CN112823648A - 一种组合物、食品或药品及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明属于食品或医药领域,具体公开了一种组合物,包含棕榈酸甘油酯、a‑乳清蛋白、β‑酪蛋白以及选自乳双歧杆菌、动物双歧杆菌、长双岐杆菌、短双歧杆菌、青春双歧杆菌、两歧双歧杆菌和婴儿双歧杆菌中至少一种双歧杆菌;其中,按照棕榈酸计算,棕榈酸甘油酯中含有15%以上重量的Sn‑2棕榈酸甘油酯。在此基础上,本发明还具体公开了一种食品或药品。本发明的食品或药品可改善或促进婴幼儿神经系统发育,还可以改善或促进婴幼儿对脂肪酸的吸收利用、改善婴幼儿肠道菌群多样性、改善婴幼儿肠道双歧杆菌和/或乳杆菌的相对丰度。
Description
技术领域
本发明属于食品或医药领域,具体涉及一种组合物,还涉及一种食品或药品、以及前述组合物的应用。
背景技术
肠道微生物群是胃肠道系统中包括古细菌、真菌、酵母菌和细菌在内的复合微生物集合,总量达到人体细胞的100倍以上,它们作为一个整体影响人体。肠道微生物群与人体基本系统的发育、成熟和维护有关,如免疫系统、消化系统、新陈代谢系统。在生命早期,肠道和大脑都会经历快速变化,这是神经发育的窗口期,也是肠道微生物定植和形成的关键时期。近年来的研究,特别是高通量测序技术用于肠道微生态研究,发现双歧杆菌在生命早期肠道微生物群中具有优势作用。已有研究发现一系列因素影响生命早期的肠道微生物群组成,包括出生胎龄、生产方式、喂养方式、遗传背景、地理环境、乳母饮食和抗生素使用。足月生产、自然顺产以及出生后6个月坚持纯母乳喂养是早期肠道微生群建立和成熟的有利因素,可降低一些急慢性疾病的风险,如肥胖、1型糖尿病、过敏和炎性肠病等。因此,目前需一种能改善婴幼儿肠道菌群多样性或改善婴幼儿肠道双歧杆菌丰度的食品或药品。
最近研究表明,肠道微生物在神经发育和行为控制中发挥着重要作用。早期肠道菌群失调可导致下丘脑垂体肾上腺(HPA)轴功能受损、小胶质细胞成熟、脑细胞因子谱、血脑屏障完整性以及行为改变。肠-脑轴(Gut-Brain Axis)是肠神经系统与中枢神经系统及认知功能之间连续的、双向的通讯互动系统。肠神经系统是一个嵌入胃肠系统内层的神经元系统,依赖神经、内分泌、免疫和体液途径实现肠-脑沟通。其中,肠道微生物群是人体肠-脑轴的一个关键影响因素。肠道微生物也可以产生神经递质,如血清素,这些神经递质可影响大脑发育、人类行为、人类情绪,甚至可能影响更高级的认知。过去十年的研究发现,肠道微生物群异常及多样性降低与许多神经系统疾病诸如帕金森氏病、抑郁症、自闭症和注意力缺陷多动障碍存在相关性。
益生菌是肠道微生物群中的重要组成。世界粮农组织(FAO)和世界卫生组织(WHO)对于益生菌的定义是:通过摄取适当数量、能够对于食用者的身体健康发挥有效作用的活菌。2012年,Dinan等提出了一个新的概念“Psychobiotics”意指有潜力治疗心理症状与疾病的益生菌[Dinan,2013]。相关研究表明,Psychobiotics可以调节神经递质和蛋白质,包括γ-氨基丁酸(gaba)、5-羟色胺、谷氨酸和脑源性神经营养因子(BDNF),它们在控制神经兴奋性抑制平衡、情绪、认知功能、学习和记忆过程中发挥重要作用。双歧杆菌属是益生菌的一种,目前常见的双歧杆菌菌株包括乳双歧杆菌、动物双歧杆菌、长双岐杆菌、短双歧杆菌、青春双歧杆菌、两歧双歧杆菌和婴儿双歧杆菌等,以及一些新型菌株。
目前需要一种能改善或促进婴幼儿神经系统发育的产品。
母乳脂肪为婴儿早期生长提供45%~60%的能量,母乳脂肪中98%以上是甘油三酯。母乳中的不同脂肪酸与甘油酯化的位置存在差异;其中,母乳中的不饱和脂肪酸如亚油酸、α-亚麻酸多位于甘油三酯的1位和3位;母乳中的长链饱和脂肪酸如棕榈酸则主要位于2位,这样形成的棕榈酸甘油三酯称为Sn-2棕榈酸甘油三酯。在消化道,婴儿胃部的脂肪水解酶主要作用于甘油三酯的1位和3位酯键,因此,不饱和脂肪酸首先游离,继而在十二指肠中与Sn-2棕榈酸甘油单酯一同被降解吸收。但是,普通婴幼儿配方粉中含有棕榈油,其长链饱和脂肪酸大多酯化在甘油三酯1位和3位酯键,水解后易与钙离子结合形成钙皂,降低了脂肪和矿物质的吸收,同时难吸收的钙皂还可能使粪便发硬导致排便困难。国标GB14880容许在婴幼儿配方粉中添加OPO结构酯,这是一种富含Sn-2棕榈酸甘油三酯的食品原料,添加OPO结构酯可提高产品中Sn-2棕榈酸甘油三酯的占比。动物研究对比饲喂不同比例Sn-2棕榈酸(低12%vs中40%vs高56%)对于大鼠肠道微生物群的影响,16srRNA测序结果显示三组动物的肠道菌群组成并没有显著差异。
母乳富含a-乳清蛋白,它是一种富含必需氨基酸的蛋白质,经消化生成多种生物活性多肽。有研究发现,a-乳清蛋白消化产物可在体外抑制大肠杆菌、肺炎球菌、金黄色葡萄球菌及念珠菌等致病菌。
β-酪蛋白是母乳中含量最高的酪蛋白分子,经消化产生的多肽片段具有抑制有害菌生长的作用。
发明内容
本发明提供了一种组合物,将其添加到食品(药品)中可改善或促进婴幼儿神经系统发育,还可以改善或促进婴幼儿对脂肪酸的吸收利用、改善婴幼儿肠道菌群多样性、改善婴幼儿肠道双歧杆菌和/或乳杆菌的相对丰度。在此基础上,本发明提供了一种食品或药品。
本发明第一方面涉及一种组合物,包含棕榈酸甘油酯、a-乳清蛋白、β-酪蛋白以及选自乳双歧杆菌、动物双歧杆菌、长双岐杆菌、短双歧杆菌、青春双歧杆菌、两歧双歧杆菌和婴儿双歧杆菌中至少一种双歧杆菌;其中,按照棕榈酸计算,棕榈酸甘油酯中含有15%以上(例如18%以上、20%以上、15%~98%、15%~90%、20%~80%、20%~95%、30%、40%、50%、60%、70%)重量的Sn-2棕榈酸甘油酯。
本发明第一方面的一些实施方式中,棕榈酸甘油酯包括Sn-2棕榈酸甘油酯以及可选的除Sn-2棕榈酸甘油酯以外的其它棕榈酸甘油酯。
本发明第一方面的一些实施方式中,a-乳清蛋白、β-酪蛋白以及Sn-2棕榈酸甘油酯之间的重量比为(1-10):(1-10):(1-10),例如1:(1-2):(1-2)、1:(1-5):(1-5)、1:(1-7):(1-7)、1:(1-6):(1-6)、1:1.32:1.2、1:1:1、1:3:3、1:5:5、1:8:8。
本发明第一方面的一些实施方式中,双歧杆菌的活菌数按照每克a-乳清蛋白计为107~1013CFU,例如108CFU、109CFU、1010CFU、1011CFU、1012CFU。
本发明第一方面的一些实施方式中,双歧杆菌选自双歧杆菌BB12和双歧杆菌HN019。
本发明第一方面的一些实施方式中,双歧杆菌BB12与双歧杆菌HN019的活菌数比例为(1:100)~(100:1),例如100:1、90:1、80:1、70:1、60:1、50:1、40:1、30:1、20:1、10:1、5:1、1:1、1:5、1:8、1:10、1:14、1:17、1:20、1:30、1:40、1:50、1:60、1:70、1:80、1:90。
本发明第二方面涉及一种食品或药品,包含本发明第一方面所述组合物。
本发明第二方面的一些实施方式中,食品或药品还包含除棕榈酸甘油酯以外的脂肪。
本发明第二方面的一些实施方式中,除棕榈酸甘油酯以外的脂肪为本领域常用脂肪。
本发明第二方面的一些实施方式中,除棕榈酸甘油酯以外的脂肪选自亚油酸甘油酯、亚麻酸甘油酯、二十二碳六烯酸甘油酯和花生四烯酸甘油酯中的至少一种脂肪。
本发明第二方面的一些实施方式中,食品或药品中,按照脂肪酸计算,棕榈酸甘油酯重量占脂肪总重量的1%~96%,例如10%~90%、20%~80%、30%~70%、20%~90%、10%~50%、5%~40%、5%~60%。其中,脂肪是由脂肪酸和甘油结合形成。
本发明第二方面的一些实施方式中,食品或药品还包含除a-乳清蛋白和β-酪蛋白以外的蛋白质。
本发明第二方面的一些实施方式中,除a-乳清蛋白和β-酪蛋白以外的蛋白质为本领域常用蛋白质。
本发明第二方面的一些实施方式中,除a-乳清蛋白和β-酪蛋白以外的蛋白质选自卵白蛋白、卵磷蛋白、白蛋白、肌蛋白、大豆蛋白、麦谷蛋白、谷蛋白、麦胶蛋白、玉米胶蛋白、胶质蛋白、胶原蛋白、豆球蛋白以及除a-乳清蛋白和β-酪蛋白以外的乳蛋白。
本发明第二方面的一些实施方式中,食品或药品还包含碳水化合物。
本发明第二方面的一些实施方式中,所述碳水化合物为本领域常用碳水化合物。
本发明第二方面的一些实施方式中,所述碳水化合物选自葡萄糖、果糖、半乳糖、蔗糖、乳糖、麦芽糖、淀粉、纤维素、半纤维素和果胶。
本发明第二方面的一些实施方式中,药品还包括药用辅料,以及任选的用于改善或促进婴幼儿神经系统发育、改善或促进婴幼儿对脂肪酸的吸收利用、改善婴幼儿肠道菌群多样性或者改善婴幼儿肠道双歧杆菌和/或乳杆菌的相对丰度的药物活性成分。
本发明第二方面的一些实施方式中,药用辅料为本领域常用药用辅料。
本发明第二方面的一些实施方式中,药用辅料选自溶剂、抛射剂、增溶剂、助溶剂、乳化剂、着色剂、黏合剂、崩解剂、填充剂、润滑剂、润湿剂、渗透压调节剂、稳定剂、助流剂、矫味剂、防腐剂、助悬剂、包衣材料、芳香剂、抗黏合剂、整合剂、渗透促进剂、pH值调节剂、缓冲剂、增塑剂、表面活性剂、发泡剂、消泡剂、增稠剂、包合剂、保湿剂、吸收剂、稀释剂、絮凝剂与反絮凝剂、助滤剂和释放阻滞剂。
本发明第二方面的一些实施方式中,食品还包括食品添加剂。
本发明第二方面的一些实施方式中,食品添加剂选自营养强化剂、抗氧化剂、增味剂、甜味剂、增稠剂、防腐剂、抗结剂和酸度调节剂。
本发明第二方面的一些实施方式中,营养强化剂选自维生素(例如维生素A、B1、B6、B12、C、D、E等)、矿物质(例如镁、磷、钙、铁、锌、硒或它们的衍生物等)、膳食纤维、牛磺酸和胆碱。
本发明第二方面的一些实施方式中,食品为乳制品。
本发明第三方面涉及一种乳制品,包含提供蛋白质的原料、提供脂肪的原料以及选自乳双歧杆菌、动物双歧杆菌、长双岐杆菌、短双歧杆菌、青春双歧杆菌、两歧双歧杆菌和婴儿双歧杆菌中至少一种双歧杆菌;其中,提供蛋白质的原料至少包含a-乳清蛋白和β-酪蛋白,提供脂肪的原料至少包含棕榈酸甘油酯,并且,按照棕榈酸计算,棕榈酸甘油酯中含有15%以上(例如18%以上、20%以上、15%~98%、15%~90%、20%~80%、20%~95%、30%、40%、50%、60%、70%)重量的Sn-2棕榈酸甘油酯。
本发明第三方面的一些实施方式中,a-乳清蛋白、β-酪蛋白以及Sn-2棕榈酸甘油酯之间的重量比为(1-10):(1-10):(1-10),例如1:(1-2):(1-2)、1:(1-5):(1-5)、1:(1-7):(1-7)、1:(1-6):(1-6)、1:1.32:1.2、1:1:1、1:3:3、1:5:5、1:8:8。
本发明第三方面的一些实施方式中,双歧杆菌的活菌数按照每克a-乳清蛋白计为107~1013CFU,例如108CFU、109CFU、1010CFU、1011CFU、1012CFU。
本发明第三方面的一些实施方式中,每百克乳制品中含0.5~16g a-乳清蛋白,例如1g、2g、3g、4g、5g、6g、7g、8g、9g、10g、11g、12g、13g、14g、15g。
本发明第三方面的一些实施方式中,每百克乳制品中含0.8~20gβ-酪蛋白,例如1g、2g、3g、4g、5g、6g、7g、8g、9g、10g、11g、12g、13g、14g、15g、16g、17g、18g、19g。
本发明第三方面的一些实施方式中,每百克乳制品中双歧杆菌的活菌数为106~1015CFU,例如107CFU、108CFU、109CFU、1010CFU、1011CFU、1012CFU、1013CFU、1014CFU。
本发明第三方面的一些实施方式中,双歧杆菌选自双歧杆菌BB12和双歧杆菌HN019。
本发明第三方面的一些实施方式中,双歧杆菌BB12与双歧杆菌HN019的活菌数之比为(1:100)~(100:1),例如100:1、90:1、80:1、70:1、60:1、50:1、40:1、30:1、20:1、10:1、5:1、1:1、1:5、1:8、1:10、1:14、1:17、1:20、1:30、1:40、1:50、1:60、1:70、1:80、1:90。
本发明第三方面的一些实施方式中,按照脂肪酸计算,棕榈酸甘油酯重量占脂肪总重量的1%~96%,例如10%~90%、20%~80%、30%~70%、20%~90%、10%~50%、5%~40%、5%~60%。
本发明第三方面的一些实施方式中,提供脂肪的原料还包含除棕榈酸甘油酯以外的脂肪。
本发明第三方面的一些实施方式中,除棕榈酸甘油酯以外的脂肪为本领域常用脂肪。
本发明第三方面的一些实施方式中,除棕榈酸甘油酯以外的脂肪选自亚油酸甘油酯、α-亚麻酸甘油酯、二十二碳六烯酸甘油酯和花生四烯酸甘油酯中至少一种脂肪。
本发明第三方面的一些实施方式中,提供蛋白质的原料还包含除a-乳清蛋白和β-酪蛋白以外的蛋白质。
本发明第三方面的一些实施方式中,除a-乳清蛋白和β-酪蛋白以外的蛋白质为本领域常用蛋白质。
本发明第三方面的一些实施方式中,除a-乳清蛋白和β-酪蛋白以外的蛋白质选自卵白蛋白、卵磷蛋白、白蛋白、肌蛋白、大豆蛋白、麦谷蛋白、谷蛋白、麦胶蛋白、玉米胶蛋白、胶质蛋白、胶原蛋白、豆球蛋白以及除a-乳清蛋白和β-酪蛋白以外的乳蛋白。
本发明第三方面的一些实施方式中,所述乳制品还包含提供碳水化合物的原料和/或食品添加剂。
本发明第三方面的一些实施方式中,所述碳水化合物为本领域常用碳水化合物。
本发明第三方面的一些实施方式中,所述碳水化合物选自葡萄糖、果糖、半乳糖、蔗糖、乳糖、麦芽糖、淀粉、纤维素、半纤维素和果胶。
本发明第三方面的一些实施方式中,食品添加剂选自营养强化剂、抗氧化剂、增味剂、甜味剂、增稠剂、防腐剂、抗结剂和酸度调节剂。
本发明第三方面的一些实施方式中,营养强化剂选自维生素(例如维生素A、B1、B6、B12、C、D、E等)、矿物质(例如镁、磷、钙、铁、锌、硒或它们的衍生物等)、膳食纤维、牛磺酸和胆碱。
本发明第四方面涉及本发明第一方面所述组合物在乳制品中的应用。
本发明第四方面的一些实施方式中,所述乳制品为本发明第三方面所述的乳制品。
本发明第五方面涉及本发明第一方面所述组合物在制备改善或促进神经系统发育、改善或促进婴幼儿对脂肪酸的吸收利用、改善婴幼儿肠道菌群多样性或者改善婴幼儿肠道双歧杆菌和/或乳杆菌的相对丰度的食品或药物中的用途。
本发明第五方面的一些实施方式中,采用《年龄与发育进程问卷》(ASQ)评估婴幼儿神经系统发育(情况)。
本发明第五方面的一些实施方式中,采用ASQ-3版本评估婴幼儿神经系统发育(情况)。
本发明第五方面的一些实施方式中,采用ASQ-3版本的中文版评估婴幼儿神经系统发育(情况)。
本发明第五方面的一些实施方式中,采用在中国婴幼儿人群中得出常模及心理测量学特性的中文版ASQ-3版本评估婴幼儿神经系统发育(情况)。
本发明第五方面的一些实施方式中,采用文献“魏梅,卞晓燕等.年龄与发育进程问卷中国常模及心理测量学特性研究[J].中华儿科杂志,2015,53(12):913-918.”报道的在中国婴幼儿人群中得出常模及心理测量学特性的中文版ASQ-3版本评估婴幼儿神经系统发育(情况)。
本发明第五方面的一些实施方式中,评估婴幼儿神经系统发育的技术指标选自沟通、粗大动作、精细动作、解决问题和个人-社会。
本发明第五方面的一些实施方式中,脂肪酸为总脂肪酸或总皂化脂肪酸。
本发明第五方面的一些实施方式中,脂肪酸选自DHA、EPA、棕榈酸、软脂酸、肉豆蔻酸、皂化棕榈酸、皂化肉豆蔻酸、皂化月桂酸及它们的混合物。
本发明第五方面的一些实施方式中,所述食品为本发明第二方面所述的食品。
本发明第五方面的一些实施方式中,所述药物为本发明第二方面所述的药品。
本发明第五方面的一些实施方式中,所述食品为乳制品。
本发明第五方面的一些实施方式中,所述乳制品为本发明第三方面所述的乳制品。
本发明中,乳制品选自杀菌乳、灭菌乳、复原乳、酸奶、优酪乳、乳粉、配方乳粉、炼乳、干酪、干酪素、乳清粉、乳脂肪和含乳饮料中至少一种,优选为配方乳粉。
本发明中,如无特别说明,其中:
术语“棕榈酸甘油酯”是指甘油基上连接至少一个棕榈酸的脂肪酸甘油酯,可选自单酯、二酯和三酯,其中,二酯、三酯的甘油基上也可连接其它脂肪酸基团。
术语“Sn-2棕榈酸”是指与脂肪的甘油基上的Sn-2位连接的棕榈酸。
术语“Sn-2棕榈酸甘油酯”是指甘油基上的Sn-2位连接棕榈酸的脂肪酸甘油酯,可以选自Sn-2棕榈酸甘油单酯、Sn-2棕榈酸甘油二酯和Sn-2棕榈酸甘油三酯;其中,Sn-2棕榈酸甘油二酯和Sn-2棕榈酸甘油三酯中甘油基上的Sn-1位和/或Sn-3位可连接任意脂肪酸,包括但不限于棕榈酸、丁酸、己酸、辛酸、癸酸、十八酸、十二酸、十四酸、二十酸、豆蔻油酸、棕榈油酸、菜籽油酸、亚油酸、亚麻酸等。
术语“a-乳清蛋白”是从牛奶中提取的一种蛋白质,有营养价值高、易消化吸收、含有多种活性成分等特点,是人体优质蛋白质补充剂之一。
术语“β-酪蛋白”是由乳腺腺泡上皮细胞合成的一种磷酸化蛋白质,广泛存在于哺乳动物(牛、牦牛、山羊、马、兔等)和人的乳汁中。
术语“神经系统发育”是指由单个细胞发育成能执行各种高级功能的极其复杂的神经网络的机制和过程。
本发明取得的有益效果:
1、本发明组合物添加到食品(药品)中可改善或促进婴幼儿神经系统发育,还可以改善或促进婴幼儿对脂肪酸的吸收利用、改善婴幼儿肠道菌群多样性、改善婴幼儿肠道双歧杆菌和/或乳杆菌的相对丰度。
2、本发明乳制品可改善或促进婴幼儿神经系统发育,还可以改善或促进婴幼儿对脂肪酸的吸收利用、改善婴幼儿肠道菌群多样性、改善婴幼儿肠道双歧杆菌和/或乳杆菌的相对丰度。
附图说明
为了使本发明的内容更容易被清楚的理解,下面根据本发明的具体实施例并结合附图,对本发明作进一步详细的说明,其中
图1为测试组、对照组和母乳组婴儿喂养4个月的神经系统发育状况得分;
图2为测试组、对照组和母乳组婴儿排出粪便的总脂肪酸含量与基线排出粪便总脂肪酸含量的差值随时间变化的示意图;
图3为测试组、对照组和母乳组婴儿排出粪便的棕榈酸含量与基线排出粪便棕榈酸含量的差值随时间变化的示意图;
图4为测试组、对照组和母乳组婴儿排出粪便的软脂酸含量与基线排出粪便软脂酸含量的差值随时间变化的示意图;
图5为测试组、对照组和母乳组喂养16周后婴儿肠道微生物β多样性的示意图;
图6为测试组和母乳组喂养24周后婴儿肠道菌群差异的LDA分析图;
图7为测试组和对照组喂养24周后婴儿肠道菌群差异的LDA分析图;
图8为在不同时间点测试组、对照组和母乳组婴儿肠道中双歧杆菌相对丰度的示意图;
图9为在不同时间点测试组、对照组和母乳组婴儿肠道中乳杆菌相对丰度的示意图。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的实施方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。以下对至少一个示例性实施例的描述实际上仅仅是说明性的,决不作为对本发明及其应用或使用的任何限制。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
实施例
按照表1中的实施例配方制备得到配方奶粉。其中,每百克奶粉约含Sn-2棕榈酸甘油酯2.17g。
表1
对比例
按照表1中的对照配方制备得到配方奶粉。其中,每百克奶粉约含Sn-2棕榈酸甘油酯0.7g。
临床实验方法及实验结果
随机对照设计,比较实施例配方与对照配方奶粉的喂养效果。
1.实验对象分组:
由儿科医师或经训练的研究人员通过招募筛选问卷筛选需要纳入的婴儿。进入研究前需获得母亲书面的知情同意书。
1.1纳入标准
足月儿:孕周≥37周;
出生体重:2.5kg-4kg;
正常妊娠、分娩的婴儿(包括剖宫产);
身体健康,出生5-10分钟后的Apgar评分>7分;
年龄:<15天。
1.2排除标准
具有以下任一特征的婴儿被排除:
出生时检测到先天性畸形或染色体病且具有临床意义者;
出生后一周内患有疾病需要机械换气或药物治疗者(不包括蓝光治疗的婴儿期黄疸患者);
因可疑或未知的代谢性因素或因机体缺陷影响喂养或代谢者;
双生子或多胞胎。
1.3实验分组
选取0-6月龄足月儿为研究对象,婴儿出生后母乳充足,母亲愿意基本母乳喂养到满6月龄的,作为母乳组;无法实施母乳喂养,决定采用婴儿配方奶粉喂养,1-15日龄婴儿配方奶粉喂养量≥250ml/d,开始干预后奶粉喂养大于80%以上的婴儿,随机分为测试组(喂养实施例配方奶粉)和对照组(喂养对照配方奶粉)。每组的入组人数不少于5人。
2.干预研究方法
对入组的婴儿开展基线(出生后第15天)的调查与样本的收集,之后连续喂养6个月,每个婴儿每天的喂奶量相等。在此期间,项目研究人员于开始喂养后的4周、6周、8周、16周、24周分别对实验对象进行随访。调查婴儿的人口社会学情况、神经系统发育情况、脂肪酸吸收利用情况、肠道菌群状况。
3.临床实验结果
3.1不同实验组婴儿的基本人口社会学情况
比较三个实验组的婴儿发现:测试组、母乳组和对照组的社会人口学分布相近,只是测试组与母乳组婴儿的父亲工作状况、父母最高学历和家庭收入稍有差异,但对比研究婴儿母乳喂养与婴儿配方奶粉喂养的现有文献、报告通常也体现出这些差异,故这些差异不会妨碍或影响本实验研究结果的对比性。另外,如表3.1所示:三组婴儿的性别比例无显著差异;与测试组和对照组相比,母乳组的阴道分娩率更高,并且,测试组与对照组的阴道分娩率无差异;母乳组或对照组与测试组数据的T检验p值也提供在表3.1中,p值<0.05说明有统计学差异,p值<0.01说明有显著性统计学差异。
表3.1婴儿性别及分娩方式构成
3.2不同实验组婴儿的神经系统发育情况
《年龄与发育进程问卷》(ASQ)自1995年在美国问世以来,已进行了两次更新,目前为2009年出版的ASQ–3版本。ASQ问卷将儿童父母纳入发育评估团队,实际心理测量学特性高;ASQ问卷还提供亲子游戏活动指导,让父母在日常生活中帮助儿童发育;并且,ASQ量表本身还有其它各种亮点。因此,ASQ问卷目前已是美国对于1~66月龄儿童人群最广泛使用的发育筛查及发育监测量表。ASQ也在世界各地广泛研究及应用,目前已被翻译成多种语言版本,并根据不同国家婴幼儿的实际情况进行了调整。
2015年ASQ-3版本被翻译成中文版,并在中国婴幼儿人群中得出常模及心理测量学特性(魏梅,卞晓燕等.年龄与发育进程问卷中国常模及心理测量学特性研究[J].中华儿科杂志,2015,53(12):913-918.)。本研究采用该ASQ-3版本的中文版问卷以“沟通”、“粗大动作”、“精细动作”、“解决问题”和“个人-社会“这五个技术指标来评估喂养4个月、6个月婴儿的神经系统发育状况,取平均值,得分越高意味着该方面的情况越好。喂养4个月的评估结果如图1所示,其中,关于每一技术指标的柱形图从左至右依次表示“母乳组”、“测试组”和“对照组”得分。表3.2显示了不同实验组各技术指标的得分统计结果,其中:各技术指标的界值表示婴儿的正常指标水平(一般指标水平);高于界值表示婴儿的指标水平高于一般指标水平,发育情况较好;低于界值表示婴儿的指标水平低于一般指标水平,发育情况不佳;接近界值表示婴儿指标水平存在低于一般指标水平的风险;数据以“A(B)”形式提供,“A”表示人数,“B”表示人数占实验组人数的B%比例。
表3.2测试组与对照组婴儿ASQ不同技术指标的人数分布
图1表明,测试组婴儿在“沟通”、“粗大动作”、“精细动作”、“个人-社会”技术指标上的得分明显高于对照组婴儿,说明测试组比对照组婴儿的神经系统发育状况更好。在评估神经系统发育的所有技术指标方面,与母乳组得分更接近的是测试组,说明测试组与母乳组婴儿的神经系统发育状况更接近。
表3.2表明:在4个月(16周)和6个月(24周),在“粗大运动”、“精细运动”和“解决问题”技术指标方面,测试组高于界值的人数比例明显比对照组高于界值的人数比例更高,在“沟通”、“粗大动作”、“解决问题”指标方面,测试组低于界值的人数比例少于对照组低于界值的人数比例;并且,从4个月至6个月,在“沟通”、“精细动作”、“个人-社会”指标方面,测试组高于界值的人数比例逐渐上升,而在“粗大运动”、“个人-社会”指标方面对照组低于界值的人数比例却在逐渐增长。第4个月,测试组在“精细动作”指标上接近界值的风险显著低于对照组,且调整父母的教育程度后,该差异仍具有统计学意义。这说明测试组比对照组婴儿的神经系统发育状况更好,本发明配方奶粉有助于改善婴幼儿的神经系统发育。
3.3不同实验组婴儿的脂肪酸吸收利用情况
3.3.1粪便中的总脂肪酸含量
检测母乳组、测试组和对照组婴儿在基线(出生后第15天)、第6周、第16周和第24周排出粪便中的总脂肪酸含量,结果见表3.3.1。表3.3.1中,每个数据以中位数(第25百分位数,第75百分位数)形式表示。将每一时间点每组婴儿的粪便中总脂肪酸含量由低至高排列,“中位数”表示每一时间点排列在中间位置婴儿的粪便中总脂肪酸含量,“第25百分位数”表示每一时间点排列在(组人数×25%)位置婴儿的粪便中总脂肪酸含量,“第75百分位数”表示每一时间点排列在(组人数×75%)位置婴儿的粪便中总脂肪酸含量。p值表示母乳组或对照组与测试组之间显著性检验p值。
图2表示婴儿在第6周、第16周和第24周排出粪便的总脂肪酸含量与基线排出粪便总脂肪酸含量的差值。其中,将每个时间点每组婴儿粪便中总脂肪酸含量与基线总脂肪酸含量的差值由低至高排列,图2中的数据表示每个时间点排列在中间位置婴儿的粪便中总脂肪酸含量与基线值的差值。
表3.3.1婴儿粪便中总脂肪酸含量(μg/g干重)
由图2及表3.3.1可知,随喂养时间的延长,测试组婴儿粪便中总脂肪酸含量的下降趋势比对照组更明显,说明测试组婴儿比对照组婴儿对脂肪酸的吸收利用能力强,本发明配方奶粉能促进婴幼儿对脂肪酸的吸收利用。并且,对照组与测试组婴儿中,测试组的脂肪酸吸收能力更接近于母乳组。
3.3.2粪便中的长链多不饱和脂肪酸含量
检测母乳组、测试组和对照组婴儿在基线(出生后第15天)、第6周、第16周和第24周排出粪便中的C22:6(DHA)及C20:5(EPA)含量,并计算第6周、第16周和第24周的检测值与基线检测值的差值,结果见表3.3.2.1及3.3.2.2。其中,每个数据以中位数(第25百分位数,第75百分位数)形式表示。将每个时间点每组婴儿粪便中DHA或EPA检测值与基线值的差值由低至高排列,“中位数”表示每个时间点排列在中间位置婴儿的粪便中DHA或EPA检测值与基线值的差值,“第25百分位数”表示每个时间点排列在(组人数×25%)位置婴儿的粪便中DHA或EPA检测值与基线值的差值,“第75百分位数”表示每个时间点排列在(组人数×75%)位置婴儿的粪便中DHA或EPA检测值与基线值的差值。组间p值表示母乳组或对照组与测试组之间的显著性检验p值。组内p值表示同一实验组不同时间点的显著性检验p值。
表3.3.2.1不同时间点婴儿粪便中C22:6(DHA)含量与基线C22:6(DHA)含量的差值(mg/g干重)
表3.3.2.2不同时间点婴儿粪便中C20:5(EPA)含量与基线C20:5(EPA)含量的差值(mg/g干重)
由表3.3.2.1及3.3.2.2可知,24周,测试组婴儿粪便中DHA含量降幅和EPA含量降幅均显著大于对照组,说明长时间喂养的测试组婴儿对DHA、EPA的吸收利用能力强于对照组婴儿,本发明配方奶粉能促进婴幼儿对长链多不饱和脂肪酸(DHA、EPA)的吸收利用,由于DHA和EPA是婴幼儿神经系统发育的重要物质(Kidd PM.Omega-3DHAand EPAforcognition,behavior,and mood:clinical findings and structural-functionalsynergies with cell membrane phospholipids.Altern Med Rev.2007Sep;12(3):207-27.),从而可以说明本发明配方奶粉有助于改善婴幼儿神经系统发育和智力发育。
3.3.3.粪便中的饱和脂肪酸含量
母乳中饱和脂肪酸主要包括棕榈酸(C16:0)、软脂酸(C18:0)及小部分的肉豆蔻酸(C14:0)。检测母乳组、测试组和对照组婴儿在基线(出生后第15天)、第6周、第16周、第24周排出粪便中的棕榈酸(C16:0)、软脂酸(C18:0)及豆蔻酸(C14:0)含量,部分结果如表3.3.3中所示。其中,每个数据以中位数(第25百分位数,第75百分位数)形式表示。将每个时间点每组婴儿粪便中棕榈酸、软脂酸或豆蔻酸的检测值由低至高排列,“中位数”表示该时间点排列在中间位置婴儿的粪便中棕榈酸、软脂酸或豆蔻酸含量,“第25百分位数”表示该时间点排列在(组人数×25%)位置婴儿的粪便中棕榈酸、软脂酸或豆蔻酸含量,“第75百分位数”表示该时间点排列在(组人数×75%)位置婴儿的粪便中棕榈酸、软脂酸或豆蔻酸含量。组间p值表示母乳组或对照组与测试组之间显著性检验p值。组内p值表示同一实验组不同时间点的显著性检验p值。
图3表示婴儿在第6周、第16周和第24周排出粪便的棕榈酸含量与基线排出粪便棕榈酸含量的差值。其中,将每个时间点每组婴儿粪便中棕榈酸含量与基线排出粪便中棕榈酸含量的差值由低至高排列,图3中的数据表示每个时间点排列在中间位置婴儿的粪便中棕榈酸含量与基线值的差值。(*:p<0.05)。
图4表示婴儿在第6周、第16周和第24周排出粪便的软脂酸含量与基线排出粪便软脂酸含量的差值。其中,将每个时间点每组婴儿粪便中软脂酸含量与基线排出粪便中软脂酸含量的差值由低至高排列,图4中的数据表示每个时间点排列在中间位置婴儿的粪便中软脂酸含量与基线值的差值。(*:p<0.05)。
表3.3.3不同时间点婴儿粪便中的饱和脂肪酸含量(mg/g干重)
由表3.3.3可知,从基线至第24周,测试组婴儿粪便中的棕榈酸(C16:0)、软脂酸(C18:0)及肉豆蔻酸(C14:0)含量均明显降低,而对照组婴儿粪便中的棕榈酸(C16:0)、软脂酸(C18:0)及肉豆蔻酸(C14:0)含量反而升高。图3-4也说明,与对照组相比,测试组婴儿粪便中的饱和脂肪酸含量下降趋势更明显。这说明与对照组相比,测试组婴儿对饱和脂肪酸的吸收利用能力更强,本发明配方奶粉有助于促进婴幼儿对饱和脂肪酸的吸收利用。同时,测试组与对照组中,测试组与母乳组婴儿的饱和脂肪酸吸收利用情况更接近。
3.3.4粪便中的总皂化脂肪酸及各种皂化脂肪酸含量
检测母乳组、测试组和对照组婴儿粪便中的总皂化脂肪酸含量、皂化C16:0(皂化棕榈酸)、皂化C14:0(皂化肉豆蔻酸)、皂化C12:0(皂化月桂酸)含量,结果如表3.3.4.1、表3.3.4.2中所示。其中,每个数据以中位数(第25百分位数,第75百分位数)形式表示。
表3.3.4.1婴儿粪便中的总皂化脂肪酸含量(mg/g干重)
母乳组 | 测试组 | 对照组 | |
基线 | 95.89(69.69,113.80) | 117.10(91.21,142.50) | 103.39(76.32,140.76) |
P | 0.063 | 0.562 | |
第6周 | 89.91(57.87,110.03) | 113.62(89.35,128.30) | 109.34(79.77,151.55) |
P | 0.009 | 1.000 | |
第16周 | 17.24(1.54,71.15) | 110.89(83.81,141.44) | 113.17(85.90,140.06) |
P | <0.001 | 0.746 | |
第24周 | 22.34(1.86,67.91) | 115.28(81.94,135.18) | 117.60(92.08,153.13) |
p | <0.001 | 0.574 |
表3.3.4.2婴儿粪便中的各皂化脂肪酸含量(mg/g干重)
由表3.3.4.1可知,比较表中的中位数,从基线至喂养16周,随喂养时间的延长,测试组婴儿粪便中的总皂化脂肪酸含量逐渐降低,但对照组婴儿粪便中的总皂化脂肪酸含量反而逐渐升高,说明测试组婴儿比对照组婴儿对皂化脂肪酸的吸收利用能力更强。同时,母乳组婴儿粪便中总皂化脂肪酸含量的变化趋势与测试组接近。
由表3.3.4.2可知:
基线时,母乳组、测试组及对照组婴儿粪便中的皂化棕榈酸含量分别占总皂化脂肪酸含量的46.4%、57.5%和58.6%,因此,皂化棕榈酸的吸收利用对于婴儿的脂肪酸吸收非常关键。比较表中的中位数,从基线至喂养24周,随喂养时间的延长,测试组婴儿粪便中的皂化棕榈酸含量逐渐降低,而对照组婴儿粪便中的皂化棕榈酸含量逐渐升高、至第24周稍有降低,但仍高于基线含量;说明测试组婴儿比对照组婴儿对皂化棕榈酸的吸收利用度更好。母乳组从基线至喂养16周的变化趋势接近测试组,只在第24周婴儿粪便中皂化棕榈酸含量稍有升高,但仍远低于基线值,因此母乳组婴儿能较好的吸收利用皂化棕榈酸。
比较表中的中位数,从基线至喂养16周,随喂养时间的延长,测试组婴儿粪便中的皂化肉豆蔻酸及皂化月桂酸的含量逐渐降低;而对照组婴儿粪便中的皂化肉豆蔻酸及皂化月桂酸含量与基线值相比有所升高或差异不大,说明测试组婴儿比对照组婴儿对皂化肉豆蔻酸及皂化月桂酸的吸收利用度更好。同时,母乳组婴儿粪便中皂化肉豆蔻酸及皂化月桂酸含量的变化趋势与测试组相似。
3.4不同实验组婴儿的肠道菌群研究
3.4.1不同实验组婴儿的肠道菌群多样性:
检测母乳组、测试组和对照组婴儿肠道菌群的α多样性指数(包括chao指数、shannon指数)、β多样性以及三组婴儿肠道菌群差异的LDA分析,结果如图5~7中所示。
图5中,第1组表示喂养16周的母乳组,第2组表示喂养16周的测试组,第3组表示喂养16周的对照组;
图6中,竖直中线的左侧表示喂养24周的母乳组的菌属统计情况,中线的右侧表示喂养24周的测试组的菌属统计情况;
图7中,竖直中线的左侧表示喂养24周的测试组的菌属统计情况,中线的右侧表示喂养24周的对照组的菌属统计情况。
结果表明:
测试组与母乳组婴儿的肠道菌群α多样性指数(包括chao1指数、shannon指数)的变化趋势相似。喂养16周,测试组婴儿的肠道微生物β多样性与母乳组婴儿没有显著性差异,但与对照组有明显差异。喂养24周,测试组与母乳组婴儿肠道菌群中的菌属统计情况差别较小,而对照组分别与测试组、母乳组婴儿肠道菌群中的菌属统计情况相差很大。这说明,测试组与母乳组婴儿肠道菌群的多样性和菌属统计情况均比较相近,而前两组与对照组婴儿肠道菌群的多样性和菌属统计情均相差较大。
3.4.2不同实验组婴儿肠道的双歧杆菌相对丰度:
图8中:由上至下的线段表示每个时间点整个实验组双歧杆菌相对丰度的范围;将每个时间点整个实验组的双歧杆菌相对丰度值由小至大排列,图8中的矩形图表示排列在第25%位置的双歧杆菌相对丰度值至排列在第75%位置的双歧杆菌相对丰度值所涵盖的范围,图8矩形内的横线表示排列在第50%位置的双歧杆菌相对丰度值(中位数)。以各实验组双歧杆菌相对丰度的中位数(第50%位置)进行比较。
如图8所示,在基线(出生后第15天),测试组与对照组婴儿的肠道双歧杆菌相对丰度无显著差异;在喂养第6周、第16周和第24周时,测试组婴儿的肠道双歧杆菌相对丰度均显著高于对照组,且差异具有统计学意义;而测试组与母乳组在各个时间点的婴儿肠道双歧杆菌相对丰度均无显著性差异。
3.4.3不同实验组婴儿肠道的乳杆菌相对丰度:
图9中:由上至下的线段表示每个时间点整个实验组乳杆菌相对丰度的范围;将每个时间点整个实验组乳杆菌相对丰度值由小至大排列,图9中的矩形图表示排列在第25%位置的乳杆菌相对丰度值至排列在第75%位置的乳杆菌相对丰度值所涵盖的范围,图9矩形内的横线表示排列在第50%位置的乳杆菌相对丰度值(中位数)。以各实验组乳杆菌相对丰度的中位数(第50%位置)进行比较。
如图9所示,在基线(出生后第15天),测试组婴儿的肠道乳杆菌相对丰度显著高于对照组;调整基线差异之后,在喂养第6周、第16周和第24周时,测试组婴儿的肠道乳杆菌相对丰度仍显著高于对照组,且差异具有统计学意义;在基线(出生后第15天)和喂养第6周时,测试组婴儿的肠道乳杆菌相对丰度显著高于母乳组,但在喂养第16周和第24周时,测试组与母乳组婴儿的肠道乳杆菌相对丰度无统计学差异。
显然,上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例,而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说,在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。
Claims (16)
1.一种组合物,包含棕榈酸甘油酯、a-乳清蛋白、β-酪蛋白以及选自乳双歧杆菌、动物双歧杆菌、长双岐杆菌、短双歧杆菌、青春双歧杆菌、两歧双歧杆菌和婴儿双歧杆菌中至少一种双歧杆菌;其中,按照棕榈酸计算,棕榈酸甘油酯中含有15%以上重量的Sn-2棕榈酸甘油酯。
2.根据权利要求1所述的组合物,其中,a-乳清蛋白、β-酪蛋白以及Sn-2棕榈酸甘油酯之间的重量比为(1-10):(1-10):(1-10)。
3.根据权利要求1或2所述的组合物,其中,双歧杆菌的活菌数按照每克a-乳清蛋白计为107~1013CFU。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的组合物,其中,双歧杆菌选自双歧杆菌BB12和双歧杆菌HN019;
优选地,双歧杆菌BB12与双歧杆菌HN019的活菌数比例为(1:100)~(100:1)。
5.一种食品或药品,包含权利要求1至4中任一项所述的组合物;
优选地,所述食品为乳制品。
6.根据权利要求5所述的食品或药品,其还包含除棕榈酸甘油酯以外的脂肪;
优选地,按照脂肪酸计算,棕榈酸甘油酯重量占脂肪总重量的1%~96%。
7.一种乳制品,包含提供蛋白质的原料、提供脂肪的原料以及选自乳双歧杆菌、动物双歧杆菌、长双岐杆菌、短双歧杆菌、青春双歧杆菌、两歧双歧杆菌和婴儿双歧杆菌中至少一种双歧杆菌;其中,提供蛋白质的原料至少包含a-乳清蛋白和β-酪蛋白,提供脂肪的原料至少包含棕榈酸甘油酯,并且,按照棕榈酸计算,棕榈酸甘油酯中含有15%以上重量的Sn-2棕榈酸甘油酯。
8.根据权利要求7所述的乳制品,其中,a-乳清蛋白、β-酪蛋白以及Sn-2棕榈酸甘油酯之间的重量比为(1-10):(1-10):(1-10)。
9.根据权利要求7或8所述的乳制品,其中,双歧杆菌的活菌数按照每克a-乳清蛋白计为107~1013CFU。
10.根据权利要求7至9中任一项所述的乳制品,其中,每百克乳制品中双歧杆菌的活菌数为106~1015CFU。
11.根据权利要求7至10中任一项所述的乳制品,其中,双歧杆菌选自双歧杆菌BB12和双歧杆菌HN019;
优选地,乳制品中,双歧杆菌BB12与双歧杆菌HN019的活菌数之比为(1:100)~(100:1)。
12.根据权利要求7至11中任一项所述的乳制品,其中,按照脂肪酸计算,棕榈酸甘油酯重量占脂肪总重量的1%~96%。
13.根据权利要求7至12中任一项所述的乳制品,其中,提供脂肪的原料还包含选自亚油酸甘油酯、α-亚麻酸甘油酯、二十二碳六烯酸甘油酯和花生四烯酸甘油酯中至少一种。
14.根据权利要求7至13中任一项所述的乳制品,其中,所述乳制品还包含提供碳水化合物的原料和/或食品添加剂;
优选地,提供碳水化合物的原料包含选自葡萄糖、果糖、半乳糖、蔗糖、乳糖、麦芽糖、淀粉、纤维素、半纤维素和果胶中至少一种;
优选地,食品添加剂选自营养强化剂、抗氧化剂、增味剂、甜味剂、增稠剂、防腐剂、抗结剂和酸度调节剂;
更优选地,营养强化剂选自维生素、矿物质、膳食纤维、牛磺酸和胆碱。
15.权利要求1至4中任一项所述组合物在乳制品中的应用。
16.权利要求1至4中任一项所述组合物在制备改善或促进婴幼儿神经系统发育、改善或促进婴幼儿对脂肪酸的吸收利用、改善婴幼儿肠道菌群多样性或者改善婴幼儿肠道双歧杆菌和/或乳杆菌的相对丰度的食品或药物中的用途;
优选地,采用《年龄与发育进程问卷》(ASQ)评估婴幼儿神经系统发育;
更优选地,评估婴幼儿神经系统发育的技术指标选自沟通、粗大动作、精细动作、解决问题和个人-社会;
优选地,脂肪酸为总脂肪酸或总皂化脂肪酸;
优选地,脂肪酸选自DHA、EPA、棕榈酸、软脂酸、肉豆蔻酸、皂化棕榈酸、皂化肉豆蔻酸、皂化月桂酸及它们的混合物;
优选地,所述食品为乳制品。
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