CN109633013A

CN109633013A - 一种金银花多指标定量分析方法

Info

Publication number: CN109633013A
Application number: CN201811638096.9A
Authority: CN
Inventors: 兰作平
Original assignee: Chongqing Medical and Pharmaceutical College
Current assignee: Chongqing Medical and Pharmaceutical College
Priority date: 2018-12-29
Filing date: 2018-12-29
Publication date: 2019-04-16

Abstract

本发明涉及金银花检测分析领域，尤其涉及一种金银花多指标定量分析方法，包括以下步骤：A、备料：采集同一产地的金银花样本；B、粉碎：使用粉碎装置对金银花进行粉碎；C、过滤：过80目筛，将过滤好的金银花粉末全部放在漏斗中；D、称重：将器皿放在称重盘上，使漏斗上的出料管的端部朝向器皿，器皿放稳之后，使出料管端部的挡板打开，通过挡板的滑动控制出料管出口的大小，并随着器皿中的金银花粉末越来越多使出料管端部出口的大小越来越小，当器皿中的重量达到预设值时，使挡板将出料管的出口全部自动关闭；E、通过定量分析的手段对金银花中的绿原酸等成分进行检测。本方案提高了金银花粉末称重的精确程度。

Description

一种金银花多指标定量分析方法

技术领域

本发明涉及金银花检测分析领域，尤其涉及一种金银花多指标定量分析方法。

背景技术

金银花具有较高的保健和药用价值，具有清热解毒、凉散风热的功能，用于痈肿疔疮、喉痹、丹毒、热毒血痢、风热感冒、温病发热诸病，是我国十大名贵药材之一。

绿原酸、木犀草苷、黄酮类化合物是金银花中的主要有效成分之一，绿原酸、木犀草苷和黄酮类化合物也常被作为金银花药材的质量控制和检测的指标。目前对黄酮类化合物和绿原酸的定量分析的技术手段主要有：薄层扫描法(TLCS)、毛细管电泳法(CE)、高效液相色谱法(HPLC)、液-质联用技术(LC-MS)等，其中以HPLC法最为普及。

无论哪种定量分析方法，在分析时均需要将金银花粉碎，过筛，并对金银花药材粉末进行精密的称重，称重之后的金银花粉末放于器皿中。精密称重的目的在于使每个器皿中的金银花粉末的重量尽可能的相同，使分析的数据和结论更加的准确，否则影响分析检测的结论。现有技术中，对金银花粉末进行称重是通过人工进行称重，即人工通过天平量取一定重量的金银花粉末，这种称重的方式比较缓慢，操作比较复杂，并且由于是人工进行称重，各个器皿中的金银花的重量多多少少存在一定的误差，试验分析的结果的精确程度有待进一步提高。

发明内容

本发明的目的在于提供一种金银花多指标定量分析方法,以提高金银花粉末称重的精确程度。

为达到上述目的，本发明的技术方案是：一种金银花多指标定量分析方法，包括以下步骤：

A、备料：采集同一产地的金银花样本；

B、粉碎：使用粉碎装置对金银花进行粉碎；

C、过滤：过80目筛，将过滤好的金银花粉末全部放在漏斗中；

D、称重：将器皿放在称重盘上，使漏斗上的出料管的端部朝向器皿，器皿放稳之后，使出料管端部的挡板打开，通过挡板的滑动控制出料管出口的大小，并随着器皿中的金银花粉末越来越多使出料管端部出口的大小越来越小，当器皿中的重量达到预设值时，使挡板将出料管的出口全部自动关闭；

E、通过定量分析的手段对金银花中的绿原酸等成分进行检测，定量分析的手段为利用超高效液相色谱法进行定量分析，其中超高效液相色谱法部分条件：色谱柱为WatersAcquity UPLC BEH RP18(100mm×2.1mm i.d.，1.7μm)；流动相：A：B＝0.4％磷酸水：乙腈。

本方案的工作原理及效果为：金银花样本来自同一产地，从而使得定量分析的结果排除了一些不确定因素，分析的结构更具有说服力。粉碎破坏了金银花内的组织结构，利于金银花内的有效成分的检测。称重盘用于放置器皿，器皿用于盛放金银花粉末。初始时，挡板使得出料管的出口较大，可增大漏斗中金银花粉末向器皿中转移，随着器皿中的金银花粉末越来越多，挡板逐渐将出料管的出口关上，从而使得金银花粉末从出料管中流出的速度逐渐变小，当器皿的重量快要达到预设值时，稍微向器皿中加入金银花粉末即可，有利于提高器皿中金银花称重的精准性，防止器皿中的金银花的重量达到预设值时，挡板在关闭出料管的出口动态过程中任有大量的金银花粉末进入到器皿中，造成器皿中的金银花的重量相比预设值较大。因此，通过本方案对金银花进行称重更加精准。

流动相采用0.4％的磷酸水溶液使得色谱图基线更加的平稳；使用RP18柱分离效果较好；另外，本方案利用超高效液相色谱法同时测定金银花中绿原酸和木犀草苷含量，相对于HPLC，超高效液相色谱法采用的是小颗粒填料色谱柱(粒径一般小于2μm)和超高压(压力大于105KPa)系统的一种分离技术，对于改善色谱峰的分离度和检测灵敏度，缩短分析时间、减少有机试剂的使用均具有比较明显的效果。

进一步，步骤E中，检测波长：241nm。当波长为241nm时，相比波长为242nm或者240nm时，其响应值反应绿原酸和木犀草苷的含量更加准确。

进一步，步骤D中，在漏斗的出料管中设置滤网。滤网可使得漏斗中的金银花粉末向器皿中转移过程中，对金银花的粉末进一步过滤，从而防止不符合标准的粉末进入到器皿中，保证了检测分析结果的精确性。

进一步，步骤D中，称重时打开漏斗和出料管上的振动器，使振动器的振动频率随着出料管的出口的缩小而增大。振动器用于防止漏斗和出料管中的粉末堵塞。当出料管的出口越来越小时，粉末越不容易从出料管中进入到器皿中，因此增大振动器的振动频率，从而可利于粉末从出料管的出口进入到器皿中，防止造成出料管出口堵塞。

进一步，步骤D中，通过控制电磁铁的产生的磁力大小控制挡板的滑动，电磁铁磁力大小随器皿的重量增大而减小。由此，当器皿的重量越大时，说明器皿中装的粉末量越多，距离预设值的差距就越来越小，则通过电磁铁磁力越来越小，从而可使出料管的出口逐渐缩小。

进一步，步骤D在称重设备上进行。称重设备用于自动完成称重步骤，使得金银花粉末的称重更加方便、快捷和精准。

附图说明

图1为称重设备的结构示意图；

图2为出料管的右端的正向剖视图。

具体实施方式

下面通过具体实施方式进一步详细说明：

说明书附图中的附图标记包括：竖杆1、漏斗2、振动器3、出料管4、称重盘5、器皿6、拉绳7、连杆8、横杆9、导电块10、弧形板11、导电条12、第二导线13、第一导线14、插板15、堵块16、滤网17、挡板18、拉簧19、横板20、电磁铁21。

一种金银花多指标定量分析方法，包括以下步骤：

A、备料：采集重庆大足地区的金银花样本；

B、粉碎：使用粉碎装置对金银花进行粉碎；

D、称重：在这一步骤中使用称重设备进行称重。

E、通过UPLC-PDA定量分析的手段对金银花中的绿原酸等成分进行检测。其中UPLC条件：色谱柱为Waters Acquity UPLC BEH RP18(100mm×2.1mm i.d.，1.7μm)；室温，流动相：A：B＝0.4％磷酸水：乙腈；梯度洗脱条件：平衡时间为5min；梯度洗脱程序：0～2min，5％～16％B；2～4min，16％～20％B；4～8min，20％～50％B；8～10min，50％～100％B；10～11min，100％～5％B；进样量：3μL，检测波长：241nm，体积流量0.2mL/min。

其中，流动相采用0.4％的磷酸水溶液使得色谱图基线更加的平稳；使用RP18柱分离效果较好；当波长为241nm时，其响应值可以准确反应绿原酸和木犀草苷的含量。另外，本方案利用超高效液相色谱法同时测定金银花中绿原酸和木犀草苷含量，相对于HPLC，超高效液相色谱法采用的是小颗粒填料色谱柱(粒径一般小于2μm)和超高压(压力大于105KPa)系统的一种分离技术，对于改善色谱峰的分离度和检测灵敏度，缩短分析时间、减少有机试剂的使用均具有比较明显的效果。

通过以上步骤，测得不同产地的金银花中的绿原酸含量≥1.5％，木犀草苷含量≥0.05％时，则可以判断该金银花药材为合格样品，符合原药材质量要求，可以投入提取等后续生产环节。

实验对比：

总共进行了三组实验，分别为实验1、实验2和实验3，对于每组实验中金银花的重量相同，并对三个实验中绿原酸的含量和木犀草苷的含量进行检测，三个实验的区别仅在于检测波长不同，实验结果如下表所示：

实验组	实验1(波长241nm)	实验1(波长240nm)	实验1(波长242nm)
				绿原酸含量	1.86％	1.61％	1.78％
木犀草苷含量	0.078％	0.073％	0.066％

从上表可知，检测波长为241nm时检测的绿原酸的含量均大于波长为240nm和波长为242nm时的绿原酸的含量，从而可知波长为241nm时，绿原酸的检测含量更加准确。同理，波长为241nm时，木犀草苷的检测含量相比波长为240nm和波长为242nu时更加准确。

对于上述步骤D中，结合图1所示，称重设备包括机架，机架上焊接有竖杆1，竖杆1的底端焊接有位于其右侧的横杆9，竖杆1的底端通过销轴转动连接有弧形板11，竖杆1的底部设有对弧形板11进行限位的限位块，从而使得弧形板11向下摆动的最大限度为图1所示的状态。弧形板11上设有弧形的导电条12，导电条12为铜制成。导电条12的顶端连接有第一导线14，第一导线14连接有电源，横杆9的右端粘接有导电块10，导电块10也为铜制成，导电块10上连接有第二导线13，导电块10可与导电条12之间连通。弧形板11转动连接在竖杆1的部位上焊接有位于弧形板11左侧的连杆8，连杆8的左端通过拉绳7连接有称重盘5，称重盘5上可放置器皿6，具体的，器皿6可为烧杯。机架上设有位于竖杆1右侧的漏斗2，漏斗2的底端连通有出料管4，出料管4和漏斗2上均设有振动器3。出料管4的右端朝向称重盘5。结合图2所示，出料管4的右端的顶部滑动连接有挡板18，挡板18的底部设有磁铁，挡板18的顶部焊接有横板20，横板20与出料管4的顶部之间连接有拉簧19。出料管4的底部设有电磁铁21，电磁铁21与挡板18的底部相对，电磁铁21可与挡板18底部的磁铁相排斥，第二导线13远离导电块10的一端连接在电磁铁21上。出料管4内设有位于挡板18左侧的滤网17，滤网17的左侧设有插板15，插板15滑动连接在出料管4的顶部上，具体的，出料管4的顶部设有开口，插板15滑动连接在开口上，出料管4的底部开设有位于滤网17左侧的漏孔，漏孔中螺纹连接有堵块16。堵块16位于插板15和滤网17之间。

称重设备的具体使用方法如下：将粉碎过滤好的金银花粉末置于漏斗2中，初始时，挡板18在拉簧19的作用下将出料管4的出口关闭，弧形板11在自身重力的作用下处于如图1所示的状态，弧形板11在限位块的作用下无法顺时针摆动，导电块10与导电条12不相接触。使用时，启动振动器3和打开电源，将器皿6放在称重盘5上，并使器皿6的右侧内壁与出料管4的管口相对，在器皿6重力的作用下，称重盘5通过拉绳7向下拉动连杆8，连杆8使得弧形板11逆时针摆动一定角度，导电块10和导电条12接触而连通，电源中的电流通过第一导线14、导电条12、导电块10和第二导线13进入到电磁铁21中，电磁铁21通电，电磁铁21产生磁性，此时导电块10和导电条12的电阻较小，电磁铁21上的电流较大，电磁铁21产生的磁性较大，电磁铁21与挡板18底部的磁铁排斥力较大，从而使挡板18向上滑动，挡板18将出料管4的出口打开，漏斗2中的金银花粉末通过出料管4进入到器皿6中。

随着器皿6中的金银花的粉末越来越多，器皿6的重量越来越大，称重盘5通过拉绳7使得连杆8逆时针摆动的幅度越来越大，弧形板11的逆时针摆动的幅度也变大，导电条12与导电块10有效的连通长度变长，导电块10和导电条12的电阻变大，在电源电压不变的情况下，从而使得电路中的电流减小，电磁铁21上的电流减小，电磁铁21的磁性减小，挡板18在拉簧19的作用下逐渐向下移动，从而使得出料管4的出口逐渐变小，使得出料管4中粉末出料的速度越来越小。当器皿6中的金银花粉末装到预设的重量时，随着弧形板11的逆时针转动，导电条12的下端滑离导电块10，导电块10和导电条12不再接触，整个电路断电，电磁铁21不再工作，电磁铁21上的磁性消失，挡板18在拉簧19的作用下而将出料管4的出口全部关上。

采用本称重设备时，具有以下优点：1、将器皿6放在称重盘5上即可实现出料管4的自动出料，无需人工将金银花粉末加入到器皿6中，操作简单方便。2、当器皿6中的金银花粉末达到预设的重量后，出料管4的出口自动关上，从而使得停止出料管4停止下料，操作简单方便，称重的更加精准。3、随着器皿6中的金银花粉末越来越多，出料管4的出口的大小逐渐变小，这样，当器皿6中的金银花的粉末正好达到预设值时，可使挡板18将出料管4的出口立刻关上，防止挡板18滑动的距离过大而出现关闭延后的现象，避免出料管4中的粉末继续向器皿6中进料而使器皿6中的金银花重量大于预设值，由此，使得器皿6中称重更加精准。4、由于出料管4的出口朝向器皿6右侧的内壁，故在连杆8逆时针摆动过程中，器皿6逐渐向右下方移动，这样出料管4不会将粉末撒入到器皿6的外侧，保证了器皿6在移动过程中粉末全部进入到器皿6中，防止粉末撒到称重盘5上。5、滤网17用于对从出料管4中出来的粉末进一步过滤，保证进入到器皿6中粉末的质量。当需要对滤网17进行清理时，使插板15向下滑动，插板15阻碍出料管4中的金银花粉末向右移动，此时可将堵块16打开，对滤网17上的挡住的金银花粉末进行清理，由此便于滤网17的清理，清理过程中，金银花粉末不会从出料管4中大量漏出。

以上所述的仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本领域的技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以作出若干变形和改进，这些也应该视为本发明的保护范围，这些都不会影响本发明实施的效果和专利的实用性。本发明所省略描述的技术、形状、构造部分均为公知技术。

Claims

1.一种金银花多指标定量分析方法，其特征在于：包括以下步骤：

A、备料：采集同一产地的金银花样本；

B、粉碎：使用粉碎装置对金银花进行粉碎；

2.根据权利要求1所述的一种金银花多指标定量分析方法，其特征在于：步骤E中，检测波长：241nm。

3.根据权利要求2所述的一种金银花多指标定量分析方法，其特征在于：步骤D中，在漏斗的出料管中设置滤网。

4.根据权利要求3所述的一种金银花多指标定量分析方法，其特征在于：步骤D中，称重时打开漏斗和出料管上的振动器，使振动器的振动频率随着出料管的出口的缩小而增大。

5.根据权利要求4所述的一种金银花多指标定量分析方法，其特征在于：步骤D中，通过控制电磁铁的产生的磁力大小控制挡板的滑动，电磁铁磁力大小随器皿的重量增大而减小。

6.根据权利要求1-5任一所述的一种金银花多指标定量分析方法，其特征在于：步骤D在称重设备上进行。