CN103720892A - 含有淫羊藿的中药组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

一种含有淫羊藿的中药组合物，原料药按重量份包括：淫羊藿100-1000；熟地黄130-1400；骨碎补60-660；黄芪130-1400；丹参60-660；木耳50-530；黄瓜子50-530，原料药淫羊藿中20-100wt.%的淫羊藿单独提取，或者，50-100wt.%的淫羊藿单独提取，或者，80-100wt.%的淫羊藿单独提取。本发明还公开了一种含有淫羊藿的中药组合物的制备方法，本发明所述的中药组合物及其制备方法，能够最大限度的保留淫羊藿中的有效成分，提高组合物中淫羊藿苷的含量，保证中药组合物质量稳定。

Description

含有淫羊藿的中药组合物及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种治疗骨质疏松症的中药组合物及其制备方法，特别涉及一种含有淫羊藿提取物的中药组合物及其制备方法。

背景技术

骨质疏松症是以单位体积内骨组织总量的绝对减少，使骨的结构改变和功能发生变化，致使骨的脆性增加以及易于发生骨折的一种全身性疾病，是中老年人常见病、多发病。以往认为是缺钙造成的，实则病因复杂，钙的缺乏仅仅是是其表面现象，实则与内分泌功能紊乱，营养缺乏，运动不足等多方面因素有关。

淫羊藿是中医治疗骨质疏松方剂中使用频率最高的中草药之一，淫羊藿水提液和总黄酮提取物均具有抗骨质疏松活性。淫羊藿苷是淫羊藿中含量最为丰富的黄酮苷类化合物，可以改善心脑血管系统功能、增强机体免疫力及调节内分泌，同时还具有抗肿瘤、抗肝毒、抗缺氧、再灌注等作用。

CN101053608A公开了一种骨疏康微丸及其制备工艺，是由如下重量份的原料药制成的：淫羊藿100-1000；熟地黄130-1400；骨碎补60-660；黄芪130-1400；丹参60-660；木耳50-530；黄瓜子50-530，其中淫羊藿与丹参药渣、熟地黄、骨碎补、黄芪、木耳加水煎煮浓缩后入药。

CN1872225A公开了一种治疗骨质疏松的药物制剂，其中淫羊藿100-600份、地黄200-800份、骨碎补100-500份、黄芪100-600份、丹参100-500份、木耳50-300份、黄瓜子50-300份，所公开的制备方法中淫羊藿与地黄、骨碎补、黄芪、木耳等采取水煎煮或用不同浓度的乙醇渗漉提取或回流提取。

CN1839999A公开了一种骨疏康制剂，含有淫羊藿7.5%-70%，熟地黄6%-50%，骨碎补5%-65%，黄芪5%-40%，丹参5%-60%，木耳3%-20%，黄瓜子5%-30%，其中淫羊藿与丹参药渣、熟地黄、骨碎补、黄芪加水煎煮，经吸附树脂精制后入药。

上述含有淫羊藿的中药组合物或药物制剂中，淫羊藿与其它原料一起煎煮处理，可能导致药物制剂中淫羊藿有效成分，例如是淫羊藿苷、总黄酮，提取不充分，组合物中有效成分含量较低，质量不稳定。

CN101812100A公开了一种制备淫羊藿苷的方法，其步骤包括乙醇提取，浓缩、低醇状态下大孔树脂富集，聚酰胺分离纯化，重结晶等。该方法采用乙醇作为提取溶剂，提取和浓缩过程中的溶剂损耗较大，导致成本过高；大孔树脂在低醇状态下对淫羊藿苷的吸附能力偏小，吸附过程中有渗漏，易导致收率偏低。

CN102718819A也公开了一种制备淫羊藿苷的工艺，包括以下步骤：用水加热提取；通过大孔树脂的层析柱分离；再通过硅胶装柱，用乙酸乙酯与甲醇的混合物进行洗脱精致的步骤。该方法以提取淫羊藿苷为目的，提取时间长，并通过硅胶层析精制，导致淫羊藿中其它有效成分损失，同时也没有考虑复方制剂中淫羊藿与其它原料的配伍问题。

发明内容

本发明的一个目的是提供了一种具有高含量淫羊藿有效成分和质量稳定的中药组合物。

本发明所述的药物组合物中原料药按重量份包括：淫羊藿100-1000；熟地黄130-1400；骨碎补60-660；黄芪130-1400；丹参60-660；木耳50-530；黄瓜子50-530；优选的，本发明所述药物组合物中原料药按重量份包括：淫羊藿300-450；熟地黄450-600；骨碎补200-300；黄芪300-450；丹参200-300；木耳100-250；黄瓜子50-250；最优选的，本发明所述药物组合物中原料药按重量份包括：淫羊藿:350；熟地黄464；骨碎补232；黄芪350；丹参232；木耳186；黄瓜子186的原料药制备而成。

本发明所述的药物组合物中淫羊藿苷含量至少为1.5wt.%，优选的组合物中淫羊藿苷含量至少为1.8wt.%，最佳的组合物中淫羊藿苷含量至少为2.0wt.%。

本发明中淫羊藿的种类来源于小檗科植物淫羊藿epimedium brevicor-num maxim.、箭叶淫羊藿epimedium sagittatum(sieb.et zucc.)maxim.、柔毛淫羊藿epimedium pubescens maxim.、巫山淫羊藿epimedium wushanense t.s.ying、或朝鲜淫羊藿epimedium nakai。

本发明所述的药物组合物可以为中药提取物、药物制剂或保健品制剂，在本发明的优选实施方案中所述的药物组合物为药物制剂。

本发明的药物组合物可以为片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、微丸剂、散剂、合剂、软胶囊剂、滴丸剂、膏剂，优选为片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂，更优选为片剂和胶囊剂。

本发明的药物组合物可以通过添加本领域使用的任何辅料制备成适合的剂型。所述的辅料包括但不限于崩解剂、填充剂、润滑剂、润湿剂、增溶剂、助溶剂、乳化剂、着色剂、黏合剂、渗透压、调节剂、稳定剂、助流剂、矫味剂、防腐剂、助悬剂、包衣材料、芳香剂、抗黏着剂、抗氧剂、抗氧增效剂、鳌合剂、渗透促进剂、pH调节剂、增塑剂、表面活性剂、发泡剂、消泡剂、增稠剂、包合剂、保湿剂、吸收剂、稀释剂、絮凝剂与反絮凝剂、助滤剂等。

本发明的另一个目的是提供了一种含有淫羊藿的中药组合物的制备方法，其中包括原料药淫羊藿中20-100wt.%的淫羊藿单独提取，优选的50-100wt.%的淫羊藿单独提取，更优选的包括80-100wt.%的淫羊藿单独提取。

其中所述淫羊藿的单独提取步骤，包括将淫羊藿原料粉碎后，加水煎煮，煎煮液通过大孔吸附树脂柱精制，浓缩干燥。

其中所述的加水煎煮步骤包括：加水煎煮2-4次，每次煎煮加水重量为淫羊藿原料重量的10-15倍，提取时间为1-1.5小时，优选的加水煎煮2-3次，每次煎煮加水重量为淫羊藿原料重量的12-15倍，提取时间为1-1.5小时，最优选的加水煎煮3次，第一次加水15倍，煎煮1.5小时，第二次加水12倍，煎煮1小时，第三次加水12倍，煎煮1小时。

其中所述的煎煮液通过大孔吸附树脂柱精制步骤包括：合并煎煮液，静置，通过D101型大孔树脂柱，流速为4-8BV/h，流出液弃去，用水冲洗，冲洗流速为4-8BV/h，弃去水洗液，最后用60-90%乙醇洗脱树脂床，洗脱流速为2-4BV/h，优选的煎煮液通过D101型大孔树脂柱，流速为6BV/h，流出液弃去，用水冲洗，冲洗流速为6BV/h，弃去水洗液，最后用70-80%乙醇洗脱树脂床，洗脱流速为3BV/h，更优选的煎煮液通过D101型大孔树脂柱，流速为6BV/h，流出液弃去，用水冲洗，冲洗流速为6BV/h，弃去水洗液，最后用70%乙醇洗脱树脂床，洗脱流速为3BV/h。在本发明的一个具体实施方式中，大孔吸附树脂与药材按重量比为0.5-2:1，优选为1:1。

本发明所述的淫羊藿提取方法中，得到的淫羊藿提取物收率按重量比至少为2%，优选为3-10%，更优选为3-8%。提取物中淫羊藿苷的含量按重量比至少为5%，优选为5%-20%，最优选为5%-15%。

在本发明的一个实施方式中，所述中药组合物制备方法包括：取淫羊藿中20-100wt.%的淫羊藿单独提取，制备成清膏；取丹参用乙醇回流提取或渗漉提取，提取完全，合并提取液或渗漉液，回收乙醇并浓缩成清膏；丹参药渣与剩余的淫羊藿、地黄、骨碎补、黄芪、木耳加水煎煮提取，提取完全，合并煎液，浓缩成清膏；将黄瓜子炒熟粉碎成粗粉，压榨脱脂，烘干，与上述得到3种清膏混合。

在本发明的另一个实施方式中，所述中药组合物制备方法包括：取淫羊藿中20-100wt.%的淫羊藿单独提取，制备成清膏；取黄瓜子破碎，与木耳加水煎煮提取，提取完全，合并煎煮液，浓缩成清膏；取丹参用乙醇回流提取或渗漉提取，提取完全，合并提取液或渗漉液，回收乙醇并浓缩成清膏；丹参药渣与剩余的淫羊藿、地黄、骨碎补、黄芪加水煎煮提取，提取完全，合并煎液，浓缩成清膏；将上述得到的4种清膏混合。

在本发明的另一个实施方式中，所述中药组合物制备方法包括：取淫羊藿中20-100wt.%的淫羊藿单独提取，制备成清膏；取丹参用乙醇回流提取或渗漉提取，提取完全，合并提取液或渗漉液，回收乙醇并浓缩成清膏；黄瓜子炒孰粉碎成粗粉，压榨脱脂，烘干，与剩余淫羊藿、地黄、骨碎补、黄芪、木耳加水煎煮提取，提取完全，合并煎液，浓缩成清膏；将上述得到的3种清膏混合。

在本发明的另一个实施方式中，所述中药组合物制备方法包括：取淫羊藿中20-100wt.%的淫羊藿单独提取，制备成清膏；取丹参、剩余淫羊藿、地黄、骨碎补、黄芪、木耳用乙醇回流提取或渗漉提取，提取完全，合并提取液或渗漉液，回收乙醇并浓缩成清膏；丹参、剩余淫羊藿、地黄、骨碎补、黄芪、木耳提取后的药渣加水煎煮提取，提取完全，合并煎液，浓缩成清膏；将黄瓜子粉碎成粗粉，压榨脱脂，烘干，与上述得到的3种清膏混合。

在本发明的一个优选的实施方式中，所述中药组合物制备方法包括：取淫羊藿中20-100wt.%的淫羊藿单独提取，制备成清膏；取黄瓜子破碎，与木耳加水煎煮提取，提取完全，合并煎煮液，浓缩成清膏；取丹参用乙醇回流提取或渗漉提取，提取完全，合并提取液或渗漉液，滤过，回收乙醇并浓缩成清膏；丹参药渣与剩余的淫羊藿、地黄、骨碎补、黄芪加水煎煮提取，提取完全，合并煎液，静置，取上清液，经吸附树脂吸附，用60-80％乙醇洗脱，洗脱液回收乙醇，并浓缩清膏；将上述得到的4种清膏混合。

特别的，在本发明的一个优选的实施方式中，所述中药组合物制备方法包括：取淫羊藿中20-100wt.%的淫羊藿单独提取，制备成清膏；取黄瓜子破碎，与木耳加水煎煮二次，每次加水为黄瓜子和木耳重量的6-8倍，每次煎煮1.5-2.5小时，煎液分别滤过，滤液减压浓缩至清膏；丹参用乙醇回流提取二次，每次加乙醇为丹参重量的3-6倍，每次回流提取1.5-2.5小时滤过，合并滤液，回收乙醇并浓缩至清膏；丹参药渣与剩余淫羊藿、熟地黄、骨碎补、黄芪等药味加水煎煮三次，每次加水为药味重量的6-8倍，每次煎煮1-1.5小时，优选第一次煎煮1.5小时，第二、三次各煎煮1小时，合并煎液，静置，取上清液，经吸附树脂吸附，用60-80％乙醇洗脱，优选用70%乙醇洗脱，洗脱液回收乙醇，并浓缩至清膏；将上述得到的4种清膏混合。

本发明还提供了一种含有淫羊藿的中药组合物在制备预防或治疗骨质疏松的药物和/或保健品中的应用，其中中药组合物中淫羊藿苷含量至少为1.5wt.%。所述的中药组合物不仅可以直接刺激成骨细胞增殖及加强其活性，而且有促进骨量恢复和抑制骨吸收的作用，明显的提高性激素水平，对血睾酮和雌二醇水平显著升高，此外，中药组合物对性腺的良好促进作用，可能对衰老有所补益，同时可以使高密度脂蛋白水平显著升高，对心脑血管疾病的防治有积极的防治作用。

本发明所述的中药组合物及其制备方法，既能够最大限度的保留淫羊藿中的有效成分，提高组合物中淫羊藿苷的含量，保证中药组合物质量稳定，又考虑到了组合物中淫羊藿与其它药材的配伍，保证了组合物中药味共同发挥药效，实现对骨质疏松症的治疗。

具体实施方式

实施例1：20%重量份淫羊藿单独提取入药制备中药组合物

按重量份取以下原料药：淫羊藿100；熟地黄1400；骨碎补660；黄芪1000；丹参400；木耳530；黄瓜子530。取淫羊藿20份加水煎煮3次，每次加水为淫羊藿重量的12倍，每次煎煮1小时。合并煎煮液，静置，通过D101型大孔树脂柱，流速为6BV/h，流出液弃去，用水冲洗，冲洗流速为6BV/h，弃去水洗液，最后用70%乙醇洗脱树脂床，洗脱流速为3BV/h。收集醇洗脱液，回收乙醇，浓缩至适量，制备成清膏；丹参用70%乙醇回流提取二次，每次加乙醇为丹参重量的4倍，第一次回流提取2小时，第二次回流提取1.5小时，过滤，合并滤液，回收乙醇并浓缩至清膏；丹参药渣与剩余淫羊藿、熟地黄、骨碎补、黄芪、木耳等药味加水煎煮三次，每次加水为药味重量的8倍，第一次煎煮1.5小时，第二、三次各煎煮1小时，合并煎液，回收乙醇，并浓缩至清膏；将黄瓜子粉碎成粗粉，压榨脱脂，烘干，与上述得到3种清膏混合干燥，粉碎，装入胶囊，制成1000粒，包装，即得。

实施例2：50%重量份淫羊藿单独提取入药制备中药组合物

按重量份取以下原料药：淫羊藿1000；熟地黄130；骨碎补60；黄芪130；丹参60；木耳50；黄瓜子50。取淫羊藿500份加水煎煮2次，每次煎煮加水重量为淫羊藿原料重量的15倍，提取时间为1.5小时。合并煎煮液，静置，通过D101型大孔树脂柱，流速为4BV/h，流出液弃去，用水冲洗，冲洗流速为4BV/h，弃去水洗液，最后用60%乙醇洗脱树脂床，洗脱流速为2BV/h。收集醇洗脱液，回收乙醇，浓缩至适量，制备成清膏；丹参用80%乙醇回流提取3次，每次加乙醇为丹参重量的3倍，每次回流提取1.5小时，过滤，合并滤液，回收乙醇并浓缩至清膏；丹参药渣与剩余淫羊藿、熟地黄、骨碎补、黄芪、木耳等药味加水煎煮三次，每次加水为药味重量的10倍，每次煎煮1小时，合并煎液，回收乙醇，并浓缩至清膏；将黄瓜子粉碎成粗粉，压榨脱脂，烘干，与上述得到3种清膏混合干燥，加入适量辅料，制成颗粒1000克，包装，即得。

实施例3：80%重量份淫羊藿单独提取入药制备中药组合物

按重量份取以下原料药：淫羊藿500；熟地黄300；骨碎补300；黄芪700；丹参300；木耳200；黄瓜子200。取淫羊藿400份加水煎煮4次，每次煎煮加水重量为淫羊藿原料重量的10倍，提取时间为1小时。合并煎煮液，静置，通过D101型大孔树脂柱，流速为8BV/h，流出液弃去，用水冲洗，冲洗流速为8BV/h，弃去水洗液，最后用90%乙醇洗脱树脂床，洗脱流速为4BV/h。收集醇洗脱液，回收乙醇，浓缩至适量，制备成清膏；取黄瓜子破碎，与木耳加水煎煮提取3次，每次加水为黄瓜子与木耳重量的5倍，每次回流提取1小时，过滤，合并滤液，回收乙醇并浓缩至清膏；取丹参用90%乙醇浸渍24小时后进行渗漉，收集漉液，回收乙醇并浓缩至清膏；丹参药渣与剩余淫羊藿、熟地黄、骨碎补、黄芪等药味加水煎煮三次，每次加水为药味重量的5倍，每次煎煮1.5小时，合并煎液，回收乙醇，并浓缩至清膏；将上述得到的4种清膏混合，加入适量辅料，压制成1000片，包装，即得。

实施例4：100%重量份淫羊藿单独提取入药制备中药组合物

按重量份取以下原料药：淫羊藿:350；熟地黄464；骨碎补232；黄芪350；丹参232；木耳186；黄瓜子186。取淫羊藿加水煎煮3次，第一次加水为淫羊藿原料重量的15倍，煎煮1.5小时，第二次加水为淫羊藿原料重量的12倍，煎煮1小时，第三次加水为淫羊藿原料重量的12倍，煎煮1小时。合并煎煮液，静置，通过D101型大孔树脂柱，流速为6BV/h，流出液弃去，用水冲洗，冲洗流速为6BV/h，弃去水洗液，最后用70%乙醇洗脱树脂床，洗脱流速为3BV/h。收集醇洗脱液，回收乙醇，浓缩至适量，制备成清膏；取丹参、地黄、骨碎补、黄芪、木耳等药味用75%乙醇回流提取二次，每次加乙醇为药味重量的4倍，第一次回流提取2小时，第二次回流提取1.5小时，过滤，合并滤液，回收乙醇并浓缩至清膏；丹参、地黄、骨碎补、黄芪、木耳提取后的药渣加水煎煮三次，每次加水为药渣重量的8倍，第一次煎煮1.5小时，第二、三次各煎煮1小时，合并煎液，回收乙醇，并浓缩至清膏；将黄瓜子粉碎成粗粉，压榨脱脂，烘干，与上述得到的3种清膏混合干燥，粉碎，装入胶囊，制成1000粒，包装，即得。

实施例5：淫羊藿单独提取影响因素实验

本实验通过探讨不同提取溶媒、煎煮时间、药材粉碎度对淫羊藿苷含量的影响，考察制备组合物中淫羊藿提取物的影响因素。

仪器与试剂

美国HP1100型高效液相色谱仪。淫羊藿苷对照品（批号：20121108，中国药品生物制品检定所，供含量测定用）。淫羊藿药材由山东海王医药有限公司提供，经鉴定为巫山淫羊藿Epimedium wushanense T.S.Yingo甲醇、乙腈为色谱纯，其余试剂均为分析纯。

方法与结果

a.淫羊藿苷的含量测定

色谱条件色谱柱：HP Spherisorb ODS2(250×4mm，5μm），流动相：乙腈-水（30:70），检测波长270nm，柱温25℃，流速1mL/min。

线性范围分别精密吸取淫羊藿苷对照品溶液（0.206mg/mL）0.5，2.5，5.0，7.5，10μL，按上述色谱条件进样测定，以对照品进样量为横坐标，峰面积积分值为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程：Y=2131.02921X-8.16197，r＝0.9999，淫羊藿苷在0.10～2.06μg范围内与峰面积呈良好的线性关系。

b.不同提取溶媒对淫羊藿苷提取率的影响

取淫羊藿药材粉末（50目）约0.2g共6份，精密称重，其中5份置60mL圆底烧瓶中，分别以30％乙醇、50％乙醇、70％乙醇、无水乙醇、水各20mL为提取溶媒，回流提取1h；另1份置100mL三角烧瓶中，加水20mL加热提取1h。待提取液冷却至室温，用50％乙醇定容至25mL，摇匀，0.45μm微孔滤膜过滤，取续滤液作为供试品溶液，高效液相色谱法测定样品中淫羊藿苷的含量。结果见表1。

表1不同提取溶媒对淫羊藿苷提取率的影响

采用不同的提取溶媒，淫羊藿苷的提取率有较大差异，以高浓度乙醇和无水乙醇为提取溶媒，淫羊藿苷含量均较低，而采用纯水提取，淫羊藿苷含量明显增高，提示在实际生产中，对含淫羊藿药材的处方，可考虑以纯水提取，不仅有利于提高指标成分的含量，而且可降低生产成本。

c.不同煎煮时间及提取溶媒用量对淫羊藿苷提取率的影响

取淫羊藿药材粉末(50目)约0.2g共14份，置100mL三角烧瓶中，精密称重，分别以水10mL、20mL提取0.5，1，1.5，2，3，4，5h，待提取液冷却至室温，50%乙醇定容至25mL，摇匀，0.45μm微孔滤膜过滤，取续滤液作为供试品溶液，高效液相色谱法测定样品中淫羊藿苷的含量。结果见表2。

表2不同煎煮时间及提取溶媒用量对淫羊藿苷提取率的影响(%)

随着煎煮时间和提取溶媒量的增加，淫羊藿苷的溶出量呈递增趋势，但煎煮时间过长会导致淫羊藿苷的破坏。实验结果表明，当煎煮时间超过2h，淫羊藿苷的含量明显下降，说明持续的高温加热会引起淫羊藿苷的成分变化，提示在含淫羊藿的制剂工艺设计中，应尽量避免长时间煎提，以1-1.5小时为宜。

d.不同粉碎度对淫羊藿苷提取率的影响

取未经粉碎的淫羊藿叶片、淫羊霍叶片粉末（粉碎度分别为20目和50目）各约0.29，精密称定重量，置100mL三角烧瓶中，加水20mL，加热提取2h，其余操作同上，重复操作2次，取平均值。结果见表3。

表3不同粉碎度对淫羊霍苷提取率的影响

粉碎度	未经粉碎	20目	50目
				淫羊霍苷含量/%	0.51	0.52	0.54

结果表明，粉碎度对淫羊藿苷的浸出影响不大，这可能与叶片类药材的质地较疏松有关。提示在叶片类药材，即使是革质类叶片的提取过程中，只要有足够的溶媒使药材完全浸润，就能保证药材得到较完全的提取。

实施例6：淫羊藿单独提取后入药与合并提取入药对有效成分的影响实验

100%淫羊藿单独提取入药组：按照实施例5的方法制备得到中药组合物胶囊；

50%淫羊藿单独提取入药组：按照实施例2的方法制备得到中药组合物胶囊；

20%淫羊藿单独提取入药组：按照实施例1的方法制备得到中药组合物胶囊；

对照组：按照CN100418053C实施例3中记载的方法制备得到中药组合物胶囊，即黄瓜子破碎，与木耳加水煎煮二次，每次加水8倍量，第一次煎煮2.5小时，第二次煎煮1.5小时，煎液分别滤过，滤液减压浓缩至相对密度约为1.18(65℃)的清膏；丹参用乙醇回流提取二次，每次加乙醇为丹参重量的4倍，第一次回流提取2小时，第二次回流提取1.5小时，过滤，合并滤液，回收乙醇并浓缩至相对密度约为1.18(65℃)的清膏；丹参药渣与淫羊藿、熟地黄、骨碎补、黄芪等药味加水煎煮三次，每次加水为药味重量的8倍，第一次煎煮1.5小时，第二、三次各煎煮1小时，合并煎液，静置8小时，取上清液，经吸附树脂吸附，用70％乙醇洗脱，洗脱液回收乙醇，并浓缩至相对密度约为1.18(65℃)的清膏；取上述清膏，干燥，粉碎，装入胶囊，制成1000粒。

表4单独/合并提取对淫羊霍苷提取率的影响

结果表明，淫羊藿单独水提取和单独醇提取淫羊藿苷含量都分别略高于合并水提取和醇提取，因此，可以推测合煎时某些成分的存在不利于淫羊藿苷的溶出，提示采用淫羊藿单独水提取工艺。

实施例7：不同比例淫羊藿单独提取对疗效的影响

探讨骨疏康颗粒中不同比例淫羊藿单独提取对疗效的影响，进行了骨疏康颗粒对糖皮质激素性骨质疏松模型的研究。

1.材料

1.1实验动物

斯泼累格·多雷（Sprague Dawley，SD）清洁型雌性大鼠60只，由山东大学实验动物中心提供，许可证号SCXK（鲁）2012-0003。

1.2药物

骨疏康颗粒1号（其中淫羊藿与其他药材混合提取），骨疏康颗粒2号（其中淫羊藿20%单独提取），骨疏康颗粒3号（其中淫羊藿50%单独提取），骨疏康颗粒4号（其中淫羊藿全部单独提取）；地塞米松磷酸钠注射液(江苏涟水制药有限公司。产品批号：E090725)。

1.3主要实验设备及仪器

(1).三级动物实验室（医学实验动物环境为鼠类实验室，清洁级，合格证书23-016，山东大学药学院提供）。

(2).美国GE公司产LUNAR DPX-MD+型双能X线骨密度仪。

2.方法

2.1动物分组

将60只SD清洁型雌性大鼠观察1周后，随机分为四组：空白对照组、模型组、药物1号组、药物2号组、药物3号组、药物4号组，每组各10只。各组动物均在18～24℃通风良好，湿度在60-70%的环境下饲养，自由饮水、摄食。

2.2动物造模

（1）空白对照组：同时每日用注射器灌胃生理盐水（灌胃剂量为：1ml）。

（2）模型组：每周2次肌肉注射地塞米松，每次注射量为：0.2mg/100g，连续用药12周。同时，每日用注射器灌胃生理盐水（灌胃剂量为：1ml）。

（3）药物1号组：每周2次肌肉注射地塞米松，每次注射量为：0.2mg/100g，连续用药12周，同时采用灌胃法给予骨疏康颗粒1号的水溶悬浊液每日灌胃1次，每次10mg/kg，连续用药治疗12周。

（4）药物2号组：每周2次肌肉注射地塞米松，每次注射量为：0.2mg/100g，连续用药12周，同时采用灌胃法给予骨疏康颗粒2号的水溶悬浊液每日灌胃1次，每次10mg/kg，连续用药治疗12周。

（5）药物3号组：每周2次肌肉注射地塞米松，每次注射量为：0.2mg/100g，连续用药12周，同时采用灌胃法给予骨疏康颗粒3号的水溶悬浊液每日灌胃1次，每次10mg/kg，连续用药治疗12周。

（6）药物4号组：每周2次肌肉注射地塞米松，每次注射量为：0.2mg/100g，连续用药12周，同时采用灌胃法给予骨疏康颗粒4号的水溶悬浊液每日灌胃1次，每次10mg/kg，连续用药治疗12周。

2.3检测指标

大鼠处死前1天，用DEXA骨密度仪及所附小动物梯级标准模型和分析软件在其腰椎体进行扫描，得出大鼠腰椎的骨密度（BMD）和骨含量（BMC）。(注：大鼠BMD、BMC扫描部位L3)

2.4统计学处理

所有实验进行数据均使用SPSS11.5版统计软件处理，检测结果以均数

表示，多组间差异的显著性采用单因素方差分析（F检验），用student-newman-kruls法进行组间的两两比较。

3.结果

3.1骨密度（BMD）检测

表5各组实验动物腰椎体的BMD对比

组别	BMD（g/cm2）
		空白组	0.395±0.121#
模型组	0.237±0.0154
		药物1号组	0.317±0.0130*
药物2号组	0.335±0.0157*
		药物3号组	0.369±0.0142**
药物4号组	0.398±0.0165**

注：12周治疗后，第3腰椎体BMD与模型组比较：*P<0.05，**P<0.01，#P<0.01。

3.2骨含量（BMC）检测

表6各组实验动物腰椎体的BMC对比

组别	BMC（g）
		空白组	1.2435±0.00874＃
模型组	0.6204±0.00965
		药物1号组	0.8125±0.01023*
药物2号组	0.9731±0.01157*
		药物3号组	1.1958±0.01326**
药物4号组	1.2653±0.01424**

注：12周治疗后，第3腰椎体BMC与模型组比较：*P<0.05，**P<0.01，#P<0.01。

4.结论

本实验从造模12周后各组第3腰椎体BMD、BMC来看，如表5和6所示，药物4号组腰椎的BMD/BMC平均值接近正常对照组(P>0.05)，优于药物1、2、3号组；且骨疏康颗粒中淫羊藿单独提取的比例与其治疗SD大鼠骨质疏松模型的疗效呈现正向关系。

Claims (10)

1.一种含有淫羊藿的中药组合物，原料药按重量份包括：淫羊藿100-1000；熟地黄130-1400；骨碎补60-660；黄芪130-1400；丹参60-660；木耳50-530；黄瓜子50-530，其特征在于，原料药淫羊藿中20-100wt.%的淫羊藿单独提取，或者，50-100wt.%的淫羊藿单独提取，或者，80-100wt.%的淫羊藿单独提取。

2.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，所述淫羊藿的单独提取包括如下步骤，包括将淫羊藿原料粉碎后，加水煎煮2-4次，每次煎煮加水重量为淫羊藿原料重量的10-15倍，每次提取时间为1-1.5小时，煎煮液通过大孔吸附树脂柱精制，浓缩干燥。

3.如权利要求2所述的中药组合物，其特征在于，所述淫羊藿的单独提取包括如下步骤，包括将淫羊藿原料粉碎后，加水煎煮3次，第一次加水为淫羊藿原料重量的15倍，煎煮1.5小时，第二次加水为淫羊藿原料重量的12倍，煎煮1小时，第三次加水为淫羊藿原料重量的12倍，煎煮1小时，煎煮液通过大孔吸附树脂柱精制，浓缩干燥。

4.如权利要求2或3所述的中药组合物，其特征在于，所述的煎煮液通过大孔吸附树脂柱精制步骤包括：合并煎煮液，静置，通过D101型大孔树脂柱，流速为4-8BV/h，流出液弃去，用水冲洗，冲洗流速为4-8BV/h，弃去水洗液，最后用60-90%乙醇洗脱树脂床，洗脱流速为2-4BV/h。

5.如权利要求4所述的中药组合物，其特征在于，所述煎煮液通过大孔吸附树脂柱精制步骤包括：合并煎煮液，静置，通过D101型大孔树脂柱，流速为6BV/h，流出液弃去，用水冲洗，冲洗流速为6BV/h，弃去水洗液，最后用70%乙醇洗脱树脂床，洗脱流速为3BV/h。

6.一种含有淫羊藿的中药组合物，原料药按重量份包括：淫羊藿100-1000；熟地黄130-1400；骨碎补60-660；黄芪130-1400；丹参60-660；木耳50-530；黄瓜子50-530，其特征在于，所述中药组合物中淫羊藿苷含量至少为1.5wt.%。

7.如权利要求6所述的中药组合物，其特征在于，所述中药组合物中淫羊藿苷含量至少为1.8wt.%，或者，所述中药组合物中淫羊藿苷含量至少为2.0wt.%。

8.一种含有淫羊藿的中药组合物的制备方法，其特征在于，所述中药组合物的原料药按重量份包括：淫羊藿100-1000；熟地黄130-1400；骨碎补60-660；黄芪130-1400；丹参60-660；木耳50-530；黄瓜子50-530，包括如下步骤：取淫羊藿中20-100wt.%的淫羊藿单独提取，制备成清膏；取黄瓜子破碎，与木耳加水煎煮提取，提取完全，合并煎煮液，浓缩成清膏；取丹参用乙醇回流提取或渗漉提取，提取完全，合并提取液或渗漉液，回收乙醇并浓缩成清膏；丹参药渣与剩余的淫羊藿、地黄、骨碎补、黄芪加水煎煮提取，提取完全，合并煎液，浓缩成清膏；将上述得到的4种清膏混合。

9.一种含有淫羊藿的中药组合物的制备方法，其特征在于，所述中药组合物的原料药按重量份包括：淫羊藿100-1000；熟地黄130-1400；骨碎补60-660；黄芪130-1400；丹参60-660；木耳50-530；黄瓜子50-530，包括如下步骤：取淫羊藿中20-100wt.%的淫羊藿单独提取，制备成清膏；取丹参用乙醇回流提取或渗漉提取，提取完全，合并提取液或渗漉液，回收乙醇并浓缩成清膏；丹参药渣与剩余的淫羊藿、地黄、骨碎补、黄芪、木耳加水煎煮提取，提取完全，合并煎液，浓缩成清膏；将黄瓜子炒孰粉碎，压榨脱脂，烘干，与上述得到的3种清膏混合。

10.一种含有淫羊藿的中药组合物的制备方法，其特征在于，所述中药组合物的原料药按重量份包括：淫羊藿100-1000；熟地黄130-1400；骨碎补60-660；黄芪130-1400；丹参60-660；木耳50-530；黄瓜子50-530，包括如下步骤：取淫羊藿中20-100wt.%的淫羊藿单独提取，制备成清膏；取丹参、剩余淫羊藿、地黄、骨碎补、黄芪、木耳用乙醇回流提取或渗漉提取，提取完全，合并提取液或渗漉液，回收乙醇并浓缩成清膏；丹参、剩余淫羊藿、地黄、骨碎补、黄芪、木耳提取后的药渣加水煎煮提取，提取完全，合并煎液，浓缩成清膏；将黄瓜子粉碎，压榨脱脂，烘干，与上述得到的3种清膏混合。