CN112877257A - 一株地衣芽孢杆菌及其应用 - Google Patents
一株地衣芽孢杆菌及其应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN112877257A CN112877257A CN202110289676.7A CN202110289676A CN112877257A CN 112877257 A CN112877257 A CN 112877257A CN 202110289676 A CN202110289676 A CN 202110289676A CN 112877257 A CN112877257 A CN 112877257A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- bacillus licheniformis
- chinese herbal
- herbal medicine
- fermentation
- kmust
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 241000194108 Bacillus licheniformis Species 0.000 title claims abstract description 40
- 241000411851 herbal medicine Species 0.000 claims abstract description 46
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims abstract description 29
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims abstract description 29
- 238000009629 microbiological culture Methods 0.000 claims abstract description 3
- 238000004321 preservation Methods 0.000 claims abstract description 3
- 239000003674 animal food additive Substances 0.000 claims description 9
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 abstract description 18
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 abstract description 14
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 abstract description 14
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 abstract description 11
- 230000012010 growth Effects 0.000 abstract description 11
- 238000011161 development Methods 0.000 abstract description 7
- 244000144972 livestock Species 0.000 abstract description 6
- 244000144977 poultry Species 0.000 abstract description 6
- 206010059866 Drug resistance Diseases 0.000 abstract description 4
- 239000003640 drug residue Substances 0.000 abstract description 4
- 235000013305 food Nutrition 0.000 abstract description 3
- 230000036737 immune function Effects 0.000 abstract description 3
- 238000003912 environmental pollution Methods 0.000 abstract description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 12
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 11
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 9
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 8
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 8
- 239000000047 product Substances 0.000 description 8
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 8
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 7
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 description 7
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 description 7
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 6
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 6
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 6
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 6
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 241000205585 Aquilegia canadensis Species 0.000 description 3
- 241000037740 Coptis chinensis Species 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 3
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 3
- 241000206469 Pulsatilla Species 0.000 description 3
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 3
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 3
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 230000001937 non-anti-biotic effect Effects 0.000 description 3
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 3
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 3
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 3
- 108020004465 16S ribosomal RNA Proteins 0.000 description 2
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 description 2
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 239000012880 LB liquid culture medium Substances 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 230000000857 drug effect Effects 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 2
- 230000007413 intestinal health Effects 0.000 description 2
- 230000006799 invasive growth in response to glucose limitation Effects 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 238000000034 method Methods 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 238000002552 multiple reaction monitoring Methods 0.000 description 2
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 description 2
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 description 2
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 2
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 239000004382 Amylase Substances 0.000 description 1
- 102000013142 Amylases Human genes 0.000 description 1
- 108010065511 Amylases Proteins 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 206010011409 Cross infection Diseases 0.000 description 1
- 206010011732 Cyst Diseases 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 238000007400 DNA extraction Methods 0.000 description 1
- RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen sulfide Chemical compound S RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000035240 Disease Resistance Diseases 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 229920002097 Lichenin Polymers 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 1
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010029803 Nosocomial infection Diseases 0.000 description 1
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 1
- 229920002230 Pectic acid Polymers 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 208000027954 Poultry disease Diseases 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 1
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- 229940124532 absorption promoter Drugs 0.000 description 1
- -1 absorption promoters Substances 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 1
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 238000000246 agarose gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000019418 amylase Nutrition 0.000 description 1
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 235000019728 animal nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 238000000137 annealing Methods 0.000 description 1
- 230000001775 anti-pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000006030 antibiotic growth promoter Substances 0.000 description 1
- 230000036528 appetite Effects 0.000 description 1
- 235000019789 appetite Nutrition 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 238000010876 biochemical test Methods 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000000711 cancerogenic effect Effects 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 231100000315 carcinogenic Toxicity 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 238000013329 compounding Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 208000031513 cyst Diseases 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 229940079919 digestives enzyme preparation Drugs 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000003113 dilution method Methods 0.000 description 1
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 235000008216 herbs Nutrition 0.000 description 1
- 229910000037 hydrogen sulfide Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000013095 identification testing Methods 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- 238000005304 joining Methods 0.000 description 1
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 1
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 1
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 1
- 235000019626 lipase activity Nutrition 0.000 description 1
- WRUGWIBCXHJTDG-UHFFFAOYSA-L magnesium sulfate heptahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.O.[Mg+2].[O-]S([O-])(=O)=O WRUGWIBCXHJTDG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940061634 magnesium sulfate heptahydrate Drugs 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 238000011177 media preparation Methods 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004899 motility Effects 0.000 description 1
- 231100000219 mutagenic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003505 mutagenic effect Effects 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 1
- 239000001814 pectin Substances 0.000 description 1
- 229920001277 pectin Polymers 0.000 description 1
- 235000010987 pectin Nutrition 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 239000010318 polygalacturonic acid Substances 0.000 description 1
- 238000012257 pre-denaturation Methods 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 235000019419 proteases Nutrition 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000007480 sanger sequencing Methods 0.000 description 1
- 238000007873 sieving Methods 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 230000019086 sulfide ion homeostasis Effects 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 231100000378 teratogenic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003390 teratogenic effect Effects 0.000 description 1
- 229940126680 traditional chinese medicines Drugs 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
- 229920001221 xylan Polymers 0.000 description 1
- 150000004823 xylans Chemical class 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K10/00—Animal feeding-stuffs
- A23K10/10—Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes
- A23K10/12—Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes by fermentation of natural products, e.g. of vegetable material, animal waste material or biomass
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K10/00—Animal feeding-stuffs
- A23K10/30—Animal feeding-stuffs from material of plant origin, e.g. roots, seeds or hay; from material of fungal origin, e.g. mushrooms
Abstract
本发明公开了一株地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）Kmust‑Li03，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCC No.21267；本发明将地衣芽孢杆菌Kmust‑Li03应用在发酵中草药提高中草药活性成分中，旨在代替抗生素，减少抗生素过度使用造成的药物残留、耐药性、环境污染及食品安全等一系列问题，提升动物生长性能，改善动物的免疫功能，为畜禽水产动物的无抗养殖提供新方向，以此推动畜牧业绿色、生态发展。
Description
技术领域
本发明涉及一株地衣芽孢杆菌及其在无抗养殖及无抗饲料生产中作为添加剂的应用，属于中草药发酵技术领域。
背景技术
抗生素是一类具有抗病原体或其它活性的化学物质，被广泛用于临床中疾病的预防和治疗。随着饲料工业和养殖业的快速发展，抗生素被广泛用于饲料添加剂和疾病防治药物。抗生素的应用提高了家禽的生长速度、饲料转化效率和抗病性能，同时还能显著提高家禽的增重。但近年来，抗生素的不合理使用，出现耐药性、药物残留和致病菌交叉感染等负面作用，更为严重的是对人体的三致（致癌、致畸、致突变）作用，畜牧业中抗生素的滥用对人类食品安全构成严重威胁。许多欧洲国家已禁止在饲料中添加抗生素生长促进剂。我国规定自2020年7月1日起，饲料生产企业停止生产含有促生长类药物饲料添加剂（中药类除外）的商品饲料。随着全球各国出台政策来限制饲用抗生素的添加，开发绿色、安全、无公害的无抗饲料是畜禽养殖发展的必然趋势。
目前，抗生素的替代品主要包括植物活性物质、益生菌、生物酶制剂和疫苗等，中草药以其天然性、毒副作用小、无抗药性、无药物残留等特点，同时具有改善机体代谢、促进生长发育、提高免疫功能及防治畜禽疾病等多重作用脱颖而出，成为代替抗生素的饲料添加剂首选。益生菌能够加快动物对营养物质的吸收、改善肠道健康、提升生长性能、增强免疫力。利用益生菌发酵中草药一方面可提高中草药活性成分含量，降低发酵产物毒性。另一方面，中草药可以和益生菌协同作用，发挥中草药最佳的药效和益生菌的益生作用。发酵中草药具有提高中草药有效成分提取率，增强药效，降低毒性，减少毒副作用，产生新活性等优势，已被视为抗生素替代品中最具成本效益的候选药物之一。随着社会对养殖业环保问题的持续关注，人们对畜牧产品品质的愈加重视，微生物发酵饲料在养殖业中将获得更加广泛的应用，发酵中草药作为饲料添加剂潜力巨大。
发明内容
本发明提供了一株地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）Kmust-Li03，其于2020年11月30日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.21267，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所。
本发明另一目的是将上述菌种应用在发酵中草药中，以提高中草药中的活性成分；发酵产物用于制备无抗饲料添加剂，即采用本发明地衣芽孢杆菌发酵中草药可以提升中草药活性成分含量，发酵后产物可以用于无抗养殖或无抗饲料的生产中。
本发明将上述菌种发酵中草药后的发酵产物作为有效活性成分，或与其他物质复配制备无抗饲料添加剂；还可以加入一种或多种具有病害防治饲料可接受的辅料，所述辅料包括药学领域常规的填充剂、稀释剂、粘合剂、赋形剂、吸收促进剂、表面活性剂和稳定剂等；或者饲料制备中常用辅料。
本发明的优点在于：
1、地衣芽孢杆菌可作为安全、高效的饲料添加剂。据研究显示，地衣芽孢杆菌具有较强的蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性，同时还能降解如木聚糖、地衣聚糖、果胶、羧甲基纤维素、多聚半乳糖醛酸以及其它一些结构复杂的植物性碳水化合物，同时可以产生多种氨基酸增强动物营养，发挥其具有的提高畜禽生长性能、改善肠道健康、促进宿主营养消化吸收、增强免疫能力作用；
2、中草药的活性成分促进了动物的免疫活性及健康。本发明所选用的四种中草药均具有提高增重、提升生长性能的作用之外， 白头翁添加到饲料中可以提高免疫性能，提升饲料转化率；苦参用于饲料添加具有防病、清热、健胃，增强畜禽食欲的功效；黄连具有调节肠道微生物平衡和改善肉品质的功效；金银花能增强动物机体免疫力和抵抗力，提高产品品质；
3、中草药与地衣芽孢杆菌协同作用，一方面发挥益生菌的益生功效，另一方面利用益生菌发酵来提升中草药活性成分含量，使二者的功效发挥到极致；
4、采用地衣芽孢杆菌发酵中草药替代抗生素，减少抗生素过度使用造成的药物残留、耐药性、环境污染及食品安全等一系列问题，提升动物生长性能，改善动物的免疫功能，减少抗生素的使用量，为无抗养殖或无抗饲料的发展提供新方向，推动了畜牧业绿色、生态发展。
附图说明
图1为地衣芽孢杆菌菌落形态图；
图2 为地衣芽孢杆菌镜检图；
图3为地衣芽孢杆菌生长曲线图；
图4为未添加中草药发酵的LC-MS峰图
图5为添加5%中草药发酵的LC-MS峰图
图6为添加7.5%中草药发酵的LC-MS峰图
图7为添加10%中草药发酵的LC-MS峰图。
具体实施方式
下面通过附图和实施例对本发明进一步说明，但本发明保护范围不局限于所述内容，本实施例中方法如无特殊说明的均按常规方法操作，所用试剂如无特殊说明均为常规市售试剂或按常规方法配置的试剂，培养基均为市售产品，按使用说明使用。
实施例1：地衣芽孢杆菌的分离及鉴定
1、菌株的分离和纯化
将猪的肠道匀浆用无菌生理盐水采用10倍稀释法进行稀释后，取10-3～10-6稀释范围的稀释液涂布于LB固体平板培养基上；其中LB固体培养基成分及质量百分比为：蛋白胨1%、氯化钠1%、酵母浸出物0.5%、琼脂粉1.8%，121℃灭菌20min；37℃恒温培养12h；挑取典型单菌落，反复划线分离至获得纯菌株，将其编号为Kmust-Li03，菌落为扁平、杆状、边缘不整齐、白色、表面粗糙皱褶，近中生的椭圆状芽孢，孢囊稍膨大，菌落形态及显微形态见图1、2。
2、地衣芽孢杆菌生长曲线测定
将菌株接种至LB液体培养基中，在37℃、150rpm的恒温摇床中振荡培养24h，在培养过程中，从0h开始，每隔2h取一次培养液，在600nm波长下测定菌液浓度（OD值），以未接入菌液的培养液作为对照来校正分光光度计的零点，来消除仪器所引入的误差，根据菌液浓度绘制地衣芽孢杆菌生长曲线图，该菌对数生长期为14h，生长曲线图见图3；
3、地衣芽孢杆菌生理生化鉴定
按芽孢杆菌种的生理生化鉴定试验要求，分别进行运动性、接触酶反应、耐盐(7%的NaCl)、耐酸(pH=5.7)、耐高温（40℃、50℃、55℃）、柠檬酸盐利用试验、甘露醇发酵试验、MR试验、VP试验、淀粉水解试验、明胶液化试验、硝酸盐还原试验、产硫化氢试验、酪素水解试验、酪氨酸水解试验、卵磷脂酶测定试验及过氧化氢酶试验、糖发酵产酸(葡萄糖、蔗糖、木糖)等生理生化实验，对照《伯杰氏细菌鉴定手册（第八版）》中的地衣芽孢杆菌模式菌株生理生化指标，可初步鉴定该菌为芽孢杆菌属地衣芽孢杆菌，实验结果见表1；
表1地衣芽孢杆菌生理生化实验结果
4、16S rRNA序列分析
对最终筛选出的菌株进行16sDNA分子生物学鉴定，用细菌基因组DNA提取试剂盒（天根生化科技有限公司 北京）提取菌株的总DNA，采用通用引物27F（5′ -AGAGTTTGATCCTGGCTCAG- 3′）和1492R（5′ -GGTTACCTTGTTAGGACTT- 3′ ）扩增其16sDNA片段；PCR的反应程序如下：94℃预变性4min；94℃ 30s ，50℃退火1min，72℃延伸2min，30个循环；72℃延伸10min；4℃保温；PCR产物大小经过琼脂糖凝胶电泳检测验证后，将目标条带进行纯化，交由上海生工生物工程股份有限公司进行Sanger测序，得到测序序列在美国国立生物技术信息中心（National Center for Biotechnology Informmion）网站GenBank数据库（http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi）中进行Blast比对，通过得分最高的已知种类确定种名；
经PCR扩增得到16S rRNA片段，经测序为1058bp，序列见SEQ ID NO:1所示，应用BLAST比对，MEGA构建Neighbor-Joining树，菌株与已知的地衣芽孢杆菌菌聚集在一个分支上，相似性为99.72%，综合形态学观察和分子生物学检测测序结果可知，从健康猪肠道分离的菌株为地衣芽孢杆菌，并命名为Kmust-Li03。
实施例2：采用地衣芽孢杆菌Kmust-Li03发酵中草药
1、中草药药粉制备
将干燥无霉变的白头翁、苦参、黄连、金银花干燥后，用粉碎机粉碎过100目筛，再按质量百分比白头翁40%、苦参20%、黄连20%、金银花20%将4种药粉混合均匀制得中草药药粉；
2、种子液制备
挑取地衣芽孢杆菌Kmust-Li03单菌落于LB液体培养基中，摇床培养至对数生长期，液体发酵培养基成分及质量百分比为：蛋白胨1%、氯化钠1%、酵母浸粉0.5%，121℃灭菌20min，培养温度为37℃，培养时间14h，转速150r/min，制得地衣芽孢杆菌Kmust-Li03种子液备用；
3、发酵培养基配置
先将培养基加入发酵罐中，培养基成分及质量百分比为蛋白胨1%、氯化钠1%、酵母浸粉0.5%、葡萄糖1%、七水硫酸镁1%，pH值自然，然后分别按5%、7.5%、10%的比例加入步骤1制得的中草药药粉，发酵罐的装液量体积为5L，中草药药粉与培养基混匀后121℃灭菌20min，待培养基冷却后即得发酵培养基；
4、发酵
按照4%的接种量将步骤2的地衣芽孢杆菌Kmust-Li03种子液接种至步骤3所得的发酵培养基中，同时用纯水代替种子液，设置未发酵对照组，中草药药粉5%、7.5%、10%为实验组，pH自然；在37℃下发酵 48h，转速300r/min，无菌空气通入量为2.0vvm；发酵结束后，发酵液经过滤去掉中草药渣和沉淀，即得地衣芽孢杆菌Kmust-Li03发酵中草药的发酵液。
5、液相-质谱联用检测发酵液活性成分
5.1样品制备
取步骤4中草药发酵液6000rpm/min离心10min后取上清液，使用2.2μm的滤膜过滤两次后即得样品液；利用液质-联用技术，根据已知中草药中的主要活性成分的分子质量见表2，检测发酵液中相应的活性成分丰度，以此来检测发酵对于中草药活性成分的影响；
表2中草药活性成分相对分子质量
5.2液相-质谱联用条件
5.2.1取液相色谱柱并设定质谱条件、参数
色谱柱选用：Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18，2 .1mm×150mm×5μm，设定色谱柱温度为35℃，保留时间:1.5min，设定流动相及流动相梯度，水相A：水；有机相B：90%甲醇；
设定质谱条件：离子源为ESI离子源(电喷雾离子源)，离子源温度为350℃，雾化器工作压力为35psi，干燥气流速为8L/min；设定质谱定性定量检测模式：正离子模式、多反应监测模式(MRM)，设定多反应监测模式参数；
使用地衣芽孢杆菌Kmust-Li03进行发酵中草药后，利用液相-质谱联用技术，检测中草药中主要活性成分丰度，以检测器检测到的离子信号强度（或离子丰度）为纵坐标，离子质荷比为横坐标作出质谱图，发酵后活性成分丰度结果见图5-7所示，结果如表3所示，在检测到的中草药活性成分中，溶出率最高的中草药活性成分为黄连中的表小檗碱，溶出率最低的中草药活性成分为金银花中的绿原酸；未发酵组中草药（图4）与发酵组中草药活性成分丰度存在较大差异，未发酵组中草药活性成分丰度最低，发酵组中7.5%发酵后中草药活性成分丰度相对较高，发酵效果最好；
表3 LC-MS分析发酵中草药中活性成分丰度
序列表
<110> 昆明理工大学
<120> 一株地衣芽孢杆菌及其应用
<160> 3
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 1058
<212> DNA
<213> 猪(Sus)
<400> 1
cttctggtcc cttcggcggc tggctccaaa ggttacctca ccgacttcgg gtgttacaaa 60
ctctcgtggt gtgacgggcg gtgtgtacaa ggcccgggaa cgtattcacc gcggcatgct 120
gatccgcgat tactagcgat tccagcttca cgcagtcgag ttgcagactg cgatccgaac 180
tgagaacaga tttgtgggat tggcttagcc tcgcggcttc gctgcccttt gttctgccca 240
ttgtagcacg tgtgtagccc aggtcataag gggcatgatg atttgacgtc atccccacct 300
tcctccggtt tgtcaccggc agtcacctta gagtgcccaa ctgaatgctg gcaactaaga 360
tcaagggttg cgctcgttgc gggacttaac ccaacatctc acgacacgag ctgacgacaa 420
ccatgcacca cctgtcactc tgcccccgaa ggggaagccc tatctctagg gttgtcagag 480
gatgtcaaga cctggtaagg ttcttcgcgt tgcttcgaat taaaccacat gctccaccgc 540
ttgtgcgggc ccccgtcaat tcctttgagt ttcagtcttg cgaccgtact ccccaggcgg 600
agtgcttaat gcgtttgctg cagcactaaa gggcggaaac cctctaacac ttagcactca 660
tcgtttacgg cgtggactac cagggtatct aatcctgttc gctccccacg ctttcgcgcc 720
tcagcgtcag ttacagacca gagagtcgcc ttcgccactg gtgttcctcc acatctctac 780
gcatttcacc gctacacgtg gaattccact ctcctcttct gcactcaagt tccccagttt 840
ccaatgaccc tccccggttg agccgggggc tttcacatca gacttaagaa accgcctgcg 900
cgcgctttac gcccaataat tccggacacg cttgccacct acgtattacc gcggctgctg 960
gcacgtagtt agccgtggct ttctggttag gtaccgtcaa ggtaccgccc tattcgaacg 1020
gtacttgttc ttccctaaca acagagttta cgatccga 1058
<210> 2
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial)
<400> 2
agagtttgat cctggctcag 20
<210> 3
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial)
<400> 3
ggttaccttg ttaggactt 19
Claims (3)
1.一种地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）Kmust-Li03，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCC No.21267。
2.权利要求1所述的地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）Kmust-Li03在发酵中草药提高中草药活性成分中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：发酵产物在作为无抗饲料添加剂中的应用。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110289676.7A CN112877257B (zh) | 2021-03-18 | 2021-03-18 | 一株地衣芽孢杆菌及其应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110289676.7A CN112877257B (zh) | 2021-03-18 | 2021-03-18 | 一株地衣芽孢杆菌及其应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN112877257A true CN112877257A (zh) | 2021-06-01 |
| CN112877257B CN112877257B (zh) | 2023-04-07 |
Family
ID=76041148
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202110289676.7A Active CN112877257B (zh) | 2021-03-18 | 2021-03-18 | 一株地衣芽孢杆菌及其应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN112877257B (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN112375712A (zh) * | 2020-11-25 | 2021-02-19 | 昆明理工大学 | 一株乳酸乳球菌及其应用 |
| CN113616715A (zh) * | 2021-08-31 | 2021-11-09 | 昆明理工大学 | 治疗仔猪腹泻及改善其肠道菌群的发酵中药口服液 |
Citations (33)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101357229A (zh) * | 2007-08-01 | 2009-02-04 | 方希修 | 能防治猪腹泻的免疫球蛋白复合剂的生产技术 |
| CN101638627A (zh) * | 2009-09-10 | 2010-02-03 | 惠飞 | 一株枯草芽孢杆菌及其在生物饲料添加剂中的应用 |
| WO2011126295A2 (ko) * | 2010-04-06 | 2011-10-13 | (주)아모레퍼시픽 | 약용 잎을 활용한 쌈 발효법 및 이를 활용한 피부 외용제 조성물 |
| WO2012064158A2 (ko) * | 2010-11-12 | 2012-05-18 | 동국대학교 산학협력단 | 발효된 한약재를 이용한 정장용 조성물 |
| CN102876614A (zh) * | 2012-10-16 | 2013-01-16 | 北京龙科方舟生物工程技术有限公司 | 一株地衣芽孢杆菌及其应用 |
| CN104206734A (zh) * | 2014-09-03 | 2014-12-17 | 湛秀河 | 中草药无抗生物饲料添加剂 |
| CN104293690A (zh) * | 2014-05-27 | 2015-01-21 | 河南牧业经济学院 | 一种中药微生态组合物、制剂及其制备方法 |
| CN104498385A (zh) * | 2014-11-17 | 2015-04-08 | 浙江大学 | 高产抗菌肽地衣芽孢杆菌及其应用 |
| CN104560816A (zh) * | 2014-12-16 | 2015-04-29 | 大地绿源环保科技(北京)有限公司 | 一种具有生物质水解酶活性的地衣芽孢杆菌及其应用 |
| CN105219682A (zh) * | 2015-11-03 | 2016-01-06 | 山东省农业科学院生物技术研究中心 | 一种替代抗生素饲料添加剂的地衣芽孢杆菌及其应用 |
| CN105661012A (zh) * | 2016-03-09 | 2016-06-15 | 广东海洋大学 | 一种中草药的高温发酵方法 |
| CN105695358A (zh) * | 2016-03-18 | 2016-06-22 | 昆明理工大学 | 一株短短芽孢杆菌菌株及其应用 |
| CN105707473A (zh) * | 2016-03-09 | 2016-06-29 | 广东海洋大学 | 一种利用水产蛋白和中草药高温发酵制备绿色饲用抗菌促生长剂的方法 |
| CN106212890A (zh) * | 2016-08-20 | 2016-12-14 | 裕龙农牧科技股份有限公司 | 一种猪用绿色免疫增强剂 |
| CN106721668A (zh) * | 2016-12-31 | 2017-05-31 | 新昌县派特普科技有限公司 | 水产动物用抗病促生长剂及其制备方法 |
| CN107125195A (zh) * | 2017-03-23 | 2017-09-05 | 柳州市讯丰养殖有限公司 | 一种富硒鸡果园散养方法 |
| CN108066392A (zh) * | 2017-12-27 | 2018-05-25 | 郑州神草生物技术有限公司 | 一种可发挥中药与有益菌双重功效的微生态制剂 |
| CN109260355A (zh) * | 2018-11-23 | 2019-01-25 | 上海松皓生物科技有限公司 | 一种治疗和改善银屑病的组合物和制备方法与应用 |
| CN109601699A (zh) * | 2018-12-28 | 2019-04-12 | 沈阳博善英胜生物技术有限公司 | 一种功能性微生物发酵饲料及生产方法和应用 |
| CN109943502A (zh) * | 2019-03-04 | 2019-06-28 | 青岛海洋生物医药研究院 | 益生菌、发酵剂及在中草药制剂中的应用 |
| CN110419643A (zh) * | 2019-09-04 | 2019-11-08 | 刘泳君 | 发酵中药制剂及其制备方法与应用 |
| CN110559415A (zh) * | 2019-09-24 | 2019-12-13 | 武汉市农业科学院 | 一种提高雏禽育成率的天然植物复方制剂及其制备方法和应用 |
| CN111363701A (zh) * | 2020-03-18 | 2020-07-03 | 泸州正泰生物工程有限公司 | 一株耐热地衣芽孢杆菌及其应用 |
| CN111363700A (zh) * | 2020-03-18 | 2020-07-03 | 泸州正泰生物工程有限公司 | 一株地衣芽孢杆菌及其应用 |
| CN112136965A (zh) * | 2020-09-08 | 2020-12-29 | 河南惠通天下生物工程有限公司 | 一种增免促生长型发酵中草药饲料添加剂及其制备方法 |
| CN112375712A (zh) * | 2020-11-25 | 2021-02-19 | 昆明理工大学 | 一株乳酸乳球菌及其应用 |
| CN112538442A (zh) * | 2020-11-10 | 2021-03-23 | 集美大学 | 一株地衣芽孢杆菌及其应用 |
| KR20210052342A (ko) * | 2019-10-29 | 2021-05-10 | 선 바이오 (주) | 다기능 어류용 생균제 및 이의 용도 |
| CN113558143A (zh) * | 2021-07-19 | 2021-10-29 | 西安海斯夫生物科技有限公司 | 一种替抗促生长饲料添加剂及其制备方法与它的用途 |
| CN113577161A (zh) * | 2021-08-27 | 2021-11-02 | 河南牧翔动物药业有限公司 | 一种分段式发酵制备畜禽抗病毒中草药制剂的方法 |
| CN113616715A (zh) * | 2021-08-31 | 2021-11-09 | 昆明理工大学 | 治疗仔猪腹泻及改善其肠道菌群的发酵中药口服液 |
| CN114601038A (zh) * | 2022-03-29 | 2022-06-10 | 巴林左旗城域饲料有限公司 | 一种畜禽用液态预混合添加剂及其制备方法 |
| CN115089672A (zh) * | 2022-06-28 | 2022-09-23 | 焦作市佰役安生物工程有限公司 | 一种饲用发酵中药口服液的制备方法 |
-
2021
- 2021-03-18 CN CN202110289676.7A patent/CN112877257B/zh active Active
Patent Citations (33)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101357229A (zh) * | 2007-08-01 | 2009-02-04 | 方希修 | 能防治猪腹泻的免疫球蛋白复合剂的生产技术 |
| CN101638627A (zh) * | 2009-09-10 | 2010-02-03 | 惠飞 | 一株枯草芽孢杆菌及其在生物饲料添加剂中的应用 |
| WO2011126295A2 (ko) * | 2010-04-06 | 2011-10-13 | (주)아모레퍼시픽 | 약용 잎을 활용한 쌈 발효법 및 이를 활용한 피부 외용제 조성물 |
| WO2012064158A2 (ko) * | 2010-11-12 | 2012-05-18 | 동국대학교 산학협력단 | 발효된 한약재를 이용한 정장용 조성물 |
| CN102876614A (zh) * | 2012-10-16 | 2013-01-16 | 北京龙科方舟生物工程技术有限公司 | 一株地衣芽孢杆菌及其应用 |
| CN104293690A (zh) * | 2014-05-27 | 2015-01-21 | 河南牧业经济学院 | 一种中药微生态组合物、制剂及其制备方法 |
| CN104206734A (zh) * | 2014-09-03 | 2014-12-17 | 湛秀河 | 中草药无抗生物饲料添加剂 |
| CN104498385A (zh) * | 2014-11-17 | 2015-04-08 | 浙江大学 | 高产抗菌肽地衣芽孢杆菌及其应用 |
| CN104560816A (zh) * | 2014-12-16 | 2015-04-29 | 大地绿源环保科技(北京)有限公司 | 一种具有生物质水解酶活性的地衣芽孢杆菌及其应用 |
| CN105219682A (zh) * | 2015-11-03 | 2016-01-06 | 山东省农业科学院生物技术研究中心 | 一种替代抗生素饲料添加剂的地衣芽孢杆菌及其应用 |
| CN105661012A (zh) * | 2016-03-09 | 2016-06-15 | 广东海洋大学 | 一种中草药的高温发酵方法 |
| CN105707473A (zh) * | 2016-03-09 | 2016-06-29 | 广东海洋大学 | 一种利用水产蛋白和中草药高温发酵制备绿色饲用抗菌促生长剂的方法 |
| CN105695358A (zh) * | 2016-03-18 | 2016-06-22 | 昆明理工大学 | 一株短短芽孢杆菌菌株及其应用 |
| CN106212890A (zh) * | 2016-08-20 | 2016-12-14 | 裕龙农牧科技股份有限公司 | 一种猪用绿色免疫增强剂 |
| CN106721668A (zh) * | 2016-12-31 | 2017-05-31 | 新昌县派特普科技有限公司 | 水产动物用抗病促生长剂及其制备方法 |
| CN107125195A (zh) * | 2017-03-23 | 2017-09-05 | 柳州市讯丰养殖有限公司 | 一种富硒鸡果园散养方法 |
| CN108066392A (zh) * | 2017-12-27 | 2018-05-25 | 郑州神草生物技术有限公司 | 一种可发挥中药与有益菌双重功效的微生态制剂 |
| CN109260355A (zh) * | 2018-11-23 | 2019-01-25 | 上海松皓生物科技有限公司 | 一种治疗和改善银屑病的组合物和制备方法与应用 |
| CN109601699A (zh) * | 2018-12-28 | 2019-04-12 | 沈阳博善英胜生物技术有限公司 | 一种功能性微生物发酵饲料及生产方法和应用 |
| CN109943502A (zh) * | 2019-03-04 | 2019-06-28 | 青岛海洋生物医药研究院 | 益生菌、发酵剂及在中草药制剂中的应用 |
| CN110419643A (zh) * | 2019-09-04 | 2019-11-08 | 刘泳君 | 发酵中药制剂及其制备方法与应用 |
| CN110559415A (zh) * | 2019-09-24 | 2019-12-13 | 武汉市农业科学院 | 一种提高雏禽育成率的天然植物复方制剂及其制备方法和应用 |
| KR20210052342A (ko) * | 2019-10-29 | 2021-05-10 | 선 바이오 (주) | 다기능 어류용 생균제 및 이의 용도 |
| CN111363701A (zh) * | 2020-03-18 | 2020-07-03 | 泸州正泰生物工程有限公司 | 一株耐热地衣芽孢杆菌及其应用 |
| CN111363700A (zh) * | 2020-03-18 | 2020-07-03 | 泸州正泰生物工程有限公司 | 一株地衣芽孢杆菌及其应用 |
| CN112136965A (zh) * | 2020-09-08 | 2020-12-29 | 河南惠通天下生物工程有限公司 | 一种增免促生长型发酵中草药饲料添加剂及其制备方法 |
| CN112538442A (zh) * | 2020-11-10 | 2021-03-23 | 集美大学 | 一株地衣芽孢杆菌及其应用 |
| CN112375712A (zh) * | 2020-11-25 | 2021-02-19 | 昆明理工大学 | 一株乳酸乳球菌及其应用 |
| CN113558143A (zh) * | 2021-07-19 | 2021-10-29 | 西安海斯夫生物科技有限公司 | 一种替抗促生长饲料添加剂及其制备方法与它的用途 |
| CN113577161A (zh) * | 2021-08-27 | 2021-11-02 | 河南牧翔动物药业有限公司 | 一种分段式发酵制备畜禽抗病毒中草药制剂的方法 |
| CN113616715A (zh) * | 2021-08-31 | 2021-11-09 | 昆明理工大学 | 治疗仔猪腹泻及改善其肠道菌群的发酵中药口服液 |
| CN114601038A (zh) * | 2022-03-29 | 2022-06-10 | 巴林左旗城域饲料有限公司 | 一种畜禽用液态预混合添加剂及其制备方法 |
| CN115089672A (zh) * | 2022-06-28 | 2022-09-23 | 焦作市佰役安生物工程有限公司 | 一种饲用发酵中药口服液的制备方法 |
Non-Patent Citations (8)
| Title |
|---|
| AHTESHAM HUSSAIN等: "Fermentation, a feasible strategy for enhancing bioactivity of herbal medicines", 《FOOD RESEARCH INTERNATIONAL》 * |
| 付雪亮;常美楠;朱浩然;鲍男;赵元;秦贵信;: "中草药添加剂在断奶仔猪上的应用", 饲料研究 * |
| 崔利军: "中药活菌微生态制剂推动畜禽产业绿色发展", 《养禽与禽病防治》 * |
| 崔利军;: "中药活菌微生态制剂推动畜禽产业绿色发展", 养禽与禽病防治 * |
| 崔宇林: "中草药在畜牧业中的应用", 《畜禽业》 * |
| 张文等: "芽孢杆菌发酵中药复方及抑菌活性的检测", 《广东饲料》 * |
| 戴玲等: "中草药防治畜禽腹泻的研究现状", 《湖南畜牧兽医》 * |
| 李秋鹏等: "一株嗜热地衣芽孢杆菌及其产高温淀粉酶的初步研究", 《工业微生物》 * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN112375712A (zh) * | 2020-11-25 | 2021-02-19 | 昆明理工大学 | 一株乳酸乳球菌及其应用 |
| CN113616715A (zh) * | 2021-08-31 | 2021-11-09 | 昆明理工大学 | 治疗仔猪腹泻及改善其肠道菌群的发酵中药口服液 |
| CN113616715B (zh) * | 2021-08-31 | 2022-05-06 | 昆明理工大学 | 治疗仔猪腹泻及改善其肠道菌群的发酵中药口服液 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN112877257B (zh) | 2023-04-07 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN112877257B (zh) | 一株地衣芽孢杆菌及其应用 | |
| CN104388514A (zh) | 利用复合菌种发酵制备γ-氨基丁酸的方法 | |
| Chen et al. | Pseudonocardia endophytica sp. nov., isolated from the pharmaceutical plant Lobelia clavata | |
| CN102925361B (zh) | 一种afb1降解菌及降解酶 | |
| CN110408558B (zh) | 一种纳豆激酶的生产菌株及其生产方法 | |
| CN110042072B (zh) | 一种降解黄曲霉毒素b1的菌株及其应用 | |
| CN111449239B (zh) | 一种灵芝菌发酵沙棘籽粕的功能性食品添加物及其制备方法 | |
| KR20130107940A (ko) | 발효 홍삼 제조방법 | |
| CN111690568A (zh) | 枯草芽孢杆菌及其在发酵处理亚麻籽饼脱毒方面的应用 | |
| JP2012532629A (ja) | 海洋由来のＢａｃｉｌｌｕｓｂａｒｂａｒｉｃｕｓＳＣＳＩＯ０２４２９及びこれを用いたイカオリゴペプチドの調製方法 | |
| CN114196586B (zh) | 一株蒙氏肠球菌及其在发酵中草药中的应用 | |
| CN114317290B (zh) | 一种能够降解敌草隆的菌株及其应用 | |
| CN112899180B (zh) | 一种具有抑菌效果的解淀粉芽孢杆菌hd-1菌株及其分离方法和应用 | |
| CN115418337A (zh) | 一株木质素降解菌及其在水稻秸秆微贮中的应用 | |
| CN116144504A (zh) | 滇黄精根部内生真菌yafef086菌株及其应用 | |
| CN111676160B (zh) | 牛大力内生菌rh5在促进牛大力生长中的应用 | |
| CN111363701B (zh) | 一株耐热地衣芽孢杆菌及其应用 | |
| CN110452833B (zh) | 一株降解大豆胰蛋白酶抑制剂的短小芽孢杆菌lz013-2及其应用 | |
| CN116622798A (zh) | 猴头菇菌株及其培养方法、猴头菌-人参双向固体发酵方法和高效转化稀有人参皂苷的方法 | |
| CN108004145B (zh) | 一种黑木耳破壁方法 | |
| CN115895941B (zh) | 一株鼠李糖乳杆菌及其应用 | |
| CN117603889B (zh) | 饲用产酸性蛋白酶的枯草芽孢杆菌及其应用 | |
| CN111763647B (zh) | 枯草芽孢杆菌mk15及其发酵方法与用途 | |
| CN117016673B (zh) | 一种枯草芽孢杆菌在改善蛋鸡的肠道菌群或肠道健康或营养吸收中的应用 | |
| CN101974457A (zh) | 一株短小芽孢杆菌及其应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20230818 Address after: 563000 Zunyi High tech Industrial Development Zone Planning Exhibition Hall, 1st Floor, Nanguan Street, Honghuagang District, Zunyi City, Guizhou Province Patentee after: Guizhou Zhongke Microagriculture Biotechnology Co.,Ltd. Address before: 650093 No. 253, Xuefu Road, Wuhua District, Yunnan, Kunming Patentee before: Kunming University of Science and Technology |
|
| TR01 | Transfer of patent right |