CN108066392A - 一种可发挥中药与有益菌双重功效的微生态制剂 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种可发挥中药与有益菌双重功效的微生态制剂，属于生物制药技术领域。本发明中药微生态制剂采用黄芪提取物与枯草芽孢杆菌的复配，目的在于利用黄芪提取物发酵培养枯草芽孢杆菌，将中药和微生态进行有机结合。其中，枯草芽孢杆菌具有改善饲料利用率、提高动物抗病力、增强动物免疫力的功能，黄芪具有增强机体特异性免疫(体液免疫和细胞免疫)和非特异性免疫的功能，且能显著促进机体抗体生成。利用黄芪发酵枯草芽孢杆菌，能有效提高中药药效，保护中药活性成分免遭破坏，同时改变微生物代谢途径，形成新的活性成分，应用于动物机体后能发挥协同作用，提高动物的生产性能及机体免疫力。

Description

一种可发挥中药与有益菌双重功效的微生态制剂
技术领域
本发明涉及一种可发挥中药与有益菌双重功效的微生态制剂，同时还涉及一种可发挥中药与有益菌双重功效的微生态制剂，属于生物制药技术领域。
背景技术
枯草芽孢杆菌是芽孢杆菌属的一种，属于革兰氏阳性菌，无荚膜，周生鞭毛，能运动。枯草芽孢杆菌菌体在生长过程中能产生枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽等多种活性物质，对致病菌或内源性感染具有明显的抑制作用，还能迅速消耗环境中的游离氧，造成肠道低氧环境，促进有益厌氧菌生长，并产生有机酸降低肠道pH值，间接抑制其他致病菌生长，同时刺激动物免疫器官生长发育，激活T、B淋巴细胞，提高免疫球蛋白和抗体水平，增强细胞免疫和体液免疫功能。另外，菌体自身能合成α-淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶等霉素，在消化道中与体内的消化酶一同发挥作用。
目前，枯草芽孢杆菌在净化水产养殖环境、作物病害防治、畜禽饲料添加等领域有广泛应用。枯草芽孢杆菌作为一种无毒、无残留的绿色饲料添加剂，主要用于改善畜禽肠道菌群平衡，提高动物的生产性能。目前常用的枯草芽孢杆菌制剂多以普通培养基进行培养，然后以液体或喷雾干燥的粉剂形式存在。液体在运输、保存方面受到一定限制，且容易出现二次发酵，导致发臭等现象出现。而粉剂形式在使用时容易出现胀气、结块、堵塞水线、搅拌不均匀等现象。
发明内容
本发明的目的是提供一种可发挥中药与有益菌双重功效的微生态制剂。
为了实现以上目的，本发明所采用的技术方案是：
一种可发挥中药与有益菌双重功效的微生态制剂，主要包括黄芪提取物和枯草芽孢杆菌。
所述的黄芪提取物为黄芪水提液，即在黄芪中加水煎煮后过滤得到的滤液。具体的，黄芪水提液的制备方法为：取黄芪加水煎煮3次，第一次煎煮加4～5倍量的水，第二次加3～4倍量的水，第三次加2～3倍量的水，每次煎煮30～60分钟，合并三次煎煮液，过滤即得黄芪水提液。
具体的，中药微生态组合物，由以下组分组成：黄芪水提液500～700mL、肉汤200～400mL、玉米粉80～120g、(NH4)2SO40.01～0.03g，以及接种量0.5～2％的枯草芽孢杆菌菌种。
所述的肉汤可采用烹饪中的常用材料，根据原料的不同分为鸡汤、猪骨汤、牛肉汤、羊肉汤、鲜鱼汤等，可取用其中任意一种。也可采用以下配方：蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化钠5g，水1000mL，pH值7.4；121℃高压灭菌15min即得。
所述的枯草芽孢杆菌的接种浓度为1～2×109cfu/mL。
一种可发挥中药与有益菌双重功效的微生态制剂，主要包括以下质量份数的组分：中药微生态组合物发酵浓缩浸膏50份、碳酸氢钠36～40份、柠檬酸(无水柠檬酸)32～36份、稀释剂134～142份。
具体的，还包括以下质量份数的组分：矫味剂2～4份。
所述微生态制剂发酵浓缩浸膏的制备方法，包括以下步骤：
(1)准确取中药微生态组合物各组分，混合均匀后调节混合液pH值为7～9；
(2)取步骤(1)的混合液在35～40℃下发酵培养60～80小时，再浓缩至原体积的1/6～1/4，即得。
所述步骤(2)中发酵培养结束后，计数枯草芽孢杆菌的总量为1～2×109cfu/mL，芽孢形成率为90％。
所述步骤(2)中优选混合液在37℃下发酵培养72小时。
所述步骤(2)中优选发酵液浓缩至原体积的1/5。
所述步骤(2)中浓缩可采用旋转蒸发仪，蒸水温度60～70℃，负压0.05～0.1Pa。
所述的稀释剂为葡萄糖、蔗糖、乳糖、淀粉、糊精中的一种或多种。优选葡萄糖(无水葡萄糖)、淀粉(可溶性淀粉)和糊精的混合物，三者的质量比为(9～10):(2～4):(0.5～2)。
所述的矫味剂为甜菊素、阿斯帕坦、木糖醇、糖精钠、糖精钙中的一种或多种。优选阿斯帕坦。
一种中药微生态制剂，可以采用常规方法制备成泡腾片剂或泡腾颗粒。本发明仅提供一种泡腾颗粒的制备方法，包括以下步骤：
(1)按照质量份数准确取各组分；
(2)酸性颗粒的配制：中药微生态组合物发酵浓缩浸膏和稀释剂各取50％，与柠檬酸混合均匀制成软材，制粒备用；
(3)碱性颗粒的配制：取剩余的中药微生态组合物发酵浓缩浸膏和稀释剂，与碳酸氢钠混合均匀制成软材，制粒备用；
(4)将步骤(2)、(3)制得的颗粒混合均匀，加入矫味剂，干燥即得。
所述步骤(2)、(3)中优选16目筛制粒。
所述步骤(2)、(3)中制粒后在50～60℃条件下干燥，再整粒备用。
本发明的有益效果：
本发明中药微生态组合物采用黄芪提取物与枯草芽孢杆菌的复配，目的在于利用黄芪提取物发酵培养枯草芽孢杆菌，将中药和微生态进行有机结合。其中，枯草芽孢杆菌具有改善饲料利用率、提高动物抗病力、增强动物免疫力等功能，黄芪具有增强机体特异性免疫(体液免疫和细胞免疫)和非特异性免疫的功能，且能显著促进机体抗体生成。本发明利用黄芪发酵枯草芽孢杆菌，能有效提高中药药效，保护中药活性成分免遭破坏，并产生新的药效，同时改变微生物代谢途径，形成新的活性成分，应用于动物机体后能发挥协同作用，提高动物的生产性能及机体免疫力。
本发明中药微生态制剂为泡腾颗粒剂型，能在较短时间内利用崩解剂发生酸碱反应，产生大量气泡而迅速溶解，大大缩短溶解时间，使用方便，且能提高动物机体对活性成分的吸收率，生物利用度高，有效发挥中药与有益菌的双重功效。
具体实施方式
下述实施例仅对本发明作进一步详细说明，但不构成对本发明的任何限制。
实施例1
本实施例中中药微生态组合物，由以下组分组成：黄芪水提液600mL、肉汤300mL、玉米粉100g、(NH4)2SO40.02g，以及接种量1％的枯草芽孢杆菌菌种；其中肉汤为牛肉汤；枯草芽孢杆菌的接种总量为1×109cfu/mL。
本实施例中中药微生态制剂，由以下组分组成：中药微生态组合物发酵浓缩浸膏50g、碳酸氢钠40g、无水柠檬酸32g，稀释剂：无水葡萄糖98g、可溶性淀粉30g、糊精10g，矫味剂：甜菊素2g。
本实施例中中药微生态制剂的制备方法，包括以下步骤：
(1)黄芪水提液的制备：称取洁净的黄芪，加水煎煮3次，第一次加5倍量水，第二次加3倍量水，第三次加2倍量水，每次煎煮30min，合并三次煎煮液，过滤得水提液；
(2)中药微生态组合物发酵浓缩浸膏的制备：准确取中药微生态组合物各组分，混合后调节混合液pH值为9，在37℃下发酵培养72小时，发酵培养后，平板菌落计数枯草芽孢杆菌的总量为1.70×109cfu/mL，芽孢形成率为90％，发酵液经旋转蒸发仪浓缩至原体积的1/5，蒸水温度65℃，负压0.09Pa；
(3)酸性颗粒的配制：中药微生态组合物发酵浓缩浸膏和稀释剂各取50％，与柠檬酸混合均匀制成软材，16目筛制粒，在50℃条件下干燥，整粒备用；
(4)碱性颗粒的配制：取剩余的中药微生态组合物发酵浓缩浸膏和稀释剂，与碳酸氢钠混合均匀制成软材，16目筛制粒，在50℃条件下干燥，整粒备用；
(5)将步骤(2)、(3)制得的颗粒混合均匀，加入矫味剂，干燥即得。
实施例2
本实施例中中药微生态组合物，由以下组分组成：黄芪水提液500mL、肉汤200mL、玉米粉80g、(NH4)2SO40.01g，以及接种量0.5％的枯草芽孢杆菌菌种；其中肉汤的配方为：蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化钠5g，水1000mL，pH值7.4，121℃高压灭菌15min；枯草芽孢杆菌的接种总量为1×109cfu/mL。
本实施例中中药微生态制剂，由以下组分组成：中药微生态组合物发酵浓缩浸膏50g、碳酸氢钠40g、无水柠檬酸36g，稀释剂：蔗糖135g，矫味剂：阿斯帕坦2g。
本实施例中中药微生态制剂的制备方法，包括以下步骤：
(1)中药微生态组合物发酵浓缩浸膏的制备：准确取中药微生态组合物各组分，混合后调节混合液pH值为9，在35℃下发酵培养80小时，发酵培养后，平板菌落计数枯草芽孢杆菌的总量为1.70×109cfu/mL，芽孢形成率为90％，发酵液经旋转蒸发仪浓缩至原体积的1/4，蒸水温度60℃，负压0.05Pa；
(2)酸性颗粒的配制：中药微生态组合物发酵浓缩浸膏和稀释剂各取50％，与柠檬酸混合均匀制成软材，16目筛制粒，在55℃条件下干燥，整粒备用；
(3)碱性颗粒的配制：取剩余的中药微生态组合物发酵浓缩浸膏和稀释剂，与碳酸氢钠混合均匀制成软材，16目筛制粒，在55℃条件下干燥，整粒备用；
(4)将步骤(2)、(3)制得的颗粒混合均匀，加入矫味剂，干燥即得。
实施例3
本实施例中中药微生态组合物，由以下组分组成：黄芪水提液700mL、肉汤400mL、玉米粉120g、(NH4)2SO40.03g，以及接种量1.5％的枯草芽孢杆菌菌种；其中肉汤为猪肉汤；枯草芽孢杆菌的接种总量为1.50×109cfu/mL。
本实施例中中药微生态制剂，由以下组分组成：中药微生态组合物发酵浓缩浸膏50g、碳酸氢钠36g、无水柠檬酸32g，稀释剂：可溶性淀粉118g、糊精24g，矫味剂：糖精钠2g。
本实施例中中药微生态制剂的制备方法，包括以下步骤：
(1)中药微生态组合物发酵浓缩浸膏的制备：准确取中药微生态组合物各组分，混合后调节混合液pH值为7，在40℃下发酵培养60小时，发酵培养后，平板菌落计数枯草芽孢杆菌的总量为1.50×109cfu/mL，芽孢形成率为90％，发酵液经旋转蒸发仪浓缩至原体积的1/6，蒸水温度70℃，负压0.08Pa；
(2)酸性颗粒的配制：中药微生态组合物发酵浓缩浸膏和稀释剂各取50％，与柠檬酸混合均匀制成软材，16目筛制粒，在60℃条件下干燥，整粒备用；
(3)碱性颗粒的配制：取剩余的中药微生态组合物发酵浓缩浸膏和稀释剂，与碳酸氢钠混合均匀制成软材，16目筛制粒，在60℃条件下干燥，整粒备用；
(4)将步骤(2)、(3)制得的颗粒混合均匀，加入矫味剂，干燥即得。
实施例4
本实施例中中药微生态组合物，由以下组分组成：黄芪水提液600mL、肉汤300mL、玉米粉100g、(NH4)2SO40.02g，以及接种量1％的枯草芽孢杆菌菌种；其中肉汤由普通肉汤培养基试剂(购自北京双旋微生物培养基制品厂)配制，pH值7.4，121℃高压灭菌15min；枯草芽孢杆菌的接种总量为1×109cfu/mL。
本实施例中中药微生态制剂，由以下组分组成：中药微生态组合物发酵浓缩浸膏50g、碳酸氢钠38g、无水柠檬酸32g，稀释剂：乳糖120g、糊精20g，矫味剂：天冬甜精2g。
本实施例中中药微生态制剂的制备方法同实施例1。
实施例5
本实施例中中药微生态组合物，由以下组分组成：黄芪水提液600mL、肉汤300mL、玉米粉100g、(NH4)2SO40.02g，以及接种量1％的枯草芽孢杆菌菌种；其中肉汤为牛肉汤；枯草芽孢杆菌的接种总量为2×109cfu/mL。
本实施例中中药微生态制剂，由以下组分组成：中药微生态组合物发酵浓缩浸膏50g、碳酸氢钠40g、无水柠檬酸36g，稀释剂：无水葡萄糖134g，矫味剂：阿斯帕坦4g。
本实施例中中药微生态制剂的制备方法同实施例1。
试验例
(1)黄芪发酵培养枯草芽孢杆菌的研究
称取适量的洁净黄芪，分别加5倍量、3倍量、2倍量水煮沸三次，每次30min，分别取留每次煮沸滤液，最后合并三次滤液为黄芪提取液。以制备的黄芪提取液为主，添加适量液体普通肉汤、(NH4)2SO4、NaOH设计8种发酵培养基(由预试验得出)，分别命名为1-8号培养基，黄芪提取液:液体普通肉汤按(100:0、90:10、80:20、70:30、60:40、50:50、40:60、30:70)比例混合(V:V)，另加入0.02g(NH4)2SO4、0.04gNaOH。将培养的枯草芽孢杆菌菌种以1％的量接种于8种发酵培养基中，37℃转摇培养72h。菌体浓度的测定使用比浊法进行测定，在培养过程中每隔12h分别取样，用紫外-分光光度测定OD600nm值。
对1-8号培养基培养结束后，分别取发酵液1mL，稀释至10-7、10-8、10-9倍，取0.1mL的稀释液涂布于普通琼脂平板上(做两个重复)，37℃培养24h，查出平板菌落数，根据公式：每毫升细菌数＝平板上菌落数×稀释倍数/平板上加菌液的量(mL)来计算发酵液中细菌总量，结果见表1。
表1黄芪发酵培养基的筛选结果
从表1可以看出，5号培养基菌体的总量是最多，可以达到1.70×109，芽孢率48小时形成率为99％。
(2)黄芪发酵枯草芽孢杆菌菌液的浓缩
将发酵菌液使用旋转蒸发仪进行浓缩，蒸水温度60～70℃，负压0.05～0.1Pa，浓缩得到发酵菌液浸膏。
(3)酸性剂和碱性剂的筛选
泡腾颗粒是利用有机酸与弱碱遇水后发生反应产生二氧化碳，使药液产生气泡，本发明采用碳酸氢钠作为碱源，选用无水柠檬酸作为酸源。
(4)处方筛选试验设计
本发明中药微生态制剂中含有黄芪发酵枯草芽孢杆菌，浓缩后的浸膏具有一定的粘性，酸碱比例合适才能达到泡腾崩解的要求，因此，要对酸、碱及其他辅料的用量进行筛选来观察泡腾颗粒的崩解速度、制粒的外观以及溶解性，结果见表2。
表2 处方筛选试验设计与结果
从表2可以看出，处方3的崩解时间最短，外观好，溶化性最好，故确定处方3为优选方案。
(5)制粒工艺确定
本发明中药微生态制剂采用黄芪发酵枯草芽孢杆菌浸膏制备泡腾颗粒，因浸膏中含有水分，为避免制粒过程中酸碱反应，故采用酸碱分开制粒。
分别称取黄芪发酵枯草芽孢杆菌浸膏和各种辅料，充分混匀，分别制成酸性、碱性软材，16目筛分别制粒，50～60℃干燥，将酸粒、碱粒混合均匀，干燥，分装，即得。

Claims (10)

1.一种可发挥中药与有益菌双重功效的微生态制剂，其特征在于：主要包括黄芪提取物和枯草芽孢杆菌。
2.根据权利要求1所述的一种可发挥中药与有益菌双重功效的微生态制剂，其特征在于：由以下组分组成：黄芪水提液500～700mL、肉汤200～400mL、玉米粉80～120g、(NH4)2SO40.01～0.03g，以及接种量0.5～2％的枯草芽孢杆菌。
3.一种可发挥中药与有益菌双重功效的微生态制剂，其特征在于：主要包括以下质量份数的组分：如权利要求2所述可发挥中药与有益菌双重功效的微生态组制剂发酵浓缩浸膏50份、碳酸氢钠36～40份、柠檬酸32～36份、稀释剂134～142份。
4.根据权利要求3所述的一种可发挥中药与有益菌双重功效的微生态制剂，其特征在于：还包括以下质量份数的组分：矫味剂2～4份。
5.根据权利要求3或4所述的一种可发挥中药与有益菌双重功效的微生态制剂，其特征在于：所述的中药微生态组合物发酵浓缩浸膏的制备方法，包括以下步骤：
(1)准确取权利要求1所述一种可发挥中药与有益菌双重功效的微生态制剂，混匀后调节混合液pH值为7～9；
(2)取步骤(1)的混合液在35～40℃下发酵培养60～80小时，再浓缩至原体积的1/6～1/4，即得。
6.根据权利要求3或4所述的一种可发挥中药与有益菌双重功效的微生态制剂，其特征在于：所述的稀释剂为葡萄糖、蔗糖、乳糖、淀粉、糊精中的一种或多种。
7.根据权利要求6所述的一种可发挥中药与有益菌双重功效的微生态制剂，其特征在于：所述的稀释剂为葡萄糖、淀粉和糊精的混合物，三者的质量比为(9～10):(2～4):(0.5～2)。
8.根据权利要求4所述的一种可发挥中药与有益菌双重功效的微生态制剂，其特征在于：所述的矫味剂为甜菊素、阿斯帕坦、木糖醇、糖精钠、糖精钙中的一种或多种。
9.根据权利要求8所述的一种可发挥中药与有益菌双重功效的微生态制剂，其特征在于：所述的矫味剂为阿斯帕坦。
10.一种如权利要求4所述的一种可发挥中药与有益菌双重功效的微生态制剂，其特征在于：包括以下步骤：
(1)按照质量份数准确取各组分；
(2)酸性颗粒的配制：可发挥中药与有益菌双重功效的微生态组制剂发酵浓缩浸膏和稀释剂各取50％，与柠檬酸混合均匀制成软材，制粒备用；
(3)碱性颗粒的配制：取剩余的可发挥中药与有益菌双重功效的微生态组制剂发酵浓缩浸膏和稀释剂，与碳酸氢钠混合均匀制成软材，制粒备用；
(4)将步骤(2)、(3)制得的颗粒混合均匀，加入矫味剂，干燥即得。
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
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CN109364114A (zh) * 2018-11-30 2019-02-22 河北征宇制药有限公司 一种提高牛羊生长和生产性能的发酵中药及其制备方法
CN112877257A (zh) * 2021-03-18 2021-06-01 昆明理工大学 一株地衣芽孢杆菌及其应用

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