CN110339335B - 一种鹿瓜多肽注射制剂 - Google Patents

一种鹿瓜多肽注射制剂 Download PDF

Info

Publication number
CN110339335B
CN110339335B CN201910585330.4A CN201910585330A CN110339335B CN 110339335 B CN110339335 B CN 110339335B CN 201910585330 A CN201910585330 A CN 201910585330A CN 110339335 B CN110339335 B CN 110339335B
Authority
CN
China
Prior art keywords
preparation
polypeptide
injection
filtrate
filtering
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201910585330.4A
Other languages
English (en)
Other versions
CN110339335A (zh
Inventor
朱吉满
何利群
夏瑞雪
宁夏
王帆
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Harbin Yuheng Pharmaceutical Co ltd
Original Assignee
Harbin Yuheng Pharmaceutical Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Harbin Yuheng Pharmaceutical Co ltd filed Critical Harbin Yuheng Pharmaceutical Co ltd
Priority to CN201910585330.4A priority Critical patent/CN110339335B/zh
Publication of CN110339335A publication Critical patent/CN110339335A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN110339335B publication Critical patent/CN110339335B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/01Hydrolysed proteins; Derivatives thereof
    • A61K38/011Hydrolysed proteins; Derivatives thereof from plants
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/01Hydrolysed proteins; Derivatives thereof
    • A61K38/012Hydrolysed proteins; Derivatives thereof from animals
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/36Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/08Solutions
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/04Drugs for skeletal disorders for non-specific disorders of the connective tissue
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A61P19/10Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02Immunomodulators
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/12Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
    • A61K35/32Bones; Osteocytes; Osteoblasts; Tendons; Tenocytes; Teeth; Odontoblasts; Cartilage; Chondrocytes; Synovial membrane
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/42Cucurbitaceae (Cucumber family)

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明属于生物医药技术领域,具体涉及一种鹿瓜多肽注射制剂,该注射剂是由鹿骨提取的多肽、甜瓜籽提取的多肽、海藻酸钠制备而成;研究表明,本发明工艺简单,适合工业化生产,去除活性炭工艺方法,符合一致性评价的规定;采用海藻酸钠作为制剂的辅料,保证制剂产品稳定性,进一步,获得质量更加优秀的产品;本发明的注射制剂,符合注射制剂常规的要求,比如内毒素、装量差异等,具有更高的潜在安全性;制剂辅料用量少,产品成本更低,降低患者的用药费用;本发明制剂经过稳定性试验,多肽含量、游离氨基酸含量、高分子物质含量几乎不增加或增加较小,具有更好的安全性。

Description

一种鹿瓜多肽注射制剂
技术领域
本发明属于生物医药技术领域,具体涉及一种鹿瓜多肽注射制剂。
背景技术
鹿瓜多肽注射制剂由鹿科动物梅花鹿的骨骼和葫芦科植物甜瓜的干燥成熟种子经分别提取后制成,主要含有骨诱导多肽类生物因子、甜瓜籽提取物、多种游离氨基酸和有机钙、磷等成分。
以鹿骨和甜瓜子为原料的药物制剂,主要是鹿瓜多肽注射制剂,该制剂具有调节骨代谢、刺激成骨细胞增殖、促进新骨形成的作用,亦可调节钙鳞代谢、增加骨钙沉积、防止骨质疏松,并具有抗炎、镇痛、抗风湿等作用,已在临床广泛使用。临床应用表明,以鹿骨和甜瓜子为原料的注射制剂是治疗骨折不愈合、骨质疏松症、风湿、类风湿性关节炎、腕舟状骨缺血性坏死和软组织损伤等的有效药物,在骨科的应用前景广阔。
中国专利CN02125357.9公开了以鹿骨和甜瓜子为原料制备注射剂,该专利方法为:分别对鹿骨和甜瓜子进行提取、酸调pH值、碱调pH值,合并提取液后再超滤制备成注射制剂;中国专利CN200410013602.7公开了鹿骨和甜瓜子为原料制备成注射制剂,该专利的方法为:鹿骨进行提取、酸调pH值、碱调pH值、超滤,甜瓜子提取、超滤,合并提取液制备成注射剂;中国专利200510108157.7公开了鹿瓜多肽注射剂的制备方法,该方法为:鹿骨提取,经过三次超滤,甜瓜子提取、三次超滤,合并提取液,制备成注射剂;中国专利CN200910167155.3公开了鹿瓜多肽注射剂的制备方法,该方法为:分别将鹿骨和甜瓜子提取、酸调pH值、加热后超滤、离心、碱调pH值、离心、调pH值、三步超滤、超滤液制备成注射剂;中国专利CN201210328858.1公开了鹿瓜多肽注射剂的制备方法,该方法为:鹿骨提取后,经过三次超滤,甜瓜子提取后,经过三次超滤,合并提取液制备成注射制剂。上述方法虽然可以获得鹿瓜多肽注射剂,但都没有充分考虑鹿瓜多肽中无效成分的含量,因此,上述制备方法有待商榷。
目前上市销售的鹿瓜多肽制剂主要为鹿瓜多肽注射液和鹿瓜多肽冻干粉针剂。专利CN1579542A公开了注射用鹿瓜多肽及其制备工艺,由多肽类物质和赋形剂制备成冻干粉针剂;专利CN1742778A公开了一种注射用鹿瓜多肽药物组合物及其制备方法,它含有鹿骨提取物、甜瓜子提取物和一种或多种赋形剂制成。然而鹿瓜多肽注射液中的肽类物质易聚合成大分子,其中的碱和鞣质可加速这种聚合反应,因此鹿瓜多肽注射液在保存过程中易聚合,导致临床过敏反应增加,同时不利于长期存放;鹿瓜多肽的冻干粉针剂在长期放置过程也存在稳定性差的问题,导致有效成分的含量降低,生物利用度降低,影响了临床应用。
发明内容
基于上述原因,为了解决现有技术的不足,申请人经过多年研究,得到一种新的鹿瓜多肽注射制剂,该制剂是由鹿骨提取的多肽、甜瓜籽提取的多肽、海藻酸钠制备而成。
为实现上述目的,本发明的技术方案如下:
一种鹿瓜多肽注射制剂,该注射制剂由鹿骨提取的多肽、甜瓜籽提取的多肽、海藻酸钠制备而成。
其中鹿骨提取的多肽、甜瓜籽提取的多肽与海藻酸钠的重量比为1.5-2.5:0.7-0.8:0.070-0.10。
其中鹿骨提取的多肽、甜瓜籽提取的多肽与海藻酸钠的重量比为2:0.75:0.083。
其中鹿骨提取的多肽的制备方法为:
取鹿骨,去掉骨髓,粉碎,称重,加入鹿骨重量1.5%~2.5%的复合蛋白酶和鹿骨重量2~4倍的注射用水,复合蛋白酶为重量比为1.85~2.35:1的胃蛋白酶和木瓜蛋白酶;40℃~50℃提取1~3小时,过滤,滤液用枸橼酸调pH到4.5~6.0,静置,过滤,滤液用枸橼酸钠调pH到8.5~9.0,加入鹿骨重量的0.1~0.3倍的胰酶,40℃~50℃水解1~3小时,过滤,将滤液枸橼酸调制pH值为6.5~7.5,依次用截取分子量十万超滤系统、截取分子量一万超滤系统、截取分子量八千超滤机组,进行超滤,保留透过液,冷冻干燥,得到鹿骨提取的多肽。
其中甜瓜籽提取的多肽的制备方法为:
取甜瓜籽,粉碎,称重,加入甜瓜籽重量1.5%~2.5%的复合蛋白酶和甜瓜籽重量2~4倍的注射用水,复合蛋白酶为重量比为1.85~2.35:1的胃蛋白酶和木瓜蛋白酶;40℃~50℃提取1~3小时,过滤,滤液用枸橼酸调pH到4.5~6.0,静置,过滤,滤液用枸橼酸钠调pH到8.5~9.0,加入甜瓜籽重量的0.1~0.3倍的胰酶,40℃~50℃水解1~3小时,过滤,滤液用枸橼酸调制pH值为6.5~7.5,依次用截取分子量十万超滤系统、截取分子量一万超滤系统、截取分子量八千超滤机组,进行超滤,保留透过液,冷冻干燥,得到甜瓜籽提取得到多肽。
其中该注射制剂的制备方法为:取海藻酸钠,加入注射用水,溶解完全,加热至30-40℃,在该温度下加入鹿骨提取的多肽和甜瓜籽提取的多肽,保持30-40℃搅拌10-20min,冷却至室温,过滤,滤液经0.22μm滤芯过滤,浓缩至多肽含量为3-6mg/ml,灌装,得到注射液。
本发具有下述有益的技术效果:
1、工艺简单,适合工业化生产,去除活性炭工艺方法,符合一致性评价的规定。
2、采用海藻酸钠作为制剂的辅料,保证制剂产品稳定性,进一步,获得质量更加优秀的产品。
3、本发明的注射制剂,符合注射制剂常规的要求,比如内毒素、装量差异等,具有更高的潜在安全性。
4、制剂辅料用量少,产品成本更低,降低患者的用药费用。
5、本发明制剂经过稳定性试验,多肽含量、游离氨基酸含量、高分子物质含量几乎不增加或增加较小,具有更好的安全性。
具体实施方式
以下通过具体实施方式的描述对本发明作进一步说明,但这并非是对本发明的限制,本领域技术人员根据本发明的基本思想,可以做出各种修改或改进,但是只要不脱离本发明的基本思想,均在本发明的范围之内。
本发明下述试验委托沈耀(香河)科技有限公司完成。
制备实施例
实施例1
取鹿骨,去掉骨髓,粉碎,称重,加入鹿骨重量1.5%的复合蛋白酶和鹿骨重量2倍的注射用水,复合蛋白酶为重量比为1.85:1的胃蛋白酶和木瓜蛋白酶;40℃提取3小时,过滤,滤液用枸橼酸调pH到4.5,静置,过滤,滤液用枸橼酸钠调pH到8.5,加入鹿骨重量的0.1倍的胰酶,40℃水解3小时,过滤,将滤液枸橼酸调制pH值为6.5,依次用截取分子量十万超滤系统、截取分子量一万超滤系统、截取分子量八千超滤机组,进行超滤,保留透过液,冷冻干燥,得到鹿骨提取的多肽。
其中甜瓜籽提取的多肽的制备方法为:取甜瓜籽,粉碎,称重,加入甜瓜籽重量1.5%的复合蛋白酶和甜瓜籽重量2倍的注射用水,复合蛋白酶为重量比为1.85:1的胃蛋白酶和木瓜蛋白酶;40℃提取3小时,过滤,滤液用枸橼酸调pH到4.5,静置,过滤,滤液用枸橼酸钠调pH到8.5,加入甜瓜籽重量的0.1倍的胰酶,40℃水解3小时,过滤,滤液用枸橼酸调制pH值为6.5,依次用截取分子量十万超滤系统、截取分子量一万超滤系统、截取分子量八千超滤机组,进行超滤,保留透过液,冷冻干燥,得到甜瓜籽提取得到多肽。
制剂的制备方法:鹿骨提取的多肽、甜瓜籽提取的多肽与海藻酸钠的重量比为1.5:0.7:0.070取海藻酸钠,加入注射用水,溶解完全,加热至30℃,在该温度下加入鹿骨提取的多肽和甜瓜籽提取的多肽,保持30℃搅拌20min,冷却至室温,过滤,滤液经0.22μm滤芯过滤,浓缩至多肽含量为4.5mg/ml,灌装,得到注射液100支。
实施例2
鹿骨提取的多肽的制备方法为:取鹿骨,去掉骨髓,粉碎,称重,加入鹿骨重量2.5%的复合蛋白酶和鹿骨重量4倍的注射用水,复合蛋白酶为重量比为2.35:1的胃蛋白酶和木瓜蛋白酶;50℃提取1小时,过滤,滤液用枸橼酸调pH到6.0,静置,过滤,滤液用枸橼酸钠调pH到9.0,加入鹿骨重量的0.3倍的胰酶,50℃水解1小时,过滤,将滤液枸橼酸调制pH值为7.5,依次用截取分子量十万超滤系统、截取分子量一万超滤系统、截取分子量八千超滤机组,进行超滤,保留透过液,冷冻干燥,得到鹿骨提取的多肽。
甜瓜籽提取的多肽的制备方法为:取甜瓜籽,粉碎,称重,加入甜瓜籽重量2.5%的复合蛋白酶和甜瓜籽重量4倍的注射用水,复合蛋白酶为重量比为2.35:1的胃蛋白酶和木瓜蛋白酶;50℃提取1小时,过滤,滤液用枸橼酸调pH到6.0,静置,过滤,滤液用枸橼酸钠调pH到9.0,加入甜瓜籽重量的0.3倍的胰酶,50℃水解1小时,过滤,滤液用枸橼酸调制pH值为7.5,依次用截取分子量十万超滤系统、截取分子量一万超滤系统、截取分子量八千超滤机组,进行超滤,保留透过液,冷冻干燥,得到甜瓜籽提取得到多肽。
制剂的制备方法:鹿骨提取的多肽、甜瓜籽提取的多肽与海藻酸钠的重量比为2.5:0.8:0.10;取海藻酸钠,加入注射用水,溶解完全,加热至40℃,在该温度下加入鹿骨提取的多肽和甜瓜籽提取的多肽,保持40℃搅拌20min,冷却至室温,过滤,滤液经0.22μm滤芯过滤,浓缩至多肽含量为4.5mg/ml,灌装,得到注射液100支。
实施例3
鹿骨提取的多肽的制备方法为:取鹿骨,去掉骨髓,粉碎,称重,加入鹿骨重量2.0%的复合蛋白酶和鹿骨重量3倍的注射用水,复合蛋白酶为重量比为2.05:1的胃蛋白酶和木瓜蛋白酶;40℃~50℃提取1~3小时,过滤,滤液用枸橼酸调pH到5.5,静置,过滤,滤液用枸橼酸钠调pH到8.8,加入鹿骨重量的0.2倍的胰酶,45℃水解2小时,过滤,将滤液枸橼酸调制pH值为7.0,依次用截取分子量十万超滤系统、截取分子量一万超滤系统、截取分子量八千超滤机组,进行超滤,保留透过液,冷冻干燥,得到鹿骨提取的多肽。
甜瓜籽提取的多肽的制备方法为:取甜瓜籽,粉碎,称重,加入甜瓜籽重量2.0%的复合蛋白酶和甜瓜籽重量3倍的注射用水,复合蛋白酶为重量比为2.05:1的胃蛋白酶和木瓜蛋白酶;45℃提取2小时,过滤,滤液用枸橼酸调pH到5.0,静置,过滤,滤液用枸橼酸钠调pH到8.8,加入甜瓜籽重量的0.2倍的胰酶,45℃水解2小时,过滤,滤液用枸橼酸调制pH值为7.0,依次用截取分子量十万超滤系统、截取分子量一万超滤系统、截取分子量八千超滤机组,进行超滤,保留透过液,冷冻干燥,得到甜瓜籽提取得到多肽。
制剂的制备方法:鹿骨提取的多肽、甜瓜籽提取的多肽与海藻酸钠的重量比为2:0.75:0.083;取海藻酸钠,加入注射用水,溶解完全,加热至35℃,在该温度下加入鹿骨提取的多肽和甜瓜籽提取的多肽,保持35℃搅拌15min,冷却至室温,过滤,滤液经0.22μm滤芯过滤,浓缩至多肽含量为4.5mg/ml,灌装,得到注射液。
实施例4
鹿骨提取的多肽的制备方法为:取鹿骨,去掉骨髓,粉碎,称重,加入鹿骨重量1.8%的复合蛋白酶和鹿骨重量3.5倍的注射用水,复合蛋白酶为重量比为1.95:1的胃蛋白酶和木瓜蛋白酶;45℃提取2.5小时,过滤,滤液用枸橼酸调pH到5.5,静置,过滤,滤液用枸橼酸钠调pH到9.0,加入鹿骨重量的0.25倍的胰酶,45℃水解1.5小时,过滤,将滤液枸橼酸调制pH值为6.5,依次用截取分子量十万超滤系统、截取分子量一万超滤系统、截取分子量八千超滤机组,进行超滤,保留透过液,冷冻干燥,得到鹿骨提取的多肽。
甜瓜籽提取的多肽的制备方法为:取甜瓜籽,粉碎,称重,加入甜瓜籽重量1.8%的复合蛋白酶和甜瓜籽重量2倍的注射用水,复合蛋白酶为重量比为1.95:1的胃蛋白酶和木瓜蛋白酶;45℃提取1.5小时,过滤,滤液用枸橼酸调pH到4.5,静置,过滤,滤液用枸橼酸钠调pH到8.5,加入甜瓜籽重量的0.15倍的胰酶,45℃水解2小时,过滤,滤液用枸橼酸调制pH值为6.5,依次用截取分子量十万超滤系统、截取分子量一万超滤系统、截取分子量八千超滤机组,进行超滤,保留透过液,冷冻干燥,得到甜瓜籽提取得到多肽。
鹿骨提取的多肽、甜瓜籽提取的多肽与海藻酸钠的重量比为1.7:0.7:0.075;取海藻酸钠,加入注射用水,溶解完全,加热至35℃,在该温度下加入鹿骨提取的多肽和甜瓜籽提取的多肽,保持35℃搅拌15min,冷却至室温,过滤,滤液经0.22μm滤芯过滤,浓缩至多肽含量为4.5mg/ml,灌装,得到注射液。
实施例5
鹿骨提取的多肽的制备方法为:取鹿骨,去掉骨髓,粉碎,称重,加入鹿骨重量2.4%的复合蛋白酶和鹿骨重量2.5倍的注射用水,复合蛋白酶为重量比为2.20:1的胃蛋白酶和木瓜蛋白酶;45℃提取3小时,过滤,滤液用枸橼酸调pH到6.0,静置,过滤,滤液用枸橼酸钠调pH到9.0,加入鹿骨重量的0.25倍的胰酶,45℃水解2.5小时,过滤,将滤液枸橼酸调制pH值为7.5,依次用截取分子量十万超滤系统、截取分子量一万超滤系统、截取分子量八千超滤机组,进行超滤,保留透过液,冷冻干燥,得到鹿骨提取的多肽。
甜瓜籽提取的多肽的制备方法为:取甜瓜籽,粉碎,称重,加入甜瓜籽重量2.5%的复合蛋白酶和甜瓜籽重量3.5倍的注射用水,复合蛋白酶为重量比为2.25:1的胃蛋白酶和木瓜蛋白酶;45℃提取2.5小时,过滤,滤液用枸橼酸调pH到6.0,静置,过滤,滤液用枸橼酸钠调pH到9.0,加入甜瓜籽重量的0.25倍的胰酶,45℃水解2小时,过滤,滤液用枸橼酸调制pH值为7.5,依次用截取分子量十万超滤系统、截取分子量一万超滤系统、截取分子量八千超滤机组,进行超滤,保留透过液,冷冻干燥,得到甜瓜籽提取得到多肽。
制剂的制备方法:鹿骨提取的多肽、甜瓜籽提取的多肽与海藻酸钠的重量比为2.4:0.8:0.095;取海藻酸钠,加入注射用水,溶解完全,加热至40℃,在该温度下加入鹿骨提取的多肽和甜瓜籽提取的多肽,保持40℃搅拌10min,冷却至室温,过滤,滤液经0.22μm滤芯过滤,浓缩至多肽含量为4.5mg/ml,灌装,得到注射液100支。
对比例:
鹿骨提取的多肽的制备方法为:取鹿骨,去掉骨髓,粉碎,称重,加入鹿骨重量2.0%的复合蛋白酶和鹿骨重量3倍的注射用水,复合蛋白酶为重量比为2.05:1的胃蛋白酶和木瓜蛋白酶;40℃~50℃提取1~3小时,过滤,滤液用枸橼酸调pH到5.5,静置,过滤,滤液用枸橼酸钠调pH到8.8,加入鹿骨重量的0.2倍的胰酶,45℃水解2小时,过滤,将滤液枸橼酸调制pH值为7.0,依次用截取分子量十万超滤系统、截取分子量一万超滤系统、截取分子量八千超滤机组,进行超滤,保留透过液,冷冻干燥,得到鹿骨提取的多肽。
甜瓜籽提取的多肽的制备方法为:
取甜瓜籽,粉碎,称重,加入甜瓜籽重量2.0%的复合蛋白酶和甜瓜籽重量3倍的注射用水,复合蛋白酶为重量比为2.05:1的胃蛋白酶和木瓜蛋白酶;45℃提取2小时,过滤,滤液用枸橼酸调pH到5.0,静置,过滤,滤液用枸橼酸钠调pH到8.8,加入甜瓜籽重量的0.2倍的胰酶,45℃水解2小时,过滤,滤液用枸橼酸调制pH值为7.0,依次用截取分子量十万超滤系统、截取分子量一万超滤系统、截取分子量八千超滤机组,进行超滤,保留透过液,冷冻干燥,得到甜瓜籽提取得到多肽。
取鹿骨提取液和甜瓜子提取液解冻后,按照多肽含量重量比2:0.8混合混合制得鹿瓜多肽提取液,加入活性炭,过滤,滤液用截取分子量8000的超滤膜超滤,保留透过液,透过液经0.22μm滤芯过滤,浓缩至多肽含量为4.5mg/ml,灌装,得到注射液100支。
【多肽含量测定】精密量取样品1ml,置25ml量瓶中,加0.1mol/L氢氧化钠溶液稀释至刻度,作为供试品溶液,照福林酚测定法测定。
福林酚测定法
试剂碱性铜试液取氢氧化钠10g,碳酸钠50g,加水400ml使溶解,作为甲液;取酒石酸钾0.5g,加水50ml使溶解,另取硫酸铜0.25g,加水30ml使溶解,将两液混合,作为乙液。
临用前,合并甲、乙两液,并加水至500ml。
操作法对照品溶液的制备取牛血清白蛋白对照品,加水制成每1ml中含0.3mg的溶液。
供试品溶液的制备照各品种项下规定的方法制备。
标准曲线的制备精密量取对照品溶液0.0ml、0.1ml、0.3ml、0.5ml、0.7ml、0.9ml,分别置具塞试管中,各加水至1.0ml,再分别加入碱性铜试液1.0ml,摇匀,各加入福林酚试液(取福林试液中的贮备液1→16)4.0ml,立即混匀,置55℃水浴中准确反应5分钟,置冷水浴10分钟,照紫外-可见分光光度法(中国药典2005年版二部附录ⅣA),在650nm的波长处测定吸收度;以0号管作为空白。以对照品溶液浓度与相应的吸收度计算回归方程。
测定法精密量取供试品溶液1.0ml,照标准曲线的制备项下的方法,自“加入碱性铜试液”起,依法测定,从回归方程计算多肽的含量,并乘以稀释倍数,即得。
【游离氨基酸测定法】
精密量取氨基酸对照品溶液和供试品溶液200μL,分别置一1ml离心管中,精密加入正亮氨酸内标溶液(1mg/ml)20μl,加入0.1mol/L异硫氰酸苯酯(PITC)乙腈溶液100μl,1mol/L三乙胺乙腈溶液100μl,混匀,室温放置1小时,加入400μl正己烷,振荡,放置10分钟,取下层溶液,用0.45μm滤器过滤。
色谱条件:色谱柱:Agela XBP-C18柱250mm*4.6mm,5μm;流动相:A液:0.1mol/L醋酸钠(pH6.5)/乙腈=93/7,B液:乙腈/水=4/1;检测波长:254nm;柱温:43℃;进样量:2μL。
表1流动相梯度表
Figure BDA0002114231740000111
取不同制剂照氨基酸测定法测定,含游离氨基酸(门冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、甘氨酸、组氨酸、精氨酸、苏氨酸、丙氨酸、脯氨酸、酪氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、胱氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸)总量不超过500μg/ml。
【高分子量物质】照高效液相色谱法(中国药典2010年版二部附录ⅤD)测定。
色谱条件与系统适用性试验用凝胶色谱柱(TSKgelG2000SW);流动相为乙腈-水-三氟乙酸(35:65:0.1);流速为0.7ml/mim;检测波长为214nm。理论板数按核糖核酸酶A峰计算不低于2000。
标准曲线的制备分别取核糖核酸酶A(分子量13700)、人胰岛素(分子量5808)、胸腺肽α1(分子量3108)、生长抑素(分子量1638)适量,用流动相制成每1ml中各含0.5mg的溶液作为分子量标准溶液。分别取分子量标准溶液10μL注入液相色谱仪,记录色谱图,重复进样,其保留时间相对偏差不得大于2.0%。以各峰的保留时间为横坐标,分子量对数为纵坐标作标准曲线,进行线性回归,相关系数不得小于0.99。
测定法取供试品10μL,注入液相色谱仪,记录色谱图,以面积归一化法计算,供试品中分子量大于10000道尔顿的组分不得过5.0%。
试验方法:稳定试验:将实施例1-5和对比例1 2分别置于高温70℃,相对湿度95%和光照照6000Lx条件下,分别于第10天、30天取样考察各项指标,结果见下表2:
表2不同试验组制剂比较试验
Figure BDA0002114231740000121
试验结论:上述试验表明,采用海藻酸钠作为药用辅料制备成的制剂,多肽含量几乎不变,游离氨基酸含量、高分子物质含量变化较小;而对比例的多肽制剂,多肽含量降低较快,游离氨酸含量和高分子物质含量增加较多,充分说明,在制剂中加入海藻酸钠后,具有更好的稳定性。

Claims (1)

1.一种鹿瓜多肽注射制剂,其特征在于该注射制剂的制备方法为:鹿骨提取的多肽的制备方法为:取鹿骨,去掉骨髓,粉碎,称重,加入鹿骨重量2.0%的复合蛋白酶和鹿骨重量3倍的注射用水,复合蛋白酶为重量比为2.05:1的胃蛋白酶和木瓜蛋白酶;40℃~50℃提取1~3小时,过滤,滤液用枸橼酸调pH到5.5,静置,过滤,滤液用枸橼酸钠调pH到8.8,加入鹿骨重量的0.2倍的胰酶,45℃水解2小时,过滤,将滤液枸橼酸调制pH值为7.0,依次用截取分子量十万超滤系统、截取分子量一万超滤系统、截取分子量八千超滤机组,进行超滤,保留透过液,冷冻干燥,得到鹿骨提取的多肽;
甜瓜籽提取的多肽的制备方法为:取甜瓜籽,粉碎,称重,加入甜瓜籽重量2.0%的复合蛋白酶和甜瓜籽重量3倍的注射用水,复合蛋白酶为重量比为2.05:1的胃蛋白酶和木瓜蛋白酶;45℃提取2小时,过滤,滤液用枸橼酸调pH到5.0,静置,过滤,滤液用枸橼酸钠调pH到8.8,加入甜瓜籽重量的0.2倍的胰酶,45℃水解2小时,过滤,滤液用枸橼酸调制pH值为7.0,依次用截取分子量十万超滤系统、截取分子量一万超滤系统、截取分子量八千超滤机组,进行超滤,保留透过液,冷冻干燥,得到甜瓜籽提取得到多肽;
制剂的制备方法:鹿骨提取的多肽、甜瓜籽提取的多肽与海藻酸钠的重量比为2:0.75:0.083;取海藻酸钠,加入注射用水,溶解完全,加热至35℃,在该温度下加入鹿骨提取的多肽和甜瓜籽提取的多肽,保持35℃搅拌15min,冷却至室温,过滤,滤液经0.22μm滤芯过滤,浓缩至多肽含量为4.5mg/ml,灌装,得到注射液。
CN201910585330.4A 2019-07-01 2019-07-01 一种鹿瓜多肽注射制剂 Active CN110339335B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910585330.4A CN110339335B (zh) 2019-07-01 2019-07-01 一种鹿瓜多肽注射制剂

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910585330.4A CN110339335B (zh) 2019-07-01 2019-07-01 一种鹿瓜多肽注射制剂

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN110339335A CN110339335A (zh) 2019-10-18
CN110339335B true CN110339335B (zh) 2023-03-24

Family

ID=68177034

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201910585330.4A Active CN110339335B (zh) 2019-07-01 2019-07-01 一种鹿瓜多肽注射制剂

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN110339335B (zh)

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105688182A (zh) * 2014-11-28 2016-06-22 西藏誉衡阳光医药有限责任公司 一种鹿瓜多肽注射制剂
CN106036837A (zh) * 2016-06-03 2016-10-26 通化师范学院 梅花鹿鹿角和鹿茸微胶囊配方及其制备方法

Family Cites Families (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1207022C (zh) * 2002-07-26 2005-06-22 哈尔滨誉衡药业有限公司 促进骨折愈合和骨关节损伤修复的药物组合物及其制备方法和应用
CN1543825A (zh) * 2003-11-17 2004-11-10 吉林省乳业集团广泽有限公司 梅花鹿骨胶多肽系列乳制品及生产工艺
CN1579540A (zh) * 2004-02-11 2005-02-16 江莉 注射用骨瓜多肽及其制备工艺
CN100363019C (zh) * 2005-10-09 2008-01-23 黑龙江迪龙制药有限公司 注射用鹿瓜多肽药物组合物及其制备方法
CN100382842C (zh) * 2006-05-31 2008-04-23 哈尔滨吉尔生物科技有限公司 口服鹿瓜多肽组合物及其制备方法
CN101297853B (zh) * 2008-06-17 2010-09-15 杨拴定 骨瓜提取物注射剂及其制备方法
CN101647814A (zh) * 2008-08-13 2010-02-17 北京凯瑞创新医药科技有限公司 一种动物角的仿生酶解产物及其用途
CN101628025B (zh) * 2009-05-12 2011-09-21 哈尔滨誉衡药业股份有限公司 包含鹿骨提取物和甜瓜籽提取物的药物组合物
CN102441023B (zh) * 2011-12-08 2013-05-01 赵联华 一种治疗骨科疾病的注射用组合物
CN103655671A (zh) * 2012-09-07 2014-03-26 天津拓飞生物科技有限公司 鹿瓜多肽药物组合物及其制备方法
CN103040910B (zh) * 2012-12-17 2015-03-11 海南圣欣医药科技有限公司 一种鹿瓜多肽脂质体注射剂
CN104248652B (zh) * 2013-06-26 2016-05-11 哈尔滨誉衡药业股份有限公司 一种鹿瓜多肽注射制剂的制备方法
CN104248651A (zh) * 2013-06-26 2014-12-31 哈尔滨誉衡药业股份有限公司 一种原料为鹿骨和甜瓜子的药物组合物
CN104888226A (zh) * 2014-03-06 2015-09-09 中国科学院大连化学物理研究所 一种蛋白质和/或多肽类物质的制剂
CN105326861A (zh) * 2015-09-23 2016-02-17 长春世鹿鹿业集团有限公司 一种鹿骨胶原肽和活性钙复剂的提取方法
CN107595924B (zh) * 2017-09-21 2021-02-09 哈尔滨松鹤制药有限公司 一种骨瓜提取物注射液制备方法及相应的药物组合物
CN107988302B (zh) * 2018-01-23 2020-11-13 吉林省吉诺生物工程有限责任公司 一种鹿瓜多肽的制备方法及鹿瓜多肽在制备特殊医学用途食品中的应用
CN108671221A (zh) * 2018-07-26 2018-10-19 广东羲准生物科技有限公司 骨瓜多肽组合物及其应用
CN110339336A (zh) * 2019-07-01 2019-10-18 哈尔滨誉衡制药有限公司 一种鹿瓜多肽注射制剂的制备方法

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105688182A (zh) * 2014-11-28 2016-06-22 西藏誉衡阳光医药有限责任公司 一种鹿瓜多肽注射制剂
CN106036837A (zh) * 2016-06-03 2016-10-26 通化师范学院 梅花鹿鹿角和鹿茸微胶囊配方及其制备方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
海藻酸钠的综合应用进展;王春霞等;《食品与发酵科技》;20131025(第05期);第99-102页 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN110339335A (zh) 2019-10-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104327176B (zh) 一种高纯度眼镜蛇神经毒素的提取方法及含有该毒素的药物组合物
CN104710511A (zh) 一种源于带鱼鱼肉蛋白的铁螯合肽及其制备方法和用途
Sinha et al. On the lipolytic action of parathyroid hormone in man
AU2021103416A4 (en) Polypeptide, composition, compound preparation for lowering uric acid, preparation method and use thereof
CN1313086C (zh) 一种注射用细辛脑制剂及制备方法
CN101297853B (zh) 骨瓜提取物注射剂及其制备方法
CN110339335B (zh) 一种鹿瓜多肽注射制剂
CN104248651A (zh) 一种原料为鹿骨和甜瓜子的药物组合物
CN1915986A (zh) 一种高纯度的丹参酮iia磺酸钠、制备方法及其制剂
CN105688182A (zh) 一种鹿瓜多肽注射制剂
CN100506212C (zh) 一种注射用去甲斑蝥酸钠冻干粉及其制备方法
CN110339336A (zh) 一种鹿瓜多肽注射制剂的制备方法
CN104248652B (zh) 一种鹿瓜多肽注射制剂的制备方法
CN105687293A (zh) 一种鹿瓜多肽注射剂的制备方法
US4085204A (en) Process for obtaining insulin like active substances
CN101204576A (zh) 一种脑蛋白水解物氯化钠注射液的制备方法
CN110100945B (zh) 一种汉麻降血脂肽组合物及其应用
SU581842A3 (ru) Способ получени антигенов
CN107412730A (zh) 一种地黄蛋白纳米颗粒及其制备方法
CN103142991A (zh) 一种脑蛋白水解物及其冻干粉针
US4139611A (en) Organic peptide containing substance recovered from blood having insulin-like activity
CN105688181A (zh) 一种鹿骨和甜瓜子为原料的注射制剂
CN1152439A (zh) 全成分珍珠原液或珍珠粉制备工艺
CN1686167A (zh) 一种脑必舒冻干粉针剂及其制备方法
CN111196840A (zh) 一种大胡蜂肽wvc-ⅰ及其制备方法和应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant