CN110746515A - 一种同步分离制取的枸杞多糖、枸杞红素、枸杞多肽及其制备方法 - Google Patents

一种同步分离制取的枸杞多糖、枸杞红素、枸杞多肽及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种同步分离制取的枸杞多糖、枸杞红素、枸杞多肽及其制备方法，属于枸杞的深加工技术领域。本发明以枸杞为原料，通过加水浸泡提取和乙醇提取获得枸杞多糖，同时利用制备获得的枸杞残渣继续添加有机溶剂提取，获得枸杞红素，并继续利用上一步获得的残渣通过添加水和益生菌，通过微生物发酵制备获得多肽。本发明为了解决原料浪费等问题，最大程度地提高了枸杞的利用价值，通过以枸杞为原料，一次性先后获得枸杞多糖、枸杞红素、枸杞多肽产品，同时利用枸杞红素、枸杞多糖、枸杞多肽连续提取的高效协同性，不仅提高各自的提取效率和纯度，而且有效避免了提取过程中其他成分对于目的成分提取的干扰，可广泛应用于工业生产。

Description

一种同步分离制取的枸杞多糖、枸杞红素、枸杞多肽及其制备 方法
技术领域
本发明属于枸杞的深加工技术领域，具体涉及一种同步分离制备的枸杞多糖、枸杞红素、枸杞多肽及其制备方法。
背景技术
枸杞是茄科植物，枸杞果实枸杞子是我国传统的药食同源药材，枸杞在我国具有悠久的食用历史，《中药大辞典》记载枸杞子具有滋补肝肾、益精明目的功效。现代生物研究表明，枸杞具有抗氧化、降血脂、抗衰老、保肝等多种生物活性，随着人们对健康的关注，枸杞的消费量逐年增加，为了满足不同人群的需求，将枸杞活性组分根据功能进行区分以满足不同人群的需求就非常必要。然而枸杞价格较高，单一组分的提取不仅提高了成本也造成了资源的浪费，因此亟需一种枸杞加工过程中综合利用技术，使枸杞的各组分尽其所能。
枸杞中含有枸杞多糖，类胡萝卜素、生物碱、氨基酸、维生素、黄酮等多种化学成分，其中枸杞多糖(Lycium Barbarum Polysaccharides,LBP)含量最为丰富，约占46.5％左右,是枸杞中主要的活性成分。越来越多的细胞、整体动物以及分子水平的研究证实枸杞多糖在抗氧化抗衰老、抗氧化、抗肿瘤、降血糖血脂、健脑护心等方面均有一定活性。
如申请号为201810461020.7的发明专利，公开了一种枸杞多糖的提取工艺，包括以下几个步骤：(1)筛选除杂：将枸杞果进行筛选，除去其中的杂质及病果；(2)脱水干燥：将枸杞置于50℃下真空干燥24h；(3)粉碎、分离：将干燥后的枸杞果经粗颗粒粉碎机破碎，然后经三级筛分离出果肉粉和枸杞籽；粉碎、过筛在常温条件进行；(4)萃取、酶解：将枸杞粉末加入石油醚萃取，将脱脂粉末在60℃真空干燥至恒重；脱脂粉末加入复合酶溶液浸提，然后置于沸水浴加热灭酶，冷却后抽滤，溶液浓缩；(5)浓缩液加入4倍体积的无水乙醇，在4℃下静置12h醇沉，在4200rpm条件下离心15min，取沉淀，以无水乙醇洗涤3次，干燥，得粗多糖。
枸杞子中的类胡萝卜素主要是玉米黄素二棕榈酸酯(zeaxanthin dipalmitate)，国内枸杞研究及产业界将玉米黄素二棕榈酸酯又称为枸杞红素。枸杞子是含有枸杞红素含量最高的植物之一，枸杞子的益精明目功效与其富含枸杞红素密切相关。枸杞红素具有强抗氧化、抗衰老、保肝明目等功能，并且作为一种天然可食用色素，得到广泛应用。
生物活性肽是一类由2-20一个氨基酸组成的、相对分子质量小于6kDa的对生物机体的生命活动有益或是具有生理作用的肤类化合物的总称，具有非常重要的科学意义。由二十种氨基酸残基组成的蛋白质，是一个具有天文数字般庞大的家族。其序列的多样性赋予了蛋白质能产生各种生物体所需的生理调节功能。这些短肤具有免疫调节、抗氧化、降血压、降胆固醇、抑菌、促进矿物质的吸收、抗血栓、抗病毒、抗癌、保肝等多种生理功能。其中天然蛋白质是其中蛋白质主要来源，所以枸杞蛋白质是生物活性肽的良好来源。
如申请号为201710080468.X的发明专利公开了一种枸杞肽的提取方法，所述的提取方法选用新鲜优质的枸杞子，运用生物酶解技术，经过预处理、制取浆汁、低温浸泡、水解、过滤、浓缩、喷雾干燥的工艺流程，能够将枸杞中的有效成份，成功转化为小分子肽类物质，并高效的提取出来。本发明枸杞肽的提取方法，通过改进制备过程，原材料经过多次酶解和过滤，不仅提高了枸杞的利用率，而且增加了枸杞肽的提取率，具有低成本、高产出、易于大规模推广的特点。
综上，现有技术中对于枸杞多糖、多肽以及枸杞红素的提取往往以枸杞作为出发原料进行提取，提取过程中难免会收到其他杂质的干扰，导致提取率以及提取纯度的下降，且以枸杞为原料提取有效物质的过程中，往往会造成原料残渣的大量浪费。
发明内容
本发明的目的是提供一种同步分离制取的枸杞多糖、枸杞红素、枸杞多肽及其制备方法，以解决现有技术中存在的问题，最大程度地提高了枸杞的利用价值，同时利用枸杞红素、枸杞多糖、枸杞多肽连续提取的高效协同性，不仅提高各自的提取效率和纯度，而且有效避免了提取过程中其他成分对于目的成分提取的干扰。
为达到上述目的，本发明采用的技术方案是：一种同步分离制备枸杞多糖、枸杞红素、枸杞多肽的方法：
(1)以干枸杞为原料，与水按照质量体积比1：2-20混合，经浸泡、粉碎、超声提取、离心后，得到上清液以及固体沉淀；
(2)向所述步骤(1)的上清液加入2-8倍体积的50-95％乙醇，经静置，离心，将沉淀冷冻干燥，得到枸杞多糖；
(3)将所述步骤(1)的固体沉淀经冻干，粉碎后与有机溶剂提取液按照质量体积比1：5-20(w/v)混合，搅拌提取0.5-2小时，经过滤，将得到的沉淀备用，滤液经浓缩，得到含有油状物的橙色固体即枸杞红素；
(4)将所述步骤(3)获得的沉淀与水按照质量体积比1：4-20(w/v)混合，用盐酸调节pH至7.0-8.0，加入益生菌，接种量为1×106-2×108CFU/ml，于35-50℃发酵24-72小时；发酵结束后经离心，取上清液冷冻干燥，得到发酵粗提取物；
(5)将所述发酵粗提取物与浓度为0.01-0.1M的盐酸按照质量体积比1：2-10(w/v)混合，经匀浆、离心，取上清液加入1-5倍体积的无水乙醇，经静置、离心，取上清冷冻干燥，得到枸杞多肽。
优选地，所述步骤(1)中，浸泡2-8小时后粉碎，超声提取时间为20-60分钟。
优选地，所述步骤(1)中，所述离心条件为：5000g离心10-20分钟。
优选地，所述步骤(2)中，所述静置条件为：4℃静置6-12小时。
优选地，所述步骤(2)中，离心条件为3000-5000g离心10-20分钟。
优选地，所述步骤(3)中，所述有机溶剂提取液为正己烷、乙酸乙酯、正丁醇、乙醇、甲醇中的一种或者两种溶剂以(1-5)；1的体积比混合。
更优选地，所述步骤(3)中，所述有机溶剂为正己烷：乙醇按照比例(1-5)；1组成。
更优选地，所述步骤(3)中，所述有机溶剂为正己烷：乙醇按照比例(2-4)；1组成。
优选地，所述步骤(3)中，所述提取温度为20-80℃、转速为80-200rpm。
优选地，所述步骤(3)中，所述浓缩条件为：在温度30-80℃下浓缩10-30分钟。
优选地，所述步骤(3)中，重复提取至提取液无色，合并提取液并过滤，得到沉淀备用。
优选地，所述步骤(4)中，所述益生菌为枯草芽孢杆菌、乳酸杆菌或嗜热链球菌中的一种。
更优选地，所述步骤(4)中，所述益生菌为枯草芽孢杆菌。
有些肽在亲本蛋白中不活跃，可以通过酶解或微生物发酵释放。大多数肽都是从食物(如乳制品)中提取的蛋白质水解而来，微生物发酵蛋白广泛应用于工业生产中。不同的微生物表现出不同的特异性。本发明优选的益生菌为枯草芽孢杆菌，因枯草芽孢杆菌在微生物发酵中发挥着重要作用，具有很强的蛋白水解活性，其中含有丰富的蛋白酶体系，相比于单一的蛋白酶可以将蛋白质水解的更加彻底，提高了蛋白质的水解活性，增加了小肽生产的机会。并且同乳酸杆菌或嗜热链球菌相比，后两者更多的添加进入乳制品用来增加风味，使其具有酸味的口感，而芽孢杆菌不仅可以在食品中作为添加，而且在分解枸杞蛋白的过程中，具有高效产生多肽的功能。
优选地，所述步骤(4)中，离心条件为12000rpm离心5-20分钟。
优选地，所述步骤(5)中，所述匀浆条件为4℃匀浆5-20分钟。
优选地，所述步骤(5)中，所述静置条件为：4℃静置24-48小时
优选地，所述步骤(5)中，离心条件为5000-15000rpm离心10-30分钟。
本发明的另一目的是提供由上述方法制备获得的枸杞多糖、枸杞红素以及枸杞多肽。
所述枸杞多糖纯度≥50.73％，枸杞红素纯度≥3.04％，枸杞多肽纯度≥7.02％。
所述步骤(2)中，乙醇通过降低水溶液的介电常数使多糖脱水从而产生沉淀来分离多糖，适用于所有水溶性多糖。
所述步骤(3)中，利用冻干的沉淀提取枸杞红素与直接用枸杞粉提取色素相比，减少了枸杞中多糖和多酚的影响，使得多糖和多酚在步骤(1)枸杞多糖的提取中被提取，从而避免了色素提取的干扰，并且经过冻干和再次粉碎后，破碎细胞壁可以更好地提取枸杞红素。本发明优选方案中，利用有机溶剂即正己烷：乙醇按照比例1:1-1:5的组合，提取的枸杞红素纯度更为显著。
所述步骤(4)中，在枸杞多糖、枸杞红素提取后，进行枸杞多肽的提取，不仅可以实现枸杞副产物的综合利用，而且可以有效避免枸杞多肽在提取过程中多糖、色素等物质的干扰。与直接利用枸杞粉提取蛋白相比，利用枸杞粉直接提取多肽时，其测定的多肽含量为14.68％，而经过枸杞多糖、枸杞红素提取过程后，得到的沉淀中测定的多肽含量则达到19.79％，提取的多肽含量提高，从而枸杞多肽的含量也随之提高。
本步骤(4)中，本发明选择的芽孢杆菌属在微生物发酵中发挥着重要作用，具有很强的蛋白水解活性，其中含有丰富的蛋白酶体系，相比于单一的蛋白酶可以将蛋白质水解的更加彻底，提高了蛋白质的水解活性，提高枸杞多肽的生成量。在本发明的优选方案中，枯草芽孢杆菌的添加，对于微生物发酵残渣获得枸杞多肽产物含量具有更为显著的技术效果。
本步骤(5)中，加入盐酸的目的是改变溶液的pH，沉淀发酵粗提物中蛋白质，减少枸杞中内源性蛋白质对后续肽段鉴定的影响；加入乙醇的目的是进一步沉淀发酵粗提物中残存的枸杞红素，减少粗提物中有色物质对于枸杞多肽的影响。
本发明具有如下优点：
枸杞红素、枸杞多糖、枸杞多肽的功能均已得到证实，本发明将枸杞多糖、枸杞红素、枸杞多肽等几个技术相关联，实现了枸杞的综合利用，最大程度地提高了枸杞的利用价值，具有广泛的应用前景。
可以在这一实验步骤中同时得到枸杞多糖、枸杞红素、枸杞多肽，并且在提取过程中三者提取相互之间互不干扰，并且在提取枸杞多糖、枸杞红素对于后一步的发酵得到枸杞多肽去除了有色物质，减少了杂质的干扰。
枸杞深加工技术中，枸杞红素、枸杞多糖、枸杞多肽的连续提取具有高效协同性，不仅充分利用了枸杞的有效成分，而且可以实现在统一提取体系中同时得到枸杞多糖、枸杞红素、枸杞多肽，并且在提取过程中三者提取相互之间互不干扰，此外在提取枸杞多糖、枸杞红素对于后一步的发酵得到枸杞多肽去除了有色物质和多糖成分，减少了杂质的干扰。
本发明获得的枸杞多糖纯度≥50.73％，枸杞红素纯度≥3.04％，枸杞多肽纯度≥7.02％。本发明首次将这三种物质统一提取的，并且提取过程相对简单，使用仪器设备相对好操作，成本低，可广泛应用于工业生产。
本发明涉及枸杞的深加工技术，利用枸杞制备多种功能组分，即包括：(1)抗氧化、抗衰老功能的枸杞多糖；(2)具有抗氧化功能的枸杞多糖；(3)具有降血压、降血糖功能的枸杞活性肽。该工艺保留并提高了枸杞中固有的活性功能，按照功能活性进行分离纯化使各组分的应用对象更为明确，并将几种提取方法优化集成。
具体实施方式
下面通过具体的实施方案叙述本发明。除非特别说明，本发明中所用的技术手段均为本领域技术人员所公知的方法。另外，实施方案应理解为说明性的，而非限制本发明的范围，本发明的实质和范围仅由权利要求书所限定。对于本领域技术人员而言，在不背离本发明实质和范围的前提下，对这些实施方案中的物料成分和用量进行的各种改变或改动也属于本发明的保护范围。以下结合具体实施例对本发明进行进一步说明。
实验例1枸杞多糖、枸杞红素、枸杞多肽的测定方法
本发明中，枸杞多糖的测定方法为：样品中多糖含量的测定参考SN/T4260—2015方法；枸杞红素的方法为：样品中枸杞红素含量测定根据建立的HPLC法测定；枸杞多肽的方法为：使用石墨消解—半自动定氮法测定的。
1、枸杞多糖的测定：使用还原糖含量测定方法。配置缓冲溶液，溶液配方为每100mL水加13.4g酒石酸钾钠、3,5-二硝基水杨酸、1.8g氢氧化钠、0.7g苯酚。使用葡萄糖标准品绘制标准曲线，准确称取并配成浓度为1.0mg/mL的葡萄糖标准溶液，分别吸取0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL葡萄糖标准溶液。加入1.50mL缓冲溶液，沸水浴5min。反应结束，流水冷却，补水至25.0mL。在540nm波长下，以0号管为空白，测定吸光值。以葡萄糖质量浓度为横坐标，吸光值为纵坐标，绘制标准曲线。后将实验得到枸杞多糖样品使用同样方法测定枸杞多糖含量。计算提取率和纯度。
2、枸杞红素的测定：使用高效液相色谱法(High Performance LiquidChromatography,HPLC)进行检验，针对于枸杞中枸杞红素的HPLC检测方法，依据枸杞红素的结构查阅文献，并且根据枸杞红素标准品在450nm处存在最大吸收，确定了检测波长，使用枸杞红素标准品，建立标准曲线，并且应用于实验中的枸杞红素样品。具体测定方法来源于文章Inbaraj B S,Lu H,Hung C F,et al.Determination of carotenoids and theiresters in fruits of Lycium barbarum Linnaeus by HPLC–DAD–APCI–MS[J].Journalof Pharmaceutical&Biomedical Analysis,2008,47(4-5):812-818.
所述提取率＝所得溶剂干燥浓缩得到的枸杞红素/枸杞子中枸杞红素的含量×100％
枸杞红素纯度计算公式＝(所得溶剂干燥浓缩得到的枸杞红素/所得溶剂干燥浓缩得到的枸杞红素粗提取物总量)×100％。
3、枸杞多肽的测定：实施例中，所得到的枸杞多肽的纯度和提取率是通过凯氏定氮的方式测定制备所获得的枸杞多肽，枸杞多肽的纯度＝(通过凯氏定氮测定获得的枸杞多肽中含氮量/得到的枸杞多肽总量得到)×100％；
枸杞多肽的提取率＝(通过凯氏定氮测定获得的枸杞多肽中含氮量/枸杞原料中总的多肽含量)×100％。
具体方法为：使用石墨消解—半自动定氮法测定的多肽含量。使用石墨消解仪，消解样品，由于炉内温度恒定，连续可调、可控，消解一般使用石墨消解仪，用于样品化学分析之前的样品消解处理。将消化好的样品直接放在半自动凯氏定氮仪上进行蒸馏。将蒸馏好的样品用标定好的硫酸进行滴定，颜色由淡蓝色变成淡粉色为滴定终点，计算含氮量含量。
需要说明的是，本发明实施例中所选择的枸杞原料相同。
实施例1枸杞多糖、枸杞红素、枸杞多肽的制备
以干枸杞为原料，按照以下工艺制备枸杞多糖、枸杞红素、枸杞活性肽：
以干枸杞为原料，称取枸杞30g并加入300毫升去离子水浸泡2小时后粉碎，超声提取20分钟，于5000g离心10分钟，上清液用于制备枸杞多糖，沉淀用于提取枸杞红素和枸杞多肽。
(1)枸杞多糖的制备
上清液270毫升加入540毫升的90％乙醇，4℃静置6小时，于3000g离心10分钟，沉淀冷冻干燥，得到枸杞多糖1.60g，纯度为50.73％，提取率为5.34％。
(2)枸杞红素的制备
将枸杞初步提取获得的28.7g沉淀冻干，再次粉碎得枸杞粉。枸杞粉中加入143.5毫升的有机溶剂提取液，正己烷：乙醇＝4:1(v/v)，于温度20℃、转速80rpm搅拌提取0.5小时，重复提取至提取液无色，合并提取液并过滤，沉淀用于制备枸杞多肽，将滤液在30℃下旋转蒸发10分钟，得到含有油状物的橙色固体即枸杞红素1.86g，提取率为6.21％，纯度为3.33％。
(3)枸杞多肽的制备
①将上述获得的22.67g沉淀加入113毫升去离子水，用盐酸调节pH至7.5，加入枯草芽孢杆菌，菌含量为1×106CFU/ml，于35℃发酵24小时；发酵结束后在12000rpm离心5分钟，取100毫升上清液冷冻干燥，得到3.14g发酵粗提取物。
②发酵粗提取中加入15.7毫升的0.01M的盐酸，在4℃匀浆5分钟内，于5000rpm离心10-30分钟，取14.9毫升上清液加入1倍体积的无水乙醇，4℃静置24小时，于5000rpm离心10分钟，取上清冷冻干燥，得到枸杞多肽1.15g，提取率为3.83％，纯度为7.27％。
实施例2枸杞多糖、枸杞红素、枸杞多肽的制备
以干枸杞为原料，称取枸杞20g并加入220毫升去离子水浸泡5小时后粉碎，超声提取40分钟，于5000g离心15分钟，得到上清液200毫升用于制备枸杞多糖，沉淀用于提取枸杞红素和枸杞多肽。
(1)枸杞多糖的制备
上清液加入1000毫升80％乙醇，4℃静置9小时，于4000g离心15分钟，沉淀冷冻干燥，得到枸杞多糖纯度为51.67％，提取率为6.98％。
(2)枸杞红素的制备
将枸杞初步提取获得的19.1g沉淀冻干，再次粉碎得枸杞粉。枸杞粉中加入324毫升的有机溶剂提取液，乙酸乙酯:甲醇＝2.5:1(v/v)，于温度50℃、转速140rpm搅拌提取1.25小时，重复提取至提取液无色，合并提取液并过滤，沉淀用于制备枸杞多肽，将滤液50℃下旋转蒸发20分钟，得到含有油状物的橙色固体即枸杞红素提取率为5.86％，纯度为3.04％。
(3)枸杞多肽的制备
①将上述获得的15g沉淀加入187.5毫升去离子水，用盐酸调节pH至7.5，加入乳酸杆菌，菌含量为1×108CFU/ml，于40℃发酵48小时；发酵结束后在12000rpm离心15分钟，取上清液冷冻干燥，得到2.09g发酵粗提取物。
②发酵粗提取中加入22.99毫升的0.05M的盐酸，在4℃匀浆12.5分钟内，于10000rpm离心20分钟，取上清液加入3倍体积的无水乙醇，4℃静置36小时，于10000rpm离心20分钟，取上清冷冻干燥，得到枸杞多肽提取率为3.60％，纯度为7.02％。
实施例3枸杞多糖、枸杞红素、枸杞多肽的制备
以干枸杞为原料，称取枸杞10g并加入200毫升去离子水浸泡8小时后粉碎，超声提取60分钟，于5000g离心20分钟，180毫升上清液用于制备枸杞多糖，沉淀用于提取枸杞红素和枸杞多肽。
(1)枸杞多糖的制备
上清液加入360毫升的70％乙醇，4℃静置12小时，于5000g离心20分钟，沉淀冷冻干燥，得到枸杞多糖纯度为51.72％，提取率为7.02％。
(2)枸杞红素的制备
将枸杞初步提取获得的9.6g沉淀冻干，再次粉碎得枸杞粉。枸杞粉中加入192毫升的有机溶剂提取液，乙酸乙酯:甲醇＝1:1(v/v)，于温度80℃、转速200rpm搅拌提取2小时，重复提取至提取液无色，合并提取液并过滤，沉淀用于制备枸杞多肽，将滤液在80℃下旋转蒸发30分钟，得到含有油状物的橙色固体即枸杞红素提取率为5.82％，纯度为3.12％。
(3)枸杞多肽的制备
①将上述获得的7.5g沉淀加入150毫升去离子水，用盐酸调节pH至7.5，加入嗜热链球菌，菌含量为2×108CFU/ml，于50℃发酵72小时；发酵结束后在12000rpm离心20分钟，取上清液冷冻干燥，得到1g发酵粗提取物。
②发酵粗提取中加入10毫升的0.1M的盐酸，在4℃匀浆20分钟内，于15000rpm离心10-30分钟，取上清液加入5倍体积的无水乙醇，4℃静置48小时，于15000rpm离心30分钟，取上清冷冻干燥，得到枸杞多肽提取率为3.63％，纯度为7.09％。
实施例4枸杞多糖、枸杞红素、枸杞多肽的制备
以干枸杞为原料，以干枸杞为原料，称取30g干枸杞，与水按照质量体积比1：10混合，浸泡4小时后粉碎，超声提取40分钟，于5000g离心15分钟，上清液用于制备枸杞多糖，沉淀用于提取枸杞红素和枸杞多肽。
(1)枸杞多糖的制备
上清液加入3倍体积的80％乙醇，4℃静置8小时，于5000g离心15分钟，沉淀冷冻干燥，得到枸杞多糖纯度为51.56％，提取率为6.35％。
(2)枸杞红素的制备
将枸杞初步提取获得的沉淀冻干29.2g，再次粉碎得枸杞粉，枸杞粉与有机溶剂提取液按照质量体积比1：5-20(w/v)混合，其中，有机溶剂提取液组成为正己烷：乙醇按照比例2.5:1组成(v/v)，于温度70℃、转速180rpm搅拌提取1.5小时，重复提取至提取液无色，合并提取液并过滤，沉淀用于制备枸杞多肽，将滤液在80℃下旋转蒸发30分钟，得到含有油状物的橙色固体即枸杞红素提取率为6.35％，纯度为3.42％。
(3)枸杞多肽的制备
①将上述获得的8.62g沉淀，与水按照质量体积比1：20(w/v)混合，用盐酸调节pH至7.5，加入枯草芽孢杆菌，菌含量为2×108CFU/ml，于45℃发酵70小时；发酵结束后在12000rpm离心15分钟，取上清液冷冻干燥，得到1.4g发酵粗提取物。
②将发酵粗提取物与0.08M的盐酸按照质量体积比1：5(w/v)混合，在4℃匀浆20分钟内，于15000rpm离心15分钟，取上清液加入5倍体积的无水乙醇，4℃静置48小时，于15000rpm离心30分钟，取上清冷冻干燥，得到枸杞多肽提取率为3.92％，纯度为7.39％。

Claims (10)

1.一种同步分离制备枸杞多糖、枸杞红素、枸杞多肽的方法，其特征在于：步骤如下：
(1)以干枸杞为原料，与水按照质量体积比1：2-20混合，经浸泡、粉碎、超声提取、离心后，得到上清液以及固体沉淀；
(2)向所述步骤(1)的上清液中加入2-8倍体积的50-95％乙醇，经静置，离心，将沉淀冷冻干燥，得到枸杞多糖；
(3)将所述步骤(1)的固体沉淀经冻干，粉碎后与有机溶剂提取液按照质量体积比1：5-20混合，搅拌提取0.5-2小时，经过滤，将得到的沉淀备用，滤液经浓缩，得到枸杞红素；
(4)将所述步骤(3)获得的沉淀与水按照质量体积比1：4-20混合，调节pH至7.0-8.0，加入益生菌，接种量为1×106-2×108CFU/ml，于35-50℃发酵24-72小时；发酵结束后经离心，取上清液经冷冻干燥，得到发酵粗提取物；
(5)将所述发酵粗提取物与0.01-0.1M的盐酸按照质量体积比1：2-10混合，经匀浆、离心，取上清液加入1-5倍体积的无水乙醇，经静置、离心，取上清冷冻干燥，得到枸杞多肽。
2.如权利要求1所述一种同步分离制备枸杞多糖、枸杞红素、枸杞多肽的方法，其特征在于：所述步骤(1)中，浸泡2-8小时后粉碎，超声提取时间为20-60分钟。
3.如权利要求1所述一种同步分离制备枸杞多糖、枸杞红素、枸杞多肽的方法，其特征在于：所述步骤(3)中，所述有机溶剂提取液为正己烷、乙酸乙酯、正丁醇、乙醇、甲醇中的一种或者两种溶剂以(1-5)；1的体积比混合。
4.如权利要求1所述一种同步分离制备枸杞多糖、枸杞红素、枸杞多肽的方法，其特征在于：所述步骤(3)中，所述有机溶剂为正己烷：乙醇按照比例(1-5)；1组成。
5.如权利要求1所述一种同步分离制备枸杞多糖、枸杞红素、枸杞多肽的方法，其特征在于：所述步骤(3)中，所述提取温度为20-80℃、转速为80-200rpm。
6.如权利要求1所述一种同步分离制备枸杞多糖、枸杞红素、枸杞多肽的方法，其特征在于：所述步骤(3)中，所述浓缩条件为：在温度30-80℃下浓缩10-30分钟。
7.如权利要求1所述一种同步分离制备枸杞多糖、枸杞红素、枸杞多肽的方法，其特征在于：所述步骤(4)中，所述益生菌为枯草芽孢杆菌、乳酸杆菌或嗜热链球菌中的一种。
8.如权利要求1所述一种同步分离制备枸杞多糖、枸杞红素、枸杞多肽的方法，其特征在于：所述步骤(4)中，离心条件为12000rpm离心5-20分钟。
9.如权利要求1所述一种同步分离制备枸杞多糖、枸杞红素、枸杞多肽的方法，其特征在于：所述步骤(5)中，所述匀浆条件为4℃匀浆5-20分钟；所述静置条件为：4℃静置24-48小时；所述离心条件为5000-15000rpm离心10-30分钟。
10.由权利要求1-9任一所述方法制备获得的枸杞多糖、枸杞红素以及枸杞多肽。
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