372
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 27
caggtgcagc tggtgcaatc tggggctgag gtgaagcagc ctggggcctc agtgaaggtt 60
tcctgccagg catctggata caccttcacc acttattata tgcactgggt gcgacaggcc 120
cctggacaag ggcttgagtg gatgggaata atcaacccta atggtggtgg cacattctac 180
gcacagaagt tccaggacag agtcaccatg accagggaca cgtccacggg cacagtctac 240
atggaactga gcagcctgag atctgacgac actgccgtgt attactgtgc gcgcggtcat 300
aaagtttaca aatctcatcc gactggtggt tacgatcgtt ggggtcaagg tactctggtg 360
accgtctcct ca 372
<210> 28
<211> 333
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 28
caatctgccc tgactcagcc tgcctccgtg tctgggtctc ctggacagtc gatcaccatc 60
tcctgcactg gaaccagccg tgacgttggt ggttataact atgtctcctg gtaccaacag 120
tacccaggca aagcccccaa actcatgatt tatgaggtca gtaagcggcc ctcaggggtt 180
tctaatcgct tctctggctc caagtctggc aacacggcct ccctgaccat ctctgggctc 240
caggctgagg acgaggctga ttattactgc agctcatata ccagtagcag cactttagac 300
ttcggaactg ggaccaaggt caccgtccta ggt 333
<210> 29
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 29
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Gly Ile Ile Pro Ile Phe Gly Thr Ala Lys Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Ser His Val Ala Trp Ser Leu Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 30
<211> 111
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 30
Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn
20 25 30
Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu
35 40 45
Ile Tyr Arg Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg
65 70 75 80
Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu
85 90 95
Ser Gly Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly
100 105 110
<210> 31
<211> 357
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 31
gaggtccagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60
tcctgcaagg cttctggagg caccttcagc agctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120
cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg attatcccta tctttggtac agcaaaatat 180
gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aatccacgag cacagcctac 240
atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gcgctctcat 300
gttgcttggt ctctgctgga ttactggggt caaggtactc tggtgaccgt ctcctca 357
<210> 32
<211> 333
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 32
tcctatgagc tgactcagcc accctcagcg tctgggaccc ccgggcagag ggtcaccatc 60
tcttgttctg gaagcagctc caacatcgga agtaattatg tatcctggta ccagcagctc 120
ccaggaacgg cccccaaact cctcatctat aggaataatc agcggccctc aggggtccct 180
gaccgattct ctggctccaa gtctggcacc tcagcctccc tggccatcag tgggctccgg 240
tccgaggatg aggctgatta ttactgtgca gcatgggatg acagcctgag tggtgtggta 300
ttcggcggag ggaccaagct gaccgtccta ggt 333
<210> 33
<211> 120
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 33
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Trp Met Asn Pro Asn Ser Gly Asn Thr Gly Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asn Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Gln Ser Tyr Lys Gly Ser Gln Ser Asp Ser Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 34
<211> 111
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 34
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn
20 25 30
Tyr Val Tyr Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu
35 40 45
Ile Tyr Arg Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg
65 70 75 80
Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu
85 90 95
Ser Gly Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly
100 105 110
<210> 35
<211> 360
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 35
caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc agtgaaggtc 60
tcctgcaagg cttctggagg caccttcagc agctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120
cctggacaag ggcttgagtg gatgggatgg atgaacccta acagtggtaa cacaggctat 180
gcacagaagt tccagggcag agtcaccatg accaggaaca cctccataag cacagcctac 240
atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gcgctaccag 300
tcttacaaag gttctcagtc tgattcttgg ggtcaaggta ctctggtgac cgtctcctca 360
<210> 36
<211> 333
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 36
cagtctgtgt tgacgcagcc accctcagcg tctgggaccc ccgggcagag ggtcaccatc 60
tcttgttctg gaagcagctc caacatcgga agtaattatg tatactggta ccagcagctc 120
ccaggaacgg cccccaaact cctcatctat aggaataatc agcggccctc aggggtccct 180
gaccgattct ctggctccaa gtctggcacc tcagcctccc tggccatcag tgggctccgg 240
tccgaggatg aggctgatta ttactgtgca gcatgggatg acagcctgag tggttgggtg 300
ttcggcggag ggaccaagct gaccgtccta ggt 333
<210> 37
<211> 127
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 37
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ile Ile Asn Pro Ser Gly Gly Ser Thr Ser Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Gly Ser Lys Lys Trp Ser Gly Glu Lys Trp Arg Arg Glu
100 105 110
Asn Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 38
<211> 111
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 38
Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr
20 25 30
Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Met Ile Tyr Asp Val Ser Lys Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Arg Ser
85 90 95
Ser Thr Glu Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly
100 105 110
<210> 39
<211> 381
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 39
gaggtccagc tggtacagtc tggggctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtt 60
tcctgcaagg catctggata caccttcacc agctactata tgcactgggt gcgacaggcc 120
cctggacaag ggcttgagtg gatgggaata atcaacccta gtggtggtag cacaagctac 180
gcacagaagt tccagggcag agtcaccatg accagggaca cgtccacgag cacagtctac 240
atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gcgcggtggt 300
tctaaaaaat ggtctggtga aaaatggcgt cgtgaaaact tcgattactg gggtcaaggt 360
actctggtga ccgtctcctc a 381
<210> 40
<211> 333
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 40
caatctgccc tgactcagcc tgcctccgtg tctgggtctc ctggacagtc gatcaccatc 60
tcctgcactg gaaccagcag tgacgttggt ggttataact atgtctcctg gtaccaacag 120
cacccaggca aagcccccaa actcatgatt tatgatgtca gtaagcggcc ctcaggggtt 180
tctaatcgct tctctggctc caagtctggc aacacggcct ccctgaccat ctctgggctc 240
caggctgagg acgaggctga ttattactgc agctcatata caagaagcag cactgaggta 300
ttcggcggag ggaccaagct gaccgtccta ggt 333
<210> 41
<211> 113
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 41
Gln Met Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Glu Tyr Thr Phe Thr Arg His
20 25 30
Ile Leu His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Ser Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Pro Gly Asn Gly Asn Thr Lys Tyr Ser Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Val Arg Val Thr Phe Thr Arg Asp Thr Ser Ala Ser Thr Val Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Leu Pro Asp Gln Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser
100 105 110
Ser
<210> 42
<211> 110
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 42
Ser Tyr Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn
20 25 30
Thr Val Asn Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu
35 40 45
Ile Tyr Arg Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg
65 70 75 80
Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu
85 90 95
Ser Gly Leu Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly
100 105 110
<210> 43
<211> 339
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 43
cagatgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtt 60
tcctgcaagg cttctgaata caccttcact aggcatattc tacattgggt gcgccaggct 120
cccggacaaa gccttgagtg gatgggatgg atcaacccag gcaatggtaa tacaaaatat 180
tcacagaagt tccaggtcag agtcaccttt accagggaca catccgcgag cacagtctat 240
atggagctga gcagcctgag atctgaagac acggccgtgt attactgtgc gcgcctgccg 300
gatcagtggg gtcaaggtac tctggtgacc gtctcctca 339
<210> 44
<211> 330
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 44
tcctatgtgc tgactcagcc accctcagcg tctgggaccc ccgggcagag ggtcaccatc 60
tcttgttctg gaagcagctc caacatcgga agtaatactg taaactggta ccagcagctc 120
ccaggaacgg cccccaaact cctcatctat aggaataatc agcggccctc aggggtccct 180
gaccgattct ctggctccaa gtctggcacc tcagcctccc tggccatcag tgggctccgg 240
tccgaggatg aggctgatta ttactgtgca gcatgggatg acagcctgag tggtctcttc 300
ggaactggga ccaaggtcac cgtcctaggt 330
<210> 45
<211> 114
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 45
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Arg Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Gly Asp Tyr
20 25 30
Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Gly Ile Asn Trp Asn Gly Gly Ser Thr Gly Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Ser Lys Gln Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val
100 105 110
Ser Ser
<210> 46
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 46
Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Arg Asp Ala Gly Gly Tyr
20 25 30
Asn Tyr Phe Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Leu Ile Tyr Glu Val Thr Lys Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Lys Thr Ala Ser Leu Thr Val Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Asp Asp Glu Ala Val Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Gly Gly Ser
85 90 95
Asn Asn Phe Arg Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly
100 105 110
<210> 47
<211> 342
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 47
gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggt gtggtacggc ctggggggtc cctgagactc 60
tcctgtgcag cctctggatt cacctttggt gattatggca tgagctgggt ccgccaagct 120
ccagggaagg ggctggagtg ggtctctggt attaattgga atggtggtag cacaggttat 180
gcagactctg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca acgccaagaa ctccctgtat 240
ctgcaaatga acagtctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gcgctctaaa 300
caggattact ggggtcaagg tactctggtg accgtctcct ca 342
<210> 48
<211> 336
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 48
cagtctgccc tgactcagcc tccctccgcg tccgggtctc ctggacagtc agtcaccatc 60
tcctgcactg gaaccagcag ggacgctggt ggttataatt atttctcctg gtaccaacaa 120
cacccaggca aagcccccaa actcctgatt tatgaggtca ctaagcggcc ctcaggggtc 180
cctgatcgct tctctggctc caagtctggc aagacggcct ccctgaccgt ctctgggctc 240
caggctgacg atgaggctgt atattactgc agctcatatg gaggcagcaa caactttcgg 300
gtgttcggcg gagggaccaa gctgaccgtc ctaggt 336
<210> 49
<211> 114
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 49
Glu Val Gln Leu Val Glu Thr Gly Gly Asn Leu Val Gln Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ser Phe Ser Gly Thr
20 25 30
Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Thr Ile Ser Ser Thr Gly Arg Ser Thr Tyr Tyr Arg Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Gly Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Val Ser Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val
100 105 110
Ser Ser
<210> 50
<211> 113
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 50
Gln Ser Val Val Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly
20 25 30
Tyr Asp Val His Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Leu Ile Tyr Gly Asn Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Ser Ser
85 90 95
Leu Ser Gly Ser Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105 110
Gly
<210> 51
<211> 342
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 51
gaggtgcagc tggtggagac tgggggaaac ttggtacagc cgggggcgtc cctgagactc 60
tcctgtgcag cctctggatt cagctttagt ggcactgcca tgcactgggt ccgccaggct 120
ccagggaagg ggctggaatg ggtctcgact attagtagta ctgggcgtag cacatactac 180
agagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240
ctgcaaatga acagcctgag aggcgaggac acggccgtat attactgtgc gcgcgtttct 300
ttcgattact ggggtcaagg tactctggtg accgtctcct ca 342
<210> 52
<211> 339
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 52
cagtctgtcg tgacgcagcc gccctcagtg tctggggccc cagggcagag ggtcaccatc 60
tcctgcactg ggagcagctc caacatcggg gcaggttatg atgtacactg gtaccagcag 120
cttccaggaa cagcccccaa actcctcatc tatggtaaca gcaatcggcc ctcaggggtc 180
cctgaccgat tctctggctc caagtctggc acctcagcct ccctggccat cactgggctc 240
caggctgagg atgaggctga ttattactgc cagtcctatg acagcagcct gagtggctcc 300
tacgtcttcg gaactgggac caagctgacc gtcctaggt 339
<210> 53
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 53
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Ala Phe Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Met Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Thr Ile Ser Gly Arg Gly Arg Ser Thr Phe Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Tyr His Ala Gly Ala Phe Asp Leu Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 54
<211> 111
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 54
Gln Ser Val Val Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr
20 25 30
Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Met Ile Tyr Asp Val Ser Lys Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ser
85 90 95
Ser Thr Leu Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly
100 105 110
<210> 55
<211> 354
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 55
gaggtgcagc tggtggagtc tgggggagcc tttgtacagc ctggggggtc cctgagactc 60
tcctgtgcag cctctggatt cacctttagc agctatgcca tgacctgggt ccgccaggct 120
ccagggaagg gcctggaatg ggtctcgact attagtggtc gtggtcgtag cacattctac 180
gcagactccg tgaagggccg gtttaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctatat 240
ctgcaaatga acagtctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gcgctactac 300
catgctggtg ctttcgatct gtggggtcaa ggtactctgg tgaccgtctc ctca 354
<210> 56
<211> 333
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 56
cagtctgtcg tgacgcagcc tgcctccgtg tctgggtctc ctggacagtc gatcaccatc 60
tcctgcactg gaaccagcag tgacgttggt ggttataact atgtctcctg gtaccaacag 120
cacccaggca aagcccccaa actcatgatt tatgatgtca gtaagcggcc ctcaggggtt 180
tctaatcgct tctctggctc caagtctggc aacacggcct ccctgaccat ctctgggctc 240
caggctgagg acgaggctga ttattactgc agctcatata caagcagcag cactttggta 300
ttcggcggag ggaccaagct gaccgtccta ggt 333
<210> 57
<211> 114
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 57
Gln Met Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Asn Arg Tyr
20 25 30
Ala Ile Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Ser Ala Tyr Asn Gly Asn Ser His Tyr Ala Gln Lys Leu
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Gly Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Arg Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Met Ala Tyr Asp Ser Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val
100 105 110
Ser Ser
<210> 58
<211> 111
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 58
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Leu Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Asn Asp Val Gly Ala Tyr
20 25 30
Lys Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln Tyr Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Ile Leu Tyr Asp Val Phe Lys Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Asp Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Phe Ser Leu Thr Ser Ser
85 90 95
Asn Thr Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly
100 105 110
<210> 59
<211> 342
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 59
cagatgcagc tggtgcagtc tggagctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc 60
tcctgcaagg cttctggtta cacctttaac agatatgcta tcacctgggt gcgacaggcc 120
cctggacaag gccttgagtg gatgggatgg atcagcgctt acaatggtaa ttcacactat 180
gcacagaagc tccagggcag agtcaccatg accacagaca catccacggg cacagcctat 240
atggagctga ggaggctgag atctgacgac acggccgtgt attactgtgc gcgcatggct 300
tacgattctt ggggtcaagg tactctggtg accgtctcct ca 342
<210> 60
<211> 333
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 60
cagtctgtgt tgacgcagcc tgcctccgtg tctgggtctc ctggacagtc gctcaccatc 60
tcctgcactg gaaccagcaa tgacgttggt gcttataagt atgtctcctg gtatcaacag 120
tacccaggca aagcccccaa actcatactt tatgatgtct ttaagcggcc ctcaggggtc 180
tctaatcgct tctctggctc caagtctgac aacacggcct ccctgaccat ctctgggctc 240
caggctgagg acgaggctga ttattactgc ttctcactta caagcagtaa cacttatgtc 300
ttcggaactg ggaccaaggt caccgtccta ggt 333
<210> 61
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 61
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Tyr Met Ser Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Tyr Ile Ser Ser Ser Gly Ser Thr Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Tyr Gly Lys Ala Tyr Asp Gln Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 62
<211> 111
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 62
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Arg Ser Asn Val Gly Gly Asn
20 25 30
Tyr Val Phe Trp Tyr Gln Gln Val Pro Gly Ala Thr Pro Lys Leu Leu
35 40 45
Ile Tyr Arg Ser Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ala
50 55 60
Gly Ser Lys Ser Gly Ser Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg
65 70 75 80
Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Thr Trp Asp Asp Ser Leu
85 90 95
Ser Gly Phe Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly
100 105 110
<210> 63
<211> 351
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 63
gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtcaagc ctggagggtc cctgagactc 60
tcctgtgcag cctctggatt caccttcagt gactactaca tgagctggat ccgccaggct 120
ccagggaagg ggctggagtg ggtttcatac attagtagta gtggtagtac catatactac 180
gcagactctg tgaagggccg attcaccatc tccagggaca acgccaagaa ctcactgtat 240
ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gcgcggttac 300
ggtaaagctt acgatcagtg gggtcaaggt actctggtga ccgtctcctc a 351
<210> 64
<211> 333
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 64
cagtctgtgt tgactcagcc accctcagcg tctgggaccc ccggacagag ggtcaccatc 60
tcttgttctg gaagcaggtc caacgtagga ggtaattatg tattttggta ccagcaagtc 120
cccggagcga cccccaaact cctcatctat aggagtaatc agcggccctc gggggtccct 180
gaccgattcg ctggctccaa gtctggctcc tcagcctccc tggccatcag tggactccgg 240
tccgaggatg aggctgatta ttactgtgca acatgggatg acagcctgag tggttttgtc 300
ttcggaactg ggaccaaggt caccgtccta ggt 333
<210> 65
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 65
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Ser His
20 25 30
Ser Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ser Ile Ser Ser Asp Ser Thr Tyr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Ser Gly Gly Gln Trp Lys Tyr Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 66
<211> 110
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 66
Ser Ser Glu Leu Thr Gln Asp Pro Ala Val Ser Val Ala Leu Gly Gln
1 5 10 15
Thr Val Arg Ile Thr Cys Gln Gly Asp Ser Leu Arg Ser Tyr Tyr Ala
20 25 30
Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Ile Tyr
35 40 45
Gly Lys Asn Asn Arg Pro Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Ser Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Thr Gly Ala Gln Ala Glu
65 70 75 80
Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Asn Ser Arg Asp Ser Ser Gly Asn Pro
85 90 95
Pro Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly
100 105 110
<210> 67
<211> 357
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 67
caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ctggtccacc ctggggggtc cctgagactc 60
tcctgtgcag cctctggatt caccttcaga agccatagca tgaactgggt ccgccaggct 120
ccagggaagg ggctggagtg ggtctcatcc attagtagtg atagtactta cacatactac 180
gcagactcag tgaagggccg attcaccatc tccagagaca acgccaagaa ctcactgtat 240
ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gcgctctggt 300
ggtcagtgga aatactacga ttactggggt caaggtactc tggtgaccgt ctcctca 357
<210> 68
<211> 330
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 68
tcttctgagc tgactcagga ccctgctgtg tctgtggcct tgggacagac agtcaggatc 60
acatgccaag gagacagcct cagaagctat tatgcaagct ggtaccagca gaagccagga 120
caggcccctg tacttgtcat ctatggtaaa aacaaccggc cctcagggat cccagaccga 180
ttctctggct ccagctcagg aaacacagct tccttgacca tcactggggc tcaggcggaa 240
gatgaggctg actattactg taactcccgg gacagcagtg gtaacccccc tgtggtattc 300
ggcggaggga ccaagctgac cgtcctaggt 330
<210> 69
<211> 116
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 69
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Ile Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr
20 25 30
Ala Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Thr Ile Asn Gly Arg Gly Ser Ser Thr Ile Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Ile Ser Arg Gly Leu Gly Asp Ser Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Leu Val Thr Val
115
<210> 70
<211> 111
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 70
Gln Ser Val Val Thr Gln Pro Pro Ser Met Ser Ala Ala Pro Gly Gln
1 5 10 15
Gln Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Gly Asn Ser Asn Ile Glu Arg Asn
20 25 30
Tyr Val Ser Trp Tyr Leu Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Val
35 40 45
Ile Phe Asp Asn Asp Arg Arg Pro Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Thr Leu Gly Ile Thr Gly Leu Gln
65 70 75 80
Thr Gly Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gly Thr Trp Asp Ser Ser Leu
85 90 95
Arg Gly Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly
100 105 110
<210> 71
<211> 354
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 71
gaggtgcagc tggtggagtc cgggggaggc ttgatacagc ctggggggtc cctgagactc 60
tcctgtgcag cctctggatt cacctttagc aactatgcca tgaactgggt ccgccaggct 120
ccagggaagg ggctggagtg ggtctcaact attaatggtc gtggtagtag tacaatctac 180
gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240
ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acagccacgt attactgtgc gcgctacatc 300
tctcgtggtc tgggtgattc ttggggtcaa ggtactctgg tgaccgtctc ctca 354
<210> 72
<211> 333
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 72
cagtctgtcg tgacgcagcc gccctcaatg tctgcggccc caggacagca agtcaccatc 60
tcctgctctg gaggcaactc caacattgag agaaattatg tatcctggta cctccagctc 120
cctggaacag cccccaaact cgtcattttt gacaatgata ggcgaccctc agggattcct 180
gaccgattct ctggctccaa gtctggcacg tcagccaccc tgggcatcac cggactccag 240
actggggacg aggccgatta ttactgcgga acatgggata gcagcctgag aggttgggtg 300
ttcggcggag ggaccaagct gaccgtccta ggt 333
<210> 73
<211> 116
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 73
Gln Met Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ile Ile Asn Pro Ser Gly Gly Ser Thr Ser Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Ala Gly Met Gly Met Asp Thr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser
115
<210> 74
<211> 111
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 74
Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr
20 25 30
Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Met Ile Tyr Glu Val Ser Lys Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Val Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Ala Gly Ser
85 90 95
Asn Thr Leu Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly
100 105 110
<210> 75
<211> 348
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 75
cagatgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtt 60
tcctgcaagg catctggata caccttcacc agctactata tgcactgggt gcgacaggcc 120
cctggacaag ggcttgagtg gatgggaata atcaacccta gtggtggtag cacaagctac 180
gcacagaagt tccagggcag agtcaccatg accagggaca cgtccacgag cacagtctac 240
atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gcgcgctggt 300
atgggtatgg atacttgggg tcaaggtact ctggtgaccg tctcctca 348
<210> 76
<211> 333
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 76
cagtctgccc tgactcagcc tccctccgcg tccgggtctc ctggacagtc agtcaccatc 60
tcctgcactg gaaccagcag tgacgttggt ggttataact atgtctcctg gtaccaacag 120
cacccaggca aagcccccaa actcatgatt tatgaggtca gtaagcggcc ctcaggggtc 180
cctgatcgct tctctggctc caagtctggc aacacggcct ccctgaccgt ctctgggctc 240
caggctgagg atgaggctga ttattactgc agctcatatg caggcagcaa caccttggtg 300
ttcggcggag ggaccaagct gaccgtccta ggt 333
<210> 77
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 77
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Arg Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ala Tyr
20 25 30
Ser Leu His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Pro Ser Ser Gly Gly Ala Val Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Gly Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asn Val Gly Gly Gln Ala Asp Asp Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 78
<211> 111
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 78
Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Ile Gly Gly Tyr
20 25 30
Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Met Ile Tyr Glu Val Asn Lys Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Val Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ser Phe Ala Gly Arg
85 90 95
Lys Thr Leu Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly
100 105 110
<210> 79
<211> 351
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 79
caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc 60
tcctgcaggg cttctggata caccttcacc gcctactctt tacactgggt gcgacaggcc 120
cctggacaag ggcttgagtg gatgggatgg atcaacccta gcagtggtgg cgcagtttat 180
gcacagaaat ttcagggtag ggtcaccatg accagggaca cgtccatcag cacagcctac 240
atggagctga gtggcctgag atctgacgac acggccgtgt attactgtgc gcgcaacgtt 300
ggtggtcagg ctgatgactg gggtcaaggt actctggtga ccgtctcctc a 351
<210> 80
<211> 333
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 80
caatctgccc tgactcagcc tccctccgcg tccgggtctc ctggacagtc agtcaccatc 60
tcctgcactg gaaccagcag tgacattggt ggttataact atgtctcctg gtaccaacag 120
cacccaggca aagcccccaa actcatgatt tatgaggtca ataagcggcc ctcaggggtc 180
cctgatcgct tctcgggctc caagtctggc aacacggcct ccctgaccgt ctctgggctc 240
caggctgagg atgaggctga ttattactgc gcctcatttg cgggcaggaa gacattggtc 300
ttcggcggag ggaccaagct gaccgtccta ggt 333
<210> 81
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 81
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Arg Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ala Tyr
20 25 30
Ser Leu His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Pro Ser Ser Gly Gly Ala Val Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
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65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Gly Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asn Val Gly Gly His Ala Asp Asp Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 82
<211> 111
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 82
Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Thr Asp Ile Gly Gly Tyr
20 25 30
Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln His His Pro Ser Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Met Ile Tyr Glu Val Asn Lys Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Val Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ser Phe Ala Gly Arg
85 90 95
Lys Thr Leu Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly
100 105 110
<210> 83
<211> 351
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 83
caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaaaaagc ctggggcctc agtgaaagtc 60
tcctgcaggg cttctggata caccttcacc gcctactctt tacactgggt gcgacaggcc 120
cctggacaag ggcttgagtg gatgggatgg atcaacccta gcagtggtgg cgcagtttat 180
gcacagaaat ttcagggtag ggtcaccatg accagggaca cgtccatcag cacagcctac 240
atggagctga gtggcctgag atctgacgac acggccgtgt attactgtgc gcgcaacgtt 300
ggtggtcacg ctgatgactg gggtcaaggt actctggtga ccgtctcctc a 351
<210> 84
<211> 333
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 84
caatctgccc tgactcagcc tccctccgcg tccgggtctc ctggacagtc agtcaccatc 60
tcctgcactg gaaccagcac tgacattggt ggttataact atgtctcctg gtaccaacac 120
cacccaagca aagcccccaa actcatgatt tatgaggtca ataagcggcc ctcaggggtc 180
cctgatcgct tctcgggctc caagtctggc aacacggcct ccctgaccgt ctctgggctc 240
caggctgagg atgaggctga ttattactgc gcctcatttg cgggcaggaa gacattggtc 300
ttcggcggag ggaccaagct gaccgtccta ggt 333
<210> 85
<211> 129
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 85
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asn Thr Tyr
20 25 30
Gly Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Ser Ala Asn Asn Gly His Thr Lys Ser Ala Gln Arg Phe
50 55 60
Gln Asp Arg Val Ala Met Ala Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Arg Ser Leu Lys Phe Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Gly Tyr His His Gln Met Gln Arg Tyr Tyr Lys Ala Thr
100 105 110
Ser Val Tyr Ser Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser
115 120 125
Ser
<210> 86
<211> 111
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 86
Gln Ser Val Val Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Ala Ala Pro Gly Gln
1 5 10 15
Lys Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Asn Asn
20 25 30
Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu
35 40 45
Ile Tyr Asp Asn Asn Lys Arg Pro Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Thr Leu Gly Ile Thr Gly Leu Gln
65 70 75 80
Thr Gly Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gly Thr Trp Asp Ser Ser Leu
85 90 95
Ser Gly Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly
100 105 110
<210> 87
<211> 387
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 87
caggtccagc tggtgcagtc tggaggtgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc 60
tcctgcaagg cttctggttt cacctttaac acctatggca tcagttgggt gcgacaggcc 120
cctggacaag ggcttgagtg gatgggatgg atcagcgcta acaatggtca cacaaagtct 180
gcacagaggt tccaggacag agtcgccatg gccacagaca catccacgag cacggcctac 240
atggagctga ggagcctgaa atttgacgac acggccgtgt attactgtgc gcgcggtggt 300
taccatcatc agatgcagcg gtactacaaa gctacttctg tttactctga ttactggggt 360
caaggtactc tggtgaccgt ctcctca 387
<210> 88
<211> 333
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 88
cagtctgtcg tgacgcagcc gccctcagtg tctgcggccc caggacagaa ggtcaccatc 60
tcctgctctg gaagcagctc caacattggg aataattatg tatcctggta ccagcaactc 120
ccaggaacag cccccaaact cctcatttat gacaataata agcgaccctc agggattcct 180
gaccgattct ctggctccaa gtctggcacg tctgccaccc tgggcatcac cggactccag 240
actggggacg aggccgatta ttactgcgga acatgggata gcagcctgag tggtgtggta 300
ttcggcggag ggaccaagct gaccgtccta ggt 333
<210> 89
<211> 116
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 89
Gln Met Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ile Ile Asn Pro Ser Gly Gly Ser Ser Ser Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Ala Gly Met Gly Met Asp Thr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser
115
<210> 90
<211> 111
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 90
Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr
20 25 30
Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Met Ile Tyr Glu Val Ser Lys Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Val Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Ala Gly Ser
85 90 95
Asn Thr Leu Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly
100 105 110
<210> 91
<211> 348
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 91
cagatgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtt 60
tcctgcaagg catctggata caccttcacc agctactata tgcactgggt gcgacaggcc 120
cctggacaag ggcttgagtg gatgggaata atcaacccta gtggtggtag ctcaagctac 180
gcacagaagt tccagggcag agtcaccatg accagggaca cgtccacgag cacagtctac 240
atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gcgcgctggt 300
atgggtatgg atacttgggg tcaaggtact ctggtgaccg tctcctca 348
<210> 92
<211> 333
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 92
cagtctgccc tgactcagcc tccctccgcg tccgggtctc ctggacagtc agtcaccatc 60
tcctgcactg gaaccagcag tgacgttggt ggttataact atgtctcctg gtaccaacag 120
cacccaggca aagcccccaa actcatgatt tatgaggtca gtaagcggcc ctcaggggtc 180
cctgatcgct tctctggctc caagtctggc aacacggcct ccctgaccgt ctctgggctc 240
caggctgagg atgaggctga ttattactgc agctcatatg caggcagcaa caccttggtg 300
ttcggcggag ggaccaagct gaccgtccta ggt 333
<210> 93
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 93
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ile Ile Asn Pro Ser Gly Gly Ser Thr Ser Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Val Ile Ser Gly Phe Asp Ser Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 94
<211> 111
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 94
Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr
20 25 30
Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln Ser Pro Gly Lys Ala Pro Arg Leu
35 40 45
Met Ile Tyr Gly Val Ser Lys Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Val Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Ala Gly Val
85 90 95
Asn Asn Leu Met Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly
100 105 110
<210> 95
<211> 351
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 95
caggtgcagc tggtgcaatc tggggctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtt 60
tcctgcaagg catctggata caccttcacc agctactata tgcactgggt gcgacaggcc 120
cctggacaag ggcttgagtg gatgggaata atcaacccta gtggtggtag cacaagctac 180
gcacagaagt tccagggcag agtcaccatg accagggaca cgtccacgag cacagtctac 240
atggagctga gcagcctgag atctgaggac actgccgtgt attactgtgc gcgcgacgtt 300
atctctggtt tcgattcttg gggtcaaggt actctggtga ccgtctcctc a 351
<210> 96
<211> 333
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 96
cagtctgccc tgactcagcc tgcctccgtg tctgggtctc ctggacagtc gatcaccatc 60
tcctgcactg gaaccagcag tgacgttggt ggttataact atgtctcctg gtaccaacaa 120
tccccaggca aagcccccag actcatgatt tatggggtca gtaagcggcc ctctggggtc 180
cctgatcgct tctctggctc caagtctggc aacacggcct ccctgaccgt ctctgggctc 240
caggctgaag atgaggctga ttattactgc agctcatatg caggcgtcaa caatttaatg 300
ttcggcggag ggaccaagct gaccgtccta ggt 333
<210> 97
<211> 345
<212> PRT
<213> 智人
<400> 97
Met Tyr Lys Asp Cys Ile Glu Ser Thr Gly Asp Tyr Phe Leu Leu Cys
1 5 10 15
Asp Ala Glu Gly Pro Trp Gly Ile Ile Leu Glu Ser Leu Ala Ile Leu
20 25 30
Gly Ile Val Val Thr Ile Leu Leu Leu Leu Ala Phe Leu Phe Leu Met
35 40 45
Arg Lys Ile Gln Asp Cys Ser Gln Trp Asn Val Leu Pro Thr Gln Leu
50 55 60
Leu Phe Leu Leu Ser Val Leu Gly Leu Phe Gly Leu Ala Phe Ala Phe
65 70 75 80
Ile Ile Glu Leu Asn Gln Gln Thr Ala Pro Val Arg Tyr Phe Leu Phe
85 90 95
Gly Val Leu Phe Ala Leu Cys Phe Ser Cys Leu Leu Ala His Ala Ser
100 105 110
Asn Leu Val Lys Leu Val Arg Gly Cys Val Ser Phe Ser Trp Thr Thr
115 120 125
Ile Leu Cys Ile Ala Ile Gly Cys Ser Leu Leu Gln Ile Ile Ile Ala
130 135 140
Thr Glu Tyr Val Thr Leu Ile Met Thr Arg Gly Met Met Phe Val Asn
145 150 155 160
Met Thr Pro Cys Gln Leu Asn Val Asp Phe Val Val Leu Leu Val Tyr
165 170 175
Val Leu Phe Leu Met Ala Leu Thr Phe Phe Val Ser Lys Ala Thr Phe
180 185 190
Cys Gly Pro Cys Glu Asn Trp Lys Gln His Gly Arg Leu Ile Phe Ile
195 200 205
Thr Val Leu Phe Ser Ile Ile Ile Trp Val Val Trp Ile Ser Met Leu
210 215 220
Leu Arg Gly Asn Pro Gln Phe Gln Arg Gln Pro Gln Trp Asp Asp Pro
225 230 235 240
Val Val Cys Ile Ala Leu Val Thr Asn Ala Trp Val Phe Leu Leu Leu
245 250 255
Tyr Ile Val Pro Glu Leu Cys Ile Leu Tyr Arg Ser Cys Arg Gln Glu
260 265 270
Cys Pro Leu Gln Gly Asn Ala Cys Pro Val Thr Ala Tyr Gln His Ser
275 280 285
Phe Gln Val Glu Asn Gln Glu Leu Ser Arg Ala Arg Asp Ser Asp Gly
290 295 300
Ala Glu Glu Asp Val Ala Leu Thr Ser Tyr Gly Thr Pro Ile Gln Pro
305 310 315 320
Gln Thr Val Asp Pro Thr Gln Glu Cys Phe Ile Pro Gln Ala Lys Leu
325 330 335
Ser Pro Gln Gln Asp Ala Gly Gly Val
340 345
<210> 98
<211> 21
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 98
Ser Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Glu Met Ala
20
<210> 99
<211> 63
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成寡核苷酸
<400> 99
tctagaggtg gtggtggtag cggcggcggc ggctctggtg gtggtggatc cctcgagatg 60
gcc 63
<210> 100
<211> 252
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 100
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Ala Ala Pro Gly Gln
1 5 10 15
Lys Val Thr Ile Pro Cys Ser Gly Ser Arg Ser Asn Val Gly Asn Tyr
20 25 30
Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu
35 40 45
Ile Tyr Asp Asn Asn Lys Arg Pro Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Thr Leu Gly Ile Thr Gly Leu Gln
65 70 75 80
Thr Gly Asp Glu Ala Asp Tyr Phe Cys Gly Thr Trp Asp Gly Ser Leu
85 90 95
Ser Ala His Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly Ser
100 105 110
Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
115 120 125
Leu Glu Met Ala Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys
130 135 140
Lys Pro Gly Ala Ser Val Arg Val Ser Cys Thr Ala Ser Gly Tyr Thr
145 150 155 160
Phe Thr Ser Tyr Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly
165 170 175
Leu Glu Trp Met Gly Val Ile Asn Pro Asn Ala Gly Ser Thr Arg Tyr
180 185 190
Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Met Ser Thr Asp Thr Ser Thr
195 200 205
Ser Thr Ala Tyr Met Asp Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala
210 215 220
Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Met Tyr Arg Ser Leu Leu Phe Tyr Asp
225 230 235 240
Pro Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
245 250
<210> 101
<211> 250
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 101
Asn Phe Met Leu Thr Gln Pro His Ser Val Ser Glu Ser Pro Gly Lys
1 5 10 15
Thr Val Ser Ile Ser Cys Thr Arg Thr Ser Gly Ala Ile Ala Gly Ala
20 25 30
Tyr Val Gln Trp Phe Gln Gln Arg Pro Gly Ser Ala Pro Thr Thr Val
35 40 45
Ile Tyr Asp Asp Asn Lys Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Ile Asp Lys Ser Ser Asn Ser Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly
65 70 75 80
Leu Lys Thr Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Tyr
85 90 95
Asp Ser Ser Asn Val Leu Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105 110
Gly Ser Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
115 120 125
Gly Ser Leu Glu Met Ala Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly
130 135 140
Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly
145 150 155 160
Phe Thr Phe Ser Asn Tyr Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly
165 170 175
Lys Gly Leu Glu Trp Val Ser Ala Ile Ser Gly Ser Gly Asn Thr Tyr
180 185 190
Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser
195 200 205
Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr
210 215 220
Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Ser Val Arg Tyr Thr Asp Ile Trp
225 230 235 240
Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
245 250
<210> 102
<211> 248
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 102
Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Ala Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Tyr Ser Val Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Ser Arg Gly Gly
100 105 110
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Leu Glu Met
115 120 125
Ala Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly
130 135 140
Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Thr Ser Gly Phe Thr Phe Asn Asn
145 150 155 160
Tyr Trp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp
165 170 175
Val Ala Asn Ile Lys Gln Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser
180 185 190
Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu
195 200 205
Ser Leu Gln Leu Asn Asn Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr
210 215 220
Cys Ala Arg Ser Met Ser Thr Ala Trp Gly Tyr Asp Glu Trp Gly Gln
225 230 235 240
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
245
<210> 103
<211> 253
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 103
Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr
20 25 30
Asn Phe Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Val
35 40 45
Met Ile Tyr Asp Val Ser Lys Arg Pro Ser Gly Ile Ser Asn Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Val Glu Asp Glu Ala Glu Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Thr
85 90 95
Arg Thr Val Ile Phe Ala Gly Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly Ser
100 105 110
Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
115 120 125
Leu Glu Met Ala Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys
130 135 140
Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr
145 150 155 160
Phe Thr Ser Tyr Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly
165 170 175
Leu Glu Trp Met Gly Ile Ile Asn Pro Ser Gly Gly Ser Thr Arg Tyr
180 185 190
Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr
195 200 205
Ser Thr Val Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala
210 215 220
Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Ser Ser Arg Trp Gly Gly Trp Thr Gly
225 230 235 240
Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
245 250
<210> 104
<211> 249
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<220>
<221> MOD_RES
<222> (37)..(37)
<223> 任意氨基酸
<400> 104
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Leu Ser Gly Ala Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Arg Ser Asn Ile Gly Thr Asn
20 25 30
Tyr Val Ser Trp Xaa Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu
35 40 45
Ile Tyr Arg Asn His Gln Trp Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr
50 55 60
Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg
65 70 75 80
Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp Asn Leu
85 90 95
Ser Gly Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Ser
100 105 110
Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
115 120 125
Leu Glu Met Ala Glu Val Gln Leu Val Glu Thr Gly Gly Gly Leu Val
130 135 140
Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ser Thr
145 150 155 160
Phe Ser Ser Tyr Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly
165 170 175
Leu Glu Trp Val Ser Ala Ile Ser Gly Arg Gly Arg Ser Thr Tyr Tyr
180 185 190
Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys
195 200 205
Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala
210 215 220
Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Tyr Tyr Lys Ser Ser Lys Asp His Trp Gly
225 230 235 240
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
245
<210> 105
<211> 253
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 105
Gln Ala Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn
20 25 30
Tyr Val Tyr Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu
35 40 45
Ile Tyr Arg Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg
65 70 75 80
Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu
85 90 95
Ser Gly Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly Ser
100 105 110
Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
115 120 125
Leu Glu Met Ala Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Gln
130 135 140
Arg Pro Gly Ala Ser Val Arg Val Ser Cys Lys Ala Ile Ala Tyr Thr
145 150 155 160
Phe Thr Asp Tyr Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly
165 170 175
Pro Glu Trp Met Gly Trp Ile Asn Pro Lys Ser Gly Arg Thr Gln Tyr
180 185 190
Ala Pro Lys Phe Gln Asp Arg Val Thr Leu Ala Arg Glu Thr Pro Ile
195 200 205
Ser Thr Ala Ser Met Glu Leu Arg Gly Leu Thr Ser Asp Asp Thr Ala
210 215 220
Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Val Tyr Gly Tyr Ser Arg Trp Ser Gly Phe
225 230 235 240
Asp Leu Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
245 250
<210> 106
<211> 256
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 106
Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Arg Asp Val Gly Gly Tyr
20 25 30
Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln Tyr Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Met Ile Tyr Glu Val Ser Lys Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ser
85 90 95
Ser Thr Leu Asp Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly Ser
100 105 110
Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
115 120 125
Leu Glu Met Ala Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys
130 135 140
Gln Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Gln Ala Ser Gly Tyr Thr
145 150 155 160
Phe Thr Thr Tyr Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly
165 170 175
Leu Glu Trp Met Gly Ile Ile Asn Pro Asn Gly Gly Gly Thr Phe Tyr
180 185 190
Ala Gln Lys Phe Gln Asp Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr
195 200 205
Gly Thr Val Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala
210 215 220
Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly His Lys Val Tyr Lys Ser His Pro Thr
225 230 235 240
Gly Gly Tyr Asp Arg Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
245 250 255
<210> 107
<211> 251
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 107
Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn
20 25 30
Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu
35 40 45
Ile Tyr Arg Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg
65 70 75 80
Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu
85 90 95
Ser Gly Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Ser
100 105 110
Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
115 120 125
Leu Glu Met Ala Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys
130 135 140
Lys Pro Gly Ser Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr
145 150 155 160
Phe Ser Ser Tyr Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly
165 170 175
Leu Glu Trp Met Gly Gly Ile Ile Pro Ile Phe Gly Thr Ala Lys Tyr
180 185 190
Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr
195 200 205
Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala
210 215 220
Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Ser His Val Ala Trp Ser Leu Leu Asp Tyr
225 230 235 240
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
245 250
<210> 108
<211> 252
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 108
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn
20 25 30
Tyr Val Tyr Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu
35 40 45
Ile Tyr Arg Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg
65 70 75 80
Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu
85 90 95
Ser Gly Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Ser
100 105 110
Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
115 120 125
Leu Glu Met Ala Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys
130 135 140
Lys Pro Gly Ser Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr
145 150 155 160
Phe Ser Ser Tyr Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly
165 170 175
Leu Glu Trp Met Gly Trp Met Asn Pro Asn Ser Gly Asn Thr Gly Tyr
180 185 190
Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asn Thr Ser Ile
195 200 205
Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala
210 215 220
Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Tyr Gln Ser Tyr Lys Gly Ser Gln Ser Asp
225 230 235 240
Ser Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
245 250
<210> 109
<211> 259
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 109
Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr
20 25 30
Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Met Ile Tyr Asp Val Ser Lys Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Arg Ser
85 90 95
Ser Thr Glu Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Ser
100 105 110
Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
115 120 125
Leu Glu Met Ala Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys
130 135 140
Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr
145 150 155 160
Phe Thr Ser Tyr Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly
165 170 175
Leu Glu Trp Met Gly Ile Ile Asn Pro Ser Gly Gly Ser Thr Ser Tyr
180 185 190
Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr
195 200 205
Ser Thr Val Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala
210 215 220
Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Gly Ser Lys Lys Trp Ser Gly Glu Lys
225 230 235 240
Trp Arg Arg Glu Asn Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
245 250 255
Val Ser Ser
<210> 110
<211> 244
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 110
Ser Tyr Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn
20 25 30
Thr Val Asn Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu
35 40 45
Ile Tyr Arg Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg
65 70 75 80
Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu
85 90 95
Ser Gly Leu Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly Ser Arg
100 105 110
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Leu
115 120 125
Glu Met Ala Gln Met Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys
130 135 140
Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Glu Tyr Thr Phe
145 150 155 160
Thr Arg His Ile Leu His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Ser Leu
165 170 175
Glu Trp Met Gly Trp Ile Asn Pro Gly Asn Gly Asn Thr Lys Tyr Ser
180 185 190
Gln Lys Phe Gln Val Arg Val Thr Phe Thr Arg Asp Thr Ser Ala Ser
195 200 205
Thr Val Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val
210 215 220
Tyr Tyr Cys Ala Arg Leu Pro Asp Gln Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
225 230 235 240
Thr Val Ser Ser
<210> 111
<211> 247
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 111
Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Arg Asp Ala Gly Gly Tyr
20 25 30
Asn Tyr Phe Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Leu Ile Tyr Glu Val Thr Lys Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Lys Thr Ala Ser Leu Thr Val Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Asp Asp Glu Ala Val Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Gly Gly Ser
85 90 95
Asn Asn Phe Arg Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly
100 105 110
Ser Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly
115 120 125
Ser Leu Glu Met Ala Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val
130 135 140
Val Arg Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe
145 150 155 160
Thr Phe Gly Asp Tyr Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys
165 170 175
Gly Leu Glu Trp Val Ser Gly Ile Asn Trp Asn Gly Gly Ser Thr Gly
180 185 190
Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala
195 200 205
Lys Asn Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr
210 215 220
Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Ser Lys Gln Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
225 230 235 240
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
245
<210> 112
<211> 248
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 112
Gln Ser Val Val Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly
20 25 30
Tyr Asp Val His Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Leu Ile Tyr Gly Asn Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Ser Ser
85 90 95
Leu Ser Gly Ser Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105 110
Gly Ser Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
115 120 125
Gly Ser Leu Glu Met Ala Glu Val Gln Leu Val Glu Thr Gly Gly Asn
130 135 140
Leu Val Gln Pro Gly Ala Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly
145 150 155 160
Phe Ser Phe Ser Gly Thr Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly
165 170 175
Lys Gly Leu Glu Trp Val Ser Thr Ile Ser Ser Thr Gly Arg Ser Thr
180 185 190
Tyr Tyr Arg Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn
195 200 205
Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Gly Glu Asp
210 215 220
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Val Ser Phe Asp Tyr Trp Gly Gln
225 230 235 240
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
245
<210> 113
<211> 250
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 113
Gln Ser Val Val Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr
20 25 30
Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Met Ile Tyr Asp Val Ser Lys Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ser
85 90 95
Ser Thr Leu Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Ser
100 105 110
Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
115 120 125
Leu Glu Met Ala Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Ala Phe Val
130 135 140
Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr
145 150 155 160
Phe Ser Ser Tyr Ala Met Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly
165 170 175
Leu Glu Trp Val Ser Thr Ile Ser Gly Arg Gly Arg Ser Thr Phe Tyr
180 185 190
Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys
195 200 205
Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala
210 215 220
Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Tyr Tyr His Ala Gly Ala Phe Asp Leu Trp
225 230 235 240
Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
245 250
<210> 114
<211> 246
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 114
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Leu Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Asn Asp Val Gly Ala Tyr
20 25 30
Lys Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln Tyr Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Ile Leu Tyr Asp Val Phe Lys Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Asp Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Phe Ser Leu Thr Ser Ser
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Asn Thr Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly Ser
100 105 110
Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
115 120 125
Leu Glu Met Ala Gln Met Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys
130 135 140
Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr
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Phe Asn Arg Tyr Ala Ile Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly
165 170 175
Leu Glu Trp Met Gly Trp Ile Ser Ala Tyr Asn Gly Asn Ser His Tyr
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Ala Gln Lys Leu Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr
195 200 205
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210 215 220
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225 230 235 240
Leu Val Thr Val Ser Ser
245
<210> 115
<211> 249
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 115
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Arg Ser Asn Val Gly Gly Asn
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Tyr Val Phe Trp Tyr Gln Gln Val Pro Gly Ala Thr Pro Lys Leu Leu
35 40 45
Ile Tyr Arg Ser Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ala
50 55 60
Gly Ser Lys Ser Gly Ser Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg
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100 105 110
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Leu Glu Met Ala Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val
130 135 140
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Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
245
<210> 116
<211> 250
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 116
Ser Ser Glu Leu Thr Gln Asp Pro Ala Val Ser Val Ala Leu Gly Gln
1 5 10 15
Thr Val Arg Ile Thr Cys Gln Gly Asp Ser Leu Arg Ser Tyr Tyr Ala
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Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
245 250
<210> 117
<211> 248
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 117
Gln Ser Val Val Thr Gln Pro Pro Ser Met Ser Ala Ala Pro Gly Gln
1 5 10 15
Gln Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Gly Asn Ser Asn Ile Glu Arg Asn
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Tyr Val Ser Trp Tyr Leu Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Val
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Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
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Leu Glu Met Ala Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Ile
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225 230 235 240
Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val
245
<210> 118
<211> 248
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 118
Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr
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50 55 60
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115 120 125
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165 170 175
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195 200 205
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210 215 220
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Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
245
<210> 119
<211> 249
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 119
Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Ile Gly Gly Tyr
20 25 30
Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
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65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ser Phe Ala Gly Arg
85 90 95
Lys Thr Leu Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Ser
100 105 110
Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
115 120 125
Leu Glu Met Ala Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys
130 135 140
Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Arg Ala Ser Gly Tyr Thr
145 150 155 160
Phe Thr Ala Tyr Ser Leu His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly
165 170 175
Leu Glu Trp Met Gly Trp Ile Asn Pro Ser Ser Gly Gly Ala Val Tyr
180 185 190
Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Ile
195 200 205
Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Gly Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala
210 215 220
Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Asn Val Gly Gly Gln Ala Asp Asp Trp Gly
225 230 235 240
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
245
<210> 120
<211> 249
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 120
Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Thr Asp Ile Gly Gly Tyr
20 25 30
Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln His His Pro Ser Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Met Ile Tyr Glu Val Asn Lys Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Val Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ser Phe Ala Gly Arg
85 90 95
Lys Thr Leu Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Ser
100 105 110
Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
115 120 125
Leu Glu Met Ala Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys
130 135 140
Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Arg Ala Ser Gly Tyr Thr
145 150 155 160
Phe Thr Ala Tyr Ser Leu His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly
165 170 175
Leu Glu Trp Met Gly Trp Ile Asn Pro Ser Ser Gly Gly Ala Val Tyr
180 185 190
Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Ile
195 200 205
Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Gly Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala
210 215 220
Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Asn Val Gly Gly His Ala Asp Asp Trp Gly
225 230 235 240
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
245
<210> 121
<211> 261
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 121
Gln Ser Val Val Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Ala Ala Pro Gly Gln
1 5 10 15
Lys Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Asn Asn
20 25 30
Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu
35 40 45
Ile Tyr Asp Asn Asn Lys Arg Pro Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Thr Leu Gly Ile Thr Gly Leu Gln
65 70 75 80
Thr Gly Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gly Thr Trp Asp Ser Ser Leu
85 90 95
Ser Gly Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Ser
100 105 110
Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
115 120 125
Leu Glu Met Ala Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Glu Val Lys
130 135 140
Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Phe Thr
145 150 155 160
Phe Asn Thr Tyr Gly Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly
165 170 175
Leu Glu Trp Met Gly Trp Ile Ser Ala Asn Asn Gly His Thr Lys Ser
180 185 190
Ala Gln Arg Phe Gln Asp Arg Val Ala Met Ala Thr Asp Thr Ser Thr
195 200 205
Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Arg Ser Leu Lys Phe Asp Asp Thr Ala
210 215 220
Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Gly Tyr His His Gln Met Gln Arg Tyr
225 230 235 240
Tyr Lys Ala Thr Ser Val Tyr Ser Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
245 250 255
Val Thr Val Ser Ser
260
<210> 122
<211> 248
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 122
Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr
20 25 30
Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Met Ile Tyr Glu Val Ser Lys Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Val Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Ala Gly Ser
85 90 95
Asn Thr Leu Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Ser
100 105 110
Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
115 120 125
Leu Glu Met Ala Gln Met Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys
130 135 140
Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr
145 150 155 160
Phe Thr Ser Tyr Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly
165 170 175
Leu Glu Trp Met Gly Ile Ile Asn Pro Ser Gly Gly Ser Ser Ser Tyr
180 185 190
Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr
195 200 205
Ser Thr Val Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala
210 215 220
Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Ala Gly Met Gly Met Asp Thr Trp Gly Gln
225 230 235 240
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
245
<210> 123
<211> 249
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 123
Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr
20 25 30
Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln Ser Pro Gly Lys Ala Pro Arg Leu
35 40 45
Met Ile Tyr Gly Val Ser Lys Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Val Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Ala Gly Val
85 90 95
Asn Asn Leu Met Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Ser
100 105 110
Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
115 120 125
Leu Glu Met Ala Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys
130 135 140
Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr
145 150 155 160
Phe Thr Ser Tyr Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly
165 170 175
Leu Glu Trp Met Gly Ile Ile Asn Pro Ser Gly Gly Ser Thr Ser Tyr
180 185 190
Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr
195 200 205
Ser Thr Val Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala
210 215 220
Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Asp Val Ile Ser Gly Phe Asp Ser Trp Gly
225 230 235 240
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
245
<210> 124
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 124
Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Tyr
1 5
<210> 125
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 125
Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Tyr
1 5
<210> 126
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 126
Ala Arg Gly Met Tyr Arg Ser Leu Leu Phe Tyr Asp Pro
1 5 10
<210> 127
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 127
Arg Ser Asn Val Gly Asn Tyr Tyr
1 5
<210> 128
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 128
Asp Asn Asn
1
<210> 129
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 129
Gly Thr Trp Asp Gly Ser Leu Ser Ala His Val
1 5 10
<210> 130
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 130
Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr Ala
1 5
<210> 131
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 131
Ile Ser Gly Ser Gly Asn Thr
1 5
<210> 132
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 132
Ala Arg Gly Ser Val Arg Tyr Thr Asp Ile
1 5 10
<210> 133
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 133
Ser Gly Ala Ile Ala Gly Ala Tyr
1 5
<210> 134
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 134
Asp Asp Asn
1
<210> 135
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 135
Gln Ser Tyr Asp Tyr Asp Ser Ser Asn Val Leu
1 5 10
<210> 136
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 136
Gly Phe Thr Phe Asn Asn Tyr Trp
1 5
<210> 137
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 137
Ile Lys Gln Asp Gly Ser Glu Lys
1 5
<210> 138
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 138
Ala Arg Ser Met Ser Thr Ala Val
1 5
<210> 139
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 139
Gln Ser Ile Ser Ser Tyr
1 5
<210> 140
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 140
Ala Ala Ser
1
<210> 141
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 141
Gln Gln Ser Tyr Ser Val Pro Tyr Thr
1 5
<210> 142
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 142
Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Tyr
1 5
<210> 143
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 143
Ile Asn Pro Ser Gly Gly Ser Thr
1 5
<210> 144
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 144
Ala Arg Gly Ser Ser Arg Trp Gly Gly Trp Thr Gly Asp Tyr
1 5 10
<210> 145
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 145
Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Phe
1 5
<210> 146
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 146
Asp Val Ser
1
<210> 147
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 147
Ser Ser Tyr Thr Ser Thr Arg Thr Val Ile Phe Ala Gly Gly Thr Lys
1 5 10 15
Val Thr Val Leu
20
<210> 148
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 148
Gly Ser Thr Phe Ser Ser Tyr Ala
1 5
<210> 149
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 149
Ile Ser Gly Arg Gly Arg Ser Thr
1 5
<210> 150
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 150
Ala Arg Tyr Tyr Lys Ser Lys Asp His
1 5
<210> 151
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 151
Arg Ser Asn Ile Gly Thr Asn Tyr
1 5
<210> 152
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 152
Arg Asn His
1
<210> 153
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 153
Ala Ala Trp Asp Asp Asn Leu Ser Gly Val Val
1 5 10
<210> 154
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 154
Ala Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr Tyr
1 5
<210> 155
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 155
Ile Asn Pro Lys Ser Gly Arg Thr
1 5
<210> 156
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 156
Ala Arg Val Tyr Gly Tyr Ser Arg Trp Ser Gly Phe Asp Leu
1 5 10
<210> 157
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 157
Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn Tyr
1 5
<210> 158
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 158
Arg Asn Asn
1
<210> 159
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 159
Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu Ser Gly Tyr Val
1 5 10
<210> 160
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 160
Gly Tyr Thr Phe Thr Thr Tyr Tyr
1 5
<210> 161
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 161
Ile Asn Pro Asn Gly Gly Gly Thr
1 5
<210> 162
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 162
Ala Arg Gly His Lys Val Tyr Lys Ser His Pro Thr Gly Gly Tyr Asp
1 5 10 15
Arg
<210> 163
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 163
Ser Arg Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr
1 5
<210> 164
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 164
Glu Val Ser
1
<210> 165
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 165
Ser Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Leu Asp
1 5 10
<210> 166
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 166
Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr Ala
1 5
<210> 167
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 167
Ile Ile Pro Ile Phe Gly Thr Ala
1 5
<210> 168
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 168
Ala Arg Ser His Val Ala Trp Ser Leu Leu Asp Tyr
1 5 10
<210> 169
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 169
Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn Tyr
1 5
<210> 170
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 170
Arg Asn Asn
1
<210> 171
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 171
Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu Ser Gly Val Val
1 5 10
<210> 172
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 172
Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr Ala
1 5
<210> 173
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 173
Met Asn Pro Asn Ser Gly Asn Thr
1 5
<210> 174
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 174
Ala Arg Tyr Gln Ser Tyr Lys Gly Ser Gln Ser Asp Ser
1 5 10
<210> 175
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 175
Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn Tyr
1 5
<210> 176
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 176
Arg Asn Asn
1
<210> 177
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 177
Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu Ser Gly Trp Val
1 5 10
<210> 178
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 178
Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Tyr
1 5
<210> 179
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 179
Ile Asn Pro Ser Gly Gly Ser Thr
1 5
<210> 180
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 180
Ala Arg Gly Gly Ser Lys Lys Trp Ser Gly Glu Lys Trp Arg Arg Glu
1 5 10 15
Asn Phe Asp Tyr
20
<210> 181
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 181
Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr
1 5
<210> 182
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 182
Asp Val Ser
1
<210> 183
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 183
Ser Ser Tyr Thr Arg Ser Ser Thr Glu Val
1 5 10
<210> 184
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 184
Glu Tyr Thr Phe Thr Arg His Ile
1 5
<210> 185
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 185
Ile Asn Pro Gly Asn Gly Asn Thr
1 5
<210> 186
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 186
Ala Arg Leu Pro Asp Gln
1 5
<210> 187
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 187
Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn Thr
1 5
<210> 188
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 188
Arg Asn Asn
1
<210> 189
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 189
Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu Ser Gly Leu
1 5 10
<210> 190
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 190
Gly Phe Thr Phe Gly Asp Tyr Gly
1 5
<210> 191
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 191
Ile Asn Trp Asn Gly Gly Ser Thr
1 5
<210> 192
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 192
Ala Arg Ser Lys Gln Asp Tyr
1 5
<210> 193
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 193
Ser Arg Asp Ala Gly Gly Tyr Asn Tyr
1 5
<210> 194
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 194
Glu Val Thr
1
<210> 195
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 195
Ser Ser Tyr Gly Gly Ser Asn Asn Phe Arg Val
1 5 10
<210> 196
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 196
Gly Phe Ser Phe Ser Gly Thr Ala
1 5
<210> 197
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 197
Ile Ser Ser Thr Gly Arg Ser Thr
1 5
<210> 198
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 198
Ala Arg Val Ser Phe Asp Tyr
1 5
<210> 199
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 199
Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly Tyr Asp
1 5
<210> 200
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 200
Gly Asn Ser
1
<210> 201
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 201
Gln Ser Tyr Asp Ser Ser Leu Ser Gly Ser Tyr Val
1 5 10
<210> 202
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 202
Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Ala
1 5
<210> 203
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 203
Ile Ser Gly Arg Gly Arg Ser Thr
1 5
<210> 204
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 204
Ala Arg Tyr Tyr His Ala Gly Ala Phe Asp Leu
1 5 10
<210> 205
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 205
Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr
1 5
<210> 206
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 206
Asp Val Ser
1
<210> 207
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 207
Ser Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Leu Val
1 5 10
<210> 208
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 208
Gly Tyr Thr Phe Asn Arg Tyr Ala
1 5
<210> 209
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 209
Ile Ser Ala Tyr Asn Gly Asn Ser
1 5
<210> 210
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 210
Ala Arg Met Ala Tyr Asp Ser
1 5
<210> 211
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 211
Ser Asn Asp Val Gly Ala Tyr Lys Tyr
1 5
<210> 212
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 212
Asp Val Phe
1
<210> 213
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 213
Phe Ser Leu Thr Ser Ser Asn Thr Tyr Val
1 5 10
<210> 214
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 214
Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr Tyr
1 5
<210> 215
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 215
Ile Ser Ser Ser Gly Ser Thr Ile
1 5
<210> 216
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 216
Ala Arg Gly Tyr Gly Lys Ala Tyr Asp Gln
1 5 10
<210> 217
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 217
Arg Ser Asn Val Gly Gly Asn Tyr
1 5
<210> 218
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 218
Arg Ser Asn
1
<210> 219
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 219
Ala Thr Trp Asp Asp Ser Leu Ser Gly Phe Val
1 5 10
<210> 220
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 220
Gly Phe Thr Phe Arg Ser His Ser
1 5
<210> 221
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 221
Ile Ser Ser Asp Ser Thr Tyr Thr
1 5
<210> 222
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 222
Ala Arg Ser Gly Gly Gln Trp Lys Tyr Tyr Asp Tyr
1 5 10
<210> 223
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 223
Ser Leu Arg Ser Tyr Tyr
1 5
<210> 224
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 224
Gly Lys Asn
1
<210> 225
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 225
Asn Ser Arg Asp Ser Ser Gly Asn Pro Pro Val Val
1 5 10
<210> 226
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 226
Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr Ala
1 5
<210> 227
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 227
Ile Asn Gly Arg Gly Ser Ser Thr
1 5
<210> 228
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 228
Ala Arg Tyr Ile Ser Arg Gly Leu Gly Asp Ser
1 5 10
<210> 229
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 229
Asn Ser Asn Ile Glu Arg Asn Tyr
1 5
<210> 230
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 230
Asp Asn Asp
1
<210> 231
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 231
Gly Thr Trp Asp Ser Ser Leu Arg Gly Trp Val
1 5 10
<210> 232
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 232
Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Tyr
1 5
<210> 233
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 233
Ile Asn Pro Ser Gly Gly Ser Thr
1 5
<210> 234
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 234
Ala Arg Ala Gly Met Gly Met Asp Thr
1 5
<210> 235
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 235
Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr
1 5
<210> 236
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 236
Glu Val Ser
1
<210> 237
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 237
Ser Ser Tyr Ala Gly Ser Asn Thr Leu Val
1 5 10
<210> 238
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 238
Gly Tyr Thr Phe Thr Ala Tyr Ser
1 5
<210> 239
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 239
Ile Asn Pro Ser Ser Gly Gly Ala
1 5
<210> 240
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 240
Ala Arg Asn Val Gly Gly Gln Ala Asp Asp
1 5 10
<210> 241
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 241
Ser Ser Asp Ile Gly Gly Tyr Asn Tyr
1 5
<210> 242
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 242
Glu Val Asn
1
<210> 243
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 243
Ala Ser Phe Ala Gly Arg Lys Thr Leu Val
1 5 10
<210> 244
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 244
Gly Tyr Thr Phe Thr Ala Tyr Ser
1 5
<210> 245
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 245
Ile Asn Pro Ser Ser Gly Gly Ala
1 5
<210> 246
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 246
Ala Arg Asn Val Gly Gly His Ala Asp Asp
1 5 10
<210> 247
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 247
Ser Thr Asp Ile Gly Gly Tyr Asn Tyr
1 5
<210> 248
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 248
Glu Val Asn
1
<210> 249
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 249
Ala Ser Phe Ala Gly Arg Lys Thr Leu Val
1 5 10
<210> 250
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 250
Gly Phe Thr Phe Asn Thr Tyr Gly
1 5
<210> 251
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 251
Ile Ser Ala Asn Asn Gly His Thr
1 5
<210> 252
<211> 22
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 252
Ala Arg Gly Gly Tyr His His Gln Met Gln Arg Tyr Tyr Lys Ala Thr
1 5 10 15
Ser Val Tyr Ser Asp Tyr
20
<210> 253
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 253
Ser Ser Asn Ile Gly Asn Asn Tyr
1 5
<210> 254
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 254
Asp Asn Asn
1
<210> 255
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 255
Gly Thr Trp Asp Ser Ser Leu Ser Gly Val Val
1 5 10
<210> 256
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 256
Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Tyr
1 5
<210> 257
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 257
Ile Asn Pro Ser Gly Gly Ser Ser
1 5
<210> 258
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 258
Ala Arg Ala Gly Met Gly Met Asp Thr
1 5
<210> 259
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 259
Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr
1 5
<210> 260
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 260
Glu Val Ser
1
<210> 261
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 261
Ser Ser Tyr Ala Gly Ser Asn Thr Leu Val
1 5 10
<210> 262
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 262
Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Tyr
1 5
<210> 263
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 263
Ile Asn Pro Ser Gly Gly Ser Thr
1 5
<210> 264
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 264
Ala Arg Asp Val Ile Ser Gly Phe Asp Ser
1 5 10
<210> 265
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 265
Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr
1 5
<210> 266
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 266
Gly Val Ser
1
<210> 267
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 267
Ser Ser Tyr Ala Gly Val Asn Asn Leu Met
1 5 10
<210> 268
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 268
Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu
1 5 10 15
His Ala Ala Arg
20
<210> 269
<211> 60
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成寡核苷酸
<400> 269
atggctctcc cagtgactgc cctactgctt cccctagcgc ttctcctgca tgcagctcgt 60
<210> 270
<211> 220
<212> PRT
<213> 智人
<400> 270
Met Leu Arg Leu Leu Leu Ala Leu Asn Leu Phe Pro Ser Ile Gln Val
1 5 10 15
Thr Gly Asn Lys Ile Leu Val Lys Gln Ser Pro Met Leu Val Ala Tyr
20 25 30
Asp Asn Ala Val Asn Leu Ser Cys Lys Tyr Ser Tyr Asn Leu Phe Ser
35 40 45
Arg Glu Phe Arg Ala Ser Leu His Lys Gly Leu Asp Ser Ala Val Glu
50 55 60
Val Cys Val Val Tyr Gly Asn Tyr Ser Gln Gln Leu Gln Val Tyr Ser
65 70 75 80
Lys Thr Gly Phe Asn Cys Asp Gly Lys Leu Gly Asn Glu Ser Val Thr
85 90 95
Phe Tyr Leu Gln Asn Leu Tyr Val Asn Gln Thr Asp Ile Tyr Phe Cys
100 105 110
Lys Ile Glu Val Met Tyr Pro Pro Pro Tyr Leu Asp Asn Glu Lys Ser
115 120 125
Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro
130 135 140
Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly
145 150 155 160
Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile
165 170 175
Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met
180 185 190
Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro
195 200 205
Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser
210 215 220
<210> 271
<211> 321
<212> DNA
<213> 智人
<400> 271
attgaagtta tgtatcctcc tccttaccta gacaatgaga agagcaatgg aaccattatc 60
catgtgaaag ggaaacacct ttgtccaagt cccctatttc ccggaccttc taagcccttt 120
tgggtgctgg tggtggttgg tggagtcctg gcttgctata gcttgctagt aacagtggcc 180
tttattattt tctgggtgag gagtaagagg agcaggctcc tgcacagtga ctacatgaac 240
atgactcccc gccgccccgg gcccacccgc aagcattacc agccctatgc cccaccacgc 300
gacttcgcag cctatcgctc c 321
<210> 272
<211> 163
<212> PRT
<213> 智人
<400> 272
Met Lys Trp Lys Ala Leu Phe Thr Ala Ala Ile Leu Gln Ala Gln Leu
1 5 10 15
Pro Ile Thr Glu Ala Gln Ser Phe Gly Leu Leu Asp Pro Lys Leu Cys
20 25 30
Tyr Leu Leu Asp Gly Ile Leu Phe Ile Tyr Gly Val Ile Leu Thr Ala
35 40 45
Leu Phe Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr
50 55 60
Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg
65 70 75 80
Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met
85 90 95
Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu
100 105 110
Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys
115 120 125
Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu
130 135 140
Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu
145 150 155 160
Pro Pro Arg
<210> 273
<211> 339
<212> DNA
<213> 智人
<400> 273
agagtgaagt tcagcaggag cgcagacgcc cccgcgtacc agcagggcca gaaccagctc 60
tataacgagc tcaatctagg acgaagagag gagtacgatg ttttggacaa gagacgtggc 120
cgggaccctg agatgggggg aaagccgaga aggaagaacc ctcaggaagg cctgtacaat 180
gaactgcaga aagataagat ggcggaggcc tacagtgaga ttgggatgaa aggcgagcgc 240
cggaggggca aggggcacga tggcctttac cagggtctca gtacagccac caaggacacc 300
tacgacgccc ttcacatgca ggccctgccc cctcgctaa 339
<210> 274
<211> 255
<212> PRT
<213> 智人
<400> 274
Met Gly Asn Ser Cys Tyr Asn Ile Val Ala Thr Leu Leu Leu Val Leu
1 5 10 15
Asn Phe Glu Arg Thr Arg Ser Leu Gln Asp Pro Cys Ser Asn Cys Pro
20 25 30
Ala Gly Thr Phe Cys Asp Asn Asn Arg Asn Gln Ile Cys Ser Pro Cys
35 40 45
Pro Pro Asn Ser Phe Ser Ser Ala Gly Gly Gln Arg Thr Cys Asp Ile
50 55 60
Cys Arg Gln Cys Lys Gly Val Phe Arg Thr Arg Lys Glu Cys Ser Ser
65 70 75 80
Thr Ser Asn Ala Glu Cys Asp Cys Thr Pro Gly Phe His Cys Leu Gly
85 90 95
Ala Gly Cys Ser Met Cys Glu Gln Asp Cys Lys Gln Gly Gln Glu Leu
100 105 110
Thr Lys Lys Gly Cys Lys Asp Cys Cys Phe Gly Thr Phe Asn Asp Gln
115 120 125
Lys Arg Gly Ile Cys Arg Pro Trp Thr Asn Cys Ser Leu Asp Gly Lys
130 135 140
Ser Val Leu Val Asn Gly Thr Lys Glu Arg Asp Val Val Cys Gly Pro
145 150 155 160
Ser Pro Ala Asp Leu Ser Pro Gly Ala Ser Ser Val Thr Pro Pro Ala
165 170 175
Pro Ala Arg Glu Pro Gly His Ser Pro Gln Ile Ile Ser Phe Phe Leu
180 185 190
Ala Leu Thr Ser Thr Ala Leu Leu Phe Leu Leu Phe Phe Leu Thr Leu
195 200 205
Arg Phe Ser Val Val Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe
210 215 220
Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly
225 230 235 240
Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu
245 250 255
<210> 275
<211> 277
<212> PRT
<213> 智人
<400> 275
Met Cys Val Gly Ala Arg Arg Leu Gly Arg Gly Pro Cys Ala Ala Leu
1 5 10 15
Leu Leu Leu Gly Leu Gly Leu Ser Thr Val Thr Gly Leu His Cys Val
20 25 30
Gly Asp Thr Tyr Pro Ser Asn Asp Arg Cys Cys His Glu Cys Arg Pro
35 40 45
Gly Asn Gly Met Val Ser Arg Cys Ser Arg Ser Gln Asn Thr Val Cys
50 55 60
Arg Pro Cys Gly Pro Gly Phe Tyr Asn Asp Val Val Ser Ser Lys Pro
65 70 75 80
Cys Lys Pro Cys Thr Trp Cys Asn Leu Arg Ser Gly Ser Glu Arg Lys
85 90 95
Gln Leu Cys Thr Ala Thr Gln Asp Thr Val Cys Arg Cys Arg Ala Gly
100 105 110
Thr Gln Pro Leu Asp Ser Tyr Lys Pro Gly Val Asp Cys Ala Pro Cys
115 120 125
Pro Pro Gly His Phe Ser Pro Gly Asp Asn Gln Ala Cys Lys Pro Trp
130 135 140
Thr Asn Cys Thr Leu Ala Gly Lys His Thr Leu Gln Pro Ala Ser Asn
145 150 155 160
Ser Ser Asp Ala Ile Cys Glu Asp Arg Asp Pro Pro Ala Thr Gln Pro
165 170 175
Gln Glu Thr Gln Gly Pro Pro Ala Arg Pro Ile Thr Val Gln Pro Thr
180 185 190
Glu Ala Trp Pro Arg Thr Ser Gln Gly Pro Ser Thr Arg Pro Val Glu
195 200 205
Val Pro Gly Gly Arg Ala Val Ala Ala Ile Leu Gly Leu Gly Leu Val
210 215 220
Leu Gly Leu Leu Gly Pro Leu Ala Ile Leu Leu Ala Leu Tyr Leu Leu
225 230 235 240
Arg Arg Asp Gln Arg Leu Pro Pro Asp Ala His Lys Pro Pro Gly Gly
245 250 255
Gly Ser Phe Arg Thr Pro Ile Gln Glu Glu Gln Ala Asp Ala His Ser
260 265 270
Thr Leu Ala Lys Ile
275
<210> 276
<211> 199
<212> PRT
<213> 智人
<400> 276
Met Lys Ser Gly Leu Trp Tyr Phe Phe Leu Phe Cys Leu Arg Ile Lys
1 5 10 15
Val Leu Thr Gly Glu Ile Asn Gly Ser Ala Asn Tyr Glu Met Phe Ile
20 25 30
Phe His Asn Gly Gly Val Gln Ile Leu Cys Lys Tyr Pro Asp Ile Val
35 40 45
Gln Gln Phe Lys Met Gln Leu Leu Lys Gly Gly Gln Ile Leu Cys Asp
50 55 60
Leu Thr Lys Thr Lys Gly Ser Gly Asn Thr Val Ser Ile Lys Ser Leu
65 70 75 80
Lys Phe Cys His Ser Gln Leu Ser Asn Asn Ser Val Ser Phe Phe Leu
85 90 95
Tyr Asn Leu Asp His Ser His Ala Asn Tyr Tyr Phe Cys Asn Leu Ser
100 105 110
Ile Phe Asp Pro Pro Pro Phe Lys Val Thr Leu Thr Gly Gly Tyr Leu
115 120 125
His Ile Tyr Glu Ser Gln Leu Cys Cys Gln Leu Lys Phe Trp Leu Pro
130 135 140
Ile Gly Cys Ala Ala Phe Val Val Val Cys Ile Leu Gly Cys Ile Leu
145 150 155 160
Ile Cys Trp Leu Thr Lys Lys Lys Tyr Ser Ser Ser Val His Asp Pro
165 170 175
Asn Gly Glu Tyr Met Phe Met Arg Ala Val Asn Thr Ala Lys Lys Ser
180 185 190
Arg Leu Thr Asp Val Thr Leu
195
<210> 277
<211> 223
<212> PRT
<213> 智人
<400> 277
Met Ala Cys Leu Gly Phe Gln Arg His Lys Ala Gln Leu Asn Leu Ala
1 5 10 15
Thr Arg Thr Trp Pro Cys Thr Leu Leu Phe Phe Leu Leu Phe Ile Pro
20 25 30
Val Phe Cys Lys Ala Met His Val Ala Gln Pro Ala Val Val Leu Ala
35 40 45
Ser Ser Arg Gly Ile Ala Ser Phe Val Cys Glu Tyr Ala Ser Pro Gly
50 55 60
Lys Ala Thr Glu Val Arg Val Thr Val Leu Arg Gln Ala Asp Ser Gln
65 70 75 80
Val Thr Glu Val Cys Ala Ala Thr Tyr Met Met Gly Asn Glu Leu Thr
85 90 95
Phe Leu Asp Asp Ser Ile Cys Thr Gly Thr Ser Ser Gly Asn Gln Val
100 105 110
Asn Leu Thr Ile Gln Gly Leu Arg Ala Met Asp Thr Gly Leu Tyr Ile
115 120 125
Cys Lys Val Glu Leu Met Tyr Pro Pro Pro Tyr Tyr Leu Gly Ile Gly
130 135 140
Asn Gly Thr Gln Ile Tyr Val Ile Asp Pro Glu Pro Cys Pro Asp Ser
145 150 155 160
Asp Phe Leu Leu Trp Ile Leu Ala Ala Val Ser Ser Gly Leu Phe Phe
165 170 175
Tyr Ser Phe Leu Leu Thr Ala Val Ser Leu Ser Lys Met Leu Lys Lys
180 185 190
Arg Ser Pro Leu Thr Thr Gly Val Tyr Val Lys Met Pro Pro Thr Glu
195 200 205
Pro Glu Cys Glu Lys Gln Phe Gln Pro Tyr Phe Ile Pro Ile Asn
210 215 220
<210> 278
<211> 288
<212> PRT
<213> 智人
<400> 278
Met Gln Ile Pro Gln Ala Pro Trp Pro Val Val Trp Ala Val Leu Gln
1 5 10 15
Leu Gly Trp Arg Pro Gly Trp Phe Leu Asp Ser Pro Asp Arg Pro Trp
20 25 30
Asn Pro Pro Thr Phe Ser Pro Ala Leu Leu Val Val Thr Glu Gly Asp
35 40 45
Asn Ala Thr Phe Thr Cys Ser Phe Ser Asn Thr Ser Glu Ser Phe Val
50 55 60
Leu Asn Trp Tyr Arg Met Ser Pro Ser Asn Gln Thr Asp Lys Leu Ala
65 70 75 80
Ala Phe Pro Glu Asp Arg Ser Gln Pro Gly Gln Asp Cys Arg Phe Arg
85 90 95
Val Thr Gln Leu Pro Asn Gly Arg Asp Phe His Met Ser Val Val Arg
100 105 110
Ala Arg Arg Asn Asp Ser Gly Thr Tyr Leu Cys Gly Ala Ile Ser Leu
115 120 125
Ala Pro Lys Ala Gln Ile Lys Glu Ser Leu Arg Ala Glu Leu Arg Val
130 135 140
Thr Glu Arg Arg Ala Glu Val Pro Thr Ala His Pro Ser Pro Ser Pro
145 150 155 160
Arg Pro Ala Gly Gln Phe Gln Thr Leu Val Val Gly Val Val Gly Gly
165 170 175
Leu Leu Gly Ser Leu Val Leu Leu Val Trp Val Leu Ala Val Ile Cys
180 185 190
Ser Arg Ala Ala Arg Gly Thr Ile Gly Ala Arg Arg Thr Gly Gln Pro
195 200 205
Leu Lys Glu Asp Pro Ser Ala Val Pro Val Phe Ser Val Asp Tyr Gly
210 215 220
Glu Leu Asp Phe Gln Trp Arg Glu Lys Thr Pro Glu Pro Pro Val Pro
225 230 235 240
Cys Val Pro Glu Gln Thr Glu Tyr Ala Thr Ile Val Phe Pro Ser Gly
245 250 255
Met Gly Thr Ser Ser Pro Ala Arg Arg Gly Ser Ala Asp Gly Pro Arg
260 265 270
Ser Ala Gln Pro Leu Arg Pro Glu Asp Gly His Cys Ser Trp Pro Leu
275 280 285
<210> 279
<211> 525
<212> PRT
<213> 智人
<400> 279
Met Trp Glu Ala Gln Phe Leu Gly Leu Leu Phe Leu Gln Pro Leu Trp
1 5 10 15
Val Ala Pro Val Lys Pro Leu Gln Pro Gly Ala Glu Val Pro Val Val
20 25 30
Trp Ala Gln Glu Gly Ala Pro Ala Gln Leu Pro Cys Ser Pro Thr Ile
35 40 45
Pro Leu Gln Asp Leu Ser Leu Leu Arg Arg Ala Gly Val Thr Trp Gln
50 55 60
His Gln Pro Asp Ser Gly Pro Pro Ala Ala Ala Pro Gly His Pro Leu
65 70 75 80
Ala Pro Gly Pro His Pro Ala Ala Pro Ser Ser Trp Gly Pro Arg Pro
85 90 95
Arg Arg Tyr Thr Val Leu Ser Val Gly Pro Gly Gly Leu Arg Ser Gly
100 105 110
Arg Leu Pro Leu Gln Pro Arg Val Gln Leu Asp Glu Arg Gly Arg Gln
115 120 125
Arg Gly Asp Phe Ser Leu Trp Leu Arg Pro Ala Arg Arg Ala Asp Ala
130 135 140
Gly Glu Tyr Arg Ala Ala Val His Leu Arg Asp Arg Ala Leu Ser Cys
145 150 155 160
Arg Leu Arg Leu Arg Leu Gly Gln Ala Ser Met Thr Ala Ser Pro Pro
165 170 175
Gly Ser Leu Arg Ala Ser Asp Trp Val Ile Leu Asn Cys Ser Phe Ser
180 185 190
Arg Pro Asp Arg Pro Ala Ser Val His Trp Phe Arg Asn Arg Gly Gln
195 200 205
Gly Arg Val Pro Val Arg Glu Ser Pro His His His Leu Ala Glu Ser
210 215 220
Phe Leu Phe Leu Pro Gln Val Ser Pro Met Asp Ser Gly Pro Trp Gly
225 230 235 240
Cys Ile Leu Thr Tyr Arg Asp Gly Phe Asn Val Ser Ile Met Tyr Asn
245 250 255
Leu Thr Val Leu Gly Leu Glu Pro Pro Thr Pro Leu Thr Val Tyr Ala
260 265 270
Gly Ala Gly Ser Arg Val Gly Leu Pro Cys Arg Leu Pro Ala Gly Val
275 280 285
Gly Thr Arg Ser Phe Leu Thr Ala Lys Trp Thr Pro Pro Gly Gly Gly
290 295 300
Pro Asp Leu Leu Val Thr Gly Asp Asn Gly Asp Phe Thr Leu Arg Leu
305 310 315 320
Glu Asp Val Ser Gln Ala Gln Ala Gly Thr Tyr Thr Cys His Ile His
325 330 335
Leu Gln Glu Gln Gln Leu Asn Ala Thr Val Thr Leu Ala Ile Ile Thr
340 345 350
Val Thr Pro Lys Ser Phe Gly Ser Pro Gly Ser Leu Gly Lys Leu Leu
355 360 365
Cys Glu Val Thr Pro Val Ser Gly Gln Glu Arg Phe Val Trp Ser Ser
370 375 380
Leu Asp Thr Pro Ser Gln Arg Ser Phe Ser Gly Pro Trp Leu Glu Ala
385 390 395 400
Gln Glu Ala Gln Leu Leu Ser Gln Pro Trp Gln Cys Gln Leu Tyr Gln
405 410 415
Gly Glu Arg Leu Leu Gly Ala Ala Val Tyr Phe Thr Glu Leu Ser Ser
420 425 430
Pro Gly Ala Gln Arg Ser Gly Arg Ala Pro Gly Ala Leu Pro Ala Gly
435 440 445
His Leu Leu Leu Phe Leu Ile Leu Gly Val Leu Ser Leu Leu Leu Leu
450 455 460
Val Thr Gly Ala Phe Gly Phe His Leu Trp Arg Arg Gln Trp Arg Pro
465 470 475 480
Arg Arg Phe Ser Ala Leu Glu Gln Gly Ile His Pro Pro Gln Ala Gln
485 490 495
Ser Lys Ile Glu Glu Leu Glu Gln Glu Pro Glu Pro Glu Pro Glu Pro
500 505 510
Glu Pro Glu Pro Glu Pro Glu Pro Glu Pro Glu Gln Leu
515 520 525
<210> 280
<211> 370
<212> PRT
<213> 智人
<400> 280
Met Leu Gly Gln Val Val Thr Leu Ile Leu Leu Leu Leu Leu Lys Val
1 5 10 15
Tyr Gln Gly Lys Gly Cys Gln Gly Ser Ala Asp His Val Val Ser Ile
20 25 30
Ser Gly Val Pro Leu Gln Leu Gln Pro Asn Ser Ile Gln Thr Lys Val
35 40 45
Asp Ser Ile Ala Trp Lys Lys Leu Leu Pro Ser Gln Asn Gly Phe His
50 55 60
His Ile Leu Lys Trp Glu Asn Gly Ser Leu Pro Ser Asn Thr Ser Asn
65 70 75 80
Asp Arg Phe Ser Phe Ile Val Lys Asn Leu Ser Leu Leu Ile Lys Ala
85 90 95
Ala Gln Gln Gln Asp Ser Gly Leu Tyr Cys Leu Glu Val Thr Ser Ile
100 105 110
Ser Gly Lys Val Gln Thr Ala Thr Phe Gln Val Phe Val Phe Glu Ser
115 120 125
Leu Leu Pro Asp Lys Val Glu Lys Pro Arg Leu Gln Gly Gln Gly Lys
130 135 140
Ile Leu Asp Arg Gly Arg Cys Gln Val Ala Leu Ser Cys Leu Val Ser
145 150 155 160
Arg Asp Gly Asn Val Ser Tyr Ala Trp Tyr Arg Gly Ser Lys Leu Ile
165 170 175
Gln Thr Ala Gly Asn Leu Thr Tyr Leu Asp Glu Glu Val Asp Ile Asn
180 185 190
Gly Thr His Thr Tyr Thr Cys Asn Val Ser Asn Pro Val Ser Trp Glu
195 200 205
Ser His Thr Leu Asn Leu Thr Gln Asp Cys Gln Asn Ala His Gln Glu
210 215 220
Phe Arg Phe Trp Pro Phe Leu Val Ile Ile Val Ile Leu Ser Ala Leu
225 230 235 240
Phe Leu Gly Thr Leu Ala Cys Phe Cys Val Trp Arg Arg Lys Arg Lys
245 250 255
Glu Lys Gln Ser Glu Thr Ser Pro Lys Glu Phe Leu Thr Ile Tyr Glu
260 265 270
Asp Val Lys Asp Leu Lys Thr Arg Arg Asn His Glu Gln Glu Gln Thr
275 280 285
Phe Pro Gly Gly Gly Ser Thr Ile Tyr Ser Met Ile Gln Ser Gln Ser
290 295 300
Ser Ala Pro Thr Ser Gln Glu Pro Ala Tyr Thr Leu Tyr Ser Leu Ile
305 310 315 320
Gln Pro Ser Arg Lys Ser Gly Ser Arg Lys Arg Asn His Ser Pro Ser
325 330 335
Phe Asn Ser Thr Ile Tyr Glu Val Ile Gly Lys Ser Gln Pro Lys Ala
340 345 350
Gln Asn Pro Ala Arg Leu Ser Arg Lys Glu Leu Glu Asn Phe Asp Val
355 360 365
Tyr Ser
370
<210> 281
<211> 289
<212> PRT
<213> 智人
<400> 281
Met Lys Thr Leu Pro Ala Met Leu Gly Thr Gly Lys Leu Phe Trp Val
1 5 10 15
Phe Phe Leu Ile Pro Tyr Leu Asp Ile Trp Asn Ile His Gly Lys Glu
20 25 30
Ser Cys Asp Val Gln Leu Tyr Ile Lys Arg Gln Ser Glu His Ser Ile
35 40 45
Leu Ala Gly Asp Pro Phe Glu Leu Glu Cys Pro Val Lys Tyr Cys Ala
50 55 60
Asn Arg Pro His Val Thr Trp Cys Lys Leu Asn Gly Thr Thr Cys Val
65 70 75 80
Lys Leu Glu Asp Arg Gln Thr Ser Trp Lys Glu Glu Lys Asn Ile Ser
85 90 95
Phe Phe Ile Leu His Phe Glu Pro Val Leu Pro Asn Asp Asn Gly Ser
100 105 110
Tyr Arg Cys Ser Ala Asn Phe Gln Ser Asn Leu Ile Glu Ser His Ser
115 120 125
Thr Thr Leu Tyr Val Thr Asp Val Lys Ser Ala Ser Glu Arg Pro Ser
130 135 140
Lys Asp Glu Met Ala Ser Arg Pro Trp Leu Leu Tyr Arg Leu Leu Pro
145 150 155 160
Leu Gly Gly Leu Pro Leu Leu Ile Thr Thr Cys Phe Cys Leu Phe Cys
165 170 175
Cys Leu Arg Arg His Gln Gly Lys Gln Asn Glu Leu Ser Asp Thr Ala
180 185 190
Gly Arg Glu Ile Asn Leu Val Asp Ala His Leu Lys Ser Glu Gln Thr
195 200 205
Glu Ala Ser Thr Arg Gln Asn Ser Gln Val Leu Leu Ser Glu Thr Gly
210 215 220
Ile Tyr Asp Asn Asp Pro Asp Leu Cys Phe Arg Met Gln Glu Gly Ser
225 230 235 240
Glu Val Tyr Ser Asn Pro Cys Leu Glu Glu Asn Lys Pro Gly Ile Val
245 250 255
Tyr Ala Ser Leu Asn His Ser Val Ile Gly Pro Asn Ser Arg Leu Ala
260 265 270
Arg Asn Val Lys Glu Ala Pro Thr Glu Tyr Ala Ser Ile Cys Val Arg
275 280 285
Ser
<210> 282
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 282
Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro
1 5 10 15
Gly Ser Thr Gly
20
<210> 283
<211> 60
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成寡核苷酸
<400> 283
atggaaaccg acaccctgct gctgtgggtg ctgctgctgt gggtgccagg atccacagga 60
<210> 284
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 284
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
1 5 10 15
<210> 285
<211> 45
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成寡核苷酸
<400> 285
ggtggaggtg gatcaggtgg aggtggatct ggtggaggtg gatct 45
<210> 286
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 286
Gly Gly Gly Gly Ser
1 5
<210> 287
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 287
Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ser
1 5
<210> 288
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 288
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser
1 5
<210> 289
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 289
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
1 5 10
<210> 290
<211> 18
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 290
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Gly Gly
1 5 10 15
Gly Ser
<210> 291
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 291
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly
1 5 10 15
Gly Gly Gly Ser
20
<210> 292
<211> 25
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 292
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly
1 5 10 15
Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
20 25
<210> 293
<211> 30
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 293
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly
1 5 10 15
Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
20 25 30
<210> 294
<211> 35
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 294
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly
1 5 10 15
Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
20 25 30
Gly Gly Ser
35
<210> 295
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 295
Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro
1 5 10 15
<210> 296
<211> 24
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 296
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys
1 5 10 15
Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro
20
<210> 297
<211> 62
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 297
Glu Leu Lys Thr Pro Leu Gly Asp Thr Thr His Thr Cys Pro Arg Cys
1 5 10 15
Pro Glu Pro Lys Ser Cys Asp Thr Pro Pro Pro Cys Pro Arg Cys Pro
20 25 30
Glu Pro Lys Ser Cys Asp Thr Pro Pro Pro Cys Pro Arg Cys Pro Glu
35 40 45
Pro Lys Ser Cys Asp Thr Pro Pro Pro Cys Pro Arg Cys Pro
50 55 60
<210> 298
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 298
Gly Ser Gly Ser Gly Ser
1 5
<210> 299
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 299
Ala Ala Ala
1
<210> 300
<211> 126
<212> DNA
<213> 智人
<400> 300
aaacggggca gaaagaagct cctgtatata ttcaaacaac catttatgag accagtacaa 60
actactcaag aggaagatgg ctgtagctgc cgatttccag aagaagaaga aggaggatgt 120
gaactg 126
<210> 301
<211> 271
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 301
Met Lys Lys Thr Ala Ile Ala Ile Ala Val Ala Leu Ala Gly Phe Ala
1 5 10 15
Thr Val Ala Gln Ala Ala Glu Leu Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Pro
20 25 30
Ser Ala Ser Gly Ser Pro Gly Gln Ser Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly
35 40 45
Thr Ser Arg Asp Ala Gly Gly Tyr Asn Tyr Phe Ser Trp Tyr Gln Gln
50 55 60
His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Glu Val Thr Lys Arg
65 70 75 80
Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Lys Thr
85 90 95
Ala Ser Leu Thr Val Ser Gly Leu Gln Ala Asp Asp Glu Ala Val Tyr
100 105 110
Tyr Cys Ser Ser Tyr Gly Gly Ser Asn Asn Phe Arg Val Phe Gly Gly
115 120 125
Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Ser Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly
130 135 140
Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Leu Glu Met Ala Glu Val Gln
145 150 155 160
Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Arg Pro Gly Gly Ser Leu Arg
165 170 175
Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Gly Asp Tyr Gly Met Ser
180 185 190
Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ser Gly Ile
195 200 205
Asn Trp Asn Gly Gly Ser Thr Gly Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg
210 215 220
Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu Gln Met
225 230 235 240
Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Ser
245 250 255
Lys Gln Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
260 265 270
<210> 302
<211> 114
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 302
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Arg Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Gly Asp Tyr
20 25 30
Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Gly Ile Asn Trp Asn Gly Gly Ser Thr Gly Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Ser Lys Gln Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val
100 105 110
Ser Ser
<210> 303
<211> 136
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 303
Met Lys Lys Thr Ala Ile Ala Ile Ala Val Ala Leu Ala Gly Phe Ala
1 5 10 15
Thr Val Ala Gln Ala Ala Glu Leu Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Pro
20 25 30
Ser Ala Ser Gly Ser Pro Gly Gln Ser Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly
35 40 45
Thr Ser Arg Asp Ala Gly Gly Tyr Asn Tyr Phe Ser Trp Tyr Gln Gln
50 55 60
His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Glu Val Thr Lys Arg
65 70 75 80
Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Lys Thr
85 90 95
Ala Ser Leu Thr Val Ser Gly Leu Gln Ala Asp Asp Glu Ala Val Tyr
100 105 110
Tyr Cys Ser Ser Tyr Gly Gly Ser Asn Asn Phe Arg Val Phe Gly Gly
115 120 125
Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly
130 135
<210> 304
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 304
Gly Phe Thr Phe Gly Asp Tyr Gly
1 5
<210> 305
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 305
Ile Asn Trp Asn Gly Gly Ser Thr
1 5
<210> 306
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 306
Ala Arg Ser Lys Gln Gly Tyr
1 5
<210> 307
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 307
Ser Arg Asp Ala Gly Gly Tyr Asn Tyr
1 5
<210> 308
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 308
Glu Val Thr
1
<210> 309
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 309
Ser Ser Tyr Gly Gly Ser Asn Asn Phe Arg Val
1 5 10
<210> 310
<211> 342
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 310
gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggt gtggtacggc ctggggggtc cctgagactc 60
tcctgtgcag cctctggatt cacctttggt gattatggca tgagctgggt ccgccaagct 120
ccagggaagg ggctggagtg ggtctctggt attaattgga atggtggtag cacaggttat 180
gcagactctg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca acgccaagaa ctccctgtat 240
ctgcaaatga acagtctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gcgctctaaa 300
caggattact ggggtcaagg tactctggtg accgtctcct ca 342
<210> 311
<211> 408
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 311
atgaaaaaga cagctatcgc gattgcagtg gcactggctg gtttcgctac cgtggcccag 60
gcggccgagc tccagtctgc cctgactcag cctccctccg cgtccgggtc tcctggacag 120
tcagtcacca tctcctgcac tggaaccagc agggacgctg gtggttataa ttatttctcc 180
tggtaccaac aacacccagg caaagccccc aaactcctga tttatgaggt cactaagcgg 240
ccctcagggg tccctgatcg cttctctggc tccaagtctg gcaagacggc ctccctgacc 300
gtctctgggc tccaggctga cgatgaggct gtatattact gcagctcata tggaggcagc 360
aacaactttc gggtgttcgg cggagggacc aagctgaccg tcctaggt 408
<210> 312
<211> 813
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 312
atgaaaaaga cagctatcgc gattgcagtg gcactggctg gtttcgctac cgtggcccag 60
gcggccgagc tccagtctgc cctgactcag cctccctccg cgtccgggtc tcctggacag 120
tcagtcacca tctcctgcac tggaaccagc agggacgctg gtggttataa ttatttctcc 180
tggtaccaac aacacccagg caaagccccc aaactcctga tttatgaggt cactaagcgg 240
ccctcagggg tccctgatcg cttctctggc tccaagtctg gcaagacggc ctccctgacc 300
gtctctgggc tccaggctga cgatgaggct gtatattact gcagctcata tggaggcagc 360
aacaactttc gggtgttcgg cggagggacc aagctgaccg tcctaggttc tagaggtggt 420
ggtggtagcg gcggcggcgg ctctggtggt ggtggatccc tcgagatggc cgaggtgcag 480
ctggtggagt ctgggggagg tgtggtacgg cctggggggt ccctgagact ctcctgtgca 540
gcctctggat tcacctttgg tgattatggc atgagctggg tccgccaagc tccagggaag 600
gggctggagt gggtctctgg tattaattgg aatggtggta gcacaggtta tgcagactct 660
gtgaagggcc gattcaccat ctccagagac aacgccaaga actccctgta tctgcaaatg 720
aacagtctga gagccgagga cacggccgta tattactgtg cgcgctctaa acaggattac 780
tggggtcaag gtactctggt gaccgtctcc tca 813
<210> 313
<211> 277
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 313
Met Lys Lys Thr Ala Ile Ala Ile Ala Val Ala Leu Ala Gly Phe Ala
1 5 10 15
Thr Val Ala Gln Ala Ala Glu Leu Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Pro Pro
20 25 30
Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln Arg Val Ser Ile Ser Cys Ser Gly
35 40 45
Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn Thr Val Asn Trp Tyr Gln Gln Phe
50 55 60
Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu Ile His Ser Asn Asn Gln Arg Pro
65 70 75 80
Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala
85 90 95
Ser Leu Ala Ile Ser Gly Pro Gln Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr
100 105 110
Cys Ala Ala Trp Asp Asp Ser Val Asn Gly Tyr Val Phe Gly Thr Gly
115 120 125
Thr Lys Val Thr Val Leu Gly Ser Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
130 135 140
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Leu Glu Met Ala Gln Leu Gln Leu
145 150 155 160
Gln Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu
165 170 175
Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr Ala Met Ser Trp
180 185 190
Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ser Ala Ile Thr
195 200 205
Asn Ser Gly Arg Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe
210 215 220
Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Ser Leu Gln Met Ser
225 230 235 240
Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Val Thr
245 250 255
His Arg Arg Tyr Gly Ser Thr Phe Asp Ser Arg Gly Gln Gly Thr Leu
260 265 270
Val Thr Val Ser Ser
275
<210> 314
<211> 121
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 314
Gln Leu Gln Leu Gln Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ala Ile Thr Asn Ser Gly Arg Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Ser
65 70 75 80
Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Val Thr His Arg Arg Tyr Gly Ser Thr Phe Asp Ser Arg Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 315
<211> 135
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 315
Met Lys Lys Thr Ala Ile Ala Ile Ala Val Ala Leu Ala Gly Phe Ala
1 5 10 15
Thr Val Ala Gln Ala Ala Glu Leu Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Pro Pro
20 25 30
Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln Arg Val Ser Ile Ser Cys Ser Gly
35 40 45
Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn Thr Val Asn Trp Tyr Gln Gln Phe
50 55 60
Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu Ile His Ser Asn Asn Gln Arg Pro
65 70 75 80
Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala
85 90 95
Ser Leu Ala Ile Ser Gly Pro Gln Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr
100 105 110
Cys Ala Ala Trp Asp Asp Ser Val Asn Gly Tyr Val Phe Gly Thr Gly
115 120 125
Thr Lys Val Thr Val Leu Gly
130 135
<210> 316
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 316
Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr Ala
1 5
<210> 317
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 317
Ile Thr Asn Ser Gly Arg Ser Thr
1 5
<210> 318
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 318
Ala Arg Val Thr His Arg Arg Tyr Gly Ser Thr Phe Asp Ser
1 5 10
<210> 319
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 319
Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn Thr
1 5
<210> 320
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 320
Ser Asn Asn
1
<210> 321
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 321
Ala Ala Trp Asp Asp Ser Val Asn Gly Tyr Val
1 5 10
<210> 322
<211> 385
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 322
cagctgcagc tgcaggagtc ggggggaggc tcggtacagc cgggggggtc tctgagactg 60
tcctgtgcag cctctggatt cacctttagc aactatgcca tgagctgggt ccgccaggct 120
ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct atcactaata gtggtcgtag tacatactac 180
gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtct 240
ttgcaaatga gcagcctgag agccgaagac acggccgtgt attactgtgc gcgcgttact 300
catcgtcgtt acggttctac tttcgattct cggggtcaag gtactctggt gaccgtctcc 360
tcaactagtg gccaggccgg ccagc 385
<210> 323
<211> 405
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 323
atgaaaaaga cagctatcgc gattgcagtg gcactggctg gtttcgctac cgtggcccag 60
gcggccgagc tctcctatga gctgactcag ccaccctcag cgtctgggac ccccgggcag 120
agggtcagca tctcttgttc tggaagcagc tccaacatcg ggagtaatac tgtaaactgg 180
taccaacagt tccccggaac ggcccccaaa ctcctcatcc atagtaataa tcagcggccc 240
tcaggggtcc ctgaccgatt ctctggctcc aagtctggca cctcagcctc cctggccatc 300
agtgggcccc agtctgagga tgaggctgat tattactgtg cagcttggga tgacagtgtg 360
aatggttatg tcttcggaac tgggaccaag gtcaccgtcc taggt 405
<210> 324
<211> 831
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 324
atgaaaaaga cagctatcgc gattgcagtg gcactggctg gtttcgctac cgtggcccag 60
gcggccgagc tctcctatga gctgactcag ccaccctcag cgtctgggac ccccgggcag 120
agggtcagca tctcttgttc tggaagcagc tccaacatcg ggagtaatac tgtaaactgg 180
taccaacagt tccccggaac ggcccccaaa ctcctcatcc atagtaataa tcagcggccc 240
tcaggggtcc ctgaccgatt ctctggctcc aagtctggca cctcagcctc cctggccatc 300
agtgggcccc agtctgagga tgaggctgat tattactgtg cagcttggga tgacagtgtg 360
aatggttatg tcttcggaac tgggaccaag gtcaccgtcc taggttctag aggtggtggt 420
ggtagcggcg gcggcggctc tggtggtggt ggatccctcg agatggccca gctgcagctg 480
caggagtcgg ggggaggctc ggtacagccg ggggggtctc tgagactgtc ctgtgcagcc 540
tctggattca cctttagcaa ctatgccatg agctgggtcc gccaggctcc agggaagggg 600
ctggagtggg tctcagctat cactaatagt ggtcgtagta catactacgc agactccgtg 660
aagggccggt tcaccatctc cagagacaat tccaagaaca cgctgtcttt gcaaatgagc 720
agcctgagag ccgaagacac ggccgtgtat tactgtgcgc gcgttactca tcgtcgttac 780
ggttctactt tcgattctcg gggtcaaggt actctggtga ccgtctcctc a 831
<210> 325
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 325
Met Lys Lys Thr Ala Ile Ala Ile Ala Val Ala Leu Ala Gly Phe Ala
1 5 10 15
Thr Val Ala Gln Ala Ala Glu Leu Gln Pro Val Leu Thr Gln Pro Pro
20 25 30
Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly
35 40 45
Ser Ser Ser Asn Ile Gly Gly Asn Thr Val Ser Trp Tyr Gln Gln Val
50 55 60
Pro Gly Thr Ala Pro Arg Leu Leu Ile Phe Arg Asn Asn Gln Arg Pro
65 70 75 80
Pro Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala
85 90 95
Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr
100 105 110
Cys Ala Ala Trp Asp Ala Ser Arg Gln Gly Val Phe Gly Gly Gly Thr
115 120 125
Lys Leu Thr Val Leu Gly Ser Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
130 135 140
Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Leu Glu Met Ala Gln Val Gln Leu Val
145 150 155 160
Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser Ser Val Lys Val Ser
165 170 175
Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Arg Ser Tyr Ala Ile Thr Trp Val
180 185 190
Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met Gly Arg Ile Ile Pro
195 200 205
Met Leu Asp Ile Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr
210 215 220
Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser
225 230 235 240
Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Thr Tyr Ser
245 250 255
Arg Ser Pro Phe His Met Glu Asp Phe Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
260 265 270
Thr Val Ser Ser
275
<210> 326
<211> 121
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 326
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Arg Ser Tyr
20 25 30
Ala Ile Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Arg Ile Ile Pro Met Leu Asp Ile Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Thr Tyr Ser Arg Ser Pro Phe His Met Glu Asp Phe Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 327
<211> 134
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 327
Met Lys Lys Thr Ala Ile Ala Ile Ala Val Ala Leu Ala Gly Phe Ala
1 5 10 15
Thr Val Ala Gln Ala Ala Glu Leu Gln Pro Val Leu Thr Gln Pro Pro
20 25 30
Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly
35 40 45
Ser Ser Ser Asn Ile Gly Gly Asn Thr Val Ser Trp Tyr Gln Gln Val
50 55 60
Pro Gly Thr Ala Pro Arg Leu Leu Ile Phe Arg Asn Asn Gln Arg Pro
65 70 75 80
Pro Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala
85 90 95
Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr
100 105 110
Cys Ala Ala Trp Asp Ala Ser Arg Gln Gly Val Phe Gly Gly Gly Thr
115 120 125
Lys Leu Thr Val Leu Gly
130
<210> 328
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 328
Gly Gly Thr Phe Arg Ser Tyr Ala
1 5
<210> 329
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 329
Ile Ile Pro Met Leu Asp Ile Thr
1 5
<210> 330
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 330
Ala Arg Thr Tyr Ser Arg Ser Pro Phe His Met Glu Asp Phe
1 5 10
<210> 331
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 331
Ser Ser Asn Ile Gly Gly Asn Thr
1 5
<210> 332
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 332
Arg Asn Asn
1
<210> 333
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 333
Ala Ala Trp Asp Ala Ser Arg Gln Gly Val
1 5 10
<210> 334
<211> 363
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 334
caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60
tcctgcaagg cttctggagg caccttccgc agctatgcta tcacctgggt gcgacaggcc 120
cctggacaag ggcttgagtg gatgggaagg atcatcccta tgcttgatat aacaaactac 180
gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggaca aatccacgag cacagcctac 240
atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gcgcacttac 300
tctcgttctc cgttccatat ggaagatttc tggggtcaag gtactctggt gaccgtctcc 360
tca 363
<210> 335
<211> 402
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 335
atgaaaaaga cagctatcgc gattgcagtg gcactggctg gtttcgctac cgtggcccag 60
gcggccgagc tccagcctgt gctgactcag ccaccctcag cgtctgggac ccccgggcag 120
agggtcacca tctcttgttc tggaagcagc tccaatatcg gaggtaacac tgtcagctgg 180
taccagcagg tcccaggaac ggcccccaga ctcctcattt ttaggaataa tcaacggccc 240
ccaggggtcc ctgaccgatt ctctggctcc aagtctggca cctcagcctc cctggccatc 300
agtgggctcc ggtctgagga tgaggctgat tattactgtg cagcatggga cgccagtcga 360
caaggggtgt tcggcggagg gaccaagctg accgtcctag gt 402
<210> 336
<211> 828
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 336
atgaaaaaga cagctatcgc gattgcagtg gcactggctg gtttcgctac cgtggcccag 60
gcggccgagc tccagcctgt gctgactcag ccaccctcag cgtctgggac ccccgggcag 120
agggtcacca tctcttgttc tggaagcagc tccaatatcg gaggtaacac tgtcagctgg 180
taccagcagg tcccaggaac ggcccccaga ctcctcattt ttaggaataa tcaacggccc 240
ccaggggtcc ctgaccgatt ctctggctcc aagtctggca cctcagcctc cctggccatc 300
agtgggctcc ggtctgagga tgaggctgat tattactgtg cagcatggga cgccagtcga 360
caaggggtgt tcggcggagg gaccaagctg accgtcctag gttctagagg tggtggtggt 420
agcggcggcg gcggctctgg tggtggtgga tccctcgaga tggcccaggt gcagctggtg 480
cagtctgggg ctgaggtgaa gaagcctggg tcctcggtga aggtctcctg caaggcttct 540
ggaggcacct tccgcagcta tgctatcacc tgggtgcgac aggcccctgg acaagggctt 600
gagtggatgg gaaggatcat ccctatgctt gatataacaa actacgcaca gaagttccag 660
ggcagagtca cgattaccgc ggacaaatcc acgagcacag cctacatgga gctgagcagc 720
ctgagatctg aggacacggc cgtgtattac tgtgcgcgca cttactctcg ttctccgttc 780
catatggaag atttctgggg tcaaggtact ctggtgaccg tctcctca 828
<210> 337
<211> 270
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 337
Met Lys Lys Thr Ala Ile Ala Ile Ala Val Ala Leu Ala Gly Phe Ala
1 5 10 15
Thr Val Ala Gln Ala Ala Glu Leu Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro
20 25 30
Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly
35 40 45
Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn Thr Val Asn Trp Tyr Gln Gln Leu
50 55 60
Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Arg Asn Asn Gln Arg Pro
65 70 75 80
Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala
85 90 95
Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr
100 105 110
Cys Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu Ser Gly Arg Val Phe Gly Gly Gly
115 120 125
Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Ser Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
130 135 140
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Leu Glu Met Ala Glu Val Gln Leu
145 150 155 160
Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu
165 170 175
Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Ala Met Ser Trp
180 185 190
Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ser Ala Ile Ser
195 200 205
Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe
210 215 220
Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn
225 230 235 240
Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Lys Tyr
245 250 255
Gln Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
260 265 270
<210> 338
<211> 114
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 338
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ala Ile Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Lys Tyr Gln Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val
100 105 110
Ser Ser
<210> 339
<211> 135
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 339
Met Lys Lys Thr Ala Ile Ala Ile Ala Val Ala Leu Ala Gly Phe Ala
1 5 10 15
Thr Val Ala Gln Ala Ala Glu Leu Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro
20 25 30
Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly
35 40 45
Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn Thr Val Asn Trp Tyr Gln Gln Leu
50 55 60
Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Arg Asn Asn Gln Arg Pro
65 70 75 80
Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala
85 90 95
Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr
100 105 110
Cys Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu Ser Gly Arg Val Phe Gly Gly Gly
115 120 125
Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly
130 135
<210> 340
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 340
Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Ala
1 5
<210> 341
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 341
Ile Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr
1 5
<210> 342
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 342
Ala Arg Lys Tyr Gln Asp Val
1 5
<210> 343
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 343
Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn Thr
1 5
<210> 344
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 344
Arg Asn Asn
1
<210> 345
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 345
Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu Ser Gly Arg Val
1 5 10
<210> 346
<211> 342
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 346
gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60
tcctgtgcag cctctggatt cacctttagc agctatgcca tgagctgggt ccgccaggct 120
ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attagtggta gtggtggtag cacatactac 180
gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca atgccaagaa cacgctgtat 240
ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gcgcaaatac 300
caggatgttt ggggtcaagg tactctggtg accgtctcct ca 342
<210> 347
<211> 405
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 347
atgaaaaaga cagctatcgc gattgcagtg gcactggctg gtttcgctac cgtggcccag 60
gcggccgagc tccagtctgt gctgacgcag ccgccctcag cgtctgggac ccccgggcag 120
agggtcacca tctcttgttc tggaagcagc tccaacatcg gaagtaatac tgtaaactgg 180
taccagcagc tcccaggaac ggcccccaaa ctcctcatct ataggaataa tcagcggccc 240
tcaggggtcc ctgaccgatt ctctggctcc aagtctggca cctcagcctc cctggccatc 300
agtgggctcc ggtccgagga tgaggctgat tattactgtg cagcatggga tgacagcctg 360
agtggtaggg tgttcggcgg agggaccaag ctgaccgtcc taggt 405
<210> 348
<211> 810
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 348
atgaaaaaga cagctatcgc gattgcagtg gcactggctg gtttcgctac cgtggcccag 60
gcggccgagc tccagtctgt gctgacgcag ccgccctcag cgtctgggac ccccgggcag 120
agggtcacca tctcttgttc tggaagcagc tccaacatcg gaagtaatac tgtaaactgg 180
taccagcagc tcccaggaac ggcccccaaa ctcctcatct ataggaataa tcagcggccc 240
tcaggggtcc ctgaccgatt ctctggctcc aagtctggca cctcagcctc cctggccatc 300
agtgggctcc ggtccgagga tgaggctgat tattactgtg cagcatggga tgacagcctg 360
agtggtaggg tgttcggcgg agggaccaag ctgaccgtcc taggttctag aggtggtggt 420
ggtagcggcg gcggcggctc tggtggtggt ggatccctcg agatggccga ggtgcagctg 480
gtggagtctg ggggaggctt ggtacagcct ggggggtccc tgagactctc ctgtgcagcc 540
tctggattca cctttagcag ctatgccatg agctgggtcc gccaggctcc agggaagggg 600
ctggagtggg tctcagctat tagtggtagt ggtggtagca catactacgc agactccgtg 660
aagggccggt tcaccatctc cagagacaat gccaagaaca cgctgtatct gcaaatgaac 720
agcctgagag ccgaggacac ggccgtatat tactgtgcgc gcaaatacca ggatgtttgg 780
ggtcaaggta ctctggtgac cgtctcctca 810
<210> 349
<211> 279
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 349
Met Lys Lys Thr Ala Ile Ala Ile Ala Val Ala Leu Ala Gly Phe Ala
1 5 10 15
Thr Val Ala Gln Ala Ala Glu Leu Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro
20 25 30
Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly
35 40 45
Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly Tyr Asp Val His Trp Tyr Gln Gln
50 55 60
Leu Pro Gly Arg Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Gly Asn Ser Asn Arg
65 70 75 80
Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser
85 90 95
Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr
100 105 110
Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Ser Ser Leu Arg Gly Tyr Val Phe Gly Thr
115 120 125
Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly Ser Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly
130 135 140
Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Leu Glu Met Ala Gln Val Gln
145 150 155 160
Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg
165 170 175
Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ser Phe Ser Gly Thr Ala Met His
180 185 190
Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ser Thr Ile
195 200 205
Ser Ser Thr Gly Arg Ser Thr Tyr Tyr Arg Asp Ser Val Lys Gly Arg
210 215 220
Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met
225 230 235 240
Asn Ser Leu Arg Gly Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Pro
245 250 255
Val Ser Ser Met Thr Leu Ser Ile Gln Ser Asp Gly Trp Gly Gln Gly
260 265 270
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
275
<210> 350
<211> 122
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 350
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ser Phe Ser Gly Thr
20 25 30
Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Thr Ile Ser Ser Thr Gly Arg Ser Thr Tyr Tyr Arg Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Gly Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Pro Val Ser Ser Met Thr Leu Ser Ile Gln Ser Asp Gly Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 351
<211> 136
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 351
Met Lys Lys Thr Ala Ile Ala Ile Ala Val Ala Leu Ala Gly Phe Ala
1 5 10 15
Thr Val Ala Gln Ala Ala Glu Leu Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro
20 25 30
Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly
35 40 45
Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly Tyr Asp Val His Trp Tyr Gln Gln
50 55 60
Leu Pro Gly Arg Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Gly Asn Ser Asn Arg
65 70 75 80
Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser
85 90 95
Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr
100 105 110
Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Ser Ser Leu Arg Gly Tyr Val Phe Gly Thr
115 120 125
Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly
130 135
<210> 352
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 352
Gly Phe Ser Phe Ser Gly Thr Ala
1 5
<210> 353
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 353
Ile Ser Ser Thr Gly Arg Ser Thr
1 5
<210> 354
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 354
Ala Arg Pro Val Ser Ser Met Thr Leu Ser Ile Gln Ser Asp Gly
1 5 10 15
<210> 355
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 355
Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly Tyr Asp
1 5
<210> 356
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 356
Gly Asn Ser
1
<210> 357
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 357
Gln Ser Tyr Asp Ser Ser Leu Arg Gly Tyr Val
1 5 10
<210> 358
<211> 366
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 358
caggtgcagc tggtgcagtc tgggggaggc gtggtccagc ctgggaggtc cctgagactc 60
tcctgtgcag cctctggatt cagctttagt ggcactgcca tgcactgggt ccgccaggct 120
ccagggaagg ggctggaatg ggtctcgact attagtagta ctgggcgtag cacatactac 180
agagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240
ctgcaaatga acagcctgag aggcgaggac acggccgtat attactgtgc gcgcccggtt 300
tcttctatga ctctgtctat ccagtctgat ggttggggtc aaggtactct ggtgaccgtc 360
tcctca 366
<210> 359
<211> 408
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 359
atgaaaaaga cagctatcgc gattgcagtg gcactggctg gtttcgctac cgtggcccag 60
gcggccgagc tccagtctgt gttgacgcag ccgccctcag tgtctggggc cccagggcag 120
agggtcacca tctcctgcac tgggagcagc tccaacatcg gggcaggtta tgatgtacac 180
tggtaccagc agcttccagg aagagccccc aaactcctca tctatggtaa cagcaatcgg 240
ccctcagggg tccctgaccg attctctggc tccaagtctg gcacctcagc ctccctggcc 300
atcactgggc tccaggctga ggatgaggct gattattact gccagtccta tgacagcagc 360
ctgagaggtt atgtcttcgg aactgggacc aaggtcaccg tcctaggt 408
<210> 360
<211> 837
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 360
atgaaaaaga cagctatcgc gattgcagtg gcactggctg gtttcgctac cgtggcccag 60
gcggccgagc tccagtctgt gttgacgcag ccgccctcag tgtctggggc cccagggcag 120
agggtcacca tctcctgcac tgggagcagc tccaacatcg gggcaggtta tgatgtacac 180
tggtaccagc agcttccagg aagagccccc aaactcctca tctatggtaa cagcaatcgg 240
ccctcagggg tccctgaccg attctctggc tccaagtctg gcacctcagc ctccctggcc 300
atcactgggc tccaggctga ggatgaggct gattattact gccagtccta tgacagcagc 360
ctgagaggtt atgtcttcgg aactgggacc aaggtcaccg tcctaggttc tagaggtggt 420
ggtggtagcg gcggcggcgg ctctggtggt ggtggatccc tcgagatggc ccaggtgcag 480
ctggtgcagt ctgggggagg cgtggtccag cctgggaggt ccctgagact ctcctgtgca 540
gcctctggat tcagctttag tggcactgcc atgcactggg tccgccaggc tccagggaag 600
gggctggaat gggtctcgac tattagtagt actgggcgta gcacatacta cagagactcc 660
gtgaagggcc ggttcaccat ctccagagac aattccaaga acacgctgta tctgcaaatg 720
aacagcctga gaggcgagga cacggccgta tattactgtg cgcgcccggt ttcttctatg 780
actctgtcta tccagtctga tggttggggt caaggtactc tggtgaccgt ctcctca 837
<210> 361
<211> 286
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 361
Met Lys Lys Thr Ala Ile Ala Ile Ala Val Ala Leu Ala Gly Phe Ala
1 5 10 15
Thr Val Ala Gln Ala Ala Glu Leu Gln Ser Val Val Thr Gln Pro Pro
20 25 30
Ser Val Ser Ala Ala Pro Gly Gln Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly
35 40 45
Gly Ser Ser Asn Ile Gly Asn Asn Tyr Val Ser Trp Phe Gln Gln Leu
50 55 60
Pro Arg Thr Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Asp Asn Asn Lys Arg Pro
65 70 75 80
Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala
85 90 95
Ala Leu Asp Ile Thr Val Leu Gln Thr Gly Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr
100 105 110
Cys Gly Thr Trp Asp Ser Ser Leu Arg Asn Trp Val Phe Gly Gly Gly
115 120 125
Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Ser Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
130 135 140
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Leu Glu Met Ala Gln Met Gln Leu
145 150 155 160
Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val
165 170 175
Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Tyr Met His Trp
180 185 190
Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met Gly Ile Ile Asn
195 200 205
Pro Ser Gly Gly Ser Thr Ser Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val
210 215 220
Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr Met Glu Leu Ser
225 230 235 240
Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Gln
245 250 255
Lys Tyr His Ser Gln Tyr Ser Arg Gly Gly Thr Gly Gly Gly Met Thr
260 265 270
Gln Asp Met Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
275 280 285
<210> 362
<211> 130
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 362
Gln Met Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ile Ile Asn Pro Ser Gly Gly Ser Thr Ser Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Gln Lys Tyr His Ser Gln Tyr Ser Arg Gly Gly Thr Gly
100 105 110
Gly Gly Met Thr Gln Asp Met Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val
115 120 125
Ser Ser
130
<210> 363
<211> 135
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 363
Met Lys Lys Thr Ala Ile Ala Ile Ala Val Ala Leu Ala Gly Phe Ala
1 5 10 15
Thr Val Ala Gln Ala Ala Glu Leu Gln Ser Val Val Thr Gln Pro Pro
20 25 30
Ser Val Ser Ala Ala Pro Gly Gln Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly
35 40 45
Gly Ser Ser Asn Ile Gly Asn Asn Tyr Val Ser Trp Phe Gln Gln Leu
50 55 60
Pro Arg Thr Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Asp Asn Asn Lys Arg Pro
65 70 75 80
Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala
85 90 95
Ala Leu Asp Ile Thr Val Leu Gln Thr Gly Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr
100 105 110
Cys Gly Thr Trp Asp Ser Ser Leu Arg Asn Trp Val Phe Gly Gly Gly
115 120 125
Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly
130 135
<210> 364
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 364
Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Tyr
1 5
<210> 365
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 365
Ile Asn Pro Ser Gly Gly Ser Thr
1 5
<210> 366
<211> 23
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 366
Ala Arg Gly Gln Lys Tyr His Ser Gln Tyr Ser Arg Gly Gly Thr Gly
1 5 10 15
Gly Gly Met Thr Gln Asp Met
20
<210> 367
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 367
Ser Ser Asn Ile Gly Asn Asn Tyr
1 5
<210> 368
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 368
Asp Asn Asn
1
<210> 369
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 369
Gly Thr Trp Asp Ser Ser Leu Arg Asn Trp Val
1 5 10
<210> 370
<211> 390
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 370
cagatgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtt 60
tcctgcaagg catctggata caccttcacc agctactata tgcactgggt gcgacaggcc 120
cctggacaag ggcttgagtg gatgggaata atcaacccta gtggtggtag cacaagctac 180
gcacaaaagt tccagggcag agtcaccatg accagggaca cgtccacgag cacagtctac 240
atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gcgcggtcag 300
aaataccatt ctcagtactc tcgtggtggt actggtggtg gtatgactca ggatatgtgg 360
ggtcaaggta ctctggtgac cgtctcctca 390
<210> 371
<211> 405
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 371
atgaaaaaga cagctatcgc gattgcagtg gcactggctg gtttcgctac cgtggcccag 60
gcggccgagc tccagtctgt cgtgacgcag ccgccctctg tgtctgcggc cccaggacag 120
agggtcacca tctcctgctc tggaggtagt tccaacattg ggaataatta tgtttcctgg 180
ttccaacaac tcccacgaac agcccccaaa ctcctcattt atgacaataa taagcgaccc 240
tcagggattc ctgaccgatt ctctggctcc aagtctggca cgtcagccgc cctggacatc 300
accgttctcc agactgggga cgaggccgat tattactgcg gaacttggga tagcagcctg 360
agaaattggg tgttcggcgg agggaccaag ctgaccgtcc taggt 405
<210> 372
<211> 858
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 372
atgaaaaaga cagctatcgc gattgcagtg gcactggctg gtttcgctac cgtggcccag 60
gcggccgagc tccagtctgt cgtgacgcag ccgccctctg tgtctgcggc cccaggacag 120
agggtcacca tctcctgctc tggaggtagt tccaacattg ggaataatta tgtttcctgg 180
ttccaacaac tcccacgaac agcccccaaa ctcctcattt atgacaataa taagcgaccc 240
tcagggattc ctgaccgatt ctctggctcc aagtctggca cgtcagccgc cctggacatc 300
accgttctcc agactgggga cgaggccgat tattactgcg gaacttggga tagcagcctg 360
agaaattggg tgttcggcgg agggaccaag ctgaccgtcc taggttctag aggtggtggt 420
ggtagcggcg gcggcggctc tggtggtggt ggatccctcg agatggccca gatgcagctg 480
gtgcagtctg gggctgaggt gaagaagcct ggggcctcag tgaaggtttc ctgcaaggca 540
tctggataca ccttcaccag ctactatatg cactgggtgc gacaggcccc tggacaaggg 600
cttgagtgga tgggaataat caaccctagt ggtggtagca caagctacgc acaaaagttc 660
cagggcagag tcaccatgac cagggacacg tccacgagca cagtctacat ggagctgagc 720
agcctgagat ctgaggacac ggccgtgtat tactgtgcgc gcggtcagaa ataccattct 780
cagtactctc gtggtggtac tggtggtggt atgactcagg atatgtgggg tcaaggtact 840
ctggtgaccg tctcctca 858
<210> 373
<211> 273
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 373
Met Lys Lys Thr Ala Ile Ala Ile Ala Val Ala Leu Ala Gly Phe Ala
1 5 10 15
Thr Val Ala Gln Ala Ala Glu Leu Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro
20 25 30
Ser Ala Ser Gly Ser Pro Gly Gln Ser Leu Thr Ile Ser Cys Thr Gly
35 40 45
Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn His Val Ser Trp Tyr Gln Gln
50 55 60
Tyr Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Met Ile Tyr Glu Val Thr Lys Arg
65 70 75 80
Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr
85 90 95
Ala Ser Leu Thr Val Ser Gly Leu Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr
100 105 110
Tyr Cys Ser Ser Tyr Ala Gly Ser Ala His Trp Val Phe Gly Gly Gly
115 120 125
Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Ser Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
130 135 140
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Leu Glu Met Ala Glu Val Gln Leu
145 150 155 160
Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val
165 170 175
Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ser Arg Tyr Tyr Ile His Trp
180 185 190
Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met Gly Trp Met Asn
195 200 205
Pro Asn Ser Gly Asn Thr Gly Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val
210 215 220
Thr Met Thr Arg Asn Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser
225 230 235 240
Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Arg
245 250 255
Tyr His Val Ile Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser
260 265 270
Ser
<210> 374
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 374
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ser Arg Tyr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Trp Met Asn Pro Asn Ser Gly Asn Thr Gly Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asn Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Arg Tyr His Val Ile Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 375
<211> 135
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 375
Met Lys Lys Thr Ala Ile Ala Ile Ala Val Ala Leu Ala Gly Phe Ala
1 5 10 15
Thr Val Ala Gln Ala Ala Glu Leu Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro
20 25 30
Ser Ala Ser Gly Ser Pro Gly Gln Ser Leu Thr Ile Ser Cys Thr Gly
35 40 45
Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn His Val Ser Trp Tyr Gln Gln
50 55 60
Tyr Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Met Ile Tyr Glu Val Thr Lys Arg
65 70 75 80
Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr
85 90 95
Ala Ser Leu Thr Val Ser Gly Leu Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr
100 105 110
Tyr Cys Ser Ser Tyr Ala Gly Ser Ala His Trp Val Phe Gly Gly Gly
115 120 125
Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly
130 135
<210> 376
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 376
Gly Tyr Thr Phe Ser Arg Tyr Tyr
1 5
<210> 377
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 377
Met Asn Pro Asn Ser Gly Asn Thr
1 5
<210> 378
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 378
Ala Arg Gly Arg Tyr His Val Ile Asp Tyr
1 5 10
<210> 379
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 379
Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn His
1 5
<210> 380
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 380
Glu Val Thr
1
<210> 381
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 381
Ser Ser Tyr Ala Gly Ser Ala His Trp Val
1 5 10
<210> 382
<211> 351
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 382
gaggtccagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtt 60
tcctgcaagg catctggata caccttcagc aggtactata tacactgggt gcgacaggcc 120
cctggacaag ggcttgagtg gatgggatgg atgaacccta acagtggtaa cacaggctat 180
gcacagaagt tccagggcag agtcaccatg accaggaaca cctccataag cacagcctac 240
atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gcgcggtcgt 300
taccatgtta tcgattactg gggtcaaggt actctggtga ccgtctcctc a 351
<210> 383
<211> 405
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 383
atgaaaaaga cagctatcgc gattgcagtg gcactggctg gtttcgctac cgtggcccag 60
gcggccgagc tccagtctgt gttgactcag ccaccctccg cgtccgggtc tcctggacag 120
tcactcacca tctcctgcac tggaaccagc agtgacgttg gtggttataa ccatgtctcc 180
tggtaccaac agtacccagg caaagccccc aaactcatga tttatgaggt cactaagcgg 240
ccctcagggg tccctgatcg cttctctggc tccaagtctg gcaacacggc ctccctgacc 300
gtctctgggc tccaggctga ggatgaggct gattattact gcagctcata tgcaggcagc 360
gcccattggg tgttcggcgg agggaccaag ctgaccgtcc taggt 405
<210> 384
<211> 819
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 384
atgaaaaaga cagctatcgc gattgcagtg gcactggctg gtttcgctac cgtggcccag 60
gcggccgagc tccagtctgt gttgactcag ccaccctccg cgtccgggtc tcctggacag 120
tcactcacca tctcctgcac tggaaccagc agtgacgttg gtggttataa ccatgtctcc 180
tggtaccaac agtacccagg caaagccccc aaactcatga tttatgaggt cactaagcgg 240
ccctcagggg tccctgatcg cttctctggc tccaagtctg gcaacacggc ctccctgacc 300
gtctctgggc tccaggctga ggatgaggct gattattact gcagctcata tgcaggcagc 360
gcccattggg tgttcggcgg agggaccaag ctgaccgtcc taggttctag aggtggtggt 420
ggtagcggcg gcggcggctc tggtggtggt ggatccctcg agatggccga ggtccagctg 480
gtgcagtctg gggctgaggt gaagaagcct ggggcctcag tgaaggtttc ctgcaaggca 540
tctggataca ccttcagcag gtactatata cactgggtgc gacaggcccc tggacaaggg 600
cttgagtgga tgggatggat gaaccctaac agtggtaaca caggctatgc acagaagttc 660
cagggcagag tcaccatgac caggaacacc tccataagca cagcctacat ggagctgagc 720
agcctgagat ctgaggacac ggccgtgtat tactgtgcgc gcggtcgtta ccatgttatc 780
gattactggg gtcaaggtac tctggtgacc gtctcctca 819
<210> 385
<211> 269
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 385
Met Lys Lys Thr Ala Ile Ala Ile Ala Val Ala Leu Ala Gly Phe Ala
1 5 10 15
Thr Val Ala Gln Ala Ala Glu Leu Gln Ala Val Leu Thr Gln Pro Pro
20 25 30
Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly
35 40 45
Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn Tyr Val Tyr Trp Tyr Gln Gln Leu
50 55 60
Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Arg Asn Asn Gln Arg Pro
65 70 75 80
Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala
85 90 95
Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr
100 105 110
Cys Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu Ser Gly Arg Val Phe Gly Thr Gly
115 120 125
Thr Lys Val Thr Val Leu Gly Ser Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
130 135 140
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Leu Glu Met Ala Gln Leu Gln Leu
145 150 155 160
Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser Ser Val Lys Val
165 170 175
Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Asn Thr Tyr Tyr Leu His Trp
180 185 190
Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met Gly Arg Ile Asn
195 200 205
Pro Asn Asn Gly Gly Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val
210 215 220
Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Ile Asn Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser
225 230 235 240
Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Ser Tyr
245 250 255
Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
260 265
<210> 386
<211> 113
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 386
Gln Leu Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Asn Thr Tyr
20 25 30
Tyr Leu His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Arg Ile Asn Pro Asn Asn Gly Gly Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Ile Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Ser Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser
100 105 110
Ser
<210> 387
<211> 135
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 387
Met Lys Lys Thr Ala Ile Ala Ile Ala Val Ala Leu Ala Gly Phe Ala
1 5 10 15
Thr Val Ala Gln Ala Ala Glu Leu Gln Ala Val Leu Thr Gln Pro Pro
20 25 30
Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly
35 40 45
Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn Tyr Val Tyr Trp Tyr Gln Gln Leu
50 55 60
Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Arg Asn Asn Gln Arg Pro
65 70 75 80
Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala
85 90 95
Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr
100 105 110
Cys Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu Ser Gly Arg Val Phe Gly Thr Gly
115 120 125
Thr Lys Val Thr Val Leu Gly
130 135
<210> 388
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 388
Gly Tyr Thr Phe Asn Thr Tyr Tyr
1 5
<210> 389
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 389
Ile Asn Pro Asn Asn Gly Gly Thr
1 5
<210> 390
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 390
Ala Arg Ser Tyr Asp Tyr
1 5
<210> 391
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 391
Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn Tyr
1 5
<210> 392
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 392
Arg Asn Asn
1
<210> 393
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 393
Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu Ser Gly Arg Val
1 5 10
<210> 394
<211> 339
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 394
cagctgcagc tggtgcaatc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60
tcctgcaagg cttctggata caccttcaac acctactatc tgcactgggt acgacaggcc 120
cctggacaag ggcttgagtg gatgggacgg atcaacccta acaatggtgg cacaaactat 180
gcacagaagt ttcagggcag ggtcaccatg accagggaca cgtccatcaa cacagcctac 240
atggagctga gcaggctgag atctgacgac acggccgtgt attactgtgc gcgctcttac 300
gattactggg gtcaaggtac tctggtgacc gtctcctca 339
<210> 395
<211> 405
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 395
atgaaaaaga cagctatcgc gattgcagtg gcactggctg gtttcgctac cgtggcccag 60
gcggccgagc tccaggctgt gctgactcag ccaccctcag cgtctgggac ccccgggcag 120
agggtcacca tctcttgttc tggaagcagc tccaacatcg gaagtaatta tgtatactgg 180
taccagcagc tcccaggaac ggcccccaaa ctcctcatct ataggaataa tcagcggccc 240
tcaggggtcc ctgaccgatt ctctggctcc aagtctggca cctcagcctc cctggccatc 300
agtgggctcc ggtccgagga tgaggctgat tattactgtg cagcatggga tgacagcctg 360
agtggtcggg tcttcggaac tgggaccaag gtcaccgtcc taggt 405
<210> 396
<211> 807
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 396
atgaaaaaga cagctatcgc gattgcagtg gcactggctg gtttcgctac cgtggcccag 60
gcggccgagc tccaggctgt gctgactcag ccaccctcag cgtctgggac ccccgggcag 120
agggtcacca tctcttgttc tggaagcagc tccaacatcg gaagtaatta tgtatactgg 180
taccagcagc tcccaggaac ggcccccaaa ctcctcatct ataggaataa tcagcggccc 240
tcaggggtcc ctgaccgatt ctctggctcc aagtctggca cctcagcctc cctggccatc 300
agtgggctcc ggtccgagga tgaggctgat tattactgtg cagcatggga tgacagcctg 360
agtggtcggg tcttcggaac tgggaccaag gtcaccgtcc taggttctag aggtggtggt 420
ggtagcggcg gcggcggctc tggtggtggt ggatccctcg agatggccca gctgcagctg 480
gtgcaatctg gggctgaggt gaagaagcct gggtcctcgg tgaaggtctc ctgcaaggct 540
tctggataca ccttcaacac ctactatctg cactgggtac gacaggcccc tggacaaggg 600
cttgagtgga tgggacggat caaccctaac aatggtggca caaactatgc acagaagttt 660
cagggcaggg tcaccatgac cagggacacg tccatcaaca cagcctacat ggagctgagc 720
aggctgagat ctgacgacac ggccgtgtat tactgtgcgc gctcttacga ttactggggt 780
caaggtactc tggtgaccgt ctcctca 807
<210> 397
<211> 1404
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 397
cagtctgtgt tgacgcagcc tgcctccgtg tctgggtctc ctggacagtc gctcaccatc 60
tcctgcactg gaaccagcaa tgacgttggt gcttataagt atgtctcctg gtatcaacag 120
tacccaggca aagcccccaa actcatactt tatgatgtct ttaagcggcc ctcaggggtc 180
tctaatcgct tctctggctc caagtctgac aacacggcct ccctgaccat ctctgggctc 240
caggctgagg acgaggctga ttattactgc ttctcactta caagcagtaa cacttatgtc 300
ttcggaactg ggaccaaggt caccgtccta ggttctagag gtggtggtgg tagcggcggc 360
ggcggctctg gtggtggtgg atccctcgag atggcccaga tgcagctggt gcagtctgga 420
gctgaggtga agaagcctgg ggcctcagtg aaggtctcct gcaaggcttc tggttacacc 480
tttaacagat atgctatcac ctgggtgcga caggcccctg gacaaggcct tgagtggatg 540
ggatggatca gcgcttacaa tggtaattca cactatgcac agaagctcca gggcagagtc 600
accatgacca cagacacatc cacgggcaca gcctatatgg agctgaggag gctgagatct 660
gacgacacgg ccgtgtatta ctgtgcgcgc atggcttacg attcttgggg tcaaggtact 720
ctggtgaccg tctcctcagc ggccgcaatt gaagttatgt atcctcctcc ttacctagac 780
aatgagaaga gcaatggaac cattatccat gtgaaaggga aacacctttg tccaagtccc 840
ctatttcccg gaccttctaa gcccttttgg gtgctggtgg tggttggtgg agtcctggct 900
tgctatagct tgctagtaac agtggccttt attattttct gggtgaggag taagaggagc 960
aggctcctgc acagtgacta catgaacatg actccccgcc gccccgggcc cacccgcaag 1020
cattaccagc cctatgcccc accacgcgac ttcgcagcct atcgctccag agtgaagttc 1080
agcaggagcg cagacgcccc cgcgtaccag cagggccaga accagctcta taacgagctc 1140
aatctaggac gaagagagga gtacgatgtt ttggacaaga gacgtggccg ggaccctgag 1200
atggggggaa agccgagaag gaagaaccct caggaaggcc tgtacaatga actgcagaaa 1260
gataagatgg cggaggccta cagtgagatt gggatgaaag gcgagcgccg gaggggcaag 1320
gggcacgatg gcctttacca gggtctcagt acagccacca aggacaccta cgacgccctt 1380
cacatgcagg ccctgccccc tcgc 1404
<210> 398
<211> 1413
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 398
cagtctgtgt tgactcagcc accctcagcg tctgggaccc ccggacagag ggtcaccatc 60
tcttgttctg gaagcaggtc caacgtagga ggtaattatg tattttggta ccagcaagtc 120
cccggagcga cccccaaact cctcatctat aggagtaatc agcggccctc gggggtccct 180
gaccgattcg ctggctccaa gtctggctcc tcagcctccc tggccatcag tggactccgg 240
tccgaggatg aggctgatta ttactgtgca acatgggatg acagcctgag tggttttgtc 300
ttcggaactg ggaccaaggt caccgtccta ggttctagag gtggtggtgg tagcggcggc 360
ggcggctctg gtggtggtgg atccctcgag atggccgagg tgcagctggt ggagtctggg 420
ggaggcttgg tcaagcctgg agggtccctg agactctcct gtgcagcctc tggattcacc 480
ttcagtgact actacatgag ctggatccgc caggctccag ggaaggggct ggagtgggtt 540
tcatacatta gtagtagtgg tagtaccata tactacgcag actctgtgaa gggccgattc 600
accatctcca gggacaacgc caagaactca ctgtatctgc aaatgaacag cctgagagcc 660
gaggacacgg ccgtatatta ctgtgcgcgc ggttacggta aagcttacga tcagtggggt 720
caaggtactc tggtgaccgt ctcctcagcg gccgcaattg aagttatgta tcctcctcct 780
tacctagaca atgagaagag caatggaacc attatccatg tgaaagggaa acacctttgt 840
ccaagtcccc tatttcccgg accttctaag cccttttggg tgctggtggt ggttggtgga 900
gtcctggctt gctatagctt gctagtaaca gtggccttta ttattttctg ggtgaggagt 960
aagaggagca ggctcctgca cagtgactac atgaacatga ctccccgccg ccccgggccc 1020
acccgcaagc attaccagcc ctatgcccca ccacgcgact tcgcagccta tcgctccaga 1080
gtgaagttca gcaggagcgc agacgccccc gcgtaccagc agggccagaa ccagctctat 1140
aacgagctca atctaggacg aagagaggag tacgatgttt tggacaagag acgtggccgg 1200
gaccctgaga tggggggaaa gccgagaagg aagaaccctc aggaaggcct gtacaatgaa 1260
ctgcagaaag ataagatggc ggaggcctac agtgagattg ggatgaaagg cgagcgccgg 1320
aggggcaagg ggcacgatgg cctttaccag ggtctcagta cagccaccaa ggacacctac 1380
gacgcccttc acatgcaggc cctgccccct cgc 1413
<210> 399
<211> 1416
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 399
tcttctgagc tgactcagga ccctgctgtg tctgtggcct tgggacagac agtcaggatc 60
acatgccaag gagacagcct cagaagctat tatgcaagct ggtaccagca gaagccagga 120
caggcccctg tacttgtcat ctatggtaaa aacaaccggc cctcagggat cccagaccga 180
ttctctggct ccagctcagg aaacacagct tccttgacca tcactggggc tcaggcggaa 240
gatgaggctg actattactg taactcccgg gacagcagtg gtaacccccc tgtggtattc 300
ggcggaggga ccaagctgac cgtcctaggt tctagaggtg gtggtggtag cggcggcggc 360
ggctctggtg gtggtggatc cctcgagatg gcccaggtgc agctggtgga gtctggggga 420
ggcctggtcc accctggggg gtccctgaga ctctcctgtg cagcctctgg attcaccttc 480
agaagccata gcatgaactg ggtccgccag gctccaggga aggggctgga gtgggtctca 540
tccattagta gtgatagtac ttacacatac tacgcagact cagtgaaggg ccgattcacc 600
atctccagag acaacgccaa gaactcactg tatctgcaaa tgaacagcct gagagccgag 660
gacacggccg tatattactg tgcgcgctct ggtggtcagt ggaaatacta cgattactgg 720
ggtcaaggta ctctggtgac cgtctcctca gcggccgcaa ttgaagttat gtatcctcct 780
ccttacctag acaatgagaa gagcaatgga accattatcc atgtgaaagg gaaacacctt 840
tgtccaagtc ccctatttcc cggaccttct aagccctttt gggtgctggt ggtggttggt 900
ggagtcctgg cttgctatag cttgctagta acagtggcct ttattatttt ctgggtgagg 960
agtaagagga gcaggctcct gcacagtgac tacatgaaca tgactccccg ccgccccggg 1020
cccacccgca agcattacca gccctatgcc ccaccacgcg acttcgcagc ctatcgctcc 1080
agagtgaagt tcagcaggag cgcagacgcc cccgcgtacc agcagggcca gaaccagctc 1140
tataacgagc tcaatctagg acgaagagag gagtacgatg ttttggacaa gagacgtggc 1200
cgggaccctg agatgggggg aaagccgaga aggaagaacc ctcaggaagg cctgtacaat 1260
gaactgcaga aagataagat ggcggaggcc tacagtgaga ttgggatgaa aggcgagcgc 1320
cggaggggca aggggcacga tggcctttac cagggtctca gtacagccac caaggacacc 1380
tacgacgccc ttcacatgca ggccctgccc cctcgc 1416
<210> 400
<211> 1416
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 400
cagtctgtcg tgacgcagcc gccctcaatg tctgcggccc caggacagca agtcaccatc 60
tcctgctctg gaggcaactc caacattgag agaaattatg tatcctggta cctccagctc 120
cctggaacag cccccaaact cgtcattttt gacaatgata ggcgaccctc agggattcct 180
gaccgattct ctggctccaa gtctggcacg tcagccaccc tgggcatcac cggactccag 240
actggggacg aggccgatta ttactgcgga acatgggata gcagcctgag aggttgggtg 300
ttcggcggag ggaccaagct gaccgtccta ggttctagag gtggtggtgg tagcggcggc 360
ggcggctctg gtggtggtgg atccctcgag atggccgagg tgcagctggt ggagtccggg 420
ggaggcttga tacagcctgg ggggtccctg agactctcct gtgcagcctc tggattcacc 480
tttagcaact atgccatgaa ctgggtccgc caggctccag ggaaggggct ggagtgggtc 540
tcaactatta atggtcgtgg tagtagtaca atctacgcag actccgtgaa gggccggttc 600
accatctcca gagacaattc caagaacacg ctgtatctgc aaatgaacag cctgagagcc 660
gaggacacag ccacgtatta ctgtgcgcgc tacatctctc gtggtctggg tgattcttgg 720
ggtcaaggta ctctggtgac cgtctcctca gcggccgcaa ttgaagttat gtatcctcct 780
ccttacctag acaatgagaa gagcaatgga accattatcc atgtgaaagg gaaacacctt 840
tgtccaagtc ccctatttcc cggaccttct aagccctttt gggtgctggt ggtggttggt 900
ggagtcctgg cttgctatag cttgctagta acagtggcct ttattatttt ctgggtgagg 960
agtaagagga gcaggctcct gcacagtgac tacatgaaca tgactccccg ccgccccggg 1020
cccacccgca agcattacca gccctatgcc ccaccacgcg acttcgcagc ctatcgctcc 1080
agagtgaagt tcagcaggag cgcagacgcc cccgcgtacc agcagggcca gaaccagctc 1140
tataacgagc tcaatctagg acgaagagag gagtacgatg ttttggacaa gagacgtggc 1200
cgggaccctg agatgggggg aaagccgaga aggaagaacc ctcaggaagg cctgtacaat 1260
gaactgcaga aagataagat ggcggaggcc tacagtgaga ttgggatgaa aggcgagcgc 1320
cggaggggca aggggcacga tggcctttac cagggtctca gtacagccac caaggacacc 1380
tacgacgccc ttcacatgca ggccctgccc cctcgc 1416
<210> 401
<211> 7689
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 401
ccggtgccgc caccatggaa accgacaccc tgctgctgtg ggtgctgctg ctgtgggtgc 60
caggatccac aggacagtct gtcgtgacgc agcctgcctc cgtgtctggg tctcctggac 120
agtcgatcac catctcctgc actggaacca gcagtgacgt tggtggttat aactatgtct 180
cctggtacca acagcaccca ggcaaagccc ccaaactcat gatttatgat gtcagtaagc 240
ggccctcagg ggtttctaat cgcttctctg gctccaagtc tggcaacacg gcctccctga 300
ccatctctgg gctccaggct gaggacgagg ctgattatta ctgcagctca tatacaagca 360
gcagcacttt ggtattcggc ggagggacca agctgaccgt cctaggttct agaggtggtg 420
gtggtagcgg cggcggcggc tctggtggtg gtggatccct cgagatggcc gaggtgcagc 480
tggtggagtc tgggggagcc tttgtacagc ctggggggtc cctgagactc tcctgtgcag 540
cctctggatt cacctttagc agctatgcca tgacctgggt ccgccaggct ccagggaagg 600
gcctggaatg ggtctcgact attagtggtc gtggtcgtag cacattctac gcagactccg 660
tgaagggccg gtttaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctatat ctgcaaatga 720
acagtctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gcgctactac catgctggtg 780
ctttcgatct gtggggtcaa ggtactctgg tgaccgtctc ctcagaacaa aaactcatct 840
cagaagagga tctggcggcc gcacccacca cgacgccagc gccgcgacca ccaaccccgg 900
cgcccacgat cgcgtcgcag cccctgtccc tgcgcccaga ggcgtgccgg ccagcggcgg 960
ggggcgcagt gcacacgagg gggctggact tcgcctgtga tatctacatc tgggcgcccc 1020
tggccgggac ttgtggggtc cttctcctgt cactggttat caccctttac tgcaacaaac 1080
ggggcagaaa gaagctcctg tatatattca aacaaccatt tatgagacca gtacaaacta 1140
ctcaagagga agatggctgt agctgccgat ttccagaaga agaagaagga ggatgtgaac 1200
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tctataacga gctcaatcta ggacgaagag aggagtacga tgttttggac aagagacgtg 1320
gccgggaccc tgagatgggg ggaaagccga gaaggaagaa ccctcaggaa ggcctgtaca 1380
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gccggagggg caaggggcac gatggccttt accagggtct cagtacagcc accaaggaca 1500
cctacgacgc ccttcacatg caggccctgc cccctcgcta acagccactc gaggatccgg 1560
attagtccaa tttgttaaag acaggatatc agtggtccag gctctagttt tgactcaaca 1620
atatcaccag ctgaagccta tagagtacga gccatagata aaataaaaga ttttatttag 1680
tctccagaaa aaggggggaa tgaaagaccc cacctgtagg tttggcaagc tagcttaagt 1740
aacgccattt tgcaaggcat ggaaaaatac ataactgaga atagagaagt tcagatcaag 1800
gtcaggaaca gatggaacag ctgaatatgg gccaaacagg atatctgtgg taagcagttc 1860
ctgccccggc tcagggccaa gaacagatgg aacagctgaa tatgggccaa acaggatatc 1920
tgtggtaagc agttcctgcc ccggctcagg gccaagaaca gatggtcccc agatgcggtc 1980
cagccctcag cagtttctag agaaccatca gatgtttcca gggtgcccca aggacctgaa 2040
atgaccctgt gccttatttg aactaaccaa tcagttcgct tctcgcttct gttcgcgcgc 2100
ttctgctccc cgagctcaat aaaagagccc acaacccctc actcggggcg ccagtcctcc 2160
gattgactga gtcgcccggg tacccgtgta tccaataaac cctcttgcag ttgcatccga 2220
cttgtggtct cgctgttcct tgggagggtc tcctctgagt gattgactac ccgtcagcgg 2280
gggtctttca cacatgcagc atgtatcaaa attaatttgg ttttttttct taagtattta 2340
cattaaatgg ccatagtact taaagttaca ttggcttcct tgaaataaac atggagtatt 2400
cagaatgtgt cataaatatt tctaatttta agatagtatc tccattggct ttctactttt 2460
tcttttattt ttttttgtcc tctgtcttcc atttgttgtt gttgttgttt gtttgtttgt 2520
ttgttggttg gttggttaat ttttttttaa agatcctaca ctatagttca agctagacta 2580
ttagctactc tgtaacccag ggtgaccttg aagtcatggg tagcctgctg ttttagcctt 2640
cccacatcta agattacagg tatgagctat catttttggt atattgattg attgattgat 2700
tgatgtgtgt gtgtgtgatt gtgtttgtgt gtgtgactgt gaaaatgtgt gtatgggtgt 2760
gtgtgaatgt gtgtatgtat gtgtgtgtgt gagtgtgtgt gtgtgtgtgt gcatgtgtgt 2820
gtgtgtgact gtgtctatgt gtatgactgt gtgtgtgtgt gtgtgtgtgt gtgtgtgtgt 2880
gtgtgtgtgt gtgttgtgaa aaaatattct atggtagtga gagccaacgc tccggctcag 2940
gtgtcaggtt ggtttttgag acagagtctt tcacttagct tggaattcac tggccgtcgt 3000
tttacaacgt cgtgactggg aaaaccctgg cgttacccaa cttaatcgcc ttgcagcaca 3060
tccccctttc gccagctggc gtaatagcga agaggcccgc accgatcgcc cttcccaaca 3120
gttgcgcagc ctgaatggcg aatggcgcct gatgcggtat tttctcctta cgcatctgtg 3180
cggtatttca caccgcatat ggtgcactct cagtacaatc tgctctgatg ccgcatagtt 3240
aagccagccc cgacacccgc caacacccgc tgacgcgccc tgacgggctt gtctgctccc 3300
ggcatccgct tacagacaag ctgtgaccgt ctccgggagc tgcatgtgtc agaggttttc 3360
accgtcatca ccgaaacgcg cgatgacgaa agggcctcgt gatacgccta tttttatagg 3420
ttaatgtcat gataataatg gtttcttaga cgtcaggtgg cacttttcgg ggaaatgtgc 3480
gcggaacccc tatttgttta tttttctaaa tacattcaaa tatgtatccg ctcatgagac 3540
aataaccctg ataaatgctt caataatatt gaaaaaggaa gagtatgagt attcaacatt 3600
tccgtgtcgc ccttattccc ttttttgcgg cattttgcct tcctgttttt gctcacccag 3660
aaacgctggt gaaagtaaaa gatgctgaag atcagttggg tgcacgagtg ggttacatcg 3720
aactggatct caacagcggt aagatccttg agagttttcg ccccgaagaa cgttttccaa 3780
tgatgagcac ttttaaagtt ctgctatgtg gcgcggtatt atcccgtatt gacgccgggc 3840
aagagcaact cggtcgccgc atacactatt ctcagaatga cttggttgag tactcaccag 3900
tcacagaaaa gcatcttacg gatggcatga cagtaagaga attatgcagt gctgccataa 3960
ccatgagtga taacactgcg gccaacttac ttctgacaac gatcggagga ccgaaggagc 4020
taaccgcttt tttgcacaac atgggggatc atgtaactcg ccttgatcgt tgggaaccgg 4080
agctgaatga agccatacca aacgacgagc gtgacaccac gatgcctgta gcaatggcaa 4140
caacgttgcg caaactatta actggcgaac tacttactct agcttcccgg caacaattaa 4200
tagactggat ggaggcggat aaagttgcag gaccacttct gcgctcggcc cttccggctg 4260
gctggtttat tgctgataaa tctggagccg gtgagcgtgg gtctcgcggt atcattgcag 4320
cactggggcc agatggtaag ccctcccgta tcgtagttat ctacacgacg gggagtcagg 4380
caactatgga tgaacgaaat agacagatcg ctgagatagg tgcctcactg attaagcatt 4440
ggtaactgtc agaccaagtt tactcatata tactttagat tgatttaaaa cttcattttt 4500
aatttaaaag gatctaggtg aagatccttt ttgataatct catgaccaaa atcccttaac 4560
gtgagttttc gttccactga gcgtcagacc ccgtagaaaa gatcaaagga tcttcttgag 4620
atcctttttt tctgcgcgta atctgctgct tgcaaacaaa aaaaccaccg ctaccagcgg 4680
tggtttgttt gccggatcaa gagctaccaa ctctttttcc gaaggtaact ggcttcagca 4740
gagcgcagat accaaatact gtccttctag tgtagccgta gttaggccac cacttcaaga 4800
actctgtagc accgcctaca tacctcgctc tgctaatcct gttaccagtg gctgctgcca 4860
gtggcgataa gtcgtgtctt accgggttgg actcaagacg atagttaccg gataaggcgc 4920
agcggtcggg ctgaacgggg ggttcgtgca cacagcccag cttggagcga acgacctaca 4980
ccgaactgag atacctacag cgtgagcatt gagaaagcgc cacgcttccc gaagggagaa 5040
aggcggacag gtatccggta agcggcaggg tcggaacagg agagcgcacg agggagcttc 5100
cagggggaaa cgcctggtat ctttatagtc ctgtcgggtt tcgccacctc tgacttgagc 5160
gtcgattttt gtgatgctcg tcaggggggc ggagcctatg gaaaaacgcc agcaacgcgg 5220
cctttttacg gttcctggcc ttttgctggc cttttgctca catgttcttt cctgcgttat 5280
cccctgattc tgtggataac cgtattaccg cctttgagtg agctgatacc gctcgccgca 5340
gccgaacgac cgagcgcagc gagtcagtga gcgaggaagc ggaagagcgc ccaatacgca 5400
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actggaaagc gggcagtgag cgcaacgcaa ttaatgtgag ttagctcact cattaggcac 5520
cccaggcttt acactttatg cttccggctc gtatgttgtg tggaattgtg agcggataac 5580
aatttcacac aggaaacagc tatgaccatg attacgccaa gctttgctct taggagtttc 5640
ctaatacatc ccaaactcaa atatataaag catttgactt gttctatgcc ctagggggcg 5700
gggggaagct aagccagctt tttttaacat ttaaaatgtt aattccattt taaatgcaca 5760
gatgttttta tttcataagg gtttcaatgt gcatgaatgc tgcaatattc ctgttaccaa 5820
agctagtata aataaaaata gataaacgtg gaaattactt agagtttctg tcattaacgt 5880
ttccttcctc agttgacaac ataaatgcgc tgctgagcaa gccagtttgc atctgtcagg 5940
atcaatttcc cattatgcca gtcatattaa ttactagtca attagttgat ttttattttt 6000
gacatataca tgtgaatgaa agaccccacc tgtaggtttg gcaagctagc ttaagtaacg 6060
ccattttgca aggcatggaa aaatacataa ctgagaatag aaaagttcag atcaaggtca 6120
ggaacagatg gaacagctga atatgggcca aacaggatat ctgtggtaag cagttcctgc 6180
cccggctcag ggccaagaac agatggaaca gctgaatatg ggccaaacag gatatctgtg 6240
gtaagcagtt cctgccccgg ctcagggcca agaacagatg gtccccagat gcggtccagc 6300
cctcagcagt ttctagagaa ccatcagatg tttccagggt gccccaagga cctgaaatga 6360
ccctgtgcct tatttgaact aaccaatcag ttcgcttctc gcttctgttc gcgcgcttat 6420
gctccccgag ctcaataaaa gagcccacaa cccctcactc ggggcgccag tcctccgatt 6480
gactgagtcg cccgggtacc cgtgtatcca ataaaccctc ttgcagttgc atccgacttg 6540
tggtctcgct gttccttggg agggtctcct ctgagtgatt gactacccgt cagcgggggt 6600
ctttcatttg ggggctcgtc cgggatcggg agacccctgc ccagggacca ccgacccacc 6660
accgggaggt aagctggcca gcaacttatc tgtgtctgtc cgattgtcta gtgtctatga 6720
ctgattttat gcgcctgcgt cggtactagt tagctaacta gctctgtatc tggcggaccc 6780
gtggtggaac tgacgagttc ggaacacccg gccgcaaccc tgggagacgt cccagggact 6840
tcgggggccg tttttgtggc ccgacctgag tcctaaaatc ccgatcgttt aggactcttt 6900
ggtgcacccc ccttagagga gggatatgtg gttctggtag gagacgagaa cctaaaacag 6960
ttcccgcctc cgtctgaatt tttgctttcg gtttgggacc gaagccgcgc cgcgcgtctt 7020
gtctgctgca gcatcgttct gtgttgtctc tgtctgactg tgtttctgta tttgtctgaa 7080
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gatgtcgagc ggatcgctca caaccagtcg gtagatgtca agaagagacg ttgggttacc 7200
ttctgctctg cagaatggcc aacctttaac gtcggatggc cgcgagacgg cacctttaac 7260
cgagacctca tcacccaggt taagatcaag gtcttttcac ctggcccgca tggacaccca 7320
gaccaggtcc cctacatcgt gacctgggaa gccttggctt ttgacccccc tccctgggtc 7380
aagccctttg tacaccctaa gcctccgcct cctcttcctc catccgcccc gtctctcccc 7440
cttgaacctc ctcgttcgac cccgcctcga tcctcccttt atccagccct cactccttct 7500
ctaggcgccc ccatatggcc atatgagatc ttatatgggg cacccccgcc ccttgtaaac 7560
ttccctgacc ctgacatgac aagagttact aacagcccct ctctccaagc tcacttacag 7620
gctctctact tagtccagca cgaagtctgg agacctctgg cggcagccta ccaagaacaa 7680
ctggaccga 7689
<210> 402
<211> 7688
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 402
ccggtgccgc caccatggaa accgacaccc tgctgctgtg ggtgctgctg ctgtgggtgc 60
caggatccac aggacagtct gtgttgactc agccaccctc agcgtctggg acccccggac 120
agagggtcac catctcttgt tctggaagca ggtccaacgt aggaggtaat tatgtatttt 180
ggtaccagca agtccccgga gcgaccccca aactcctcat ctataggagt aatcagcggc 240
cctcgggggt ccctgaccga ttcgctggct ccaagtctgg ctcctcagcc tccctggcca 300
tcagtggact ccggtccgag gatgaggctg attattactg tgcaacatgg gatgacagcc 360
tgagtggttt tgtcttcgga actgggacca aggtcaccgt cctaggttct agaggtggtg 420
gtggtagcgg cggcggcggc tctggtggtg gtggatccct cgagatggcc gaggtgcagc 480
tggtggagtc tgggggaggc ttggtcaagc ctggagggtc cctgagactc tcctgtgcag 540
cctctggatt caccttcagt gactactaca tgagctggat ccgccaggct ccagggaagg 600
ggctggagtg ggtttcatac attagtagta gtggtagtac catatactac gcagactctg 660
tgaagggccg attcaccatc tcccagggac aacgccaaga actcactgta tctgcaaatg 720
aacagcctga gagccgagga cacggccgta tattactgtg cgcgcgggtt acggtaaagc 780
ttacgatcag tggggtcaag gtactctggt gaccgtctcc tcagaacaaa aactcatctc 840
agaagaggat ctggcggccg cacccaccac gacgccagcg ccgcgaccac caaccccggc 900
gcccacgatc gcgtcgcagc ccctgtccct gcgcccagag gcgtgccggc cagcggcggg 960
gggcgcagtg cacacgaggg ggctggactt cgcctgtgat atctacatct gggcgcccct 1020
ggccgggact tgtggggtcc ttctcctgtc actggttatc accctttact gcaacaaacg 1080
gggcagaaag aagctcctgt atatattcaa acaaccattt atgagaccag tacaaactac 1140
tcaagaggaa gatggctgta gctgccgatt tccagaagaa gaagaaggag gatgtgaact 1200
gagagtgaag ttcagcagga gcgcagagcc ccccgcgtac cagcagggcc agaaccagct 1260
ctataacgag ctcaatctag gacgaagaga ggagtacgat gttttggaca agagacgtgg 1320
ccgggaccct gagatggggg gaaagccgag aaggaagaac cctcaggaag gcctgtacaa 1380
tgaactgcag aaagataaga tggcggaggc ctacagtgag attgggatga aaggcgagcg 1440
ccggaggggc aaggggcacg atggccttta ccagggtctc agtacagcca ccaaggacac 1500
ctacgacgcc cttcacatgc aggccctgcc ccctcgctaa cagccactcg aggatccgga 1560
ttagtccaat ttgttaaaga caggatatca gtggtccagg ctctagtttt gactcaacaa 1620
tatcaccagc tgaagcctat agagtacgag ccatagataa aataaaagat tttatttagt 1680
ctccagaaaa aggggggaat gaaagacccc acctgtaggt ttggcaagct agcttaagta 1740
acgccatttt gcaaggcatg gaaaaataca taactgagaa tagagaagtt cagatcaagg 1800
tcaggaacag atggaacagc tgaatatggg ccaaacagga tatctgtggt aagcagttcc 1860
tgccccggct cagggccaag aacagatgga acagctgaat atgggccaaa caggatatct 1920
gtggtaagca gttcctgccc cggctcaggg ccaagaacag atggtcccca gatgcggtcc 1980
agccctcagc agtttctaga gaaccatcag atgtttccag ggtgccccaa ggacctgaaa 2040
tgaccctgtg ccttatttga actaaccaat cagttcgctt ctcgcttctg ttcgcgcgct 2100
tctgctcccc gagctcaata aaagagccca caacccctca ctcggggcgc cagtcctccg 2160
attgactgag tcgcccgggt acccgtgtat ccaataaacc ctcttgcagt tgcatccgac 2220
ttgtggtctc gctgttcctt gggagggtct cctctgagtg attgactacc cgtcagcggg 2280
ggtctttcac acatgcagca tgtatcaaaa ttaatttggt tttttttctt aagtatttac 2340
attaaatggc catagtactt aaagttacat tggcttcctt gaaataaaca tggagtattc 2400
agaatgtgtc ataaatattt ctaattttaa gatagtatct ccattggctt tctacttttt 2460
cttttatttt tttttgtcct ctgtcttcca tttgttgttg ttgttgtttg tttgtttgtt 2520
tgttggttgg ttggttaatt tttttttaaa gatcctacac tatagttcaa gctagactat 2580
tagctactct gtaacccagg gtgaccttga agtcatgggt agcctgctgt tttagccttc 2640
ccacatctaa gattacaggt atgagctatc atttttggta tattgattga ttgattgatt 2700
gatgtgtgtg tgtgtgattg tgtttgtgtg tgtgactgtg aaaatgtgtg tatgggtgtg 2760
tgtgaatgtg tgtatgtatg tgtgtgtgtg agtgtgtgtg tgtgtgtgtg catgtgtgtg 2820
tgtgtgactg tgtctatgtg tatgactgtg tgtgtgtgtg tgtgtgtgtg tgtgtgtgtg 2880
tgtgtgtgtg tgttgtgaaa aaatattcta tggtagtgag agccaacgct ccggctcagg 2940
tgtcaggttg gtttttgaga cagagtcttt cacttagctt ggaattcact ggccgtcgtt 3000
ttacaacgtc gtgactggga aaaccctggc gttacccaac ttaatcgcct tgcagcacat 3060
ccccctttcg ccagctggcg taatagcgaa gaggcccgca ccgatcgccc ttcccaacag 3120
ttgcgcagcc tgaatggcga atggcgcctg atgcggtatt ttctccttac gcatctgtgc 3180
ggtatttcac accgcatatg gtgcactctc agtacaatct gctctgatgc cgcatagtta 3240
agccagcccc gacacccgcc aacacccgct gacgcgccct gacgggcttg tctgctcccg 3300
gcatccgctt acagacaagc tgtgaccgtc tccgggagct gcatgtgtca gaggttttca 3360
ccgtcatcac cgaaacgcgc gatgacgaaa gggcctcgtg atacgcctat ttttataggt 3420
taatgtcatg ataataatgg tttcttagac gtcaggtggc acttttcggg gaaatgtgcg 3480
cggaacccct atttgtttat ttttctaaat acattcaaat atgtatccgc tcatgagaca 3540
ataaccctga taaatgcttc aataatattg aaaaaggaag agtatgagta ttcaacattt 3600
ccgtgtcgcc cttattccct tttttgcggc attttgcctt cctgtttttg ctcacccaga 3660
aacgctggtg aaagtaaaag atgctgaaga tcagttgggt gcacgagtgg gttacatcga 3720
actggatctc aacagcggta agatccttga gagttttcgc cccgaagaac gttttccaat 3780
gatgagcact tttaaagttc tgctatgtgg cgcggtatta tcccgtattg acgccgggca 3840
agagcaactc ggtcgccgca tacactattc tcagaatgac ttggttgagt actcaccagt 3900
cacagaaaag catcttacgg atggcatgac agtaagagaa ttatgcagtg ctgccataac 3960
catgagtgat aacactgcgg ccaacttact tctgacaacg atcggaggac cgaaggagct 4020
aaccgctttt ttgcacaaca tgggggatca tgtaactcgc cttgatcgtt gggaaccgga 4080
gctgaatgaa gccataccaa acgacgagcg tgacaccacg atgcctgtag caatggcaac 4140
aacgttgcgc aaactattaa ctggcgaact acttactcta gcttcccggc aacaattaat 4200
agactggatg gaggcggata aagttgcagg accacttctg cgctcggccc ttccggctgg 4260
ctggtttatt gctgataaat ctggagccgg tgagcgtggg tctcgcggta tcattgcagc 4320
actggggcca gatggtaagc cctcccgtat cgtagttatc tacacgacgg ggagtcaggc 4380
aactatggat gaacgaaata gacagatcgc tgagataggt gcctcactga ttaagcattg 4440
gtaactgtca gaccaagttt actcatatat actttagatt gatttaaaac ttcattttta 4500
atttaaaagg atctaggtga agatcctttt tgataatctc atgaccaaaa tcccttaacg 4560
tgagttttcg ttccactgag cgtcagaccc cgtagaaaag atcaaaggat cttcttgaga 4620
tccttttttt ctgcgcgtaa tctgctgctt gcaaacaaaa aaaccaccgc taccagcggt 4680
ggtttgtttg ccggatcaag agctaccaac tctttttccg aaggtaactg gcttcagcag 4740
agcgcagata ccaaatactg tccttctagt gtagccgtag ttaggccacc acttcaagaa 4800
ctctgtagca ccgcctacat acctcgctct gctaatcctg ttaccagtgg ctgctgccag 4860
tggcgataag tcgtgtctta ccgggttgga ctcaagacga tagttaccgg ataaggcgca 4920
gcggtcgggc tgaacggggg gttcgtgcac acagcccagc ttggagcgaa cgacctacac 4980
cgaactgaga tacctacagc gtgagcattg agaaagcgcc acgcttcccg aagggagaaa 5040
ggcggacagg tatccggtaa gcggcagggt cggaacagga gagcgcacga gggagcttcc 5100
agggggaaac gcctggtatc tttatagtcc tgtcgggttt cgccacctct gacttgagcg 5160
tcgatttttg tgatgctcgt caggggggcg gagcctatgg aaaaacgcca gcaacgcggc 5220
ctttttacgg ttcctggcct tttgctggcc ttttgctcac atgttctttc ctgcgttatc 5280
ccctgattct gtggataacc gtattaccgc ctttgagtga gctgataccg ctcgccgcag 5340
ccgaacgacc gagcgcagcg agtcagtgag cgaggaagcg gaagagcgcc caatacgcaa 5400
accgcctctc cccgcgcgtt ggccgattca ttaatgcagc tggcacgaca ggtttcccga 5460
ctggaaagcg ggcagtgagc gcaacgcaat taatgtgagt tagctcactc attaggcacc 5520
ccaggcttta cactttatgc ttccggctcg tatgttgtgt ggaattgtga gcggataaca 5580
atttcacaca ggaaacagct atgaccatga ttacgccaag ctttgctctt aggagtttcc 5640
taatacatcc caaactcaaa tatataaagc atttgacttg ttctatgccc tagggggcgg 5700
ggggaagcta agccagcttt ttttaacatt taaaatgtta attccatttt aaatgcacag 5760
atgtttttat ttcataaggg tttcaatgtg catgaatgct gcaatattcc tgttaccaaa 5820
gctagtataa ataaaaatag ataaacgtgg aaattactta gagtttctgt cattaacgtt 5880
tccttcctca gttgacaaca taaatgcgct gctgagcaag ccagtttgca tctgtcagga 5940
tcaatttccc attatgccag tcatattaat tactagtcaa ttagttgatt tttatttttg 6000
acatatacat gtgaatgaaa gaccccacct gtaggtttgg caagctagct taagtaacgc 6060
cattttgcaa ggcatggaaa aatacataac tgagaataga aaagttcaga tcaaggtcag 6120
gaacagatgg aacagctgaa tatgggccaa acaggatatc tgtggtaagc agttcctgcc 6180
ccggctcagg gccaagaaca gatggaacag ctgaatatgg gccaaacagg atatctgtgg 6240
taagcagttc ctgccccggc tcagggccaa gaacagatgg tccccagatg cggtccagcc 6300
ctcagcagtt tctagagaac catcagatgt ttccagggtg ccccaaggac ctgaaatgac 6360
cctgtgcctt atttgaacta accaatcagt tcgcttctcg cttctgttcg cgcgcttatg 6420
ctccccgagc tcaataaaag agcccacaac ccctcactcg gggcgccagt cctccgattg 6480
actgagtcgc ccgggtaccc gtgtatccaa taaaccctct tgcagttgca tccgacttgt 6540
ggtctcgctg ttccttggga gggtctcctc tgagtgattg actacccgtc agcgggggtc 6600
tttcatttgg gggctcgtcc gggatcggga gacccctgcc cagggaccac cgacccacca 6660
ccgggaggta agctggccag caacttatct gtgtctgtcc gattgtctag tgtctatgac 6720
tgattttatg cgcctgcgtc ggtactagtt agctaactag ctctgtatct ggcggacccg 6780
tggtggaact gacgagttcg gaacacccgg ccgcaaccct gggagacgtc ccagggactt 6840
cgggggccgt ttttgtggcc cgacctgagt cctaaaatcc cgatcgttta ggactctttg 6900
gtgcaccccc cttagaggag ggatatgtgg ttctggtagg agacgagaac ctaaaacagt 6960
tcccgcctcc gtctgaattt ttgctttcgg tttgggaccg aagccgcgcc gcgcgtcttg 7020
tctgctgcag catcgttctg tgttgtctct gtctgactgt gtttctgtat ttgtctgaaa 7080
atatgggccc gggctagact gttaccactc ccttaagttt gaccttaggt cactggaaag 7140
atgtcgagcg gatcgctcac aaccagtcgg tagatgtcaa gaagagacgt tgggttacct 7200
tctgctctgc agaatggcca acctttaacg tcggatggcc gcgagacggc acctttaacc 7260
gagacctcat cacccaggtt aagatcaagg tcttttcacc tggcccgcat ggacacccag 7320
accaggtccc ctacatcgtg acctgggaag ccttggcttt tgacccccct ccctgggtca 7380
agccctttgt acaccctaag cctccgcctc ctcttcctcc atccgccccg tctctccccc 7440
ttgaacctcc tcgttcgacc ccgcctcgat cctcccttta tccagccctc actccttctc 7500
taggcgcccc catatggcca tatgagatct tatatggggc acccccgccc cttgtaaact 7560
tccctgaccc tgacatgaca agagttacta acagcccctc tctccaagct cacttacagg 7620
ctctctactt agtccagcac gaagtctgga gacctctggc ggcagcctac caagaacaac 7680
tggaccga 7688
<210> 403
<211> 7689
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 403
ccggtgccgc caccatggaa accgacaccc tgctgctgtg ggtgctgctg ctgtgggtgc 60
caggatccac aggacagtct gtcgtgacgc agccgccctc aatgtctgcg gccccaggac 120
agcaagtcac catctcctgc tctggaggca actccaacat tgagagaaat tatgtatcct 180
ggtacctcca gctccctgga acagccccca aactcgtcat ttttgacaat gataggcgac 240
cctcagggat tcctgaccga ttctctggct ccaagtctgg cacgtcagcc accctgggca 300
tcaccggact ccagactggg gacgaggccg attattactg cggaacatgg gatagcagcc 360
tgagaggttg ggtgttcggc ggagggacca agctgaccgt cctaggttct agaggtggtg 420
gtggtagcgg cggcggcggc tctggtggtg gtggatccct cgagatggcc gaggtgcagc 480
tggtggagtc cgggggaggc ttgatacagc ctggggggtc cctgagactc tcctgtgcag 540
cctctggatt cacctttagc aactatgcca tgaactgggt ccgccaggct ccagggaagg 600
ggctggagtg ggtctcaact attaatggtc gtggtagtag tacaatctac gcagactccg 660
tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat ctgcaaatga 720
acagcctgag agccgaggac acagccacgt attactgtgc gcgctacatc tctcgtggtc 780
tgggtgattc ttggggtcaa ggtactctgg tgaccgtctc ctcagaacaa aaactcatct 840
cagaggagga tctggcggcc gcacccacca cgacgccagc gccgcgacca ccaaccccgg 900
cgcccacgat cgcgtcgcag cccctgtccc tgcgcccaga ggcgtgccgg ccagcggcgg 960
ggggcgcagt gcacacgagg gggctggact tcgcctgtga tatctacatc tgggcgcccc 1020
tggccgggac ttgtggggtc cttctcctgt cactggttat caccctttac tgcaacaaac 1080
ggggcagaaa gaagctcctg tatatattca aacaaccatt tatgagacca gtacaaacta 1140
ctcaagagga agatggctgt agctgccgat ttccagaaga agaagaagga ggatgtgaac 1200
tgagagtgaa gttcagcagg agcgcagagc cccccgcgta ccagcagggc cagaaccagc 1260
tctataacga gctcaatcta ggacgaagag aggagtacga tgttttggac aagagacgtg 1320
gccgggaccc tgagatgggg ggaaagccga gaaggaagaa ccctcaggaa ggcctgtaca 1380
atgaactgca gaaagataag atggcggagg cctacagtga gattgggatg aaaggcgagc 1440
gccggagggg caaggggcac gatggccttt accagggtct cagtacagcc accaaggaca 1500
cctacgacgc ccttcacatg caggccctgc cccctcgcta acagccactc gaggatccgg 1560
attagtccaa tttgttaaag acaggatatc agtggtccag gctctagttt tgactcaaca 1620
atatcaccag ctgaagccta tagagtacga gccatagata aaataaaaga ttttatttag 1680
tctccagaaa aaggggggaa tgaaagaccc cacctgtagg tttggcaagc tagcttaagt 1740
aacgccattt tgcaaggcat ggaaaaatac ataactgaga atagagaagt tcagatcaag 1800
gtcaggaaca gatggaacag ctgaatatgg gccaaacagg atatctgtgg taagcagttc 1860
ctgccccggc tcagggccaa gaacagatgg aacagctgaa tatgggccaa acaggatatc 1920
tgtggtaagc agttcctgcc ccggctcagg gccaagaaca gatggtcccc agatgcggtc 1980
cagccctcag cagtttctag agaaccatca gatgtttcca gggtgcccca aggacctgaa 2040
atgaccctgt gccttatttg aactaaccaa tcagttcgct tctcgcttct gttcgcgcgc 2100
ttctgctccc cgagctcaat aaaagagccc acaacccctc actcggggcg ccagtcctcc 2160
gattgactga gtcgcccggg tacccgtgta tccaataaac cctcttgcag ttgcatccga 2220
cttgtggtct cgctgttcct tgggagggtc tcctctgagt gattgactac ccgtcagcgg 2280
gggtctttca cacatgcagc atgtatcaaa attaatttgg ttttttttct taagtattta 2340
cattaaatgg ccatagtact taaagttaca ttggcttcct tgaaataaac atggagtatt 2400
cagaatgtgt cataaatatt tctaatttta agatagtatc tccattggct ttctactttt 2460
tcttttattt ttttttgtcc tctgtcttcc atttgttgtt gttgttgttt gtttgtttgt 2520
ttgttggttg gttggttaat ttttttttaa agatcctaca ctatagttca agctagacta 2580
ttagctactc tgtaacccag ggtgaccttg aagtcatggg tagcctgctg ttttagcctt 2640
cccacatcta agattacagg tatgagctat catttttggt atattgattg attgattgat 2700
tgatgtgtgt gtgtgtgatt gtgtttgtgt gtgtgactgt gaaaatgtgt gtatgggtgt 2760
gtgtgaatgt gtgtatgtat gtgtgtgtgt gagtgtgtgt gtgtgtgtgt gcatgtgtgt 2820
gtgtgtgact gtgtctatgt gtatgactgt gtgtgtgtgt gtgtgtgtgt gtgtgtgtgt 2880
gtgtgtgtgt gtgttgtgaa aaaatattct atggtagtga gagccaacgc tccggctcag 2940
gtgtcaggtt ggtttttgag acagagtctt tcacttagct tggaattcac tggccgtcgt 3000
tttacaacgt cgtgactggg aaaaccctgg cgttacccaa cttaatcgcc ttgcagcaca 3060
tccccctttc gccagctggc gtaatagcga agaggcccgc accgatcgcc cttcccaaca 3120
gttgcgcagc ctgaatggcg aatggcgcct gatgcggtat tttctcctta cgcatctgtg 3180
cggtatttca caccgcatat ggtgcactct cagtacaatc tgctctgatg ccgcatagtt 3240
aagccagccc cgacacccgc caacacccgc tgacgcgccc tgacgggctt gtctgctccc 3300
ggcatccgct tacagacaag ctgtgaccgt ctccgggagc tgcatgtgtc agaggttttc 3360
accgtcatca ccgaaacgcg cgatgacgaa agggcctcgt gatacgccta tttttatagg 3420
ttaatgtcat gataataatg gtttcttaga cgtcaggtgg cacttttcgg ggaaatgtgc 3480
gcggaacccc tatttgttta tttttctaaa tacattcaaa tatgtatccg ctcatgagac 3540
aataaccctg ataaatgctt caataatatt gaaaaaggaa gagtatgagt attcaacatt 3600
tccgtgtcgc ccttattccc ttttttgcgg cattttgcct tcctgttttt gctcacccag 3660
aaacgctggt gaaagtaaaa gatgctgaag atcagttggg tgcacgagtg ggttacatcg 3720
aactggatct caacagcggt aagatccttg agagttttcg ccccgaagaa cgttttccaa 3780
tgatgagcac ttttaaagtt ctgctatgtg gcgcggtatt atcccgtatt gacgccgggc 3840
aagagcaact cggtcgccgc atacactatt ctcagaatga cttggttgag tactcaccag 3900
tcacagaaaa gcatcttacg gatggcatga cagtaagaga attatgcagt gctgccataa 3960
ccatgagtga taacactgcg gccaacttac ttctgacaac gatcggagga ccgaaggagc 4020
taaccgcttt tttgcacaac atgggggatc atgtaactcg ccttgatcgt tgggaaccgg 4080
agctgaatga agccatacca aacgacgagc gtgacaccac gatgcctgta gcaatggcaa 4140
caacgttgcg caaactatta actggcgaac tacttactct agcttcccgg caacaattaa 4200
tagactggat ggaggcggat aaagttgcag gaccacttct gcgctcggcc cttccggctg 4260
gctggtttat tgctgataaa tctggagccg gtgagcgtgg gtctcgcggt atcattgcag 4320
cactggggcc agatggtaag ccctcccgta tcgtagttat ctacacgacg gggagtcagg 4380
caactatgga tgaacgaaat agacagatcg ctgagatagg tgcctcactg attaagcatt 4440
ggtaactgtc agaccaagtt tactcatata tactttagat tgatttaaaa cttcattttt 4500
aatttaaaag gatctaggtg aagatccttt ttgataatct catgaccaaa atcccttaac 4560
gtgagttttc gttccactga gcgtcagacc ccgtagaaaa gatcaaagga tcttcttgag 4620
atcctttttt tctgcgcgta atctgctgct tgcaaacaaa aaaaccaccg ctaccagcgg 4680
tggtttgttt gccggatcaa gagctaccaa ctctttttcc gaaggtaact ggcttcagca 4740
gagcgcagat accaaatact gtccttctag tgtagccgta gttaggccac cacttcaaga 4800
actctgtagc accgcctaca tacctcgctc tgctaatcct gttaccagtg gctgctgcca 4860
gtggcgataa gtcgtgtctt accgggttgg actcaagacg atagttaccg gataaggcgc 4920
agcggtcggg ctgaacgggg ggttcgtgca cacagcccag cttggagcga acgacctaca 4980
ccgaactgag atacctacag cgtgagcatt gagaaagcgc cacgcttccc gaagggagaa 5040
aggcggacag gtatccggta agcggcaggg tcggaacagg agagcgcacg agggagcttc 5100
cagggggaaa cgcctggtat ctttatagtc ctgtcgggtt tcgccacctc tgacttgagc 5160
gtcgattttt gtgatgctcg tcaggggggc ggagcctatg gaaaaacgcc agcaacgcgg 5220
cctttttacg gttcctggcc ttttgctggc cttttgctca catgttcttt cctgcgttat 5280
cccctgattc tgtggataac cgtattaccg cctttgagtg agctgatacc gctcgccgca 5340
gccgaacgac cgagcgcagc gagtcagtga gcgaggaagc ggaagagcgc ccaatacgca 5400
aaccgcctct ccccgcgcgt tggccgattc attaatgcag ctggcacgac aggtttcccg 5460
actggaaagc gggcagtgag cgcaacgcaa ttaatgtgag ttagctcact cattaggcac 5520
cccaggcttt acactttatg cttccggctc gtatgttgtg tggaattgtg agcggataac 5580
aatttcacac aggaaacagc tatgaccatg attacgccaa gctttgctct taggagtttc 5640
ctaatacatc ccaaactcaa atatataaag catttgactt gttctatgcc ctagggggcg 5700
gggggaagct aagccagctt tttttaacat ttaaaatgtt aattccattt taaatgcaca 5760
gatgttttta tttcataagg gtttcaatgt gcatgaatgc tgcaatattc ctgttaccaa 5820
agctagtata aataaaaata gataaacgtg gaaattactt agagtttctg tcattaacgt 5880
ttccttcctc agttgacaac ataaatgcgc tgctgagcaa gccagtttgc atctgtcagg 5940
atcaatttcc cattatgcca gtcatattaa ttactagtca attagttgat ttttattttt 6000
gacatataca tgtgaatgaa agaccccacc tgtaggtttg gcaagctagc ttaagtaacg 6060
ccattttgca aggcatggaa aaatacataa ctgagaatag aaaagttcag atcaaggtca 6120
ggaacagatg gaacagctga atatgggcca aacaggatat ctgtggtaag cagttcctgc 6180
cccggctcag ggccaagaac agatggaaca gctgaatatg ggccaaacag gatatctgtg 6240
gtaagcagtt cctgccccgg ctcagggcca agaacagatg gtccccagat gcggtccagc 6300
cctcagcagt ttctagagaa ccatcagatg tttccagggt gccccaagga cctgaaatga 6360
ccctgtgcct tatttgaact aaccaatcag ttcgcttctc gcttctgttc gcgcgcttat 6420
gctccccgag ctcaataaaa gagcccacaa cccctcactc ggggcgccag tcctccgatt 6480
gactgagtcg cccgggtacc cgtgtatcca ataaaccctc ttgcagttgc atccgacttg 6540
tggtctcgct gttccttggg agggtctcct ctgagtgatt gactacccgt cagcgggggt 6600
ctttcatttg ggggctcgtc cgggatcggg agacccctgc ccagggacca ccgacccacc 6660
accgggaggt aagctggcca gcaacttatc tgtgtctgtc cgattgtcta gtgtctatga 6720
ctgattttat gcgcctgcgt cggtactagt tagctaacta gctctgtatc tggcggaccc 6780
gtggtggaac tgacgagttc ggaacacccg gccgcaaccc tgggagacgt cccagggact 6840
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ttcccgcctc cgtctgaatt tttgctttcg gtttgggacc gaagccgcgc cgcgcgtctt 7020
gtctgctgca gcatcgttct gtgttgtctc tgtctgactg tgtttctgta tttgtctgaa 7080
aatatgggcc cgggctagac tgttaccact cccttaagtt tgaccttagg tcactggaaa 7140
gatgtcgagc ggatcgctca caaccagtcg gtagatgtca agaagagacg ttgggttacc 7200
ttctgctctg cagaatggcc aacctttaac gtcggatggc cgcgagacgg cacctttaac 7260
cgagacctca tcacccaggt taagatcaag gtcttttcac ctggcccgca tggacaccca 7320
gaccaggtcc cctacatcgt gacctgggaa gccttggctt ttgacccccc tccctgggtc 7380
aagccctttg tacaccctaa gcctccgcct cctcttcctc catccgcccc gtctctcccc 7440
cttgaacctc ctcgttcgac cccgcctcga tcctcccttt atccagccct cactccttct 7500
ctaggcgccc ccatatggcc atatgagatc ttatatgggg cacccccgcc ccttgtaaac 7560
ttccctgacc ctgacatgac aagagttact aacagcccct ctctccaagc tcacttacag 7620
gctctctact tagtccagca cgaagtctgg agacctctgg cggcagccta ccaagaacaa 7680
ctggaccga 7689
<210> 404
<211> 235
<212> PRT
<213> 智人
<400> 404
Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu
1 5 10 15
His Ala Ala Arg Pro Ser Gln Phe Arg Val Ser Pro Leu Asp Arg Thr
20 25 30
Trp Asn Leu Gly Glu Thr Val Glu Leu Lys Cys Gln Val Leu Leu Ser
35 40 45
Asn Pro Thr Ser Gly Cys Ser Trp Leu Phe Gln Pro Arg Gly Ala Ala
50 55 60
Ala Ser Pro Thr Phe Leu Leu Tyr Leu Ser Gln Asn Lys Pro Lys Ala
65 70 75 80
Ala Glu Gly Leu Asp Thr Gln Arg Phe Ser Gly Lys Arg Leu Gly Asp
85 90 95
Thr Phe Val Leu Thr Leu Ser Asp Phe Arg Arg Glu Asn Glu Gly Cys
100 105 110
Tyr Phe Cys Ser Ala Leu Ser Asn Ser Ile Met Tyr Phe Ser His Phe
115 120 125
Val Pro Val Phe Leu Pro Ala Lys Pro Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg
130 135 140
Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg
145 150 155 160
Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly
165 170 175
Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr
180 185 190
Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Asn His
195 200 205
Arg Asn Arg Arg Arg Val Cys Lys Cys Pro Arg Pro Val Val Lys Ser
210 215 220
Gly Asp Lys Pro Ser Leu Ser Ala Arg Tyr Val
225 230 235
<210> 405
<211> 213
<212> DNA
<213> 智人
<400> 405
cccaccacga cgccagcgcc gcgaccacca accccggcgc ccacgatcgc gtcgcagccc 60
ctgtccctgc gcccagaggc gtgccggcca gcggcggggg gcgcagtgca cacgaggggg 120
ctggacttcg cctgtgatat ctacatctgg gcgcccctgg ccgggacttg tggggtcctt 180
ctcctgtcac tggttatcac cctttactgc aac 213
<210> 406
<211> 1509
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 406
atggaaaccg acaccctgct gctgtgggtg ctgctgctgt gggtgccagg atccacagga 60
cagtctgtcg tgacgcagcc tgcctccgtg tctgggtctc ctggacagtc gatcaccatc 120
tcctgcactg gaaccagcag tgacgttggt ggttataact atgtctcctg gtaccaacag 180
cacccaggca aagcccccaa actcatgatt tatgatgtca gtaagcggcc ctcaggggtt 240
tctaatcgct tctctggctc caagtctggc aacacggcct ccctgaccat ctctgggctc 300
caggctgagg acgaggctga ttattactgc agctcatata caagcagcag cactttggta 360
ttcggcggag ggaccaagct gaccgtccta ggttctagag gtggtggtgg tagcggcggc 420
ggcggctctg gtggtggtgg atccctcgag atggccgagg tgcagctggt ggagtctggg 480
ggagcctttg tacagcctgg ggggtccctg agactctcct gtgcagcctc tggattcacc 540
tttagcagct atgccatgac ctgggtccgc caggctccag ggaagggcct ggaatgggtc 600
tcgactatta gtggtcgtgg tcgtagcaca ttctacgcag actccgtgaa gggccggttt 660
accatctcca gagacaattc caagaacacg ctatatctgc aaatgaacag tctgagagcc 720
gaggacacgg ccgtatatta ctgtgcgcgc tactaccatg ctggtgcttt cgatctgtgg 780
ggtcaaggta ctctggtgac cgtctcctca gaacaaaaac tcatctcaga agaggatctg 840
gcggccgcaa ttgaagttat gtatcctcct ccttacctag acaatgagaa gagcaatgga 900
accattatcc atgtgaaagg gaaacacctt tgtccaagtc ccctatttcc cggaccttct 960
aagccctttt gggtgctggt ggtggttggt ggagtcctgg cttgctatag cttgctagta 1020
acagtggcct ttattatttt ctgggtgagg agtaagagga gcaggctcct gcacagtgac 1080
tacatgaaca tgactccccg ccgccccggg cccacccgca agcattacca gccctatgcc 1140
ccaccacgcg acttcgcagc ctatcgctcc agagtgaagt tcagcaggag cgcagacgcc 1200
cccgcgtacc agcagggcca gaaccagctc tataacgagc tcaatctagg acgaagagag 1260
gagtacgatg ttttggacaa gagacgtggc cgggaccctg agatgggggg aaagccgaga 1320
aggaagaacc ctcaggaagg cctgtacaat gaactgcaga aagataagat ggcggaggcc 1380
tacagtgaga ttgggatgaa aggcgagcgc cggaggggca aggggcacga tggcctttac 1440
cagggtctca gtacagccac caaggacacc tacgacgccc ttcacatgca ggccctgccc 1500
cctcgctaa 1509
<210> 407
<211> 7677
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 407
ccggtgccgc caccatggaa accgacaccc tgctgctgtg ggtgctgctg ctgtgggtgc 60
caggatccac aggacagtct gtgttgacgc agcctgcctc cgtgtctggg tctcctggac 120
agtcgctcac catctcctgc actggaacca gcaatgacgt tggtgcttat aagtatgtct 180
cctggtatca acagtaccca ggcaaagccc ccaaactcat actttatgat gtctttaagc 240
ggccctcagg ggtctctaat cgcttctctg gctccaagtc tgacaacacg gcctccctga 300
ccatctctgg gctccaggct gaggacgagg ctgattatta ctgcttctca cttacaagca 360
gtaacactta tgtcttcgga actgggacca aggtcaccgt cctaggttct agaggtggtg 420
gtggtagcgg cggcggcggc tctggtggtg gtggatccct cgagatggcc cagatgcagc 480
tggtgcagtc tggagctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc tcctgcaagg 540
cttctggtta cacctttaac agatatgcta tcacctgggt gcgacaggcc cctggacaag 600
gccttgagtg gatgggatgg atcagcgctt acaatggtaa ttcacactat gcacagaagc 660
tccagggcag agtcaccatg accacagaca catccacggg cacagcctat atggagctga 720
ggaggctgag atctgacgac acggccgtgt attactgtgc gcgcatggct tacgattctt 780
ggggtcaagg tactctggtg accgtctcct cagaacaaaa actcatctca gaagaggatc 840
tggcggccgc acccaccacg acgccagcgc cgcgaccacc aaccccggcg cccacgatcg 900
cgtcgcagcc cctgtccctg cgcccagagg cgtgccggcc agcggcgggg ggcgcagtgc 960
acacgagggg gctggacttc gcctgtgata tctacatctg ggcgcccctg gccgggactt 1020
gtggggtcct tctcctgtca ctggttatca ccctttactg caacaaacgg ggcagaaaga 1080
agctcctgta tatattcaaa caaccattta tgagaccagt acaaactact caagaggaag 1140
atggctgtag ctgccgattt ccagaagaag aagaaggagg atgtgaactg agagtgaagt 1200
tcagcaggag cgcagacgcc cccgcgtacc agcagggcca gaaccagctc tataacgagc 1260
tcaatctagg acgaagagag gagtacgatg ttttggacaa gagacgtggc cgggaccctg 1320
agatgggggg aaagccgaga aggaagaacc ctcaggaagg cctgtacaat gaactgcaga 1380
aagataagat ggcggaggcc tacagtgaga ttgggatgaa aggcgagcgc cggaggggca 1440
aggggcacga tggcctttac cagggtctca gtacagccac caaggacacc tacgacgccc 1500
ttcacatgca ggccctgccc cctcgctaac agccactcga ggatccggat tagtccaatt 1560
tgttaaagac aggatatcag tggtccaggc tctagttttg actcaacaat atcaccagct 1620
gaagcctata gagtacgagc catagataaa ataaaagatt ttatttagtc tccagaaaaa 1680
ggggggaatg aaagacccca cctgtaggtt tggcaagcta gcttaagtaa cgccattttg 1740
caaggcatgg aaaaatacat aactgagaat agagaagttc agatcaaggt caggaacaga 1800
tggaacagct gaatatgggc caaacaggat atctgtggta agcagttcct gccccggctc 1860
agggccaaga acagatggaa cagctgaata tgggccaaac aggatatctg tggtaagcag 1920
ttcctgcccc ggctcagggc caagaacaga tggtccccag atgcggtcca gccctcagca 1980
gtttctagag aaccatcaga tgtttccagg gtgccccaag gacctgaaat gaccctgtgc 2040
cttatttgaa ctaaccaatc agttcgcttc tcgcttctgt tcgcgcgctt ctgctccccg 2100
agctcaataa aagagcccac aacccctcac tcggggcgcc agtcctccga ttgactgagt 2160
cgcccgggta cccgtgtatc caataaaccc tcttgcagtt gcatccgact tgtggtctcg 2220
ctgttccttg ggagggtctc ctctgagtga ttgactaccc gtcagcgggg gtctttcaca 2280
catgcagcat gtatcaaaat taatttggtt ttttttctta agtatttaca ttaaatggcc 2340
atagtactta aagttacatt ggcttccttg aaataaacat ggagtattca gaatgtgtca 2400
taaatatttc taattttaag atagtatctc cattggcttt ctactttttc ttttattttt 2460
ttttgtcctc tgtcttccat ttgttgttgt tgttgtttgt ttgtttgttt gttggttggt 2520
tggttaattt ttttttaaag atcctacact atagttcaag ctagactatt agctactctg 2580
taacccaggg tgaccttgaa gtcatgggta gcctgctgtt ttagccttcc cacatctaag 2640
attacaggta tgagctatca tttttggtat attgattgat tgattgattg atgtgtgtgt 2700
gtgtgattgt gtttgtgtgt gtgactgtga aaatgtgtgt atgggtgtgt gtgaatgtgt 2760
gtatgtatgt gtgtgtgtga gtgtgtgtgt gtgtgtgtgc atgtgtgtgt gtgtgactgt 2820
gtctatgtgt atgactgtgt gtgtgtgtgt gtgtgtgtgt gtgtgtgtgt gtgtgtgtgt 2880
gttgtgaaaa aatattctat ggtagtgaga gccaacgctc cggctcaggt gtcaggttgg 2940
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tgactgggaa aaccctggcg ttacccaact taatcgcctt gcagcacatc cccctttcgc 3060
cagctggcgt aatagcgaag aggcccgcac cgatcgccct tcccaacagt tgcgcagcct 3120
gaatggcgaa tggcgcctga tgcggtattt tctccttacg catctgtgcg gtatttcaca 3180
ccgcatatgg tgcactctca gtacaatctg ctctgatgcc gcatagttaa gccagccccg 3240
acacccgcca acacccgctg acgcgccctg acgggcttgt ctgctcccgg catccgctta 3300
cagacaagct gtgaccgtct ccgggagctg catgtgtcag aggttttcac cgtcatcacc 3360
gaaacgcgcg atgacgaaag ggcctcgtga tacgcctatt tttataggtt aatgtcatga 3420
taataatggt ttcttagacg tcaggtggca cttttcgggg aaatgtgcgc ggaaccccta 3480
tttgtttatt tttctaaata cattcaaata tgtatccgct catgagacaa taaccctgat 3540
aaatgcttca ataatattga aaaaggaaga gtatgagtat tcaacatttc cgtgtcgccc 3600
ttattccctt ttttgcggca ttttgccttc ctgtttttgc tcacccagaa acgctggtga 3660
aagtaaaaga tgctgaagat cagttgggtg cacgagtggg ttacatcgaa ctggatctca 3720
acagcggtaa gatccttgag agttttcgcc ccgaagaacg ttttccaatg atgagcactt 3780
ttaaagttct gctatgtggc gcggtattat cccgtattga cgccgggcaa gagcaactcg 3840
gtcgccgcat acactattct cagaatgact tggttgagta ctcaccagtc acagaaaagc 3900
atcttacgga tggcatgaca gtaagagaat tatgcagtgc tgccataacc atgagtgata 3960
acactgcggc caacttactt ctgacaacga tcggaggacc gaaggagcta accgcttttt 4020
tgcacaacat gggggatcat gtaactcgcc ttgatcgttg ggaaccggag ctgaatgaag 4080
ccataccaaa cgacgagcgt gacaccacga tgcctgtagc aatggcaaca acgttgcgca 4140
aactattaac tggcgaacta cttactctag cttcccggca acaattaata gactggatgg 4200
aggcggataa agttgcagga ccacttctgc gctcggccct tccggctggc tggtttattg 4260
ctgataaatc tggagccggt gagcgtgggt ctcgcggtat cattgcagca ctggggccag 4320
atggtaagcc ctcccgtatc gtagttatct acacgacggg gagtcaggca actatggatg 4380
aacgaaatag acagatcgct gagataggtg cctcactgat taagcattgg taactgtcag 4440
accaagttta ctcatatata ctttagattg atttaaaact tcatttttaa tttaaaagga 4500
tctaggtgaa gatccttttt gataatctca tgaccaaaat cccttaacgt gagttttcgt 4560
tccactgagc gtcagacccc gtagaaaaga tcaaaggatc ttcttgagat cctttttttc 4620
tgcgcgtaat ctgctgcttg caaacaaaaa aaccaccgct accagcggtg gtttgtttgc 4680
cggatcaaga gctaccaact ctttttccga aggtaactgg cttcagcaga gcgcagatac 4740
caaatactgt ccttctagtg tagccgtagt taggccacca cttcaagaac tctgtagcac 4800
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gaacgggggg ttcgtgcaca cagcccagct tggagcgaac gacctacacc gaactgagat 4980
acctacagcg tgagcattga gaaagcgcca cgcttcccga agggagaaag gcggacaggt 5040
atccggtaag cggcagggtc ggaacaggag agcgcacgag ggagcttcca gggggaaacg 5100
cctggtatct ttatagtcct gtcgggtttc gccacctctg acttgagcgt cgatttttgt 5160
gatgctcgtc aggggggcgg agcctatgga aaaacgccag caacgcggcc tttttacggt 5220
tcctggcctt ttgctggcct tttgctcaca tgttctttcc tgcgttatcc cctgattctg 5280
tggataaccg tattaccgcc tttgagtgag ctgataccgc tcgccgcagc cgaacgaccg 5340
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gcagtgagcg caacgcaatt aatgtgagtt agctcactca ttaggcaccc caggctttac 5520
actttatgct tccggctcgt atgttgtgtg gaattgtgag cggataacaa tttcacacag 5580
gaaacagcta tgaccatgat tacgccaagc tttgctctta ggagtttcct aatacatccc 5640
aaactcaaat atataaagca tttgacttgt tctatgccct agggggcggg gggaagctaa 5700
gccagctttt tttaacattt aaaatgttaa ttccatttta aatgcacaga tgtttttatt 5760
tcataagggt ttcaatgtgc atgaatgctg caatattcct gttaccaaag ctagtataaa 5820
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ttgacaacat aaatgcgctg ctgagcaagc cagtttgcat ctgtcaggat caatttccca 5940
ttatgccagt catattaatt actagtcaat tagttgattt ttatttttga catatacatg 6000
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acagctgaat atgggccaaa caggatatct gtggtaagca gttcctgccc cggctcaggg 6180
ccaagaacag atggaacagc tgaatatggg ccaaacagga tatctgtggt aagcagttcc 6240
tgccccggct cagggccaag aacagatggt ccccagatgc ggtccagccc tcagcagttt 6300
ctagagaacc atcagatgtt tccagggtgc cccaaggacc tgaaatgacc ctgtgcctta 6360
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caataaaaga gcccacaacc cctcactcgg ggcgccagtc ctccgattga ctgagtcgcc 6480
cgggtacccg tgtatccaat aaaccctctt gcagttgcat ccgacttgtg gtctcgctgt 6540
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ggctcgtccg ggatcgggag acccctgccc agggaccacc gacccaccac cgggaggtaa 6660
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tttgtggccc gacctgagtc ctaaaatccc gatcgtttag gactctttgg tgcacccccc 6900
ttagaggagg gatatgtggt tctggtagga gacgagaacc taaaacagtt cccgcctccg 6960
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ggctagactg ttaccactcc cttaagtttg accttaggtc actggaaaga tgtcgagcgg 7140
atcgctcaca accagtcggt agatgtcaag aagagacgtt gggttacctt ctgctctgca 7200
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caccctaagc ctccgcctcc tcttcctcca tccgccccgt ctctccccct tgaacctcct 7440
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gtccagcacg aagtctggag acctctggcg gcagcctacc aagaacaact ggaccga 7677
<210> 408
<211> 7689
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多核苷酸
<400> 408
ccggtgccgc caccatggaa accgacaccc tgctgctgtg ggtgctgctg ctgtgggtgc 60
caggatccac aggatcttct gagctgactc aggaccctgc tgtgtctgtg gccttgggac 120
agacagtcag gatcacatgc caaggagaca gcctcagaag ctattatgca agctggtacc 180
agcagaagcc aggacaggcc cctgtacttg tcatctatgg taaaaacaac cggccctcag 240
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gggctcaggc ggaagatgag gctgactatt actgtaactc ccgggacagc agtggtaacc 360
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gtagcggcgg cggcggctct ggtggtggtg gatccctcga gatggcccag gtgcagctgg 480
tggagtctgg gggaggcctg gtccaccctg gggggtccct gagactctcc tgtgcagcct 540
ctggattcac cttcagaagc catagcatga actgggtccg ccaggctcca gggaaggggc 600
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tggccgggac ttgtggggtc cttctcctgt cactggttat caccctttac tgcaacaaac 1080
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ctcaagagga agatggctgt agctgccgat ttccagaaga agaagaagga ggatgtgaac 1200
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gtgtgtgtgt gtgttgtgaa aaaatattct atggtagtga gagccaacgc tccggctcag 2940
gtgtcaggtt ggtttttgag acagagtctt tcacttagct tggaattcac tggccgtcgt 3000
tttacaacgt cgtgactggg aaaaccctgg cgttacccaa cttaatcgcc ttgcagcaca 3060
tccccctttc gccagctggc gtaatagcga agaggcccgc accgatcgcc cttcccaaca 3120
gttgcgcagc ctgaatggcg aatggcgcct gatgcggtat tttctcctta cgcatctgtg 3180
cggtatttca caccgcatat ggtgcactct cagtacaatc tgctctgatg ccgcatagtt 3240
aagccagccc cgacacccgc caacacccgc tgacgcgccc tgacgggctt gtctgctccc 3300
ggcatccgct tacagacaag ctgtgaccgt ctccgggagc tgcatgtgtc agaggttttc 3360
accgtcatca ccgaaacgcg cgatgacgaa agggcctcgt gatacgccta tttttatagg 3420
ttaatgtcat gataataatg gtttcttaga cgtcaggtgg cacttttcgg ggaaatgtgc 3480
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tccgtgtcgc ccttattccc ttttttgcgg cattttgcct tcctgttttt gctcacccag 3660
aaacgctggt gaaagtaaaa gatgctgaag atcagttggg tgcacgagtg ggttacatcg 3720
aactggatct caacagcggt aagatccttg agagttttcg ccccgaagaa cgttttccaa 3780
tgatgagcac ttttaaagtt ctgctatgtg gcgcggtatt atcccgtatt gacgccgggc 3840
aagagcaact cggtcgccgc atacactatt ctcagaatga cttggttgag tactcaccag 3900
tcacagaaaa gcatcttacg gatggcatga cagtaagaga attatgcagt gctgccataa 3960
ccatgagtga taacactgcg gccaacttac ttctgacaac gatcggagga ccgaaggagc 4020
taaccgcttt tttgcacaac atgggggatc atgtaactcg ccttgatcgt tgggaaccgg 4080
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caacgttgcg caaactatta actggcgaac tacttactct agcttcccgg caacaattaa 4200
tagactggat ggaggcggat aaagttgcag gaccacttct gcgctcggcc cttccggctg 4260
gctggtttat tgctgataaa tctggagccg gtgagcgtgg gtctcgcggt atcattgcag 4320
cactggggcc agatggtaag ccctcccgta tcgtagttat ctacacgacg gggagtcagg 4380
caactatgga tgaacgaaat agacagatcg ctgagatagg tgcctcactg attaagcatt 4440
ggtaactgtc agaccaagtt tactcatata tactttagat tgatttaaaa cttcattttt 4500
aatttaaaag gatctaggtg aagatccttt ttgataatct catgaccaaa atcccttaac 4560
gtgagttttc gttccactga gcgtcagacc ccgtagaaaa gatcaaagga tcttcttgag 4620
atcctttttt tctgcgcgta atctgctgct tgcaaacaaa aaaaccaccg ctaccagcgg 4680
tggtttgttt gccggatcaa gagctaccaa ctctttttcc gaaggtaact ggcttcagca 4740
gagcgcagat accaaatact gtccttctag tgtagccgta gttaggccac cacttcaaga 4800
actctgtagc accgcctaca tacctcgctc tgctaatcct gttaccagtg gctgctgcca 4860
gtggcgataa gtcgtgtctt accgggttgg actcaagacg atagttaccg gataaggcgc 4920
agcggtcggg ctgaacgggg ggttcgtgca cacagcccag cttggagcga acgacctaca 4980
ccgaactgag atacctacag cgtgagcatt gagaaagcgc cacgcttccc gaagggagaa 5040
aggcggacag gtatccggta agcggcaggg tcggaacagg agagcgcacg agggagcttc 5100
cagggggaaa cgcctggtat ctttatagtc ctgtcgggtt tcgccacctc tgacttgagc 5160
gtcgattttt gtgatgctcg tcaggggggc ggagcctatg gaaaaacgcc agcaacgcgg 5220
cctttttacg gttcctggcc ttttgctggc cttttgctca catgttcttt cctgcgttat 5280
cccctgattc tgtggataac cgtattaccg cctttgagtg agctgatacc gctcgccgca 5340
gccgaacgac cgagcgcagc gagtcagtga gcgaggaagc ggaagagcgc ccaatacgca 5400
aaccgcctct ccccgcgcgt tggccgattc attaatgcag ctggcacgac aggtttcccg 5460
actggaaagc gggcagtgag cgcaacgcaa ttaatgtgag ttagctcact cattaggcac 5520
cccaggcttt acactttatg cttccggctc gtatgttgtg tggaattgtg agcggataac 5580
aatttcacac aggaaacagc tatgaccatg attacgccaa gctttgctct taggagtttc 5640
ctaatacatc ccaaactcaa atatataaag catttgactt gttctatgcc ctagggggcg 5700
gggggaagct aagccagctt tttttaacat ttaaaatgtt aattccattt taaatgcaca 5760
gatgttttta tttcataagg gtttcaatgt gcatgaatgc tgcaatattc ctgttaccaa 5820
agctagtata aataaaaata gataaacgtg gaaattactt agagtttctg tcattaacgt 5880
ttccttcctc agttgacaac ataaatgcgc tgctgagcaa gccagtttgc atctgtcagg 5940
atcaatttcc cattatgcca gtcatattaa ttactagtca attagttgat ttttattttt 6000
gacatataca tgtgaatgaa agaccccacc tgtaggtttg gcaagctagc ttaagtaacg 6060
ccattttgca aggcatggaa aaatacataa ctgagaatag aaaagttcag atcaaggtca 6120
ggaacagatg gaacagctga atatgggcca aacaggatat ctgtggtaag cagttcctgc 6180
cccggctcag ggccaagaac agatggaaca gctgaatatg ggccaaacag gatatctgtg 6240
gtaagcagtt cctgccccgg ctcagggcca agaacagatg gtccccagat gcggtccagc 6300
cctcagcagt ttctagagaa ccatcagatg tttccagggt gccccaagga cctgaaatga 6360
ccctgtgcct tatttgaact aaccaatcag ttcgcttctc gcttctgttc gcgcgcttat 6420
gctccccgag ctcaataaaa gagcccacaa cccctcactc ggggcgccag tcctccgatt 6480
gactgagtcg cccgggtacc cgtgtatcca ataaaccctc ttgcagttgc atccgacttg 6540
tggtctcgct gttccttggg agggtctcct ctgagtgatt gactacccgt cagcgggggt 6600
ctttcatttg ggggctcgtc cgggatcggg agacccctgc ccagggacca ccgacccacc 6660
accgggaggt aagctggcca gcaacttatc tgtgtctgtc cgattgtcta gtgtctatga 6720
ctgattttat gcgcctgcgt cggtactagt tagctaacta gctctgtatc tggcggaccc 6780
gtggtggaac tgacgagttc ggaacacccg gccgcaaccc tgggagacgt cccagggact 6840
tcgggggccg tttttgtggc ccgacctgag tcctaaaatc ccgatcgttt aggactcttt 6900
ggtgcacccc ccttagagga gggatatgtg gttctggtag gagacgagaa cctaaaacag 6960
ttcccgcctc cgtctgaatt tttgctttcg gtttgggacc gaagccgcgc cgcgcgtctt 7020
gtctgctgca gcatcgttct gtgttgtctc tgtctgactg tgtttctgta tttgtctgaa 7080
aatatgggcc cgggctagac tgttaccact cccttaagtt tgaccttagg tcactggaaa 7140
gatgtcgagc ggatcgctca caaccagtcg gtagatgtca agaagagacg ttgggttacc 7200
ttctgctctg cagaatggcc aacctttaac gtcggatggc cgcgagacgg cacctttaac 7260
cgagacctca tcacccaggt taagatcaag gtcttttcac ctggcccgca tggacaccca 7320
gaccaggtcc cctacatcgt gacctgggaa gccttggctt ttgacccccc tccctgggtc 7380
aagccctttg tacaccctaa gcctccgcct cctcttcctc catccgcccc gtctctcccc 7440
cttgaacctc ctcgttcgac cccgcctcga tcctcccttt atccagccct cactccttct 7500
ctaggcgccc ccatatggcc atatgagatc ttatatgggg cacccccgcc ccttgtaaac 7560
ttccctgacc ctgacatgac aagagttact aacagcccct ctctccaagc tcacttacag 7620
gctctctact tagtccagca cgaagtctgg agacctctgg cggcagccta ccaagaacaa 7680
ctggaccga 7689
<210> 409
<211> 25
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 409
Thr Ser Gly Gln Ala Gly Gln His His His His His His Gly Ala Tyr
1 5 10 15
Pro Tyr Asp Val Pro Asp Tyr Ala Ser
20 25
<210> 410
<211> 75
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成寡核苷酸
<400> 410
actagtggcc aggccggcca gcaccatcac catcaccatg gcgcataccc gtacgacgtt 60
ccggactacg cttct 75
<210> 411
<211> 4
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 411
Tyr Val Lys Met
1
<210> 412
<211> 33
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 412
Cys Leu Ser Ser Glu Arg Glu Arg Val Glu Asp Leu Phe Glu Tyr Glu
1 5 10 15
Cys Glu Leu Leu Thr Ser Glu Pro Ile Phe His Cys Arg Gln Glu Asp
20 25 30
Cys
<210> 413
<211> 10
<212> PRT
<213> 智人
<400> 413
Cys Asp Ala Glu Gly Pro Trp Gly Ile Ile
1 5 10
<210> 414
<211> 8
<212> PRT
<213> 智人
<400> 414
Met Phe Val Asn Met Thr Pro Cys
1 5
<210> 415
<211> 9
<212> PRT
<213> 智人
<400> 415
Pro Gln Phe Gln Arg Gln Pro Gln Trp
1 5
<210> 416
<211> 13
<212> PRT
<213> 智人
<400> 416
Cys Ile Glu Ser Thr Gly Asp Tyr Phe Leu Leu Cys Asp
1 5 10
<210> 417
<211> 11
<212> PRT
<213> 智人
<400> 417
Asn Gln Gln Thr Ala Pro Val Arg Tyr Phe Leu
1 5 10
<210> 418
<211> 8
<212> PRT
<213> 智人
<400> 418
Gly Asp Tyr Phe Leu Leu Cys Asp
1 5
<210> 419
<211> 11
<212> PRT
<213> 智人
<400> 419
Met Phe Val Asn Met Thr Pro Cys Gln Leu Asn
1 5 10
<210> 420
<211> 11
<212> PRT
<213> 智人
<400> 420
Gly Asn Pro Gln Phe Gln Arg Gln Pro Gln Trp
1 5 10
<210> 421
<211> 9
<212> PRT
<213> 智人
<400> 421
Leu Cys Asp Ala Glu Gly Pro Trp Gly
1 5
<210> 422
<211> 14
<212> PRT
<213> 智人
<400> 422
Gln Phe Gln Arg Gln Pro Gln Trp Asp Asp Pro Val Val Cys
1 5 10
<210> 423
<211> 33
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 423
Cys Met Asp Tyr Asp Phe Lys Val Lys Leu Ser Ser Glu Arg Glu Arg
1 5 10 15
Cys Trp Ala Ile Gly Cys Ile Phe Ala Glu Leu Leu Thr Ser Glu Pro
20 25 30
Cys
<210> 424
<211> 33
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 424
Cys Met Asp Tyr Asp Phe Lys Val Lys Leu Ser Ser Glu Arg Glu Arg
1 5 10 15
Cys Cys Ile Phe Ala Glu Leu Leu Thr Ser Glu Pro Ile Phe His Cys
20 25 30
Cys
<210> 425
<211> 33
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 425
Cys Met Asp Tyr Asp Phe Lys Val Lys Leu Ser Ser Glu Arg Glu Arg
1 5 10 15
Cys Glu Leu Leu Thr Ser Glu Pro Ile Phe His Cys Arg Gln Glu Asp
20 25 30
Cys
<210> 426
<211> 33
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 426
Cys Met Asp Tyr Asp Phe Lys Val Lys Leu Ser Ser Glu Arg Glu Arg
1 5 10 15
Cys Ser Glu Pro Ile Phe His Cys Arg Gln Glu Asp Ile Lys Thr Ser
20 25 30
Cys
<210> 427
<211> 33
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 427
Cys Phe Lys Val Lys Leu Ser Ser Glu Arg Glu Arg Val Glu Asp Leu
1 5 10 15
Cys Trp Ala Ile Gly Cys Ile Phe Ala Glu Leu Leu Thr Ser Glu Pro
20 25 30
Cys
<210> 428
<211> 33
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 428
Cys Phe Lys Val Lys Leu Ser Ser Glu Arg Glu Arg Val Glu Asp Leu
1 5 10 15
Cys Cys Ile Phe Ala Glu Leu Leu Thr Ser Glu Pro Ile Phe His Cys
20 25 30
Cys
<210> 429
<211> 33
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 429
Cys Phe Lys Val Lys Leu Ser Ser Glu Arg Glu Arg Val Glu Asp Leu
1 5 10 15
Cys Glu Leu Leu Thr Ser Glu Pro Ile Phe His Cys Arg Gln Glu Asp
20 25 30
Cys
<210> 430
<211> 33
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 430
Cys Phe Lys Val Lys Leu Ser Ser Glu Arg Glu Arg Val Glu Asp Leu
1 5 10 15
Cys Ser Glu Pro Ile Phe His Cys Arg Gln Glu Asp Ile Lys Thr Ser
20 25 30
Cys
<210> 431
<211> 33
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 431
Cys Leu Ser Ser Glu Arg Glu Arg Val Glu Asp Leu Phe Glu Tyr Glu
1 5 10 15
Cys Trp Ala Ile Gly Cys Ile Phe Ala Glu Leu Leu Thr Ser Glu Pro
20 25 30
Cys
<210> 432
<211> 33
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 432
Cys Leu Ser Ser Glu Arg Glu Arg Val Glu Asp Leu Phe Glu Tyr Glu
1 5 10 15
Cys Cys Ile Phe Ala Glu Leu Leu Thr Ser Glu Pro Ile Phe His Cys
20 25 30
Cys
<210> 433
<211> 33
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 433
Cys Leu Ser Ser Glu Arg Glu Arg Val Glu Asp Leu Phe Glu Tyr Glu
1 5 10 15
Cys Ser Glu Pro Ile Phe His Cys Arg Gln Glu Asp Ile Lys Thr Ser
20 25 30
Cys
<210> 434
<211> 33
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 434
Cys Arg Glu Arg Val Glu Asp Leu Phe Glu Tyr Glu Gly Cys Lys Val
1 5 10 15
Cys Trp Ala Ile Gly Cys Ile Phe Ala Glu Leu Leu Thr Ser Glu Pro
20 25 30
Cys
<210> 435
<211> 33
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 435
Cys Arg Glu Arg Val Glu Asp Leu Phe Glu Tyr Glu Gly Cys Lys Val
1 5 10 15
Cys Cys Ile Phe Ala Glu Leu Leu Thr Ser Glu Pro Ile Phe His Cys
20 25 30
Cys
<210> 436
<211> 33
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 436
Cys Arg Glu Arg Val Glu Asp Leu Phe Glu Tyr Glu Gly Cys Lys Val
1 5 10 15
Cys Glu Leu Leu Thr Ser Glu Pro Ile Phe His Cys Arg Gln Glu Asp
20 25 30
Cys
<210> 437
<211> 33
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成多肽
<400> 437
Cys Arg Glu Arg Val Glu Asp Leu Phe Glu Tyr Glu Gly Cys Lys Val
1 5 10 15
Cys Ser Glu Pro Ile Phe His Cys Arg Gln Glu Asp Ile Lys Thr Ser
20 25 30
Cys
<210> 438
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 438
Met Asp Tyr Asp Phe Lys Val Lys Leu Ser Ser Glu Arg Glu Arg
1 5 10 15
<210> 439
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 439
Phe Lys Val Lys Leu Ser Ser Glu Arg Glu Arg Val Glu Asp Leu
1 5 10 15
<210> 440
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 440
Leu Ser Ser Glu Arg Glu Arg Val Glu Asp Leu Phe Glu Tyr Glu
1 5 10 15
<210> 441
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 441
Arg Glu Arg Val Glu Asp Leu Phe Glu Tyr Glu Gly Cys Lys Val
1 5 10 15
<210> 442
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 442
Trp Ala Ile Gly Cys Ile Phe Ala Glu Leu Leu Thr Ser Glu Pro
1 5 10 15
<210> 443
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 443
Cys Ile Phe Ala Glu Leu Leu Thr Ser Glu Pro Ile Phe His Cys
1 5 10 15
<210> 444
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 444
Glu Leu Leu Thr Ser Glu Pro Ile Phe His Cys Arg Gln Glu Asp
1 5 10 15
<210> 445
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的说明: 合成肽
<400> 445
Ser Glu Pro Ile Phe His Cys Arg Gln Glu Asp Ile Lys Thr Ser
1 5 10 15
Claims (10)
1.一种嵌合抗原受体(CAR)，其包含细胞外抗原结合结构域、跨膜结构域和细胞内结构域，其中所述细胞外抗原结合结构域特异性地结合G-蛋白偶联受体，其中所述细胞外抗原结合结构域包含：
(a)包含序列如SEQ ID NO:124所示的氨基酸的重链可变区CDR1；包含序列如SEQ IDNO:125所示的氨基酸的重链可变区CDR2；包含序列如SEQ ID NO:126所示的氨基酸的重链可变区CDR3；包含序列如SEQ ID NO:127所示的氨基酸的轻链可变区CDR1；包含序列如SEQID NO:128所示的氨基酸的轻链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:129所示的氨基酸的轻链可变区CDR3。
2.一种嵌合抗原受体(CAR)，其包含细胞外抗原结合结构域、跨膜结构域和细胞内结构域，其中所述细胞外抗原结合结构域特异性地结合G-蛋白偶联受体，其中所述细胞外抗原结合结构域包含：
(b)包含序列如SEQ ID NO:130所示的氨基酸的重链可变区CDR1；包含序列如SEQ IDNO:131所示的氨基酸的重链可变区CDR2；包含序列如SEQ ID NO:132所示的氨基酸的重链可变区CDR3；包含序列如SEQ ID NO:133所示的氨基酸的轻链可变区CDR1；包含序列如SEQID NO:134所示的氨基酸的轻链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:135所示的氨基酸的轻链可变区CDR3。
3.一种嵌合抗原受体(CAR)，其包含细胞外抗原结合结构域、跨膜结构域和细胞内结构域，其中所述细胞外抗原结合结构域特异性地结合G-蛋白偶联受体，其中所述细胞外抗原结合结构域包含：
(c)包含序列如SEQ ID NO:136所示的氨基酸的重链可变区CDR1；包含序列如SEQ IDNO:137所示的氨基酸的重链可变区CDR2；包含序列如SEQ ID NO:138所示的氨基酸的重链可变区CDR3；包含序列如SEQ ID NO:139所示的氨基酸的轻链可变区CDR1；包含序列如SEQID NO:140所示的氨基酸的轻链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:141所示的氨基酸的轻链可变区CDR3。
4.一种嵌合抗原受体(CAR)，其包含细胞外抗原结合结构域、跨膜结构域和细胞内结构域，其中所述细胞外抗原结合结构域特异性地结合G-蛋白偶联受体，其中所述细胞外抗原结合结构域包含：
(d)包含序列如SEQ ID NO:142所示的氨基酸的重链可变区CDR1；包含序列如SEQ IDNO:143所示的氨基酸的重链可变区CDR2；包含序列如SEQ ID NO:144所示的氨基酸的重链可变区CDR3；包含序列如SEQ ID NO:145所示的氨基酸的轻链可变区CDR1；包含序列如SEQID NO:146所示的氨基酸的轻链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:147所示的氨基酸的轻链可变区CDR3。
5.一种嵌合抗原受体(CAR)，其包含细胞外抗原结合结构域、跨膜结构域和细胞内结构域，其中所述细胞外抗原结合结构域特异性地结合G-蛋白偶联受体，其中所述细胞外抗原结合结构域包含：
(e)包含序列如SEQ ID NO:148所示的氨基酸的重链可变区CDR1；包含序列如SEQ IDNO:149所示的氨基酸的重链可变区CDR2；包含序列如SEQ ID NO:150所示的氨基酸的重链可变区CDR3；包含序列如SEQ ID NO:151所示的氨基酸的轻链可变区CDR1；包含序列如SEQID NO:152所示的氨基酸的轻链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:153所示的氨基酸的轻链可变区CDR3。
6.一种嵌合抗原受体(CAR)，其包含细胞外抗原结合结构域、跨膜结构域和细胞内结构域，其中所述细胞外抗原结合结构域特异性地结合G-蛋白偶联受体，其中所述细胞外抗原结合结构域包含：
(f)包含序列如SEQ ID NO:154所示的氨基酸的重链可变区CDR1；包含序列如SEQ IDNO:155所示的氨基酸的重链可变区CDR2；包含序列如SEQ ID NO:156所示的氨基酸的重链可变区CDR3；包含序列如SEQ ID NO:157所示的氨基酸的轻链可变区CDR1；包含序列如SEQID NO:158所示的氨基酸的轻链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:159所示的氨基酸的轻链可变区CDR3。
7.一种嵌合抗原受体(CAR)，其包含细胞外抗原结合结构域、跨膜结构域和细胞内结构域，其中所述细胞外抗原结合结构域特异性地结合G-蛋白偶联受体，其中所述细胞外抗原结合结构域包含：
(g)包含序列如SEQ ID NO:160所示的氨基酸的重链可变区CDR1；包含序列如SEQ IDNO:161所示的氨基酸的重链可变区CDR2；包含序列如SEQ ID NO:162所示的氨基酸的重链可变区CDR3；包含序列如SEQ ID NO:163所示的氨基酸的轻链可变区CDR1；包含序列如SEQID NO:164所示的氨基酸的轻链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:165所示的氨基酸的轻链可变区CDR3。
8.一种嵌合抗原受体(CAR)，其包含细胞外抗原结合结构域、跨膜结构域和细胞内结构域，其中所述细胞外抗原结合结构域特异性地结合G-蛋白偶联受体，其中所述细胞外抗原结合结构域包含：
(h)包含序列如SEQ ID NO:166所示的氨基酸的重链可变区CDR1；包含序列如SEQ IDNO:167所示的氨基酸的重链可变区CDR2；包含序列如SEQ ID NO:168所示的氨基酸的重链可变区CDR3；包含序列如SEQ ID NO:169所示的氨基酸的轻链可变区CDR1；包含序列如SEQID NO:170所示的氨基酸的轻链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:171所示的氨基酸的轻链可变区CDR3。
9.一种嵌合抗原受体(CAR)，其包含细胞外抗原结合结构域、跨膜结构域和细胞内结构域，其中所述细胞外抗原结合结构域特异性地结合G-蛋白偶联受体，其中所述细胞外抗原结合结构域包含：
(i)包含序列如SEQ ID NO:172所示的氨基酸的重链可变区CDR1；包含序列如SEQ IDNO:173所示的氨基酸的重链可变区CDR2；包含序列如SEQ ID NO:174所示的氨基酸的重链可变区CDR3；包含序列如SEQ ID NO:175所示的氨基酸的轻链可变区CDR1；包含序列如SEQID NO:176所示的氨基酸的轻链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:177所示的氨基酸的轻链可变区CDR3。
10.一种嵌合抗原受体(CAR)，其包含细胞外抗原结合结构域、跨膜结构域和细胞内结构域，其中所述细胞外抗原结合结构域特异性地结合G-蛋白偶联受体，其中所述细胞外抗原结合结构域包含：
(j)包含序列如SEQ ID NO:178所示的氨基酸的重链可变区CDR1；包含序列如SEQ IDNO:179所示的氨基酸的重链可变区CDR2；包含序列如SEQ ID NO:180所示的氨基酸的重链可变区CDR3；包含序列如SEQ ID NO:181所示的氨基酸的轻链可变区CDR1；包含序列如SEQID NO:182所示的氨基酸的轻链可变区CDR2；和包含序列如SEQ ID NO:183所示的氨基酸的轻链可变区CDR3。
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