CN102399725A - 一组卷烟赋香菌株及复配的微生物制剂及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种卷烟叶组赋香复配微生物制剂及其复配方法，该卷烟叶组赋香微生物制剂组成为芽孢杆菌(Bacillus sp..)LBT1.0007、芽孢杆菌(Bacillus sp..)LBT1.0013和酵母菌(Saccharomyces.sp.)LBT1.0038，在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏号分别为CGMCCNo.5332、CGMCC No.5333和CGMCC No.5334。该复配菌株均由醇化烟叶表面分离筛选获得，是一种新的卷烟叶组赋香微生物制剂，经该微生物处理后，卷烟叶组的吸食品质改善明显，达到商品化卷烟相关技术要求。
Description
技术领域
本发明属于微生物技术领域，具体涉及3种卷烟赋香菌株及复配的卷烟赋香微生物制剂，其中包括2株芽孢杆菌(Bacillus sp.)和1株酵母菌(Saccharomyces sp.)，该卷烟赋香微生物制剂能够用于卷烟发酵，替代传统的加香，经发酵处理的卷烟理化指标和评吸结果均达到商品化卷烟标准。
背景技术
卷烟工业中，根据不同卷烟叶组中的烟叶品种、烟叶产地、烟叶等级、烟叶年份和烟叶配比等，通过加料加香，赋予卷烟产品特定产品风格，提供给消费者特定的感官体验。通过加料，可以改善卷烟的吸食品质、改善烟丝的物理性状、改善烟丝的燃烧性和防止烟丝霉变等；通过加香，在不损害烟叶原有香气的情况下，衬托烟香，同时掩盖杂气，达到增香赋香、改善吃味和协调香味的作用，进而最终形成卷烟产品风格。按照来源不同，烟草香料包括天然香料和合成香料2大类。然而，世界卫生组织(WHO)在《烟草控制框架公约》中建议各国限制或禁止在烟草中使用香料等添加剂，包括葡萄糖、蜂蜜、香草醛和中草药等天然或合成烟香香料都在范围内。我国已于2005年正式批准《烟草控制框架公约》，减少和限制天然和合成香料的使用是大势所趋。
采用烟叶表面微生物来达到替代传统加料加香的目的，以期形成新的卷烟的卷烟产品。本领域技术人员也做了大量的工作，实际上，微生物发酵已被证明可改善烟叶可用性，是烟叶吸食品质形成的重要环节，根据发酵方式的不同，可分为人工发酵和自然发酵，国内外学者针对烟叶的人工发酵进行了大量的研究和实践。然而，但还未有仅使用复配微生物制剂用于卷烟产品风格形成的报道。
发明内容
针对卷烟工业发展的需求，本发明目的在于，通过分离、筛选、培养得到了3株卷烟赋香菌株，经复配可以用于卷烟叶组的赋香，替代传统加料加香工艺。经实验证明，采用该复配菌株制剂用于卷烟发酵后，卷烟的理化指标和评吸结果均达到商品化卷烟标准。
为了实现上述任务，本发明的方法通过以下技术方案得以实现：
一种卷烟赋香菌株，其特征在于，该卷烟赋香菌株命名为芽孢杆菌(Bacillus sp.)LBT1.0007，保藏号为CGMCC No.5332。
一种卷烟赋香菌株，其特征在于，该卷烟赋香菌株命名为芽孢杆菌(Bacillus sp.)LBT1.0013，保藏号为CGMCC No.5333。
一种卷烟赋香菌株，其特征在于，该卷烟赋香菌株命名为酵母菌(Saccharomyces sp.)LBT1.0038，保藏号为CGMCC No.5334。
一种卷烟赋香微生物复配制剂，其特征在于，该卷烟赋香微生物复配制剂含有芽孢杆菌(Bacillus sp.)LBT1.0007、芽孢杆菌(Bacillus sp.)LBT1.0013和酵母菌(Saccharomyces sp.)LBT1.0038，且芽孢杆菌(Bacillus sp.)LBT1.0007∶芽孢杆菌(Bacillus sp.)LBT1.0013∶酵母菌(Saccharomyces sp.)LBT1.0038＝(0.001～1)∶(0.001～1.5)∶(0.005～15)。
上述芽孢杆菌(Bacillus sp.)LBT1.0007或芽孢杆菌(Bacillus sp.)LBT1.0013的分离筛选方法，其特征在于，该方法先用无菌生理盐水与1g醇化烟叶混合后，用无菌取样的方法取1mL混合液加入到9mL灭菌生理盐水中制成10-1菌悬液，然后逐级稀释，取10-2、10-3、10-4、10 -5、10-6、10-7六个稀释度的菌悬液0.2mL涂布到LB培养基上，37℃恒温培养24h，挑取长势良好，菌落饱满均匀，且稀释度适宜的平板的单菌落，镜检；
LB培养基主要成分为：胰化蛋白胨：1％，酵母提取物：0.5％，NaCl：1％；酵母提取物(yeast extract)，也称酵母膏，市售。
镜检若为纯培养单一菌株，则接种于LB斜面固体培养基，37℃恒温培养24h后保藏于4℃冰箱；
LB斜面固体培养基主要成分为：胰化蛋白胨：1％，酵母提取物：0.5％，NaCl：1％；琼脂：2％；
镜检若为混合菌株，则再次在LB培养基平板上进行划线分离，直至镜检为菌株纯培养物后，接种斜面试管，37℃恒温培养24h后保藏于4℃冰箱；
对筛选所得的所有纯培养菌株用于烟叶发酵，并根据烟叶理化性质和评吸结果，最终筛选和确定卷烟赋香菌株。
上述酵母菌(Saccharomyces sp.)LBT1.0038的分离筛选方法，其特征在于，该方法先用无菌生理盐水与1g醇化烟叶混合后，用无菌取样的方法取1mL混合液加入到9mL灭菌生理盐水中制成10-1菌悬液，然后逐级稀释，取10-2、10-3、10-4、10-5、10-6、10-7六个稀释度的菌悬液0.2mL涂布到YPD培养基上，32℃恒温培养24h，挑取长势良好，菌落饱满均匀，且稀释度适宜的平板的单菌落，镜检；
YPD培养基主要成分为：酵母膏：1％，蛋白胨：2％，葡萄糖：2％；
镜检若为纯培养单一菌株，则接种于YPD斜面固体培养基，32℃恒温培养24h后保藏于 4℃冰箱；
YPD斜面固体培养基主要成分为：酵母膏：1％，蛋白胨：2％，葡萄糖：2％；琼脂：2％；
镜检若为混合菌株，则再次在YPD培养基平板上进行划线分离，直至镜检为菌株纯培养物后，接种斜面试管，32℃恒温培养24h后保藏于4℃冰箱；
对筛选所得的所有纯培养菌株用于烟叶发酵，并根据烟叶理化性质和评吸结果，最终筛选和确定卷烟赋香菌株。
上述芽孢杆菌(Bacillus sp.)LBT1.0007或芽孢杆菌(Bacillus sp.)LBT1.0013的培养方法，其特征在于，将保藏的芽孢杆菌(Bacillus sp.)LBT1.0013或芽孢杆菌(Bacillus sp.)LBT1.0007从斜面接种2环至100mL的LB液体培养基中，于27℃～37℃，100rpm～180rpm恒温摇床振荡培养12h～36h，得到芽孢杆菌(Bacillus sp.)LBT1.0013或芽孢杆菌(Bacillus sp.)LBT 1.0007发酵液；其中，LB液体培养基主要成分为：胰化蛋白胨：1％，酵母提取物：0.5％，NaCl：1％；琼脂：2％，pH自然；
所得到的芽孢杆菌(Bacillus sp.)LBT1.0013或芽孢杆菌(Bacillus sp.)LBT 1.0007发酵液在4℃条件下，以8500r/min～11000r/min离心5min～15min，弃上清液得到湿菌体，进一步得到粉剂或冻干粉，保藏于4℃冰箱备用。
上述酵母菌(Saccharomyces sp.)LBT1.0038的培养方法，其特征在于，将保藏的酵母菌(Saccharomyces sp.)LBT1.0038从斜面接种2环至100mL的YPD液体培养基中，于27℃～37℃，100rpm～180rpm恒温摇床振荡培养12h～36h，得到酵母菌(Saccharomyces sp.)LBT1.0038发酵液；其中，YPD液体培养基主要成分为：酵母膏：1％，蛋白胨：2％，葡萄糖：2％，琼脂：2％，pH自然；
所得到的酵母菌(Saccharomyces sp.)LBT1.0038发酵液在4℃条件下，以8500r/min～11000r/min离心5min～15min，弃上清液得到湿菌体，进一步得到粉剂或冻干粉，保藏于4℃冰箱备用。
上述卷烟赋香微生物复配制剂的配制方法，其特征在于，将各菌株发酵液、粉剂或冻干粉在4℃条件下，于8500r/min～11000r/min离心5min～15min，弃上清液得到湿菌体，称量，然后以芽孢杆菌(Bacillus sp.)LBT1.0007∶芽孢杆菌(Bacillus sp.)LBT1.0013∶酵母菌(Saccharomyces sp.)LBT1.0038＝(0.001～1)∶(0.001～1.5)∶(0.005～15)的比例复配。
将上述烟赋香微生物复配制剂用于卷烟叶组发酵的应用，将卷烟赋香复配菌株制剂按照0.0001wt％～10wt％质量比例喷施于切后烟丝/叶组或烘后烟丝/叶组的表面进行发酵。
本发明得到的3株卷烟赋香菌株，并配制成卷烟叶组赋香复配微生物制剂，具有易培养、 增香效果好、发酵速度快、降害效果明显等，是一种新的卷烟赋香复配微生物制剂。
具体实施方式
为了获得卷烟叶组赋香菌株，申请人从烟叶表面分离、筛选可使卷烟叶组赋香的一组微生物菌株，即芽孢杆菌(Bacillus sp.)LBT1.0007、芽孢杆菌(Bacillus sp.)LBT1.0013和酵母菌(Saccharomyces sp.)LBT1.0038，于2011年10月12日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，并配制成卷烟叶组复配赋香微生物，该复配微生物制剂其可实现卷烟叶组的增香和降害。在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏号分别为CGMCC No.5332、CGMCC No.5333和CGMCCNo.5334。
以下给出具体的分离、筛选的实施例。
1)芽孢杆菌(Bacillus sp.)LBT1.0007或芽孢杆菌(Bacillus sp.)LBT1.0013的分离与筛选：
从自然醇化3年以上的烟叶表面分离卷烟叶组赋香菌菌株，其分离方法是：先用无菌生理盐水与1g醇化烟叶混合后，用无菌取样的方法取1mL混合液加入到9mL灭菌生理盐水中制成10-1菌悬液，然后逐级稀释，取10-2、10-3、10-4、10-5、10-6、10-7六个稀释度的菌悬液0.2mL涂布到LB培养基上，37℃恒温培养24h，挑取长势良好，菌落饱满均匀，且稀释度适宜的平板的单菌落，镜检。
镜检若为纯培养单一菌株，则接种于LB斜面固体培养基，37℃恒温培养24h后保藏于4℃冰箱。
镜检若为混合菌株，则再次在LB培养基平板上进行划线分离，直至镜检为菌株纯培养物后，接种斜面试管，37℃恒温培养24h后保藏于4℃冰箱。
LB培养基主要成分为：胰化蛋白胨1％，酵母提取物0.5％，NaCl 1％；pH自然，
LB斜面固体培养基是在LB培养基的基础上加入2％琼脂成为LB斜面固体培养基；pH自然。
镜检若为纯培养单一菌株，则接种于LB斜面固体培养基，37℃恒温培养24h后保藏于4℃冰箱；
镜检若为混合菌株，则再次在LB培养基平板上进行划线分离，直至镜检为菌株纯培养物后，接种斜面试管，37℃恒温培养24h后保藏于4℃冰箱；
对筛选所得的所有纯培养菌株用于烟叶发酵，并根据烟叶理化性质和评吸结果，最终筛选和确定卷烟赋香菌株。
2)酵母菌(Saccharomyces sp.)LBT1.0038的分离与筛选：
从自然醇化3年以上的烟叶表面分离卷烟叶组赋香菌菌株，其分离方法是：
该方法先用无菌生理盐水与1g醇化烟叶混合后，用无菌取样的方法取1mL混合液加入到9mL灭菌生理盐水中制成10-1菌悬液，然后逐级稀释，取10-2、10-3、10-4、10-5、10-6、10-7六个稀释度的菌悬液0.2mL涂布到YPD培养基上，32℃恒温培养24h，挑取长势良好，菌落饱满均匀，且稀释度适宜的平板的单菌落，镜检；
YPD培养基主要成分为：酵母膏：1％，蛋白胨：2％，葡萄糖：2％；
YPD斜面固体培养基是在YPD培养基加入2％琼脂成为YPD斜面固体培养基；pH自然。
镜检若为纯培养单一菌株，则接种于YPD斜面固体培养基，37℃恒温培养24h后保藏于4℃冰箱；
镜检若为混合菌株，则再次在YPD培养基平板上进行划线分离，直至镜检为菌株纯培养物后，接种斜面试管，37℃恒温培养24h后保藏于4℃冰箱；
对筛选所得的所有纯培养菌株用于烟叶发酵，并根据烟叶理化性质和评吸结果，最终筛选和确定卷烟赋香菌株。
将所得的芽孢杆菌(Bacillus sp.)LBT1.0007或芽孢杆菌(Bacillus sp.)LBT1.0013进行培养，其方法是，将保藏的芽孢杆菌(Bacillus sp.)LBT1.0013或芽孢杆菌(Bacillus sp.)LBT1.0007从斜面接种2环至100mL的LB液体培养基中，于27℃～37℃，100rpm～180rpm恒温摇床振荡培养12h～36h，得到芽孢杆菌(Bacillus sp.)LBT1.0013或芽孢杆菌(Bacillus sp.)LBT 1.0007新鲜发酵液；其中，LB液体培养基主要成分为：胰化蛋白胨：1％，酵母提取物：0.5％，NaCl：1％；琼脂：2％，pH自然；
所得到的芽孢杆菌(Bacillus sp.)LBT1.0013或芽孢杆菌(Bacillus sp.)LBT 1.0007发酵液在4℃条件下，以8500r/min～11000r/min离心5min～15min，弃上清液得到湿菌体，进一步得到粉剂或冻干粉，保藏于4℃冰箱备用。
将所得的酵母菌(Saccharomyces sp.)LBT1.0038进行培养，其方法是，将保藏的酵母菌(Saccharomyces sp.)LBT1.0038从斜面接种2环至100mL的YPD液体培养基中，于27℃～37℃，100rpm～180rpm恒温摇床振荡培养12h～36h，得到酵母菌(Saccharomyces sp.)LBT1.0038新鲜发酵液；其中，YPD液体培养基主要成分为：酵母膏：1％，蛋白胨：2％，葡萄糖：2％，琼脂：2％，pH自然；
所得到的酵母菌(Saccharomyces sp.)LBT1.0038发酵液在4℃条件下，以8500r/min～11000r/min离心5min～15min，弃上清液得到湿菌体，进一步得到粉剂或冻干粉，保藏于4℃冰箱备用。
3)将得到的芽孢杆菌(Bacillus sp.)LBT1.0007、芽孢杆菌(Bacillus sp.)LBT1.0013和酵母菌(Saccharomyces sp.)LBT1.0038的发酵液在4℃条件下，按照芽孢杆菌(Bacillus sp.)LBT1.0007∶芽孢杆菌(Bacillus sp.)LBT1.0013∶酵母菌(Saccharomyces sp.)LBT1.0038＝(0.001～1)∶(0.001～1.5)∶(0.005～15)的比例复配，得到卷烟赋香微生物复配制剂。如果采用粉剂或冻干粉可直接进行复配。
4)用于卷烟叶组发酵
将得到卷烟赋香微生物复配制剂，按照0.0001wt％～10wt％质量比例均匀喷洒到卷烟叶组上进行恒温恒湿发酵。发酵后的卷烟叶组经烘丝、卷接和包装，获得卷烟成品
经实验证明，采用该复配菌株制剂用于卷烟发酵后，卷烟的理化指标和评吸结果均达到商品化卷烟标准(表1，表2)。
表1赋香复合微生物制剂的卷烟理化指标
| 总氮(％) | 氯(％) | 钾(％) | 烟碱(％) | |
| 赋香复合微生物制剂卷烟 | 2.04 | 0.32 | 1.537 | 2.04 |
| 对照组(喷施等量去离子水) | 2.01 | 0.32 | 2.31 | 2.12 |
表2赋香复合微生物制剂的卷烟评吸结果
| 评吸人 | 样品编号 | 光泽 | 香气 | 协调 | 杂气 | 刺激性 | 余味 | 合计 |
| 空白样 | 5 | 29 | 5 | 10 | 17 | 22 | 88 | |
| 1 | 赋香复合微生物制剂卷烟 | 5 | 30 | 6 | 10.5 | 18 | 23 | 92.5 |
| 2 | 赋香复合微生物制剂卷烟 | 5 | 29.5 | 5 | 10.5 | 17.5 | 22 | 89.5 |
| 3 | 赋香复合微生物制剂卷烟 | 5 | 29.5 | 5.5 | 10 | 18 | 22.5 | 90.5 |
| 4 | 赋香复合微生物制剂卷烟 | 5 | 29.5 | 5.5 | 10 | 17.5 | 23.0 | 90.5 |
| 5 | 赋香复合微生物制剂卷烟 | 5 | 29.5 | 6.0 | 10 | 17.5 | 22.5 | 90.5 |
| 均值 | 5 | 90.7 |
Claims (10)
1.一种卷烟赋香菌株，其特征在于，该卷烟赋香菌株命名为芽孢杆菌(Bacillus sp.)LBT1.0007，保藏号为CGMCC No.5332。
2.一种卷烟赋香菌株，其特征在于，该卷烟赋香菌株命名为芽孢杆菌(Bacillus sp.)LBT1.0013保藏号为CGMCC No.5333。
3.一种卷烟赋香菌株，其特征在于，该卷烟赋香菌株命名为酵母菌(Saccharomyces sp.)LBT1.0038，保藏号为CGMCC No.5334。
4.一种卷烟赋香微生物复配制剂，其特征在于，该卷烟赋香微生物复配制剂含有芽孢杆菌(Bacillus sp.)LBT1.0007、芽孢杆菌(Bacillus sp.)LBT1.0013和酵母菌(Saccharomyces sp.)LBT1.0038，且芽孢杆菌(Bacillus sp.)LBT1.0007∶芽孢杆菌(Bacillus sp.)LBT1.0013∶酵母菌(Saccharomyces sp.)LBT1.0038＝(0.001～1)∶(0.001～1.5)∶(0.005～15)。
5.权利要求1或2所述的卷烟赋香菌株的分离筛选方法，其特征在于，该方法，先用无菌生理盐水与1g醇化烟叶混合后，用无菌取样的方法取1mL混合液加入到9mL灭菌生理盐水中制成10-1菌悬液，然后逐级稀释，取10-2、10-3、10-4、10-5、10-6、10-7六个稀释度的菌悬液0.2mL涂布到LB培养基上，37℃恒温培养24h，挑取长势良好，菌落饱满均匀，且稀释度适宜的平板的单菌落，镜检；
LB培养基主要成分为：胰化蛋白胨：1％，酵母提取物：0.5％，NaCl：1％；
镜检若为纯培养单一菌株，则接种于LB斜面固体培养基，37℃恒温培养24h后保藏于4℃冰箱；
LB斜面固体培养基主要成分为：胰化蛋白胨：1％，酵母提取物：0.5％，NaCl：1％；琼脂：2％；
镜检若为混合菌株，则再次在LB培养基平板上进行划线分离，直至镜检为菌株纯培养物后，接种斜面试管，37℃恒温培养24h后保藏于4℃冰箱；
对筛选所得的所有纯培养菌株用于烟叶发酵，并根据烟叶理化性质和评吸结果，最终筛选和确定卷烟赋香菌株。
6.权利要求3所述的卷烟赋香菌株的分离筛选方法，其特征在于，该方法，先用无菌生理盐水与1g醇化烟叶混合后，用无菌取样的方法取1mL混合液加入到9mL灭菌生理盐水中制成10-1菌悬液，然后逐级稀释，取10-2、10-3、10-4、10-5、10-6、10-7六个稀释度的菌悬液0.2mL涂布到YPD培养基上，32℃恒温培养24h，挑取长势良好，菌落饱满均匀，且稀释度适宜的平板的单菌落，镜检；
YPD培养基主要成分为：酵母膏：1％，蛋白胨：2％，葡萄糖：2％；
镜检若为纯培养单一菌株，则接种于YPD斜面固体培养基，37℃恒温培养24h后保藏于4℃冰箱；
YPD斜面固体培养基主要成分为：酵母膏：1％，蛋白胨：2％，葡萄糖：2％；琼脂：2％；
镜检若为混合菌株，则再次在YPD培养基平板上进行划线分离，直至镜检为菌株纯培养物后，接种斜面试管，37℃恒温培养24h后保藏于4℃冰箱；
对筛选所得的所有纯培养菌株用于烟叶发酵，并根据烟叶理化性质和评吸结果，最终筛选和确定卷烟赋香菌株。
7.权利要求1或2所述的卷烟赋香菌株的培养方法，其特征在于，将保藏的芽孢杆菌(Bacillus sp.)LBT1.0013或芽孢杆菌(Bacillus sp.)LBT 1.0007从斜面接种2环至100mL的LB液体培养基中，于27℃～37℃，100rpm～180rpm恒温摇床振荡培养12h～36h，得到芽孢杆菌(Bacillus sp.)LBT1.0013或芽孢杆菌(Bacillus sp.)LBT 1.0007发酵液；其中，LB液体培养基主要成分为：胰化蛋白胨：1％，酵母提取物：0.5％，NaCl：1％；琼脂：2％，pH自然；
所得到的芽孢杆菌(Bacillus sp.)LBT1.0013或芽孢杆菌(Bacillus sp.)LBT 1.0007发酵液在4℃条件下，以8500r/min～11000r/min离心5min～15min，弃上清液得到湿菌体，进一步得到粉剂或冻干粉，保藏于4℃冰箱备用。
8.权利要求3所述的卷烟赋香菌株的培养方法，其特征在于，将保藏的酵母菌(Saccharomyces sp.)LBT1.0038从斜面接种2环至100mL的YPD液体培养基中，于27℃～37℃，100rpm～180rpm恒温摇床振荡培养12h～36h，得到酵母菌(Saccharomyces sp.)LBT1.0038发酵液；其中，YPD液体培养基主要成分为：酵母膏：1％，蛋白胨：2％，葡萄糖：2％，琼脂：2％，pH自然；
所得到的酵母菌(Saccharomyces sp.)LBT1.0038发酵液在4℃条件下，以8500r/min～11000r/min离心5min～15min，弃上清液得到湿菌体，进一步得到粉剂或冻干粉，保藏于4℃冰箱备用。
9.权利要求4所述的卷烟赋香微生物复配制剂的配制方法，其特征在于，将各菌株发酵液在4℃条件下，于8500r/min～11000r/min离心5min～15min，弃上清液得到湿菌体，称量，然后以芽孢杆菌(Bacillus sp.)LBT1.0007∶芽孢杆菌(Bacillus sp.)LBT1.0013∶酵母菌(Saccharomyces sp.)LBT1.0038＝(0.001～1)∶(0.001～1.5)∶(0.005～15)的比例复配。
10.权利要求4所述的卷烟赋香微生物复配制剂用于卷烟叶组发酵的应用，将卷烟赋香复配菌株制剂按照0.0001wt％～10wt％质量比例喷施于切后烟丝/叶组或烘后烟丝/叶组的表面进行发酵。
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| CN103320352A (zh) * | 2013-05-16 | 2013-09-25 | 西北农林科技大学 | 一种微生物菌株及其应用 |
| CN107354109A (zh) * | 2017-08-11 | 2017-11-17 | 陕西中烟工业有限责任公司 | 一种用于烟叶快速发酵的赋香复合微生物制剂及其应用 |
| CN111213901A (zh) * | 2019-11-29 | 2020-06-02 | 中国农业科学院烟草研究所 | 果香型酵母、筛选方法及在香烟中的应用 |
| CN111254092A (zh) * | 2020-01-20 | 2020-06-09 | 陕西中烟工业有限责任公司 | 一种用于增加烟草燃烧抽吸时口腔甜味、改善口腔舒适性的细菌制剂及烟草制品 |
-
2011
- 2011-11-19 CN CN 201110369808 patent/CN102399725B/zh active Active
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
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| CN107354109B (zh) * | 2017-08-11 | 2020-11-06 | 陕西中烟工业有限责任公司 | 一种用于烟叶快速发酵的赋香复合微生物制剂及其应用 |
| CN111213901A (zh) * | 2019-11-29 | 2020-06-02 | 中国农业科学院烟草研究所 | 果香型酵母、筛选方法及在香烟中的应用 |
| CN111213901B (zh) * | 2019-11-29 | 2022-04-08 | 中国农业科学院烟草研究所 | 果香型酵母、筛选方法及在香烟中的应用 |
| CN111254092A (zh) * | 2020-01-20 | 2020-06-09 | 陕西中烟工业有限责任公司 | 一种用于增加烟草燃烧抽吸时口腔甜味、改善口腔舒适性的细菌制剂及烟草制品 |
| CN111254092B (zh) * | 2020-01-20 | 2021-07-30 | 陕西中烟工业有限责任公司 | 一种用于增加烟草燃烧抽吸时口腔甜味、改善口腔舒适性的细菌制剂及烟草制品 |
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