CN110331215B - 一种用于鉴别鹿角的引物探针组合物及其应用 - Google Patents

一种用于鉴别鹿角的引物探针组合物及其应用 Download PDF

Info

Publication number
CN110331215B
CN110331215B CN201910657475.0A CN201910657475A CN110331215B CN 110331215 B CN110331215 B CN 110331215B CN 201910657475 A CN201910657475 A CN 201910657475A CN 110331215 B CN110331215 B CN 110331215B
Authority
CN
China
Prior art keywords
deer
primer
probe
kit
seq
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201910657475.0A
Other languages
English (en)
Other versions
CN110331215A (zh
Inventor
季申
潘杰
冯睿
张静娴
胡青
张甦
苗水
李丽敏
王少敏
孙健
毛丹
刘贤贤
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
SHANGHAI INSTITUTE FOR FOOD AND DRUG CONTROL
Original Assignee
SHANGHAI INSTITUTE FOR FOOD AND DRUG CONTROL
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by SHANGHAI INSTITUTE FOR FOOD AND DRUG CONTROL filed Critical SHANGHAI INSTITUTE FOR FOOD AND DRUG CONTROL
Priority to CN201910657475.0A priority Critical patent/CN110331215B/zh
Publication of CN110331215A publication Critical patent/CN110331215A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN110331215B publication Critical patent/CN110331215B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
    • C12Q1/6888—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/156—Polymorphic or mutational markers
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明公开了一种用于鉴别鹿角的引物探针组合物，其包括：引物F1、引物R1、探针P1；其中，所述引物F1为如SEQ ID No.1所示序列的单链DNA分子；所述引物R1为如SEQ ID No.2所示序列的单链DNA分子；所述探针P1为如SEQ ID No.3所示序列的单链DNA分子；其中上述引物、探针也可为将其对应的序列经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与该对应的序列具有相同功能的DNA分子。本发明还涉及含有上述引物探针组合物的试剂盒和系统及其应用。本发明将马鹿、梅花鹿与其余18种鹿科动物以及猪牛羊的完整线粒体基因序列进行对比，建立了一种从分子水平对真伪鹿角的鉴别试剂盒，具有简单，快速，高特异性和高灵敏度的特点。

Description

一种用于鉴别鹿角的引物探针组合物及其应用
技术领域
本发明属于分子生物学技术领域，尤其涉及一种用于鉴别鹿角的引物探针组合物及其应用。
背景技术
中国药典2015年版规定鹿角来源为马鹿和梅花鹿，其饮片规格为极薄片和鹿角粉，无法从性状上加以区分，也没有专属的鉴别方法，造成了造假的重灾区，给鹿角市场造成了巨大冲击。
根据有关文献报道，目前已出现从DNA分子水平对物种加以界定，每个物种的DNA序列都存在有一定的不同，根据序列的SNP位点来设计特异性引物和探针组合可以对物种进行有效鉴别，采用该分子水平的界别可作为传统形态鉴别方法的有效补充。
发明内容
为了克服现有技术所存在的缺陷，本发明依据鹿科动物基因树，发现马鹿和梅花鹿遗传距离最小，并对其和其余鹿科动物进行DNA序列比对，寻找SNP位点，设计引物探针组合，以实现正伪品鹿角的鉴别。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
本发明的第一个方面是提供一种用于鉴别鹿角的引物探针组合物，其包括：引物F1、引物R1、探针P1；
其中，所述引物F1为如SEQ ID No.1所示序列的单链DNA分子，或为将SEQ ID No.1所示序列经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与该序列具有相同功能的DNA分子；
所述引物R1为如SEQ ID No.2所示序列的单链DNA分子，或为将SEQ ID No.2所示序列经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与该序列具有相同功能的DNA分子；
所述探针P1为如SEQ ID No.3所示序列的单链DNA分子，或为将SEQ ID No.3所示序列经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与该序列具有相同功能的DNA分子。
上述引物、探针的具体序列如下：
引物F1：5'-CGTCTGAATCGGATTCGAAAT-3'(SEQ ID No.1)；
引物R1：5'-AGTGAGAGCCATTGTTATGAA-3'(SEQ ID No.2)；
探针P1：5'-CACGAGCCACAGAGGCAGCA-3'(SEQ ID No.3)。
进一步地，所述探针P1由荧光基团和荧光淬灭基团修饰；其中，所述荧光基团选自FAM、VIC、HEX、JOE、ROX、Cy5，所述荧光淬灭基团选自BHQ1、BHQ2、TAMRA。更优选为，所述荧光基团为FAM，所述荧光淬灭基团为BHQ1。
进一步地，所述鉴别鹿角为鉴别正品鹿角与伪品鹿角或检测是否含有正品鹿角成分。
进一步地，所述正品鹿角为马鹿和梅花鹿，所述伪品鹿角包括其余18种鹿科动物以及猪、牛、羊，所述其余18种鹿科动物包括鹿亚科鹿属：白唇鹿，水鹿，坡鹿，泽鹿；麋鹿属：麋鹿；黇鹿属：黇鹿；花鹿属：斑鹿，豚鹿。麂亚科毛冠鹿属：毛冠鹿；麂属：小麂，赤麂，黑麂。空齿鹿亚科驯鹿属：驯鹿；驼鹿属：驼鹿；狍属：狍子；空齿鹿属：白尾鹿，黑尾鹿。獐亚科獐属：獐。
本发明的第二个方面是提供一种含有上述用于鉴别鹿角的引物探针组合物的试剂盒。
进一步地，所述试剂盒中，引物F1、引物R1、探针P1的浓度均为10μM。
进一步地，所述试剂盒还包括：反应预混液、DNA模板、双蒸水。
进一步地，所述试剂盒采用的扩增反应体系为：反应预混液10μL，引物F1、引物R1、探针P1各0.5μL，DNA模板2μL，双蒸水6.5μL；其中，各引物、探针在扩增反应体系中的浓度均为250nM，DNA模板在扩增反应体系中的浓度为5ng/μL。
进一步，所述DNA模板以DNA溶液的形式加至反应体系中。
进一步地，所述反应预混液为包括PCR缓冲液、dNTPs和Mg2+的2×TaqMan MasterMix。
进一步地，所述扩增反应体系的配制如下表所示：
Figure BDA0002137279640000031
进一步地，所述试剂盒还包括正品鹿角阳性对照品、阴性对照品以及空白对照品。
本发明的第三个方面是提供一种包含上述引物探针组合物或试剂盒的系统。
进一步地，所述系统还包括利用定量PCR鉴别正品鹿角和伪品鹿角所需要的仪器，包括但不限于PCR扩增仪等。
本发明的第五个方面是提供一种上述引物探针组合物、试剂盒或系统在鉴别鹿角中的应用。
进一步地，所述应用包括用于鉴别正品鹿角和伪品鹿角，或者用于检测待测鹿角样本中是否含有正品鹿角成分。
进一步地，所述鉴别正品鹿角和伪品鹿角的方法包括步骤：以待测鹿角的基因DNA为模版，采用上述引物探针组合物进行荧光定量PCR，若结果显示为阳性，则待测鹿角为正品；若结果显示为阴性，则待测鹿角为伪品。
进一步地，所述检测待测鹿角样本中是否含有正品鹿角成分的方法包括步骤：以待测鹿角的基因DNA为模版，采用上述引物探针组合物进行荧光定量PCR，若结果显示为阳性，则待测鹿角中包含正品鹿角成分；若结果显示为阴性，则待测鹿角不包含正品鹿角成分。
进一步地，在上述两个方法中，所述阳性结果具体可为Ct值<25，所述阴性结果具体可为Ct值≥25(或undet)。
本发明的第六个方面是提供一种上述试剂盒的制备方法，其包括各条引物、探针单独包装的步骤。
与现有技术相比，本发明采用上述技术方案具有以下有益效果：
本发明提供一种鉴别正品鹿角(马鹿，梅花鹿)和伪品鹿角的方法，其从分子水平对真伪鹿角进行区分，具有简单，快速，高特异性和高灵敏度的特点。
附图说明
附图仅用于对本发明的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与本发明的实施例一起用于解释本发明，但并不构成对本发明的限制。
图1为本发明一实施例中样本中含有马鹿成分的扩增图。
图2为本发明一实施例中样本中含有梅花鹿成分的扩增图。
图3为本发明一实施例中马鹿标准质粒ORF1以10倍依次稀释的检测结果图。
图4为本发明一实施例中马鹿标准质粒的标准曲线图。
图5为本发明一实施例中梅花鹿标准质粒ORF2以10倍依次稀释的检测结果图。
图6为本发明一实施例中梅花鹿标准质粒的标准曲线图。
图7为本发明一实施例中检测引物探针特异性的结果示意图。
具体实施方式
本发明涉及一种用于鉴别鹿角的引物探针组合物，其包括：引物F1、引物R1、探针P1；其中，所述引物F1为如SEQ ID No.1所示序列的单链DNA分子，或为将SEQ ID No.1所示序列经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与该序列具有相同功能的DNA分子；所述引物R1为如SEQ ID No.2所示序列的单链DNA分子，或为将SEQ ID No.2所示序列经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与该序列具有相同功能的DNA分子；所述探针P1为如SEQ ID No.3所示序列的单链DNA分子，或为将SEQ ID No.3所示序列经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与该序列具有相同功能的DNA分子。本发明还涉及含有上述引物探针组合物的试剂盒和系统及其应用。
下面结合附图和实施例，对本发明的具体实施方式作进一步描述。以下实施例仅用于更加清楚地说明本发明的技术方案，而不能以此来限制本发明的保护范围。
下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；下述实施例中所用的原料、试剂等，如无特殊说明，均可从公开商业途径获得。下述实施例中的定量试验，均设置三次重复实验，结果取平均值。
下述实施例涉及的试剂及仪器具体为：
所用试剂：柱式骨骼DNA提取试剂盒购自北京百奥莱博生物科技有限公司。引物与探针组合、标准质粒由生工生物工程(上海)有限公司负责合成，2×TaqMan Master为罗氏公司LightCycler 480 Probes Master。
所用仪器：LightCycler 480 II荧光定量PCR仪为罗氏公司产品。
实施例1
本实施例为用于鉴别鹿角的引物探针组合物的设计，其具体步骤如下：
对马鹿、梅花鹿和其余18种鹿科动物以及猪牛羊的线粒体完整基因进行序列分析、比对，获得了一套鉴别马鹿、梅花鹿与其余18种鹿科动物以及猪牛羊的引物探针组合，如下所示：
引物F1：5'-CGTCTGAATCGGATTCGAAAT-3'(SEQ ID No.1)；
引物R1：5'-AGTGAGAGCCATTGTTATGAA-3'(SEQ ID No.2)；
探针P1：5'-CACGAGCCACAGAGGCAGCA-3'(SEQ ID No.3)；
探针P1的5'端采用FAM荧光基团修饰，3'端采用BHQ1淬灭基团修饰。
探针P1可同时检测到马鹿和梅花鹿成分。
实施例2
本实施例为采用实施例1所述的引物探针组合物鉴别正品、伪品鹿角的方法或检测是否含有正品鹿角成分的方法，其包括：
(1)鹿角DNA的提取
参照北京百奥莱博柱式骨骼DNA提取试剂盒说明书，从猪牛羊骨粉以及麋鹿、驯鹿、马鹿和梅花鹿鹿角粉中提取鹿角DNA。
(2)定性鉴别模型的建立
以步骤(1)得到的总DNA为模板，进行荧光定量PCR检测。
荧光定量PCR反应体系：引物F1、引物R1、探针P1各0.5μL，2×TaqMan Master 10μL，DNA模板2μL，ddH2O 6.5μL。
各条引物探针在体系中的浓度为250nM，DNA模板以DNA溶液的形式加至反应体系中。
荧光定量PCR反应程序为：94℃预变性5分钟，94℃变性45秒，60℃退火45秒，72℃延伸45秒，共30个循环。
设置阳性对照组、阴性对照组，与待测样本同法提取DNA作为模板，空白对照以双蒸水作为模板进行实验。
(3)对检测结果进行分析
如果Ct值<25，结果为阳性；Ct值≥25(或undet)，结果为阴性。
阴性对照应无CT值。
更具体地：若待测样品具有扩增曲线，并且Ct值<25，说明待测样品为马鹿角(图1)、梅花鹿角(图2)或含有马鹿角成分(图1)、梅花鹿角成分(图2)；若待测样品不具有扩增曲线，说明待测样品为伪品鹿角。
阳性对照应具有扩增曲线，且Ct值<25，阴性对照及空白对照应无扩增曲线。
实施例3
本实施例为正品鹿角成分的标准曲线的制作过程，该标准曲线用于检测结果的定量，其包括：
1)标准质粒的制备
根据物种间序列比对情况，分别选取由F1、R1引物扩增的马鹿及梅花鹿DNA片段(226bp)，交由生物公司插入pUC57载体制成标准质粒ORF1和ORF2。
2)标准曲线的绘制
制作标准质粒ORF1(2.98×1012copies/μL)，ORF2(3.70×1012copies/μL)，分别作为马鹿和梅花鹿的标准品，计算拷贝数，并以10倍的梯度稀释标准质粒，通过QPCR来绘制标准曲线，并验证该引物探针组合的敏感性。
标准曲线荧光定量PCR反应程序为：94℃预变性5分钟，94℃变性45秒，60℃退火45秒，72℃延伸45秒，共30个循环。
图3为马鹿标准质粒ORF1以10倍依次稀释的检测结果：其中每个梯度做三次重复。
图4为马鹿标准质粒ORF1的标准曲线。
图5为梅花鹿标准质粒ORF2以10倍依次稀释的检测结果：其中每个梯度做三次重复。
图6为梅花鹿标准质粒ORF2的标准曲线。
3)敏感性实验
根据所得标准曲线的方程以及仪器所能检测到的最大Ct值25，计算得出：最低可检测到8.494×107copies/μL的马鹿DNA和7.680×107copies/μL的梅花鹿DNA。
实施例4
本实施例为实际样本的检测，待测样本为一份猪骨粉样本、一份牛骨粉样本、一份羊骨粉样本、一份麋鹿角粉样本、一份驯鹿角粉样本、一份马鹿角粉样本和一份梅花鹿角粉样本。
采用实验例2中的方法进行检测，结果如图7所示。
结果判定：样品具有扩增曲线并且Ct值在25以内为正品鹿角(马鹿和梅花鹿)，样品无扩增曲线均为伪品。
定量结果：梅花鹿、马鹿样品Ct值分别为17.88、21.47，经标准曲线方程换算，其起始DNA拷贝数分别为2.42×1011copies/μL和1.82×1010copies/μL。
上述结果表明，利用本发明的方法鉴别正伪品鹿角，结果准确可靠，特异性好，并且可以精确对样本起始拷贝数进行定量。
以上对本发明的具体实施例进行了详细描述，但其只作为范例，本发明并不限制于以上描述的具体实施例。对于本领域技术人员而言，任何对本发明进行的等同修改和替代也都在本发明的范畴之中。因此，在不脱离本发明的精神和范围下所作的均等变换和修改，都应涵盖在本发明的范围内。
序列表
<110> 上海市食品药品检验所
<120> 一种用于鉴别鹿角的引物探针组合物及其应用
<130> IPI192584
<160> 3
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 21
<212> DNA
<213> 引物F1(Artificial Sequence)
<400> 1
cgtctgaatc ggattcgaaa t 21
<210> 2
<211> 21
<212> DNA
<213> 引物R1(Artificial Sequence)
<400> 2
agtgagagcc attgttatga a 21
<210> 3
<211> 20
<212> DNA
<213> 探针P1(Artificial Sequence)
<400> 3
cacgagccac agaggcagca 20

Claims (4)

1.一种用于鉴别鹿角的引物探针组合物的试剂盒，其特征在于，所述引物探针组合物包括：引物F1、引物R1、探针P1；
其中，所述引物F1为如SEQ ID No. 1所示序列的单链DNA分子；
所述引物R1为如SEQ ID No. 2所示序列的单链DNA分子；
所述探针P1为如SEQ ID No. 3所示序列的单链DNA分子；
所述探针P1由荧光基团和荧光淬灭基团修饰；其中，所述荧光基团选自FAM、VIC、HEX、JOE、ROX、Cy5，所述荧光淬灭基团选自BHQ1、BHQ2、TAMRA；
引物F1、引物R1、探针P1的浓度均为10μM；
所述试剂盒还包括：反应预混液、DNA模板、双蒸水；
所述试剂盒采用的扩增反应体系为：反应预混液10μL，引物F1、引物R1、探针P1各0.5μL，DNA模板2μL，双蒸水6.5μL；其中，各引物、探针在扩增反应体系中的浓度均为250nM，DNA模板在扩增反应体系中的浓度为5 ng/μL；
所述试剂盒还包括正品鹿角阳性对照品、阴性对照品以及空白对照品；
所述鉴别鹿角为鉴别正品鹿角和伪品鹿角，或者检测待测鹿角样本中是否含有正品鹿角成分；
所述正品鹿角为马鹿和梅花鹿，所述伪品鹿角包括18种鹿科动物、猪、牛以及羊，所述18种鹿科动物包括白唇鹿、水鹿、坡鹿、泽鹿、麋鹿、黇鹿、斑鹿、豚鹿、毛冠鹿、小麂、赤麂、黑麂、驯鹿、驼鹿、狍子、白尾鹿、黑尾鹿以及獐。
2.一种含有权利要求1所述的试剂盒的系统。
3.根据权利要求2所述的系统，其特征在于，所述系统还包括利用定量PCR鉴别鹿角所需要的仪器。
4.一种如权利要求1所述的试剂盒、或权利要求2所述的系统在鉴别鹿角中的应用。
CN201910657475.0A 2019-07-19 2019-07-19 一种用于鉴别鹿角的引物探针组合物及其应用 Active CN110331215B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910657475.0A CN110331215B (zh) 2019-07-19 2019-07-19 一种用于鉴别鹿角的引物探针组合物及其应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910657475.0A CN110331215B (zh) 2019-07-19 2019-07-19 一种用于鉴别鹿角的引物探针组合物及其应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN110331215A CN110331215A (zh) 2019-10-15
CN110331215B true CN110331215B (zh) 2022-09-27

Family

ID=68146828

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201910657475.0A Active CN110331215B (zh) 2019-07-19 2019-07-19 一种用于鉴别鹿角的引物探针组合物及其应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN110331215B (zh)

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101974522A (zh) * 2010-11-23 2011-02-16 中国检验检疫科学研究院 用于马鹿茸真伪鉴别的引物及探针、试剂盒和方法
CN101974524A (zh) * 2010-11-23 2011-02-16 中国检验检疫科学研究院 用于梅花鹿茸真伪鉴别的引物及探针、试剂盒和方法
CN106868188A (zh) * 2017-04-11 2017-06-20 山东省农业科学院生物技术研究中心 一种鹿角胶中鹿、牛源性多重荧光pcr检测引物、探针、试剂盒及检测方法与应用

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101974522A (zh) * 2010-11-23 2011-02-16 中国检验检疫科学研究院 用于马鹿茸真伪鉴别的引物及探针、试剂盒和方法
CN101974524A (zh) * 2010-11-23 2011-02-16 中国检验检疫科学研究院 用于梅花鹿茸真伪鉴别的引物及探针、试剂盒和方法
CN106868188A (zh) * 2017-04-11 2017-06-20 山东省农业科学院生物技术研究中心 一种鹿角胶中鹿、牛源性多重荧光pcr检测引物、探针、试剂盒及检测方法与应用

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
中药材鹿茸的分子分类学鉴定研究;唐双焱等;《中国药学杂志》;20020430;第37卷(第4期);全文 *
鹿源类中药材DNA序列分析及马鹿和梅花鹿的PCR鉴定;白根本等;《中草药》;20061031;第37卷(第10期);全文 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN110331215A (zh) 2019-10-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN111235232B (zh) 基于CRISPR-Cas12a系统的可视化快速核酸检测方法及应用
CN111926116A (zh) 快速定量检测鸭腺病毒4型的引物和探针及其检测方法与应用
CN113774168A (zh) 2019新型冠状病毒及其德尔塔和拉姆达变异株分型核酸检测试剂盒及检测方法
CN113774169A (zh) 2019新型冠状病毒德尔塔变异株核酸检测试剂、试剂盒及检测方法
CN111733291A (zh) 数字pcr检测新型冠状病毒核酸的方法及试剂盒
CN110055340A (zh) 一种食品中牛源成分快速检测方法及试剂盒
CN111154903A (zh) 一种用于布鲁氏菌rpa扩增的引物组、可视化检测试剂盒及应用
CN112831597A (zh) 用于非洲猪瘟病毒基因鉴别检验的实时荧光pcr扩增引物对、探针引物、及制备的试剂盒
CN113817872A (zh) 2019新型冠状病毒拉姆达变异株核酸检测试剂、试剂盒及检测方法
CN110331215B (zh) 一种用于鉴别鹿角的引物探针组合物及其应用
CN105925691B (zh) 一种快速检测人13号、18号、21号、x和y染色体数目的试剂盒
CN115786541B (zh) 鉴别布鲁氏菌疫苗株a19的snp分子标记、引物探针、试剂盒、方法和应用
CN110317881B (zh) 一种用于鉴别鹿角的荧光pcr检测方法
CN105779642B (zh) 一种用于鉴别宽额鲈成分的实时荧光pcr引物和探针、试剂盒及检测方法
CN109136390A (zh) 一种同时鉴别鸡、鸭、羊种属来源的pcr-str方法
CN109735629B (zh) 一种基于锁式探针技术的食品中猪源性成分检测试剂盒
CN109852706B (zh) 一种快速鉴定食品中鸭源成分的试剂盒及其应用
CN115125313A (zh) 一种致病性小肠结肠炎耶尔森氏菌检测用引物对和CRISPR/Cas12a检测试剂盒
CN109825613B (zh) 一种食品中鸭源成分快速检测方法及试剂盒
KR20170027405A (ko) 실시간 중합효소연쇄반응을 이용하는 참홍어의 동정 방법
CN109825609A (zh) 一种快速鉴定食品中牛源成分的试剂盒及其应用
CN110551799A (zh) 检测食品中海狸鼠源性和狐狸源性成分的试剂盒及其应用
CN114182027B (zh) 一种基于熔解曲线技术的动物源性成分通用筛检试剂盒及检测方法
CN109825608B (zh) 一种快速鉴定食品中山羊源成分的试剂盒及其应用
CN107641660A (zh) 一种用于检测油菜茎基溃疡病菌的lamp‑hnb引物组、试剂盒及方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
CB02 Change of applicant information

Address after: 200120 No. 1500 Zhangheng Road, Pudong New Area, Shanghai

Applicant after: Shanghai Institute for food and drug control

Address before: 200120 No. 1500 Zhangheng Road, Pudong New Area, Shanghai

Applicant before: SHANGHAI INSTITUTE FOR FOOD AND DRUG CONTROL

CB02 Change of applicant information
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant