CN109187387A - 黄连花薹的品质评价方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了黄连花薹的品质评价方法，包括步骤：(1)原料准备、(2)黄连花薹总黄酮的测定、(3)盐酸小檗碱的测定、(4)计算综合评分、(5)验证。本发明方法所建立的总黄酮以及盐酸小檗碱含量测定方法具有较好的稳定性和重复性，能对不同海拔、不同生长年限、不同产地、以及不同加工方式的黄连花薹的品质进行较为准确的评价，有利于黄连花薹的质量控制，为黄连花薹的可持续利用和开发奠定了基础。

Description

黄连花薹的品质评价方法
技术领域
本发明涉及一种黄连花薹的品质评价方法。
背景技术
黄连为毛茛科植物黄连Coptis chinensis Franch.、三角叶黄连Coptisdeltoidea C.Y.Cheng et Hsiao或云连Coptis teeta Wall.的干燥根茎。以上三种分别习称“味连”、“雅连”、“云连”。具有清热燥湿，泻火解毒的功效。主要用于治疗湿热痞满，呕吐吞酸，泻痢等症。黄连花薹是黄连的花序，春季开花，其花为淡黄色，花瓣呈线性或披针形，顶端较尖，中央有蜜槽，雄蕊多数(约20)，花药长1mm，花丝长2～5mm，外轮雄蕊比花瓣略短或近等长，心皮8～12，离生，有短柄，花柱微外弯。黄连移栽后第二年春季便会开花，开花后会消耗植物大量养分，一般摘除黄连花薹能增产黄连根茎，故在黄连生产基地除留种外皆摘除丢弃，造成了大量的资源浪费，只有少量的黄连花薹经瞭晒、杀青后作为土特产在市场上销售。近年大量研究发现，黄连花薹含有大量的生物碱、黄酮和酚类活性物质，具有降血脂血糖血压、抗氧化、促进小肠蠕动、促进排便和保护心肌缺血再灌损伤等作用，为黄连花薹资源的综合开发和合理应用提供了新的发展方向。目前，对黄连花薹的研究较少，没有针对黄连花薹的质量评价标准，为了更好地开发和利用黄连花薹，有必要提供一种黄连花薹的品质评价方法。
发明内容
本发明的目的在于提供一种黄连花薹的品质评价方法。
本发明提供的黄连花薹的品质评价方法包括如下步骤：
(1)原料准备
将待评价的黄连花薹按生长地的海拔高度、生长年限、产地及杀青方式分为不同的批次，并将各批次的黄连花薹加工成粗粉；
(2)黄连花薹总黄酮的测定
a.供试品溶液的制备：取黄连花薹粗粉0.5g，置具塞锥形瓶中，加入甲醇25±5mL，称定重量，加热回流30±5min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；
b.对照品溶液的制备：取芦丁对照品50.03mg，置25mL量瓶中，加甲醇适量，置水浴上微热使溶解，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，转移至250mL量瓶中，用少量水分数次洗涤25mL量瓶，洗液一起并入250mL量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得每1mL中含芦丁0.20mg的对照品溶液；
c.绘制总黄酮浓度与吸光度的标准曲线：量取对照品溶液1mL、2mL、3mL、4mL、5mL、6mL，分别置25mL量瓶中，各加水至6mL，并加5.0％亚硝酸钠溶液1mL，混匀，放置6分钟，再加10％硝酸铝溶液1mL，摇匀，放置6分钟，加氢氧化钠试液10mL，再加水至刻度，摇匀，放置15分钟，以相应的试剂为空白，按照紫外-可见分光光度法，在500nm波长处测定吸光度，以吸光度为横坐标，对照品浓度为纵坐标，绘制标准曲线，得线性回归方程；
d.测定总黄酮：量取不同批次的供试品溶液1mL，分别置25mL容量瓶中，加水至6.0mL，并加5.0％亚硝酸钠溶液1mL，混匀，放置6分钟，再加10％硝酸铝溶液1mL，摇匀，放置6分钟，加氢氧化钠试液10mL，再加水至刻度，摇匀，放置15分钟，以相应的试剂为空白，按照紫外-可见分光光度法，在500nm波长处测定吸光度，将测得的吸光度分别代入上述线性回归方程,即可计算出各批次黄连花薹的总黄酮含量；
(3)盐酸小檗碱的测定
a.供试品溶液的制备：取黄连花薹粗粉约0.2g，置具塞锥形瓶中，加入体积比为100:1的甲醇—盐酸的混合溶液50±5mL，密塞，称定重量，超声处理30±5min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，量取续滤液2mL，置5mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；
b.系列对照品溶液的制备：取盐酸小檗碱对照品适量，加甲醇制成每1mL含0.5348mg的溶液，得对照品储备液，吸取盐酸小檗碱对照品储备液0.5mL、1mL、1.5mL、2mL、2.5mL、3mL，分别置10mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得浓度为26.74μg·mL-1、53.48μg·mL-1、80.22μg·mL-1、106.96μg·mL-1、133.70μg·mL-1、160.44μg·mL-1的系列对照品溶液；
c.绘制盐酸小檗碱浓度与峰面积的标准曲线
色谱条件与系统适应性：Supersil ODS2色谱柱；流动相为体积比为50：50的乙腈-0.05mol·L-1磷酸二氢钾溶液；检测波长为345nm，进样量10μL；
将上述系列对照品溶液按照上述色谱条件进样，测定峰面积，并以峰面积为纵坐标，盐酸小檗碱浓度为横坐标，绘制标准曲线，得线性回归方程；
d.测定盐酸小檗碱：取不同批次的供试品溶液，按照上述色谱条件进样，测定峰面积，将测得的峰面积分别代入上述线性回归方程,即可计算出各批次黄连花薹的盐酸小檗碱含量；
(4)计算综合评分
a.将各批次黄连花薹干燥方式中耗时最小的时间规定为单位1，每增加50h依次递减0.1，得各批次黄连花薹干燥时间转化值；
b.将测得的各批次黄连花薹的总黄酮含量和盐酸小檗碱含量代入公式：综合评分＝40×盐酸小檗碱含量/最大盐酸小檗碱含量+30×总黄酮含量/最大总黄酮含量+30×干燥时间转化值/最大干燥时间转化值中计算出各批次黄连花薹的综合评分；
式中最大盐酸小檗碱含量、最大总黄酮含量、最大干燥时间转化值是指所有批次黄连花薹中盐酸小檗碱含量的最大值、总黄酮含量的最大值、干燥时间转化值的最大值；
(5)验证
应用“IBM SPSS Statistics”软件对各批次黄连花薹进行系统聚类分析，得聚类谱系图，聚类分析的结果与综合评分的结果至少80％一致。
进一步地，步骤(3)a中所述超声处理的功率为250W，频率为40KHz。
本发明方法所建立的总黄酮以及盐酸小檗碱含量测定方法具有较好的稳定性和重复性，能对不同海拔、不同生长年限、不同产地、以及不同加工方式的黄连花薹的品质进行较为准确的评价，有利于黄连花薹的质量控制，为黄连花薹的可持续利用和开发奠定了基础。
附图说明
图1为黄连花薹聚类谱系图。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明做进一步详细说明，但本发明的保护范围不局限于此。
仪器：SQP型电子天平(赛多利斯科学仪器(北京)有限公司)；FA2004型分析电子天平(上海良平仪器仪表有限公司生产)；TU-1810型紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)；ichrom W5100型高效液相色谱仪(大连依利特分析仪器有限公司)；ZFD-A5140型鼓风干燥箱(上海智城分析仪器制造有限公司)。
材料：盐酸小檗碱对照品(HPLC≥98％，批号wkq17112710)、芦丁对照品(HPLC≥98％，批号wkq18012501)，均购自四川省维克奇生物科技有限公司；甲醇、乙腈为色谱纯，水为娃哈哈纯净水，其余试剂均为分析纯。黄连花薹主要采集不同的黄连种植基地，采集时间及样品信息见表1。
实施例1
本实施例提供的黄连花薹的品质评价方法包括如下步骤：
(1)原料准备
将待评价的黄连花薹按生长地的海拔高度、生长年限、产地及干燥方式分为不同的批次，具体见表1，将各批次的黄连花薹加工成粗粉；
表1黄连花薹采集及不同加工方法信息表
表1中：
第一法(恒温干燥)：将黄连花薹平铺于托盘上置于60±5℃干燥箱中，干燥至水分低于13％；
第二法(梯度干燥)：将黄连花薹平铺于托盘上，置于干燥箱中，温度控制30±5℃，8h；40±5℃，8h；50±5℃，8h；60±5℃，直至水分低于13％；
第三法(阴干)：将黄连花薹平铺，放置在阴凉通风处，阴干至水分低于13％；
第四法(晒干)：将黄连花薹平铺，晒干至水分低于13％。
(2)黄连花薹总黄酮的测定
a.供试品溶液的制备：取黄连花薹粗粉0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入甲醇25mL，称定重量，加热回流30min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；
b.对照品溶液的制备：取芦丁对照品50.03mg，置25mL量瓶中，加甲醇适量，置水浴上微热使溶解，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，转移至250mL量瓶中，用少量水分数次洗涤25mL量瓶，洗液一起并入250mL量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得每1mL中含芦丁0.20mg的对照品溶液；
c.绘制总黄酮浓度与吸光度的标准曲线：精密量取对照品溶液1mL、2mL、3mL、4mL、5mL、6mL，分别置于25mL量瓶中，各加水至6mL，并加5.0％亚硝酸钠溶液1mL，混匀，放置6分钟，再加10％硝酸铝溶液1mL，摇匀，放置6分钟，加氢氧化钠试液10mL，再加水至刻度，摇匀，放置15分钟，以相应的试剂为空白，按照紫外-可见分光光度法(通则0401)，在500nm波长处测定吸光度，以吸光度为横坐标，对照品浓度为纵坐标，绘制标准曲线，得线性回归方程Y＝0.0105X-0.0035，R2＝0.9996，表明芦丁在8.0～48.0μg·mL-1范围内，浓度与吸光度呈良好的线性关系；
d.测定总黄酮：精密量取不同批次的供试品溶液1mL，分别置25mL容量瓶中，加水至6.0mL，并加5.0％亚硝酸钠溶液1mL，混匀，放置6分钟，再加10％硝酸铝溶液1mL，摇匀，放置6分钟，加氢氧化钠试液10mL，再加水至刻度，摇匀，放置15分钟，以相应的试剂为空白，按照紫外-可见分光光度法(通则0401)，在500nm波长处测定吸光度，将测得的吸光度代入上述线性回归方程Y＝0.0105X-0.0035中,即可计算出各批次黄连花薹的总黄酮含量，结果见表2。
(3)盐酸小檗碱的测定
a.供试品溶液的制备：取黄连花薹粗粉约0.2g，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇—盐酸(100:1)的混合溶液50mL，密塞，称定重量，用功率为250W，频率为40KHz的超声处理30min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，量取续滤液2mL，置5mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；
b.系列对照品溶液的制备：取盐酸小檗碱对照品适量，加甲醇制成每1mL含0.5348mg的溶液，得对照品储备液，精密吸取盐酸小檗碱对照品储备液0.5mL、1mL、1.5mL、2mL、2.5mL、3mL，分别置10mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得浓度为26.74μg·mL-1、53.48μg·mL-1、80.22μg·mL-1、106.96μg·mL-1、133.70μg·mL-1、160.44μg·mL-1的系列对照品溶液；
c.绘制盐酸小檗碱浓度与峰面积的标准曲线
色谱条件与系统适应性：Supersil ODS2色谱柱(250mm×4.6mm，5μm)；流动相为乙腈-0.05mol·L-1磷酸二氢钾溶液(50：50)(每100mL中加十二烷基硫酸钠0.4g，再以磷酸调节pH值为4.0)；检测波长为345nm，进样量10μL；理论塔板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于5000。
将上述系列对照品溶液按照上述色谱条件进样，测定峰面积，并以峰面积为纵坐标，盐酸小檗碱浓度为横坐标，绘制标准曲线，得线性回归方程Y＝13.063X-49.955，R2＝0.9987，表明盐酸小檗碱在26.74～160.44μg·mL-1范围内，浓度与峰面积呈良好的线性关系；
d.测定盐酸小檗碱：取不同批次的供试品溶液，按照上述色谱条件进样，测定峰面积，将测得的峰面积分别代入上述线性回归方程Y＝13.063X-49.955中,即可计算出各批次黄连花薹的盐酸小檗碱含量，结果见表2。
表2批次黄连花薹样品总黄酮及盐酸小檗碱含量
(4)计算综合评分
a.将各批次黄连花薹干燥方式中耗时最小的时间规定为单位1，在此基础上，每增加50h依次递减0.1，得各批次黄连花薹干燥时间转化值；
b.将测得的各批次黄连花薹的总黄酮含量和盐酸小檗碱含量代入公式：综合评分＝40×盐酸小檗碱含量/最大盐酸小檗碱含量+30×总黄酮含量/最大总黄酮含量+30×干燥时间转化值/最大干燥时间转化值中计算出各批次黄连花薹的综合评分(由于指标成分可以直接评价黄连花的质量，而盐酸小檗碱为单一成分，测定结果较为精确，总黄酮是从整体上评价其质量，因此确定盐酸小檗碱、总黄酮、干燥时间所占权重比例分别为40、30、30)，结果见表3；
式中最大盐酸小檗碱含量、最大总黄酮含量、最大干燥时间转化值是指所有批次黄连花薹中盐酸小檗碱含量的最大值、总黄酮含量的最大值、干燥时间转化值的最大值；
表3不同产地及加工方式黄连花薹样品综合评分结果表
由结果可知，S1、S2、S3、S4、S9、S10、S12、S13、S14、S15、S16、S17、S18、S22的综合评分在80分以上，表明其品质较好。其中，编号S1、S2、S3、S4和S13、S14、S15、S16，即为表1中采集编号为R1和R4的样品经过4种加工方式得到的样品，综合评分较高，均在84～94之间，R1和R4的生长海拔均在1200m左右，且生长年限在4年及以上，即生长在海拔为1 200m左右，生长年限在4年及以上的黄连花薹品质较好；S1～S4、S5～S8、S9～S12、S13～S16、S17～S20、S21～S24分别为R1、R2、R3、R4、R5和R6经过四种加工方式得到的样品，其中S2、S6、S10、S14、S18、S22的综合评分在4种干燥方式中最高或接近最高，即黄连花薹样品的产地加工宜采用梯度干燥的方法。
(5)验证
应用“IBM SPSS Statistics”软件对各批次黄连花薹进行系统聚类分析，见图1，聚类谱系中，24批样品分为两大类。样品S1、S2、S3、S4、S9、S10、S13、S14、S15、S16、S17、S18聚为一类，在综合评分分析中，该12批样品综合评分均高于80分。其余12批聚为一类(除S12、S22外)，在综合评分分析中，此类样品综合评分低于80分，与综合评分分析结果基本一致。其中，编号S1、S2、S3、S4和S13、S14、S15、S16，即为表1中采集编号为R1和R4的样品经过四种加工方式得到的样品，全部聚集在第一类，表明生长在海拔为1 200m左右，生长年限在四年及以上的黄连花薹品质较好，也与综合评分分析结果基本一致。虽然4种干燥方式中有一种干燥方式较好，但是由于6个采集地的黄连花薹存在品质的高低，因此24批样品在谱系图中会按照品质的高低聚集，干燥方式哪一种更优，则不能直接在聚类分析谱系图中直观地体现出来。
实施例2
总黄酮及盐酸小檗碱含量测定方法研究
(1)总黄酮含量测定方法研究
a.精密度试验
精密量取黄连花薹(批号：20130310-3-4)供试品溶液1mL，置25mL容量瓶中，按实施例1步骤(2)d的测定方法，在500nm处连续测定6次。结果吸光度RSD为0.79％，表明仪器的精密度良好。
c.稳定性试验
精密量取黄连花薹(批号：20130310-3-4)供试品溶液1mL，置25mL容量瓶中，按实施例1步骤(2)d的测定方法，在500nm处于0、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60min时测定吸光度。结果吸光度RSD为2.19％，表明供试品溶液在1h内稳定。
d.重复性试验
取同一批黄连花薹(批号：20130310-3-4)粗粉6份，按实施例1步骤(2)a的方法制成供试品溶液，精密量取供试品溶液1mL，置25mL容量瓶中，按实施例1步骤(2)d的测定方法，在500nm处依法测定吸光度，并计算样品的含量。结果含量RSD为3.34％，表明该方法具有良好的重复性。
e.加样回收率试验
取同一批黄连花薹(批号：20130310-3-4，含量：4.14％)粗粉约0.25g，精密称定，置具塞锥形瓶中，分别加入芦丁对照品(100％)适量，平行6份，按照实施例1步骤(2)a的方法制成供试品溶液，精密量取供试品溶液1mL，置25mL容量瓶中，按实施例1步骤(2)d的测定方法，在500nm处依法测定吸光度，并计算。结果平均回收率为99.80％，RSD为2.44％，表明该方法加样回收率良好。
(1)盐酸小檗碱含量测定方法研究
a.精密度试验
精密吸取盐酸小檗碱对照品溶液10μL，按照实施例1步骤(3)c的色谱条件重复进样6次，测定其峰面积，计算RSD为1.80％，表明仪器精密度良好。
b.稳定性试验
精密吸取同一供试品溶液(批号：20130310-3-4)，分别于0、1、2、4、8、12h按实施例1步骤(3)c的色谱条件进样，测定盐酸小檗碱的峰面积，计算RSD为1.70％，表明供试品溶液在12h内基本稳定。
c.重复性试验
取同一批黄连花薹(批号：20130310-3-4)粗粉6份，按实施例1步骤3(a)的方法制成供试品溶液，按实施例1步骤(3)c的色谱条件进样，测定盐酸小檗碱峰面积，计算含量，并计算RSD为3.72％，表明该方法具有良好的重复性。
d.加样回收率试验
取黄连花薹(批号：20130310-3-4，含量3.38％)粗粉约0.1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，平行6份，分别加入盐酸小檗碱对照品溶液15mL(0.23mg·mL-1)，再精密加入甲醇—盐酸(100:1)的混合溶液35mL，密塞，称定重量，超声处理(功率250W，频率40KHz)30min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液2mL，置5mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。按实施例1步骤(3)c的色谱条件进样，分别测定盐酸小檗碱峰面积，计算回收率，结果平均回收率为97.57％，RSD为1.68％，表明本方法回收率良好。
实施例3
供试品溶液制备方法考察
(1)总黄酮含量测定供试品溶液制备方法考察
a.提取方法考察
取黄连花薹(批号：20130310-3-4)粗粉2份，每份约0.5g，精密称定，分别置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25mL，分别采用超声提取30min，加热回流提取30min的方法。结果两种方法测得总黄酮的含量分别为3.92％，4.16％。故采用加热回流30min的方法。
b.提取时间的考察
取黄连花薹(批号：20130310-3-4)粗粉4份，每份约0.5g，精密称定，分别置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25mL，分别加热回流15、30、45、60min。结果测得总黄酮的含量分别为4.05％，4.20％，4.20％，4.18％。故选择加热回流提取的时间为30min。
c.提取溶媒用量考察
取黄连花薹(批号：20130310-3-4)粗粉4份，每份约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，分别精密加入甲醇25，50，75，100mL，加热回流30min。结果测得总黄酮的含量分别为4.18％，4.36％，4.12％，4.34％。由结果可知，溶剂的用量对样品中总黄酮含量影响较小，考虑到吸光度在0.3～0.7之间为宜。因此选择加热回流提取的溶媒用量为25mL。
(2)盐酸小檗碱含量测定供试品溶液制备方法考察
a.提取方法考察
取黄连花薹(批号：20130310-3-4)粗粉2份，每份约0.2g，精密称定，分别置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇—盐酸(100:1)的混合溶液50mL，分别采用超声提取30min，加热回流提取30min的方法。结果两种方法测得盐酸小檗碱的含量分别为3.64％，3.29％。故采用超声提取30min的方法。
b.提取时间的考察
取黄连花薹(批号：20130310-3-4)粗粉6份，每份约0.2g，精密称定，分别置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇—盐酸(100:1)的混合溶液50mL，分别超声处理(功率240W，频率40KHz)10，20，30，40，50，60min。结果测得盐酸小檗碱的含量分别为3.04％，3.24％，3.28％，3.17％，3.24％，3.24％。故选择超声提取的时间为30min。
c.提取溶媒用量考察
取黄连花薹(批号：20130310-3-4)粗粉4份，每份约0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，分别精密加入甲醇—盐酸(100:1)的混合溶液25，50，75，100mL，分别超声处理(功率250W，频率40KHz)30min。结果测得盐酸小檗碱的含量分别为3.50％，3.51％，3.40％，3.42％。故选择超声提取的溶媒用量为50mL。

Claims (2)

1.黄连花薹的品质评价方法，其特征在于包括如下步骤：
(1)原料准备
将待评价的黄连花薹按生长地的海拔高度、生长年限、产地及干燥方式分为不同的批次，并将各批次的黄连花薹加工成粗粉；
(2)黄连花薹总黄酮的测定
a.供试品溶液的制备：取黄连花薹粗粉0.5g，置具塞锥形瓶中，加入甲醇25±5mL，称定重量，加热回流30±5min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；
b.对照品溶液的制备：取芦丁对照品50.03mg，置25mL量瓶中，加甲醇适量，置水浴上微热使溶解，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，转移至250mL量瓶中，用少量水分数次洗涤25mL量瓶，洗液一起并入250mL量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得每1mL中含芦丁0.20mg的对照品溶液；
c.绘制总黄酮浓度与吸光度的标准曲线：量取对照品溶液1mL、2mL、3mL、4mL、5mL、6mL，分别置25mL量瓶中，各加水至6mL，并加5.0％亚硝酸钠溶液1mL，混匀，放置6分钟，再加10％硝酸铝溶液1mL，摇匀，放置6分钟，加氢氧化钠试液10mL，再加水至刻度，摇匀，放置15分钟，以相应的试剂为空白，按照紫外-可见分光光度法，在500nm波长处测定吸光度，以吸光度为横坐标，对照品浓度为纵坐标，绘制标准曲线，得线性回归方程；
d.测定总黄酮：量取不同批次的供试品溶液1mL，分别置25mL容量瓶中，加水至6.0mL，并加5.0％亚硝酸钠溶液1mL，混匀，放置6分钟，再加10％硝酸铝溶液1mL，摇匀，放置6分钟，加氢氧化钠试液10mL，再加水至刻度，摇匀，放置15分钟，以相应的试剂为空白，按照紫外-可见分光光度法，在500nm波长处测定吸光度，将测得的吸光度分别代入上述线性回归方程,即可计算出各批次黄连花薹的总黄酮含量；
(3)盐酸小檗碱的测定
a.供试品溶液的制备：取黄连花薹粗粉约0.2g，置具塞锥形瓶中，加入体积比为100:1的甲醇—盐酸的混合溶液50±5mL，密塞，称定重量，超声处理30±5min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，量取续滤液2mL，置5mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；
b.系列对照品溶液的制备：取盐酸小檗碱对照品适量，加甲醇制成每1mL含0.5348mg的溶液，得对照品储备液，吸取盐酸小檗碱对照品储备液0.5mL、1mL、1.5mL、2mL、2.5mL、3mL，分别置10mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得浓度为26.74μg·mL-1、53.48μg·mL-1、80.22μg·mL-1、106.96μg·mL-1、133.70μg·mL-1、160.44μg·mL-1的系列对照品溶液；
c.绘制盐酸小檗碱浓度与峰面积的标准曲线
色谱条件与系统适应性：Supersil ODS2色谱柱；流动相为体积比为50：50的乙腈-0.05mol·L-1磷酸二氢钾溶液；检测波长为345nm，进样量10μL；
将上述系列对照品溶液按照上述色谱条件进样，测定峰面积，并以峰面积为纵坐标，盐酸小檗碱浓度为横坐标，绘制标准曲线，得线性回归方程；
d.测定盐酸小檗碱：取不同批次的供试品溶液，按照上述色谱条件进样，测定峰面积，将测得的峰面积分别代入上述线性回归方程,即可计算出各批次黄连花薹的盐酸小檗碱含量；
(4)计算综合评分
a.将各批次黄连花薹干燥方式中耗时最小的时间规定为单位1，每增加50h依次递减0.1，得各批次黄连花薹干燥时间转化值；
b.将测得的各批次黄连花薹的总黄酮含量和盐酸小檗碱含量代入公式：综合评分＝40×盐酸小檗碱含量/最大盐酸小檗碱含量+30×总黄酮含量/最大总黄酮含量+30×干燥时间转化值/最大干燥时间转化值中计算出各批次黄连花薹的综合评分；
式中最大盐酸小檗碱含量、最大总黄酮含量、最大干燥时间转化值是指所有批次黄连花薹中盐酸小檗碱含量的最大值、总黄酮含量的最大值、干燥时间转化值的最大值；
(5)验证
应用“IBM SPSS Statistics”软件对各批次黄连花薹进行系统聚类分析，聚类分析的结果与综合评分的结果至少80％吻合。
2.根据权利要求1所述的黄连花薹的品质评价方法，其特征在于：步骤(3)a中所述超声处理的功率为250W，频率为40KHz。
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