CN112552356A - 一种淫羊藿苷制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明属于中药提取制备技术领域，具体涉及一种淫羊藿苷制备方法，将洗净的淫羊藿粉碎成粗粉，加入一倍量的浓度为40％‑90％乙醇溶液进行浸润，浸润时长1‑5小时，将浸润液装入渗漉装置中，并加入两倍量的浓度为40％‑80％乙醇溶液浸渍，浸渍时长18‑50小时；浸渍后进行渗漉，渗漉流速3‑8ml/min/kg；收集渗漉液，减压浓缩，得到淫羊藿苷粗品；对淫羊藿苷粗品采用大孔树脂进行柱纯化，纯化结束后梯度洗脱，收集洗脱液一；采用凝胶柱对洗脱液一进行层析，后进行梯度洗脱，收集洗脱液二，对洗脱液二进行减压浓缩，干燥粉碎，得到淫羊藿苷。本发明的淫羊藿苷制备方法提取效果好，淫羊藿苷转化率高。

Description

一种淫羊藿苷制备方法
技术领域
本发明属于中药提取制备技术领域，具体涉及一种淫羊藿苷制备方法。
背景技术
淫羊藿来源小蘖科淫羊藿属多种植物，是中国常用中药，又名仙灵脾，味辛、甘，性温，归肝、肾两经，淫羊藿具有很高的药用价值，我国传统中药淫羊藿，具有补肾阳、祛风湿、强筋骨等功效。淫羊藿含有多种成分，总黄酮和淫羊藿苷具有多种生物活性，为主要有效成分，此外还含有生物碱、木脂素、多糖和微量元素、酚苷类、有机酸、紫罗酮类和苯乙醇苷类等。现代药理学研究证明，淫羊藿具有抗肿瘤、增强机体免疫功能、延缓衰老和改善内分泌等多种药理学作用。
有关淫羊藿总黄酮和淫羊藿苷提取的报道很多，现有技术中对于淫羊藿有效成份的提取方法通常采用加热回流法、碱提取法和水提醇沉法等，其中加热回流法是最常见的淫羊藿黄酮类化合物提取技术。但是加热回流法需要反复加热、多次回流；水提醇沉法中浓缩过程过长，会使有效成分被破坏；碱提取法提取和浓缩时会发生苷类成分碱水解，使有效成分提取量减少。因此在含淫羊藿药材制剂的大规模生产中，需要提出更合适的淫羊藿苷提取方法来满足需求。
发明内容
为了克服上述背景技术中提到的困难，本发明的目的是提供一种淫羊藿苷制备方法，该方法提取效果好，效率高，且节约资源和能源。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种淫羊藿苷制备方法，其包括以下步骤：
(1)浸润、浸渍：将洗净的淫羊藿粉碎成粗粉，加入一倍量的浓度为40％-90％乙醇溶液进行浸润，浸润时长1-5小时，将浸润液装入渗漉装置中，并加入两倍量的浓度为40％-90％乙醇溶液浸渍，浸渍时长18-50小时；
(2)渗漉：浸渍后进行分梯度渗漉，渗漉流速3-8ml/min/kg；
(3)收集：收集渗漉液，减压浓缩，得到淫羊藿苷粗品；
(4)纯化：对淫羊藿苷粗品采用大孔树脂进行柱纯化，纯化结束后用30％-80％的乙醇进行梯度洗脱，收集洗脱液一；
(5)精提：采用SephadexLH-20凝胶柱对洗脱液一进行层析，并使用洗脱液进行梯度洗脱，收集洗脱液二，对洗脱液二进行减压浓缩，干燥粉碎，得到淫羊藿苷。
优选地，渗漉过程中，乙醇浓度为90％-50％。
优选地，所述淫羊藿粉碎至细度为20～60目。
优选地，所述淫羊藿选自大叶淫羊藿、心叶淫羊藿、箭叶淫羊藿、柔毛淫羊藿、朝鲜淫羊藿、大花淫羊藿和腺毛淫羊藿中的至少一种。
优选地，步骤(5)中，层析过后，使用浓度为20％，40％，60％，80％和100％的甲醇水溶液依次进行洗脱。硅胶层析是根据物质在硅胶上的吸附力不同而得到分离，再使用甲醇水溶液进行梯度洗脱。
本发明淫羊藿苷制备方法，主要采用了渗漉-纯化-精提的步骤，对淫羊藿中的有效成分淫羊藿苷进行提取，其中渗漉法是将适度粉碎的药材装入渗漉装置中，由上部不断添加溶剂，溶剂渗过药材层向下流动过程中浸出药材成分的方法。渗漉法可对淫羊藿中的有效成分进行粗提，再经过大孔树脂柱的纯化和凝胶柱柱的精提，得到了叫纯净的淫羊藿苷，淫羊藿中淫羊藿苷的提取率平均最高可达99％。
本发明中，使用渗漉法对淫羊藿中的有效成分淫羊藿苷进行提取，提取效果好，得到淫羊藿苷含量高。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。具体实施例如下：
实施例1：
采用渗漉法提取淫羊藿中的有效成分淫羊藿苷，其过程包括以下步骤：
(1)浸润、浸渍：称取800g洗净的大叶淫羊藿粉碎成粗粉，过40目筛网，加入一倍量的75％乙醇溶液进行浸润，浸润时长2小时，将浸润液装入渗漉装置中，并加入两倍量的75％乙醇溶液浸渍，浸渍时长24小时；
(2)渗漉：浸渍后采用75％乙醇进行渗漉，渗漉流速5ml/min/kg；
(3)收集：收集渗漉液，减压浓缩，得到淫羊藿苷粗品。
(4)纯化：对淫羊藿苷粗品采用大孔树脂进行柱纯化，纯化结束后依次用35％，45％，55％，65％，75％，85％的乙醇进行梯度洗脱，收集洗脱液一；
(5)精提：采用SephadexLH-20凝胶柱对洗脱液一进行层析，层析过后，使用浓度为20％，40％，60％，80％和100％的甲醇水溶液依次进行洗脱，收集洗脱液二，对洗脱液二进行减压浓缩，干燥粉碎，得到淫羊藿苷。
使用本实施例方法，对淫羊藿中淫羊藿苷进行提取，经检测，淫羊藿苷的转移率可达96％。
实施例2：
采用渗漉法提取淫羊藿中的有效成分淫羊藿苷，其过程包括以下步骤：
(1)浸润、浸渍：称取1000g洗净的大花淫羊藿粉碎成粗粉，过40目筛网，加入一倍量的55％乙醇溶液进行浸润，浸润时长3小时，将浸润液装入渗漉装置中，并加入两倍量的55％乙醇溶液浸渍，浸渍时长30小时；
(2)渗漉：浸渍后采用50％乙醇进行渗漉。渗漉流速4ml/min/kg；
(3)收集：收集渗漉液，减压浓缩，得到淫羊藿苷粗品。
(4)纯化：对淫羊藿苷粗品采用大孔树脂进行柱纯化，纯化结束后依次用30％，40％，50％，60％，70％，90％的乙醇进行梯度洗脱，收集洗脱液一；
(5)精提：采用SephadexLH-20凝胶柱对洗脱液一进行层析，层析过后，使用甲浓度为20％，40％，60％，80％和100％的甲醇水溶液依次进行洗脱，收集洗脱液二，对洗脱液二进行减压浓缩，干燥粉碎，得到淫羊藿苷。
使用本实施例方法，对淫羊藿中淫羊藿苷进行提取，经检测，淫羊藿苷的转移率可达99％。
实施例3：
采用渗漉法提取淫羊藿中的有效成分淫羊藿苷，其过程包括以下步骤：
(1)浸润、浸渍：称取800g洗净的心叶淫羊藿粉碎成粗粉，过40目筛网，加入一倍量的65％乙醇溶液进行浸润，浸润时长2小时，将浸润液装入渗漉装置中，并加入两倍量的65％乙醇溶液浸渍，浸渍时长40小时；
(2)渗漉：浸渍后采用80％乙醇进行渗漉，渗漉流速4ml/min/kg；
(3)收集：收集渗漉液，减压浓缩，得到淫羊藿苷粗品。
(4)纯化：对淫羊藿苷粗品采用大孔树脂进行柱纯化，纯化结束后依次用30％，50％，70％，90％的乙醇进行梯度洗脱，收集洗脱液一；
(5)精提：采用SephadexLH-20凝胶柱对洗脱液一进行层析，层析过后，使用浓度为20％，40％，60％，80％和100％的甲醇水溶液依次进行洗脱，收集洗脱液二，对洗脱液二进行减压浓缩，干燥粉碎，得到淫羊藿苷。
使用本实施例方法，对淫羊藿中淫羊藿苷进行提取，经检测，淫羊藿苷的转移率可达97％。
实施例4：
采用渗漉法提取淫羊藿中的有效成分淫羊藿苷，其过程包括以下步骤：
(1)浸润、浸渍：称取800g洗净的心叶淫羊藿粉碎成粗粉，过40目筛网，加入一倍量的80％乙醇溶液进行浸润，浸润时长3小时，将浸润液装入渗漉装置中，并加入两倍量的80％乙醇溶液浸渍，浸渍时长20小时；
(2)渗漉：浸渍后采用65％乙醇进行渗漉，渗漉流速4ml/min/kg；
(3)收集：收集渗漉液，减压浓缩，得到淫羊藿苷粗品。
(4)纯化：对淫羊藿苷粗品采用大孔树脂进行柱纯化，纯化结束后依次用30％，60％，90％的乙醇进行梯度洗脱，收集洗脱液一；
(5)精提：采用SephadexLH-20凝胶柱对洗脱液一进行层析，层析过后，使用浓度为20％，40％，60％，80％和100％的甲醇水溶液依次进行洗脱，收集洗脱液二，对洗脱液二进行减压浓缩，干燥粉碎，得到淫羊藿苷。
使用本实施例方法，对淫羊藿中淫羊藿苷进行提取，经检测，淫羊藿苷的转移率可达95％。
对比例1
与实施例1相比，对比例1中，取消了步骤(5)中‘采用SephadexLH-20凝胶柱对洗脱液一进行层析，层析过后，使用浓度为20％，40％，60％，80％和100％的甲醇水溶液依次进行洗脱’该步骤，直接将步骤(4)中的洗脱液一进行减压浓缩，干燥粉碎，得到淫羊藿苷。其余步骤均与实施例1相同，具体操作如下：
采用渗漉法提取淫羊藿中的有效成分淫羊藿苷，其过程包括以下步骤：
(1)浸润、浸渍：称取800g洗净的心叶淫羊藿粉碎成粗粉，过40目筛网，加入一倍量的80％乙醇溶液进行浸润，浸润时长3小时，将浸润液装入渗漉装置中，并加入两倍量的80％乙醇溶液浸渍，浸渍时长20小时；
(2)渗漉：浸渍后采用65％乙醇进行渗漉，渗漉流速4ml/min/kg；
(3)收集：收集渗漉液，减压浓缩，得到淫羊藿苷粗品。
(4)纯化：对淫羊藿苷粗品采用大孔树脂进行柱纯化，纯化结束后依次用30％，60％，90％的乙醇进行梯度洗脱，收集洗脱液一；
(5)对洗脱液一进行减压浓缩，干燥粉碎，得到淫羊藿苷。
使用本实施例方法，对淫羊藿中淫羊藿苷进行提取，经检测，淫羊藿苷的转移率可达73％。
对比例2
与实施例2相比，对比例2中，取消了步骤(4)的纯化步骤，直接将步骤(3)中的淫羊藿苷粗品进行精提层析，后对层析后的洗脱液二进行减压浓缩，干燥粉碎，得到淫羊藿苷。其余步骤均与实施例2相同，具体操作如下：
采用渗漉法提取淫羊藿中的有效成分淫羊藿苷，其过程包括以下步骤：
(1)浸润、浸渍：称取1000g洗净的大花淫羊藿粉碎成粗粉，过40目筛网，加入一倍量的55％乙醇溶液进行浸润，浸润时长3小时，将浸润液装入渗漉装置中，并加入两倍量的55％乙醇溶液浸渍，浸渍时长30小时；
(2)渗漉：浸渍后采用50％乙醇进行渗漉。渗漉流速4ml/min/kg；
(3)收集：收集渗漉液，减压浓缩，得到淫羊藿苷粗品。
(4)精提：采用SephadexLH-20凝胶柱对淫羊藿苷粗品进行层析，层析过后，使用浓度为20％，40％，60％，80％和100％的甲醇水溶液依次进行洗脱，收集洗脱液二，对洗脱液二进行减压浓缩，干燥粉碎，得到淫羊藿苷。
使用本实施例方法，对淫羊藿中淫羊藿苷进行提取，经检测，淫羊藿苷的转移率可达79％。
本发明中，实施例的结果表明，使用渗漉法对淫羊藿中淫羊藿苷的提取，提取效果好，效率高，淫羊藿苷的转移率可达95％以上。对比例与实施例相比，淫羊藿苷的转移率均不足80％，因此，使用本发明的方法，提取淫羊藿中的淫羊藿苷，效果更好。
以上已经描述了本发明的实施例，上述说明是示例性的，并非穷尽性的，并且也不限于所披露的实施例。在不偏离所说明实施例的范围和精神的情况下，对于本技术领域的普通技术人员来说许多修改和变更都是显而易见的。

Claims (5)

1.一种淫羊藿苷制备方法，其特征在于：其包括以下步骤：
(1)浸润、浸渍：将洗净的淫羊藿粉碎成粗粉，加入一倍量的浓度为40％-90％乙醇溶液进行浸润，浸润时长1-5小时，将浸润液装入渗漉装置中，并加入两倍量的浓度为40％-80％乙醇溶液浸渍，浸渍时长18-50小时；
(2)渗漉：浸渍后采用乙醇进行渗漉，渗漉流速3-8ml/min/kg；
(3)收集：收集渗漉液，减压浓缩，得到淫羊藿苷粗品；
(4)纯化：对淫羊藿苷粗品采用大孔树脂进行柱纯化，纯化结束后用30％-90％的乙醇进行梯度洗脱，收集洗脱液一；
(5)精提：采用SephadexLH-20凝胶柱对洗脱液一进行层析，并使用洗脱液进行梯度洗脱，收集洗脱液二，对洗脱液二进行减压浓缩，干燥粉碎，得到淫羊藿苷。
2.根据权利要求1所述的淫羊藿苷制备方法，其特征在于：渗漉过程中，乙醇浓度为50％-90％。
3.根据权利要求1所述的淫羊藿苷制备方法，其特征在于：所述淫羊藿粉碎至细度为20～60目。
4.根据权利要求1所述的淫羊藿苷制备方法，其特征在于：所述淫羊藿选自大叶淫羊藿、心叶淫羊藿、箭叶淫羊藿、柔毛淫羊藿、朝鲜淫羊藿、大花淫羊藿和腺毛淫羊藿中的至少一种。
5.根据权利要求1所述的淫羊藿苷制备方法，其特征在于：步骤(5)中，层析过后，使用浓度为20％，40％，60％，80％和100％的甲醇水溶液依次进行洗脱。
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