CN109432392A - 一种治疗非洲猪瘟的肽制剂及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及兽药技术领域，具体公开一种治疗非洲猪瘟的肽制剂及其制备方法，所述治疗非洲猪瘟的肽制剂包括质量百分比的组分：金银花肽20‑25％、白扁豆肽20‑25％、黄芩肽12‑18％、连翘肽12‑18％、黄柏肽8‑12％、木香肽8‑12％、黄连肽4‑8％。本发明的治疗非洲猪瘟的肽制剂，口服治疗效果好，吸收快，活性成分高，口服治疗3天其临床症状就可完全消失，且治疗彻底、不反复，治疗后无有害药物残留、无副作用。

Description

一种治疗非洲猪瘟的肽制剂及其制备方法
技术领域
本发明涉及兽药技术领域，尤其涉及一种治疗非洲猪瘟的肽制剂及其制备方法。
背景技术
非洲猪瘟(ASF)是由非洲猪瘟病毒(ASFV)感染家猪和野猪引起一种急性、出血性的烈性传染病。该病是我国乃至全球重点防范的一类动物疫情。病毒可经过口和上呼吸道系统进入猪体，在鼻咽部或是扁桃体发生感染，然后迅速蔓延到下颌淋巴结，通过淋巴和血液遍布全身。强毒感染时细胞变化很快，在呈现明显的刺激反应前，细胞都已死亡，发病过程短，最急性和急性感染死亡率高达100％，临床表现为发热，心跳加快，呼吸困难，部分咳嗽，眼、鼻有浆液性或粘液性脓性分泌物，皮肤发绀，淋巴结、肾、胃肠粘膜明显出血。2007年以来，非洲猪瘟在全球多个国家发生、扩散、流行，特别是俄罗斯及其周边地区，2018年8月3日我国确诊首例非洲猪瘟疫情。非洲猪瘟不是“人畜共患病”，只传染猪不传染人，但对猪来说是非常致命的，给养猪行业带来巨大损失。
近年来，虽有部分治疗非洲猪瘟的药物研发出来，但其治疗效果慢，病情易反复、治疗不彻底，而非洲猪瘟发病快，传染性强，急性死亡率高，感染病毒的动物大多会在治疗过程中死亡，即使部分感染猪症状缓解，但病情复发的概率较大，且部分药物含有大量的抗生素，用药后，导致体内遗留大量抗生素。另一方面，目前用于治疗非洲猪瘟的中药制剂口服治疗效果较差，且多数抗菌活性成分会被消化系统快速分解和代谢，失去治疗效果。目前，还没有研发出快速、彻底、高效和安全的治疗非洲猪瘟的口服药品，感染非洲猪瘟后只能采取当即宰杀、隔离防传染方式。
发明内容
针对现有治疗非洲猪瘟的药物疗效慢、易反复、治疗不彻底以及副作用大等问题，本发明提供一种高效、快速、治愈率高及安全的治疗非洲猪瘟的肽制剂及其制备方法。
为达到上述发明目的，本发明实施例采用了如下的技术方案：
一种治疗非洲猪瘟的肽制剂，包括如下质量百分比的组分：
金银花肽20-25％、白扁豆肽20-25％、黄芩肽12-18％、连翘肽12-18％、黄柏肽8-12％、木香肽8-12％、黄连肽4-8％。
相对于现有技术，本发明提供的治疗非洲猪瘟的肽制剂通过分别提取金银花、白扁豆、黄芩、连翘、黄柏、木香和黄连中的小分子活性肽，将这些小分子活性肽按质量比混合，其中的小分子活性肽还可以螯合提取液中的绿原酸、黄芩苷、连翘皂苷、小檗碱、木香烯内酯和黄连碱等具有杀菌和解毒等药理作用的活性物质，提高肽制剂的治疗疗效，同时，各原料活性肽混合得到的肽制剂可100％被消化系统吸收，吸收速度快，达到快速治疗的效果，且肽制剂中的所有成分均为天然提取物，避免了抗生素、药物残留对猪肉的影响。
黄连中的小檗碱亦称黄连素，是黄连中的一种季铵生物碱，也是黄连抗菌的主要有效成分，对多种革兰阳性及阴性菌均具抑菌作用，但是其口服吸收差、注射后血药浓度维持时间短且血药浓度低于最低抑菌浓度，易被体内代谢清除，达不到较好的治疗效果，而黄连肽中的小檗碱与小分子活性肽螯合后，通过口服可迅速被吸收，并在体内维持较长的作用时间；另一方面，小檗碱虽有抗菌消炎的作用，但是其抗菌作用有限，感染非洲猪瘟的猪体内菌类繁多，无法起到较好的治疗效果，而本发明中的金银花肽中熬合有中药活性成分绿原酸，绿原酸和小檗碱的结合，达到较高的抑菌效果，可快速治疗因菌体感染引发的炎症，并加快伤口的愈合。
非洲猪瘟主要是因猪体感染非洲猪瘟病毒引起的急性感染性疾病，提取得到的白扁豆肽有抑制病毒活性的作用，但是病毒扩增速度快，易产生变异，极大增加了非洲猪瘟的治疗难度，本发明在肽制剂中加入黄芩肽，黄芩肽和白扁豆肽的结合使用，可以有效抑制病毒的扩增，降低变性率，提高白扁豆肽的杀毒效果。
木香肽中螯合有木香烯内酯，木香肽、连翘肽以及黄柏肽的结合可以有效缓解感染非洲猪瘟的猪的发热、呼吸困难以及食欲不振的症状。
优选地，包括如下质量百分比的组分：
金银花肽22-24％、白扁豆肽21-23％、黄芩肽14-16％、连翘肽14-16％、黄柏肽9-11％、木香肽9-11％、黄连肽4-6％。
进一步地，本发明还提供所述治疗非洲猪瘟的肽制剂的制备方法，该制备方法，至少包括以下步骤：
a、原料加水蒸煮；
b、降温至56-58℃，加入淀粉酶、纤维素酶和中性蛋白酶搅拌酶解；
c、升温灭酶；
d、离心纯化；
e、浓缩干燥。
相对于现有技术，本发明提供的治疗非洲猪瘟的肽制剂的制备方法，得到的肽制剂中活性成分高，1000道尔顿以下的肽含量达到96％以上，有利于动物的快速吸收；180-500道尔顿的肽占肽含量在50％左右，具有很高的生物活性，得到的肽制剂中螯合有多种具有抑菌杀毒作用的活性物质，这些活性物质经过与肽的螯合，大大增加了其在动物体内的稳定性和活性，增加活性成分的治疗效果，且本发明的制备方法生产周期短、成本低、不产生任何有毒有害物质、安全无毒副作用。
优选地，所述步骤a中水的加入量为原料质量的7-8倍，蒸煮温度为90℃-95℃，蒸煮7-8小时。
优选地，所述步骤b中的中性蛋白酶由米曲霉经发酵提取得到，加入质量为原料质量的1-1.5％。
优选地，所述步骤b中的淀粉酶由黑曲霉经发酵提取得到，加入质量为原料质量的1-1.5％。
优选地，所述步骤b中的纤维素酶由李氏木霉经发酵提取得到，加入质量为原料质量的0.8-1.2％。
优选地，所述步骤d离心纯化过程中，先用卧锣离心机离心过滤，滤液再用三相离心机进行离心分离。
优选地，所述步骤e中采用双效浓缩器对纯化得到的离心液进行浓缩干燥。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。下面通过实施例做进一步的举例说明：
实施例1
一种治疗非洲猪瘟的肽制剂的制备方法，包括以下步骤：
步骤1，分别提取金银花、白扁豆、黄芩、连翘、黄柏、川木香和黄连中的活性肽；以金银花肽为例，提取方法为：
a、取金银花100g，加入700ml的纯化水，90℃蒸煮7h；
b、降温至56℃，加入1g淀粉酶、0.8g纤维素酶和1g中性蛋白酶搅拌酶解3h；
c、90℃灭酶10min；
d、用卧锣离心机过滤后，再用三相离心机离心分离，得到的离心液用双效浓缩器浓缩至离心液体积的1/10；
e、浓缩液干燥后，得到金银花肽。
白扁豆肽、黄芩肽、连翘肽、黄柏肽、川木香肽、黄连肽的提取方法与金银花肽相同。
步骤2、分别按质量比为金银花肽20％、白扁豆肽20％、黄芩肽12％、连翘肽18％、黄柏肽12％、川木香肽12％、黄连肽6％进行配比，用三维混合机搅拌均匀，进行包装，即得到治疗非洲猪瘟的肽制剂。
实施例2
一种治疗非洲猪瘟的肽制剂的制备方法，包括以下步骤：
步骤1，分别提取金银花、白扁豆、黄芩、连翘、黄柏、川木香和黄连中的活性肽；以金银花为例，提取方法为：
a、取金银花100g，加入800ml的纯化水，95℃蒸煮8h；
b、降温至58℃，加入1.5g淀粉酶、1.2g纤维素酶和1.5g中性蛋白酶搅拌酶解3h；
c、90℃灭酶10min；
d、用卧锣离心机过滤后，再用三相离心机离心分离，得到的离心液用双效浓缩器浓缩至离心液体积的1/10；
e、浓缩液干燥后，得到金银花肽。
白扁豆肽、黄芩肽、连翘肽、黄柏肽、川木香肽、黄连肽的提取方法与金银花肽相同。
步骤2、分别按质量比为金银花肽25％、白扁豆肽25％、黄芩肽18％、连翘肽12％、黄柏肽8％、川木香肽8％、黄连肽4％进行配比，用三维混合机搅拌均匀，进行包装，即得到治疗非洲猪瘟的肽制剂。
实施例3
一种治疗非洲猪瘟的肽制剂的制备方法，包括以下步骤：
步骤1，分别提取金银花、白扁豆、黄芩、连翘、黄柏、川木香和黄连中的活性肽；以金银花为例，提取方法为：
a、取金银花100g，加入800ml的纯化水，95℃蒸煮8h；
b、降温至58℃，加入1.2g淀粉酶、1g纤维素酶和1.2g中性蛋白酶搅拌酶解3h；
c、90℃灭酶10min；
d、用卧锣离心机过滤后，再用三相离心机离心分离，得到的离心液用双效浓缩器浓缩至离心液体积的1/10；
e、浓缩液干燥后，得到金银花肽。
白扁豆肽、黄芩肽、连翘肽、黄柏肽、川木香肽、黄连肽的提取方法与金银花肽相同。
步骤2、分别按质量比为金银花肽23％、白扁豆肽22％、黄芩肽15％、连翘肽15％、黄柏肽10％、川木香肽10％、黄连肽5％进行配比，用三维混合机搅拌均匀，进行包装，即得到治疗非洲猪瘟的肽制剂。
对比例1
用黄芪代替实施例3中的黄连，其他制备方法与实施例3相同。
对比例2
用甘草代替实施例3中的金银花，其他制备方法与实施例3相同。
对比例3
用红扁豆代替实施例3中的白扁豆，其他制备方法与实施例3相同。
对比例4
用夏枯草代替实施例3中的黄芩，其他制备方法与实施例3相同。
猪场选取35头年龄、体重均一、均为感染非洲猪瘟前期发病阶段的猪，该阶段的临床症状主要为发热(达40～42℃)，行动迟缓、食欲低、精神沉郁、心跳加快、呼吸困难、部分咳嗽，眼、鼻有浆液性或粘液性脓性分泌物，淋巴结、肾、胃肠粘膜明显出血，将35头猪分成7组，每组5头，分别用实施例1-3和对比例1-4的制备方法得到的治疗非洲猪瘟的肽制剂对每组猪进行口服治疗，每头猪每日服用肽制剂15g，连续服用3日，其治疗效果如下：
上述治疗效果检测结果说明，本发明治疗非洲猪瘟的肽制剂，口服治疗效果好，吸收快，活性成分高，口服治疗3天其临床症状就可完全消失，且治疗彻底不反复，治疗后无有害药物残留、无副作用。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换或改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种治疗非洲猪瘟的肽制剂，其特征在于：包括如下质量百分比的组分：
金银花肽20-25％、白扁豆肽20-25％、黄芩肽12-18％、连翘肽12-18％、黄柏肽8-12％、木香肽8-12％、黄连肽4-8％。
2.如权利要求1所述的一种治疗非洲猪瘟的肽制剂，其特征在于：包括如下质量百分比的组分：
金银花肽22-24％、白扁豆肽21-23％、黄芩肽14-16％、连翘肽14-16％、黄柏肽9-11％、木香肽9-11％、黄连肽4-6％。
3.权利要求1～2所述的一种治疗非洲猪瘟的肽制剂的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
步骤1、分别提取金银花、白扁豆、黄芩、连翘、黄柏、木香和黄连中的活性肽；
步骤2、将提取到的金银花肽、白扁豆肽、黄芩肽、连翘肽、黄柏肽、木香肽和黄连肽按质量比混合，得到治疗非洲猪瘟的肽制剂。
4.如权利要求3所述的一种治疗非洲猪瘟的肽制剂的制备方法，其特征在于：所述步骤1中金银花肽、白扁豆肽、黄芩肽、连翘肽、黄柏肽、木香肽和黄连肽的提取方法为：
a、原料加水蒸煮；
b、降温至56-58℃，加入淀粉酶、纤维素酶和中性蛋白酶搅拌酶解；
c、升温灭酶；
d、离心纯化；
e、浓缩干燥。
5.如权利要求4所述的一种治疗非洲猪瘟的肽制剂的制备方法，其特征在于：所述步骤a中水的加入量为原料质量的7-8倍，蒸煮温度为90℃-95℃，蒸煮7-8小时。
6.如权利要求4所述的一种治疗非洲猪瘟的肽制剂的制备方法，其特征在于：所述步骤b中的中性蛋白酶由米曲霉经发酵提取得到，加入质量为原料质量的1-1.5％。
7.如权利要求4所述的一种治疗非洲猪瘟的肽制剂的制备方法，其特征在于：所述步骤b中的淀粉酶由黑曲霉经发酵提取得到，加入质量为原料质量的1-1.5％。
8.如权利要求4所述的一种治疗非洲猪瘟的肽制剂的制备方法，其特征在于：所述步骤b中的纤维素酶由李氏木霉经发酵提取得到，加入质量为原料质量的0.8-1.2％。
9.如权利要求4所述的一种治疗非洲猪瘟的肽制剂的制备方法，其特征在于：所述步骤d离心纯化过程中，先用卧锣离心机离心过滤，滤液再用三相离心机进行离心分离。
10.如权利要求4所述的一种治疗非洲猪瘟的肽制剂的制备方法，其特征在于：所述步骤e中采用双效浓缩器对纯化得到的离心液进行浓缩干燥。
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