CN111040043A - 一种硒化熟地黄多糖及其制备方法和应用 - Google Patents

一种硒化熟地黄多糖及其制备方法和应用 Download PDF

Info

Publication number
CN111040043A
CN111040043A CN201911347777.4A CN201911347777A CN111040043A CN 111040043 A CN111040043 A CN 111040043A CN 201911347777 A CN201911347777 A CN 201911347777A CN 111040043 A CN111040043 A CN 111040043A
Authority
CN
China
Prior art keywords
supernatant
polysaccharide
ultrasonic
prepared rehmannia
selenized
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Withdrawn
Application number
CN201911347777.4A
Other languages
English (en)
Inventor
伍金娥
雷媛媛
董志文
王然然
李明
张挽挽
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Wuhan Polytechnic University
Original Assignee
Wuhan Polytechnic University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Wuhan Polytechnic University filed Critical Wuhan Polytechnic University
Priority to CN201911347777.4A priority Critical patent/CN111040043A/zh
Publication of CN111040043A publication Critical patent/CN111040043A/zh
Withdrawn legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C08B37/0003—General processes for their isolation or fractionation, e.g. purification or extraction from biomass

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Sustainable Development (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Abstract

本发明涉及一种硒化熟地黄多糖及其制备方法和应用。包括如下步骤：(1)熟地黄药材干燥至恒质量后粉碎，过30‑70目筛，密封保存；(2)称取熟地黄药材粉末于70‑85％的乙醇中浸泡，超声处理；离心，回收上清液a；(3)将得到的残渣洗涤，然后超声处理，得上清液b；(4)将上清液a与上清液b用Sevag法脱白，再用活性炭回流脱色，过滤，离心弃去沉淀得上清液c，并对得到的上清液c进行浓缩，再用无水乙醇调节浓缩后的上清液，使其醇浓度为75‑85％，置冰箱中1‑4℃沉淀10‑16h，抽滤收集沉淀；(5)将步骤(4)所得沉淀洗涤、冷冻干燥得精制多糖。本发明具有制备流程简便，所制得的硒化熟地黄多糖硒含量高等优点。

Description

一种硒化熟地黄多糖及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于硒化多糖领域，更具体地，涉及一种硒化熟地黄多糖及其制备方法和应用。
背景技术
硒是生命必需的微量元素，中国约有2/3的地区属于国际公认的缺硒地区，其中近1/3为严重缺硒地区。许多疾病比如克山病、糖尿病、心血管疾病等都与体内硒元素缺乏有关。
硒化合物的存在形式包括有机硒和无机硒两种，有机硒主要包括：硒多糖、硒氨基酸、硒蛋白和硒核酸等，无机硒主要包括：硒酸和亚硒酸。无机硒具有蓄积性毒性和致突变作用，使用时剂量难以控制，在医疗保健行业应用范围较窄。相较于无机硒而言，有机硒食用安全、无毒副作用，吸收率高，且营养价值也较高。采用液体发酵的方法对大球盖菇菌丝进行富硒培养，并提取硒多糖进行抗氧化能力测定的研究结果表明，大球盖菇硒多糖能明显提高小炙血中SOD、GSH-Px的含量，能在一定程度上显著降低血中MDA的含量。
多糖的生物活性往往与其结构单元的构成及糖链上所连接的基团有着直接的关系，采取一定的方法对多糖分子结构进行适当修饰可以改变多糖的活性。将硒与多糖结合使之成为有机硒化合物硒多糖，它不仅保持了多糖的基本构型和生物活性，而且有机硒化合物很大程度更易于为机体吸收和利用，降低了毒性和不良反应，是一种安全、有效、健康的硒营养源。硒化多糖因具有特殊的化学键(Se＝O)，因此较普通多糖具有了更多的生理活性，且更易被机体吸收和利用。但是由于天然硒多糖在生物体内的含量甚微，一定程度上限制硒多糖的研究。通过对多糖的硒化修饰，将硒或含硒的功能基团接枝到多糖分子上，是获得较高活性硒多糖的一种有效途径。
近几年，人们开始对提取出来的天然多糖进行硒化来提高生物活性和生物利用度，研制高含硒量的硒化多糖，具有重要的理论价值和潜在的应用价值。
熟地黄(Nulumbo nucifera Geartn)，熟地黄(拉丁学名：Rehmannia glutinosa(Gaetn.)Libosch.ex Fisch.et Mey.)，玄参科熟地黄属多年生草本植物，高可达30厘米，根茎肉质，鲜时黄色，在栽培条件下，茎紫红色。直径可达5.5厘米，叶片卵形至长椭圆形，叶脉在上面凹陷，花在茎顶部略排列成总状花序，花冠外紫红色，内黄紫色，药室矩圆形，蒴果卵形至长卵形，花果期4-7月。生于海拔50-1100m的山坡及路旁荒地等处。因其地下块根为黄白色而得名熟地黄，其根部为传统中药之一，最早出典于《神农本草经》。依照炮制方法在药材上分为：鲜熟地黄、干熟地黄与熟熟地黄，同时其药性和功效也有较大的差异，按照《中华本草》功效分类：鲜熟地黄为清热凉血药；熟熟地黄则为补益药。熟悉黄甘，微温。归肝、肾经。入血分，质柔润降，具有有强心、利尿、降血糖和升高外周白细胞，增强免疫功能等作用。
现有技术中对于熟地黄多糖也有着一定的研究基础，例如：曹道俊(黄霞等.熟地黄多糖的补血作用及临床研究)降血糖活性及对体内抗氧化能力的影响.《辽宁中医杂质》，2005，第32期)的研究表明熟地黄多糖的补血功效。
目前现有技术中对于熟地黄多糖的提取以及进一步利用有着较多的研究，然而，对于硒化熟地黄多糖的制备以及性质和应用等方面研究并不多见，虽然现有技术中已经在此方面进行了一定的尝试，但效果并不理想，对于其作用机理也没有进行深入研究。因此，进一步探索和优化熟地黄多糖的提取工艺，以及硒化熟地黄多糖的合成工艺以及其作用机理，将具有重要的使用价值。有鉴于此，特提出本发明。
发明内容
本发明的主要目的在于提供一种硒化熟地黄多糖及其制备方法，所述方法具有制备流程简便，所制得的硒化熟地黄多糖硒含量高等优点。
本发明的第一方面提供一种硒化熟地黄多糖的制备方法，包括如下步骤：
(1)熟地黄药材在65-85℃烘箱中干燥至恒质量后粉碎，过30-70目筛，置于干燥皿中密封保存；
(2)称取5-15g熟地黄药材粉末于50-350mL 70-85％的乙醇中浸泡1-3h，超声功率200-500W处理10-60min，超声提取次数为1-3次，8000-10000r/min离心30-60min，回收上清液a；
(3)将得到的残渣依次用80-95％乙醇、无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤2-5次，然后在超声功率200-500W处理10-60min，超声提取次数为1-3次，得上清液b；
(4)将所述上清液a与上清液b用Sevag法脱白多次，再用活性炭回流l-3h脱色，过滤，离心弃去沉淀得上清液c，并对得到的上清液c进行浓缩，再用无水乙醇调节浓缩后的上清液，使其醇浓度为75-85％，置冰箱中1-4℃沉淀10-16h，抽滤收集沉淀；
(5)将步骤(4)所得沉淀依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤2-4次，冷冻干燥得精制多糖。
根据本发明，优选地，步骤(1)中，过40-60目筛。
根据本发明，优选地，步骤(2)中，超声波辅助提取熟地黄多糖的提取条件为液料比15-25：1(mL：g)。
根据本发明，优选地，步骤(2)中，超声波辅助提取熟地黄多糖的提取条件为超声功率250-400W。
根据本发明，优选地，步骤(2)中，超声波辅助提取熟地黄多糖的提取条件为超声时间10-30min。
根据本发明，优选地，步骤(3)中，超声波辅助提取熟地黄多糖的提取条件为超声时间10-30min。
本发明的第二方面提供由上述制备方法制得的硒化熟地黄多糖。
本发明的硒化熟地黄多糖可用于进一步制备降脂药物或特膳食品。
本发明有益效果：
本发明对超声波辅助提取熟地黄多糖条件中的主要影响因素即液料比、超声时间、超声功率的最优水平及其交互作用进行了分析，获得了熟地黄多糖提取的最佳提取条件为原料粒度40-60目、液料比为18：1(mL：g)、超声功率280W、超声时间为20min。在此工艺条件下，熟地黄多糖的提取率最高可达10.99％。
本发明的其它特征和优点将在随后具体实施方式部分予以详细说明。
附图说明
通过结合附图对本发明示例性实施方式进行更详细的描述，本发明的上述以及其它目的、特征和优势将变得更加明显。
图1示出了原料粒度对提取率的影响。
图2示出了液料比对提取率的影响。
图3示出了超声功率对提取率的影响。
图4示出了超声时间对提取率的影响。
具体实施方式
下面将更详细地描述本发明的优选实施方式。虽然以下描述了本发明的优选实施方式，然而应该理解，可以以各种形式实现本发明而不应被这里阐述的实施方式所限制。
实施例1
本实施例提供一种硒化熟地黄多糖的制备方法，其步骤如下：
(1)硒化熟地黄药材在65℃烘箱中干燥至恒质量后粉碎，过30目筛，置于干燥皿中密封保存，准确称量熟地黄药材粉末5g于烧杯中；
(2)烧杯中加入75mL 80％的乙醇浸泡1h，超声功率200W处理10min，超声提取次数为1次，8000r/min离心30min，回收上清液a；
(3)将得到的残渣分别用80％乙醇、无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤2次，然后在一定超声功率下处理处理10min，超声提取次数为1次，得上清液b；
(4)将上述所得的上清液a与上清液b再用Sevag法脱白多次，再用活性炭回流l h脱色，过滤，离心弃去沉淀得上清液c，并对得到的上清液c进行浓缩，再用无水乙醇调节浓缩后的上清液，使其醇浓度为80％，置冰箱中1℃沉淀10h，抽滤收集沉淀；
(5)将步骤(4)所得沉淀用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤2次，冷冻干燥得精制多糖。
该实施例的熟地黄多糖的理论提取率为10.21％。
实施例2
本实施例提供一种硒化熟地黄多糖的制备方法，其步骤如下：
(1)熟地黄药材在80℃烘箱中干燥至恒质量后粉碎，过60目筛，置于干燥皿中密封保存，准确称量熟地黄药材粉末10g于烧杯中；
(2)烧杯中加入180mL 80％的乙醇浸泡2h，超声功率280W处理20min，超声提取次数为2次，9000r/min离心20min，回收上清液a；
(3)将得到的残渣分别用80-95％乙醇、无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤4次，然后在一定超声功率下处理处理20min，超声提取次数为2次，得上清液b；
(4)将上述所得的上清液a与上清液b再用Sevag法脱白多次，再用活性炭回流2h脱色，过滤，离心弃去沉淀得上清液c，并对得到的上清液c进行浓缩，再用无水乙醇调节浓缩后的上清液，使其醇浓度为80％，置冰箱中3℃沉淀12h，抽滤收集沉淀；
(5)将步骤(4)所得沉淀用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤3次，冷冻干燥得精制多糖。
该实施例的熟地黄多糖的理论提取率为10.99％。
实施例3
本实施例提供一种硒化熟地黄多糖的制备方法，其步骤如下：
(1)熟地黄药材在85℃烘箱中干燥至恒质量后粉碎，过70目筛，置于干燥皿中密封保存，准确称量熟地黄药材粉末15g于烧杯中；
(2)烧杯中加入300mL 80％的乙醇浸泡1-3h，超声功率500W处理60min，超声提取次数为3次，10000r/min离心60min，回收上清液a；
(3)将得到的残渣分别用95％乙醇、无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤5次，然后在一定超声功率下处理处理60min，超声提取次数为3次，得上清液b；
(4)将上述所得的上清液a与上清液b再用Sevag法脱白多次，再用活性炭回流3h脱色，过滤，离心弃去沉淀得上清液c，并对得到的上清液c进行浓缩，再用无水乙醇调节浓缩后的上清液，使其醇浓度为80％，置冰箱中4℃沉淀16h，抽滤收集沉淀；
(5)将步骤(4)所得沉淀用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤4次，冷冻干燥得精制多糖。
该实施例的熟地黄多糖的理论提取率为10.53％。
测试例
熟地黄多糖提取试验：
1.材料：地黄购买自北京同仁堂，产地为河南焦作；葡萄糖标准溶液，苯酚(5％)，氢氧化钠、无水乙醇、浓硫酸等均为分析纯。
2.试验方法
熟地黄多糖提取：以实施例2测出熟地黄多糖提取率作为参考提取率。
多糖标准曲线的绘制：采用苯酚一硫酸法绘制多糖标准曲线，在490nm处测定吸光度。取1mL去离子水做空白。以吸光度Y为纵坐标，葡萄糖浓度(mg/L)为横坐标绘制标准曲线，得到回归方程为Y＝0.0092X+0.0061(R2＝0.9978)。
3.单因素试验
分别选择原料熟地黄粉碎粒度为20-40目、40-60目、60-80目、80-100目、>100目5个水平，液料比(去离子水：熟地黄，mL：g，下同)为5：l、10：1、12：1、15：1、18：15个水平，超声功率为120W、200W、280W、360W、440W 5个水平，超声处理时间为10min、20min、30min、40min4个水平，超声次数为1次、2次、3次、4次进行单因素试验。
(1)原料粒度对提取率的影响
从图1可以看出，利用超声波辅助提取熟地黄多糖的提取率随着粒度的减小而逐渐增大。在40-60目时达到最大，然后再缓慢减小。这是由于随着熟地黄粒度的逐渐减小，多糖类物质逐渐溶出，同时杂质也大量溶出，反而阻碍了多糖类物质的溶出，使提取率逐渐减小。因此选择最适宜的熟地黄粒度为40-60目。
(2)液料比对提取率的影响
从图2可以看出，当液料比从5：1增加到12：1时熟地黄多糖的提取率逐渐增大，液料比在12：1-18：1时，熟地黄多糖提取率增长逐渐变缓并在18：1时达到最大。故提取时采用18：1的液料比为宜。
(3)超声功率对提取率的影响
从图3中得知，当超声功率在120-280W时，熟地黄多糖的提取率随着超声功率的增加而增大，并在280W时熟地黄多糖的提取率达到最大，但当超声功率再增大时，熟地黄多糖的提取率反而逐渐减小，这主要是由于增大了机械振动强度。超声热效应增加而过高的温度会破坏多糖的结构而且增加超声功率会使杂质溶出量增多，抑制多糖的溶出.导致多糖提取率下降。
(4)超声时间对提取率的影响
从图4可以得出，随着超声浸提时间的延长.熟地黄多糖的提取率缓慢增大，但在处理20-30min时多糖提取率缓慢降低，并在30min时出现一个小的拐点。随着时间的增加，多糖提取率又缓慢升高，并在40min时达到最大值。这是因为超声提取时间越长，杂质溶出量越多，而过多的杂质会抑制多糖的溶出影响熟地黄多糖的提取率，最后综合考虑经济性和效率性，确定较佳的超声时间为20min。
以上已经描述了本发明的各实施例，上述说明是示例性的，并非穷尽性的，并且也不限于所披露的各实施例。在不偏离所说明的各实施例的范围和精神的情况下，对于本技术领域的普通技术人员来说许多修改和变更都是显而易见的。

Claims (8)

1.一种硒化熟地黄多糖的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)熟地黄药材在65-85℃烘箱中干燥至恒质量后粉碎，过30-70目筛，置于干燥皿中密封保存；
(2)称取5-15g熟地黄药材粉末于50-350mL 70-85％的乙醇中浸泡1-3h，超声功率200-500W处理10-60min，超声提取次数为1-3次，8000-10000r/min离心30-60min，回收上清液a；
(3)将得到的残渣依次用80-95％乙醇、无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤2-5次，然后在超声功率200-500W处理10-60min，超声提取次数为1-3次，得上清液b；
(4)将所述上清液a与上清液b用Sevag法脱白，再用活性炭回流l-3h脱色，过滤，离心弃去沉淀得上清液c，并对得到的上清液c进行浓缩，再用无水乙醇调节浓缩后的上清液，使其醇浓度为75-85％，置冰箱中1-4℃沉淀10-16h，抽滤收集沉淀；
(5)将步骤(4)所得沉淀依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤2-4次，冷冻干燥得精制多糖。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，过40-60目筛。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，超声波辅助提取熟地黄多糖的提取条件为液料比15-25：1(mL：g)。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，超声波辅助提取熟地黄多糖的提取条件为超声功率250-400W。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，超声波辅助提取熟地黄多糖的提取条件为超声时间10-30min。
6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，超声波辅助提取熟地黄多糖的提取条件为超声时间10-30min。
7.由权利要求1-6中任意一项所述的制备方法制得的硒化熟地黄多糖。
8.权利要求7所述的硒化熟地黄多糖在制备降脂药物或特膳食品中的应用。
CN201911347777.4A 2019-12-24 2019-12-24 一种硒化熟地黄多糖及其制备方法和应用 Withdrawn CN111040043A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201911347777.4A CN111040043A (zh) 2019-12-24 2019-12-24 一种硒化熟地黄多糖及其制备方法和应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201911347777.4A CN111040043A (zh) 2019-12-24 2019-12-24 一种硒化熟地黄多糖及其制备方法和应用

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN111040043A true CN111040043A (zh) 2020-04-21

Family

ID=70238828

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201911347777.4A Withdrawn CN111040043A (zh) 2019-12-24 2019-12-24 一种硒化熟地黄多糖及其制备方法和应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN111040043A (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113801249A (zh) * 2021-11-05 2021-12-17 河南中医药大学 一种熟地黄多糖的制备方法、产品及其应用
CN116162180A (zh) * 2023-02-15 2023-05-26 李晓春 一种多糖及从富硒多花黄精中提取多糖的方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101402691A (zh) * 2008-11-17 2009-04-08 河南中医学院 熟地黄多糖的制备方法
CN104017101A (zh) * 2014-06-18 2014-09-03 中国科学院过程工程研究所 一种地黄多糖的制备方法
CN104892790A (zh) * 2015-06-25 2015-09-09 河北农业大学 生地黄中同时提取多糖和梓醇的方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101402691A (zh) * 2008-11-17 2009-04-08 河南中医学院 熟地黄多糖的制备方法
CN104017101A (zh) * 2014-06-18 2014-09-03 中国科学院过程工程研究所 一种地黄多糖的制备方法
CN104892790A (zh) * 2015-06-25 2015-09-09 河北农业大学 生地黄中同时提取多糖和梓醇的方法

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
倪银星等: ""含硒中药抗氧化作用研究进展"", 《重庆医科大学学报》 *
李锦金等: ""硒多糖的研究进展"", 《广西师范学院学报（自然科学版）》 *
林春燕等: ""熟地中水溶性多糖超声提取工艺的正交优化"", 《齐鲁药事》 *
段振华主编: "《高级食品化学》", 31 January 2012, 中国轻工业出版社 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113801249A (zh) * 2021-11-05 2021-12-17 河南中医药大学 一种熟地黄多糖的制备方法、产品及其应用
CN116162180A (zh) * 2023-02-15 2023-05-26 李晓春 一种多糖及从富硒多花黄精中提取多糖的方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101791119B (zh) 桦褐孔菌营养组合物
CN108477612B (zh) 一种包含铁皮石斛纯化提取物的石斛营养粉及制备方法
CN103740566B (zh) 一种刺梨药酒及其制作方法
CN109846940A (zh) 一种黄精多糖提取物及其提取方法和用途
CN106350458A (zh) 一种提高姬松茸液体发酵产物产量及产物活性的方法
CN105494844A (zh) 一种枸杞压片糖果生产方法
CN104522460A (zh) 菊芋多糖益脑片
CN111040043A (zh) 一种硒化熟地黄多糖及其制备方法和应用
CN102552376A (zh) 一种用微波提取的白芸豆提取物及其制备方法和应用
CN105012707A (zh) 一种铁皮石斛胶囊及其制备方法
CN104544456B (zh) 一种沙棘型固体膳食纤维饮料及其制备方法
CN105384562A (zh) 一种袖珍菇培养基
CN112535239B (zh) 一种用于禽畜日常保健促生长的复方中草药饲料添加剂及其制备及应用
CN110051815A (zh) 一种辅助降血糖食丸及其制备方法
CN106727888A (zh) 一种菊芋复方制品及其制备方法
CN106261450A (zh) 一种清热去火的红球藻泡腾片及其制备方法
CN113383950A (zh) 一种苦瓜保健食品
CN102940688A (zh) 一种无花果叶中多糖与总黄酮的提取方法
CN101647820B (zh) 活性纯蛇粉胶囊及其制作工艺
CN108823018A (zh) 红枣特酿及加工工艺
CN107961293A (zh) 一种沙棘番茄片及其制备方法
CN114470084A (zh) 环保高效防治罗非鱼白便的组合物及其制备方法和应用
CN107684574B (zh) 具有降血脂功能的药食两用组合物及其制备方法
CN115669763B (zh) 一种能够辅助抑制尿酸积累的黄茶复方饮品
CN108295032A (zh) 采用抗性糊精制备中药配方颗粒的方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
WW01 Invention patent application withdrawn after publication
WW01 Invention patent application withdrawn after publication

Application publication date: 20200421