CN110099694A - 低体温改善剂 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种对低体温有用的低体温预防或改善剂。该低体温预防或改善剂以GIP功能抑制剂为有效成分。

Description

低体温改善剂
技术领域
本发明涉及一种低体温预防或改善剂。
背景技术
人的平均体温约为36.5℃，这是体内的酶最大活性化而发挥功能的温度。
然而，近年来，正常体温下降0.5～1.5℃的低体温的人在增加。考虑其原因在于矿物质、维生素、蛋白质的不足、运动不足、过度的压力所导致的血液循环不良和自律神经的紊乱等。另外，人的正常体温在婴儿时最高，随着年龄增加而缓慢下降。在青年时期体温的下降停止，但成为高龄者时，可以看到体温再次下降、正常体温比年轻时大约低0.2℃左右的倾向。作为其原因之一，考虑与承担产生热的棕色脂肪组织的功能下降有关。
这样的低体温导致免疫力下降、基础代谢下降、体内酶活性下降，容易引起感冒等传染病，并且容易出现花粉症等过敏症状。还引起血液循环不良、淋巴流动或新陈代谢能力的下降、自律神经的平衡破坏。因此，低体温时，会频繁出现伴随内脏功能下降的各症状、腹泻或脱水症状、手脚冰冷、肩酸、头痛、腰痛、腹痛、生理疼痛、失眠、睡眠质量下降、疲劳感、活动量降低这样的症状。
另一方面，GIP(肠抑胃肽(gastric inhibitory polypeptide)或葡萄糖依赖性促胰岛素多肽(glucose-dependent insulinotropic polypeptide))是胰高血糖素和促胰液素族所属的胃肠激素之一。GIP与GLP-1(胰高血糖素样肽1)一起被称为肠降血糖素，进食脂质、糖质时，由存在于小肠的K细胞分泌。
已知GIP促进从胰岛β细胞分泌胰岛素，增强胰岛素存在下的葡萄糖向脂肪细胞的进入。因此，也可以认为GIP的作用已成为肥胖的一个主要原因，实际上，已有若抑制GIP的功能则肥胖被抑制的报告(非专利文献1)。
另外，已报告了GIP是胰岛素抵抗性的一个原因(非专利文献1)。发生胰岛素抵抗性时，通过胰岛素的糖的吸收作用下降，其结果，引起高胰岛素血症。也可以说，高胰岛素血症是与发生以肥胖为代表的各种生活习惯病有关的根本性原因，从降低生活习惯病的风险的方面考虑，胰岛素抵抗性的预防和改善也是重要的。
然而，尚未有GIP与低体温存在关系这样的报告，还完全不知道通过减少血中GIP浓度，能够改善低体温。
(非专利文献1)Miyawaki K等，Nat Med.8(7):738-42,2002
发明内容
本发明涉及以下的1)～5)。
1)一种以GIP功能抑制剂为有效成分的低体温预防或改善剂。
2)GIP功能抑制剂在用于制造低体温预防或改善剂中的用途。
3)一种用于低体温的预防或改善的GIP功能抑制剂。
4)GIP功能抑制剂在低体温预防或改善中的用途。
5)一种低体温的预防或改善方法，其中，包括向对象将GIP功能抑制剂给药。
附图说明
图1是利用使用抗活性型GIP抗体的夹心ELISA得到的标准曲线。
图2是表示给药GIP后的深部体温的急性变化的图表。
图3是表示继续给药GIP或GIP结合型抗GIP抗体所产生的深部体温的慢性变化的图表。
图4是表示血中GIP量的加龄性变化的图表。
图5是表示伴随年龄增加的深部体温的经时变化的图表。
图6是表示对老龄小鼠继续给药抗GIP抗体所产生的深部体温的慢性变化的图表。
图7是表示继续摄入GIP受体拮抗剂和GIP分泌抑制剂后的深部体温的图表。
具体实施方式
本发明涉及提供一种对低体温的改善有用的低体温改善剂。
本发明者们对GIP与体温的关系进行了研究，结果发现给药GIP时体温显著降低，并且通过抑制GIP功能，能够改善低体温。
本发明的低体温预防或改善剂对低体温状态、例如伴随年龄增加的低体温发挥体温下降抑制效果。因此，对因低体温而产生的免疫力下降、基础代谢下降、血液循环不良和淋巴流动或新陈代谢能力的下降、自律神经的平衡破坏等的预防或改善是有用的。
在本发明中，GIP(肠抑胃肽(gastric inhibitory polypeptide)或葡萄糖依赖性促胰岛素多肽(glucose-dependent insulinotropic polypeptide))为由序列号1所示的42个氨基酸构成的多肽。GIP(1-42)具有生理活性(活性型GIP)，但被存在于生物体内的二肽基肽酶-4(dipeptidyl peptidase-4(DPP-4))切断N末端的2个氨基酸后，成为非活性型的GIP(3-42)。
在本发明中，“GIP功能抑制剂”是指阻碍或抑制GIP所具有的作为胃肠激素的功能的物质，即在GIP基因或GIP受体基因水平上或者在GIP自身或GIP受体水平上抑制功能的物质，具体可以列举抗GIP抗体、GIP受体拮抗剂、GIP分泌或上升抑制剂。
在本发明中，“抗GIP抗体”可以为至少抑制活性型GIP的功能的抗体，可以为多克隆抗体、单克隆抗体中的任意种，优选为国际公开第2016/104439号、日本特开2013-138638号公报所记载的与非活性型GIP实质上不结合的抗体(称为“抗活性型GIP抗体”)。另外，与活性型GIP的结合常数(Ka)优选为107M-1以上，更优选为108M-1以上，更优选为109M-1以上。
作为抗活性型GIP抗体，可以列举：将被检验抗体对活性型GIP的结合量设为100％时，被检验抗体对非活性型GIP的结合量最多为10％以下，优选为5％以下，更优选为1％以下，更进一步优选为0.1％。通过利用蛋白质印迹、免疫沉淀、免疫组织化学染色和ELISA等方法，测定被检验抗体与非活性型GIP的结合，能够判断与非活性型GIP的结合量。
作为抗活性型GIP抗体，例如为识别活性型GIP(序列号5)的N末端至第8位之后的氨基酸的抗体，优选可以列举至少识别选自第8～10位(SDY)中的1个以上的氨基酸的抗体。
作为该抗活性型GIP抗体，更优选H链中包括由下述(1)所示的氨基酸序列或其保守序列改变构成的区域。
EMNPSDGRTHFNE(1)
(1)中的字母文字是指氨基酸的一种文字标记，序列按照从N末端向C末端方向的顺序记载。其中，F表示苯丙氨酸，T表示苏氨酸，D表示天冬氨酸，E表示谷氨酸，M表示甲硫氨酸，N表示天冬酰胺，P表示脯氨酸，S表示丝氨酸，G表示甘氨酸，R表示精氨酸，H表示组氨酸。
在本说明书中，“保守序列改变”是参与抗原决定的互补性决定区域(CDR)以外的氨基酸改变，是指对由改变前的氨基酸序列构成的抗体的反应性不产生显著的影响或不使其发生变化的氨基酸改变。这样的保守序列改变包括1～数个、优选1～3个、更优选1个氨基酸的置换、添加和缺失。作为进行了该保守序列改变的氨基酸序列，可以列举具有与改变前的氨基酸序列90％以上、优选95％以上、更优选99％以上的序列同一性的氨基酸序列。利用定点诱变和PCR介导诱变那样的该技术领域内公知的标准技术，能够向本发明的抗体导入该改变。作为保守氨基酸置换，可以列举氨基酸残基被置换为具有类似的侧链的氨基酸残基(氨基酸残基的族)。这样的氨基酸残基的族在该技术领域内已被定义，包括具有碱性侧链(例如赖氨酸、精氨酸、组氨酸)、酸性侧链(例如天冬氨酸、谷氨酸)、非带电极性侧链(例如甘氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸、半胱氨酸、色氨酸)、非极性侧链(例如丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸)、β-分支侧链(例如苏氨酸、缬氨酸、异亮氨酸)和芳香族侧链(例如酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、组氨酸)的氨基酸。
另外，氨基酸序列之间的同一性是指在对2个氨基酸序列进行比对时，双方的序列中存在相同的氨基酸残基的位置数相对于全部氨基酸残基数的比率(％)。具体而言，例如利用李普曼-皮尔森法(Lipman-Pearson法；Science,227,1435,(1985))进行计算，通过使用遗传信息处理软件Genetyx-Win(Ver.5.1.1；软件开发)的同源性分析(Searchhomology)程序，并将Unit size to compare(ktup)设为2进行分析而算出。
上述(1)所示的氨基酸序列编码由表示H链可变区域的序列号2所示的氨基酸序列的第50～62位的13个氨基酸残基构成的区域。
因此，作为上述抗活性型GIP抗体，更优选包括由序列号2所示的氨基酸序列或其保守序列改变构成的区域作为H链可变区域。另外，进一步优选包括由序列号2所示的氨基酸序列或其保守序列改变构成的区域作为H链可变区域并且包括由序列号4所示的氨基酸序列或其保守序列改变构成的区域作为L链可变区域。
作为包括由序列号2所示的氨基酸序列构成的区域作为H链可变区域并且包括由序列号4所示的氨基酸序列构成的区域作为L链可变区域的抗活性型GIP抗体，可以列举下述制造例1所示的由杂交瘤9B9H5-B9株生产的单克隆抗体。
本发明的抗GIP抗体只要具有上述反应性，就可以为该抗体的片段，例如F(ab')2、F(ab')、单链Fv(scFv)、VH和VL中的被半胱氨酸残基置换后的氨基酸残基经由二硫键结合而成的二硫键合Fv(dsFv)或它们的聚合物、或者scFv二聚体化而成的二聚体化V区域(双链抗体(Diabody))。进一步而言，只要具有上述反应性，就可以为包含抗活性型GIP抗体的一部分的肽、即具有构成抗体的氨基酸序列的一部分的肽，并且该抗体的片段也包含具有上述反应性的肽。
另外，本发明的抗GIP抗体的免疫球蛋白类没有特别限定，可以为IgG、IgM、IgA、IgE、IgD、IgY中的任意的免疫球蛋白类，优选为IgG。另外，本发明的抗体还包含任意的同型抗体。
另外，本发明的抗GIP抗体(包括抗活性型GIP抗体)可以为非人动物的抗体、人型嵌合体抗体、人源化抗体和人抗体中的任意种。作为非人动物的抗体，例如可以列举小鼠、大鼠、仓鼠、豚鼠等的抗体，优选为小鼠的抗体。
其中，“人型嵌合体抗体”是利用基因工程学的方法将来自非人动物且与GIP特异结合的抗体的恒定区域改变成具有与人的抗体相同的恒定区域的抗体，优选为人-小鼠-嵌合体抗体。另外，“人源化抗体”是利用基因工程学的方法将来自非人动物且与GIP特异结合的抗体的H链和L链的互补性决定区域(CDR)以外的一次结构改变成与人的抗体相对应的一次结构的抗体。另外，“人抗体”是指完全为来自人的抗体基因的表达产物的人抗体。
抗GIP抗体除了市售的多克隆抗体(Bioss公司)以外，还可以使用利用公知的方法制作的单克隆抗体。作为来自哺乳动物的单克隆抗体，包含由杂交瘤产生的单克隆抗体，以及对抗体基因或抗体片段基因进行设计并利用公知的基因工程学方法生产的单克隆抗体。
例如，关于上述的抗活性型GIP抗体，可以列举通过如下方式生产具有抗原结合能力的单链重组抗体蛋白质(scFv)：将编码H链可变区域的DNA(例如由序列号1所示的碱基序列构成的DNA)和编码L链可变区域的DNA(例如由序列号3所示的碱基序列构成的DNA)分别插入适当的载体的启动子下游，制造重组载体，由将其导入宿主细胞而得到的转化体制造H链和L链，利用具有可能性的肽使它们连结；或者利用公知的编码连接肽的DNA将编码H链可变区域的DNA(例如由序列号1所示的碱基序列构成的DNA)和编码L链可变区域的DNA(例如由序列号3所示的碱基序列构成的DNA)连结并插入适当的载体的启动子下游，制造重组载体，使其在宿主细胞内表达等。(参照MacCfferty,J.et al.,Nature,348,552-554,1990；Tim Clackson et al,Nature,352,642-628,1991等)。另外，还可以生产使编码可变区域的DNA和编码恒定区域的DNA结合并表达而得到的抗体。此时，恒定区域可以与来自可变区域的抗体相同，或者也可以来自不同的抗体。
如上所述，用于调制功能上同等的多肽的氨基酸变异的导入例如可以利用定点诱变法等进行。
基本上使用公知技术，按照以下的操作，能够制作抗活性型GIP抗体产生杂交瘤。
例如，可以如下地进行制作：根据需要，将活性型GIP或具有其N末端的氨基酸序列的肽(由序列号5的第1～15位的氨基酸序列构成的肽)与适当的载体蛋白质、例如钥孔虫戚血蓝素(KLH)或牛血清白蛋白等结合，由此能够进一步提高免疫原性而对非人哺乳动物免疫。另外，作为致敏抗原(免疫源)使用的活性型GIP或上述肽还可以利用基因工程学的方法或化学合成进行制作。
作为被致敏抗原免疫的哺乳动物，没有特别限定，优选考虑与作为细胞融合所使用的亲代细胞的哺乳动物的骨髓瘤细胞的亲合性而进行选择，通常使用啮齿类动物、例如小鼠、大鼠、仓鼠等。
使致敏抗原对动物免疫时，可以按照公知的方法进行。例如，可以通过向哺乳动物的腹腔内或皮下注射致敏抗原而进行。具体而言，利用PBS(磷酸盐缓冲液(Phosphate-Buffered Saline))或生理盐水等将致敏抗原稀释至适当量，使其悬浮，根据需要适量混合通常的佐剂、例如弗罗因德完全佐剂，乳化后，向动物的皮下、皮内、腹腔等给药，暂时刺激后，根据需要重复进行同样的操作。抗原的给药量根据给药途径、动物种类适当决定，通常的给药量优选每1次10μg～1mg左右。对如此进行免疫而在血清中上升了所希望的抗体水平进行确认后，从抗体水平上升后的哺乳动物中取出免疫细胞，进行细胞融合。作为进行细胞融合时的优选的免疫细胞，特别可以列举脾细胞。
作为与上述免疫细胞融合的其它的亲代细胞的哺乳动物的骨髓瘤细胞已经适当使用了公知的各种细胞株、例如P3X63、NS-1、MPC-11、SP2/0等。
上述免疫细胞与骨髓瘤细胞的细胞融合可以按照公知的方法、例如Kohler等的方法(Kohler et al.,Nature,vol,256,p495-497(1975))等进行。即，在聚乙二醇(平均分子量1000～6000的PEG、30～60％浓度)、仙台病毒(HVJ)等细胞融合促进剂的存在下，根据需要添加二甲亚砜等辅助剂，在RPMI1640培养液、MEM培养液等营养培养液中，将免疫细胞和骨髓瘤细胞混合，由此进行融合细胞(杂交瘤)的形成。
将利用融合形成的杂交瘤在含有次黄嘌呤、胸苷和氨基蝶呤的培养基(HAT培养基)等选择性培养基中培养1日～7日，与未融合细胞分离。利用其产生的抗体(与活性型GIP结合并且与非活性型GIP实质上不结合的抗体)进一步选择所得到的杂交瘤。
利用公知的有限稀释法将所选择的杂交瘤单克隆化，作为单克隆性抗体产生杂交瘤而建立。
对杂交瘤所产生的抗体的活性进行检测的方法可以使用公知的方法。例如可以列举ELISA法、凝聚反应法、放射免疫测定法。
由所得到的杂交瘤取得单克隆抗体时，可以采用：按照通常的方法培养该杂交瘤，作为其培养上清液而得到的方法；或者向与杂交瘤具有亲合性的哺乳动物给药杂交瘤，使其增殖，作为其腹水而得到的方法等。
抗体的精制可以利用盐析法、凝胶过滤法、离子交换色谱法或亲和色谱法等公知的精制方法进行。
在本发明中，作为“GIP受体拮抗剂”，例如可以列举国际公开第2003/097031号所记载的亚甲基酰肼化合物，具体可以列举4-羟基苯甲酸(2-溴亚苄基)酰肼、3-氰基-4-羟基苯甲酸[1-(2,3,5,6-四甲基苄基)吲哚-4-基]亚甲基酰肼、3-氯-4-羟基苯甲酸(4-甲氧基萘-1-基)亚甲基酰肼、3-氯-4-羟基苯甲酸[1-(5-氯噻吩-2-基甲基)-1H-吲哚-5-基]亚甲基酰肼等。
在本发明中，作为“GIP分泌或上升抑制剂”，例如可以列举BMPP(3-溴-5-甲基-2-苯基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-醇)(国际公开第2001/87341号)、藻酸(日本特开2013-166741号公报)、磷脂酰乙醇胺(日本特开2010-222284号公报)、聚谷氨酸(日本特开2012-144486号公报)、皂树(日本特开2012-171914号公报)、溶血磷脂酰肌醇(日本特开2012-171915号公报)、纤维素纳米纤维(日本特开2009-126837号公报)、β-甲壳质纳米纤维(日本特开2010-241713号公报)、二酰基甘油(日本特开2006-342084号公报)、羟丙基化淀粉(日本特开2006-342085号公报)、单酰基甘油(日本特开2007-290989号公报)、碳原子数20以上的超长链脂肪酸(例如二十烷酸、二十二烷酸、二十四烷酸、二十六烷酸、二十八烷酸、三十烷酸、三十二烷酸、鳕油酸、二高-γ-亚麻酸、花生四烯酸、二十碳五烯酸、芥酸、二十二碳五烯酸、二十二碳六烯酸、神经酸、二十六碳烯酸、二十八碳烯酸(octacosenoic acid)等；日本特开2011-225458号公报)、构成脂肪酸的1质量％以上为二十二碳六烯酸且1质量％以上为二十碳五烯酸的三酰基甘油(日本特开2013-063937号公报)、长链不饱和脂肪酸乙醇酰胺(例如油基乙醇酰胺(oleylethanolamide)、亚油基乙醇酰胺(linoleylethanolamide)、亚麻基乙醇酰胺(linolenylethanolamide)、homo-γ-亚麻基乙醇酰胺、花生四烯基乙醇酰胺(arachidonylethanolamide)、7,10,13,16-二十二碳四烯基乙醇酰胺(7,10,13,16-docosatetraenylethanolamide)；日本特开2010-180203号公报)、米糠提取物(日本特表2012-515139号公报)、儿茶素类(日本特开2010-260856号公报)、构成脂肪酸的10质量％以上为α-亚麻酸的三酰基甘油(日本特开2013-075887号公报)、C14～C18饱和脂肪酸与甘油骨架的2位结合而成的酰基甘油(例如十二烷酸(12：0)、十四烷酸(14：0)、十六烷酸(16：0)、亚油酸(18：2)、油酸(18：1)、十八烷酸(18：0)或花生四烯酸(20：4)与2位结合而成的2-酰基单甘油；日本特开2016-047805号公报)等。
如下述实施例所示，抗GIP抗体具有抑制因给药GIP而产生的体温下降、改善老龄小鼠的慢性的低体温的作用。
因此，抗GIP抗体那样的GIP功能抑制剂可以成为低体温预防或改善剂，还可以用于制造低体温预防或改善剂。
另外，GIP功能抑制剂还可以用于低体温的预防或改善。其中，该用途可以为在人或非人动物、或者来自这些的被检测体中的用途，也可以为治疗用途，还可以为非治疗用途。另外，“非治疗”是不包括医疗行为的概念，即不包括对人进行手术、治疗或诊断的方法的概念，更具体而言，是不包括医师或接受了医师的指示的人对人实施手术、治疗或诊断的方法的概念。
在本发明中，“低体温”是指深部体温比正常体温低0.5℃以上，“低体温的预防或改善”是指抑制深部体温下降而成为低体温，或者是指提高深部体温而改善低体温。其中，深部体温是指身体的深部(例如直肠、食道、心脏、脑等)的温度，通常为直肠温度。关于深部体温，为人时，可以根据腋下温度、口腔(舌下)温度、皮肤温度等算出。
低体温的原因可以列举矿物质和维生素、蛋白质的不足、运动不足、过度的压力所产生的血液循环不良和自律神经的紊乱、年龄增加等，没有特别限定，在本发明中，适于伴随年龄增加而发生的低体温的预防或改善。
本发明的低体温预防或改善剂可以成为发挥体温下降的抑制或低体温的改善的效果的人或者动物用的药品，还可以成为与药品配合使用的原材料或制剂。
将本发明的低体温预防或改善剂作为药品使用时，该药品能够以任意的给药形态给药。作为给药形态，例如可以列举片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、糖浆剂等的经口给药或注射剂；栓剂、吸入药、经皮吸收剂、外用剂等的非经口给药，优选的形态为非经口给药。
关于这样的各种剂型的医药制剂，可以将本发明的GIP功能抑制剂单独调制、或者适当组合其它的药学上允许的赋形剂、结合剂、增量剂、崩解剂、表面活性剂、光滑剂、分散剂、缓冲剂、保存剂、矫味剂、香料、被膜剂、载体、稀释剂等而进行调制。
本发明的低体温预防或改善剂中的GIP功能抑制剂的含量优选为0.001质量％以上，更优选为0.01质量％以上，并且优选为1质量％以下，更优选为0.1质量％以下，还优选为0.001～1质量％，更优选为0.01～0.1质量％。
本发明的低体温预防或改善剂的给药量可以根据对象的状态、体重、性别、年龄或其它的主要原因进行变动，经口给药或摄入时，对于每1个成人，作为GIP功能抑制剂，每1日优选为1mg以上，更优选为5mg以上，并且优选为100mg以下，更优选为20mg以下。
另外，作为本发明的低体温预防或改善剂的给药对象，优选深部体温为36℃以下的人。
关于上述的实施方式，在本发明中进一步公开以下的实施方式。
＜1＞一种以GIP功能抑制剂为有效成分的低体温预防或改善剂。
＜2＞GIP功能抑制剂在用于制造低体温预防或改善剂中的用途。
＜3＞一种用于低体温的预防或改善的GIP功能抑制剂。
＜4＞GIP功能抑制剂在低体温预防或改善中的(非治疗的)用途。
＜5＞一种低体温的预防或改善方法，其中，包括向对象将GIP功能抑制剂给药。
＜6＞在＜1＞～＜5＞中，GIP功能抑制剂为抗GIP抗体、GIP受体拮抗剂或者GIP分泌或上升抑制剂。
＜7＞在＜6＞中，抗GIP抗体优选为抗活性型GIP抗体。
＜8＞在＜6＞中，GIP受体拮抗剂优选为4-羟基苯甲酸(2-溴亚苄基)酰肼、3-氰基-4-羟基苯甲酸[1-(2,3,5,6-四甲基苄基)吲哚-4-基]亚甲基酰肼、3-氯-4-羟基苯甲酸(4-甲氧基萘-1-基)亚甲基酰肼、或3-氯-4-羟基苯甲酸[1-(5-氯噻吩-2-基甲基)-1H-吲哚-5-基]亚甲基酰肼。
＜9＞在＜6＞中，GIP分泌或上升抑制剂优选为3-溴-5-甲基-2-苯基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-醇、藻酸、磷脂酰乙醇胺、聚谷氨酸、皂树、溶血磷脂酰肌醇、纤维素纳米纤维、β-甲壳质纳米纤维、二酰基甘油、羟丙基化淀粉、单酰基甘油、碳原子数20以上的超长链脂肪酸、构成脂肪酸的1质量％以上为二十二碳六烯酸且1质量％以上为二十碳五烯酸的三酰基甘油、长链不饱和脂肪酸乙醇酰胺、米糠提取物、儿茶素类、构成脂肪酸的10质量％以上为α-亚麻酸的三酰基甘油或C14～C18饱和脂肪酸与甘油骨架的2位结合而成的酰基甘油。
＜10＞在＜7＞中，抗活性型GIP抗体优选为与活性型GIP结合且与非活性型GIP实质上不结合的抗活性型GIP抗体，为至少识别选自序列号5所示的氨基酸序列的第8～10位的氨基酸中的1个以上且H链中包括由下述(1)所示的氨基酸序列或其保守序列改变构成的区域的抗体。
EMNPSDGRTHFNE (1)
＜11＞在＜10＞中，抗活性型GIP抗体优选为包括由序列号2所示的氨基酸序列或其保守序列改变构成的区域作为H链可变区域的抗体。
＜12＞在＜11＞中，抗活性型GIP抗体优选保守序列改变后的氨基酸序列具有与序列号2所示的氨基酸序列90％以上的同一性。
＜13＞在＜10＞中，抗活性型GIP抗体优选为包括由序列号2所示的氨基酸序列或其保守序列改变构成的区域作为H链可变区域并且包括由序列号4所示的氨基酸序列或其保守序列改变构成的区域作为L链可变区域的抗体。
＜14＞在＜13＞中，抗活性型GIP抗体优选对序列号2所示的氨基酸序列进行保守序列改变后的氨基酸序列具有与序列号2所示的氨基酸序列90％以上的同一性，对序列号4所示的氨基酸序列进行保守序列改变后的氨基酸序列具有与序列号4所示的氨基酸序列90％以上的同一性。
实施例
制造例1抗活性型GIP抗体的制作
(1)免疫用肽的合成
向活性型GIP的N末端15个氨基酸(GIP(1-15))添加聚乙二醇(PEG(polyethyleneglycol)化)后，利用化学方法结合钥孔虫戚血蓝素(KLH；keyhole limpet hemocyanin)，制作KLH结合PEG化GIP(1-15)，形成免疫抗原。将使活性型GIP的N末端15个氨基酸(GIP(1-15))PEG化而得到的肽作为测定用抗原(1)，将使非活性型GIP的N末端13个氨基酸(GIP(3-15))PEG化而得到的肽作为测定用抗原(2)。
(2)免疫
使用BALB/c小鼠(东方酵母工业株式会社)，在背部皮下进行免疫。在初次免疫中，给药将上述所制作的抗原和完全弗罗因德佐剂混合而成的乳液。从初次免疫开始，每2周使用将抗原和不完全弗罗因德佐剂混合而成的乳液，实施追加免疫。一次免疫的抗原量在0.1～0.2mg的范围内进行。在实施初次免疫7周后，使用从小鼠采集的血清，实施抗体值测定，确认了抗体值的上升。
(3)细胞融合
从抗体值上升后的小鼠中摘出脾脏，得到脾细胞。利用PEG法将所得到的脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞株P3U1融合。之后，向20块96孔板进行接种(1×105cells/孔)。
(4)筛选
将测定用抗原(1)和(2)固相化，利用ELISA法，评价杂交瘤培养上清液与抗原(1)和(2)的反应，选择对抗原(1)显示阳性并对抗原(2)显示阴性的杂交瘤作为抗活性型GIP单克隆抗体产生杂交瘤。
(5)克隆
利用有限稀释法，以得到单菌落的方式培养上述所得到的杂交瘤，由此进行抗体产生杂交瘤的克隆，对单菌落形成孔再次进行ELISA测定，建立产生对抗原(1)显示阳性并对抗原(2)显示阴性的抗体的9B9H5-B9株(国际公开第2016/104439号)。
关于所得到的抗体产生杂交瘤的保存，培养该杂交瘤，在对数增殖期内回收后，利用含有FBS(胎牛血清(Fetal Bovine Serum))的细胞冻结液进行调制，使得细胞浓度成为1×106cells/mL后，以成为1×106cells/管的方式分别注入冻结管内，在细胞冷存杯(bicell)中以-80℃保存。
(6)抗体生产
将所得到的抗体产生杂交瘤的冻结管形瓶解冻，向杂交瘤(Hybridoma)-SFM(无血清培养基(Serum-Free Medium))进行无血清驯化。扩大培养后，在2个滚瓶(500mL×2个、1L)中进行培养，回收培养上清液。利用使用Protein A的亲和色谱法，精制所回收的培养上清液作为单克隆抗体。
试验例1利用ELISA法的与活性型GIP的反应性
利用ELISA法确认制造例1中得到的单克隆抗体与活性型GIP的反应性。利用NH2基生物素化试剂盒(Dojindo公司制造)，进行抗活性型GIP单克隆抗体的氨基的生物素化。使用所制作的生物素化抗活性型GIP单克隆抗体1μg/mL，代替附属于Human(total)GIP ELISA试剂盒(Millipore公司制造)的检测抗体’GIP detection antibody(生物素化抗totalGIP单克隆抗体)，进行ELISA。将GIP(1-42)或者GIP(3-42)的2000pg/mL溶液作为最高浓度，以6个阶段(8.2～2000pg/mL)制作4倍稀释系列，利用使用抗total GIP单克隆抗体(Millipore公司制造，附属于Human GIP(total)ELISA试剂盒)作为捕获抗体、使用生物素化抗活性型GIP单克隆抗体作为检测抗体、检测使用过氧化酶-抗生蛋白链菌素结合物的夹心ELISA体系，将GIP浓度作为X轴，将吸光度450nm-590nm作为Y轴，制作标准曲线(图1)。
如图1所示，在GIP(3-42)中，即使在高浓度区域，吸光度也不上升，只有GIP(1-42)的吸光度发生了浓度依赖性地上升，因此，确认了制造例1中得到的单克隆抗体与GIP(3-42)没有交叉性，是能够特异地检测GIP(1-42)的抗体。
实施例1 GIP的急性的体温下降作用
(1)动物和饲养方法
在6周龄引入C57BLKS/J系统的雄性misty小鼠(m/m小鼠，东方酵母工业株式会社)后(室温23℃，湿度55±10％，光周期：7：00～19：00)，在自由进食、自由饮水下进行饲养。饲料使用CE-2(Clea Japan,Inc.)，在上述环境下进行2周驯化后，供于试验。
(2)GIP溶液的制作
将来自小鼠的GIP(Ana spec公司制造)以500nM的浓度溶解在生理盐水中，形成GIP溶液。
(3)给药量和给药方法
向小鼠(8周龄)在光周期(AM9：00～10：00)腹腔内给药生理盐水(对照组)或GIP溶液(5nmol/kg体重)(GIP给药组)。在给药前和给药0.5、2、4.5、8小时后，向小鼠直肠插入探针，测量体温(直肠温度)。
(4)体温(直肠温度)测定
直肠温度测定使用数字直肠温度计(NS-TC10，Neuroscience公司制造)。按照实验动物手册(养贤堂、1983年发行)，在无麻醉下将小鼠保定后，将探针(RET-3(19×0.7mm轴径)，Physitemp公司制造)的前端插入小鼠直肠0.5～1cm，测量15～30秒。
(5)统计分析
分析结果由平均值(Ave.)±标准误差(SE)表示。统计分析中使用2-way ANOVAfollowed by Bonferroni’s post hoc检验，P值为0.05以下时，判定为在统计学上有显著性差异。
(6)结果
与对照组相比，在GIP给药组中，显示了急性的体温下降(2小时后下降0.83℃，4.5小时后下降0.81℃)(图2)。
实施例2GIP的慢性的体温下降作用和抗GIP抗体的体温下降抑制作用
(1)动物和饲养方法
在6周龄引入C57BLKS/J系统的雄性、瘦素受体异常小鼠(db/db小鼠，东方酵母工业株式会社)后(室温23℃，湿度55±10％，光周期：7：00～19：00)，在自由进食、自由饮水下进行饲养。饲料使用CE-2(Clea Japan,Inc.)，在上述环境下进行2周驯化后，供于试验。
(2)GIP溶液和利用抗体抗原反应的GIP结合型抗GIP抗体溶液的制作
将来自小鼠的GIP(Ana spec公司制造)以500nM的浓度溶解在生理盐水中，形成GIP溶液。将来自小鼠的GIP(Ana spec公司制造)和制造例1中制作的抗活性型GIP抗体分别以500nM和0.1mg/mL的浓度溶解在生理盐水中，室温下培养1～2小时，将所得到的溶液作为GIP结合型抗GIP抗体溶液。
(3)给药量和给药方法
每天早晨(AM9：00～10：00)向小鼠(8周龄)腹腔内给药生理盐水(对照组)、GIP溶液(5nmol/kg体重)(GIP给药组)、或GIP结合型抗GIP抗体溶液(GIP：5nmol/kg体重，抗GIP抗体：1mg/kg体重)(GIP+抗GIP抗体给药组)。给药期为28日，经时(间隔3～4日)给药1～2小时后，向小鼠直肠插入探针，测量体温(直肠温度)。
(4)体温(直肠温度)测定
直肠温度测定使用数字直肠温度计(NS-TC10，Neuroscience公司制造)。按照实验动物手册(养贤堂、1983年发行)，在无麻醉下将小鼠保定后，将探针(RET-3(19×0.7mm轴径)，Physitemp公司制造)的前端插入小鼠直肠0.5～1cm，测量15～30秒。
(5)统计分析
分析结果由平均值(Ave.)±标准误差(SE)表示。统计分析使用2-way ANOVAfollowed by Bonferroni’s post hoc检验，P值为0.05以下时，判定为在统计学上有显著性差异。
(6)结果
与对照组相比，在GIP给药组中，显示了慢性的体温下降，在GIP+抗GIP抗体给药组中，确认有体温下降的抑制(图3)。
实施例3血中GIP量的加龄性变化
(1)动物和饲养方法
在4周龄引入C57BL/6J雄性小鼠(Clea Japan,Inc.)后(室温23℃，湿度55±10％，光周期：7：00～19：00)，在自由进食、自由饮水下进行饲养。饲料为CE-2(Clea Japan,Inc.)，进行1周驯化后，以通常食物(D12450K，Research Diets,Inc)或高脂肪食物(D12451，Research Diets,Inc)饲养95周。
(2)采血
对于各周龄(5、10、15、20、30、40、50、65、80、100周龄)的小鼠，在异氟烷麻醉下，从腹部大静脉采集全血。
(3)血中GIP量的测定
关于血中GIP的浓度，对于所采集的血液，利用离心分离调制血浆部分后，使用GIPELISA试剂盒(Millipore公司制造)，按照常规方法测定总GIP。
(4)统计分析
分析结果由平均值(Ave.)±标准误差(SE)表示。统计分析使用2-way ANOVAfollowed by Bonferroni’s post hoc检验，P值为0.05以下时，判定为在统计学上有显著性差异。
(5)结果
随着年龄增加，观察到血中GIP浓度的上升，特别是在高脂肪食物摄入组中，与通常食物组相比，看到了显著的血中GIP量的上升(图4)。已知总GIP与活性型GIP量连动而发生变化(国际公开2012-121302号)，因此，可以认为活性型GIP量也上升了。
实施例4深部体温的加龄性变化
(1)动物和饲养方法
在4周龄引入C57BL/6J雄性小鼠(Clea Japan,Inc.)后(室温23℃，湿度55±10％，光周期：7：00～19：00)，在自由进食、自由饮水下进行饲养。饲料为CE-2(Clea Japan,Inc.)，进行1周驯化后，以通常食物(D12450K，Research Diets,Inc)或高脂肪食物(D12451，Research Diets,Inc)饲养95周。5周龄后每周向小鼠直肠插入探针，测量体温(直肠温度)。给药期为8周，经时(间隔2～4周)地向小鼠直肠插入探针，测量体温(直肠温度)。
(2)体温(直肠温度)测定
5周龄后每周向小鼠直肠插入探针(RET-3(19×0.7mm轴径)，Physitemp公司制造)，测量体温(直肠温度)。直肠温度测定使用数字直肠温度计(NS-TC10，Neuroscience公司制造)。按照实验动物手册(养贤堂、1983年发行)，在无麻醉下将小鼠保定后，将探针的前端插入小鼠直肠0.5～1cm，测量15～30秒。
(3)统计分析
分析结果由平均值(Ave.)±标准误差(SE)表示。统计分析使用2-way ANOVAfollowed by Bonferroni’s post hoc检验，P值为0.05以下时，判定为在统计学上有显著性差异。
(4)结果
随着年龄增加，观察到体温的下降，特别是在高脂肪食物摄入组中，与通常食物组相比，看到了急速的体温下降(图5)。
实施例5抗GIP抗体对老龄小鼠的体温下降抑制作用
(1)动物和饲养方法
在4周龄引入C57BL/6J雄性小鼠(Clea Japan,Inc.)后(室温23℃，湿度55±10％，光周期：7：00～19：00)，在自由进食(D12450K，Research Diets,Inc)、自由饮水下饲养111周。
(2)抗GIP抗体溶液的制作
将制造例1中制作的抗活性型GIP抗体以0.05mg/mL的浓度溶解在生理盐水中，制成抗GIP抗体溶液。
(3)给药量和给药方法
1周1次(AM9：00～10：00)向C57BL/6J小鼠(107周龄)腹腔内给药生理盐水(对照组)或抗GIP抗体溶液(0.5mg/kg体重)(抗GIP抗体给药组)。给药期为8周，经时(间隔2～4周)地向小鼠直肠插入探针，测量体温(直肠温度)。
(4)体温(直肠温度)测定
直肠温度测定使用数字直肠温度计(NS-TC10，Neuroscience公司制造)。按照实验动物手册(养贤堂、1983年发行)，在无麻醉下将小鼠保定后，将探针(RET-3(19×0.7mm轴径)，Physitemp公司制造)的前端插入小鼠直肠0.5～1cm，测量15～30秒。
(5)统计分析
分析结果由平均值(Ave.)±标准误差(SE)表示。统计分析使用2-way ANOVAfollowed by Bonferroni’s post hoc检验，P值为0.05以下时，判定为在统计学上有显著性差异。
(6)结果
与对照组和非给药群相比较，在抗GIP抗体给药组中，体温显著变高，确认抑制了伴随年龄增加的体温下降(图6)。
实施例6 GIP受体拮抗剂和GIP分泌或上升抑制剂对继续摄入高脂肪食物小鼠的体温下降抑制作用
(1)动物和饲养方法
在7周龄引入C57BL/6J雄性小鼠(Clea Japan,Inc.)后(室温23℃，湿度55±10％，光周期：7：00～19：00)，在自由进食、自由饮水下进行饲养。饲料为CE-2(Clea Japan,Inc.)，进行1周驯化后，以各组体重相等的方式进行分组，分别喂食含有5％的脂质的通常食物(通常食物组)、含有30％的脂质(三酰基甘油)的高脂肪食物(高脂肪食物组)、含有0.4％的4-羟基苯甲酸(2-溴亚苄基)酰肼(4H2BH、利用Ling et al.,J.Med.Chem.44:3141-9,2001所记载的方法制造)的高脂肪食物(4H2BH组)、或者将30％的三酰基甘油置换成二酰基甘油(日本特开2006-342084号公报)而得到的高脂肪食物(DAG置换组)26周(34周龄)。将食物组成示于下述表1中。在饲养期内，每周测定1次体重，每周测定2次进食量。其中，饲养期内为自由进食、自由饮水。34周龄时向小鼠直肠插入探针，测量体温(直肠温度)。
[表1]
饲料中的食物组成
利用百分率(w/w)表示试验食物中的含量
4H2BH：4-羟基苯甲酸(2-溴亚苄基)酰肼
(2)体温(直肠温度)测定
直肠温度测定使用数字直肠温度计(NS-TC10，Neuroscience公司制造)。按照实验动物手册(养贤堂、1983年发行)，在无麻醉下将小鼠保定后，将探针(RET-3(19×0.7mm轴径)，Physitemp公司制造)的前端插入小鼠直肠0.5～1cm，测量15～30秒。
(3)统计分析
分析结果由平均值(Ave.)±标准误差(SE)表示。统计分析使用1-way ANOVAfollowed by Dunnett’s post hoc检验，P值为0.05以下时，判定为在统计学上有显著性差异。
(4)结果
与通常食物组相比，在继续摄入高脂肪食物的组(对照组)中，看到了体温的显著下降，但在摄入了GIP受体拮抗剂(4H2BH)或者将三酰基甘油置换成二酰基甘油的高脂肪食物(DAG置换组)的组中，因摄入高脂肪食物而导致的体温下降被抑制(图7)。
序列表
<110> 花王株式会社
<120> 低体温改善剂
<130> KS1541
<150> JP 2016-251776
<151> 2016-12-26
<160> 5
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 339
<212> DNA
<213> 小鼠
<220>
<221> CDS
<222> (1)..(339)
<400> 1
cag gtc caa ctg cag cag cct ggg gct gaa ctg gtg aag cct ggg gcc 48
Gln Val Gln Leu Gln Gln Pro Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
tca gtg aag ctg tcc tgc aag gct tct ggc tac acc ttc acc agc ttc 96
Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Phe
20 25 30
tgg atg cac tgg gtg att cag agg cct gga caa ggc ctt gag tgg att 144
Trp Met His Trp Val Ile Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
gga gag atg aat cct agc gac ggt cgt act cac ttc aat gaa aag ttc 192
Gly Glu Met Asn Pro Ser Asp Gly Arg Thr His Phe Asn Glu Lys Phe
50 55 60
aag acc aag gcc aca ctg act ata gac aca tcc tcc aac aca gcc tac 240
Lys Thr Lys Ala Thr Leu Thr Ile Asp Thr Ser Ser Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
atg gaa ctc aac agc ctg aca tct gag gac tct gcg gtc tat tac tgt 288
Met Glu Leu Asn Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
gca aga agg atg gag gac tgg ggc caa ggg act ctg gtc act gtt tct 336
Ala Arg Arg Met Glu Asp Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser
100 105 110
gca 339
Ala
<210> 2
<211> 113
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 2
Gln Val Gln Leu Gln Gln Pro Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Phe
20 25 30
Trp Met His Trp Val Ile Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Glu Met Asn Pro Ser Asp Gly Arg Thr His Phe Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Thr Lys Ala Thr Leu Thr Ile Asp Thr Ser Ser Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Asn Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Arg Met Glu Asp Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser
100 105 110
Ala
<210> 3
<211> 324
<212> DNA
<213> 小鼠
<220>
<221> CDS
<222> (1)..(324)
<400> 3
gac atc aag atg acc cag tct cca tct tcc atg tat gca tct cta gga 48
Asp Ile Lys Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Met Tyr Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
gag aga gtc act atc act tgc aag gcg agt cag gac att aat agc tat 96
Glu Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Ile Asn Ser Tyr
20 25 30
tta ggc tgg ttc cag cag aaa cca ggg aaa tct cct aag acc ctg ata 144
Leu Gly Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Pro Lys Thr Leu Ile
35 40 45
tat ggt gca aac aga ttg gta gat ggg gtc cca tca agg ttc agt ggc 192
Tyr Gly Ala Asn Arg Leu Val Asp Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
agt gga tct ggg caa gat tac tct ctc acc atc agc agc ctg gag tat 240
Ser Gly Ser Gly Gln Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Tyr
65 70 75 80
gac gat atg gga ata tat tat tgt cta cag tat gat gag ttt ccg ctc 288
Asp Asp Met Gly Ile Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Asp Glu Phe Pro Leu
85 90 95
acc ttc ggt gct ggg acc aag ctg gag ctg aaa cgg 324
Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys Arg
100 105
<210> 4
<211> 108
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 4
Asp Ile Lys Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Met Tyr Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
Glu Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Ile Asn Ser Tyr
20 25 30
Leu Gly Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Pro Lys Thr Leu Ile
35 40 45
Tyr Gly Ala Asn Arg Leu Val Asp Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Gln Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Tyr
65 70 75 80
Asp Asp Met Gly Ile Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Asp Glu Phe Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys Arg
100 105
<210> 5
<211> 42
<212> PRT
<213> 智人
<400> 5
Tyr Ala Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Lys
1 5 10 15
Ile His Gln Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys Gly Lys
20 25 30
Lys Asn Asp Trp Lys His Asn Ile Thr Gln
35 40

Claims (25)

1.一种低体温预防或改善剂，其中，
以GIP功能抑制剂为有效成分。
2.如权利要求1所述的低体温预防或改善剂，其中，
GIP功能抑制剂为抗GIP抗体、GIP受体拮抗剂或者GIP分泌或上升抑制剂。
3.如权利要求2所述的低体温预防或改善剂，其中，
抗GIP抗体为抗活性型GIP抗体。
4.如权利要求2所述的低体温预防或改善剂，其中，
GIP受体拮抗剂为4-羟基苯甲酸(2-溴亚苄基)酰肼、或3-氰基-4-羟基苯甲酸[1-(2,3,5,6-四甲基苄基)-吲哚-4-基]亚甲基酰肼、3-氯-4-羟基苯甲酸(4-甲氧基萘-1-基)亚甲基酰肼、或3-氯-4-羟基苯甲酸[1-(5-氯噻吩-2-基甲基)-1H-吲哚-5-基]亚甲基酰肼。
5.如权利要求2所述的低体温预防或改善剂，其中，
GIP分泌或上升抑制剂为3-溴-5-甲基-2-苯基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-醇、藻酸、磷脂酰乙醇胺、聚谷氨酸、皂树、溶血磷脂酰肌醇、纤维素纳米纤维、β-甲壳质纳米纤维、二酰基甘油、羟丙基化淀粉、单酰基甘油、碳原子数20以上的超长链脂肪酸、构成脂肪酸的1质量％以上为二十二碳六烯酸且1质量％以上为二十碳五烯酸的三酰基甘油、长链不饱和脂肪酸乙醇酰胺、米糠提取物、儿茶素类、构成脂肪酸的10质量％以上为α-亚麻酸的三酰基甘油、或C14～C18饱和脂肪酸与甘油骨架的2位结合而成的酰基甘油。
6.GIP功能抑制剂在用于制造低体温预防或改善剂中的用途。
7.如权利要求6所述的用途，其中，
GIP功能抑制剂为抗GIP抗体、GIP受体拮抗剂或者GIP分泌或上升抑制剂。
8.如权利要求7所述的用途，其中，
抗GIP抗体为抗活性型GIP抗体。
9.如权利要求7所述的用途，其中，
GIP受体拮抗剂为4-羟基苯甲酸(2-溴亚苄基)酰肼、或3-氰基-4-羟基苯甲酸[1-(2,3,5,6-四甲基苄基)-吲哚-4-基]亚甲基酰肼、3-氯-4-羟基苯甲酸(4-甲氧基萘-1-基)亚甲基酰肼、或3-氯-4-羟基苯甲酸[1-(5-氯噻吩-2-基甲基)-1H-吲哚-5-基]亚甲基酰肼。
10.如权利要求7所述的用途，其中，
GIP分泌或上升抑制剂为3-溴-5-甲基-2-苯基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-醇、藻酸、磷脂酰乙醇胺、聚谷氨酸、皂树、溶血磷脂酰肌醇、纤维素纳米纤维、β-甲壳质纳米纤维、二酰基甘油、羟丙基化淀粉、单酰基甘油、碳原子数20以上的超长链脂肪酸、构成脂肪酸的1质量％以上为二十二碳六烯酸且1质量％以上为二十碳五烯酸的三酰基甘油、长链不饱和脂肪酸乙醇酰胺、米糠提取物、儿茶素类、构成脂肪酸的10质量％以上为α-亚麻酸的三酰基甘油、或C14～C18饱和脂肪酸与甘油骨架的2位结合而成的酰基甘油。
11.一种用于低体温的预防或改善的GIP功能抑制剂。
12.如权利要求11所述的GIP功能抑制剂，其中，
GIP功能抑制剂为抗GIP抗体、GIP受体拮抗剂或者GIP分泌或上升抑制剂。
13.如权利要求12所述的GIP功能抑制剂，其中，
抗GIP抗体为抗活性型GIP抗体。
14.如权利要求12所述的GIP功能抑制剂，其中，
GIP受体拮抗剂为4-羟基苯甲酸(2-溴亚苄基)酰肼、或3-氰基-4-羟基苯甲酸[1-(2,3,5,6-四甲基苄基)-吲哚-4-基]亚甲基酰肼、3-氯-4-羟基苯甲酸(4-甲氧基萘-1-基)亚甲基酰肼、或3-氯-4-羟基苯甲酸[1-(5-氯噻吩-2-基甲基)-1H-吲哚-5-基]亚甲基酰肼。
15.如权利要求12所述的GIP功能抑制剂，其中，
GIP分泌或上升抑制剂为3-溴-5-甲基-2-苯基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-醇、藻酸、磷脂酰乙醇胺、聚谷氨酸、皂树、溶血磷脂酰肌醇、纤维素纳米纤维、β-甲壳质纳米纤维、二酰基甘油、羟丙基化淀粉、单酰基甘油、碳原子数20以上的超长链脂肪酸、构成脂肪酸的1质量％以上为二十二碳六烯酸且1质量％以上为二十碳五烯酸的三酰基甘油、长链不饱和脂肪酸乙醇酰胺、米糠提取物、儿茶素类、构成脂肪酸的10质量％以上为α-亚麻酸的三酰基甘油、或C14～C18饱和脂肪酸与甘油骨架的2位结合而成的酰基甘油。
16.GIP功能抑制剂在用于低体温预防或改善中的用途。
17.如权利要求16所述的用途，其中，
GIP功能抑制剂为抗GIP抗体、GIP受体拮抗剂或者GIP分泌或上升抑制剂。
18.如权利要求17所述的用途，其中，
抗GIP抗体为抗活性型GIP抗体。
19.如权利要求17所述的用途，其中，
GIP受体拮抗剂为4-羟基苯甲酸(2-溴亚苄基)酰肼、或3-氰基-4-羟基苯甲酸[1-(2,3,5,6-四甲基苄基)-吲哚-4-基]亚甲基酰肼、3-氯-4-羟基苯甲酸(4-甲氧基萘-1-基)亚甲基酰肼、或3-氯-4-羟基苯甲酸[1-(5-氯噻吩-2-基甲基)-1H-吲哚-5-基]亚甲基酰肼。
20.如权利要求17所述的用途，其中，
GIP分泌或上升抑制剂为3-溴-5-甲基-2-苯基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-醇、藻酸、磷脂酰乙醇胺、聚谷氨酸、皂树、溶血磷脂酰肌醇、纤维素纳米纤维、β-甲壳质纳米纤维、二酰基甘油、羟丙基化淀粉、单酰基甘油、碳原子数20以上的超长链脂肪酸、构成脂肪酸的1质量％以上为二十二碳六烯酸且1质量％以上为二十碳五烯酸的三酰基甘油、长链不饱和脂肪酸乙醇酰胺、米糠提取物、儿茶素类、构成脂肪酸的10质量％以上为α-亚麻酸的三酰基甘油、或C14～C18饱和脂肪酸与甘油骨架的2位结合而成的酰基甘油。
21.一种低体温的预防或改善方法，其中，
包括向对象将GIP功能抑制剂给药。
22.如权利要求21所述的方法，其中，
GIP功能抑制剂为抗GIP抗体、GIP受体拮抗剂或者GIP分泌或上升抑制剂。
23.如权利要求22所述的方法，其中，
抗GIP抗体为抗活性型GIP抗体。
24.如权利要求22所述的方法，其中，
GIP受体拮抗剂为4-羟基苯甲酸(2-溴亚苄基)酰肼、或3-氰基-4-羟基苯甲酸[1-(2,3,5,6-四甲基苄基)-吲哚-4-基]亚甲基酰肼、3-氯-4-羟基苯甲酸(4-甲氧基萘-1-基)亚甲基酰肼、或3-氯-4-羟基苯甲酸[1-(5-氯噻吩-2-基甲基)-1H-吲哚-5-基]亚甲基酰肼。
25.如权利要求22所述的方法，其中，
GIP分泌或上升抑制剂为3-溴-5-甲基-2-苯基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-醇、藻酸、磷脂酰乙醇胺、聚谷氨酸、皂树、溶血磷脂酰肌醇、纤维素纳米纤维、β-甲壳质纳米纤维、二酰基甘油、羟丙基化淀粉、单酰基甘油、碳原子数20以上的超长链脂肪酸、构成脂肪酸的1质量％以上为二十二碳六烯酸且1质量％以上为二十碳五烯酸的三酰基甘油、长链不饱和脂肪酸乙醇酰胺、米糠提取物、儿茶素类、构成脂肪酸的10质量％以上为α-亚麻酸的三酰基甘油、或C14～C18饱和脂肪酸与甘油骨架的2位结合而成的酰基甘油。
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