CN113430301B - 一种呼吸道病原体检测用组合物、试剂盒及其应用 - Google Patents

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    • C12Q1/689—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms for bacteria

Abstract

本发明涉及一种呼吸道病原体检测用组合物、试剂盒及其应用，其中试剂盒包括用于检测RNA病原体的Panel A和用于检测DNA病原体Panel B，本发明针对38种病原体设计相应的引物探针，并将设计的引物探针分成Panel A和Panel B，Panel A中检测孔中设计三个通道，用于检测RNA病原体，Panel B中每个检测孔中设计两个通道，用于检测DNA病原体，且Panel A和Panel B中各引物探针不会发生相互交叉反应，每个孔中能够灵敏的检测出对应的病原体，以使在检测的过程中能够快速的得到检测结果。

Description

一种呼吸道病原体检测用组合物、试剂盒及其应用
技术领域
本发明涉及领域生物学医学核酸检测领域，具体涉及一种呼吸道病原体检测用组合物、试剂盒及其应用。
背景技术
呼吸道感染是临床常见病症，可由多种病原体引起。呼吸道感染疾病常见于成人和儿童当中，具有很高的发病率和死亡率。急性上呼吸道和下呼吸道的感染主要通过空气中的飞沫、人与人之间的接触或与被污染物品的接触传播。呼吸道病原体感染可以引起多种疾病，如感冒、流感、咽炎、喉炎、支气管炎、肺炎等，人体感染后主要临床症状，包括发热、流涕、咽痛、咳嗽、头痛和腹泻等。
病毒在呼吸道感染中占有很重要的地位，目前已证明全球每年呼吸道疾病的发病和死亡很大一部分是由呼吸道病毒的感染引起的，许多病毒具有感染力强、传播快、潜伏期短、病后免疫力不能持久等特点，容易造成大流行。呼吸道细菌感染在呼吸道感染中约占20％比例，很多细菌出现了耐药现象，如何选用治疗效果好的抗生素对患者而言至关重要。下呼吸道感染特别是重症肺炎患者还常见各种呼吸道细菌和病毒的混合感染。另外，在免疫抑制或免疫力低下人群，真菌和呼吸道正常寄居菌也常引起重症肺炎。近几年，非结核分枝杆菌(NTM)肺病报道的发病率逐年增高，同时我国也是肺结核的高发国家。呼吸道感染常见的病原体包含：病毒、细菌、真菌、结核杆菌及NTM等。
呼吸道感染发病急，进展快，快速明确感染病原体的种类，对个体而言可以获得针对性有效治疗，对群体而言可以尽早切断传播途径，避免人群中大流行。另外，明确呼吸道细菌种类可以针对性用药，有效控制抗生素的滥用。目前呼吸道病原体检测方法通常有病原体分离培养法、胶体金抗原检测法、血清学检测法及核酸检测法。其中，病原体分离培养法是病毒检测的“金标准”，但存在培养方法复杂及检测速度慢等缺点；胶体金抗原检测法灵敏度低，易造成假阴性；血清学检测需要急性期和恢复期双份血清，急性期主要的IgM在体内维持时间短，且目前尚无成熟完善的针对IgM的特异性检测方法。主要针对恢复期的IgG进行抗体检测，但检测阳性者已进入恢复期，诊断存在滞后性，对呼吸道疾病的预防没有实际意义。
发明内容
本发明的目的就是为了克服上述现有技术存在的缺陷而提供一种可提高临床检测效率，快速的确认病原体，为后续的用药和治疗进行指导，急需更简便、更快速并且能够联合检测的呼吸道病原体检测用组合物、试剂盒及其应用。
本发明的目的可以通过以下技术方案来实现：
一种呼吸道病原体检测用组合物，该组合物包括：
用于三通道荧光PCR检测的引物对组合物，该组成引物对组合物的序列为SEQ IDNo.1～SEQ ID No.24和SEQ ID No.116～SEQ ID No.139；
用于三通道荧光PCR检测的探针组合物，该组成探针组合物序列为SEQ ID No.39～SEQ ID No.62；
用于双通道荧光PCR检测的引物对组合物，该组成引物对组合物的序列为SEQ IDNo.25～SEQ ID No.38和SEQ ID No.140～SEQ ID No.153；
用于双通道荧光PCR检测的探针对组合物，该组成探针组合物的序列为SEQ IDNo.63～SEQ ID No.76。
进一步地，所述的呼吸道病原体的检测靶序列为SEQ ID No.77～SEQ ID No.114。
进一步地，针对呼吸道病原体的检测靶序列设计的内参引物和探针为：
上游引物：CTTCAGCATGGCGGTGTTT；
下游引物：CCGCGCAGAGCCTTCA；
探针：CAGATTTGGACCTGCGAGCGGG。
进一步地，
SEQ ID No.39～SEQ ID No.46的探针序列的5’端修饰的荧光基团包括FAM荧光基团；
SEQ ID No.47～SEQ ID No.54的探针序列的5’端修饰的荧光基团包括VIC荧光基团；
SEQ ID No.55～SEQ ID No.62的探针序列的5’端修饰的荧光基团包括CY5荧光基团；
SEQ ID No.63～SEQ ID No.70的探针序列的5’端修饰的荧光基团包括FAM荧光基团；
SEQ ID No.71～SEQ ID No.76的探针序列的5’端修饰的荧光基团包括VIC荧光基团。
进一步地，
针对SEQ ID No.1～SEQ ID No.24和SEQ ID No.116～SEQ ID No.139所示的序列以及SEQ ID No.39～SEQ ID No.62探针组合物设计的内参探针序列上修饰的荧光基团为ROX；
针对SEQ ID No.25～SEQ ID No.38和SEQ ID No.140～SEQ ID No.153所示的序列以及SEQ ID No.63～SEQ ID No.76探针组合物设计的内参探针序列上修饰的荧光基团为VIC。
一种呼吸道病原体检测用试剂盒，该试剂盒包括如上所述的呼吸道病原体检测用组合物。
进一步地，该试剂盒具体包括用于检测RNA病原体的Panel A和用于检测DNA病原体Panel B；
所述Panel A包括SEQ ID No.1～SEQ ID No.24和SEQ ID No.116～SEQ IDNo.139所示的序列引物对、SEQ ID No.39～SEQ ID No.62所示的探针及内参引物探针、第一核酸扩增反应液及酶混合液；
所述Panel B包括SEQ ID No.25～SEQ ID No.38和SEQ ID No.140～SEQ IDNo.153所示的序列引物、SEQ ID No.63～SEQ ID No.76所示的探针及内参引物探针、第二核酸扩增反应液。
进一步地，所述的酶混合液包括逆转录酶、RNA酶抑制剂以及Taq酶。
一种如上所述的呼吸道病原体检测用试剂盒的应用，该试剂盒应用于呼吸道病原体的检测，包括如下步骤：
S10：提取样本核酸；
S20：将S10中提取的核酸样本加入到试剂盒中后上机检测；
S30：对S20中的检测结果进行判定，具体如下：
当每种检测靶标中的阴性对照满足Ct值>38或未检出时；阳性对照满足扩增曲线呈S型，且Ct值≤30的要求时；再对Panel A和Panel B中各通道进行阳性判读；
Panel A中的FAM、VIC以及CY5三个通道的阳性判读原则以及Panel B中的FAM、VIC两个通道的阳性判读原则如下：
阴性：Ct值>38或未检出；
阳性：扩增曲线呈S型，且Ct值≤35；
可疑：扩增曲线呈S型，且35<Ct值≤38，需复检；复检结果若一致，判定结果为阳性。
进一步地，S20中，每种检测靶标上机检测结束时，根据图像调节起止的阈值，设置PCR的起始循环数为3-15cycle，终止循环数设置为5-20cycle，同时调整阴性对照的扩增曲线的基线平直或低于阈值线。
与现有技术相比，本发明针对呼吸道病原体设计相应的引物探针，并将设计的引物探针分成Panel A和Panel B，Panel A中检测孔中设计三个检测通道，用于检测RNA病原体，Panel B中每个检测孔中设计两个通道，用于检测DNA病原体，且Panel A和Panel B中各引物探针不会发生相互交叉反应，每个孔中能够灵敏的检测出对应的病原体，以使在检测的过程中能够快速的得到检测结果。
附图说明
图1是本发明panel A中巨细胞病毒、人博卡病毒以及副流感病毒Ⅳ型扩增曲线；
图2是本发明panel A中巨细胞病毒、腮腺炎病毒以及副流感病毒Ⅳ型扩增曲线；
图3是本发明panel A中甲型流感病毒、乙型流感病毒、肠道病毒通用、副流感病毒Ⅰ型、呼吸道腺病毒、人偏肺病毒、呼吸道合胞病毒、副流感病毒Ⅱ型扩增曲线；
图4是本发明panel A中副流感病毒Ⅲ型、人鼻病毒、腮腺炎病毒、低致病性冠状病毒通用、巨细胞病毒、人博卡病毒、副流感病毒Ⅳ型、肺炎支原体扩增曲线；
图5是本发明panel A中肺炎衣原体、嗜肺军团菌、铜绿假单胞菌、肺炎链球菌、肺炎克雷伯菌、A组链球菌、流感嗜血杆菌、金黄色葡萄球菌扩增曲线；
图6是panel B中鲍曼不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌、屎肠球菌、粪肠球菌、大肠杆菌、结核分枝杆菌、非典型分枝杆菌扩增曲线；
图7是panel B中诺卡菌、马尔尼菲青霉菌、耶氏肺孢子菌、白色念珠菌、新生隐球菌、曲霉、毛霉菌扩增曲线。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施例对本发明进行详细说明。本实施例在以本发明技术方案为前提下进行实施，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，但本发明的保护范围不限于下述的实施例。
实施例
一种用于检测38种呼吸道病原体的试剂盒，试剂盒包括用于检测RNA病原体的Panel A和用于检测DNA病原体Panel B；
Panel A包括SEQ ID No.1～SEQ ID No.24和SEQ ID No.116～SEQ ID No.139所示的序列引物对、SEQ ID No.39～SEQ ID No.62所示的探针以及内参引物探针、第一核酸扩增反应液以及酶混合液；
Panel B包括SEQ ID No.25～SEQ ID No.38和SEQ ID No.140～SEQ ID No.153所示的序列引物和SEQ ID No.63～SEQ ID No.76所示的探针以及内参引物探针、第二核酸扩增反应液。
在本实施例子中，第一核酸扩增反应液为RT-qPCR反应预混液，具体包括：qRT-PCR反应液，其组分包括Tris、KCl、MgCl2以及dNTPs，Tris终浓度为0.05-0.1M，KCl终浓度为100-200mM，Mg2+终浓度为1-5mM，dNTPs终浓度为0.1-0.8mM。qRT-PCR酶混合液，其组分包括逆转录酶、RNA酶抑制剂、Taq酶，逆转录酶终浓度为1-10U/μL，Taq酶终浓度为0.1-1U/μL。
第二核酸扩增反应液为qPCR反应预混液，具体成分包括qPCR预混液，其具体组分和浓度如下；其组分包括Tris、KCl、MgCl2、dNTPs以及Taq酶。Tris终浓度为0.05-0.1M，KCl终浓度为100-200mM，Mg2+终浓度为1-5mM，dNTPs终浓度为0.1-0.8mM，Taq酶终浓度为0.1-1U/μL。所使用的阳性质粒由上海捷瑞生物工程有限公司合成提供。
上述试剂盒用于检测38种病原体，通过NCBI搜索对应的靶标序列，使用序列比对软件进行比对，从同源性最高的序列中选取一段保守序列作为检测靶标序列，以使得在检测的过程中特异性更高，其中38种病原体的靶标序列如下表1；
表1
/>
本实施例中的针对上述病原体的保守序列设计出对应的引物对以及对应的探针序列，其中引物对如下表2；
表2
/>
/>
针对上述的保守序列设计相应的探针序列具体的探针序列如下表3；
表3
/>
根据38种靶标序列设计的内参引物探针序列，其中Panel A和Panel B中的内参引物探针序列一样，具体的引物探针序列为：
上游引物：CTTCAGCATGGCGGTGTTT；
下游引物：CCGCGCAGAGCCTTCA；
探针：CAGATTTGGACCTGCGAGCGGG。
其中，SEQ ID No.39～SEQ ID No.46的所示的探针序列的5’端修饰的荧光基团为FAM荧光基团；
SEQ ID No.47～SEQ ID No.54的探针序列的5’端修饰的荧光基团为：VIC荧光基团；
SEQ ID No.55～SEQ ID No.62的探针序列的5’端修饰的荧光基团为：CY5荧光基团；
SEQ ID No.63～SEQ ID No.70的探针序列的5’端修饰的荧光基团为：FAM荧光基团
SEQ ID No.71～SEQ ID No.76的探针序列的5’端修饰的荧光基团为：VIC荧光基团，
针对SEQ ID No.1～SEQ ID No.24和SEQ ID No.116～SEQ ID No.139所示的序列以及SEQ ID No.39～SEQ ID No.62探针组合物设计的内参探针序列上修饰的荧光基团为ROX；
针对SEQ ID No.25～SEQ ID No.38和SEQ ID No.140～SEQ ID No.153所示的序列以及SEQ ID No.63～SEQ ID No.76探针组合物设计的内参探针序列上修饰的荧光基团为VIC。
针对上述的引物探针组合设计出如下的8连管检测孔，Panel A中每个检测孔中设置有三个检测通道，Panel B中设置有两个检测通道，通过对病原体的分析，将上述设计的引物探针分布在对应的检测孔内，Panel A和Panel B的具体设计如下表4和表5：
表4 Panel A(8连管预制三通道荧光PCR法)
FAM荧光通道 VIC荧光通道 CY5荧光通道 ROX荧光通道
1 甲型流感病毒 乙型流感病毒 肠道病毒通用 /
2 副流感病毒Ⅰ型 呼吸道腺病毒 人偏肺病毒 内参
3 呼吸道合胞病毒 副流感病毒Ⅱ型 副流感病毒Ⅲ型 /
4 人鼻病毒 腮腺炎病毒 低致病性冠状病毒通用型 /
5 巨细胞病毒 人博卡病毒 副流感病毒Ⅳ型 /
6 肺炎支原体 肺炎衣原体 嗜肺军团菌 /
7 铜绿假单胞菌 肺炎链球菌 肺炎克雷伯菌 /
8 A组链球菌 流感嗜血杆菌 金黄色葡萄球菌 /
表5 Panel B(8连管预制双通道荧光PCR法)
在检测前，可以进行鼻拭子标本采集、咽拭子标本采集、支气管肺泡灌洗液标本、痰标本的采集、鼻咽抽吸物标本的采集、胸腔穿刺液标本的采集，采集的样本使用检测38种呼吸道病原体的试剂盒进行检测，具体的检测方法包括如下步骤：
S10、提取样本核酸；
S20、将S10中提取的核酸样本加入试剂盒中后上机检测，每种检测靶标上机检测结束时，根据图像调节起止的阈值，设置PCR的起始循环数为3～15cycle,终止循环数设置为5～20cycle，同时调整阴性对照的扩增曲线的基线平直或低于阈值线；
S30、对S20中的检测结果进行判定，具体如下：
当每种检测靶标中的阴性对照满足Ct值＞38或未检出时；阳性对照满足扩增曲线呈S型，且Ct值≤30的要求时；再对Panel A和Panel B中各通道进行阳性判读；
Panel A中的FAM、VIC以及CY5三个通道的阳性判读原则以及Panel B中的FAM、VIC两个通道的阳性判读原则如下：
阴性：Ct值＞38或未检出；
阳性：扩增曲线呈S型，且Ct值≤35；
可疑：扩增曲线呈S型，且35＜Ct值≤38，需复检；复检结果若一致，判定结果为阳性。
在检测时，Panel A中的反应体系如表6：
表6
在检测时，Panel B中的反应体系如表7：
表7
检测过程中，荧光PCR扩增的具体程序如下表8：
表8
通过上述反应体系的对灵敏度进行检测，检测的灵敏度结果如下：
Panel A中使用各靶标阳性质粒混合后用TE稀释至100copies/μL、10copies/μL、2copies/μL、1copies/μL、0.5copies/μL，然后用Panel A试剂检测，两个重复，以两次检测均为阳性的最低拷贝数为试剂灵敏度。检测结果如下表9，Panel A中各病原体灵敏度检测的扩增曲线如图3-5。
表9
Panel B中使用各靶标阳性质粒混合后用TE稀释至100copies/μL、10copies/μL、2copies/μL、1copies/μL、0.5copies/μL，然后用Panel B试剂检测，两个重复，以两次检测均为阳性的最低拷贝数为试剂灵敏度。检测结果如下表10，Panel B中各病原体灵敏度检测的扩增曲线如图6-7：
表10
对于Panel A和Panel B中的的灵敏度实验进行重复性实验，使用各靶标浓度为100copies/μL的混合质粒进行验证，每次试验测3个重复，重复5次试验，统计结果计算各靶标CV值，要求CV值小于5％，实验结果均小于5％。
在具体实施时，通过对panel A中VIC荧光通道中的人博卡病毒与腮腺炎病毒的位置置换，以巨细胞病毒、腮腺炎病毒以及副流感病毒Ⅳ型位于同一检测孔中；或以巨细胞病毒、人博卡病毒以及副流感病毒Ⅳ型位于同一检测孔中进行检测，在相同浓度样本，扩增出现异常，灵敏度降低，检测后的扩增曲线分别为图1和图2。
由此可见，本申请文件中的RNA病原体以及DNA病原体的组合使得同一个检测孔中检测过程中的灵敏度不受影响，保证试剂盒在能够快速检出的同时不影响检测的灵敏性，能够快速的得到检测结果。
以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非是对本发明作其它形式的限制，任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示的技术内容加以变更或改型为等同变化的等效实施例。但是凡是未脱离本发明技术方案内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与改型，仍属于本发明技术方案的保护范围。
序列表
<110> 复旦大学附属中山医院,上海伯杰医疗科技有限公司
<120> 一种呼吸道病原体检测用组合物、试剂盒及其应用
<160> 153
<170> SIPOSequenceListing 1.0
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<211> 25
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 25
aatctagcac gacctgacca tagac 25
<210> 26
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 26
aagttcttgt ccgtgttgac ttca 24
<210> 27
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 27
gacctacatg agtgattgcc tgaa 24
<210> 28
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 28
ccactggctt cgggtgtta 19
<210> 29
<211> 23
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 29
agctctttac gcccagtaat tcc 23
<210> 30
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 30
ccactcccgt cgtaaatgtg t 21
<210> 31
<211> 25
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 31
tgctcgtagc attatctatg cctta 25
<210> 32
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 32
tctgcttggc ggtgatgtaa 20
<210> 33
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 33
tgcagggtgt gggtcactt 19
<210> 34
<211> 23
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 34
cctttaggat gtggtccgtc taa 23
<210> 35
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 35
gccgccaact acggtgttta 20
<210> 36
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 36
caccgattcc acaaacagta tt 22
<210> 37
<211> 25
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 37
caccttccca ctaacacatt taagg 25
<210> 38
<211> 23
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 38
gctgattaac ttcaagtcag tct 23
<210> 39
<211> 25
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 39
agcgaacagg cagcggaagc catgg 25
<210> 40
<211> 29
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 40
ccggaccaag tctactttct ggatccacc 29
<210> 41
<211> 29
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 41
tatccaatat agtaggagta acatcgcca 29
<210> 42
<211> 30
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 42
atgtacaagc acttctgttt cccaggagcg 30
<210> 43
<211> 23
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 43
ctcaaaccgc caaacgctgg tca 23
<210> 44
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 44
tgagcaaatt cacaacgacc ccgc 24
<210> 45
<211> 23
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 45
tctcctccga ggtgaagacc gcg 23
<210> 46
<211> 28
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 46
tcccacaaag tcagcactgc ttagacca 28
<210> 47
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 47
ccgggagcaa ccaatgccac c 21
<210> 48
<211> 23
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 48
acattgcaaa ccaggccgtg cag 23
<210> 49
<211> 25
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 49
ttcctcgtcc tggagtcatg ccatg 25
<210> 50
<211> 26
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 50
tcaagctcct acatagtggt caagct 26
<210> 51
<211> 28
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 51
tgaacctgta aataacgctg atcgcgct 28
<210> 52
<211> 30
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 52
tactataccc cttaatccag tttgcgcccg 30
<210> 53
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 53
tggcatgggc atggttggtt tggt 24
<210> 54
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 54
accgaaggcg aaggcagccc c 21
<210> 55
<211> 26
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 55
cgtcatacat gagatggctc caccgc 26
<210> 56
<211> 25
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 56
caagcttacg gtgctggcca aacaa 25
<210> 57
<211> 27
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 57
caggcgtctc atagtccatg gttctcg 27
<210> 58
<211> 28
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 58
ttcggaatac cccctctgaa gcaaaagg 28
<210> 59
<211> 27
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 59
atggctttat cagtaccgtg ccccttg 27
<210> 60
<211> 29
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 60
tccatgatat ccaacagacc ccaaacagg 29
<210> 61
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 61
ccccggtggt caccatttcg g 21
<210> 62
<211> 25
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 62
tgcagcaagc cttttctcta aaatt 25
<210> 63
<211> 30
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 63
tttaaaccga ttgatttgtc gccgatcttt 30
<210> 64
<211> 27
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 64
cagtgatcac gccgtctttc aaaggaa 27
<210> 65
<211> 25
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 65
ttttcaccag gcgcagactt gctgt 25
<210> 66
<211> 23
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 66
cgcccgtcac gtcatgaaag tcg 23
<210> 67
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 67
cggccaacta cgtgccagca gc 22
<210> 68
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 68
ttcctggcat ccctgtcagc catt 24
<210> 69
<211> 30
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 69
ttaccagcag aatcaaaatg cacttgacca 30
<210> 70
<211> 27
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 70
tcgcaaccga ctccattaag aacacca 27
<210> 71
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 71
tacggcgtgc agttccaccc g 21
<210> 72
<211> 30
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 72
ctatccacgc ttacacaggt gaccaaatga 30
<210> 73
<211> 25
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 73
ccctcacggt tcagggttag ccaca 25
<210> 74
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 74
tgctggtgaa gtagctgccg ttcg 24
<210> 75
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 75
acctgcaaag gacgccggct c 21
<210> 76
<211> 29
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 76
atgtgaaatt gccaagaggg aagcatttg 29
<210> 77
<211> 501
<212> DNA
<213> 甲型流感病毒(Influenza A virus)
<400> 77
catcggtccc acaggcagat ggcgactact actaacccac taattaggca tgagaataga 60
atggtactag ccagcactac ggctaaggct atggagcaga tggctggatc aagcgaacag 120
gcagcggaag ccatggaagt tgcaagtcag gctaggcaaa tggtgcaggc tatgagaaca 180
gttgggactc accctaactc cagtacaggt ctaaaagatg atcttattga aaatttgcag 240
gcctaccaga accggatggg agtgcaattg cagcggttca agtgagcctc tagtcgttgc 300
agctaacatt attgggatat tgcacttgat attgtggatt cttgatcgtc ttttcttcaa 360
atgcatttat cgtcgtttta aatacggttt gaaaagaggg ccttctacgg aaggaatacc 420
tgagtctatg agggaagaat atcggcagga acagcagaat gctgtggatg ttgacgatgg 480
tcattttgtc aacatagagc t 501
<210> 78
<211> 501
<212> DNA
<213> 副流感病毒Ⅰ型(Parainfluenza virum type I)
<400> 78
cggaataacc cctctagacc cacatgattt ctggagatgt cccgtaggag aacccctact 60
gagcaacaac cctaatatct cattattacc cggaccaagt ctactttctg gatccaccac 120
aatttcagga tgtgttagac taccttcatt atcaattggt gatgcaatat atgcttattc 180
atcaaactta atcactcaag gatgtgcaga tatagggaag tcatatcagg ttttacaatt 240
aggttacata tctttaaatt cagatatgta tcctgattta aacccggtaa tttctcatac 300
ctatgacatc aacgacaaca ggagatcatg ttctgtaata gctgcaggaa caaggggtta 360
tcagttatgc tccttgccca ctgtgaatga gactacagat tactcgagtg aaggtataga 420
agacttagta tttgacatat tagatctcaa aggaaagacc aaatctcatc gatacaaaaa 480
tgaagatata acttttgacc a 501
<210> 79
<211> 501
<212> DNA
<213> 呼吸道合胞病毒(virus syncitii respiratorium)
<400> 79
caacactata ctaccactga gattgatcta aatgacatta tgcaaaatat agaaccaact 60
taccctcatg gattaagagt tgtttatgaa agtttacctt tttataaagc agaaaaaata 120
gttaatctta tatcaggaac aaaatccata actaatatac ttgaaaaaac atcagcgata 180
gatacaactg atattaatag ggctactgat atgatgagga aaaatataac cttacttata 240
aggatacttc cattagattg taacaaagac aaaagagagt tattaagtct agagaatctt 300
agcataactg aattaagcaa gtatgtaaga gaaagatctt ggtcattatc caatatagta 360
ggagtaacat cgccaagtat tatgttcaca atggacatta aatatacaac tagcactata 420
gccagtggta taattataga aaaatataat gttaatagtt taactcgtgg tgaaagagga 480
cctactaagc catgggtagg t 501
<210> 80
<211> 450
<212> DNA
<213> 人鼻病毒(Humanum rhinovirus)
<400> 80
taaaacagcg gatgggtatc ccaccattcg acccattggg tgtagtactc tggtactatg 60
tacctttgta cgcctgtttc tccccaacca cccttcctta aaattcccac ccatgaaacg 120
ttagaagctt gacattaaag tacaataggt ggcgccatat ccaatggtgt ctatgtacaa 180
gcacttctgt ttcccaggag cgaggtatag gctgtaccca ctgccaaaag cctttaaccg 240
ttatccgcca accaactacg taacagttag taccatcttg ttcttgactg gacgttcgat 300
caggtggatt ttccctccac tagtttggtc gatgaggcta ggaattcccc acgggtgacc 360
gtgtcctagc ctgcgtggcg gccaacccag cttatgctgg gacgcccttt taaggacatg 420
gtgtgaagac tcgcatgtgc ttggttgtga 450
<210> 81
<211> 501
<212> DNA
<213> 巨细胞病毒(Mycobacterium intracellulare)
<400> 81
cagggtagtt gtaattgggg gcgacattcg tactgtccag aagacaattg cacgggtttc 60
agtgagatga gtactttagc gatgtcggcg ggggcgctac gtttcaccgt gacggtgaga 120
acttgaccgt cgttttgtac ttcatgaggc acgttataca agccactggt atcatgaagg 180
atgacctctg atgcgatgtg aggattaaat tgtccctcaa accgccaaac gctggtcatg 240
tttccaccgt caattacgca gctgacggtg tgagatacca cgatgttgga cttaggtttg 300
ggggctaatt gcctttttac aaattccctt ctgtattgca ggtcctgctg ccactgcttt 360
tccgtgcgga aagtcgccat gtcttccaca cgtgtggcga cgatagacgc caccaaggta 420
gataccagaa gcagctggat ccgcatggta ttaccgtatg tcaattagaa agttgaacgg 480
acacggttat cgttcctggc g 501
<210> 82
<211> 501
<212> DNA
<213> 肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae)
<400> 82
aaactccagg gcgctgaggc cactggttct tcaaccacat ctggatctgg ccaatccacc 60
caacgtgggg gttcgtcagg ggacaccaaa gtcaaggcgt tgcaggtggc ggtgaaaaag 120
aaatcggact cggaggacaa tggtcagatc gaacttgaaa ccaacaacct cgccaacgcc 180
ccgattaaac ggggctccaa taacaaccag caagtccaac tcaaggcgga cgattttggt 240
actgcccctt ccagttcggg atcaggcacc caagatggca cccccacccc ctgaacgccg 300
tggttaacga ctgagcaaat tcacaacgac cccgccaaat tcgccgcctc gatcctcatt 360
ctgtacgatg cgccttatgc gcgcaaccgt accgtcattg accgcgttga tcacttggat 420
cccaaggtga tggtggataa ttactgttaa caattttttt agaaaaaggc agtttttgaa 480
gtttttaatt tgtaaaattt c 501
<210> 83
<211> 501
<212> DNA
<213> 铜绿假单胞菌(Yersinia pestis)
<400> 83
gtggaacgac agcttcaacg agaacctgct ctgcttcacc aacaacatcc cgcagcgtga 60
tggcggcacc cacctggccg gtttccgttc ggcgctgacg cgtaacctga acaactacat 120
cgaggccgaa ggcctggcga agaaattcaa gatcgccacc accggcgacg atgcccgcga 180
aggcctcacc gcgatcatct cggtgaaggt accggacccg aagttcagct cgcagaccaa 240
ggacaagctg gtctcctccg aggtgaagac cgcggtggaa caggagatgg gcaagtactt 300
cgccgacttc ctgctggaga atcccaacga agccaaggcc gtggtcggca agatgatcga 360
cgccgcccgt gcccgtgaag ccgcgcgcaa ggcgcgcgag atgacccgcc gcaagggcgc 420
gctggacatc gccggcctgc ccggcaaact ggccgattgc caggaaaagg acccggcgct 480
ctccgaactg tacatcgtgg a 501
<210> 84
<211> 501
<212> DNA
<213> A组链球菌(Group A Haemophilus influenzae)
<400> 84
tgtcaatggc aaaaggaatg cccaattctt tttcaacaac ggaaccgact tcttgggttt 60
ctttccaatt aaggttgaat gccccagtaa ctgtattagt atcacggtca accgctcctg 120
gtgatcccat accaattccc acaaagtcag cactgcttag accatacaag tctaagcgat 180
gtttgatgga agcgatgata tcagggacaa tatgtttgcc tccttctaaa atattagtct 240
caattgccca tttttcttgg acttctcctg ctgctgttaa aattccaaat ttaatggtgg 300
taccacctaa atcaatcccc agtaattttt gactcatttg tctatccttc tttttccaat 360
tctaatctat gctcacgtcg caaaattaac tccgcattta agtaatccct cttatccaat 420
aagccgctat catagagacg ctgaagttca atcttcatca tttcaatatc ataaagacgt 480
ttgccaaggt aaacaaaaat g 501
<210> 85
<211> 551
<212> DNA
<213> 乙型流感病毒(GRAVEDO virus B)
<400> 85
gtttagtcac tggcaaacag gaaaaatggc ggacaatatg accacaacac aaattgaggt 60
gggtccggga gcaaccaatg ccaccataaa cttcgaagca ggaattctgg agtgctatga 120
aagactttca tggcaaaggg cccttgacta ccctggtcaa gaccgtctaa acagactaaa 180
gaggaaatta gagtcaagaa taaagaccca caacaaaagt gagcctgaaa gtaaaaggat 240
gtctcttgaa gagagaaaag caattggagt aaaaatgatg aaagtacttc tatttatgaa 300
tccatctgct ggaattgaag ggtttgagcc atactgtatg aaaagttcct cagagagtaa 360
ctgtccgaaa tacagttgga ttgactaccc ttcaacccca gggaggtgcc ttgatgacat 420
agaagaagaa ccagatgatg ttgatggccc aactgaaata gtattaaggg acatgaacaa 480
caaagatgca aggcaaaaga taaaggagga agtaaacact cagaaagaag ggaagttccg 540
tttgacaata a 551
<210> 86
<211> 501
<212> DNA
<213> 呼吸道腺病毒(adenovirus respiratoriorum)
<400> 86
aacgggggcg ccttcaattg gagcagtgtc tggagcgggc ttaaaaattt cggctcaacg 60
ctccggacct atgggaacaa ggcctggaat agtagcacag ggcagatgtt gagggaaaag 120
cttgcagacc aaaacttcca gcaaaaggtg gtggacggcc tggcctcggg cattaacggg 180
gtagtggaca ttgcaaacca ggccgtgcag cgcgagataa acagccgcct gaacccgcgg 240
ccgcccacgg tagtggagat ggaagatgca actcctccgc ccaggggcga gaagcggccg 300
cggcctgacg cggaggagac aaccctgcag gtagacgagc cgccctcgta cgaggaggcc 360
ctcaaggccg gcatgcccac cacacgcatc attgcgccaa tggccacggg tgtcatgaaa 420
cccgccaccc ttgacctgcc tttgccaccc gtgcccgctc caccaaaggc agctccggtt 480
gagcaggccc ccccggtggc a 501
<210> 87
<211> 501
<212> DNA
<213> 副流感病毒Ⅱ型(Parainfluenza virum type II)
<400> 87
gtctcataaa tgggactact tcttacaatg agcagtcctc acgctatttt atcccaaaac 60
atcccaacat aacttgtgcc ggtaactcca gcaaacaggc tgcaatagca cggagttcct 120
atgtcatccg ttatcactca aacaggttga ttcagagtgc tgttcttatt tgtccattgt 180
ctgacatgca cacagaagag tgtaatctag ttatgtttaa caattcccaa gtcatgatgg 240
gtgcagaagg taggctctat gttattggta ataatttgta ttattatcaa cgcagttcct 300
cttggtggtc tgcatcgctc ttttacagga tcaatacaga tttttccaaa ggaattcctc 360
cgatcattga ggctcaatgg gtaccgtcct atcaagttcc tcgtcctgga gtcatgccat 420
gcaatgcaac aagtttttgc cctgctaact gcatcacagg ggtgtacgca gatgtgtggc 480
cgcttaatga tccagaactc a 501
<210> 88
<211> 235
<212> DNA
<213> 腮腺炎病毒(mumps virum)
<400> 88
cttgcagcaa attggatata tcaagcaaca agtcaggcaa ctgagctatt actcacaaag 60
ttcaagctcc tacatagtgg tcaagctttt accgaatatc caacccactg ataacagctg 120
tgaattcaag agtgtaactc aatacaataa gaccttgagt aatttgcttc ttccaattgc 180
agaaaacata aataatattg catcgccctc acctggatca agacgtcata aaagg 235
<210> 89
<211> 501
<212> DNA
<213> 人博卡病毒(Boca Humanum virum)
<400> 89
aataaaatag gatgggataa cactagagaa ctattgttta atcaaaagaa aacactagat 60
caaaaataca gaaatatgtt ctggcacttt agaaataact ctgattgtga aagatgtaat 120
tactgggatg atgtgtaccg tagacactta gctaatgttt cctcacagac agaagcagac 180
gagataactg acgaggaaat gctttctgct gctgaaagca tggaagcaga tgcctccaat 240
taagagacag cctagagggt gggtgctgcc tggatacaga tatcttgggc catttaatcc 300
acttgataac ggtgaacctg taaataacgc tgatcgcgct gctcaattac atgatcacgc 360
ctactctgaa ctaataaaga gtggtaaaaa tccatacctg tatttcaata aagctgatga 420
aaaattcatt gatgatctaa aagacgattg gtcaattggt ggaattattg gatccagttt 480
ttttaaaata aagcgcgccg t 501
<210> 90
<211> 501
<212> DNA
<213> 肺炎衣原体(Chlamydia pneumoniae)
<400> 90
gttctcagac ttcatgcaaa ttgtttcctg tcagatcaac aagtttaaat ctagaaaagc 60
ttgtggagtt actgtaggag ctactttagt tgatgctgat aaatggtcac ttactgcaga 120
agctcgttta attaacgaga gagctgctca cgtatctggt cagttcagat tctaaagatt 180
tgcttagaat ttctcctcac cttgttatca gagtctacat gttaggctct gatttatgct 240
cagagcttct taatttctga gcaattttta ttccccccct acttcacatc acatcaagac 300
aaatgaatta tttacttatg ctattttcta atagcttcct gtagattaca cgcttgcgtt 360
aaaagcatta ttacactact atacccctta atccagtttg cgcccgtagc tcaatggtag 420
agctgtagcc ttccaagcta ccggtgtcag ttcgattctg atcgggcgct ttctttacac 480
aaccaagact gaaattctgg c 501
<210> 91
<211> 210
<212> DNA
<213> 肺炎链球菌(Clostridium)
<400> 91
tggctcatat tgttttttat ctctcttgcc tcgttgaagc aatggtgcat aagacaatgt 60
ttgatggcat gggcatggtt ggtttggtct tgcttatttt ttctatgctg atgttgatgt 120
tggtgattca cttgttggga gatatttgga cagtgaagct tatgcttgtc aataatcaca 180
aatatgtaga tcatatcttg tttaggacag 210
<210> 92
<211> 242
<212> DNA
<213> 流感嗜血杆菌(fusobacterium)
<400> 92
tcggaataac tgggcgtaaa gggcacgcag gcggttattt aagtgaggtg tgaaagccct 60
gggcttaacc taggaattgc atttcagact gggtaactag agtactttag ggaggggtag 120
aattccacgt gtagcggtga aatgcgtaga gatgtggagg aataccgaag gcgaaggcag 180
ccccttggga atgtactgac gctcatgtgc gaaagcgtgg ggagcaaaca ggattagata 240
cc 242
<210> 93
<211> 501
<212> DNA
<213> 肠道病毒通用(Herpesviridae universal)
<400> 93
agcgatccgg gtcacatgag aactcaaact ctgcatcgga gggctcgacc ataaattaca 60
caactataaa ctactataag gatgcatacg ctgcaagtgc ggggcgccag gatatgtctc 120
aagatccgaa gaaatttacc gaccctgtca tggacgtcat acatgagatg gctccaccgc 180
tcaagtctcc aagcgctgag gcatgtggtt atagtgatcg tgtggctcag cttaccattg 240
ggaactctac catcacgaca caggaagcag ctaacatagt tatagcctat ggggagtggc 300
ctgagtactg cccagacaca gatgcaacgg cagtcgacaa gcctacacga cctgacgtgt 360
cagtgaacag atttttcacg ctagacacta aatcttgggc caaggattca aagggatggt 420
attggaaatt ccctgatgtt ttgacagaag taggtgtttt tggtcaaaat gctcagttcc 480
actacctgta tcgatccggg t 501
<210> 94
<211> 519
<212> DNA
<213> 人偏肺病毒(Humanum metapneumovirus)
<400> 94
taatcttatt atgtgtaggt gccttaatat ttaccaaact agcatcaact atagaagtgg 60
gattagagac cacagtcaga agagctaacc gtgtactaag tgatgcactc aagagatacc 120
ctaggatgga cataccaaaa atcgctagat ctttctatga cttatttgaa caaaaagtgt 180
attacagaag cttgttcatt gagtatggca aagcattagg ctcatcctct acaggcagca 240
aagcagaaag tttattcgtt aatatattca tgcaagctta cggtgctggc caaacaatgc 300
tgaggtgggg agtcattgcc aggtcatcta acaatataat gttaggacat gtatctgtcc 360
aagctgagtt aaaacaagtc acagaagtct atgacctggt gcgagaaatg ggccctgaat 420
ctgggctcct acatttaagg caaagcccaa aagctggact gttgtcacta gccaattgtc 480
ccaactttgc aagtgttgtt ctcggtaatg cctcaggct 519
<210> 95
<211> 562
<212> DNA
<213> 副流感病毒Ⅲ型(Parainfluenza virum type III)
<400> 95
ttaaatccca ggatctctca tacttttaac ataaatgaca ataggaagtc atgttctcta 60
gcactcctaa atacagatgt atatcaactg tgttcaactc ccaaagttga tgaaagatca 120
gattatgcat catcaggcat agaagatatt gtacttgata ttgtcaatta tgatggctca 180
atctcaacaa caagatttaa gaataataac ataagctttg atcaacctta tgctgcacta 240
tacccatctg ttggaccagg gatatactac aaaggcaaaa taatatttct cgggtatgga 300
ggtcttgaac atccaataaa tgagaatgta atctgcaaca caactgggtg tcccgggaaa 360
acacaaagag actgcaatca ggcgtctcat agtccatggt tctcggatag aagaatggtc 420
aactccatca ttgttgttga caaaggctta aactcaattc caaaattgaa ggtatggaca 480
atatctatga gacagaatta ctgggggtca gaaggaaggt tacttctact aggtaacaag 540
atctatatat atacgagatc ca 562
<210> 96
<211> 486
<212> DNA
<213> 低致病性冠状病毒通用型(Humilis morbificae coronavirus universaegenus)
<400> 96
gttcaggaat cctcaagaaa acttcttggg ctgaccaatc tgaacgaaat taccaaacct 60
ttaatagagg cagaaaaacc caacctaaat tcactgtgtc tactcaacca caaggaaata 120
ctatcccaca ttattcctgg ttctccggga tcactcaatt tcaaaaaggt agagacttta 180
aattttcaga tggtcaagga gttcccattg ctttcggaat accccctctg aagcaaaagg 240
atattggtat agacacagcc ggcgttcttt taaaacagct gatggtcaac aaaagcagtt 300
gttaccgaga tggtatttct actatctcgg taccggccca tatgccaatg catcctatgg 360
tgaatccctc gaaggggtct tctgggttgc taatcaccaa gctgacactt ctactccctc 420
cgatgtttcg tcaagggatc ctactactca agaagctatc cctactaggt ttccgcctgg 480
tacgat 486
<210> 97
<211> 601
<212> DNA
<213> 嗜肺军团菌(Legionella pneumophila)
<400> 97
caaggatttc atgcattctt gggatcatgg aggcaggatc aactgtctcg ggagctttgt 60
tttcaagacc atttaaaatg gctttatcag taccgtgccc cttgccagta agcgccagcg 120
aaccataaag ctctactttg actctctgag ttttatcaaa cagatttttt tgttccagta 180
attgcaaaaa agcattggca gctaacatag ggcctactgt gtgtgagctt gatggcccaa 240
ttcctataga aaataaatca aaaacactaa tgttcatcgc cgttaaaatc tcttgttcat 300
tattaggggc aagtgtagaa ggatattacc tttttgtcca ttatataatt aaatgatagc 360
ttatgactgg taattttacg caaatttagg caaaattagt gggcgatttg tttttgcttt 420
attttgctca atttattgtg cagtatgaga acttaagtgt aagactaaaa ggggattgtt 480
tatgaagatg aaattggtga ctgcagctgt tatggggctt gcaatgtcaa cagcaatggc 540
tgcaaccgat gccacatcat tagctacaga caaggataag ttgtcttata gcattggtgc 600
c 601
<210> 98
<211> 635
<212> DNA
<213> 副流感病毒Ⅳ型(Parainfluenza virum type IV)
<400> 98
attaggtgca accagtcaac tcccgccaaa taaatctccg tctcagacca gcaaaacaga 60
agaaaccaac gatgagacaa gaacctcaaa aaacttggca tcaggagagg caccagccca 120
cgcctcttca ccactgcggt cacacaatga agagagtgaa tcagggaaac agagcccaga 180
cggtttctcc atgatatcca acagacccca aacaggtaca ctgctcatgg gatcagacac 240
acaatctcca agtccatcaa agacctatca aggactcatt cttgatgcaa agaagagagc 300
gctaaatgaa ccaaggagga atcaaaaaac aacaaatgaa catggaaaca caaatgacac 360
caggatattt aagagggggg aatatagcca ccaagaaaga ggcttgggtt acacaggatc 420
agagatcaaa aacgcaatct tcattccaag acatcgaagg gaatactcga tttcatgggt 480
caacggaaga accacaatat cagagtggtg caatccatgt tgcgcaccag tcaaaccaac 540
cgcctctgtc gaaaagtgta catgtggaag atgtcccaaa gtttgcgaat tgtgcatcag 600
agatccttga tgcaatcaaa gcattagagg tgagg 635
<210> 99
<211> 401
<212> DNA
<213> 肺炎克雷伯菌(Moraxella catarrhalis)
<400> 99
cagatagtcc cctttgccgt gaataatcgc cccggtggtc accatttcgg tatacagcag 60
cgtatgccgc gacagcagcc gcaggaagta gcggcagtgt cggtcggtcc agtcgagcat 120
cggcgcgatg gagaagcggt gagcagggaa aacaggtgac gttgattcag gcatcatggc 180
gaataaataa gcatccgggt aaaaaggggc gctactatag cataaagata caccacaggc 240
gcatagtgcg ccgcgcttcg cccctcacct gaaatgatta ctttttccgc ggcttaccgt 300
cgtgtggacc gaagaactgc ggcggatggt caacccaacg atcctggcgc gtcgcggcat 360
agccgggatt gagcgggtaa taaatgcggt tgtacttctt a 401
<210> 100
<211> 457
<212> DNA
<213> 金黄色葡萄球菌(Bacillus)
<400> 100
gctgaagatg ctggtgtagt taaattcaaa aaaggttaca atgctgaaat tattgaatat 60
gttggtgact ttattaaacc aattaataaa cctgtttacg cagcatatac cgcacttaaa 120
aaagttaaag acagaatttt ttaggaaggg aattatcaaa acatgaaatt tacagagtta 180
actgttaccg aatttgacaa ctttgtacaa aatccatcat tggaaagtca ttatttccaa 240
gtaaaagaaa atatagttac ccgtgagaat gatggctttg aagtagtttt attaggtatt 300
aaagacgaca ataacaaagt aattgcagca agccttttct ctaaaattcc tactatggga 360
agttatgttt actattcgaa tcgtggtcca gtaatggatt tttcagattt aggattagtt 420
gattattatt taaaagagtt agataaatat ttacagc 457
<210> 101
<211> 601
<212> DNA
<213> 鲍曼不动杆菌(oeni)
<400> 101
tccccaatgc gatgtctaaa gttaaagaac ctgtagatac ggcttcaact gcttgaacag 60
tgttatcacc aagacgcata accgtatttt taccaaattg cttctcaatt tggctcaaag 120
cggcttgtaa tgctttgctt ttattctcat ccatctcaaa aacctcaata ctctatgttc 180
atcacgttta acccaagtgg atgcattgaa tctcaacttg tttcacaggg ctaatagtga 240
cagatttttt ctctagcttc tatatattgt atatgtgagt gcgacacaac tcgacgtttt 300
tattcatcat tataagacca gtgatcttca taatgttgat cattatcctg tttaaaccga 360
ttgatttgtc gccgatcttt cttgcttggt ctatggtcag gtcgtgctag attatgcaat 420
tttcgttggg aagcaatcaa ctcccgtctt gcaatactta cttctgtttc ttcataaagt 480
tgttgtgcaa caggggccgg tcctcgggta ttggagagcg ctttaacaac aactgttttt 540
ttatcgaaac cttgttgaac aacgagctcc ataccgacac gaatttcttt agaaactttt 600
a 601
<210> 102
<211> 575
<212> DNA
<213> 屎肠球菌(Propionibacterium acnes)
<400> 102
tcttcaaatc gtgtattttc gaatacgaca acgtcgccgt cattcatgtt gcggattgct 60
tcttctaatt gttctccgcg agtttcaggt acgaatgtta cttctttacc taataattcg 120
cctagacgtt ttgcaactgg agctaaagat tttccttctt tatcttcttc tgtttttaca 180
cgtccaaggt gagagaaaag gattgctttt ccgccttgtt ctagaacgta gttgattgtt 240
ggcaatgctg ctttgatacg agtgtcgtca gtgatcacgc cgtctttcaa aggaacgttg 300
aagtcaacac ggacaagaac ttttttgtct tttaaatcga tatctttcac tgttttctta 360
gccattttat ttcctcctga ataaacttat tatcaaaaaa agcggaagaa gcgcgattgc 420
ttccccgctt ttaaatgtac atgtctataa tttacacttg tacgtttgtc tatcttataa 480
gttagcgaag tattctaaag tacgtactaa ttgtgcagtg tatgacattt cgttgtcgta 540
ccaagcaaca gttttaacta attgtttgtc gccaa 575
<210> 103
<211> 461
<212> DNA
<213> 大肠杆菌(Mus)
<400> 103
ggaggttcct ccccatgcgc cgccgctttt ttgaaaaagt tttcatcatt cattattttt 60
gggaacattc agaaacaatt ttcccaaatt atagagacgg ggctaaaggc agaagtatga 120
aatttcgggt gagccacttt cgtagctcac ccgttagcac tatcaggtat caggcggctt 180
tcttgaggca ggcactcata aacttattac gatcatcacc tttcagagat tgttgcgttg 240
cttgattatt acattcgcgc atcttttgct gctgtggcgt caaacttttt tcaccaggcg 300
cagacttgct gttcttcagg caatcactca tgtaggtctt acgagcatcc cctttcaacg 360
cctgcgccgt cgcctgctga ttacaggatg tcatacgctg ttgttgtggg gttaaggttc 420
tctcggcagc gccgacggtg gttaaaaaaa ccagaccaaa a 461
<210> 104
<211> 642
<212> DNA
<213> 非典型分枝杆菌(Mycobacterium atypical)
<400> 104
caaaggaatt gacgggggcc cgcacaagcg gcggagcatg tggattaatt cgatgcaacg 60
cgaagaacct tacctgggtt tgacatgcac aggacgtacc tagagatagg tattcccttg 120
tggcctgtgt gcaggtggtg catggctgtc gtcagctcgt gtcgtgagat gttgggttaa 180
gtcccgcaac gagcgcaacc cttgtcctat gttgccagcg ggtaatgccg gggactcgta 240
ggagactgcc ggggtcaact cggaggaagg tggggatgac gtcaagtcat catgcccctt 300
atgtccaggg cttcacacat gctacaatgg ccagtacaga gggctgcgaa gccgtaaggt 360
ggagcgaatc ccttaaagct ggtctcagtt cggattgggg tctgcaactc gaccccatga 420
agtcggagtc gctagtaatc gcagatcagc aacgctgcgg tgaatacgtt cccgggcctt 480
gtacacaccg cccgtcacgt catgaaagtc ggtaacaccc gaagccagtg gcctaacctt 540
ttggagggag ctgtcgaagg tgggatcggc gattgggacg aagtcgtaac aaggtagccg 600
taccggaagg tgcggctgga tcacctcctt tctaaggagc ac 642
<210> 105
<211> 541
<212> DNA
<213> 诺卡菌(Mycobacterium)
<400> 105
atgctgttgg gtggaaagat ttatcggtgc gagatgggcc cgcggcctat cagcttgttg 60
gcggggtaac ggcccaccaa ggcgacgacg ggtagccgac ctgagagggt gaccggccac 120
actgggactg agacacggcc cagactccta cgggaggcag cagtggggaa tattgcacaa 180
tgggcggaag cctgatgcag cgacgccgcg tgagggatga cggccttcgg gttgtaaacc 240
tctttcgaca gggacgaagc gcaagtgacg gtacctgtag aagaagcacc ggccaactac 300
gtgccagcag ccgcggtaat acgtagggtg cgagcgttgt ccggaattac tgggcgtaaa 360
gagcttgtag gcggtttgtc gcgtcgtccg tgaaaacttg gggctcaacc ccaagcttgc 420
gggcgatacg ggcagacttg agtacttcag gggagactgg aattcctggt gtagcggtga 480
aatgcgcaga tatcaggagg aacaccggtg gcgaaggcgg gtctctggga agtaactgac 540
g 541
<210> 106
<211> 656
<212> DNA
<213> 马尔尼菲青霉菌(Phialophora)
<400> 106
atgcctgaaa ttgttcctgc tcatggtatt cctggcatcc ctgtcagcca ttacggacac 60
atttacgacg ggagtggaat ggactctcag atgccggacc gcgtgggtga cgataatgat 120
aattcggagg ctggtggtcg aaagaaacga ggctccagct ccactattgc taacgataat 180
gaactgagaa aacttttacg tcaatatgaa ggttacacgc tcaagcagat ggccgcagag 240
gttcagaagc atgaaggtgc gggaggcaaa tctgaaaagg tgaaacaggt tttcgccatg 300
gtgtggttga aggagaattg ccggaaaagc agcggctctg ttcgtcggga tcgtgtatat 360
tgttgttatg ctgagagatg tggaagcgaa cacgtctctg ttctcaatcc agcttccttc 420
ggcaaactcg tgcgaatcat atttccaaat gtgcagacac gtcgccttgg tgtcagaggt 480
gaatcgaaat atcactatgt tgatctcact gtcatagagg aaaaacatca acaatcgatc 540
ggccaaagct cacaggatca aaatacggcg aacgaatcac ttaatacaga tgggagaggg 600
ttgaactcgt ctttgcgacc tcgcagtata agcatatctc aaccaccagt cgatac 656
<210> 107
<211> 471
<212> DNA
<213> 白色念珠菌(Candida albicans)
<400> 107
ggaaatcaac ggtacctgaa gttttacaat cagcaacata agctttatta ccagcagaat 60
caaaatgcac ttgaccacct aaggcataga taatgctacg agcaatactt ggagtgaaat 120
aactgatagt agtaccagaa tctaagagga caccagcgtt gacattaaca tttcgtccca 180
taacattgac agatcttaaa ccgacactta atgttctgtc agaagtaatt ggtaattcaa 240
ctaaagagcc actgtacttg gccttgtcaa taccaccaaa aataatttgc ccagaagaag 300
cttcaggaga gttaaggaag agggaataag catttttagc aataatgcct tgttttttca 360
aactaatagg aagattgtcg taaggagttc tggtagcttc gttggcttgg aaaccaatac 420
ctaaaatacc tttatgagca ctagtagacc aaacgttagc aaataattga t 471
<210> 108
<211> 470
<212> DNA
<213> 曲霉(Aspergillus fumigatus)
<400> 108
cgatcctcaa tccaacttgt acatacttct cccaactctc tgctatatcc ttcatattcc 60
catactacaa gatgtccgca gtaaaagcag cccgctacgg caaggacaat gtccgcgtct 120
acaaggttca caaggacgag aagaccggtg tccagacggt gtacgagatg accgtctgtg 180
tgcttctgga gggtgagatt gagacctcgt aagtcacccc ccgtctaaac cgatcccttg 240
aaagtttggc taataaccga ggactgcagt tacaccaagg ccgacaacag cgtcattgtc 300
gcaaccgact ccattaagaa caccatttac atcaccgcca agcagaaccc cgttactcct 360
cccgagctgt tcggctccat cctgggcaca cacttcattg agaagtacaa ccacatccat 420
gccgctcacg tcaacattgt ctgccaccgc tggacccgga tggacattga 470
<210> 109
<211> 506
<212> DNA
<213> 嗜麦芽窄食单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia)
<400> 109
atcgaccacg ctgccgggtg cgccggccgc gccgcaggaa gtgttcgaca gcggcctgcc 60
gatcttcggc atctgctacg gcatgcagac cctggccgcg cagctgggcg gtgccaccga 120
agcggcggat cagcgcgagt tcggccacgc cgaagtgaac gtgatcaacc cggatgcact 180
gttcaagggc ctgagcgacc acggcggcga gccgaagctg aatgtctgga tgagccacgg 240
cgaccacgtc tccgttgcac cgccgggctt caccatcacc gccaccaccg accgcattcc 300
ggtggccgcc atggccaacg aagaaaagcg ctggtacggc gtgcagttcc acccggaagt 360
gacccacacc ctgcagggcc aggcgctgct gcgccgcttc gtggtggacg tgtgcggttg 420
ccagaccctg tggaccgccg ccaacatcat cgacgaccag atcgcccgcg tgcgcgaaca 480
ggtgggcgat gacgaagtga tcctgg 506
<210> 110
<211> 468
<212> DNA
<213> 粪肠球菌(Bacillus)
<400> 110
cacaactcaa ggccgtttca acggtacagt tgaagttcac gaaggttcat tcaacgttaa 60
cggcaaagaa atcaaagttt tagctaaccg taaccctgaa gaattaccat ggggcgaatt 120
aggcgtagac atcgttttag aatgtactgg tttctttact tctaaagaag ctgctgaaaa 180
acatttaact gctggtgcaa aacgtgtagt tatttcagct cctggtggta acgatgtacc 240
aacaatcgtt tacaacacaa accatgaaac attaactgga gaagaaactg taatttcagg 300
cgcttcttgt actacaaact gcttagctcc aatggctaaa gctttacatg acaactttgg 360
tgttgttgaa ggtttaatga caactatcca cgcttacaca ggtgaccaaa tgacattaga 420
cggaccacat cctaaaggcg acttccgtcg tgcgcgcgct gctgctgc 468
<210> 111
<211> 463
<212> DNA
<213> 结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)
<400> 111
cggtgacaaa ggccacgtag gcgaaccctg cccaggtcga cacataggtg aggtctgcta 60
cccacagccg gttaggtgct ggtggtccga agcggcgctg gacgagatcg gcgggacggg 120
ctgtggccgg atcagcgatc gtggtcctgc gggctttgcc gcgggtggtc ccggacaggc 180
cgagtttggt catcagccgt tcgacggtgc atctggccac ctcgatgccc tcacggttca 240
gggttagcca cactttgcgg gcaccgtaaa caccgtagtt ggcggcgtgg acgcggctga 300
tgtgctcctt gagttcgcca tcgcgcagct cgcggcggct gggctcccgg ttgatgtggt 360
cgtagtaggt cgatggggcg atcggcacac ccagctcggt cagctgtgtg cagatcgact 420
cgacacccca ccgcaaacca tcggggccct cgcggtggcc ctg 463
<210> 112
<211> 571
<212> DNA
<213> 耶氏肺孢子菌(Pneumocystis jiroi)
<400> 112
accgttgcta ttatagatga tgggttggat atgactagtg aagacttaaa agataattat 60
tatcctgaag gctcttatga ctttaatgat cacaaccctg ttccaatgcc taaacttcct 120
gaagatacgc atgggactag atgtgctggt gaagtagctg ccgttcgaaa tactgtttgt 180
ggaatcggtg ttgcatatga atccaaagtt tctggtttgc gaatattatc cgggcctata 240
acagatcttg atgaagcaga atcgcttaat tatgatttcc ataaaaatca tatttattcc 300
tgtagttggg gacctgacga tgatggaaaa actgttgatg ggccttcttc tcttgttctt 360
agagcactta ttaatggagt aaataatgga aggaatgggt tgggttctat ctatgttttt 420
gcatcaggaa atggtggaat atatgaagat aactgtaatt tcgatggata tgcaaatagt 480
gtgtttacca ttactattgg tggcatagat aaacatggaa agcgtcttaa atattctgaa 540
gcgtgttctt ctcagctagc tgttacatat g 571
<210> 113
<211> 377
<212> DNA
<213> 新生隐球菌(Pneumocystis jiroi)
<400> 113
caacaacgga tctcttggct tccacatcga tgaagaacgc agcgaaatgc gataagtaat 60
gtgaattgca gaattcagtg aatcatcgag tctttgaacg caacttgcgc cctttggtat 120
tccgaagggc atgcctgttt gagagtcatg aaaatctcaa tccctcaggt tttattacct 180
gttggacttg gatttgggtg tttgccgcga cctgcaaagg acgccggctc gccttaaatg 240
tgttagtggg aaggtgatta cctgtcagcc cggcgtaata agtttcgctg ggcctatggg 300
gtagtcttcg gcttgctgat aacaaccatc tctttttgtt tgacctcaaa tcaggtaggg 360
ctacccgctg aacttaa 377
<210> 114
<211> 423
<212> DNA
<213> 毛霉菌(Mucor hiemalis)
<400> 114
caggcgagag accgatagcg aacaagtacc gtgagggaaa gatgaaaagt actttgaaaa 60
gagagttaaa cagtatgtga aattgccaag agggaagcat ttggagttag actgacttga 120
agttaatcag cttggtcttt ggactgggtg tacttgactt ctatgtctgc caatagcagt 180
tagtcctggt ggaaaaaact gaagggaagg tagtccttcg ggatgtttat agacctttgg 240
aaaatacact gggattgact gaggaatgca gtagatgcta ttaaggcttc gtctagtagg 300
tgttaggtga aggtacttgg tattttcagc ttgctgatgt gctaggttac ttgagcttaa 360
ttgcttgcta gaactgtaat ctactttggt tattggctta atgactctaa atggcccgtc 420
ttg 423
<210> 115
<211> 175
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 115
cgcagactgg cgcgcgcggg tggtcatggg acttcagcat ggcggtgttt gcagatttgg 60
acctcttcag catggcggtg tttacagatt tggacctgcg agcgggtgga gacagccgct 120
caccttggct attcagttgt tgctatcaat catatcgttg actttaagga aaaga 175
<210> 116
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 116
ctacggctaa ggctatggag 20
<210> 117
<211> 27
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 117
ctactgagca acaaccctaa tatctca 27
<210> 118
<211> 25
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 118
aagtatgtaa gagaaagatc ttggt 25
<210> 119
<211> 18
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 119
tggcgccata tccaatgg 18
<210> 120
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 120
atgcgatgtg aggattaaat tgtc 24
<210> 121
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 121
tgaacgccgt ggttaacga 19
<210> 122
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 122
tcgcagacca aggacaagct 20
<210> 123
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 123
ctcctggtga tcccatacca a 21
<210> 124
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 124
caggaaaaat ggcggacaat 20
<210> 125
<211> 17
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 125
ggcctcgggc attaacg 17
<210> 126
<211> 23
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 126
ctcaatgggt accgtcctat caa 23
<210> 127
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 127
tcaagcaaca agtcaggcaa c 21
<210> 128
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 128
ggccatttaa tccacttgat aacg 24
<210> 129
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 129
cgcttgcgtt aaaagcatta ttac 24
<210> 130
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 130
cctcgttgaa gcaatggtgc 20
<210> 131
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 131
agtgaggtgt gaaagccctg 20
<210> 132
<211> 23
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 132
agaaatttac cgaccctgtc atg 23
<210> 133
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 133
ggcagcaaag cagaaagttt attc 24
<210> 134
<211> 23
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 134
gggaaaacac aaagagactg caa 23
<210> 135
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 135
ggtcaaggag ttcccattgc 20
<210> 136
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 136
gatcaactgt ctcgggagct tt 22
<210> 137
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 137
gaaacagagc ccagacggtt t 21
<210> 138
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 138
tcccctttgc cgtgaataat c 21
<210> 139
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 139
tgatggcttt gaagtagttt t 21
<210> 140
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 140
tgcgacacaa ctcgacgttt 20
<210> 141
<211> 23
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 141
caatgctgct ttgatacgag tgt 23
<210> 142
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 142
gctgctgtgg cgtcaaact 19
<210> 143
<211> 18
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 143
tcccgggcct tgtacaca 18
<210> 144
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 144
gtgacggtac ctgtagaaga agca 24
<210> 145
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 145
tgaaattgtt cctgctcatg gt 22
<210> 146
<211> 25
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 146
acctgaagtt ttacaatcag caaca 25
<210> 147
<211> 18
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 147
ggccgacaac agcgtcat 18
<210> 148
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 148
catggccaac gaagaaaagc 20
<210> 149
<211> 26
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 149
actttggtgt tgttgaaggt ttaatg 26
<210> 150
<211> 18
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 150
gcatctggcc acctcgat 18
<210> 151
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 151
tgaagatacg catgggacta ga 22
<210> 152
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 152
gacttggatt tgggtgtttg c 21
<210> 153
<211> 26
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 153
agtactttga aaagagagtt aaacag 26

Claims (8)

1.一种呼吸道病原体检测用组合物，其特征在于，包括：
用于三通道荧光PCR检测的引物对组合物，该引物对组合物由序列为SEQ ID No .1～SEQ ID No .24和SEQ ID No .116～SEQ ID No .139所示的引物组成；
用于三通道荧光PCR检测的探针组合物，该探针组合物由序列为SEQ ID No .39～SEQID No .62所示的探针组成；
用于双通道荧光PCR检测的引物对组合物，该引物对组合物由序列为SEQ ID No .25～SEQ ID No .38和SEQ ID No .140～SEQ ID No .153所示的引物组成；
用于双通道荧光PCR检测的探针对组合物，该探针组合物由序列为SEQ ID No .63～SEQ ID No .76所示的探针组成。
2.根据权利要求1所述的一种呼吸道病原体检测用组合物，其特征在于，所述的呼吸道病原体的检测靶序列为SEQ ID No.77～SEQ ID No.114。
3.根据权利要求2所述的一种呼吸道病原体检测用组合物，其特征在于：针对呼吸道病原体的检测靶序列设计的内参引物和探针为：
上游引物：CTTCAGCATGGCGGTGTTT；
下游引物：CCGCGCAGAGCCTTCA；
探针：CAGATTTGGACCTGCGAGCGGG。
4.根据权利要求1-3任一所述的一种呼吸道病原体检测用组合物，其特征在于：
SEQ ID No.39～SEQ ID No.46的探针序列的5’端修饰的荧光基团包括FAM荧光基团；
SEQ ID No.47～SEQ ID No.54的探针序列的5’端修饰的荧光基团包括VIC荧光基团；
SEQ ID No.55～SEQ ID No.62的探针序列的5’端修饰的荧光基团包括CY5荧光基团；
SEQ ID No.63～SEQ ID No.70的探针序列的5’端修饰的荧光基团包括FAM荧光基团；
SEQ ID No.71～SEQ ID No.76的探针序列的5’端修饰的荧光基团包括VIC荧光基团。
5.根据权利要求4所述的一种呼吸道病原体检测用组合物，其特征在于：
针对SEQ ID No .1～SEQ ID No .24和SEQ ID No .116～SEQ ID No .139所示的序列以及SEQ ID No .39～SEQ ID No .62探针组合物设计的内参探针序列上修饰的荧光基团为ROX；
针对SEQ ID No .25～SEQ ID No .38和SEQ ID No .140～SEQ ID No .153所示的序列以及SEQ ID No .63～SEQ ID No .76探针组合物设计的内参探针序列上修饰的荧光基团为VIC。
6.一种呼吸道病原体检测用试剂盒，其特征在于：包括权利要求1-5任一所述的呼吸道病原体检测用组合物。
7.根据权利要求6所述的一种呼吸道病原体检测用试剂盒，其特征在于，该试剂盒具体包括用于检测RNA病原体的Panel A和用于检测DNA病原体Panel B；
所述Panel A包括SEQ ID No .1～SEQ ID No .24和SEQ ID No .116～SEQ ID No.139所示的序列引物对、SEQ ID No .39～SEQ ID No .62所示的探针及内参引物探针、第一核酸扩增反应液及酶混合液；
所述Panel B包括SEQ ID No .25～SEQ ID No .38和SEQ ID No .140～SEQ ID No.153所示的序列引物、SEQ ID No .63～SEQ ID No .76所示的探针及内参引物探针、第二核酸扩增反应液。
8.根据权利要求7所述的一种呼吸道病原体检测用试剂盒，其特征在于：所述酶混合液包括逆转录酶、RNA 酶抑制剂以及Taq酶。
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Citations (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU6203290A (en) * 1989-09-02 1991-03-07 Dade Behring Marburg Gmbh Detection of influenza a virus by polymerase chain reaction (PCR) preceded by reverse transcription of a region of the viral hemagglutinin gene
CA2339035A1 (en) * 1998-09-24 2000-03-30 Innogenetics N.V. Identification of microorganisms causing acute respiratory tract infections (ari)
WO2012112012A2 (ko) * 2011-02-18 2012-08-23 주식회사 엘지생명과학 호흡기 바이러스로 인한 질환의 동시진단용 키트
CN105648115A (zh) * 2016-02-26 2016-06-08 深圳市亿立方生物技术有限公司 用于检测多种呼吸道病原体的pcr引物组、探针组及试剂盒
CN106521035A (zh) * 2016-12-13 2017-03-22 湖南圣湘生物科技有限公司 检测16种呼吸道病原体的基因芯片检测用试剂盒及方法
CN107630098A (zh) * 2017-11-13 2018-01-26 湖南圣湘生物科技有限公司 用于联合检测多种呼吸道细菌的荧光pcr检测体系、试剂盒及检测方法
CN109609692A (zh) * 2018-12-25 2019-04-12 北京卓诚惠生生物科技股份有限公司 用于检测呼吸道感染病原体的核酸试剂、试剂盒、系统及方法
CN110408725A (zh) * 2019-06-20 2019-11-05 中山大学达安基因股份有限公司 用于呼吸道病原体多重检测的试剂盒
CN111321251A (zh) * 2020-04-16 2020-06-23 圣湘生物科技股份有限公司 检测引起呼吸道感染的病原体并分型的组合物、试剂盒、方法及用途
CN111440897A (zh) * 2020-02-28 2020-07-24 江苏硕世生物科技股份有限公司 一种快速检测七种冠状病毒和其他呼吸道病原体的探针及引物组合物
CN112813196A (zh) * 2020-12-31 2021-05-18 广州微远基因科技有限公司 用于检测病原微生物的捕获探针组、方法、试剂盒及应用
CN112899394A (zh) * 2020-11-23 2021-06-04 广州市达瑞生物技术股份有限公司 一种maldi-tof质谱平台检测33种呼吸道病原体的试剂盒

Patent Citations (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU6203290A (en) * 1989-09-02 1991-03-07 Dade Behring Marburg Gmbh Detection of influenza a virus by polymerase chain reaction (PCR) preceded by reverse transcription of a region of the viral hemagglutinin gene
CA2339035A1 (en) * 1998-09-24 2000-03-30 Innogenetics N.V. Identification of microorganisms causing acute respiratory tract infections (ari)
WO2012112012A2 (ko) * 2011-02-18 2012-08-23 주식회사 엘지생명과학 호흡기 바이러스로 인한 질환의 동시진단용 키트
CN105648115A (zh) * 2016-02-26 2016-06-08 深圳市亿立方生物技术有限公司 用于检测多种呼吸道病原体的pcr引物组、探针组及试剂盒
CN106521035A (zh) * 2016-12-13 2017-03-22 湖南圣湘生物科技有限公司 检测16种呼吸道病原体的基因芯片检测用试剂盒及方法
CN107630098A (zh) * 2017-11-13 2018-01-26 湖南圣湘生物科技有限公司 用于联合检测多种呼吸道细菌的荧光pcr检测体系、试剂盒及检测方法
CN109609692A (zh) * 2018-12-25 2019-04-12 北京卓诚惠生生物科技股份有限公司 用于检测呼吸道感染病原体的核酸试剂、试剂盒、系统及方法
CN110408725A (zh) * 2019-06-20 2019-11-05 中山大学达安基因股份有限公司 用于呼吸道病原体多重检测的试剂盒
CN111440897A (zh) * 2020-02-28 2020-07-24 江苏硕世生物科技股份有限公司 一种快速检测七种冠状病毒和其他呼吸道病原体的探针及引物组合物
CN111321251A (zh) * 2020-04-16 2020-06-23 圣湘生物科技股份有限公司 检测引起呼吸道感染的病原体并分型的组合物、试剂盒、方法及用途
CN112899394A (zh) * 2020-11-23 2021-06-04 广州市达瑞生物技术股份有限公司 一种maldi-tof质谱平台检测33种呼吸道病原体的试剂盒
CN112813196A (zh) * 2020-12-31 2021-05-18 广州微远基因科技有限公司 用于检测病原微生物的捕获探针组、方法、试剂盒及应用

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Reversing T Cell Dysfunction to Boost Glioblastoma Immunotherapy by Paroxetine-Mediated GRK2 Inhibition and Blockade of Multiple Checkpoints through Biomimetic Nanoparticles;Tingting Wang等;Adv. Sci;第10卷;第1-15页 *
多种呼吸道病原体的多重实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用;邸红芹;杨永辉;康丽菲;安晓颖;李晓霞;张辉;;河北医科大学学报(11);第68-72页 *

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