CN116162180A - 一种多糖及从富硒多花黄精中提取多糖的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种多糖及从富硒多花黄精中提取多糖的方法，属于提取技术领域。该从富硒多花黄精中提取多糖的方法，包括：S1、将脱脂后的富硒多花黄精粉末加水提取，经洗涤干燥得到多糖P1；S2、将多糖P1溶解，透析得到多糖P2；S3、将多糖P2溶解，加入中性蛋白酶水浴，取上清液并浓缩干燥得到多糖P3；S4、将多糖P3溶解，过树脂层析柱得多糖P4；S5、将多糖P4溶解，过纤维素柱层析柱得到多糖P5；S6、将多糖P5过葡聚糖凝胶层析柱得到多糖P6。本发明还包括上述提取方法得到的多糖。本发明提出的提取方法提高了从多花黄精中提取得到的多糖的纯度。
Description
技术领域
本发明涉及提取技术领域，具体涉及一种多糖及从富硒多花黄精中提取多糖的方法。
背景技术
多花黄精Polygonatum cyrtonema Hua Liliaceae属于百合科黄精属，多年生草本植物，药食同源，在民间有悠久的使用历史，具有潜在的药用价值，包括抗衰老、调节免疫、降血糖血脂、改善记忆力、抗肿瘤、抗菌等。黄精多糖是黄精中最主要的活性成分之一，是2020年版《中国药典》评价黄精质量的重要指标。
硒是人类和动物必不可少的元素，在自然界中，硒以无机和有机两种形态存在，其中硒多糖是有机硒的一种重要形式，具有广泛的生物活性，如抗高血脂、免疫调节、抗氧化、抗肿瘤和抗衰老能力，广泛应用于医疗保健行业。在二者结合下，多花黄精硒多糖具有更强的抗癌、抗氧化、增强免疫力的功效，因此研究富硒多花黄精的栽培和多花黄精硒多糖的提取方法，对于开发新型医疗保健产品，改善人类健康状况具有重要意义。
现有技术存在的问题和缺点：现有技术提取的黄精多糖纯度较低，多糖物质约占总重的30-45％，且多糖中硒的含量较低，硒的含量在0.60mg/kg左右。如何提高多糖的纯度以及提高多糖中硒的含量是现有技术需要解决的问题。
发明内容
本发明的目的在于克服上述技术不足，提供一种多糖及从黄精中提取多糖的方法，解决现有技术中如何提高从富硒多花黄精中提取得到的多糖的纯度技术问题。
为达到上述技术目的，本发明的技术方案提供一种从富硒多花黄精中提取多糖的方法，包括以下步骤：
S1、将脱脂后的富硒多花黄精粉末加水提取得上清液，之后浓缩，之后加入有机溶剂洗涤干燥得到多糖P1；
S2、将所述多糖P1溶解透析，加入有机溶剂洗涤干燥得到多糖P2；
S3、将所述多糖P2溶解，加入中性蛋白酶在40-60℃水浴，之后90-95℃加热取上清液，上清液中加入Sevage试剂进行搅拌，之后取上清液并浓缩干燥得到多糖P3；
S4、将所述多糖P3溶解，过树脂层析柱，用NaCl溶液洗脱，之后浓缩，之后加入有机溶剂洗涤、干燥得多糖P4；
S5、将所述多糖P4水解，过纤维素柱层析柱，之后浓缩，透析，再浓缩，之后醇沉，用有机溶剂洗涤、干燥得到多糖P5；
S6、将所述多糖P5过葡聚糖凝胶层析柱，之后浓缩干燥得到多糖P6。
进一步地，在步骤S1中，所述脱脂后的富硒多花黄精粉末与所述水按照物料比1g:(20-30)mL将脱脂后的富硒多花黄精粉末加水提取。
进一步地，在步骤S1中，将脱脂后的富硒多花黄精粉末加水提取包括将脱脂后的富硒多花黄精粉末加水先超声提取，再在75-85℃下提取。
进一步地，在步骤S1中，所述超声提取的时间为1-2h，在75-85℃下提取的时间为1-1.5h。
进一步地，在步骤S4或者步骤S5中，加入所述有机溶剂洗涤沉淀干燥得所述多糖P4或者所述多糖P5包括依次用80-85％乙醇、90-95％乙醇、无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤、再干燥得多糖P4或者多糖P5。
进一步地，在步骤S1或者S2中，所述有机溶剂为乙醇、甲醇、乙醚或者丙酮。
进一步地，在步骤S4中，用所述NaCl溶液洗脱包括依次用浓度从低到高的NaCl溶液作为流动性进行洗脱。
进一步地，在步骤S1中，所述脱脂后的富硒多花黄精粉末中的富硒多花黄精的块茎由以下步骤种植得到：
将多花黄精块茎或实生苗，栽培于林下土壤中，在叶片发出后，每隔15天，在根部喷施浓度2-10mg/L的亚硒酸钠，喷施量平均每株50-55ml，连续喷施4个月，收获以上处理得到的块茎。
此外，本发明还提出一种多糖，由上述提取方法提取得到。
进一步地，所述多糖包括阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖、半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸；或者所述多糖包括阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖和甘露糖。
与现有技术相比，本发明的有益效果包括：S1、将脱脂后的富硒多花黄精粉末加水提取得上清液，之后浓缩，之后加入有机溶剂洗涤干燥得到黄精多糖P1；S2、将所述多糖P1溶解透析，加入有机溶剂洗涤干燥得到多糖P2，步骤S2的处理可以水解并清除部分蛋白质；S3、将所述多糖P2溶解，加入中性蛋白酶在40-60℃水浴，之后90-95℃加热取上清液，上清液中加入Sevage试剂进行搅拌，之后取上清液并浓缩干燥得到多糖P3，步骤S3的处理可以进一步去除蛋白质；S4、将所述多糖P3溶解，过树脂层析柱，用NaCl溶液洗脱，之后浓缩，之后加入有机溶剂洗涤、干燥得多糖P4，步骤S4的处理去除非极性或极性较弱的物质；S5、将所述多糖P4水解，过纤维素柱层析柱，之后浓缩，透析，再浓缩，之后醇沉，用有机溶剂洗涤、干燥得到多糖P5，步骤S5的处理能够吸附离子型物质，并起到分子筛的作用；S6、将所述多糖P5过葡聚糖凝胶层析柱，用水洗脱，之后浓缩干燥得到多糖P6，步骤S6进一步起到分子筛的作用，得到多糖的重量占总的多糖P6的80-90％，提高了从富硒多花黄精中提取得到的多糖的纯度。
附图说明
图1是本发明实施例2提取得到的富硒多花黄精多糖样品P6的照片。
图2是本发明实施例2提取得到的富硒多花黄精多糖样品P6的离子色谱图。
图3是本发明实施例3提取得到的富硒多花黄精多糖样品P6的离子色谱图。
具体实施方式
本具体实施方式提供一种从富硒多花黄精中提取多糖的方法，包括以下步骤：
S1、按照脱脂后的富硒多花黄精粉末与水的物料比1g:(20-30)mL将脱脂后的富硒多花黄精粉末加水提取得上清液，之后浓缩，之后加入有机溶剂洗涤干燥得到多糖P1；将脱脂后的富硒多花黄精粉末加水提取包括将脱脂后的富硒多花黄精粉末加水先超声提取1-2h，再在75-85℃下提取1-1.5h；所述有机溶剂为乙醇、甲醇、乙醚或者丙酮；
所述脱脂后的富硒多花黄精粉末中的多花黄精的块茎由以下步骤种植得到：
将多花黄精块茎或实生苗，栽培于林下土壤中，在叶片发出后，每隔15天，在根部喷施浓度2-10mg/L的亚硒酸钠，喷施量平均每株50-55ml，连续喷施4个月，收获以上处理得到的块茎；
S2、将所述多糖P1溶解透析，加入有机溶剂洗涤干燥得到多糖P2；所述有机溶剂为乙醇、甲醇、乙醚或者丙酮；
S3、将所述多糖P2溶解，加入中性蛋白酶在40-60℃水浴，之后90-95℃加热取上清液，上清液中加入Sevage试剂进行搅拌，之后取上清液并浓缩干燥得到多糖P3；
S4、将所述多糖P3溶解，过树脂层析柱，用NaCl溶液洗脱，之后浓缩，之后依次用80-85％乙醇、90-95％乙醇、无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤、干燥得多糖P4；用所述NaCl溶液洗脱包括依次用浓度从低到高的NaCl溶液作为流动性进行洗脱；用浓度从低到高的NaCl溶液分别为浓度为0.1mol/L，0.3mol/L，0.5mol/L，0.7mol/L，0.9mol/L，1.2mol/L，1.5mol/L，1.8mol/L，2mol/L的NaCl溶液；
S5、将所述多糖P4水解，过纤维素柱层析柱，之后浓缩，透析，再浓缩，之后醇沉，之后依次用80-85％乙醇、90-95％乙醇、无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤、干燥得到多糖P5；
S6、将所述多糖P5过葡聚糖凝胶层析柱，用水洗脱，之后浓缩干燥得到多糖P6。
本具体实施方式还提出一种多糖，由上述从富硒多花黄精中提取多糖的方法得到，进一步地，所述多糖包括阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖、半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸；或者所述多糖包括阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖和甘露糖。
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
实施例1
本实施例提出一种富硒多花黄精的栽培方法，包括：
选取2年生多花黄精块茎或实生苗，栽培于林下土壤中，栽培密度为每亩1000株。在叶片发出后，每隔15d，在根部喷施浓度2-20mg/L不同浓度的亚硒酸钠对应案例1-4，喷施量平均每株50ml，连续喷施4个月。
收获以上处理的块茎，用去离子水清洗干净，60℃烘干48-72h。样品中总硒和无机硒的浓度采用中华人民共和国卫生部制定的标准方法GB 5009.93-2010和GB 5009.268-2016进行测定。样品中有机硒含量等于总硒含量减去无机硒含量，结果如表1所示。
表1不同亚硒酸钠处理多花黄精块茎硒含量
对比分析1：结合实例1和实例2可知，亚硒酸钠浓度提高，会显著增加多花黄精块茎的硒含量。
对比分析2：结合实例2，3，4可知，过高的亚硒酸钠浓度虽然会显著增加多花黄精块茎的硒含量，但会导致多花黄精根系和块茎生长不良。
对比分析3：结合实例1，2，3，4，亚硒酸钠最佳的处理浓度是5mg/kg。
将案例2栽培的多花黄精根状茎用于下述实施例中。
实施例2
本实施例提出一种多糖，由以下步骤提取得到：
(1)选取以上方法中处理案例2栽培的多花黄精根状茎，洗净、切块后放入60℃的烘箱中烘干至恒重，用组织粉碎机粉碎后过60目筛，获得黄精粉。
(2)通过索氏提取法，石油醚20倍体积，80℃回流8h，进行脱脂。
(3)称取20g脱脂后的粉末，加入500mL的蒸馏水超声水提2h(60％功率，超声时间80s，间隔5s)；转移到80℃水煮1h，离心收取上清液；沉淀加水300ml，再超声1h，后水浴1h，离心收取上清液。
(4)旋转蒸发仪浓缩至100ml，然后加入4倍体积的乙醇(或甲醇、乙醚、丙酮)，4℃静置24h，离心得沉淀，冷冻干燥得多花黄精多糖样品P1。
(5)水解样品P1至浓度100mg/ml，使用3.5kDa透析袋子，透析48h，之后加入4倍体积的乙醇，4℃静置24h后，离心得沉淀，冷冻干燥得多花黄精多糖样品P2。
(6)水解样品P2至浓度100mg/ml，在烧杯里面加入5.0％中性蛋白酶(酶液浓度)，缓慢搅拌均匀，50℃水浴活化1.5h，95℃加热灭活10min，冷却后，4000r/min离心10min，取上清液放入烧杯中，清除部分蛋白质。
(7)将三氯甲烷溶液和正丁醇溶液，按照4:1比例，混合均匀以后，得到Sevage试剂，按照上清液：Sevage的体积4:1加入Sevage试剂到烧杯中的上清液里面，搅拌30min后，3000r/min离心，取上清液，重复3次，去除蛋白质，提纯多糖。减压浓缩，冷冻干燥，得多花黄精多糖样品P3。
(8)水解P3，过D101树脂层析柱，用水洗脱，样品每5ml收集在试管中，用苯酚-硫酸法测定含有多糖溶液的试管，进行合并，去除非极性或极性较弱的物质，减压浓缩，加入4倍体积的乙醇(或甲醇、乙醚、丙酮)，4℃静置20h后，离心得沉淀。
(9)依次用80％乙醇、95％乙醇、无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤沉淀，去除可溶于有机溶剂的杂质，冷冻干燥，得多花黄精多糖样品P4。
(10)水解P4，过DEAE-52纤维素柱层析柱，分别用0.1mol/L，0.3mol/L，0.5mol/L，0.7mol/L，0.9mol/L，1.2mol/L，1.5mol/L，1.8mol/L，2mol/L的NaCl溶液作为流动相，进行样品的洗脱，样品每5ml收集在试管中，用苯酚-硫酸法测定含有多糖溶液的试管，进行合并，吸附离子型物质，并起到分子筛的作用。减压，浓缩，离心后取上清液，然后用3.5kDa透析袋透析48h，减压浓缩，8000r/min离心，取上清液。用4倍体积的乙醇醇沉，4℃静置12h后，离心得沉淀。
(11)依次用80％乙醇、95％乙醇、无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤沉淀，去除可溶于有机溶剂的杂质，冷冻干燥，得多花黄精多糖样品P5。
(12)水解P5，6000r/min离心20min，取上清液过G200葡聚糖凝胶层析柱，用水洗脱，样品每5ml收集在试管中，用苯酚-硫酸法测定含有多糖溶液的试管，进行合并，此步骤起到分子筛的目的。减压浓缩，冷冻干燥，得多花黄精多糖样品P6。本实施例中P6的提取率约为3.0％。经检测P6由阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖、半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸组成，阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖、半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸的摩尔比1.9:3.7:40.9:1.5:20.8:2.5:2.6，Se含量为5.42mg/kg。得到的多花黄精多糖样品P6的照片如图1所示，为白色粉末；结合图2，从多花黄精多糖样品P6的离子色谱图可以看出其包括了阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖、半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸。
实施例3
本实施例提出一种多糖，由以下步骤提取得到：
(1)选取以上方法中处理案例2栽培的多花黄精根状茎，洗净、切块后放入60℃的烘箱中烘干至恒重，用组织粉碎机粉碎后过60目筛，获得黄精粉。
(2)通过索氏提取法，石油醚20倍体积，80℃回流4h，进行脱脂。
(3)称取20g脱脂后的粉末，加入600mL的蒸馏水超声水提1.5h(60％功率，超声时间80s，间隔5s)；转移到80℃水煮1.5h，离心收取上清液；沉淀加水300ml，再超声0.5h，后水浴0.5h，离心收取上清液。
(4)旋转蒸发仪浓缩至100ml，然后加入4倍体积的乙醇，6℃静置24h，离心得沉淀，冷冻干燥得多花黄精多糖样品P1。
(5)水解样品P1，使浓度100mg/ml，使用3.5kDa透析袋子，透析48h。加入4倍体积的乙醇，4℃静置20h后，离心得沉淀，冷冻干燥得多花黄精多糖样品P2。
(6)水解样品P2，使浓度100mg/ml，在烧杯里面加入2.0％中性蛋白酶(酶液浓度)，缓慢搅拌均匀，50℃水浴1h活化，90℃加热10min灭活，冷却后，6000r/min离心10min，取上清放入烧杯中，清除部分蛋白质。
(7)将三氯甲烷溶液和正丁醇溶液，按照5:1的比例，混合均匀以后，得到Sevage试剂，按照上清液：Sevage的体积5:1加入Sevage试剂到烧杯中的上清液里面，搅拌30min后，3000r/min离心5min，取上清液，重复5次，去除蛋白质，提纯多糖。减压浓缩，冷冻干燥，得多花黄精多糖样品P3。
(8)水解P3，过D101树脂层析柱，用水洗脱，样品每5ml收集在试管中，用苯酚-硫酸法测定含有多糖溶液的试管，进行合并，去除非极性或极性较弱的物质，减压浓缩，加入4倍体积的乙醇(或甲醇、乙醚、丙酮)，4℃静置24h后，离心得沉淀。
(9)依次用80％乙醇、95％乙醇、无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤沉淀，去除可溶于有机溶剂的杂质，冷冻干燥，得多花黄精多糖样品P4。
(10)水解P4，过DEAE-52纤维素柱层析柱，分别用0.3mol/L，0.5mol/L，1.2mol/L，1.8mol/L，2mol/L的NaCl溶液作为流动相，进行样品的洗脱，样品每5ml收集在试管中，用苯酚-硫酸法测定含有多糖溶液的试管，进行合并，吸附离子型物质，并起到分子筛的作用。减压，浓缩，然后3.5kDa透析袋透析48h，减压浓缩。用4倍体积的乙醇醇沉，4℃静置12h后，离心得沉淀。
(11)依次用80％乙醇、95％乙醇、无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤沉淀，去除可溶于有机溶剂的杂质，冷冻干燥，得多花黄精多糖样品P5。
(12)水解P5，8000r/min离心15min，取上清液过G200葡聚糖凝胶层析柱，用水洗脱，样品每5ml收集在试管中，用苯酚-硫酸法测定含有多糖溶液的试管，进行合并，此步骤起到分子筛的目的。减压浓缩，冷冻干燥，得多花黄精多糖样品P6。采用本方法，在新鲜多花黄精块茎中获得P6的提取率约为2.6％，经检测P6由阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、甘露糖组成，阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、甘露糖的摩尔比2.4:5.0:27.3:33.6，Se含量为5.21mg/kg；结合图3，从多花黄精多糖样品P6的离子色谱图可以看出其包括了阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖和甘露糖。
实施例4
本实施例提出一种多糖，由以下步骤提取得到：
(1)选取以上方法中处理案例2栽培的多花黄精根状茎，洗净、切块后放入60℃的烘箱中烘干至恒重，用组织粉碎机粉碎后过60目筛，获得黄精粉。
(2)通过索氏提取法，石油醚20倍体积，80℃回流5h，进行脱脂。
(3)称取20g脱脂后的粉末，加入500mL的蒸馏水超声水提1h(60％功率，超声时间80s，间隔5s)；转移到80℃水煮1.5h，离心收取上清液；沉淀加水300ml，再超声1h，后水浴1h，离心收取上清液。
(4)旋转蒸发仪浓缩至100ml，然后加入4倍体积的乙醇，2℃静置24h，离心得沉淀，冷冻干燥得多花黄精多糖样品P1。
(5)水解样品P1，使浓度100mg/ml，使用3.5kDa透析袋子，透析48h。加入4倍体积的乙醇，4℃静置12h后，离心得沉淀，冷冻干燥得多花黄精多糖样品P2。
(6)水解样品P2，使浓度100mg/ml，在烧杯里面加入3.0％中性蛋白酶(酶液浓度)，缓慢搅拌均匀，50℃水浴1h，90℃加热10min，冷却后，4000r/min离心10min，取上清放入烧杯中，水解并清除部分蛋白质。
(7)将三氯甲烷溶液和正丁醇溶液，按照4:1的比例，混合均匀以后，得到Sevage试剂，按照上清液：Sevage的体积5:1加入Sevage试剂到烧杯中的上清液里面，搅拌30min后，3000r/min离心6min，取上清液，重复4次，去除蛋白质，提纯多糖。减压浓缩，冷冻干燥，得多花黄精多糖样品P3。
(8)水解P3，过D101树脂层析柱，用水洗脱，样品每5ml收集在试管中，用苯酚-硫酸法测定含有多糖溶液的试管，进行合并，去除非极性或极性较弱的物质，减压浓缩，加入4倍体积的乙醇，4℃静置20h后，离心得沉淀。
(9)依次用80％乙醇、95％乙醇、无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤沉淀，去除可溶于有机溶剂的杂质，冷冻干燥，得多花黄精多糖样品P4。
(10)水解P4，9000r/min离心10min，取上清液过DEAE-52纤维素柱层析柱，分别用0.1mol/L，0.5mol/L，1.0mol/L，1.5mol/L，2mol/L的NaCl溶液作为流动相，进行样品的洗脱，样品每5ml收集在试管中，用苯酚-硫酸法测定含有多糖溶液的试管，进行合并，吸附离子型物质，并起到分子筛的作用。减压，浓缩，然后3.5kDa透析袋透析48h，减压浓缩。用4倍体积的乙醇醇沉，4℃静置12h后，离心得沉淀。
(11)依次用80％乙醇、95％乙醇、无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤沉淀，去除可溶于有机溶剂的杂质，冷冻干燥，得多花黄精多糖样品P5。
(12)水解P5，9000r/min离心12min，取上清液过G200葡聚糖凝胶层析柱，用水洗脱，样品每5ml收集在试管中，用苯酚-硫酸法测定含有多糖溶液的试管，进行合并，此步骤起到分子筛的目的。减压浓缩，冷冻干燥，得多花黄精多糖样品P6。采用本方法，Se含量为4.13mg/kg。
采用本发明提出的的多花黄精硒多糖的提取方法得到的硒多糖中硒的含量可高达5.42mg/kg。
以上所述本发明的具体实施方式，并不构成对本发明保护范围的限定。任何根据本发明的技术构思所做出的各种其他相应的改变与变形，均应包含在本发明权利要求的保护范围内。
Claims (10)
1.一种从富硒多花黄精中提取多糖的方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、将脱脂后的富硒多花黄精粉末加水提取得上清液，之后浓缩，之后加入有机溶剂洗涤干燥得到多糖P1；
S2、将所述多糖P1溶解透析，加入有机溶剂洗涤干燥得到多糖P2；
S3、将所述多糖P2溶解，加入中性蛋白酶在40-60℃水浴，之后90-95℃加热取上清液，上清液中加入Sevage试剂进行搅拌，之后取上清液并浓缩干燥得到多糖P3；
S4、将所述多糖P3溶解，过树脂层析柱，用NaCl溶液洗脱，之后浓缩，之后加入有机溶剂洗涤、干燥得多糖P4；
S5、将所述多糖P4水解，过纤维素柱层析柱，之后浓缩，透析，再浓缩，之后醇沉，用有机溶剂洗涤、干燥得到多糖P5；
S6、将所述多糖P5过葡聚糖凝胶层析柱，之后浓缩干燥得到多糖P6。
2.根据权利要求1所述的从富硒多花黄精中提取多糖的方法，其特征在于，在步骤S1中，所述脱脂后的富硒多花黄精粉末与所述水按照物料比1g:(20-30)mL将脱脂后的富硒多花黄精粉末加水提取。
3.根据权利要求1所述的从富硒多花黄精中提取多糖的方法，其特征在于，在步骤S1中，将脱脂后的富硒多花黄精粉末加水提取包括将脱脂后的富硒多花黄精粉末加水先超声提取，再在75-85℃下提取。
4.根据权利要求3所述的从富硒多花黄精中提取多糖的方法，其特征在于，在步骤S1中，所述超声提取的时间为1-2h，在75-85℃下提取的时间为1-1.5h。
5.根据权利要求1所述的从富硒多花黄精中提取多糖的方法，其特征在于，在步骤S4或者步骤S5中，加入所述有机溶剂洗涤沉淀干燥得所述多糖P4或者所述多糖P5包括依次用80-85％乙醇、90-95％乙醇、无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤、再干燥得多糖P4或者多糖P5。
6.根据权利要求1所述的从富硒多花黄精中提取多糖的方法，其特征在于，在步骤S1或者S2中，所述有机溶剂为乙醇、甲醇、乙醚或者丙酮。
7.根据权利要求1所述的从富硒多花黄精中提取多糖的方法，其特征在于，在步骤S4中，用所述NaCl溶液洗脱包括依次用浓度从低到高的NaCl溶液作为流动性进行洗脱。
8.根据权利要求1所述的从富硒多花黄精中提取多糖的方法，其特征在于，在步骤S1中，所述脱脂后的富硒多花黄精粉末中的富硒多花黄精的块茎由以下步骤种植得到：
将多花黄精块茎或实生苗，栽培于林下土壤中，在叶片发出后，每隔15天，在根部喷施浓度2-10mg/L的亚硒酸钠，喷施量平均每株50-55ml，连续喷施4个月，收获以上处理的块茎。
9.一种多糖，其特征在于，由权利要求1-8任一项所述的从富硒多花黄精中提取多糖的方法得到。
10.根据权利要求9所述的多糖，其特征在于，所述多糖包括阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖、半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸；或者所述多糖包括阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖和甘露糖。
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