CN113207692A - 一种鼠尾草种苗的繁育方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种鼠尾草种苗的繁育方法,包括以下步骤:S1:外植体的选择和处理;S2:不定芽的诱导;S3:增殖培养;S4:生根培养;S5:练苗、移栽;本发明操作简便,诱导率高,可达500%,增殖系数高,可达3.8,生根率可达100%,移栽成活率可达100%,能够克服季节对种苗繁育的限制,获得的再生植株可以有效保留母本的优良性状,是鼠尾草种苗繁育的有效途径,具有广阔的应用前景,有利于推广应用。
Description
技术领域
本发明属于植物组织培养与育种技术领域,尤其涉及一种鼠尾草种苗的繁育方法。
背景技术
鼠尾草是唇形科鼠尾草属一年生或多年生草本或小灌木。鼠尾草具芳香,能够从中提取精油,涂抹肌肤具有美肤的作用;鼠尾草具有一定的药用价值,具有防腐、抗菌、抗炎、安神等作用;鼠尾草具有食用价值,可作为食用调香剂,用于肉类食品炖卤、煲汤或香肠、罐头食品、奶制品的调味剂,其种子亦可使用,具有一定的减肥作用;鼠尾草也可用于园林绿化。随着国内外专家对鼠尾草作用的不断开发,市场对于鼠尾草种苗的数量及质量需求越来越高。种子育苗法、茎芽扦插繁殖法、分株繁殖法等传统繁殖方法繁殖周期长、繁殖系数低、受季节限制,甚至还会造成产量减少、品种退化等问题。
近年来,植物组织培养技术在种苗繁育领域的广泛应用,有效地解决了传统繁殖方法的缺陷。相应的,将植物组织培养技术应用到鼠尾草的种苗繁育中,可有效提高繁殖系数、缩短繁殖周期、不受季节限制、保持原有品种的优良性状。目前,关于鼠尾草组织培养的研究报道较少。因此,急需开发一种鼠尾草种苗的繁育方法,为鼠尾草种苗工厂化繁育提供技术依据。
有鉴于此,特提出本发明。
发明内容
本发明的目的是提供一种鼠尾草种苗的繁育方法,该方法操作简便,诱导率高,可达500%,增殖系数高,可达3.8,生根率可达100%,移栽成活率可达100%,能够克服季节对种苗繁育的限制,获得的再生植株可以有效保留母本的优良性状,是鼠尾草种苗繁育的有效途径,具有广阔的应用前景,有利于推广应用。
为了实现上述目的,本发明提供的一种鼠尾草种苗的繁育方法,包括以下步骤:
S1:外植体的选择和处理
于当年5-6月份选取无病虫害的幼枝,即半硬化枝条作为外植体,去除叶片及叶柄,切分成长度为1-2cm并带有节间的茎段,灭菌剂灭菌,无菌水浸洗;
S2:不定芽的诱导
将经过S1处理的外植体,接种于诱导培养基中,暗培养1周后,移至正常光照下培养3周,诱导出不定芽;诱导培养条件为:温度25±2℃,光照时间12h/d,光照强度1000-1500LX;
S3:增殖培养
将S2中获得的外植体切成1-2cm的茎段,切除多余的叶片,接种至增殖培养基中,培养4周,获得丛生芽;增殖培养条件为:温度25±2℃,光照时间12h/d,光照强度1000-1500LX;
S4:生根培养
将S3中获得的丛生芽切分成单株,接种于生根培养基中,培养3周,获得生根苗;生根培养条件为:温度25±2℃,光照时间12h/d,光照强度1000-1500LX;
S5:练苗、移栽
将S4中的试管苗放在室温中,预处理1周后,取出生根苗,清洗掉培养基,杀菌剂浸泡30min,种于配置好的基质中,自然光下练苗3周,获得鼠尾草再生植株。
优选地,在S2中,所述诱导培养基以MS培养基为基本培养基,添加6-BA浓度为1.0-3.0mg/L、NAA浓度为0.5-2.0mg/L、蔗糖30g/L、琼脂4.5g/L,PH为5.8-6.2。
优选地,在S3中,所述增殖培养基以MS培养基为基本培养基,添加6-BA浓度为0.5-2.0mg/L、NAA浓度为0.1-1.0mg/L、蔗糖30g/L、琼脂4.5g/L,PH为5.8-6.2。
优选地,在S4中,所述生根培养基以1/2MS培养基为基本培养基,添加IAA浓度为0.1-1.0mg/L、AC浓度为1.0g/L、蔗糖30g/L、琼脂4.5g/L,PH为5.8-6.2。
优选地,在S1中,所述灭菌剂分别为75%酒精和5%新洁尔灭,灭菌时间分别为30s和15min。
优选地,在S2中,将经过S1处理的外植体切除部分伤口垂直接种于诱导培养基中,分清植物学上下端,下端插进诱导培养基中,上端暴露在诱导培养基上。
优选地,在S3中,进行切段的外植体的株高为3-5cm。
优选地,在S4中,进行切分的丛生芽株高为4cm以上。
优选地,在S5中,预处理过程为:打开瓶盖倒入蒸馏水再将瓶盖盖在瓶口上,不拧紧,2-3天后拿掉瓶盖;放置在温室中弱光下2-3天,20-25℃保持瓶内有充足的蒸馏水;配置好的基质中各组分体积比为泥炭∶珍珠岩∶蛭石=6∶3∶1。
本发明提供的一种鼠尾草种苗的繁育方法,具有如下有益效果。
1.本发明以鼠尾草当年生的幼茎作为外植体材料,诱导产生不定芽,4周后可以获得具有母本优良性状的再生植株,克服了以往通过诱导愈伤再分化植株时,后代出现变异等问题。
2.本发明在外植体的培育过程中,在外植体生长的不同阶段采用不同细胞分裂素6-BA和生长素NAA、IAA等激素浓度的配比,有利于外植体的生长发育,能够保障鼠尾草试管苗的质量。
3.利用本发明的练苗、移栽技术,对试管苗进行驯化,使其完全适应外部环境,移栽成活率可达100%,小苗质量好。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明做进一步说明,以助于理解本发明的内容。
本发明提供的一种鼠尾草种苗的繁育方法,包括以下步骤:
S1:外植体的选择和处理
于当年5-6月份选取无病虫害的幼枝(半硬化枝条)作为外植体,去除叶片及叶柄,切分成长度为1-2cm并带有节间的茎段,用洗洁精浸洗15min,流水冲洗2h,待用。在超净工作台上,先用75%酒精灭菌30s,再用5%新洁尔灭灭菌15min,无菌水冲洗5遍,然后用无菌滤纸吸干外植体表面的水分,外植体两端各切去2mm,待用。
S2:不定芽的诱导
将经过S1处理的外植体垂直接种于诱导培养基中,分清植物学上下端,下端插进诱导培养基中,上端暴露在诱导培养基上,暗培养1周后,移至正常光照下培养3周,诱导出不定芽,诱导率可达500%。
诱导培养条件为:温度25±2℃,光照时间12h/d,光照强度1000-1500LX。
诱导培养基以MS培养基为基本培养基,添加6-BA浓度为1.0-3.0mg/L、NAA浓度为0.5-2.0mg/L、蔗糖30g/L、琼脂4.5g/L,PH为5.8-6.2。优选地,诱导培养基为:MS+6-BA2.0mg/L+NAA 0.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂4.5/L。
S3:增殖培养
选取S2中分化良好、生长情况基本一致(株高3-5cm)的试管苗,切成1-2cm的茎段,切除多余的叶片,每段带有至少一个节间及叶片,垂直接种至增殖培养基中,培养4周,获得丛生芽;增殖系数为3.8,不定芽生长健壮,叶片浓绿色。
增殖培养条件为:温度25±2℃,光照时间12h/d,光照强度1000-1500LX。
增殖培养基以MS培养基为基本培养基,添加6-BA浓度为0.5-2.0mg/L、NAA浓度为0.1-1.0mg/L、蔗糖30g/L、琼脂4.5g/L,PH为5.8-6.2。优选地,增殖培养基为:MS+6-BA1.0mg/L+NAA 0.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂4.5g/L。
S4:生根培养
选取S3中分化良好、生长均匀(株高≥4cm)的丛生芽切分成单株,垂直接种于生根培养基中,培养3周,获得生根苗,生根率可达100%,根系乳白色,富有弹性。
生根培养条件为:温度25±2℃,光照时间12h/d,光照强度1000-1500LX。
生根培养基以1/2MS培养基为基本培养基,添加IAA浓度为0.1-1.0mg/L、AC浓度为1.0g/L、蔗糖30g/L、琼脂4.5g/L,PH为5.8-6.2。优选地,生根培养基为:1/2MS+IAA 0.5mg/L+AC1.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂4.5g/L。
S5:练苗、移栽
预处理,将S4中的试管苗放在室温中,打开瓶盖倒入蒸馏水再将瓶盖盖在瓶口上,不拧紧,2-3天后拿掉瓶盖;放置在温室中弱光下2-3天,20-25℃保持瓶内有充足的蒸馏水;预处理1周后,取出生根苗,清洗掉培养基,杀菌剂浸泡30分钟,种于配置好的基质中,自然光下练苗3周,获得鼠尾草穴盘苗,小苗生长健壮,叶片颜色浓绿,成活率100%。上述基质中各组分体积比为泥炭∶珍珠岩∶蛭石=6∶3∶1。
本发明操作简便,诱导率高,可达500%,增殖系数高,可达3.8,生根率可达100%,移栽成活率可达100%,能够克服季节对种苗繁育的限制,获得的再生植株可以有效保留母本的优良性状,是鼠尾草种苗繁育的有效途径,具有广阔的应用前景,有利于推广应用。
本发明以鼠尾草当年生的幼茎作为外植体材料,诱导产生不定芽,4周后可以获得具有母本优良性状的再生植株,克服了以往通过诱导愈伤再分化植株时,后代出现变异等问题。本发明在外植体的培育过程中,在外植体生长的不同阶段采用不同细胞分裂素6-BA和生长素NAA、IAA等激素浓度的配比,有利于外植体的生长发育,能够保障鼠尾草试管苗的质量。利用本发明的练苗、移栽技术,对试管苗进行驯化,使其完全适应外部环境,移栽成活率可达100%,小苗质量好。本发明利用鼠尾草的幼茎作为外植体诱导不定芽,建立一套稳定的鼠尾草植株再生体系,获得的组培苗具有母本优良性状,一年四季皆可进行种苗生产繁育工作,克服鼠尾草因分根、扦插繁殖造成的品种退化,繁育受季节限制等的弊端,实现鼠尾草组培苗的再生并有效进行大量繁育。
本文中应用了具体个例对发明构思进行了详细阐述,以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的核心思想。应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离该发明构思的前提下,所做的任何显而易见的修改、等同替换或其他改进,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (9)
1.一种鼠尾草种苗的繁育方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1:外植体的选择和处理
于当年5-6月份选取无病虫害的幼枝,即半硬化枝条作为外植体,去除叶片及叶柄,切分成长度为1-2cm并带有节间的茎段,灭菌剂灭菌,无菌水浸洗;
S2:不定芽的诱导
将经过S1处理的外植体,接种于诱导培养基中,暗培养1周后,移至正常光照下培养3周,诱导出不定芽;诱导培养条件为:温度25±2℃,光照时间12h/d,光照强度1000-1500LX;
S3:增殖培养
将S2中获得的外植体切成1-2cm的茎段,切除多余的叶片,接种至增殖培养基中,培养4周,获得丛生芽;增殖培养条件为:温度25±2℃,光照时间12h/d,光照强度1000-1500LX;
S4:生根培养
将S3中获得的丛生芽切分成单株,接种于生根培养基中,培养3周,获得生根苗;生根培养条件为:温度25±2℃,光照时间12h/d,光照强度1000-1500LX;
S5:练苗、移栽
将S4中的试管苗放在室温中,预处理1周后,取出生根苗,清洗掉培养基,杀菌剂浸泡30min,种于配置好的基质中,自然光下练苗3周,获得鼠尾草再生植株。
2.根据权利要求1所述的一种鼠尾草种苗繁育的方法,其特征在于,在S2中,所述诱导培养基以MS培养基为基本培养基,添加6-BA浓度为1.0-3.0mg/L、NAA浓度为0.5-2.0mg/L、蔗糖30g/L、琼脂4.5g/L,PH为5.8-6.2。
3.根据权利要求2所述的一种鼠尾草种苗繁育的方法,其特征在于,在S3中,所述增殖培养基以MS培养基为基本培养基,添加6-BA浓度为0.5-2.0mg/L、NAA浓度为0.1-1.0mg/L、蔗糖30g/L、琼脂4.5g/L,PH为5.8-6.2。
4.根据权利要求3所述的一种鼠尾草种苗繁育的方法,其特征在于,在S4中,所述生根培养基以1/2MS培养基为基本培养基,添加IAA浓度为0.1-1.0mg/L、AC浓度为1.0g/L、蔗糖30g/L、琼脂4.5g/L,PH为5.8-6.2。
5.根据权利要求4所述的一种鼠尾草种苗繁育的方法,其特征在于,在S1中,所述灭菌剂分别为75%酒精和5%新洁尔灭,灭菌时间分别为30s和15min。
6.根据权利要求5所述的一种鼠尾草种苗繁育的方法,其特征在于,在S2中,将经过S1处理的外植体切除部分伤口垂直接种于诱导培养基中,分清植物学上下端,下端插进诱导培养基中,上端暴露在诱导培养基上。
7.根据权利要求6所述的一种鼠尾草种苗繁育的方法,其特征在于,在S3中,进行切段的外植体的株高为3-5cm。
8.根据权利要求7所述的一种鼠尾草种苗繁育的方法,其特征在于,在S4中,进行切分的丛生芽株高为4cm以上。
9.根据权利要求8所述的一种鼠尾草种苗繁育的方法,其特征在于,在S5中,预处理过程为:打开瓶盖倒入蒸馏水再将瓶盖盖在瓶口上,不拧紧,2-3天后拿掉瓶盖;放置在温室中弱光下2-3天,20-25℃保持瓶内有充足的蒸馏水;配置好的基质中各组分体积比为泥炭∶珍珠岩∶蛭石=6∶3∶1。
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