CN111303185B - 一种具有抑制肿瘤活性的化合物及其提取方法 - Google Patents

一种具有抑制肿瘤活性的化合物及其提取方法 Download PDF

Info

Publication number
CN111303185B
CN111303185B CN202010270253.6A CN202010270253A CN111303185B CN 111303185 B CN111303185 B CN 111303185B CN 202010270253 A CN202010270253 A CN 202010270253A CN 111303185 B CN111303185 B CN 111303185B
Authority
CN
China
Prior art keywords
compound
activity
inhibiting activity
extraction method
methanol
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CN202010270253.6A
Other languages
English (en)
Other versions
CN111303185A (zh
Inventor
杨炳友
刘艳
夏永刚
匡海学
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Heilongjiang University of Chinese Medicine
Original Assignee
Heilongjiang University of Chinese Medicine
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Heilongjiang University of Chinese Medicine filed Critical Heilongjiang University of Chinese Medicine
Priority to CN202010270253.6A priority Critical patent/CN111303185B/zh
Publication of CN111303185A publication Critical patent/CN111303185A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN111303185B publication Critical patent/CN111303185B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D493/00—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system
    • C07D493/22—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system in which the condensed system contains four or more hetero rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents

Landscapes

  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Abstract

本发明涉及一种具有抑制肿瘤活性的新化合物，以及从五味子叶中提取分离该化合物的方法。活性实验表明，本发明化合物对Caco2结肠上皮细胞具有优异的抑制活性。

Description

一种具有抑制肿瘤活性的化合物及其提取方法
技术领域
本发明涉及一种具有抑制肿瘤活性的新化合物及其提取方法，具体涉及从五味子叶中提取分离具有抑制肿瘤活性的化合物。
背景技术
五味子为木兰科植物五味子的干燥成熟果实，其具有敛肺止咳、滋补涩精、止泻止汗之效。目前，国内外对五味子研究主要集中于五味子果实的化学成分及其活性，据现有技术证实五味子果实含有五味子素、木脂素、有机酸、挥发油、氨基酸、鞣质及多糖等多种化学成分；而作为五味子主要组成部分的五味子叶中的活性成分研究较少，其通常作为废弃物丢掉。
本发明对五味子叶中活性成分进行研究，以期变废为宝，从中获得更多具有生物活性的药用成分，为寻找新的天然药物提供选择范围。
通过对五味子中的活性成分进一步分离研究，发明人发现了一种具有抑制肿瘤细胞活性的新化合物。
发明内容
本发明一方面提供一种式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其具有如下结构：
Figure BDA0002442904280000011
本发明另一方面提供式(I)化合物或其药学上可接受的盐的制备方法，其方案如下：
A.将干燥的五味子叶用1-12倍重量的乙醇回流提取2-6次，回收溶剂得浸膏；
B.将浸膏与水混悬均匀，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取，分别得石油醚提取物，乙酸乙酯提取物，正丁醇提取物。
C.乙酸乙酯提取物采用硅胶柱色谱分离，以二氯甲烷-甲醇为流动相进行梯度洗脱，得到9个馏分，Fr.A-Fr.AI；
D.将Fr.D馏分经MCI柱色谱分离，甲醇-水梯度洗脱，得到14个馏分段，Fr.D1-Fr.D14；
E.将Fr.D8馏分通过SephadexLH-20葡聚糖凝胶柱层析分离，甲醇洗脱，得到10个馏分段，Fr.D8-1～Fr.D8-10；
F.Fr.D8-5馏分通过制备HPLC，以甲醇-水为洗脱剂，得到化合物54(式I)，为无色针状晶体。
其中，所述步骤A中，乙醇为70-95％乙醇，优选75-85％乙醇，最优选80％乙醇；五味子叶与乙醇的重量比为1：1-12，优选1：1-6，最优选1：1-3；提取次数优选2-4次，最优选2次；提取时间为1-6h/次，优选2-4h/次，最优选2h/次。
所述步骤B中，浸膏与水的重量比为1：1-4，优选1：1-2，最优选1：1；
所述步骤C中，二氯甲烷与甲醇的体积比为1:0-0:1；
所述步骤D中，甲醇与水的体积比为2:8-8:2；
所述步骤F中，甲醇与水的体积比为55:45。
本发明另一方面提供药物组合物，其包括式(I)化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体。
本发明再一方面提供式(I)化合物或其药学上可接受的盐在制备预防和/或治疗癌症药物中的用途。经活性研究表明，本发明化合物具有抑制肿瘤细胞生长的作用，其对Caco2结肠上皮细胞具有优异的抑制活性，可以用于诸如结肠癌、直肠癌等癌症的预防或治疗
具体实施方式
在下文中更详细地描述了本发明以有助于对本发明的理解。
实施例1：化合物54的分离
干燥的五味子叶14.0Kg,80％乙醇回流提取2次，2h/次，回收溶剂得浸膏3.5Kg.将浸膏与水1:1混悬均匀，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取，得石油醚层381.0g，乙酸乙酯层603.0g，正丁醇层526.0g。取乙酸乙酯层263.8g，采用硅胶柱色谱，以二氯甲烷-甲醇(1:0-0:1)为流动相进行梯度洗脱，将所得到的洗脱液经TLC分析鉴别后合并，最终得到9个馏分，Fr.A-I。将Fr.D(22.6g)经MCI柱色谱分离，甲醇-水梯度洗脱(30:70-80:20，1：0)得到14个馏分段，Fr.D1～Fr.D14。Fr.D8(1.8g)通过SephadexLH-20葡聚糖凝胶柱层析分离，甲醇洗脱，得到10个馏分段，Fr.D8-1～Fr.D8-10。Fr.D5(20mg)通过制备HPLC(甲醇：水55:45)纯化得化合物54(1.1mg)。
化合物54的表征数据如下：
化合物54的ESI-MS(e/z)：([M+NH4]+560.2505计算值560.2496)
化合物54的结构式及其NMR数据归属：
Figure BDA0002442904280000031
表1.化合物54的NMR(Pyridine-d6,δinppm,JinHz)
Figure BDA0002442904280000032
Figure BDA0002442904280000041
实施例2化合物54活性筛选及结果
2.1实验方法
Caco2结肠上皮细胞购买自中国科学院上海生科院细胞资源中心，用DMEM含20％FBS和1％PS的培养基培养于37℃、5％CO2细胞培养箱。
将对数生长期的Caco2细胞以密度为1×104个/mL接种于96孔培养板，24h细胞完全贴壁后，用含有20％胎牛血清的高糖培养基进行培养，配置不同浓度的降三萜化合物54溶液(0-1000μg/mL)，每孔加入200μL，设六个复孔，同时设空白对照组，于37℃，5％CO2条件下培养24h。每孔加入CCK-8液10μL，继续培养1h后，用酶标仪于450nm处测量吸光度(A)，并计算细胞的抑制率。
2.2实验结果
表2
Figure BDA0002442904280000051
由表2可知，本发明化合物54对人结肠腺癌细胞的IC50值为0.0042μM(4.2nM)，其对人结肠腺癌细胞显示出了极高的抑制活性，其可以用于预防或治疗癌症，如结肠癌、直肠癌。
此外，我们按照上述方法对化合物54具有类似结构的化合物(LancifodilactoneI和Wuweizidilactone B)进行了Caco-2细胞抑制活性试验，结果发现两种化合物的IC50均大于100μM，不具备抗肿瘤活性药物价值，两种化合物的具体结构如下：
Figure BDA0002442904280000052
以上描述了本发明优选实施方式，然其并非用以限定本发明。本领域技术人员对在此公开的实施方案可进行并不偏离本发明范畴和精神的改进和变化。

Claims (3)

1.一种式(I)化合物或其药学上可接受的盐：
Figure FDA0002985129190000011
2.一种药物组合物，其包括权利要求1所述式(I)化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体。
3.权利要求1所述式(I)化合物或其药学上可接受的盐在制备预防和/或治疗癌症药物中的用途，其中癌症选自结肠癌、直肠癌。
CN202010270253.6A 2020-04-08 2020-04-08 一种具有抑制肿瘤活性的化合物及其提取方法 Expired - Fee Related CN111303185B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010270253.6A CN111303185B (zh) 2020-04-08 2020-04-08 一种具有抑制肿瘤活性的化合物及其提取方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010270253.6A CN111303185B (zh) 2020-04-08 2020-04-08 一种具有抑制肿瘤活性的化合物及其提取方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN111303185A CN111303185A (zh) 2020-06-19
CN111303185B true CN111303185B (zh) 2021-05-25

Family

ID=71151899

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202010270253.6A Expired - Fee Related CN111303185B (zh) 2020-04-08 2020-04-08 一种具有抑制肿瘤活性的化合物及其提取方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN111303185B (zh)

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS61282315A (ja) * 1985-06-07 1986-12-12 Tsumura Juntendo Inc 肝不全症治療剤
KR100752750B1 (ko) * 2005-07-11 2007-08-29 최영환 오미자로부터 추출된 쉬산드렌 및 이를 주성분으로 한 항산화제 조성물
CN102050733B (zh) * 2009-10-29 2013-05-29 复旦大学 联苯环辛烯型木脂素类化合物及其药物用途
KR101201866B1 (ko) * 2010-06-23 2012-11-15 건국대학교 산학협력단 고미신-ａ를 유효성분으로 함유하는 암 예방 및 치료를 위한 약학 조성물
CN103012359B (zh) * 2011-12-31 2015-09-09 广州白云山陈李济药厂有限公司 (2′s)-南五味子木质素j及其制备方法
CN108299361A (zh) * 2018-03-29 2018-07-20 湖南中医药大学 一种以异型南五味子为原料制备五内酯e的方法及在制备抗肿瘤药物中的应用
CN109908201A (zh) * 2019-05-07 2019-06-21 黑龙江中医药大学 一种中药组合物提取物及制备工艺与应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN111303185A (zh) 2020-06-19

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN105362315B (zh) 一种东革阿里提取物及其制备方法
CN107698546B (zh) 马齿苋中化合物Oleracone D及其提取分离方法
CN110818669B (zh) 沉香四氢2-（2-苯乙基）色酮类化合物及其分离方法和应用
CN110066283B (zh) 一种吲哚二酮哌嗪类生物碱及其制备方法和用途
CN109134574B (zh) 甾体化合物及其制备方法与应用和抗肿瘤的药物
CN110746421B (zh) 吲哚单萜类化合物的提取方法及应用
CN111303185B (zh) 一种具有抑制肿瘤活性的化合物及其提取方法
CN111689923B (zh) 一个具有逆转肿瘤多药耐药活性的环脂肽化合物、其制备方法及用途
CN113061124B (zh) 倍半萜二聚体化合物及其制备方法、应用和药物组合物
CN103191143B (zh) 一种强心苷化合物的用途
CN113214214B (zh) 关苍术中一种萜类化合物的制备方法和应用
CN111377933B (zh) 诸葛菜种子提取的生物碱类化合物及其提取方法与应用
CN109824685B (zh) 马齿苋中化合物oleracone G及其提取分离方法与应用
CN112079897A (zh) 两种甾体类化合物及其制备方法和应用
CN111808015A (zh) 一类苯丙氨酸来源的细胞松弛素及其制备方法和应用
CN110368407B (zh) 一种钩枝藤枝叶有效部位及其制备方法和应用
CN108129309B (zh) 一类具有抗肿瘤活性的艾里莫芬烷倍半萜及其制备方法
CN111606787B (zh) 一种脂肪醇类化合物及其制备方法
CN113880857B (zh) 多异戊烯基取代的笼状氧杂蒽酮类化合物及其制备方法和应用
CN114685420B (zh) 一种具有抗肿瘤活性的化合物及其制备方法与应用
CN115677471B (zh) 玫瑰烷型二萜类化合物及制备、药物组合物和抗肿瘤应用
CN116496332B (zh) 一种半日花烷型二萜苷化合物及其制备方法
CN115611844B (zh) 一种从关苍术中分离得到的化合物的制备方法和应用
CN109180467B (zh) 三十四碳-（20,23）-二烯酸的提取方法及其应用
CN109589340B (zh) 蝼蛄提取物在制备治疗三阴乳腺癌药物中的应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20210525

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee