CN111286472A - 一种具有产香功能的解淀粉芽孢杆菌及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种具有产香功能的解淀粉芽孢杆菌，为OS‑12菌种，其生物保藏编号为CGMCC No.18457；其制备方法，包括以下步骤：菌种活化、种子液制备、发酵液的制备；一种利用上述解淀粉芽孢杆菌制作产香剂的方法，按下述步骤进行：在发酵液中按照重量比加入0.05％‑0.15％的吐温80及0.005％‑0.015％的氮酮，与发酵液混合均匀，即得微生物产香剂；OS‑12菌种可以应用在除臭和增香方面；本发明的有益效果在于，广谱性强，对大部分发酵食品生产都适用；增香速度快，调香效果好；安全环保，本功能菌种OS‑12是由自然界中筛选分离得到，未进行基因改造，来源资源广，容易得到，与常规化学增香、调香剂相比安全性大大提高，有利于可持续农业的发展。
Description
技术领域
本发明涉及微生物领域，尤其涉及一种具有产香功能的解淀粉芽 孢杆菌及其制备方法和应用。
背景技术
产香微生物是指在生长过程中可以发酵代谢产生香味物质的微生 物，大部分为乳酸菌、双歧杆菌、酵母菌和霉菌类，不同的产香微生 物产生的香味物质各不相同。利用微生物产香天然、安全健康、周期 短、不受原料的限制，既可降低成本，又可提高香料产量，已广泛应 用于香烟、果酒、香水、化妆品等领域。产香微生物主要来源于酒醋 酱油等发酵产品、土壤、天然植物。自然界植物资源丰富，特别是具 有特殊香味的植物多种多样，从植物组织分离已成为获得产香菌株的 重要途径之一。
发明内容
本发明的目的在于针对现有技术的不足而提供一种具有产香功 能的解淀粉芽孢杆菌及其制备方法和应用。
为达到上述目的，本发明通过以下技术方案来实现。
一种具有产香功能的解淀粉芽孢杆菌，为OS-12菌种，该OS-12 菌菌株于2019年09月02日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通 微生物中心保藏，保藏编号为CGMCCNo.18457，建议分类命名为： 解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens，保藏地址：北京市朝阳区 北辰西路1号院3号。
一种具有产香功能的解淀粉芽孢杆菌的制备方法，它包括以下步 骤：
(1)菌种活化：将-80℃下保存的OS-12菌株活化12～16h，挑 取单菌落在固体培养基上，在35℃下培养1～2天，得到活化的菌株；
(2)种子液制备：用无菌接种环刮培养基上活化的菌株接种到 50ml液体培养基中，在温度为35℃、转速为160rpm条件下培养24h， 得到种子液；
(3)发酵液的制备：按照种子液、培养液体积比为1：120的比 例将种子液接入到车间发酵料培养基中，在温度为36.5-37.5℃、转速 为120rpm/min条件下培养25-30h，得到发酵液。
进一步的，步骤(3)中的发酵液，即为具有产香功能的解淀粉 芽孢杆菌菌液，对发酵液进行喷粉干燥，即为具有产香功能的解淀粉 芽孢杆菌菌粉，解淀粉芽孢杆菌菌液和菌粉的有效活菌数均控制在 2.0×1010cfu/g以上。
进一步的，OS-12菌培养基配方，所述培养基的组分及其重量百 分比为：黄豆粉1.0-1.6％、蔗糖0.1-0.5％、蛋白胨0.2-0.6％、玉米粉 0.2-0.6％、碳酸钙0.3-0.9％、鱼粉0.1-0.3％、硫酸铵0.01-0.08％、硫酸 镁0.02-0.05％、磷酸二氢钾0.01-0.04％、磷酸氢二钾0.02-0.05％、硫 酸锰0.01-0.04％、氢氧化钠0.01-0.04％、氯化钠0.02-0.03％、消泡剂0.5-1.5％，用盐酸及氢氧化钠调节pH至6.8-7.5。
一种利用上述解淀粉芽孢杆菌制作产香剂的方法，按下述步骤进 行：在步骤(3)所得的发酵液中按照重量比加入0.05％-0.15％的吐温 80及0.005％-0.015％的氮酮，与发酵液混合均匀，即得微生物产香剂。
一种由上述方法制备的具有产香功能的解淀粉芽孢杆菌的应用， 在除臭和增香方面的应用。
本发明的有益效果在于：广谱性强，采用本专利中的解淀粉芽孢 杆菌OS-12生产出的微生物产香剂，对大部分发酵食品生产都适用， 节约成本，提高经济效益；增香速度快，调香效果好；安全环保，本 功能菌种OS-12是由自然界中筛选分离得到，未进行基因改造，来源 于桂花，来源资源广，容易得到，田间使用不具有风险，其分泌的产 香物质对作物、动物和人体均不产生危害，可实现田间、作物、水源 无污染、无残留，与常规化学增香、调香剂相比安全性大大提高，有 利于可持续农业的发展。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步说明，但不局限于说明书上的 内容。
一种具有产香功能的解淀粉芽孢杆菌，为OS-12菌种，该OS-12 菌菌株于2019年09月02日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微 生物中心保藏，保藏编号为CGMCCNo.18457，保藏地址：北京市朝阳 区北辰西路1号院3号。
一种具有产香功能的解淀粉芽孢杆菌的制备方法，它包括以下步 骤：
(1)菌种活化：将-80℃下保存的OS-12菌株活化12～16h，挑 取单菌落在固体培养基上，在35℃下培养1～2天，得到活化的菌株；
OS-12菌培养基配方，所述培养基的组分及其重量百分比为：黄 豆粉1.0-1.6％、蔗糖0.1-0.5％、蛋白胨0.2-0.6％、玉米粉0.2-0.6％、 碳酸钙0.3-0.9％、鱼粉0.1-0.3％、硫酸铵0.01-0.08％、硫酸镁0.02-0.05％、 磷酸二氢钾0.01-0.04％、磷酸氢二钾0.02-0.05％、硫酸锰0.01-0.04％、 氢氧化钠0.01-0.04％、氯化钠0.02-0.03％、消泡剂0.5-1.5％，用盐酸 及氢氧化钠调节pH至6.8-7.5。
(2)种子液制备：用无菌接种环刮培养基上活化的菌株接种到 50ml液体培养基中，在温度为35℃、转速为160rpm条件下培养24h， 得到种子液；
(3)发酵液的制备：按照菌种与培养液体积比为1：120的比例 将种子液接入到车间发酵料培养基中，在温度为36.5-37.5℃、转速为 120rpm/min条件下培养25-30h，得到发酵液。
(4)步骤(3)中的发酵液，即为具有产香功能的解淀粉芽孢杆 菌菌液，对发酵液进行喷粉干燥，即为具有产香功能的解淀粉芽孢杆 菌菌粉，解淀粉芽孢杆菌菌液和菌粉的有效活菌数均控制在 2.0×1010cfu/g以上。
(5)解淀粉芽孢杆菌制作产香剂的制备方法，按下述步骤进行： 在步骤(3)所得的发酵液中按照重量比加入0.05％-0.15％的吐温80 及0.005％-0.015％的氮酮，与发酵液混合均匀，即得微生物产香剂。
一种由上述方法制备的具有产香功能的解淀粉芽孢杆菌的应用， 在除臭和增香方面的应用，具体实施方式如下。
具体实施例1：将OS-12应用于馒头的制作，将其分为四个处理 组，采用不同的稀释倍数检验馒头增香的效果，选择最优增香配方。
处理一：250g面粉+清水125ml+3g酵母粉；
处理二：250g面粉+OS-12菌原液125ml+3g酵母粉；
处理三：250g面粉+稀释10倍的OS-12菌液125ml+3g酵母粉；
处理四：250g面粉+稀释100倍的OS-12菌液125ml+3g酵母粉。
分别将4个处理组的材料均匀混合揉面，用手揉直至表面光滑后， 放置发酵30min。将面团分成若干等份后，置于蒸屉中，汽蒸 25min-30min。将蒸好的馒头取出判断馒头是否有香味。
试验结果及分析：加了OS-12菌液的馒头都有香味，原液与空白 对照相比有味道，但味道较淡；随着稀释倍数升高，味道越来越淡。
具体运用在使馒头增香中，最优的增香制备步骤为：将制备的 OS-12菌液按照重量比0.1％-0.5％加入到发酵的面粉中，加入酵母， 加入适量干净水，揉搓面粉，将面团在35℃-40℃的条件下，自然发 酵25min-30min后，置于蒸屉中，98℃条件下，汽蒸25min-30min， 最终得到带有香味的产品。
具体实施例2：将OS-12组合菌液应用在烟叶上，探究其增香 效果及最佳增香组方。
试验方法：设置清水空白对照、单一菌液组24-7、OS-12、YZ-1， 组合菌液组24-7+OS-12、24-7+YZ-1、OS-12+YZ-1、24-7+OS-12+YZ-1 进行对比实验，共设原液、稀释10倍、稀释100倍三个梯度，将不 同处理组的菌液喷在烟叶上，密封烟叶，每隔3天，将保鲜袋打开检测烟叶是否有香味。
其中24-7菌株保藏编号为CGMCC No.18460，建议分类命名为： 枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis，保藏日期为2019年09月02日，保 藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北 京市朝阳区北辰西路1号院3号；其中YZ-1菌株保藏编号为：CGMCC No.15728，建议分类命名为：枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis，保藏日 期为2018年05月04日，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普 通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
试验结果及分析：将组合菌液喷于干、湿烟叶后，与空白对比烟 叶都有香气产生，24-7、OS-12优于YZ-1，24-7与OS-12无较大差异， 24-7+OS-12优于24-7+YZ-1、OS-12+YZ-1、24-7+OS-12+YZ-1。喷施原 液后的烟叶有香味但带有烟叶的刺激性，稀释10倍后烟叶较香，无 刺激性，稀释100倍后香味较淡，无刺激性。OS-12组合菌液在烟叶 上应用的最优组合为：24-7+OS-12稀释10倍。
具体实施例3：将24-7与OS-12复配除臭试验探究，判断OS-12 的除臭效果及最佳除臭组方。
试验方法：将24-7与OS-12复配，比例1:1-1:9(固定24-7菌液 比例为1，调整OS-12比例)，每隔3天，统计试验结果。
试验结果及分析：1:1、1:2有24-7菌味，1:3既无24-7菌味，也 无0S-12菌香味，1:4有细微的OS-12菌香味，1:5、1:6两个比例组方 中OS-12菌香味明显，1:7、1:8、1:9三个比例的组方有刺鼻的味道。 24-7与OS-12复配比例为1:3，可以除去24-7的菌味。复配比例为1:4、 1:5、1:6，混合菌液有香味，3天后就能有效除臭，除臭效率高，效 果明显。
本发明的有益效果在于：广谱性强，采用本发明中的解淀粉芽孢 杆菌OS-12生产出的微生物产香剂，对大部分发酵食品生产都适用， 节约成本，提高经济效益；增香速度快，调香效果好；安全环保，本 功能菌种OS-12是由自然界中筛选分离得到，未进行基因改造，来源 于桂花，来源资源广，容易得到，田间使用不具有风险，其分泌的产 香物质对作物、动物和人体均不产生危害，可实现田间、作物、水源 无污染、无残留，与常规化学增香、调香剂相比安全性大大提高，有 利于可持续农业的发展。
以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和本发明的优点。 本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实 施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神 和范围的前提下本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落 入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求 书及其等同物界定。
Claims (7)
1.一种具有产香功能的解淀粉芽孢杆菌，其特征在于：所述有产香功能的解淀粉芽孢杆菌为OS-12菌种，生物保藏编号为CGMCC No.18457。
2.一种具有产香功能的解淀粉芽孢杆菌的制备方法，其特征在于，它包括以下步骤：
(1)菌种活化：将-80℃下保存的OS-12菌株活化12～16h，挑取单菌落在固体培养基上，在35℃下培养1～2天，得到活化的菌株；
(2)种子液制备：用无菌接种环刮培养基上活化的菌株接种到50ml液体培养基中，在温度为35℃、转速为160rpm条件下培养24h，得到种子液；
(3)发酵液的制备：按照种子液、培养液体积比为1：120的比例将种子液接入到车间发酵料培养基中，在温度为36.5-37.5℃、转速为120rpm/min条件下培养25-30h，得到发酵液。
3.据权利要求2所述的一种具有产香功能的解淀粉芽孢杆菌的制备方法，其特征在于：步骤(3)中的发酵液，即为具有产香功能的解淀粉芽孢杆菌菌液，对发酵液进行喷粉干燥，即为具有产香功能的解淀粉芽孢杆菌菌粉，解淀粉芽孢杆菌菌液和菌粉的有效活菌数均控制在2.0×1010cfu/g以上。
4.据权利要求2所述的一种具有产香功能的解淀粉芽孢杆菌的制备方法，其特征在于：OS-12菌培养基配方，所述培养基的组分及其重量百分比为：黄豆粉1.0-1.6％、蔗糖0.1-0.5％、蛋白胨0.2-0.6％、玉米粉0.2-0.6％、碳酸钙0.3-0.9％、鱼粉0.1-0.3％、硫酸铵0.01-0.08％、硫酸镁0.02-0.05％、磷酸二氢钾0.01-0.04％、磷酸氢二钾0.02-0.05％、硫酸锰0.01-0.04％、氢氧化钠0.01-0.04％、氯化钠0.02-0.03％、消泡剂0.5-1.5％，用盐酸及氢氧化钠调节pH至6.8-7.5。
5.一种具有产香功能的解淀粉芽孢杆菌制作产香剂的方法，其特征在于，按下述步骤进行：在步骤(3)所得的发酵液中按照重量比加入0.05％-0.15％的吐温80及0.005％-0.015％的氮酮，与发酵液混合均匀，即得微生物产香剂。
6.一种具有产香功能的解淀粉芽孢杆菌制作馒头的方法，其特征在于，按下述步骤进行：将制备的OS-12菌粉按照重量比0.1％-0.5％加入到发酵的面粉中，加入酵母，加入水，揉搓成面团后，将面团在35℃-40℃的条件下，自然发酵25min-30min后蒸煮为成品馒头。
7.一种由权利要求2-3任意一项所述的方法制备的具有产香功能的解淀粉芽孢杆菌的应用，其特征在于：在除臭和增香方面的应用。
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Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114214248A (zh) * | 2021-12-29 | 2022-03-22 | 云南省微生物发酵工程研究中心有限公司 | 一种降解pbat地膜的枯草芽孢杆菌降解剂及其制备方法 |
Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105585379A (zh) * | 2015-12-21 | 2016-05-18 | 云南省微生物发酵工程研究中心有限公司 | 一种生物复合肥及应用 |
| US20170020173A1 (en) * | 2015-07-23 | 2017-01-26 | Jiangnan University | Method for improving the quality of soy sauce using Bacillus amyloliquefaciens |
| CN109602071A (zh) * | 2019-01-30 | 2019-04-12 | 云南中烟工业有限责任公司 | 一种强化烟叶发酵过程的方法 |
| CN109652329A (zh) * | 2018-12-28 | 2019-04-19 | 云南省微生物发酵工程研究中心有限公司 | 一种芽孢杆菌属固体微生物菌剂的制备及应用 |
| CN109706095A (zh) * | 2018-12-29 | 2019-05-03 | 贵州大学 | 一株解淀粉芽孢杆菌及其应用 |
| CN109971680A (zh) * | 2019-03-29 | 2019-07-05 | 云南省微生物发酵工程研究中心有限公司 | 一种具有抗病促生长功能的复合微生物菌剂的制备及应用 |
| CN110250209A (zh) * | 2019-06-19 | 2019-09-20 | 云南省微生物发酵工程研究中心有限公司 | 一种具有防治烟草霉烂病功能的微生物菌剂及其制备方法和应用 |
-
2019
- 2019-12-20 CN CN201911325335.XA patent/CN111286472B/zh active Active
Patent Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20170020173A1 (en) * | 2015-07-23 | 2017-01-26 | Jiangnan University | Method for improving the quality of soy sauce using Bacillus amyloliquefaciens |
| CN105585379A (zh) * | 2015-12-21 | 2016-05-18 | 云南省微生物发酵工程研究中心有限公司 | 一种生物复合肥及应用 |
| CN109652329A (zh) * | 2018-12-28 | 2019-04-19 | 云南省微生物发酵工程研究中心有限公司 | 一种芽孢杆菌属固体微生物菌剂的制备及应用 |
| CN109706095A (zh) * | 2018-12-29 | 2019-05-03 | 贵州大学 | 一株解淀粉芽孢杆菌及其应用 |
| CN109602071A (zh) * | 2019-01-30 | 2019-04-12 | 云南中烟工业有限责任公司 | 一种强化烟叶发酵过程的方法 |
| CN109971680A (zh) * | 2019-03-29 | 2019-07-05 | 云南省微生物发酵工程研究中心有限公司 | 一种具有抗病促生长功能的复合微生物菌剂的制备及应用 |
| CN110250209A (zh) * | 2019-06-19 | 2019-09-20 | 云南省微生物发酵工程研究中心有限公司 | 一种具有防治烟草霉烂病功能的微生物菌剂及其制备方法和应用 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 赵爽 等: "白酒生产中酿酒微生物研究进展", 《中国酿造》 * |
| 黄永光 等: "产酱香风味芽孢杆菌类菌株发酵代谢产物及其酶分析研究", 《酿酒科技》 * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114214248A (zh) * | 2021-12-29 | 2022-03-22 | 云南省微生物发酵工程研究中心有限公司 | 一种降解pbat地膜的枯草芽孢杆菌降解剂及其制备方法 |
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