CN111272905B - 茺蔚子药材的特征图谱构建方法和检测方法 - Google Patents

茺蔚子药材的特征图谱构建方法和检测方法 Download PDF

Info

Publication number
CN111272905B
CN111272905B CN202010223351.4A CN202010223351A CN111272905B CN 111272905 B CN111272905 B CN 111272905B CN 202010223351 A CN202010223351 A CN 202010223351A CN 111272905 B CN111272905 B CN 111272905B
Authority
CN
China
Prior art keywords
mobile phase
medicinal material
motherwort fruit
fruit medicinal
solution
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202010223351.4A
Other languages
English (en)
Other versions
CN111272905A (zh
Inventor
李国卫
吴文平
邓淙友
何民友
吴淑珍
吴世蓉
魏梅
孙冬梅
程学仁
陈向东
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Guangdong Yifang Pharmaceutical Co Ltd
Original Assignee
Guangdong Yifang Pharmaceutical Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Guangdong Yifang Pharmaceutical Co Ltd filed Critical Guangdong Yifang Pharmaceutical Co Ltd
Priority to CN202010223351.4A priority Critical patent/CN111272905B/zh
Publication of CN111272905A publication Critical patent/CN111272905A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN111272905B publication Critical patent/CN111272905B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G01N30/06—Preparation
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
    • G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
    • G01N30/34—Control of physical parameters of the fluid carrier of fluid composition, e.g. gradient
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/86—Signal analysis
    • G01N30/8675—Evaluation, i.e. decoding of the signal into analytical information
    • G01N30/8679—Target compound analysis, i.e. whereby a limited number of peaks is analysed
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/86—Signal analysis
    • G01N30/8675—Evaluation, i.e. decoding of the signal into analytical information
    • G01N30/8686—Fingerprinting, e.g. without prior knowledge of the sample components

Landscapes

  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Library & Information Science (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明涉及一种茺蔚子药材的特征图谱构建方法和检测方法。所述特征图谱构建方法包括如下步骤：对照品溶液和供试品溶液制备；采用超高效液相色谱法对所述对照品溶液和供试品溶液进行检测；所述超高效液相色谱法采用的流动相为：以乙腈作为流动相A，体积浓度为0.05～0.15％的三氟乙酸水溶液为流动相B；采用梯度洗脱。所述特征图谱构建方法构建了具有多个共有峰的茺蔚子药材的特征图谱，能够对茺蔚子药材的进行全面、有效、快速的评价。

Description

茺蔚子药材的特征图谱构建方法和检测方法
技术领域
本发明涉及中药材的检测方法，特别是涉及茺蔚子药材的特征图谱构建方法和检测方法。
背景技术
茺蔚子收载于2015年版《中国药典》，为唇形科植物益母草Leonurus ja ponicusHoutt.的干燥成熟果实，其性微寒，味辛、苦，具有活血调经，清肝明目的功能，临床主要用于月经不调，经期痛经，目赤翳障，头晕胀痛等。茺蔚子广泛分布于全国各地，主要生于山野荒地、田埂、河滩、草地、路旁、溪边等处，部分地区有栽培。
茺蔚子的化学成分众多，主要包括生物碱、黄酮类、二萜类、强心苷、脂肪酸、氨基酸、矿质元素等，其中生物碱类成分主要包括盐酸水苏碱、益母草碱、益母草啶、益母草宁等；黄酮类包括汉黄芩素、大豆素、洋芹素及苷、槲皮素、山奈素及苷、芦丁等；脂肪酸类包括延胡索酸、月桂酸、油酸、亚油酸、亚麻酸等。
目前，关于茺蔚子的质量检测，主要是对茺蔚子的化学成分盐酸水苏碱进行含量测定。而市场上茺蔚子产地多、质量不一，采用测定单一成分含量的方法来评价药材质量，不足以全面反映药材的整体质量。
发明内容
基于此，有必要提供一种茺蔚子药材的特征图谱构建方法。所述特征图谱构建方法构建了具有多个共有峰的茺蔚子药材的特征图谱，能够对茺蔚子药材的进行全面、有效、快速的评价。
具体技术方案如下：
一种茺蔚子药材的特征图谱构建方法，包括如下步骤：
对照品溶液和供试品溶液制备，其中，
所述对照品溶液的制备步骤包括：取4-羟基苯甲酸对照品，以溶剂溶解，得对照品溶液；所述供试品溶液的制备步骤包括：取茺蔚子药材，加入提取溶剂进行提取，过滤，滤液蒸干，所得固状物再以所述提取溶剂溶解，滤过，取续滤液，得供试品溶液；
采用超高效液相色谱对所述对照品溶液和供试品溶液进行检测；
所述超高效液相色谱采用的流动相为：以乙腈作为流动相A，体积浓度为0.05～0.15％的三氟乙酸水溶液为流动相B；采用梯度洗脱。
在其中一个实施例中，所述梯度洗脱的方法如下：
0～3min，保持流动相A的体积百分比为0％；
3～15min，流动相A的体积百分比由0％上升至4％；
15～22min，流动相A的体积百分比由4％上升至6％；
22～25min，流动相A的体积百分比由6％上升至9％；
25～28min，流动相A的体积百分比由9％上升至10％；
28～40min，保持流动相A的体积百分比为10％；
40～40.1min，流动相A的体积百分比由10％上升至80％；
40.1～45min，保持流动相A的体积百分比为80％。
在其中一个实施例中，所述超高效液相色谱采用的柱温为28～32℃，流速为0.2～0.4mL/min。
在其中一个实施例中，所述超高效液相色谱采用紫外监测，监测波长为250～260nm。
在其中一个实施例中，所述对照品溶液的制备步骤中，所述溶剂为甲醇。
在其中一个实施例中，所述供试品溶液的制备步骤中，所述提取溶剂为体积浓度为65～75％的甲醇水溶液，所述提取的方式为加热至回流，提取25～35min。
在其中一个实施例中，所述供试品溶液的制备步骤中，进行所述提取前，将所述茺蔚子药材制粉，并过45～60目标准筛。
在其中一个实施例中，所述特征图谱包含13个共有峰。
本发明还提供一种茺蔚子药材的检测方法，包括如下步骤：
待测样品溶液制备：取待测茺蔚子药材，加入提取溶剂进行提取，过滤，滤液蒸干，所得固状物再以所述提取溶剂溶解，滤过，取续滤液，得待测样品溶液；
采用超高效液相色谱对所述待测样品溶液进行检测，并与如上所述特征图谱构建方法构建的特征图谱进行比对；
所述超高效液相色谱采用的流动相为：以乙腈作为流动相A，体积浓度为0.05～0.15％的三氟乙酸水溶液为流动相B；采用梯度洗脱。
在其中一个实施例中，所述梯度洗脱的方法如下：
0～3min，保持流动相A的体积百分比为0％；
3～15min，流动相A的体积百分比由0％上升至4％；
15～22min，流动相A的体积百分比由4％上升至6％；
22～25min，流动相A的体积百分比由6％上升至9％；
25～28min，流动相A的体积百分比由9％上升至10％；
28～40min，保持流动相A的体积百分比为10％；
40～40.1min，流动相A的体积百分比由10％上升至80％；
40.1～45min，保持流动相A的体积百分比为80％。
在其中一个实施例中，所述超高效液相色谱采用的柱温为28～32℃，流速为0.2～0.4mL/min。
在其中一个实施例中，所述超高效液相色谱法采用紫外监测，监测波长为250～260nm。
在其中一个实施例中，所述待测样品溶液的制备步骤中，所述提取溶剂为体积浓度为65～75％的甲醇水溶液，所述提取的方式为加热至回流，提取25～35min。
在其中一个实施例中，所述待测样品溶液的制备步骤中，进行所述提取前，将所述待测茺蔚子药材制粉，并过45～60目标准筛。
与现有技术相比较，本发明具有如下有益效果：
本发明利用超高效液相色谱法(UPLC)，结合合适的流动相设置，构建了茺蔚子药材的UPLC特征图谱，该特征图谱能够充分反应茺蔚子药材的特征峰信息，展示茺蔚子药材的化学成分特征，能够较全面地评价不同产地茺蔚子药材及其质量，且快速有效，为茺蔚子药材的质量控制研究提供了切实可行的参考方法。
附图说明
图1为18批不同产地茺蔚子药材的UPLC特征图谱；
图2为茺蔚子药材的特征图谱以及共有峰归属确认，其中，A：4-羟基苯甲酸对照品溶液图谱；B：茺蔚子药材的特征图谱；峰7(S)：4-羟基苯甲酸；
图3为18批不同产地茺蔚子药材的聚类分析结果；
图4为18批不同产地茺蔚子药材的主成分分析三维得分散点图。
具体实施方式
为了便于理解本发明，下面将参照实施例对本发明进行更全面的描述，以下给出了本发明的较佳实施例。但是，本发明可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例。提供这些实施例的目的是使对本发明的公开内容的理解更加透彻全面。
除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本发明。本文所使用的术语“和/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。
本发明的实施例提供一种茺蔚子药材的特征图谱构建方法，包括如下步骤：
对照品溶液和供试品溶液制备，其中，
所述对照品溶液的制备步骤包括：取4-羟基苯甲酸对照品，以溶剂溶解，得对照品溶液；所述供试品溶液的制备步骤包括：取茺蔚子药材，加入提取溶剂进行提取，过滤，滤液蒸干，所得固状物再以所述提取溶剂溶解，滤过，取续滤液，得供试品溶液；
采用超高效液相色谱对所述对照品溶液和供试品溶液进行检测；
所述超高效液相色谱采用的流动相为：以乙腈作为流动相A，体积浓度为0.05～0.15％的三氟乙酸水溶液为流动相B；采用梯度洗脱。
在此基础之上，可进一步运用相似度分析、聚类分析和主成分分析对不同产地的茺蔚子药材特征图谱进行分析，以初步总结出不同产地茺蔚子特征图谱的共性。
在其中一个具体的实施例中，所述梯度洗脱的方法如下：
0～3min，保持流动相A的体积百分比为0％；
3～15min，流动相A的体积百分比由0％上升至4％；
15～22min，流动相A的体积百分比由4％上升至6％；
22～25min，流动相A的体积百分比由6％上升至9％；
25～28min，流动相A的体积百分比由9％上升至10％；
28～40min，保持流动相A的体积百分比为10％；
40～40.1min，流动相A的体积百分比由10％上升至80％；
40.1～45min，保持流动相A的体积百分比为80％。
在其中一个具体的实施例中，所述超高效液相色谱采用的柱温为28～32℃，流速为0.2～0.4mL/min。合理控制柱温和流速，能够优化各组分在流动相和色谱柱固定相中的分配效率，有利于各特征的分离，同时耗时较短。具体地，所述柱温包括但不限于如下温度：28℃、29℃、30℃、32℃；所述流速包括但不限于如下：0.2mL/min、0.3mL/min、0.4mL/min。
在其中一个具体的实施例中，所述超高效液相色谱采用紫外监测，监测波长为250～260nm。具体地，所述检测波长包括但不限于如下波长：250nm、253nm、254nm、255nm、257nm、260nm。在其中一个优选的实施例中，所述检测波长为254nm。
在其中一个具体的实施例中，所述对照品溶液的制备步骤中，所述溶剂为甲醇。
在其中一个具体的实施例中，所述供试品溶液的制备步骤中，所述提取溶剂为体积浓度为65～75％的甲醇水溶液，所述提取的方式为加热至回流，提取25～35min。作为优选地，所述提取溶剂为体积浓度为68～72％的甲醇水溶液。
在其中一个具体的实施例中，所述供试品溶液的制备步骤中，进行所述提取前，将所述茺蔚子药材制粉，并过45～60目标准筛。具体地，所述制粉的方法可以通过如将所述茺蔚子药材粉碎并研磨制得，也可以通过如先将所述茺蔚子药材制成饮片，再研磨制得。
在其中一个具体的实施例中，所述特征图谱包含13个共有峰。
在其中一个具体的实施例中，所述检测步骤中，所述对照溶液和/或所述供试品溶液的进样量为1～3μL。所述对照溶液和所述供试品溶液的进样量可以相同，也可以不同。更为具体地，所述对照溶液和/或所述供试品溶液的进样量包括但不限于如下体积：1μL、2μL、3μL。
本发明的实施例还提供一种茺蔚子药材的检测方法，包括如下步骤：
待测样品溶液制备：取待测茺蔚子药材，加入提取溶剂进行提取，过滤，滤液蒸干，所得固状物再以所述提取溶剂溶解，滤过，取续滤液，得待测样品溶液；
采用超高效液相色谱对所述待测样品溶液进行检测，并与如上所述特征图谱构建方法构建的特征图谱进行比对；
所述超高效液相色谱采用的流动相为：以乙腈作为流动相A，体积浓度为0.05～0.15％的三氟乙酸水溶液为流动相B；采用梯度洗脱。
可以理解地，为使获得的图谱结果与如上所述特征图谱具有可比性，如上检测方法中，采用的超高效液相色谱的条件理应相同或相似于所述特征图谱构建方法。其具体的实施例和优点在此不再赘述。
在其中一个具体的实施例中，与所述供试品溶液相同或相似的，所述待测样品溶液的制备步骤中，所述提取溶剂为体积浓度为65～75％的甲醇水溶液，所述提取的方式为加热至回流，提取25～35min。作为优选地，所述提取溶剂为体积浓度为68～72％的甲醇水溶液。
在其中一个具体的实施例中，与所述供试品溶液相同或相似的，所述待测样品溶液的制备步骤中，进行所述提取前，将所述待测茺蔚子药材制粉，并过45～60目标准筛。
更为具体地，获得待测样品的色谱图后，可从如下方面进行评价：
(1)相似度评价：比较不同产地茺蔚子药材的色谱图与特征图谱的相似度；
(2)聚类分析：运用SPSS 20.0软件对不同产地的茺蔚子药材进行系统聚类，采用组间平均数联结法，以夹角余弦作为样品相似度的距离公式，得到不同产地的茺蔚子药材的聚类结果；
(3)主成分分析：针对特征图谱中确定的主成分，对茺蔚子药材进行综合评价，得到不同产地茺蔚子药材的质量分析结果。
以下为具体的实施例，如无特别说明，采用的原料试剂或设备均为现有可获得的。如无特别说，以下实施例中提及的“％”均为体积百分比或体积浓度。
实施例1茺蔚子药材的特征图谱构建方法
1仪器与试药
1.1仪器Waters H-Class型超高效液相色谱仪(美国沃特世有限公司)；WatersHSS T3色谱柱(2.1mm×150mm，1.8μm)(美国沃特世有限公司)；HWS28型恒温水浴锅(上海一恒科技有限公司)，HQ-500DE型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)，ME204E型万分之一天平，XP26型百万分之一天平(梅特勒-托利多公司)。
1.2试药18批茺蔚子药材经广东一方制药有限公司魏梅主任中药师鉴定为唇形科植物益母草Leonurus ja ponicus Houtt.的干燥成熟果实。产地及编号见表1。
表1样品信息表
Figure BDA0002426844710000091
4-羟基苯甲酸(批号：101149-201903，含量：100.0％)，由中国食品药品检定研究院提供；甲醇、乙腈、三氟乙酸为色谱级，水为超纯水，其它试剂为分析纯。
2方法与结果
2.1色谱条件采用Waters HSS T3(2.1mm×150mm，1.8μm)色谱柱；以乙腈为流动相A，以0.1％三氟乙酸水溶液为流动相B，梯度洗脱为：0～3min，0％A；3～15min，0→4％A；15～22min，4→6％A；22～25min，6→9％A；25～28min，9→10％A；28～40min，10％A；40～40.1min，10→80％A；40.1～45min，80％A；柱温为30℃；流速为0.30mL/min；检测波长为254nm。每次检测的样品进样量为1μL。
2.2供试品溶液制备取茺蔚子药材粉末(过50目标准筛)约2.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70％甲醇水溶液100mL，称定重量，加热回流30min，放冷，再称定重量，用70％甲醇水溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，蒸干，残渣用70％甲醇溶解，转移至5mL量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2.3对照品溶液制备取4-羟基苯甲酸对照品适量，精密称量，加甲醇制成浓度为20μg/mL的对照品溶液，即得。
2.4特征图谱的建立
2.4.1特征图谱共有模式的建立取18批茺蔚子药材按“2.2”项下方法制备成供试品溶液，按“2.1”项下色谱条件分别进样，记录色谱图。根据18批样品测定结果，利用中药色谱特征图谱相似度评价系统(国家药典委员会，2012.0版)建立特征图谱，设定S1为参照图谱，采用平均数法生成对照图谱，标定共有峰13个，结果见图1，各批样品的共有峰峰面积见表2。对茺蔚子药材特征图谱的13个共有峰进行鉴定，通过与对照品比对，鉴定出1个主要成分，即4-羟基苯甲酸，见图2。
表2特征图谱共有峰峰面积结果
Figure BDA0002426844710000101
2.4.2各产地药材特征图谱相似度评价以5个产地茺蔚子药材生产的共有模式(R)为对照特征图谱，18批茺蔚子药材与对照特征图谱的相似度范围为0.801～0.982，除广西省玉林市3批与对照特征图谱相似度小于0.88以外，其他各批次药材与对照特征图谱的相似度均在0.88以上，说明其他各产地药材质量较为接近，见表3。
表3不同产地茺蔚子样品特征图谱相似度评价
Figure BDA0002426844710000111
2.4.3聚类分析运用SPSS 20.0软件对5个产地茺蔚子样品进行系统聚类，采用组间平均数联结法，以夹角余弦作为样品相似度的距离公式。聚类分析将茺蔚子样品分为3类，Ⅰ类包括S7、S8、S16、S17、S18，即河南省信阳市2批，山东省临沂市3批聚为一类；Ⅱ类包括S1、S2、S3、S4、S5、S6、S12、S13、S14、S15，即河南省南阳市3批、河南省信阳市3批、黑龙江省绥化市4批，共10批聚为一类；Ⅲ类包括S9、S10、S11，即广西省玉林市3批聚为一类，结果见图3。
2.4.4主成分分析
2.4.4.1共有峰主成分分析用SPSS20.0软件对18批茺蔚子药材特征图谱所得的13个共有峰进行主成分分析，得出相关矩阵的特征值及其方差，见表5。由表4可知，前3个成分的特征值为6.446、2.124和1.437，对总方差的累积贡献率达76.981％，基本保留了原样本的信息。所以确定提取的主成分数为3个。初始因子载荷矩阵见表5，第一主成分主要反映了来自原始指标色谱峰4，10，12的信息，第二主成分主要反映了来自原始指标色谱峰2，3的信息，第三主成分主要反映了来自原指标色谱峰6和峰7的信息，故仅用前3个主成分就可表示原UPLC数据的主要信息。前3名变量的权重值分别为0.942、0.933、0.887，对应峰12、峰4和峰10，说明峰4、峰10和峰12是判断不同产地茺蔚子药材质量的重要性因素。
表4特征根、各主成分的贡献率、各因子初始因子载荷矩阵
Figure BDA0002426844710000121
表5各因子初始因子载荷矩阵
Figure BDA0002426844710000122
2.5方法学考察
2.5.1精密度试验取同一批茺蔚子样品(S1)，按“2.2”项下方法制备供试品溶液，按“2.1”项色谱条件重复进样测定6次，以4-羟基苯甲酸峰为参照峰，计算13个共有峰的相对保留时间及相对峰面积的RSD。结果表明，13个色谱峰的相对保留时间及相对峰面积RSD均小于3％，说明仪器精密度良好。
2.5.2重现性试验取同一批茺蔚子样品(S1)，按“2.2”项下方法平行制备6份供试品溶液，按“2.1”项色谱条件分别进样测定，以4-羟基苯甲酸峰为参照峰，计算13个共有峰的相对保留时间及相对峰面积的RSD。结果表明，13个色谱峰的相对保留时间及相对峰面积RSD均小于3％，表明本方法重现性良好。
2.5.3稳定性试验取同一供试品溶液，按“2.1”项色谱条件，分别于0，2，4，6，8，12，24h进样，以4-羟基苯甲酸峰为参照峰，计算13个共有峰的相对保留时间及相对峰面积的RSD。结果表明，13个色谱峰的相对保留时间及相对峰面积RSD均小于3％，表明供试品在24h内稳定。
实施例2不同产地茺蔚子药材的检测及评价方法
将18批茺蔚子药材按同“2.2”项下方法制备成待测样品溶液(可以理解地，也可以直接采用相应的供试品溶液作为待测样品溶液)，按“2.1”项下色谱条件分别进样，记录色谱图。针对实施例1中确认的3个主成分，即峰12、峰4和峰10对18批不同产地茺蔚子药材进行综合评价，按方差贡献率加权计算综合得分，结果见表6。排名前5的样品中，山东省临沂市的3批，河南省信阳市的2批；排名前5～10的样品中，黑龙江省绥化市的3批，河南省信阳市的2两批。总体来说，山东省临沂市产地的茺蔚子药材质量较优且稳定；广西省玉林市产地的整体质量较差，综合排名靠后；河南省南阳市的茺蔚子药材质量一般且稳定；河南省信阳市的茺蔚子药材质量不是很均匀，有优有劣。三维得分散点图见图4，可知18批不同产地茺蔚子药材可以分为三类，其中Ⅰ类包括S7、S8、S16、S17、S18，即河南省信阳市2批，山东省临沂市3批分为一类；Ⅱ类包括S1、S2、S3、S12、S13、S14、S15，即河南省南阳市3批、黑龙江省绥化市4批，共7批分为一类；Ⅲ类包括S4、S5、S6、S9、S10、S11，即河南省信阳市3批、广西省玉林市3批，共6批为一类。
表6主成分得分、综合得分及排序
Figure BDA0002426844710000141
以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims (14)

1.一种茺蔚子药材的特征图谱构建方法，其特征在于，包括如下步骤：
对照品溶液和供试品溶液制备，其中，
所述对照品溶液的制备步骤包括：取4-羟基苯甲酸对照品，以溶剂溶解，得对照品溶液；所述供试品溶液的制备步骤包括：取茺蔚子药材，加入提取溶剂进行提取，过滤，滤液蒸干，所得固状物再以所述提取溶剂溶解，滤过，取续滤液，得供试品溶液；
采用超高效液相色谱法对所述对照品溶液和供试品溶液进行检测；
所述超高效液相色谱法采用的流动相为：以乙腈作为流动相A，体积浓度为0.05～0.15％的三氟乙酸水溶液为流动相B；采用梯度洗脱；
所述梯度洗脱的方法如下：
0～3min，保持流动相A的体积百分比为0％；
3～15min，流动相A的体积百分比由0％上升至4％；
15～22min，流动相A的体积百分比由4％上升至6％；
22～25min，流动相A的体积百分比由6％上升至9％；
25～28min，流动相A的体积百分比由9％上升至10％；
28～40min，保持流动相A的体积百分比为10％；
40～40.1min，流动相A的体积百分比由10％上升至80％；
40.1～45min，保持流动相A的体积百分比为80％；
所述超高效液相色谱法采用的色谱柱为Waters HSS T3色谱柱。
2.根据权利要求1所述的茺蔚子药材的特征图谱构建方法，其特征在于，所述超高效液相色谱法采用的柱温为28～32℃，流速为0.2～0.4mL/min。
3.根据权利要求1所述的茺蔚子药材的特征图谱构建方法，其特征在于，所述超高效液相色谱法采用紫外检测，检测 波长为250～260nm。
4.根据权利要求1所述的茺蔚子药材的特征图谱构建方法，其特征在于，所述对照品溶液的制备步骤中，所述溶剂为甲醇。
5.根据权利要求1所述的茺蔚子药材的特征图谱构建方法，其特征在于，所述供试品溶液的制备步骤中，所述提取溶剂为体积浓度为65～75％的甲醇水溶液，所述提取的方式为加热至回流，提取25～35min。
6.根据权利要求1所述的茺蔚子药材的特征图谱构建方法，其特征在于，所述供试品溶液的制备步骤中，所述提取溶剂为体积浓度为68～72％的甲醇水溶液。
7.根据权利要求1所述的茺蔚子药材的特征图谱构建方法，其特征在于，所述供试品溶液的制备步骤中，进行所述提取前，将所述茺蔚子药材制粉，并过45～60目标准筛。
8.根据权利要求1～7任一项所述的茺蔚子药材的特征图谱构建方法，其特征在于，所述特征图谱包含13个共有峰。
9.一种茺蔚子药材的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：
待测样品溶液制备：取待测茺蔚子药材，加入提取溶剂进行提取，过滤，滤液蒸干，所得固状物再以所述提取溶剂溶解，滤过，取续滤液，得待测样品溶液；
采用超高效液相色谱对所述待测样品溶液进行检测，并与权利要求1～8任一项所述特征图谱构建方法构建的特征图谱进行比对；
所述超高效液相色谱采用的流动相为：以乙腈作为流动相A，体积浓度为0.05～0.15％的三氟乙酸水溶液为流动相B；采用梯度洗脱；
所述梯度洗脱的方法如下：
0～3min，保持流动相A的体积百分比为0％；
3～15min，流动相A的体积百分比由0％上升至4％；
15～22min，流动相A的体积百分比由4％上升至6％；
22～25min，流动相A的体积百分比由6％上升至9％；
25～28min，流动相A的体积百分比由9％上升至10％；
28～40min，保持流动相A的体积百分比为10％；
40～40.1min，流动相A的体积百分比由10％上升至80％；
40.1～45min，保持流动相A的体积百分比为80％；
所述超高效液相色谱采用的色谱柱为Waters HSS T3色谱柱。
10.根据权利要求9所述的茺蔚子药材的检测方法，其特征在于，所述超高效液相色谱采用的柱温为28～32℃，流速为0.2～0.4mL/min。
11.根据权利要求9所述的茺蔚子药材的检测方法，其特征在于，所述超高效液相色谱采用紫外检测，检测波长为250～260nm。
12.根据权利要求9～11任一项所述的茺蔚子药材的检测方法，其特征在于，所述待测样品溶液的制备步骤中，所述提取溶剂为体积浓度为65～75％的甲醇水溶液，所述提取的方式为加热至回流，提取25～35min。
13.根据权利要求12所述的茺蔚子药材的检测方法，其特征在于，所述待测样品溶液的制备步骤中，所述提取溶剂为体积浓度为68～72％的甲醇水溶液。
14.根据权利要求9～11任一项所述的茺蔚子药材的检测方法，其特征在于，所述待测样品溶液的制备步骤中，进行所述提取前，将所述待测茺蔚子药材制粉，并过45～60目标准筛。
CN202010223351.4A 2020-03-26 2020-03-26 茺蔚子药材的特征图谱构建方法和检测方法 Active CN111272905B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010223351.4A CN111272905B (zh) 2020-03-26 2020-03-26 茺蔚子药材的特征图谱构建方法和检测方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010223351.4A CN111272905B (zh) 2020-03-26 2020-03-26 茺蔚子药材的特征图谱构建方法和检测方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN111272905A CN111272905A (zh) 2020-06-12
CN111272905B true CN111272905B (zh) 2022-03-11

Family

ID=70998364

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202010223351.4A Active CN111272905B (zh) 2020-03-26 2020-03-26 茺蔚子药材的特征图谱构建方法和检测方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN111272905B (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113759043B (zh) * 2021-09-06 2023-03-21 北京康仁堂药业有限公司 茺蔚子特征图谱及其构建方法和盐酸水苏碱含量测定方法以及茺蔚子配方颗粒及其制备方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104458948A (zh) * 2014-12-05 2015-03-25 江苏省农业科学院 一种秸秆酚酸类化合物的检测方法
CN109655565A (zh) * 2019-01-07 2019-04-19 南京海昌中药集团有限公司 益母草膏的指纹图谱检测方法
CN110057945A (zh) * 2019-05-29 2019-07-26 南京市中西医结合医院 益母草的质量检测方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104458948A (zh) * 2014-12-05 2015-03-25 江苏省农业科学院 一种秸秆酚酸类化合物的检测方法
CN109655565A (zh) * 2019-01-07 2019-04-19 南京海昌中药集团有限公司 益母草膏的指纹图谱检测方法
CN110057945A (zh) * 2019-05-29 2019-07-26 南京市中西医结合医院 益母草的质量检测方法

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Quality assessment of crude and processed Leonuri Fructus by chemical and color analysis combined with chemometric method;Xin-dan Liu 等;《Chinese Herbal Medicines》;20181231;1-12 *
基于主成分分析的不同产地茺蔚子质量评价研究;杨小露 等;《广东药科大学学报》;20170831;第33卷(第04期);462-465 *
益母草流浸膏的指纹图谱和多指标成分含量测定方法研究;钟宁远 等;《中国现代应用药学》;20151231;第32卷(第12期);1467-1471 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN111272905A (zh) 2020-06-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104215698B (zh) 裸花紫珠药材、中间体及其制剂的指纹图谱检测方法和标准指纹图谱
CN102370891A (zh) 一种用hplc指纹图谱鉴别铁皮石斛真伪的方法
CN100535655C (zh) 头花蓼药材的检测方法
CN111272904B (zh) 诃子和绒毛诃子药材特征图谱的构建方法和应用
CN111272905B (zh) 茺蔚子药材的特征图谱构建方法和检测方法
CN109374785A (zh) 淡竹叶药材uplc特征图谱的构建方法和检测方法
CN108267535B (zh) 青皮药材指纹图谱检测方法及其指纹图谱
CN108663440A (zh) 裸花紫珠药材uplc指纹图谱构建方法及标准指纹图谱
CN109884219A (zh) 白术药材uplc特征图谱的构建方法和检测方法
CN111624267A (zh) 一种泽泻中16-氧代泽泻醇a的高效液相检测方法
CN110501433A (zh) 一种不同产地裸花紫珠药材的鉴别方法
CN109828053A (zh) 一种对石生金钗石斛和树生金钗石斛进行色谱鉴别的方法
CN106018647B (zh) 一种建立葵花盘hplc标准指纹图谱的方法
CN111323496A (zh) Hplc检测管萼山豆根中4种生物碱含量的方法
CN110441440B (zh) 一种冬葵果药材uplc特征图谱的构建方法及其鉴别方法
CN109358120B (zh) 一种槐角制剂的特征图谱检测方法
CN109490450B (zh) 细叶石仙桃药材指纹图谱的建立方法及其指纹图谱
CN112946132A (zh) 月季花药材指纹图谱及其构建方法和月季花药材的质量检测方法
CN112858495A (zh) 一种熊胆开明片hplc特征图谱构建方法
CN104458954A (zh) 一种菟丝子配方颗粒指纹图谱及其建立方法
CN115586279B (zh) 一种竹叶柴胡或其制剂的检测方法及其指纹图谱的构建方法
CN114152687B (zh) 一种包含莲子的中药复方的指纹图谱构建方法及其应用
CN113671066B (zh) 粉团蔷薇根药材的质量控制方法
CN109738531B (zh) 一种克白合剂指纹图谱检测方法
CN115963197A (zh) 一种铁筷子药材的质量检测方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant