CN111437335A - 一种杀灭非洲猪瘟病毒的植物细胞酶解提取物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种杀灭非洲猪瘟病毒的植物细胞酶解提取物及其制备方法。该方法包括：S1、将新鲜的洋葱去皮、香蕉皮、苦瓜、黄连洗净，混合后破碎，过筛后得混合物备用；S2：按1:1:1的质量比例，向制得的混合物中加入食用陈醋和粮食酒，加淀粉蛋白酶，高速旋转搅拌1‑3分钟，每天搅拌1‑2次，并连续搅拌5‑6天；S3：再向S2中加入细胞融合酶，静止30‑40天；S4:常温下进行分离提纯，将提取物沉清过滤，按1：0.25的质量比例，加入羧甲基纤维素钠混合即可。本发明的植物细胞酶解提取物是一种新型活性小分子肽物质，对杀非洲猪瘟病毒，治疗非洲猪瘟瘟病有明显效果，且无副作用。

Description

一种杀灭非洲猪瘟病毒的植物细胞酶解提取物及其制备方法

技术领域

本发明涉及生物制药技术领域，尤其是涉及一种杀灭非洲猪瘟病毒的植物细胞酶解提取物及其制备方法。

背景技术

非洲猪瘟病毒是一种能够感染家猪和各种野猪(如非洲野猪、欧洲野猪等)，引起急性、出血性的烈性传染病。其特征是发病过程短，最急性和急性感染死亡率高达100％，临床表现为发热(达40-42℃)，心跳加快，呼吸困难，部分咳嗽，眼、鼻有浆液性或粘液性脓性分泌物，皮肤发绀，淋巴结、肾、胃肠粘膜明显出血，成猪发病病程一般为7-10天，幼猪2-3天，可通过母幼垂直传播，潜伏期一般为7-19天。

非洲猪瘟临床症状与猪瘟症状相似，非洲猪瘟区别于其它已知猪瘟，非洲猪瘟更加凶险、烈性，目前无方法治疗及免疫，其病毒种属及形态只能依靠实验室监测确诊。在感染非洲猪瘟后，目前常规的治疗方法均是使用大量抗生素，但是都会对猪产生副作用，使猪产生耐药性，且在体内产生药物残留。

发明内容

本发明的目的是提供一种杀灭非洲猪瘟病毒的植物细胞酶解提取物及其制备方法。该提取物以食用植物的根茎和果实，通过植物细胞的基因转换、重组，建立细胞活性酶转换模型，诱导转换酶中的定向活性物质释放，靶向结合非洲猪瘟病毒的体表，改变非洲猪瘟病毒体表的蛋白合成。同时增强WBC的吞噬能力，增强机体免疫功能，提高血清备解素，对动物感染性疾病的治疗有着重要的意义。

为了达到上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种杀灭非洲猪瘟病毒的植物细胞酶解提取物的制备方法，包括如下步骤：

S1、将新鲜的洋葱去皮、香蕉皮、苦瓜、黄连洗净，混合后破碎，过10-20目筛后得混合物备用；

S2：按1:1:1的质量比例，向制得的混合物中加入食用陈醋和粮食酒，置于酶解容器中，加淀粉蛋白酶，高速旋转搅拌1-3分钟，每天搅拌1-2次，并连续搅拌5-6天；

S3：再向S2中加入细胞融合酶，静止30-40天；

S4:常温下进行分离提纯，将提取物沉清过滤200目，按1：0.25的质量比例，加入羧甲基纤维素钠混合即可。

进一步地，S2中，用于酶解S1中混合物的食用陈醋的溶液浓度为30％，食用粮食酒的酒精浓度为50％，酶解温度不高于30℃。

进一步地，S2中，淀粉蛋白酶的投放比例为酶解容器中总量的10％。

进一步地，S3中，所述细胞融合酶为壳寡糖细胞融合酶，且壳寡糖细胞融合酶投放比例为酶解容器中总量的1.5％。

本发明还提供一种治疗女性HPV病毒的植物细胞酶解提取物，该提取物由上述的方法制备得到。

苦瓜：苦瓜中含有丰富的营养及多种微量元素，苦瓜苦味就源自喹宁，其中维生素c的含量是柑橘的两倍多，是天然的美容剂，最适合想保持肌肤“颜如玉”的女性，经常食用能增强机体免疫力，促进皮肤新陈代谢，使肌肤细腻、光滑有弹性。

苦瓜性寒味苦，可清暑涤热、明目解毒，促进食欲，对热烦渴饮、胃病、痔疮丹毒、肠炎痢疾、眼睛红肿疼痛、痈疮疔疥等都有很好的治疗效果，对糖尿病也有一定的疗效。苦瓜中还含有能抑制恶性肿瘤细胞生成和增强免疫细胞活性的蛋白酶，能够阻止癌细胞的生长和扩散，具有明显的抗癌作用。苦瓜中铁和维生素C的含量很高，能快速消除青春痘与黑斑，使脸部皮肤光滑细腻。苦瓜中含有糖苷，有特殊苦味，能促进食欲，帮助消化；有清热解毒、清凉降火、养颜美容的作用。

香蕉皮：香蕉皮中富含蛋白质、脂肪、糖以及K、Ca、Mg、S、Fe、Zn等十几种元素，可作为潜在的资源与原材料。

香蕉皮富含色氨酸、维生素B6、丰富血清素，能产生舒适、满足、幸福、惬意、和乐观的情绪。经过国外的研究验证，香蕉及香蕉皮萃取的价值超越了多种蔬果萃取的价值，成为了植物萃取中的最佳主角。

香蕉及香蕉皮萃取技术利用SuperX低温超音波高频萃取技术，提升多达23％的高效能萃取率，在低温以及特殊坏境下，将血清素完整萃取而不受到热破坏，其卓越成果荣获多项肯定。

洋葱，富含钾、维生素C、叶酸、锌、硒，及纤维质等营养素，可杀菌消炎、提神健体、祛痰利尿。此外，它还能清除体内氧自由基，增强新陈代谢能力。

1.促进消化

洋葱中的洋葱蒜辣素和挥发油，具有刺激消化腺分泌的作用，从而起到健胃和促消化的功效。

2.杀菌消炎

洋葱有杀菌消炎作用，可有效杀灭葡萄球菌、链球菌、痢疾杆菌及白喉杆菌，从而使身体保持健康。

3.祛痰利尿

洋葱所含的植物杀菌素有祛痰利尿、发汗、预防感冒以及抑菌防腐的作用；洋葱所含的槲皮质类物质，在人体内的黄酮醇的诱导下，可以形成一种药用配糖体，它具有很强的利尿作用，可以用来辅助治疗肾炎等疾病引起的水肿。

4.提神健体

洋葱中的蒜素可刺激泪腺分泌眼泪，同时有很好的提神作用，能促进新陈代谢，增强体力，消除疲劳，提高注意力，促进脑部活性化的功效。

5.阻止血小板凝聚

洋葱中含有一些能激活血溶纤维蛋白酶原的活性成分，可以起到阻止血板凝聚。

6.有益心血管健康

洋葱所含的环蒜氨酸是降血脂的有效成分，故洋葱被认为呈抗动脉粥祥硬化的良药。洋葱含有的前列腺素，是一种较强的血管舒张剂和软化剂，能减少血管和心脏冠状动脉的阻力，可促进钠盐的排泄。

黄连为毛茛科植物黄连、三角叶黄连或云连的干燥根茎，分布在我国的四川、贵州、湖南、湖北、陕西南部。含小檗碱、黄连碱、掌叶防己碱、药根碱等化学成分，有清热燥湿、泻火解毒功效，对黄疸、牙痛、目赤、湿疹等均有治疗作用。

1.清热解毒

黄连在中医里配以其他辅助药物既适用于湿热证，也适用于火热证，黄连苦寒，泻火解毒功效很强，凡是湿热阻滞证，温病高热，烦躁不安等都可使用，治疗湿热常配以半夏，瓜萎，等，治疗火热常配以朱砂、地黄等。

2.抑菌

黄连对金葡、霍乱弧菌、乙型链球菌作用较强，对大肠杆菌、伤寒杆菌作用较弱。

3.治疗疟疾

在我国中医里黄连一直都是用来治疗疟疾等严重的腹泻，黄连中含有黄连素，在现在医学中黄连素也是一种非处方的腹泻药物，主要是黄连素具有抑菌抗菌作用，对痢疾杆菌，结核杆菌，肺炎球菌，伤寒杆菌以及白喉杆菌等都具有抑制作用，对痢疾杆菌的作用最强，是治疗细菌性胃肠炎、痢疾等消化道疾病的特效药。

4.治疗消化道炎症

胃炎，胃溃疡，肠胃炎，肠炎等消化道疾病一直都是属于很难治疗的疾病，很多药物对胃肠道都有刺激作用，在食用之后对炎症虽有治疗效果，但同时也有刺激促进作用，对药物的量的把控很难做到准确，黄连不一样，黄连在食用之后其主要成分黄连素是不会通过胃肠道黏膜进入血液的，其主要是在胃肠道中停留，由于苦涩作用会使黄连素在胃肠道中停留的时间增长，对消化道炎症的治疗效果明显。

以食用植物的根茎和果实，通过植物细胞的基因转换、重组，建立细胞活性酶转换模型，诱导转换酶中的定向活性物质释放，靶向结合非洲猪瘟病毒的体表，改变非洲猪瘟病毒体表的蛋白合成。同时增强WBC的吞噬能力，增强机体免疫功能，提高血清备解素，对动物感染性疾病的治疗有着重要的意义。

本发明的制备方法将纯天然药食同源植物洋葱、香蕉皮、苦瓜、黄连，经过细胞酶解融合后进行提取，提取物除保持其洋葱、香蕉皮、苦瓜、黃连原有的功能外(提高免疫能力、抗氧化、抗衰老、降血脂、消炎杀菌、抗病毒等)，特别增加了具有强烈杀灭非洲猪瘟病毒的能力。该植物细胞酶解提取物能使猪减少，或不使用抗生素，避免了抗生素产生的副作用和耐药性，以及抗生素在猪体内的残留，提高了猪的成活率及出栏率，对稳定猪肉价格有着极其现实的意义。

本发明是运用传统的中医理论，和现代的生物细胞工程技术相结合，创新发明获取的一种新型活性小分子肽物质。对杀非洲猪瘟病毒，治疗非洲猪瘟瘟病，有着不可替代的作用，且无副作用。同时，用来制备本发明的洋葱、香蕉皮、苦瓜、黄连细胞酶解融合提取物的方法及操作简单收得率高，生产成本相对比较低，适合工业化生产或推广。

具体实施方式

下面将对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1

本实施例的杀灭非洲猪瘟病毒的植物细胞酶解提取物的制备方法，包括如下步骤：

S1、将新鲜的洋葱去皮、香蕉皮、苦瓜、黄连洗净，混合后破碎，过20目筛后得混合物备用；

S2：按1:1:1的质量比例，向制得的混合物中加入食用陈醋和粮食酒，置于酶解容器中，加淀粉蛋白酶，高速旋转搅拌2分钟，每天搅拌1次，并连续搅拌5天；

其中，用于酶解S1中混合物的食用陈醋的溶液浓度为30％，食用粮食酒的酒精浓度为50％，酶解温度不高于30℃。

淀粉蛋白酶的投放比例为酶解容器中总量的10％。

S3：再向S2中加入细胞融合酶，静止30天；

其中，所述细胞融合酶为壳寡糖细胞融合酶，且壳寡糖细胞融合酶投放比例为酶解容器中总量的1.5％。

S4:常温下进行分离提纯，将提取物沉清过滤200目，按1：0.25的质量比例，加入羧甲基纤维素钠混合即可。

本实施例通过10％淀粉蛋白酶及1.5％壳寡糖细胞融合酶的两次作用下，分泌出的小分子肽活性物质。

实施例2

本实施例的杀灭非洲猪瘟病毒的植物细胞酶解提取物的制备方法，包括如下步骤：

S1、将新鲜的洋葱去皮、香蕉皮、苦瓜、黄连洗净，混合后破碎，过10目筛后得混合物备用；

S2：按1:1:1的质量比例，向制得的混合物中加入食用陈醋和粮食酒，置于酶解容器中，加淀粉蛋白酶，高速旋转搅拌1分钟，每天搅拌2次，并连续搅拌6天；

其中，用于酶解S1中混合物的食用陈醋的溶液浓度为30％，食用粮食酒的酒精浓度为50％，酶解温度不高于30℃。

淀粉蛋白酶的投放比例为酶解容器中总量的10％。

S3：再向S2中加入细胞融合酶，静止40天；

其中，所述细胞融合酶为壳寡糖细胞融合酶，且壳寡糖细胞融合酶投放比例为酶解容器中总量的1.5％。

S4:常温下进行分离提纯，将提取物沉清过滤200目，按1：0.25的质量比例，加入羧甲基纤维素钠混合即可。

本实施例通过10％淀粉蛋白酶及1.5％壳寡糖细胞融合酶的两次作用下，分泌出的小分子肽活性物质。

本发明的提取物能够杀灭非洲猪瘟病毒，有效治疗非洲猪瘟。使用时，将该提取物与猪饲料按照1:100的比例混合即可。

以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应所述以权利要求的保护范围为准。

Claims (5)

1.一种杀灭非洲猪瘟病毒的植物细胞酶解提取物的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：

S1、将新鲜的洋葱去皮、香蕉皮、苦瓜、黄连洗净，混合后破碎，过10-20目筛后得混合物备用；

S2：按1:1:1的质量比例，向制得的混合物中加入食用陈醋和粮食酒，置于酶解容器中，加淀粉蛋白酶，高速旋转搅拌1-3分钟，每天搅拌1-2次，并连续搅拌5-6天；

S3：再向S2中加入细胞融合酶，静止30-40天；

S4:常温下进行分离提纯，将提取物沉清过滤200目，按1：0.25的质量比例，加入羧甲基纤维素钠混合即可。

2.根据权利要求1所述的杀灭非洲猪瘟病毒的植物细胞酶解提取物的制备方法，其特征在于，S2中，用于酶解S1中混合物的食用陈醋的溶液浓度为30％，食用粮食酒的酒精浓度为50％，酶解温度不高于30℃。

3.根据权利要求1所述一种治疗女性HPV病毒的植物细胞酶解提取物的制备方法，其特征在于，S2中，淀粉蛋白酶的投放比例为酶解容器中总量的10％。

4.根据权利要求1所述一种治疗女性HPV病毒的植物细胞酶解提取物的制备方法，其特征在于，S3中，所述细胞融合酶为壳寡糖细胞融合酶，且壳寡糖细胞融合酶投放比例为酶解容器中总量的1.5％。

5.一种治疗女性HPV病毒的植物细胞酶解提取物，其特征在于，由权利要求1至4任一项所述的方法制备得到。