CN111458421B - 一种成熟油菜蜂蜜的鉴别方法 - Google Patents

一种成熟油菜蜂蜜的鉴别方法 Download PDF

Info

Publication number
CN111458421B
CN111458421B CN202010177424.0A CN202010177424A CN111458421B CN 111458421 B CN111458421 B CN 111458421B CN 202010177424 A CN202010177424 A CN 202010177424A CN 111458421 B CN111458421 B CN 111458421B
Authority
CN
China
Prior art keywords
honey
mature
time
flow rate
flight mass
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202010177424.0A
Other languages
English (en)
Other versions
CN111458421A (zh
Inventor
赵柳微
王凯
郭娜娜
吴黎明
薛晓锋
彭文君
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Institute of Apicultural Research of Chinese Academy of Agricultural Sciences
Original Assignee
Institute of Apicultural Research of Chinese Academy of Agricultural Sciences
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Institute of Apicultural Research of Chinese Academy of Agricultural Sciences filed Critical Institute of Apicultural Research of Chinese Academy of Agricultural Sciences
Priority to CN202010177424.0A priority Critical patent/CN111458421B/zh
Publication of CN111458421A publication Critical patent/CN111458421A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN111458421B publication Critical patent/CN111458421B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G01N30/06—Preparation
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
    • G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
    • G01N30/34—Control of physical parameters of the fluid carrier of fluid composition, e.g. gradient
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/62—Detectors specially adapted therefor
    • G01N30/72—Mass spectrometers
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G01N30/06—Preparation
    • G01N2030/062—Preparation extracting sample from raw material

Landscapes

  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)
  • Sampling And Sample Adjustment (AREA)

Abstract

本发明提供一种成熟油菜蜂蜜的鉴别方法，该方法采用液相色谱‑四极杆‑飞行时间质谱对待测蜂蜜进行检测，以207.07±0.01质量数准分子离子峰为特征峰，当飞行时间质谱中含有所述特征峰，则判定所述待测蜂蜜为成熟油菜蜂蜜。本发明确定了207.07±0.01质量数准分子离子峰可以作为鉴别成熟油菜蜂蜜的特征峰，只有成熟油菜蜂蜜中才含有该特征峰，而非成熟油菜蜂蜜中是没有该特征峰的。以此方法来鉴别成熟油菜蜂蜜既快速又准确，对于成熟油菜蜂蜜的鉴别具有重要意义，为控制蜂蜜质量和维持市场秩序提供保障。

Description

一种成熟油菜蜂蜜的鉴别方法
技术领域
本发明属于蜂蜜鉴别领域，具体涉及一种成熟油菜蜂蜜的鉴别方法。
背景技术
蜂蜜是蜜蜂采集植物花蜜或分泌物，与自身分泌物混合后经充分酿造而成的天然甜味物质。气味清香浓郁，味道纯真甜美。
蜂蜜有成熟蜂蜜和非成熟蜂蜜之分。成熟蜂蜜是指经过蜜蜂充分酿造后的蜂蜜。蜜蜂把蜜酿造好后会集中储藏在蜂房中，并用蜂蜡封盖。此时取蜜必须用割蜜刀割除蜜盖，非常费工费事。这样的蜂蜜久放后会结晶(蜂蜜整体的凝结)，无需经过任何加工，并可长期保存而不变质。而非成熟蜂蜜没有经过充分的酿造，酿造时间短，蜂蜜中水分含量多，高分子糖没有完全分解，蜂酶含量低，蜜较稀，其营养价值远不如成熟蜂蜜。
但由于蜂蜜没有成熟时蜜蜂没有把蜜封盖储藏，蜂农取蜜比较省事，所以大都不等到蜜成熟就取出。这样成本低、产量高，加上目前成熟蜂蜜的鉴别繁琐，用户不宜识别。因此，现在市场上的蜂蜜绝大多数不是成熟蜂蜜，而是非成熟蜂蜜经过加工浓缩得到的，严重扰乱市场秩序和损害消费者利益。而油菜蜂蜜占了蜂蜜市场的四成左右，因此本发明旨在提供一种较为方便准确的鉴别成熟油菜蜂蜜的方法。
发明内容
针对现有技术存在的问题，本发明提供一种成熟油菜蜂蜜的鉴别方法。
本发明提供一种成熟油菜蜂蜜的鉴别方法，采用液相色谱-四极杆-飞行时间质谱对待测蜂蜜进行检测，以207.07±0.01质量数准分子离子峰为特征峰，当飞行时间质谱中含有所述特征峰，则判定所述待测蜂蜜为成熟油菜蜂蜜。
采用上述方法可快速准确地鉴别出待测蜂蜜是否为成熟蜂蜜，为控制蜂蜜质量和维持市场秩序提供保障。
进一步地，所述液相色谱-四极杆-飞行时间质谱中液相色谱的检测条件为：
色谱柱为C18色谱柱；流动相A为0.1％甲酸水溶液，流动相B为甲醇；梯度洗脱的程序为：0-1min流动相B的体积分数增加至5％，1-6min流动相B的体积分数由5％增加至55％，6-20min流动相B的体积分数由55％增加到95％，20-26min流动相B的体积分数维持在95％，26-27min流动相B的体积分数下降至5％。
进一步优选地，所述色谱柱为Proshell 120EC-C18色谱柱，其规格为2.1mm×100mm，2.7μm，流动相的流速为0.25mL/min；进样量为2μL；柱温为30±1℃。
进一步地，所述液相色谱-四极杆-飞行时间质谱中四极杆-飞行时间质谱的检测条件为：
ESI，负离子模式；干燥气温度：310～330℃；干燥气流速：7～9L/min；鞘气温度：340～360℃；鞘气流速：10～12L/min；喷雾气压力：38～42psi；毛细管电压：3400～3600V；喷嘴电压：800～1100V。
进一步优选地，所述四极杆-飞行时间质谱的检测条件为：ESI，负离子模式；干燥气温度：320℃；干燥气流速：8L/min；鞘气温度：350℃；鞘气流速：11L/min；喷雾气压力：40psi；毛细管电压：3500V；喷嘴电压：1000V。上述条件下可提高检测的灵敏度和目标离子的响应值。
进一步地，检测前对所述待测蜂蜜进行如下预处理：
(1)将所述待测蜂蜜充分溶于纯净水中，形成蜂蜜溶液；
(2)将步骤(1)所得蜂蜜溶液通过活化后的固相萃取小柱，吸附蜂蜜中的有效成分；
(3)将步骤(2)得到的吸附有有效成分的洗脱柱，先用纯水淋洗两遍，然后用甲醇洗脱并收集洗脱液；
(4)将步骤(3)所得洗脱液进行浓缩，去除甲醇后得固形物，将所得固形物复溶于甲醇，即得进样溶液。
进行上述预处理是为了提取蜂蜜中的目标物(特征峰物质)，同时尽可能得去除蜂蜜中的糖类等杂质，以有利于目标物的检测。
优选地，步骤(1)中所述待测蜂蜜与纯净水的质量体积比为1:2。
优选地，步骤(2)中所述蜂蜜溶液以1mL/min的流速通过所述固相萃取小柱。
本发明的有益效果：
本发明确定了207.07±0.01质量数准分子离子峰可以作为鉴别成熟油菜蜂蜜的特征峰，只有成熟油菜蜂蜜中才含有该特征峰，而非成熟油菜蜂蜜中是没有该特征峰的。以此方法来鉴别成熟油菜蜂蜜既快速又准确，对于成熟油菜蜂蜜的鉴别具有重要意义，为控制蜂蜜质量和维持市场秩序提供保障。
附图说明
图1为非成熟油菜蜂蜜(A)、成熟油菜蜂蜜(B)提取物Q-TOF分析总离子图；
图2为成熟油菜蜂蜜提取物Q-TOF分析特征离子207.0663提取色谱图；
图3为非成熟油菜蜂蜜提取物Q-TOF分析特征离子207.0663提取色谱图。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件，或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可通过正规渠道商购买得到的常规产品。
实施例1
本实施例提供一种成熟油菜蜂蜜的鉴别方法，包括如下步骤：
S1、从蜂场采集天然封盖的成熟油菜蜂蜜作为待测样品
S2、待测样品预处理得到蜂蜜提取物
1)称取待测油菜蜂蜜5g，将蜂蜜放入50mL离心管中，加入10mL纯水，超声溶解20min，得蜂蜜的水溶液；
2)将SPE柱安装在固相萃取装置上，分别用5mL甲醇和5mL纯水淋洗，后加入蜂蜜溶液，蜂蜜中的有效物质被吸附在SPE柱填充物上；
3)吸附有蜂蜜有效物质的SPE柱首先经10mL纯水淋洗两遍，然后用8mL甲醇洗脱，收集洗脱液；
4)将所述洗脱液用氮吹仪浓缩至固形物，所述固形物经1mL甲醇超声溶解，移至1.5mL离心管中，用0.2μm滤膜过滤，得进样溶液，即蜂蜜提取物。
S3、样品检测
采用安捷伦高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱(Agilent 1290HPLC-Q-TOF/MS6545)进行检测，数据处理采用Agilent Masshunter工作站。
HPLC条件如下：
色谱柱：Proshell 120EC-C18色谱柱(2.1mm×100mm，2.7μm)；
流速：0.25mL/min；
流动相：0.1％甲酸水溶液(A)，甲醇(B)；
梯度洗脱：0-1min 5％B，1-6min 5％-55％B，6-20min 55％-95％B，20-26min95％B；26-27min，5％B；
进样量2μL；
柱温：30℃。
Q-TOF/MS条件如下：
ESI负离子，气体温度(Gas Temp)：320℃；气体流速(Gas Flow):8L/min；喷雾气压力(Nebulizer)：40psi；毛细管电压：3500V；喷嘴电压：1000V；鞘气温度(Sheath Temp)：350℃；鞘气流速(Sheath Gas Flow)：11L/min；
扫描方式：MS scan全扫描，质量数范围100-1700，参比实时校正。
经过检测，成熟油菜蜂蜜提取物Q-TOF分析总离子图如图1中的B所示，成熟油菜蜂蜜提取物Q-TOF分析特征离子207.0663提取色谱图如图2所示。
实施例2
从蜂场采集未封盖的非成熟油菜蜂蜜作为待测样品，采用如实施1所述的方法对其进行检测，结果非成熟油菜蜂蜜提取物Q-TOF分析总离子图如图1中的A所示，非成熟油菜蜂蜜提取物Q-TOF分析特征离子207.0663提取色谱图如图3所示。
从图2与图3的比较可知，207.07±0.01质量数准分子离子峰可以作为鉴别成熟油菜蜂蜜的特征峰，只有成熟油菜蜂蜜中才含有该特征峰，而非成熟油菜蜂蜜中是没有该特征峰的。经过多次重复试验，结果依然如此。
虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (5)

1.一种成熟油菜蜂蜜的鉴别方法，其特征在于，采用液相色谱-四极杆-飞行时间质谱对待测蜂蜜进行检测，以保留时间7.775min，207.07±0.01质量数准分子离子峰为特征峰，当飞行时间质谱中含有所述特征峰，则判定所述待测蜂蜜为成熟油菜蜂蜜；
所述液相色谱-四极杆-飞行时间质谱中液相色谱的检测条件为：
色谱柱为Proshell 120 EC-C18色谱柱，其规格为2.1mm×100mm，2.7μm；流动相A为0.1%甲酸水溶液，流动相B为甲醇；流动相的流速为0.25mL/min；进样量为2μL；柱温为30±1℃；梯度洗脱的程序为：0-1min 5% B，1-6min 5%-55%B，6-20min 55%-95%B，20-26min 95%B；26-27 min，5%B；
所述液相色谱-四极杆-飞行时间质谱中四极杆-飞行时间质谱的检测条件为：
ESI，负离子模式；干燥气温度：310~330℃；干燥气流速：7~9 L/min；鞘气温度：340~360℃；鞘气流速：10~12L/min；喷雾气压力：38~42psi；毛细管电压：3400~3600 V；喷嘴电压：800~1100 V。
2.根据权利要求1所述的鉴别方法，其特征在于，所述四极杆-飞行时间质谱的检测条件为：
ESI，负离子模式；干燥气温度：320℃；干燥气流速：8L/min；鞘气温度：350℃；鞘气流速：11L/min；喷雾气压力：40psi；毛细管电压：3500 V；喷嘴电压：1000 V。
3.根据权利要求1或2所述的鉴别方法，其特征在于，检测前对所述待测蜂蜜进行如下预处理：
（1）将所述待测蜂蜜充分溶于纯净水中，形成蜂蜜溶液；
（2）将步骤（1）所得蜂蜜溶液通过活化后的固相萃取小柱，吸附蜂蜜中的有效成分；
（3）将步骤（2）得到的吸附有有效成分的洗脱柱，先用纯水淋洗两遍，然后用甲醇洗脱并收集洗脱液；
（4）将步骤（3）所得洗脱液进行浓缩，去除甲醇后得固形物，将所得固形物复溶于甲醇，即得进样溶液。
4.根据权利要求3所述的鉴别方法，其特征在于，步骤（1）中所述待测蜂蜜与纯净水的质量体积比为1:2。
5.根据权利要求3所述的鉴别方法，其特征在于，步骤（2）中所述蜂蜜溶液以1mL/min的流速通过所述固相萃取小柱。
CN202010177424.0A 2020-03-13 2020-03-13 一种成熟油菜蜂蜜的鉴别方法 Active CN111458421B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010177424.0A CN111458421B (zh) 2020-03-13 2020-03-13 一种成熟油菜蜂蜜的鉴别方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010177424.0A CN111458421B (zh) 2020-03-13 2020-03-13 一种成熟油菜蜂蜜的鉴别方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN111458421A CN111458421A (zh) 2020-07-28
CN111458421B true CN111458421B (zh) 2022-06-17

Family

ID=71684295

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202010177424.0A Active CN111458421B (zh) 2020-03-13 2020-03-13 一种成熟油菜蜂蜜的鉴别方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN111458421B (zh)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112098530B (zh) * 2020-07-30 2022-07-08 中国农业科学院蜜蜂研究所 ɑ-亚麻酸、亚油酸联合作为特征识别物在翅果油蜂蜜鉴别中的应用
CN111896649A (zh) * 2020-08-03 2020-11-06 西北大学 一种成熟蜂蜜和未成熟蜂蜜的鉴别方法
CN113820434B (zh) * 2021-11-23 2022-02-18 中国农业科学院蜜蜂研究所 一种洋槐蜜成熟度的鉴别方法
CN114384183B (zh) * 2022-01-18 2024-02-27 秦皇岛海关技术中心 一种葫芦巴碱的检测方法及其在蜂蜜鉴别中的应用

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103278573B (zh) * 2013-04-26 2014-11-26 中国农业科学院蜜蜂研究所 一种油菜蜜和荆条蜜的鉴别方法
CN103215373B (zh) * 2013-05-10 2014-11-05 中国检验检疫科学研究院 用于检测蜂蜜的组合物、试剂盒、检测方法及应用
CN103487540B (zh) * 2013-07-30 2015-05-13 中国标准化研究院 一种利用动态顶空技术检测油菜蜜香气成分的方法
CN105372341A (zh) * 2015-06-30 2016-03-02 西北大学 油菜蜜酚类特征标识物的鉴别方法
CN108152389A (zh) * 2017-12-03 2018-06-12 西北大学 一种鉴别荔枝蜜的方法
CN108072742A (zh) * 2017-12-21 2018-05-25 西北大学 一种鉴别成熟油蜂蜜的方法
CN108645829B (zh) * 2018-05-15 2021-01-15 中国农业科学院蜜蜂研究所 一种快速识别蜂蜜品种和掺假蜂蜜的方法
CN108845050B (zh) * 2018-06-21 2021-08-06 中国农业科学院蜜蜂研究所 一种夏枯草蜂蜜的鉴别方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN111458421A (zh) 2020-07-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN111458421B (zh) 一种成熟油菜蜂蜜的鉴别方法
CN111458422B (zh) 一种成熟油菜蜂蜜的鉴别方法
CN103353488B (zh) 一种测定蔬果中百菌清、克菌丹、敌菌丹和灭菌丹残留的方法
CN108845050B (zh) 一种夏枯草蜂蜜的鉴别方法
CN111189939A (zh) 一种利用超高效液相色谱-串联质谱检测植物内源游离氨基酸的方法
CN110819452A (zh) 糖苷键合态香气物质的提取方法及猕猴桃酒的制备方法
JP2017049024A (ja) 最終糖化産物分析のための試料の調製方法及び最終糖化産物の分析方法
CN104730185B (zh) 掺假蜂蜜中甜菜糖浆特征物的快速检测方法
Flath et al. Volatiles in Gravenstein apple essence identified by GC-mass spectrometry
CN106645477A (zh) 一种检测氟苯尼考胺残留的方法及应用
CN111426776B (zh) Hqr作为鸭脚木蜂蜜特征性标志物的应用
CN117192001A (zh) 血清样本中亚油酸全通路代谢物的检测方法
CN112697931B (zh) 三叶豆苷作为胡枝子蜜特征性标志物的应用
CN112394129A (zh) 一种浸膏类香精香料的化学成分分析前处理方法
CN109374765B (zh) 一种全自动在线spe-lc-ms/ms定量分析植物样品中内源性独脚金内酯的方法
CN217007145U (zh) 一种与仪器分析同步的香精成分人工嗅闻装置
CN110749670B (zh) 一种在线检测植物样品中褪黑素的方法
CN104165947A (zh) 一种定量测定植物中生长素与脱落酸含量的方法
CN108051522B (zh) 一种适制花果香型茶叶的茶树种质快速鉴定方法
CN112461959A (zh) 一种鉴别夏枯草蜂蜜的方法及其应用
CN112098530A (zh) ɑ-亚麻酸、亚油酸联合作为特征识别物在翅果油蜂蜜鉴别中的应用
CN112505208A (zh) 一种高纯碳酸酯溶剂中痕量有机杂质的检测方法及其应用
CN111398491A (zh) 一种污泥中阿特拉津农药残留量的检测方法
CN109725098B (zh) 一种烟气钩藤碱转移率和滤嘴钩藤碱截留率测定方法
De Boer et al. Mass spectrometric characterization of different norandrosterone derivatives by low‐cost mass spectrometric detectors using electron ionization and chemical ionization

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant