发明内容
本发明的目的是提供一种中药大青叶的质量检测方法,该方法利用中药大青叶的电喷雾质谱做指纹图谱,利用高效液相色谱法测定了中药大青叶中核苷和嘌呤类成分的含量,并利用紫外-可见分光光度法测定了中药大青叶中总黄酮的含量,保证了中药大青叶质量检测方法的科学性和质量检测的先进性。
本发明利用软电离质谱技术对中药大青叶进行检测,根据得到的中药大青叶的电喷雾指纹图谱中特征指纹峰的个数及强度,对中药大青叶的质量进行初步评价,本发明考虑到中药大青叶中含有多种核苷和嘌呤类成分,并且以胞苷、腺嘌呤、尿苷、鸟苷和腺苷为主,因此本发明以这五种成分作为标准对照品,通过高效液相色谱测定,得到各标准对照品对应色谱峰的峰面积,根据标准曲线测定供试样品中胞苷、腺嘌呤、尿苷、鸟苷和腺苷的含量;本发明还考虑到中药大青叶中含有多种黄酮类成分,主要以碳苷黄酮和氧苷黄酮为主,因此本发明利用紫外-可见分光光度法,采用芦丁作为标准对照品,硝酸铝与黄酮类化合物形成配合物的显色原理进行测定,完成一种中药大青叶的质量检测方法,
实施本发明的技术方案如下:
(1)供试样品溶液的制备
以大青叶为原料,称取大青叶药材饮片2-10g,加40-200mL水分别煎煮两次,每次1h,过滤,合并滤液,加入滤液的3倍体积的乙醇,搅匀,静置24h,过滤,减压浓缩并干燥,得到大青叶水提取物,将得到的大青叶水提取物加25-100mL水使溶解,加入25-100mL乙酸乙酯分别萃取3次,合并乙酸乙酯萃取液,减压浓缩并干燥,残渣以50%(V/V)甲醇溶解并定容至10mL摇匀,即为供试品溶液1;萃取后的部分加入25-100mL水饱和正丁醇分别萃取3次,合并水饱和正丁醇萃取液,减压浓缩并干燥,残渣以60%(V/V)乙醇溶解并定容至25mL,即为供试品溶液2,
(2)供试样品的电喷雾指纹图谱
样品的电喷雾指纹图谱通过如下步骤得到:取5-10μL供试品溶液1,用甲醇稀释至100-500μL,做电喷雾质谱分析,电喷雾质谱实验条件如下:大气压化学电离源,正离子电离方式,放电电流为4.0-5.0μA,气化温度350-450℃,流动注入泵进样流速3-8μL/min,扫描范围质荷比(m/z)50-1000,在m/z100-300范围内,存在m/z120、m/z146、m/z149、m/z163、m/z181、m/z187、m/z239、m/z249、m/z263和m/z279离子,
(3)核苷和嘌呤类成分含量测定
高效液相色谱实验条件如下:C18色谱柱:4.6mm×250mm,5μm;柱温:20-35℃;流动相:水和甲醇;水与甲醇体积比为90∶10-95∶5;洗脱时间:15-30min;紫外检测器检测波长:230-280nm;样品进样量:5-20μL;
核苷和嘌呤类成分含量测定方法如下:分别精密称取1mg的标准对照品:胞苷、腺嘌呤、尿苷、鸟苷和腺苷,加60%(V/V)乙醇定容至10mL容量瓶中,配成标准对照品溶液;
高效液相色谱测定:各标准对照品溶液分别以2、4、6、8、10μL进样,测得各标准对照品的高效液相色谱峰面积;以所得各标准对照品峰面积为纵坐标,各对应标准对照品含量为横坐标分别做标准曲线,分别计算得线性回归方程;然后对供试品溶液2进行高效液相色谱测定,得到各标准对照品对应色谱峰的峰面积,根据标准曲线测得供试品溶液2中各标准对照品的含量,并结合供试品2的质量与原生药材的质量的比例,经计算得到各标准对照品的含量为胞苷0.27-0.30mg/g、腺嘌呤0.10-0.12mg/g、尿苷0.54-0.57mg/g、鸟苷0.31-0.34mg/g、腺苷0.27-0.30mg/g;
(4)总黄酮含量测定
总黄酮含量测定方法:精密称量20mg芦丁对照品,用60%(V/V)乙醇溶解并定容至25mL容量瓶中,摇匀,即为芦丁标准对照品溶液,备用;用移液枪精密移取芦丁对照品溶液0、40、80、120、160、200μL,分别置6个25mL容量瓶中,分别加入5%(m/V)亚硝酸钠水溶液0.2mL,摇匀,静置6min,再分别加入10%(m/V)硝酸铝水溶液0.2mL,摇匀,静置6min,再分别加入4%(m/V)氢氧化钠水溶液1mL,加60%(V/V)乙醇定容至刻度,摇匀,静置15min,作为待测溶液,于490-510nm波长处测定待测溶液的吸光度,以芦丁对照品溶液的吸光度(A)为纵坐标,对应芦丁对照品的浓度(C)为横坐标做线性回归。得到芦丁对照品的标准工作曲线和线性回归方程,然后根据供试品溶液2的吸光度和得到的芦丁对照品的标准工作曲线,测得供试品溶液2中总黄酮的含量。根据供试样品2的质量与原生药材质量的比例,通过计算得到中药大青叶中总黄酮的含量以芦丁计为3.63-3.85mg/g,完成一种中药大青叶的质量检测方法。
有益效果:本发明利用中药大青叶的电喷雾质谱作为指纹图谱,再结合高效液相色谱对中药大青叶中核苷和嘌呤类成分的含量测定结果以及紫外-可见分光光度法对中药大青叶中总黄酮的含量测定结果,可以对中药大青叶的质量进行评价。
具体实施方式
实施例1
(1)供试样品溶液的制备
以大青叶为原料,称取大青叶药材饮片2g,加40mL水分别煎煮两次,每次1h,过滤,合并滤液,加入滤液的3倍体积的乙醇,搅匀,静置24h,过滤,减压浓缩并干燥,得到大青叶水提取物,将得到的大青叶水提取物加25mL水使溶解,加入25mL乙酸乙酯分别萃取3次,合并乙酸乙酯萃取液,减压浓缩并干燥,残渣以50%(V/V)甲醇溶解并定容至10mL摇匀,即为供试品溶液1;萃取后的部分加入25mL水饱和正丁醇分别萃取3次,合并水饱和正丁醇萃取液,减压浓缩并干燥,残渣以60%(V/V)乙醇溶解并定容至25mL,即为供试品溶液2,
(2)供试样品的电喷雾指纹图谱
样品的电喷雾指纹图谱通过如下步骤得到:取5μL供试品溶液1,用甲醇稀释至100μL,做电喷雾质谱分析,电喷雾质谱实验条件如下:大气压化学电离源,正离子电离方式,放电电流为4.0μA,气化温度380℃,流动注入泵进样流速3μL/min,扫描范围质荷比(m/z)50-1000,在m/z100-300范围内,存在m/z120、m/z146、m/z149、m/z163、m/z181、m/z187、m/z239、m/z249、m/z263和m/z279离子,
(3)核苷和嘌呤类成分含量测定
高效液相色谱实验条件如下:C18色谱柱:4.6mm×250mm,5μm;柱温:20℃;流动相:水和甲醇;水与甲醇体积比为90∶10-95∶5;洗脱时间:20min;紫外检测器检测波长:230nm;样品进样量:20μL;
核苷和嘌呤类成分含量测定方法如下:分别精密称取1mg的标准对照品:胞苷、腺嘌呤、尿苷、鸟苷和腺苷,加60%(V/V)乙醇定容至10mL容量瓶中,配成标准对照品溶液;
高效液相色谱测定:各标准对照品溶液分别以2、4、6、8、10μL进样,测得各标准对照品的高效液相色谱峰面积;以所得各标准对照品峰面积为纵坐标,各对应标准对照品含量为横坐标分别做标准曲线,分别计算得线性回归方程;然后对供试品溶液2进行高效液相色谱测定,得到各标准对照品对应色谱峰的峰面积,根据标准曲线测得供试品溶液2中各标准对照品的含量,并结合供试品2的质量与原生药材的质量的比例,经计算得到各标准对照品的含量为胞苷0.27-0.28mg/g、腺嘌呤0.10-0.11mg/g、尿苷0.55-0.56mg/g、鸟苷0.31-0.32mg/g、腺苷0.28-0.29mg/g,
(4)总黄酮含量测定
总黄酮含量测定方法:精密称量20mg芦丁对照品,用60%(V/V)乙醇溶解并定容至25mL容量瓶中,摇匀,即为芦丁标准对照品溶液,备用;用移液枪精密移取芦丁对照品溶液0、40、80、120、160、200μL,分别置6个25mL容量瓶中,分别加入5%(m/V)亚硝酸水钠溶液0.2mL,摇匀,静置6min,再分别加入10%(m/V)硝酸铝水溶液0.2mL,摇匀,静置6min,再分别加入4%(m/V)氢氧化钠水溶液1mL,加60%(V/V)乙醇定容至刻度,摇匀,静置15min,作为待测溶液,于490nm波长处测定待测溶液的吸光度,以芦丁对照品溶液的吸光度(A)为纵坐标,对应芦丁对照品的浓度(C)为横坐标做线性回归。得到芦丁对照品的标准工作曲线和线性回归方程,然后根据供试品溶液2的吸光度和得到的芦丁对照品的标准工作曲线,测得供试品溶液2中总黄酮的含量。根据供试样品2的质量与原生药材质量的比例,通过计算得到中药大青叶中总黄酮的含量以芦丁计为3.65-3.72mg/g,完成一种中药大青叶的质量检测方法,
实施例2
(1)供试样品溶液的制备
以大青叶为原料,称取大青叶药材饮片4g,加80mL水分别煎煮两次,每次1h,过滤,合并滤液,加入滤液的3倍体积的乙醇,搅匀,静置24h,过滤,减压浓缩并干燥,得到大青叶水提取物,将得到的大青叶水提取物加50mL水使溶解,加入50mL乙酸乙酯分别萃取3次,合并乙酸乙酯萃取液,减压浓缩并干燥,残渣以50%(V/V)甲醇溶解并定容至10mL摇匀,即为供试品溶液1;萃取后的部分加入50mL水饱和正丁醇分别萃取3次,合并水饱和正丁醇萃取液,减压浓缩并干燥,残渣以60%(V/V)乙醇溶解并定容至25mL,即为供试品溶液2,
(2)供试样品的电喷雾指纹图谱
样品的电喷雾指纹图谱通过如下步骤得到:取6μL供试品溶液1,用甲醇稀释至150μL,做电喷雾质谱分析,电喷雾质谱实验条件如下:大气压化学电离源,正离子电离方式,放电电流为4.3μA,气化温度400℃,流动注入泵进样流速7μL/min,扫描范围质荷比(m/z)50-1000,在m/z100-300范围内,存在m/z120、m/z146、m/z149、m/z163、m/z181、m/z187、m/z239、m/z249、m/z263和m/z279离子,
(3)核苷和嘌呤类成分含量测定
高效液相色谱实验条件如下:C18色谱柱:4.6mm×250mm,5μm;柱温:30℃;流动相:水和甲醇;水与甲醇体积比为90∶10-90∶10;洗脱时间:15min;紫外检测器检测波长:240nm;样品进样量:15μL;
核苷和嘌呤类成分含量测定方法如下:分别精密称取1mg的标准对照品:胞苷、腺嘌呤、尿苷、鸟苷和腺苷,加60%(V/V)乙醇定容至10mL容量瓶中,配成标准对照品溶液;
高效液相色谱测定:各标准对照品溶液分别以2、4、6、8、10μL进样,测得各标准对照品的高效液相色谱峰面积;以所得各标准对照品峰面积为纵坐标,各对应标准对照品含量为横坐标分别做标准曲线,分别计算得线性回归方程;然后对供试品溶液2进行高效液相色谱测定,得到各标准对照品对应色谱峰的峰面积,根据标准曲线测得供试品溶液2中各标准对照品的含量,并结合供试品2的质量与原生药材的质量的比例,经计算得到各标准对照品的含量为胞苷0.29-0.30mg/g、腺嘌呤0.11-0.12mg/g、尿苷0.56-0.57mg/g、鸟苷0.32-0.33mg/g、腺苷0.29-0.30mg/g,
(4)总黄酮含量测定
总黄酮含量测定方法:精密称量20mg芦丁对照品,用60%(V/V)乙醇溶解并定容至25mL容量瓶中,摇匀,即为芦丁标准对照品溶液,备用;用移液枪精密移取芦丁对照品溶液0、40、80、120、160、200μL,分别置6个25mL容量瓶中,分别加入5%(m/V)亚硝酸水钠溶液0.2mL,摇匀,静置6min,再分别加入10%(m/V)硝酸铝水溶液0.2mL,摇匀,静置6min,再分别加入4%(m/V)氢氧化钠水溶液1mL,加60%乙醇(V/V)定容至刻度,摇匀,静置15min,作为待测溶液,于500nm波长处测定待测溶液的吸光度,以芦丁对照品溶液的吸光度(A)为纵坐标,对应芦丁对照品的浓度(C)为横坐标做线性回归。得到芦丁对照品的标准工作曲线和线性回归方程,然后根据供试品溶液2的吸光度和得到的芦丁对照品的标准工作曲线,测得供试品溶液2中总黄酮的含量。根据供试样品2的质量与原生药材质量的比例,通过计算得到中药大青叶中总黄酮的含量以芦丁计为3.70-3.81mg/g,完成一种中药大青叶的质量检测方法,
实施例3
(1)供试样品溶液的制备
以大青叶为原料,称取大青叶药材饮片6g,加120mL水分别煎煮两次,每次1h,过滤,合并滤液,加入滤液的3倍体积的乙醇,搅匀,静置24h,过滤,减压浓缩并干燥,得到大青叶水提取物,将得到的大青叶水提取物加50mL水使溶解,加入50mL乙酸乙酯分别萃取3次,合并乙酸乙酯萃取液,减压浓缩并干燥,残渣以50%(V/V)甲醇溶解并定容至10mL摇匀,即为供试品溶液1;萃取后的部分加入50mL水饱和正丁醇分别萃取3次,合并水饱和正丁醇萃取液,减压浓缩并干燥,残渣以60%(V/V)乙醇溶解并定容至25mL,即为供试品溶液2,
(2)供试样品的电喷雾指纹图谱
样品的电喷雾指纹图谱通过如下步骤得到:取8μL供试品溶液1,用甲醇稀释至250μL,做电喷雾质谱分析,电喷雾质谱实验条件如下:大气压化学电离源,正离子电离方式,放电电流为4.2μA,气化温度450℃,流动注入泵进样流速5μL/min,扫描范围质荷比(m/z)50-1000,在m/z100-300范围内,存在m/z120、m/z146、m/z149、m/z163、m/z181、m/z187、m/z239、m/z249、m/z263和m/z279离子,
(3)核苷和嘌呤类成分含量测定
高效液相色谱实验条件如下:C18色谱柱:4.6mm×250mm,5μm;柱温:25℃;流动相:水和甲醇;水与甲醇体积比为95∶5-95∶5;洗脱时间:30min;紫外检测器检测波长:254nm;样品进样量:10μL;
核苷和嘌呤类成分含量测定方法如下:分别精密称取1mg的标准对照品:胞苷、腺嘌呤、尿苷、鸟苷和腺苷,加60%(V/V)乙醇定容至10mL容量瓶中,配成标准对照品溶液;
高效液相色谱测定:各标准对照品溶液分别以2、4、6、8、10μL进样,测得各标准对照品的高效液相色谱峰面积;以所得各标准对照品峰面积为纵坐标,各对应标准对照品含量为横坐标分别做标准曲线,分别计算得线性回归方程;然后对供试品溶液2进行高效液相色谱测定,得到各标准对照品对应色谱峰的峰面积,根据标准曲线测得供试品溶液2中各标准对照品的含量,并结合供试品2的质量与原生药材的质量的比例,经计算得到各标准对照品的含量为胞苷0.28-0.29mg/g、腺嘌呤0.10-0.11mg/g、尿苷0.55-0.56mg/g、鸟苷0.31-0.32mg/g、腺苷0.27-0.28mg/g,
(4)总黄酮含量测定
总黄酮含量测定方法:精密称量20mg芦丁对照品,用60%(V/V)乙醇溶解并定容至25mL容量瓶中,摇匀,即为芦丁标准对照品溶液,备用;用移液枪精密移取芦丁对照品溶液0、40、80、120、160、200μL,分别置6个25mL容量瓶中,分别加入5%(m/V)亚硝酸水钠溶液0.2mL,摇匀,静置6min,再分别加入10%(m/V)硝酸铝水溶液0.2mL,摇匀,静置6min,再分别加入4%(m/V)氢氧化钠水溶液1mL,加60%(V/V)乙醇定容至刻度,摇匀,静置15min,作为待测溶液,于500nm波长处测定待测溶液的吸光度,以芦丁对照品溶液的吸光度(A)为纵坐标,对应芦丁对照品的浓度(C)为横坐标做线性回归。得到芦丁对照品的标准工作曲线和线性回归方程,然后根据供试品溶液2的吸光度和得到的芦丁对照品的标准工作曲线,测得供试品溶液2中总黄酮的含量。根据供试样品2的质量与原生药材质量的比例,通过计算得到中药大青叶中总黄酮的含量以芦丁计为3.77-3.85mg/g,完成一种中药大青叶的质量检测方法,
实施例4
(1)供试样品溶液的制备
以大青叶为原料,称取大青叶药材饮片8g,加160mL水分别煎煮两次,每次1h,过滤,合并滤液,加入滤液的3倍体积的乙醇,搅匀,静置24h,过滤,减压浓缩并干燥,得到大青叶水提取物,将得到的大青叶水提取物加100mL水使溶解,加入100mL乙酸乙酯分别萃取3次,合并乙酸乙酯萃取液,减压浓缩并干燥,残渣以50%(V/V)甲醇溶解并定容至10mL摇匀,即为供试品溶液1;萃取后的部分加入100mL水饱和正丁醇分别萃取3次,合并水饱和正丁醇萃取液,减压浓缩并干燥,残渣以60%(V/V)乙醇溶解并定容至25mL,即为供试品溶液2,
(2)供试样品的电喷雾指纹图谱
样品的电喷雾指纹图谱通过如下步骤得到:取9μL供试品溶液1,用甲醇稀释至400μL,做电喷雾质谱分析,电喷雾质谱实验条件如下:大气压化学电离源,正离子电离方式,放电电流为4.1μA,气化温度420℃,流动注入泵进样流速6μL/min,扫描范围质荷比(m/z)50-1000,在m/z100-300范围内,存在m/z120、m/z146、m/z149、m/z163、m/z181、m/z187、m/z239、m/z249、m/z263和m/z279离子,
(3)核苷和嘌呤类成分含量测定
高效液相色谱实验条件如下:C18色谱柱:4.6mm×250mm,5μm;柱温:35℃;流动相:水和甲醇;水与甲醇体积比为90∶10-95∶5;洗脱时间:25min;紫外检测器检测波长:265nm;样品进样量:5μL;
核苷和嘌呤类成分含量测定方法如下:分别精密称取1mg的标准对照品:胞苷、腺嘌呤、尿苷、鸟苷和腺苷,加60%(V/V)乙醇定容至10mL容量瓶中,配成标准对照品溶液;
高效液相色谱测定:各标准对照品溶液分别以2、4、6、8、10μL进样,测得各标准对照品的高效液相色谱峰面积;以所得各标准对照品峰面积为纵坐标,各对应标准对照品含量为横坐标分别做标准曲线,分别计算得线性回归方程;然后对供试品溶液2进行高效液相色谱测定,得到各标准对照品对应色谱峰的峰面积,根据标准曲线测得供试品溶液2中各标准对照品的含量,并结合供试品2的质量与原生药材的质量的比例,经计算得到各标准对照品的含量为胞苷0.28-0.29mg/g、腺嘌呤0.10-0.11mg/g、尿苷0.56-0.57mg/g、鸟苷0.33-0.34mg/g、腺苷0.29-0.30mg/g,
(4)总黄酮含量测定
总黄酮含量测定方法:精密称量20mg芦丁对照品,用60%(V/V)乙醇溶解并定容至25mL容量瓶中,摇匀,即为芦丁标准对照品溶液,备用;用移液枪精密移取芦丁对照品溶液0、40、80、120、160、200μL,分别置6个25mL容量瓶中,分别加入5%(m/V)亚硝酸水钠溶液0.2mL,摇匀,静置6min,再分别加入10%(m/V)硝酸铝水溶液0.2mL,摇匀,静置6min,再分别加入4%(m/V)氢氧化钠水溶液1mL,加60%(V/V)乙醇定容至刻度,摇匀,静置15min,作为待测溶液,于510nm波长处测定待测溶液的吸光度,以芦丁对照品溶液的吸光度(A)为纵坐标,对应芦丁对照品的浓度(C)为横坐标做线性回归。得到芦丁对照品的标准工作曲线和线性回归方程,然后根据供试品溶液2的吸光度和得到的芦丁对照品的标准工作曲线,测得供试品溶液2中总黄酮的含量。根据供试样品2的质量与原生药材质量的比例,通过计算得到中药大青叶中总黄酮的含量以芦丁计为3.63-3.75mg/g,完成一种中药大青叶的质量检测方法,
实施例5
(1)供试样品溶液的制备
以大青叶为原料,称取大青叶药材饮片10g,加200mL水分别煎煮两次,每次1h,过滤,合并滤液,加入滤液的3倍体积的乙醇,搅匀,静置24h,过滤,减压浓缩并干燥,得到大青叶水提取物,将得到的大青叶水提取物加100mL水使溶解,加入100mL乙酸乙酯分别萃取3次,合并乙酸乙酯萃取液,减压浓缩并干燥,残渣以50%(V/V)甲醇溶解并定容至10mL摇匀,即为供试品溶液1;萃取后的部分加入100mL水饱和正丁醇分别萃取3次,合并水饱和正丁醇萃取液,减压浓缩并干燥,残渣以60%(V/V)乙醇溶解并定容至25mL,即为供试品溶液2,
(2)供试样品的电喷雾指纹图谱
样品的电喷雾指纹图谱通过如下步骤得到:取10μL供试品溶液1,用甲醇稀释至500μL,做电喷雾质谱分析,电喷雾质谱实验条件如下:大气压化学电离源,正离子电离方式,放电电流为4.5μA,气化温度350℃,流动注入泵进样流速8μL/min,扫描范围质荷比(m/z)50-1000,在m/z100-300范围内,存在m/z120、m/z146、m/z149、m/z163、m/z181、m/z187、m/z239、m/z249、m/z263和m/z279离子,
(3)核苷和嘌呤类成分含量测定
高效液相色谱实验条件如下:C18色谱柱:4.6mm×250mm,5μm;柱温:25℃;流动相:水和甲醇;水与甲醇体积比为95∶5-95∶5;洗脱时间:30min;紫外检测器检测波长:280nm;样品进样量:5μL;
核苷和嘌呤类成分含量测定方法如下:分别精密称取1mg的标准对照品:胞苷、腺嘌呤、尿苷、鸟苷和腺苷,加60%(V/V)乙醇定容至10mL容量瓶中,配成标准对照品溶液;
高效液相色谱测定:各标准对照品溶液分别以2、4、6、8、10μL进样,测得各标准对照品的高效液相色谱峰面积;以所得各标准对照品峰面积为纵坐标,各对应标准对照品含量为横坐标分别做标准曲线,分别计算得线性回归方程;然后对供试品溶液2进行高效液相色谱测定,得到各标准对照品对应色谱峰的峰面积,根据标准曲线测得供试品溶液2中各标准对照品的含量,并结合供试品2的质量与原生药材的质量的比例,经计算得到各标准对照品的含量为胞苷0.27-0.28mg/g、腺嘌呤0.10-0.11mg/g、尿苷0.54-0.55mg/g、鸟苷0.31-0.32mg/g、腺苷0.27-0.28mg/g,
(4)总黄酮含量测定
总黄酮含量测定方法:精密称量20mg芦丁对照品,用60%(V/V)乙醇溶解并定容至25mL容量瓶中,摇匀,即为芦丁标准对照品溶液,备用;用移液枪精密移取芦丁对照品溶液0、40、80、120、160、200μL,分别置6个25mL容量瓶中,分别加入5%(m/V)亚硝酸水钠溶液0.2mL,摇匀,静置6min,再分别加入10%(m/V)硝酸铝水溶液0.2mL,摇匀,静置6min,再分别加入4%(m/V)氢氧化钠水溶液1mL,加60%(V/V)乙醇定容至刻度,摇匀,静置15min,作为待测溶液,于500nm波长处测定待测溶液的吸光度,以芦丁对照品溶液的吸光度(A)为纵坐标,对应芦丁对照品的浓度(C)为横坐标做线性回归。得到芦丁对照品的标准工作曲线和线性回归方程,然后根据供试品溶液2的吸光度和得到的芦丁对照品的标准工作曲线,测得供试品溶液2中总黄酮的含量。根据供试样品2的质量与原生药材质量的比例,通过计算得到中药大青叶中总黄酮的含量以芦丁计为3.76-3.84mg/g,完成一种中药大青叶的质量检测方法。