CN110404006A - 一种治疗鸡坏死性肠炎的药物组合物 - Google Patents

一种治疗鸡坏死性肠炎的药物组合物 Download PDF

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Abstract

本发明提供了一种治疗鸡坏死性肠炎的药物组合物，该药物组合物主要成分重量份数计为：裸花紫珠10‑100份、瓜蒌10‑80份、酸枣仁10‑50份、淫羊霍5‑30份、安息香1‑30份，并具体公开了该药物组合物颗粒剂的制备方法。该药物组合物在治疗鸡坏死性肠炎中的应用，抗产气荚膜梭菌作用疗效好，能显著增强鸡的抵抗力、提高免疫力。且处方工艺简单、利于工业化生产，处方来源于纯天然、无污染、无药物残留，有效率100%。

Description

一种治疗鸡坏死性肠炎的药物组合物
技术领域
本发明属于兽药制剂领域，具体涉及一种治疗鸡坏死性肠炎的药物组合物。
背景技术
技术
鸡坏死性肠炎（Necrotic enteritis，NE）是一种发病机制复杂的肠道疾病，主要由产气荚膜梭菌分泌外毒素引起鸡小肠黏膜坏死为主要特征的一种急性细菌性疾病。除此之外还包括一系列的诱发因素。通常继发于球虫病，导致肉鸡的增重率下降，死亡率上升，给家禽生产造成直接和间接的经济损失。
目前重在预防，除保持鸡舍干燥、通风等外，一般可以注射疫苗如产气荚膜梭菌疫苗、灭活疫苗、类毒素疫苗和重组蛋白疫苗等；但治疗方面大多采用抗生素和抗菌剂如青霉素、泰乐菌素、利高霉素等，但是抗生素耐药性和食品动物抗生素残留等问题频发，抗生素可能会随着食物链进入人体，危害人体健康。故本发明人着力研究一种纯天然的抗产气荚膜梭菌药物组合物。
发明内容
本发明旨在提供一种抗产气荚膜梭菌作用疗效好，能显著增强鸡的抵抗力、提高免疫力的药物组合物。
为实现上述发明目的，本发明一种治疗鸡坏死性肠炎的药物组合物，具体实施方案为： 本发明所述一种治疗鸡坏死性肠炎的药物组合物，该药物组合物主要成分重量份数计为：裸花紫珠10-100份、瓜蒌10-80份、酸枣仁10-50份、淫羊霍5-30份、安息香1-30份。
本发明所述一种治疗鸡坏死性肠炎的药物组合物，该药物组合物主要成分重量份数计为：裸花紫珠40-70份、瓜蒌25-50份、酸枣仁10-35份、淫羊霍10-30份、安息香1-20份。
本发明所述一种治疗鸡坏死性肠炎的药物组合物，该药物组合物主要成分重量份数计为：裸花紫珠49-60份、瓜蒌30-41份、酸枣仁15-25份、淫羊霍10-20份、安息香5-10份。
本发明所述一种治疗鸡坏死性肠炎的药物组合物，该药物组合物主要成分重量份数计为：裸花紫珠55份、瓜蒌35份、酸枣仁25份、淫羊霍20份、安息香10份。
本发明所述一种治疗鸡坏死性肠炎的药物组合物，该药物组合物制剂为颗粒剂、胶囊、片剂、丸剂。
本发明所述一种治疗鸡坏死性肠炎的药物组合物，该药物组合物制剂为颗粒剂。
本发明所述一种治疗鸡坏死性肠炎的药物组合物，该药物组合物制剂颗粒剂制备工艺为：
（1）挥发油提取工艺：将处方量的裸花紫珠、酸枣仁、淫羊霍、安息香提取挥发油，加水倍数5-20倍，提取时间1.5-6h，收集挥发油，水提取液和药渣备用；
（2）醇提工艺：将上述药渣进行醇提，乙醇浓度30-80%，加醇倍数3-18，回流时间1-6h，提取次数1-4次，过滤，回收乙醇，浓缩至稠膏，密度1.10，温度为40-60℃，干燥，得浸膏，粉碎过100目筛，备用；
（3）制备挥发油微囊：
①囊材的选择：筛选阿拉伯胶、明胶中一种或两种按比例混合的复合囊材；
②将提取的挥发油加入到①囊材溶液中，在500-1000r/min条件下搅拌乳化1-10min，使之成乳状液，用8%盐酸调节pH值至2-5，水浴37℃保温20min；
③向②加入0.5mol/L硫酸钠200ml作为稀释液，冷至室温后用氢氧化钠调pH值至8-9，再加37%甲醛溶液固化微囊，静置，分离，水洗至无甲醛，37℃干燥，得微囊，过100目筛备用；
（4）将上述浸膏、挥发油微囊中加入适宜辅料制成颗粒剂。
本发明一种治疗鸡坏死性肠炎的药物组合物，该药物组合物制剂颗粒剂制备工艺中阿拉伯胶浓度2-20%、明胶浓度5-20%，两种按比例1:5-5:1混合。
本发明一种治疗鸡坏死性肠炎的药物组合物，该药物组合物制剂颗粒剂制备工艺所述辅料为乳糖、微晶纤维素、甘露醇中一种或多种组合。
本发明制备的一种治疗鸡坏死性肠炎的药物组合物在治疗鸡坏死性肠炎中的应用。
本发明主要活性成分分析：
裸花紫珠：苦、微辛，平。归脾、胃、肝经。 有止血止痛、散瘀消肿之效。治外伤出血、跌打肿痛、风湿肿痛、肺结核咯血、胃肠出血。
瓜蒌：甘、微苦,寒。归肺、胃、 大肠经。润肺，化痰，散结，滑肠。治痰热咳嗽，胸痹，结胸，肺痿咳血，消渴，黄疸，便秘，痈肿初起。
酸枣仁：味甘、酸，性平。归肝、胆、心经。养心补肝，宁心安神，敛汗，生津。用于虚烦不眠，惊悸多梦，体虚多汗，津伤口渴。
淫羊霍：味辛，甘、性温，归肝、肾经。主治阳萎早泄，腰酸腿痛，四肢麻木，半身不遂，神经衰弱，健忘，耳鸣，目眩等症。
安息香：味辛，香、平、无毒。开窃清神，行气活血，止痛。用于中风痰厥，气郁暴厥，中恶昏迷，心腹疼痛，产后血晕，小儿惊风。
本发明药物组合物以裸花紫珠、瓜蒌合理配比对产气荚膜梭菌致病菌的敏感性和抑菌作用，当裸花紫珠和瓜蒌质量比1.6:1，对产气荚膜梭菌抑菌圈直径最大，抑菌效果最强。本发明药物组合物直接针对病灶部位起效，达到去死新生的功效。
本发明组合物抗产气荚膜梭菌作用疗效好，能显著增强鸡的抵抗力、提高免疫力且处方工艺简单、利于工业化生产，处方来源于纯天然、无污染、无药物残留。
具体实施方式
下面实施例只为进一步说明本发明，不以任何形式限制本发明范围。
实施例1
处方：裸花紫珠55份、瓜蒌35份、酸枣仁25份、淫羊霍20份、安息香10份
工艺：（1）挥发油提取工艺：将处方量的裸花紫珠、酸枣仁、淫羊霍、安息香提取挥发油，加水倍数10倍，提取时间5h，收集挥发油，水提取液和药渣备用。（2）醇提工艺：将上述药渣进行醇提，乙醇浓度60%，加醇倍数12倍，回流时间3h，提取次数3次。过滤，回收乙醇，浓缩至稠膏，密度1.10（40-60℃），干燥，得浸膏，粉碎过100目筛，备用。
（3）制备挥发油微囊：
①囊材的选择：阿拉伯胶10%、明胶20%的复合囊材
②将提取的挥发油加入到①囊材溶液中，在800r/min条件下搅拌乳化5min，使之成乳状液，用8%盐酸调节pH值至4.5，水浴37℃保温20min。
③向②加入0.5mol/L硫酸钠200ml作为稀释液，冷至室温后用氢氧化钠调pH值至8-9，再加37%甲醛溶液固化微囊，静置，分离，水洗至无甲醛，37℃干燥，得微囊，过100目筛备用。
（4）将上述浸膏中加入适宜辅料（（如乳糖、微晶纤维素、甘露醇中一种或多种组合）制成颗粒剂。
实施例2
处方：裸花紫珠60份、瓜蒌30份、酸枣仁25份、淫羊霍20份、安息香10份
工艺：（1）挥发油提取工艺：将处方量的裸花紫珠、酸枣仁、淫羊霍、安息香提取挥发油，加水倍数10倍，提取时间5h，收集挥发油，水提取液和药渣备用。（2）醇提工艺：将上述药渣进行醇提，乙醇浓度60%，加醇倍数12倍，回流时间3h，提取次数3次。过滤，回收乙醇，浓缩至稠膏，密度1.10（40-60℃），干燥，得浸膏，粉碎过100目筛，备用。
（3）制备挥发油微囊：
①囊材的选择：阿拉伯胶10%、明胶20%的复合囊材
②将提取的挥发油加入到①囊材溶液中，在800r/min条件下搅拌乳化5min，使之成乳状液，用8%盐酸调节pH值至4.5，水浴37℃保温20min。
③向②加入0.5mol/L硫酸钠200ml作为稀释液，冷至室温后用氢氧化钠调pH值至8-9，再加37%甲醛溶液固化微囊，静置，分离，水洗至无甲醛，37℃干燥，得微囊，过100目筛备用。
（4）将上述浸膏中加入适宜辅料（如乳糖、微晶纤维素、甘露醇中一种或多种组合）制成颗粒剂。
实施例3
处方：裸花紫珠49份、瓜蒌41份、酸枣仁25份、淫羊霍20份、安息香10份
工艺：（1）挥发油提取工艺：将处方量的裸花紫珠、酸枣仁、淫羊霍、安息香提取挥发油，加水倍数10倍，提取时间5h，收集挥发油，水提取液和药渣备用。（2）醇提工艺：将上述药渣进行醇提，乙醇浓度60%，加醇倍数12倍，回流时间3h，提取次数3次。过滤，回收乙醇，浓缩至稠膏，密度1.10（40-60℃），干燥，得浸膏，粉碎过100目筛，备用。
（3）制备挥发油微囊：
①囊材的选择：阿拉伯胶10%、明胶20%的复合囊材
②将提取的挥发油加入到①囊材溶液中，在800r/min条件下搅拌乳化5min，使之成乳状液，用8%盐酸调节pH值至4.5，水浴37℃保温20min。
③向②加入0.5mol/L硫酸钠200ml作为稀释液，冷至室温后用氢氧化钠调pH值至8-9，再加37%甲醛溶液固化微囊，静置，分离，水洗至无甲醛，37℃干燥，得微囊，过100目筛备用。
（4）将上述浸膏中加入适宜辅料（如乳糖、微晶纤维素、甘露醇中一种或多种组合）制成颗粒剂。
试验例1
裸花紫珠和瓜蒌分别为本处方君药和臣药，其比例配比关系到药效，故采用体外抑菌试验对裸花紫珠和瓜蒌配比进行筛选。
1.材料与方法
1.1 试验菌株
产气荚膜梭菌标准株
1.2 滤纸片的制备
选吸水性强而质地均匀的滤纸，用打孔机打成直径为8mm的圆片，分装于洁净的干燥试管中，121℃高压灭菌30min后备用。
1.3 菌株活化
将产气荚膜梭菌菌株，划线接种于TSC平板上，40℃厌氧培养24h。挑取典型的典型密集菌落，接种到10mLFT液体培养基中，40℃厌氧培养8h。按照0.5麦氏比浊管将菌液稀释至100CFU/mL。
1.4纸片扩散法
用移液枪吸取100μL100FU/mL试验菌液至FT营养琼脂培养基上，用涂布器均匀涂布3次然后绕平板边缘涂抹一周，盖好平皿，置室温干燥3～5min。每个平板贴放用灭菌的镊子小心夹取滤纸片，贴于培养基表面，并轻压纸片，使其紧贴培养基表面，各纸片中心相距大于24mm，纸片距平皿外缘大于15mm。分别吸取10μl待测品滴加到滤纸片上。将平皿倒置，40℃厌氧培养24h，观察并测量抑菌圈的直径，每组做3次重复，取平均值。
1.5 分组
空白对照组：0.9%氯化钠溶液
阳性对照组：青霉素溶液
药物组：A、B、C、D、E组，将颗粒灭菌，加灭菌后的水溶解。
A组(裸花紫珠和瓜蒌质量比2:1)
B组(裸花紫珠和瓜蒌质量比1.6:1)
C组(裸花紫珠和瓜蒌质量比1.2:1)
D组(裸花紫珠和瓜蒌质量比0.8:1)
E组(裸花紫珠和瓜蒌质量比0.4:1)
1.6抑菌圈判定标准：抑菌作用效果以抑菌圈直径小于10mm为不敏感，在11～15mm之间为敏感，在16～20之间为中度敏感，大于20mm为高度敏感。
2 纸片扩散法结果
利用纸片扩散法检测下列裸花紫珠和瓜蒌配方比例对产气荚膜梭菌致病菌的敏感性和抑菌作用。结果见下表2
组别 平均抑菌圈直径/mm
空白对照组 0
阳性对照组 24.2
A组 29.4
B组 35.1
C组 23.7
D组 19.5
E组 15.8
由试验结果看，当裸花紫珠和瓜蒌质量比1.6:1，对产气荚膜梭菌抑菌圈直径最大，抑菌效果最强。其次裸花紫珠和瓜蒌质量比2:1、裸花紫珠和瓜蒌质量比1.2:1。
试验例2
固定裸花紫珠和瓜蒌质量比，考察其他组分对产气荚膜梭菌抑菌效果影响。
操作同试验1。
处方：
组成 处方1 处方2 处方3 处方4 处方5
裸花紫珠 55份 55份 55份 55份 55份
瓜蒌 35份 35份 35份 35份 35份
酸枣仁 25份 0份 25份 25份 0份
淫羊霍 20份 20份 0份 20份 0份
安息香 10份 10份 10份 0份 0份
结果：
组别 平均抑菌圈直径/mm
空白对照组 0
阳性对照组 24.5
处方1 35.4
处方2 26.2
处方3 28.6
处方4 30.3
处方5 22.4
从实验结果看，处方1抑菌圈最大，抑菌效果最强；对比处方1，处方2、3、4、5抑菌效果差异较明显；对比处方5，处方5只有裸花紫珠和瓜蒌两种成分，处方1-4组抑菌效果明显强于处方5，说明本发明组分之间配伍作用相辅相成，起协同作用，缺少部分组分均会影响一定的效果。
试验例3
依据上述试验结果，将实施例1、2、3治疗效果采用鸡坏死性肠炎模型鸡进行进一步验证。
（1）肠道病变评分标准
评分 肠道病变症状
0分 没有任何病变；
1分 肠壁变薄，易碎，黏膜无溃疡，但表面附着松散的纤维蛋白；
2分 黏膜溃疡，局灶性坏死黏膜表面附着紧密不可擦掉的纤维蛋白沉积病灶直径小于1cm，病灶数量在1~5；
3分 黏膜溃疡，局灶性坏死，黏膜表面附着紧密不可擦掉的纤维蛋白沉积，病灶数量在 6~15；
4分 黏膜溃疡，局灶性坏死，黏膜表面附着紧密不可擦掉的纤维蛋白沉积，病灶数量在 16 个以上；
5分 坏死性病灶的长度在2~3cm；
6分 大范围的典型坏死；
（2）操作
1.分组：将60只健康的体重±5g的一日龄肉鸡随机分为正常组、A、B、C、D、E5 组，每组10只，分别饲养于熏蒸消毒的鸡笼。A组为对照组、B组为青霉素组、C组为实施例1组、D组为实施例2组、E组为实施例3组；
2.造模：除正常组外，将其他5组肉鸡用普通饲料喂养20天，第21天开始口鼻接种产气荚膜梭菌3×108cfu/只，每天早晚各1次，连续3天。
3.给药：第24天开始，A组继续单纯喂普通饲料、B组喂普通饲料+注射青霉素（（每次7万单位，每天2次，连续5天给药）、C、D、E组喂普通饲料+本发明药物（每次12g，每天2次，连续5天给药）
4.检测指标
实验结束后，评分小肠病变情况、测定免疫器官指数（胸腺、脾脏、法氏囊）
（3）结果
1.小肠病变情况
表1 小肠病变记分
由结果可见除正常组外，C组评分最低，说明小肠病变最少，其次E组、D组、B组；与对照组相比，B、C、D、E组均有显著差异（P＜0.05）；与青霉素组对比，C、E组均有显著差异（P＜0.05）。说明本发明组方配比不同，产生的疗效会有差异；本发明实施例1、3疗效较青霉素疗效好。
2.免疫器官影响情况
免疫器官指数在一定程度上能反映机体免疫器官的发育状况，免疫器官指数的降低说明免疫器官发育受到了抑制，免疫功能降低。反之则为免疫器官发育良好，免疫功能增强。
由结果可见C组免疫器官指数最高，其次E组、D组、B组；与对照组相比，B、C、D、E组均有显著差异（P＜0.05）；与青霉素组对比，C、E组均有显著差异（P＜0.05）。说明本发明组方配比不同，产生的效果会有差异；本发明实施例1、3较青霉素有更好的免疫器官保护作用。
实验例2
（1）收集150只鸡坏死性肠炎的病鸡，有典型症状，病程在3天内。随机分成5组，每组30只；A组为对照组、B组为青霉素组、C组为实施例1组、D组为实施例2组、E组为实施例3组。
（2）给药：
青霉素组：每次7万单位，每天2次，连续7天给药；
实施例1、2、3：每次12g，每天2次，连续7天给药。
（3）评价
无效：食欲不佳，排红色乃至黑褐色煤焦油样粪便；
好转：食欲有所改善，红色血便消失；
治愈：正常饮食，粪便呈圆柱型，表面有白色尿酸盐。
（4）有效率%=好转率+治愈率
结果如下：
从结果可以看出，与对照组相比，B、C、D、E组均有显著差异（P＜0.05）；与青霉素组对比，C、E组均有显著差异（P＜0.05）。实施例1组治愈率达96.7%，而处方比例不同的实施例2、3组治愈率分别为66.7%、83.3%，有效率均为100%，说明本发明治疗非常显著。

Claims (10)

1.一种治疗鸡坏死性肠炎的药物组合物，其特征在于，该药物组合物主要成分重量份数计为：裸花紫珠10-100份、瓜蒌10-80份、酸枣仁10-50份、淫羊霍5-30份、安息香1-30份。
2.根据权利要求1所述一种治疗鸡坏死性肠炎的药物组合物，其特征在于，该药物组合物主要成分重量份数计为：裸花紫珠40-70份、瓜蒌25-50份、酸枣仁10-35份、淫羊霍10-30份、安息香1-20份。
3.根据权利要求1所述一种治疗鸡坏死性肠炎的药物组合物，其特征在于，该药物组合物主要成分重量份数计为：裸花紫珠49-60份、瓜蒌30-41份、酸枣仁15-25份、淫羊霍10-20份、安息香5-10份。
4.根据权利要求1所述一种治疗鸡坏死性肠炎的药物组合物，其特征在于，该药物组合物主要成分重量份数计为：裸花紫珠55份、瓜蒌35份、酸枣仁25份、淫羊霍20份、安息香10份。
5.根据权利要求1-4任一项所述一种治疗鸡坏死性肠炎的药物组合物，其特征在于，该药物组合物制剂为颗粒剂、胶囊、片剂、丸剂。
6.根据权利要求5所述一种治疗鸡坏死性肠炎的药物组合物，其特征在于，该药物组合物制剂为颗粒剂。
7.根据权利要求6所述一种治疗鸡坏死性肠炎的药物组合物，其特征在于，该药物组合物制剂颗粒剂制备工艺为：
（1）挥发油提取工艺：将处方量的裸花紫珠、酸枣仁、淫羊霍、安息香提取挥发油，加水倍数5-20倍，提取时间1.5-6h，收集挥发油，水提取液和药渣备用；
（2）醇提工艺：将上述药渣进行醇提，乙醇浓度30-80%，加醇倍数3-18，回流时间1-6h，提取次数1-4次，过滤，回收乙醇，浓缩至稠膏，密度1.10，温度为40-60℃，干燥，得浸膏，粉碎过100目筛，备用；
（3）制备挥发油微囊：
①囊材的选择：筛选阿拉伯胶、明胶中一种或两种按比例混合的复合囊材；
②将提取的挥发油加入到①囊材溶液中，在500-1000r/min条件下搅拌乳化1-10min，使之成乳状液，用8%盐酸调节pH值至2-5，水浴37℃保温20min；
③向②加入0.5mol/L硫酸钠200ml作为稀释液，冷至室温后用氢氧化钠调pH值至8-9，再加37%甲醛溶液固化微囊，静置，分离，水洗至无甲醛，37℃干燥，得微囊，过100目筛备用；
（4）将上述浸膏、挥发油微囊中加入适宜辅料制成颗粒剂。
8.根据权利要求7一种治疗鸡坏死性肠炎的药物组合物，其特征在于，该药物组合物制剂颗粒剂制备工艺中阿拉伯胶浓度2-20%、明胶浓度5-20%，两种按比例1:5-5:1混合。
9.根据权利要求7一种治疗鸡坏死性肠炎的药物组合物，其特征在于，该药物组合物制剂颗粒剂制备工艺所述辅料为乳糖、微晶纤维素、甘露醇中一种或多种组合。
10.权利要求1-9任意一项制备的一种治疗鸡坏死性肠炎的药物组合物在治疗鸡坏死性肠炎中的应用。
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