CN113881721A - 一种多糖聚谷氨酸发酵方法 - Google Patents
一种多糖聚谷氨酸发酵方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN113881721A CN113881721A CN202111202420.4A CN202111202420A CN113881721A CN 113881721 A CN113881721 A CN 113881721A CN 202111202420 A CN202111202420 A CN 202111202420A CN 113881721 A CN113881721 A CN 113881721A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- tank
- fermentation
- valve
- steam
- sterilization
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 title claims abstract description 205
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 title claims abstract description 205
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 47
- 229920002643 polyglutamic acid Polymers 0.000 title claims abstract description 45
- 108010020346 Polyglutamic Acid Proteins 0.000 title claims abstract description 43
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 title claims abstract description 26
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 title claims abstract description 26
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 title claims abstract description 26
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims abstract description 113
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 claims abstract description 104
- 239000011229 interlayer Substances 0.000 claims abstract description 35
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 34
- 238000005070 sampling Methods 0.000 claims abstract description 25
- 230000008569 process Effects 0.000 claims abstract description 21
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims abstract description 13
- 238000010924 continuous production Methods 0.000 claims abstract description 11
- 239000000498 cooling water Substances 0.000 claims abstract description 11
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims abstract description 9
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 30
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 28
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 claims description 20
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims description 20
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims description 20
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 20
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 claims description 15
- 238000007664 blowing Methods 0.000 claims description 15
- 235000020188 drinking water Nutrition 0.000 claims description 15
- 239000003651 drinking water Substances 0.000 claims description 15
- 239000006260 foam Substances 0.000 claims description 15
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 15
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 239000010410 layer Substances 0.000 claims description 12
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 10
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims description 10
- 238000011218 seed culture Methods 0.000 claims description 10
- 239000008399 tap water Substances 0.000 claims description 10
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 claims description 10
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 8
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 claims description 7
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 claims description 7
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 5
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 claims description 5
- 230000005587 bubbling Effects 0.000 claims description 5
- 230000008859 change Effects 0.000 claims description 5
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 claims description 5
- 238000011109 contamination Methods 0.000 claims description 5
- 238000007599 discharging Methods 0.000 claims description 5
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 claims description 5
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 5
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 claims description 5
- 239000010871 livestock manure Substances 0.000 claims description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 5
- 238000005086 pumping Methods 0.000 claims description 5
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 claims description 5
- 238000003860 storage Methods 0.000 claims description 5
- 239000004744 fabric Substances 0.000 claims description 2
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 claims 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 abstract description 12
- 230000008030 elimination Effects 0.000 abstract 3
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 abstract 3
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 12
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 10
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 4
- 108700022290 poly(gamma-glutamic acid) Proteins 0.000 description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- 241001052560 Thallis Species 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011031 large-scale manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 235000013557 nattō Nutrition 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000003825 pressing Methods 0.000 description 2
- 235000010627 Phaseolus vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- 244000046052 Phaseolus vulgaris Species 0.000 description 1
- 239000004952 Polyamide Substances 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 229920005615 natural polymer Polymers 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 229920002647 polyamide Polymers 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000011345 viscous material Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
- C12P13/02—Amides, e.g. chloramphenicol or polyamides; Imides or polyimides; Urethanes, i.e. compounds comprising N-C=O structural element or polyurethanes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/04—Polysaccharides, i.e. compounds containing more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic bonds
Landscapes
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
Abstract
本发明涉及一种多糖聚谷氨酸发酵方法，包括以下步骤：1)空消，发酵罐在每次停产时和开产前必须空消，连续生产过程中每批生产结束后空消，灭菌前检查灭菌罐的夹层排水阀和罐顶排气阀处于打开状态，打开夹层罐底排污阀门将冷却水完全排出，将空气管道入罐蒸汽阀和取样管道蒸汽阀打开。该多糖聚谷氨酸发酵方法，通过对发酵罐进行严格灭菌，发酵前的空消和发酵时的实消进行有效的配合，使得对发酵罐内部细菌以及培养基内部的微生物活体进行有效的灭杀，从而使得培养菌处于一个良好的发酵环境，避免了发酵罐中灭菌不彻底会涉及到其他细菌，受到控制其他细菌的发酵过程的影响，从而导致多糖聚谷氨酸的发酵失败。
Description
技术领域
本发明涉及聚谷氨酸发酵技术领域，具体为一种多糖聚谷氨酸发酵方法。
背景技术
聚谷氨酸(γ-PGA)，又称纳豆菌胶和多聚谷氨酸，它是一种水溶性，生物降解，不含毒性，使用微生物发酵法制得的生物高分子，γ-PGA聚谷氨酸是一种有粘性的物质，在“纳豆”——发酵豆中被首次发现，γ-PGA聚谷氨酸是一种特殊的阴离子自然聚合物，是以α-胺基和γ-羧基之间经酰胺键结所构成的同型聚酰胺γ-PGA的分子量从5万到2百万道尔顿不等。
就目前行业内聚谷氨酸发酵水平而言，发酵得到的产品含量相对较低，发酵周期较长，得到高含量的产品也一般仅限于实验室小试水平，实际规模化生产中含量并不能达到要求，溶氧很低导致菌体生长过慢，聚谷氨酸的合成速率降低，并且发酵过程中很容易灭菌不充分很容易导致生成的聚谷氨酸变质，影响产品的生产质量，故此，提出一种多糖聚谷氨酸发酵方法来解决上述的问题。
发明内容
(一)解决的技术问题
针对现有技术的不足，本发明提供了一种多糖聚谷氨酸发酵方法，具备聚谷氨酸的合成速率提高等优点，解决了发酵得到的产品含量相对较低，发酵周期较长，得到高含量的产品也一般仅限于实验室小试水平，实际规模化生产中含量并不能达到要求，溶氧很低导致菌体生长过慢，聚谷氨酸的合成速率降低的问题。
(二)技术方案
为实现上述提高聚谷氨酸的合成速率的目的，本发明提供如下技术方案：一种多糖聚谷氨酸发酵方法，包括以下步骤：
1)空消，发酵罐在每次停产时和开产前必须空消，连续生产过程中每批生产结束后空消，灭菌前检查灭菌罐的夹层排水阀和罐顶排气阀处于打开状态，打开夹层罐底排污阀门将冷却水完全排出，将空气管道入罐蒸汽阀和取样管道蒸汽阀打开，先排掉管道内的冷凝水，然后向罐内通入蒸汽，并保持蒸汽畅通，微开罐顶排气阀，使罐压逐渐上升，当罐压升至0.08MPa时关闭取样口处入罐蒸汽阀门、取样口处蒸汽阀门及取样口阀门，适当控制进、排汽，使各路进汽均匀畅通，控制罐压0.12-0.13MPa，连续生产时和停产时控制此压力灭菌5min，染菌或开产前空消时控制此压力灭菌25min，空消结束，关闭各路蒸汽入罐阀，关闭管道蒸汽阀，适当开大尾气阀门排尽管道内残余蒸汽，观察尾气颜色变淡时开启压缩空气阀门，打开进气阀，关小尾气排气阀，调节罐顶排气阀，控制压力0.05-0.10MPa，排尽罐内冷凝水后，备用。
2)投料，用饮用水将发酵罐冲洗干净后进行投料，发酵罐原料用100L的饮用水进行溶解，并且开启发酵罐搅拌，至其完全溶解，完全溶解后，继续补加饮用水120L-150L。
3)实消，发酵罐加完料并完全溶解之后，加水至相应体积，发酵罐灭菌前将培养基pH调至7.2-7.5，进行实消，通过检查夹层罐底排污阀和夹层排水阀处于打开状态，将罐顶排气阀打开，打开手动进夹套蒸汽阀，然后夹套内通入蒸汽并保持蒸汽畅通，待罐温升至90℃时向发酵罐内通入蒸汽，打开空气管道入罐蒸汽阀和取样管道蒸汽阀，先排掉管道内的冷凝水，然后向罐内通入蒸汽并保持蒸汽畅通，开始升温时，全开罐顶排气阀，待罐压出现，关小罐顶排气阀，微开种子罐的接种口使有少量蒸汽排出，当发酵罐罐温升至115℃时开始计时，控制罐压0.10-0.12MPa，罐温115.0-121.0℃，维持30min，每5min记录一次灭菌参数。
4)冷却，开大罐顶排气阀，关闭罐体各排气阀，关闭各路蒸汽入罐阀，取样口要有少量蒸汽冒出保持气封，关闭空气管路蒸汽阀之后降温，关闭夹层罐底排水阀，打开夹层冷却水阀门迅速降温，当罐压降至0.05MPa时，立即通入无菌空气，维持罐压0.05-0.10MPa，当罐温降至38-40℃时，停止降温。
5)培养接种，按照培养条件培养后进行接种，将发酵罐接种口四周用脱脂棉包住，在脱脂棉上加成品酒精，直至脱脂棉饱和，关小进气阀，开大排气阀门，使罐压维持在0.02-0.03MPa，点燃接种口脱脂棉，迅速打开接种口，并立即关闭发酵罐排气阀，将摇瓶种子液在火焰上方打开纱布，灼烧瓶口后倒入发酵罐，将接种口压盖在火焰上消毒后，拧紧接种口，开大发酵罐进气阀，当罐压大于0.05MPa时打开发酵罐排气阀，调整进气量为10m3/h，罐压0.05-0.1MPa，用湿抹布扑灭接种口火焰。
6)观察，每1h记录运转罐生长情况：罐温、罐压、空气温度、空气流量、滤器压、搅拌转速和泡沫高度，每4h取样检测发酵液pH值，将各个参数：罐温、罐压、空气流量和搅拌转速调整规定的范围内，随时观察各个参数的变化，在发酵过程的0-24h，时刻关注发酵罐的泡沫高度，当泡沫达到消泡桨位置时，及时添加消泡剂，添加量为0.5‰/次，夜班每2h到发酵平台下巡视一次，检查蒸汽及自来水不得有跑冒滴漏等异常情况，检查运转的电机和减速机有无异常声响，是否产热。
7)放罐，要放罐的发酵液取样，将搅拌和温度调整为“停止”状态，关闭发酵罐罐底蒸汽阀门，关闭发酵罐排污阀门，关闭夹层降温和升温阀门以及打开夹层罐底排污阀，打开发酵罐罐底放料阀门，农业级的聚谷氨酸不用通气，罐压落零即可，打开罐底放料阀门，开始放料。
8)洗罐，放罐结束用自来水清洗发酵罐，清洗液打入储罐，用于菌肥生产，按发酵罐灭菌操作规程进行空消。
进一步，所述步骤1)中空消前，需确认总蒸汽压力大于0.40MPa，并且确认已将设备准备好。
进一步，所述步骤2)中投料时，需要一人进行投料，一人进行复核，对原料的数量、批号及重量进行确认。
进一步，所述步骤1)中空消指使用蒸汽在空罐状态下灭菌，杀灭罐内存留的微生物活体，所述步骤3)中实消指在罐内已经加入培养基的状态下使用蒸汽杀灭培养基内微生物活体。
进一步，所述步骤1)和步骤3)均为灭菌过程，灭菌过程中要坚守工作面，不得离开，灭菌时严禁超压、超时，严禁消罐过程及消罐后罐内、罐夹层形成负压。
进一步，所述步骤5)中培养条件包括种子培养条件和发酵罐培养条件，种子培养条件包括温度、摇床转速、培养周期、体积和装液量，所述温度为37℃，所述摇床转速为250rpm，所述培养周期为6-12h，所述体积为0级种子2mL(甘油管种子)和1级种子400mL，2级种子7.2L(分两批培养)，所述装液量为200mL/500mL，所述发酵罐培养条件包括空气流量、罐温、罐压、搅拌转速和培养周期，所述空气流量为10m3/h，所述罐温为36.7-38℃，所述罐压为0.05-0.1MPa，所述搅拌转速为100-150rpm，所述培养周期为45-72h。
进一步，所述步骤7)中放罐标准为发酵培养45-72h，发酵液中葡萄糖糖浓度低于5g/L时，发酵液黏度不上升，谷氨酸消耗停止，发酵即可终止，发酵异常，放罐提前或拖后须报上级主管批准。
(三)有益效果
与现有技术相比，本发明提供了一种多糖聚谷氨酸发酵方法，具备以下有益效果：
该多糖聚谷氨酸发酵方法，通过对发酵罐进行严格灭菌，发酵前的空消和发酵时的实消进行有效的配合，使得对发酵罐内部细菌以及培养基内部的微生物活体进行有效的灭杀，从而使得培养菌处于一个良好的发酵环境，避免了发酵罐中灭菌不彻底会涉及到其他细菌的复杂控制，以及受到控制其他细菌的发酵过程的影响，从而导致多糖聚谷氨酸的发酵失败，并且发酵过程中种子的培养环境和发酵罐的培养环境处于一个良好的发酵状态，更有利于多糖聚谷氨酸的发酵，以及通过多糖聚谷氨酸的发酵处于一整套规范的发酵流程，可有效的提高了多糖聚谷氨酸的发酵速率以及发酵质量。
具体实施方式
下面将结合本发明的实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例一：一种多糖聚谷氨酸发酵方法，包括以下步骤：
1)空消，发酵罐在每次停产时和开产前必须空消，连续生产过程中每批生产结束后空消，灭菌前检查灭菌罐的夹层排水阀和罐顶排气阀处于打开状态，打开夹层罐底排污阀门将冷却水完全排出，将空气管道入罐蒸汽阀和取样管道蒸汽阀打开，先排掉管道内的冷凝水，然后向罐内通入蒸汽，并保持蒸汽畅通，微开罐顶排气阀，使罐压逐渐上升，当罐压升至0.08MPa时关闭取样口处入罐蒸汽阀门、取样口处蒸汽阀门及取样口阀门，适当控制进、排汽，使各路进汽均匀畅通，控制罐压0.12MPa，连续生产时和停产时控制此压力灭菌5min，染菌或开产前空消时控制此压力灭菌25min，空消结束，关闭各路蒸汽入罐阀，关闭管道蒸汽阀，适当开大尾气阀门排尽管道内残余蒸汽，观察尾气颜色变淡时开启压缩空气阀门，打开进气阀，关小尾气排气阀，调节罐顶排气阀，控制压力0.05MPa，排尽罐内冷凝水后，备用。
需要说明的是，所述步骤1)中空消前，需确认总蒸汽压力大于0.40MPa，并且确认已将设备准备好。
2)投料，用饮用水将发酵罐冲洗干净后进行投料，发酵罐原料用100L的饮用水进行溶解，并且开启发酵罐搅拌，至其完全溶解，完全溶解后，继续补加饮用水120L。
需要说明的是，所述步骤2)中投料时，需要一人进行投料，一人进行复核，对原料的数量、批号及重量进行确认。
3)实消，发酵罐加完料并完全溶解之后，加水至相应体积，发酵罐灭菌前将培养基pH调至7.2，进行实消，通过检查夹层罐底排污阀和夹层排水阀处于打开状态，将罐顶排气阀打开，打开手动进夹套蒸汽阀，然后夹套内通入蒸汽并保持蒸汽畅通，待罐温升至90℃时向发酵罐内通入蒸汽，打开空气管道入罐蒸汽阀和取样管道蒸汽阀，先排掉管道内的冷凝水，然后向罐内通入蒸汽并保持蒸汽畅通，开始升温时，全开罐顶排气阀，待罐压出现，关小罐顶排气阀，微开种子罐的接种口使有少量蒸汽排出，当发酵罐罐温升至115℃时开始计时，控制罐压0.10MPa，罐温115.0℃，维持30min，每5min记录一次灭菌参数。
需要说明的是，所述步骤1)中空消指使用蒸汽在空罐状态下灭菌，杀灭罐内存留的微生物活体，所述步骤3)中实消指在罐内已经加入培养基的状态下使用蒸汽杀灭培养基内微生物活体，所述步骤1)和步骤3)均为灭菌过程，灭菌过程中要坚守工作面，不得离开，灭菌时严禁超压、超时，严禁消罐过程及消罐后罐内、罐夹层形成负压。
4)冷却，开大罐顶排气阀，关闭罐体各排气阀，关闭各路蒸汽入罐阀，取样口要有少量蒸汽冒出保持气封，关闭空气管路蒸汽阀之后降温，关闭夹层罐底排水阀，打开夹层冷却水阀门迅速降温，当罐压降至0.05MPa时，立即通入无菌空气，维持罐压0.05MPa，当罐温降至38℃时，停止降温。
5)培养接种，按照培养条件培养后进行接种，将发酵罐接种口四周用脱脂棉包住，在脱脂棉上加成品酒精，直至脱脂棉饱和，关小进气阀，开大排气阀门，使罐压维持在0.02MPa，点燃接种口脱脂棉，迅速打开接种口，并立即关闭发酵罐排气阀，将摇瓶种子液在火焰上方打开纱布，灼烧瓶口后倒入发酵罐，将接种口压盖在火焰上消毒后，拧紧接种口，开大发酵罐进气阀，当罐压大于0.05MPa时打开发酵罐排气阀，调整进气量为10m3/h，罐压0.05MPa，用湿抹布扑灭接种口火焰。
需要说明的是，所述步骤5)中培养条件包括种子培养条件和发酵罐培养条件，种子培养条件包括温度、摇床转速、培养周期、体积和装液量，所述温度为37℃，所述摇床转速为250rpm，所述培养周期为6h，所述体积为0级种子2mL(甘油管种子)和1级种子400mL，2级种子7.2L(分两批培养)，所述装液量为200mL/500mL，所述发酵罐培养条件包括空气流量、罐温、罐压、搅拌转速和培养周期，所述空气流量为10m3/h，所述罐温为36.7℃，所述罐压为0.05MPa，所述搅拌转速为100rpm，所述培养周期为45h。
6)观察，每1h记录运转罐生长情况：罐温、罐压、空气温度、空气流量、滤器压、搅拌转速和泡沫高度，每4h取样检测发酵液pH值，将各个参数：罐温、罐压、空气流量和搅拌转速调整规定的范围内，随时观察各个参数的变化，在发酵过程的0-24h，时刻关注发酵罐的泡沫高度，当泡沫达到消泡桨位置时，及时添加消泡剂，添加量为0.5‰/次，夜班每2h到发酵平台下巡视一次，检查蒸汽及自来水不得有跑冒滴漏等异常情况，检查运转的电机和减速机有无异常声响，是否产热。
7)放罐，要放罐的发酵液取样，将搅拌和温度调整为“停止”状态，关闭发酵罐罐底蒸汽阀门，关闭发酵罐排污阀门，关闭夹层降温和升温阀门以及打开夹层罐底排污阀，打开发酵罐罐底放料阀门，农业级的聚谷氨酸不用通气，罐压落零即可，打开罐底放料阀门，开始放料。
需要说明的是，所述步骤7)中放罐标准为发酵培养45h，发酵液中葡萄糖糖浓度低于5g/L时，发酵液黏度不上升，谷氨酸消耗停止，发酵即可终止，发酵异常，放罐提前或拖后须报上级主管批准。
8)洗罐，放罐结束用自来水清洗发酵罐，清洗液打入储罐，用于菌肥生产，按发酵罐灭菌操作规程进行空消。
实施例二：一种多糖聚谷氨酸发酵方法，包括以下步骤：
1)空消，发酵罐在每次停产时和开产前必须空消，连续生产过程中每批生产结束后空消，灭菌前检查灭菌罐的夹层排水阀和罐顶排气阀处于打开状态，打开夹层罐底排污阀门将冷却水完全排出，将空气管道入罐蒸汽阀和取样管道蒸汽阀打开，先排掉管道内的冷凝水，然后向罐内通入蒸汽，并保持蒸汽畅通，微开罐顶排气阀，使罐压逐渐上升，当罐压升至0.08MPa时关闭取样口处入罐蒸汽阀门、取样口处蒸汽阀门及取样口阀门，适当控制进、排汽，使各路进汽均匀畅通，控制罐压0.13MPa，连续生产时和停产时控制此压力灭菌5min，染菌或开产前空消时控制此压力灭菌25min，空消结束，关闭各路蒸汽入罐阀，关闭管道蒸汽阀，适当开大尾气阀门排尽管道内残余蒸汽，观察尾气颜色变淡时开启压缩空气阀门，打开进气阀，关小尾气排气阀，调节罐顶排气阀，控制压力0.10MPa，排尽罐内冷凝水后，备用。
需要说明的是，所述步骤1)中空消前，需确认总蒸汽压力大于0.40MPa，并且确认已将设备准备好。
2)投料，用饮用水将发酵罐冲洗干净后进行投料，发酵罐原料用100L的饮用水进行溶解，并且开启发酵罐搅拌，至其完全溶解，完全溶解后，继续补加饮用水150L。
需要说明的是，所述步骤2)中投料时，需要一人进行投料，一人进行复核，对原料的数量、批号及重量进行确认。
3)实消，发酵罐加完料并完全溶解之后，加水至相应体积，发酵罐灭菌前将培养基pH调至7.5，进行实消，通过检查夹层罐底排污阀和夹层排水阀处于打开状态，将罐顶排气阀打开，打开手动进夹套蒸汽阀，然后夹套内通入蒸汽并保持蒸汽畅通，待罐温升至90℃时向发酵罐内通入蒸汽，打开空气管道入罐蒸汽阀和取样管道蒸汽阀，先排掉管道内的冷凝水，然后向罐内通入蒸汽并保持蒸汽畅通，开始升温时，全开罐顶排气阀，待罐压出现，关小罐顶排气阀，微开种子罐的接种口使有少量蒸汽排出，当发酵罐罐温升至115℃时开始计时，控制罐压0.12MPa，罐温121.0℃，维持30min，每5min记录一次灭菌参数。
需要说明的是，所述步骤1)中空消指使用蒸汽在空罐状态下灭菌，杀灭罐内存留的微生物活体，所述步骤3)中实消指在罐内已经加入培养基的状态下使用蒸汽杀灭培养基内微生物活体，所述步骤1)和步骤3)均为灭菌过程，灭菌过程中要坚守工作面，不得离开，灭菌时严禁超压、超时，严禁消罐过程及消罐后罐内、罐夹层形成负压。
4)冷却，开大罐顶排气阀，关闭罐体各排气阀，关闭各路蒸汽入罐阀，取样口要有少量蒸汽冒出保持气封，关闭空气管路蒸汽阀之后降温，关闭夹层罐底排水阀，打开夹层冷却水阀门迅速降温，当罐压降至0.05MPa时，立即通入无菌空气，维持罐压0.10MPa，当罐温降至40℃时，停止降温。
5)培养接种，按照培养条件培养后进行接种，将发酵罐接种口四周用脱脂棉包住，在脱脂棉上加成品酒精，直至脱脂棉饱和，关小进气阀，开大排气阀门，使罐压维持在0.03MPa，点燃接种口脱脂棉，迅速打开接种口，并立即关闭发酵罐排气阀，将摇瓶种子液在火焰上方打开纱布，灼烧瓶口后倒入发酵罐，将接种口压盖在火焰上消毒后，拧紧接种口，开大发酵罐进气阀，当罐压大于0.05MPa时打开发酵罐排气阀，调整进气量为10m3/h，罐压0.1MPa，用湿抹布扑灭接种口火焰。
需要说明的是，所述步骤5)中培养条件包括种子培养条件和发酵罐培养条件，种子培养条件包括温度、摇床转速、培养周期、体积和装液量，所述温度为37℃，所述摇床转速为250rpm，所述培养周期为12h，所述体积为0级种子2mL(甘油管种子)和1级种子400mL，2级种子7.2L(分两批培养)，所述装液量为200mL/500mL，所述发酵罐培养条件包括空气流量、罐温、罐压、搅拌转速和培养周期，所述空气流量为10m3/h，所述罐温为38℃，所述罐压为0.1MPa，所述搅拌转速为150rpm，所述培养周期为72h。
6)观察，每1h记录运转罐生长情况：罐温、罐压、空气温度、空气流量、滤器压、搅拌转速和泡沫高度，每4h取样检测发酵液pH值，将各个参数：罐温、罐压、空气流量和搅拌转速调整规定的范围内，随时观察各个参数的变化，在发酵过程的0-24h，时刻关注发酵罐的泡沫高度，当泡沫达到消泡桨位置时，及时添加消泡剂，添加量为0.5‰/次，夜班每2h到发酵平台下巡视一次，检查蒸汽及自来水不得有跑冒滴漏等异常情况，检查运转的电机和减速机有无异常声响，是否产热。
7)放罐，要放罐的发酵液取样，将搅拌和温度调整为“停止”状态，关闭发酵罐罐底蒸汽阀门，关闭发酵罐排污阀门，关闭夹层降温和升温阀门以及打开夹层罐底排污阀，打开发酵罐罐底放料阀门，农业级的聚谷氨酸不用通气，罐压落零即可，打开罐底放料阀门，开始放料。
需要说明的是，所述步骤7)中放罐标准为发酵培养72h，发酵液中葡萄糖糖浓度低于5g/L时，发酵液黏度不上升，谷氨酸消耗停止，发酵即可终止，发酵异常，放罐提前或拖后须报上级主管批准。
8)洗罐，放罐结束用自来水清洗发酵罐，清洗液打入储罐，用于菌肥生产，按发酵罐灭菌操作规程进行空消。
实施例三：一种多糖聚谷氨酸发酵方法，包括以下步骤：
1)空消，发酵罐在每次停产时和开产前必须空消，连续生产过程中每批生产结束后空消，灭菌前检查灭菌罐的夹层排水阀和罐顶排气阀处于打开状态，打开夹层罐底排污阀门将冷却水完全排出，将空气管道入罐蒸汽阀和取样管道蒸汽阀打开，先排掉管道内的冷凝水，然后向罐内通入蒸汽，并保持蒸汽畅通，微开罐顶排气阀，使罐压逐渐上升，当罐压升至0.08MPa时关闭取样口处入罐蒸汽阀门、取样口处蒸汽阀门及取样口阀门，适当控制进、排汽，使各路进汽均匀畅通，控制罐压0.125MPa，连续生产时和停产时控制此压力灭菌5min，染菌或开产前空消时控制此压力灭菌25min，空消结束，关闭各路蒸汽入罐阀，关闭管道蒸汽阀，适当开大尾气阀门排尽管道内残余蒸汽，观察尾气颜色变淡时开启压缩空气阀门，打开进气阀，关小尾气排气阀，调节罐顶排气阀，控制压力0.075MPa，排尽罐内冷凝水后，备用。
需要说明的是，所述步骤1)中空消前，需确认总蒸汽压力大于0.40MPa，并且确认已将设备准备好。
2)投料，用饮用水将发酵罐冲洗干净后进行投料，发酵罐原料用100L的饮用水进行溶解，并且开启发酵罐搅拌，至其完全溶解，完全溶解后，继续补加饮用水135L。
需要说明的是，所述步骤2)中投料时，需要一人进行投料，一人进行复核，对原料的数量、批号及重量进行确认。
3)实消，发酵罐加完料并完全溶解之后，加水至相应体积，发酵罐灭菌前将培养基pH调至7.35，进行实消，通过检查夹层罐底排污阀和夹层排水阀处于打开状态，将罐顶排气阀打开，打开手动进夹套蒸汽阀，然后夹套内通入蒸汽并保持蒸汽畅通，待罐温升至90℃时向发酵罐内通入蒸汽，打开空气管道入罐蒸汽阀和取样管道蒸汽阀，先排掉管道内的冷凝水，然后向罐内通入蒸汽并保持蒸汽畅通，开始升温时，全开罐顶排气阀，待罐压出现，关小罐顶排气阀，微开种子罐的接种口使有少量蒸汽排出，当发酵罐罐温升至115℃时开始计时，控制罐压0.11MPa，罐温118.5℃，维持30min，每5min记录一次灭菌参数。
需要说明的是，所述步骤1)中空消指使用蒸汽在空罐状态下灭菌，杀灭罐内存留的微生物活体，所述步骤3)中实消指在罐内已经加入培养基的状态下使用蒸汽杀灭培养基内微生物活体，所述步骤1)和步骤3)均为灭菌过程，灭菌过程中要坚守工作面，不得离开，灭菌时严禁超压、超时，严禁消罐过程及消罐后罐内、罐夹层形成负压。
4)冷却，开大罐顶排气阀，关闭罐体各排气阀，关闭各路蒸汽入罐阀，取样口要有少量蒸汽冒出保持气封，关闭空气管路蒸汽阀之后降温，关闭夹层罐底排水阀，打开夹层冷却水阀门迅速降温，当罐压降至0.05MPa时，立即通入无菌空气，维持罐压0.075MPa，当罐温降至39℃时，停止降温。
5)培养接种，按照培养条件培养后进行接种，将发酵罐接种口四周用脱脂棉包住，在脱脂棉上加成品酒精，直至脱脂棉饱和，关小进气阀，开大排气阀门，使罐压维持在0.025MPa，点燃接种口脱脂棉，迅速打开接种口，并立即关闭发酵罐排气阀，将摇瓶种子液在火焰上方打开纱布，灼烧瓶口后倒入发酵罐，将接种口压盖在火焰上消毒后，拧紧接种口，开大发酵罐进气阀，当罐压大于0.05MPa时打开发酵罐排气阀，调整进气量为10m3/h，罐压0.075MPa，用湿抹布扑灭接种口火焰。
需要说明的是，所述步骤5)中培养条件包括种子培养条件和发酵罐培养条件，种子培养条件包括温度、摇床转速、培养周期、体积和装液量，所述温度为37℃，所述摇床转速为250rpm，所述培养周期为9h，所述体积为0级种子2mL(甘油管种子)和1级种子400mL，2级种子7.2L(分两批培养)，所述装液量为200mL/500mL，所述发酵罐培养条件包括空气流量、罐温、罐压、搅拌转速和培养周期，所述空气流量为10m3/h，所述罐温为37.5℃，所述罐压为0.075MPa，所述搅拌转速为125rpm，所述培养周期为58.5h。
6)观察，每1h记录运转罐生长情况：罐温、罐压、空气温度、空气流量、滤器压、搅拌转速和泡沫高度，每4h取样检测发酵液pH值，将各个参数：罐温、罐压、空气流量和搅拌转速调整规定的范围内，随时观察各个参数的变化，在发酵过程的0-24h，时刻关注发酵罐的泡沫高度，当泡沫达到消泡桨位置时，及时添加消泡剂，添加量为0.5‰/次，夜班每2h到发酵平台下巡视一次，检查蒸汽及自来水不得有跑冒滴漏等异常情况，检查运转的电机和减速机有无异常声响，是否产热。
7)放罐，要放罐的发酵液取样，将搅拌和温度调整为“停止”状态，关闭发酵罐罐底蒸汽阀门，关闭发酵罐排污阀门，关闭夹层降温和升温阀门以及打开夹层罐底排污阀，打开发酵罐罐底放料阀门，农业级的聚谷氨酸不用通气，罐压落零即可，打开罐底放料阀门，开始放料。
需要说明的是，所述步骤7)中放罐标准为发酵培养58.5h，发酵液中葡萄糖糖浓度低于5g/L时，发酵液黏度不上升，谷氨酸消耗停止，发酵即可终止，发酵异常，放罐提前或拖后须报上级主管批准。
8)洗罐，放罐结束用自来水清洗发酵罐，清洗液打入储罐，用于菌肥生产，按发酵罐灭菌操作规程进行空消。
本发明的有益效果是：该多糖聚谷氨酸发酵方法，通过对发酵罐进行严格灭菌，发酵前的空消和发酵时的实消进行有效的配合，使得对发酵罐内部细菌以及培养基内部的微生物活体进行有效的灭杀，从而使得培养菌处于一个良好的发酵环境，避免了发酵罐中灭菌不彻底会涉及到其他细菌的复杂控制，以及受到控制其他细菌的发酵过程的影响，从而导致多糖聚谷氨酸的发酵失败，并且发酵过程中种子的培养环境和发酵罐的培养环境处于一个良好的发酵状态，更有利于多糖聚谷氨酸的发酵，以及通过多糖聚谷氨酸的发酵处于一整套规范的发酵流程，可有效的提高了多糖聚谷氨酸的发酵速率以及发酵质量。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。
Claims (7)
1.一种多糖聚谷氨酸发酵方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)空消，发酵罐在每次停产时和开产前必须空消，连续生产过程中每批生产结束后空消，灭菌前检查灭菌罐的夹层排水阀和罐顶排气阀处于打开状态，打开夹层罐底排污阀门将冷却水完全排出，将空气管道入罐蒸汽阀和取样管道蒸汽阀打开，先排掉管道内的冷凝水，然后向罐内通入蒸汽，并保持蒸汽畅通，微开罐顶排气阀，使罐压逐渐上升，当罐压升至0.08MPa时关闭取样口处入罐蒸汽阀门、取样口处蒸汽阀门及取样口阀门，适当控制进、排汽，使各路进汽均匀畅通，控制罐压0.12-0.13MPa，连续生产时和停产时控制此压力灭菌5min，染菌或开产前空消时控制此压力灭菌25min，空消结束，关闭各路蒸汽入罐阀，关闭管道蒸汽阀，适当开大尾气阀门排尽管道内残余蒸汽，观察尾气颜色变淡时开启压缩空气阀门，打开进气阀，关小尾气排气阀，调节罐顶排气阀，控制压力0.05-0.10MPa，排尽罐内冷凝水后，备用。
2)投料，用饮用水将发酵罐冲洗干净后进行投料，发酵罐原料用100L的饮用水进行溶解，并且开启发酵罐搅拌，至其完全溶解，完全溶解后，继续补加饮用水120L-150L。
3)实消，发酵罐加完料并完全溶解之后，加水至相应体积，发酵罐灭菌前将培养基pH调至7.2-7.5，进行实消，通过检查夹层罐底排污阀和夹层排水阀处于打开状态，将罐顶排气阀打开，打开手动进夹套蒸汽阀，然后夹套内通入蒸汽并保持蒸汽畅通，待罐温升至90℃时向发酵罐内通入蒸汽，打开空气管道入罐蒸汽阀和取样管道蒸汽阀，先排掉管道内的冷凝水，然后向罐内通入蒸汽并保持蒸汽畅通，开始升温时，全开罐顶排气阀，待罐压出现，关小罐顶排气阀，微开种子罐的接种口使有少量蒸汽排出，当发酵罐罐温升至115℃时开始计时，控制罐压0.10-0.12MPa，罐温115.0-121.0℃，维持30min，每5min记录一次灭菌参数。
4)冷却，开大罐顶排气阀，关闭罐体各排气阀，关闭各路蒸汽入罐阀，取样口要有少量蒸汽冒出保持气封，关闭空气管路蒸汽阀之后降温，关闭夹层罐底排水阀，打开夹层冷却水阀门迅速降温，当罐压降至0.05MPa时，立即通入无菌空气，维持罐压0.05-0.10MPa，当罐温降至38-40℃时，停止降温。
5)培养接种，按照培养条件培养后进行接种，将发酵罐接种口四周用脱脂棉包住，在脱脂棉上加成品酒精，直至脱脂棉饱和，关小进气阀，开大排气阀门，使罐压维持在0.02-0.03MPa，点燃接种口脱脂棉，迅速打开接种口，并立即关闭发酵罐排气阀，将摇瓶种子液在火焰上方打开纱布，灼烧瓶口后倒入发酵罐，将接种口压盖在火焰上消毒后，拧紧接种口，开大发酵罐进气阀，当罐压大于0.05MPa时打开发酵罐排气阀，调整进气量为10m3/h，罐压0.05-0.1MPa，用湿抹布扑灭接种口火焰。
6)观察，每1h记录运转罐生长情况：罐温、罐压、空气温度、空气流量、滤器压、搅拌转速和泡沫高度，每4h取样检测发酵液pH值，将各个参数：罐温、罐压、空气流量和搅拌转速调整规定的范围内，随时观察各个参数的变化，在发酵过程的0-24h，时刻关注发酵罐的泡沫高度，当泡沫达到消泡桨位置时，及时添加消泡剂，添加量为0.5‰/次，夜班每2h到发酵平台下巡视一次，检查蒸汽及自来水不得有跑冒滴漏等异常情况，检查运转的电机和减速机有无异常声响，是否产热。
7)放罐，要放罐的发酵液取样，将搅拌和温度调整为“停止”状态，关闭发酵罐罐底蒸汽阀门，关闭发酵罐排污阀门，关闭夹层降温和升温阀门以及打开夹层罐底排污阀，打开发酵罐罐底放料阀门，农业级的聚谷氨酸不用通气，罐压落零即可，打开罐底放料阀门，开始放料。
8)洗罐，放罐结束用自来水清洗发酵罐，清洗液打入储罐，用于菌肥生产，按发酵罐灭菌操作规程进行空消。
2.根据权利要求1所述的一种多糖聚谷氨酸发酵方法，其特征在于，所述步骤1)中空消前，需确认总蒸汽压力大于0.40MPa，并且确认已将设备准备好。
3.根据权利要求1所述的一种多糖聚谷氨酸发酵方法，其特征在于，所述步骤2)中投料时，需要一人进行投料，一人进行复核，对原料的数量、批号及重量进行确认。
4.根据权利要求1所述的一种多糖聚谷氨酸发酵方法，其特征在于，所述步骤1)中空消指使用蒸汽在空罐状态下灭菌，杀灭罐内存留的微生物活体，所述步骤3)中实消指在罐内已经加入培养基的状态下使用蒸汽杀灭培养基内微生物活体。
5.根据权利要求1所述的一种多糖聚谷氨酸发酵方法，其特征在于，所述步骤1)和步骤3)均为灭菌过程，灭菌过程中要坚守工作面，不得离开，灭菌时严禁超压、超时，严禁消罐过程及消罐后罐内、罐夹层形成负压。
6.根据权利要求1所述的一种多糖聚谷氨酸发酵方法，其特征在于，所述步骤5)中培养条件包括种子培养条件和发酵罐培养条件，种子培养条件包括温度、摇床转速、培养周期、体积和装液量，所述温度为37℃，所述摇床转速为250rpm，所述培养周期为6-12h，所述体积为0级种子2mL(甘油管种子)和1级种子400mL，2级种子7.2L(分两批培养)，所述装液量为200mL/500mL，所述发酵罐培养条件包括空气流量、罐温、罐压、搅拌转速和培养周期，所述空气流量为10m3/h，所述罐温为36.7-38℃，所述罐压为0.05-0.1MPa，所述搅拌转速为100-150rpm，所述培养周期为45-72h。
7.根据权利要求1所述的一种多糖聚谷氨酸发酵方法，其特征在于，所述步骤7)中放罐标准为发酵培养45-72h，发酵液中葡萄糖糖浓度低于5g/L时，发酵液黏度不上升，谷氨酸消耗停止，发酵即可终止，发酵异常，放罐提前或拖后须报上级主管批准。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202111202420.4A CN113881721A (zh) | 2021-10-15 | 2021-10-15 | 一种多糖聚谷氨酸发酵方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202111202420.4A CN113881721A (zh) | 2021-10-15 | 2021-10-15 | 一种多糖聚谷氨酸发酵方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN113881721A true CN113881721A (zh) | 2022-01-04 |
Family
ID=79003054
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202111202420.4A Pending CN113881721A (zh) | 2021-10-15 | 2021-10-15 | 一种多糖聚谷氨酸发酵方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN113881721A (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN115386522A (zh) * | 2022-09-30 | 2022-11-25 | 山东天润和生物工程有限公司 | 一种丁酸梭菌的发酵方法 |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101974409A (zh) * | 2010-11-27 | 2011-02-16 | 福州大北农生物技术有限公司 | 细菌培养发酵罐装置及其发酵工艺 |
| CN103060212A (zh) * | 2013-01-05 | 2013-04-24 | 义马煤业集团煤生化高科技工程有限公司 | 一种单细胞甲醇蛋白的工业化生产方法 |
| CN107022581A (zh) * | 2017-05-22 | 2017-08-08 | 东莞理工学院 | 一种利用空气压力脉动固体发酵生产γ‑聚谷氨酸的方法 |
| WO2017197887A1 (zh) * | 2016-05-17 | 2017-11-23 | 河南巨龙生物工程股份有限公司 | 大肠埃希氏菌JLTrp及其在生产L-色氨酸中的应用 |
| CN107746864A (zh) * | 2017-11-25 | 2018-03-02 | 万达集团股份有限公司 | 一种微生物法丙烯酰胺发酵新工艺 |
-
2021
- 2021-10-15 CN CN202111202420.4A patent/CN113881721A/zh active Pending
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101974409A (zh) * | 2010-11-27 | 2011-02-16 | 福州大北农生物技术有限公司 | 细菌培养发酵罐装置及其发酵工艺 |
| CN103060212A (zh) * | 2013-01-05 | 2013-04-24 | 义马煤业集团煤生化高科技工程有限公司 | 一种单细胞甲醇蛋白的工业化生产方法 |
| WO2017197887A1 (zh) * | 2016-05-17 | 2017-11-23 | 河南巨龙生物工程股份有限公司 | 大肠埃希氏菌JLTrp及其在生产L-色氨酸中的应用 |
| CN107022581A (zh) * | 2017-05-22 | 2017-08-08 | 东莞理工学院 | 一种利用空气压力脉动固体发酵生产γ‑聚谷氨酸的方法 |
| CN107746864A (zh) * | 2017-11-25 | 2018-03-02 | 万达集团股份有限公司 | 一种微生物法丙烯酰胺发酵新工艺 |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN115386522A (zh) * | 2022-09-30 | 2022-11-25 | 山东天润和生物工程有限公司 | 一种丁酸梭菌的发酵方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN108102965A (zh) | 复合己酸菌液扩大培养方法 | |
| CN102057836A (zh) | 一种采用子母式培养罐快速生产食用菌液体菌种的方法 | |
| CN107746864B (zh) | 一种微生物法丙烯酰胺发酵新工艺 | |
| CN113881721A (zh) | 一种多糖聚谷氨酸发酵方法 | |
| CN201241154Y (zh) | 白腐菌固体发酵系统 | |
| CN209702736U (zh) | 一种液体菌种培养器 | |
| CN201878571U (zh) | 子母式食用菌液体菌种培养罐 | |
| CN106490547A (zh) | 泡椒的高效制作方法 | |
| CN101979635A (zh) | 一种基于转筒式发酵反应器的细菌纤维素生产工艺 | |
| CN107557215A (zh) | 一种米浆水全回用的机械化绍兴黄酒生产工艺 | |
| CN108373976A (zh) | 一种深层发酵制备蛹虫草菌种的生产方法 | |
| CN105420130A (zh) | 一种饲用酿酒酵母液固两相发酵方法 | |
| PL222528B1 (pl) | Sposób uruchomienia fermentacji octowej w warunkach przemysłowych | |
| CN214327689U (zh) | 一种半固态法酿酒用发酵装置 | |
| CN115094008A (zh) | 一种防治禽产气荚膜梭菌的生物抗菌制剂研发方法 | |
| CN213172363U (zh) | 一种益生菌复合菌种发酵罐 | |
| CN211445718U (zh) | 发酵系统 | |
| CN110305812B (zh) | 一种地衣芽孢杆菌发酵培养工艺 | |
| CN110358798B (zh) | 一种发酵生产井冈霉素的方法 | |
| CN108285874A (zh) | 一种制作酱油过程中酱油酵母的培养及其添加方法 | |
| CN214458000U (zh) | 一种无醇米醪发酵罐 | |
| CN209276501U (zh) | 用于海洋红酵母菌活化培养虾青素的发酵设备 | |
| CN208701031U (zh) | 一种零死角物料灭菌发酵罐 | |
| CN105132233B (zh) | 一种河内白曲生产工艺 | |
| CN209442977U (zh) | 白僵菌发酵装置 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20220104 |