CN108779087A

CN108779087A - 羟丙基噻唑烷羧酰胺衍生物的l-缬氨酸酯及其盐形式、晶体多晶型物

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Publication number: CN108779087A
Application number: CN201780015011.9A
Authority: CN
Inventors: P·纳克索斯佩奇; M·施瓦兹; C·乔兰德-莱布伦; A·夸特罗帕尼; V·波梅尔
Original assignee: Merck Serono SA
Current assignee: Merck Serono SA
Priority date: 2016-01-04
Filing date: 2017-01-04
Publication date: 2018-11-09
Also published as: EP3400217B1; DK3400217T3; PL3400217T3; HUE058872T2; AU2021218003A1; IL260286B; ES2915948T3; MX2018008157A; KR20180099708A; JP2019501897A; IL289256A; UA125118C2; JP2023002668A; LT3397622T; ZA201903769B; AU2021218009A1; JP7432284B2; EA036990B1; WO2017118639A1; WO2017118641A1

Abstract

本发明提供了式(I)的羟丙基噻唑烷羧酰胺衍生物，即(2S)‑3‑([1,1'‑联苯]‑4‑基磺酰基)‑N‑[(1S)‑3‑羟基‑1‑苯基丙基]‑l,3‑噻唑烷‑2‑甲酰胺的L‑缬氨酸酯，以及其盐和晶体多晶型物。所述化合物抑制前列腺素F受体(PGF2α)并且可用于治疗病症如在妊娠期早期早产或痛经。

Description

羟丙基噻唑烷羧酰胺衍生物的L-缬氨酸酯及其盐形式、晶体多晶型物

技术领域

本发明涉及能够结合并抑制前列腺素F2α(PGF2α)受体活性的化学组合物，如化合物、盐及晶体多晶型物，以及通过向需要治疗的患者施用这些组合物来预防在妊娠期早期早产的方法。

背景技术

早产是发达国家中引起围产期死亡的主要原因，并且在全部分娩中占约7％至10％(Berkowitz等人,《流行病学综述(Epidemiol.Rev.)》15:414-443(1993))。重症，尤其是呼吸窘迫综合症、脑室内出血、支气管与肺发育不良及坏死性小肠结肠炎在早产婴儿中的发生率远大于足月婴儿。长期损害，如大脑性麻痹、视觉障碍及听觉损失在早产婴儿中也较为常见。目前，在美国，早产一直是导致婴儿死亡和发病的主导原因，在此情况下，尽管产科医学得到了显著发展，但婴儿死亡率仍高于许多其他工业化国家，使得每年用于低出生体重婴儿的新生儿重症监护的成本超过50亿美元。如果考虑早产相关疾病如呼吸窘迫综合症、心脏疾病、大脑性麻痹、癫痫症及重度学习障碍等的医疗服务，则与此护理相关的实际成本甚至更高。

在过去40年的临床调查期间，尽管使用了多种治疗剂，但早产率并未明显下降。早产很难预防，而且尽管有宫缩抑制疗法作为管理早产的基石，但有关该疗法在此疾病中的价值尚未达成一致意见。可用的宫缩抑制剂本身不能使分娩延长超过48小时，并且这些药剂中大部分都缺乏子宫选择性并因此可能会对母体和胎儿造成严重副作用。

从根本上讲，足月分娩和早产的过程是类似的，因为它们共有以子宫收缩、子宫颈扩张及胚膜活化为特征的共同生理终点。差别在于这些过程发生的孕龄以及使其活化的机制。足月分娩被认为是终末路径生理性活化的结果，而早产是以多种病因为特征的病理状况，其中此路径的一种或多种组分异常活化。

子宫收缩受子宫肌层细胞中的各种受体刺激或抑制。据推测，子宫肌层活化是由收缩相关蛋白质(contraction-associated protein，CAP)，包括肌动蛋白、肌球蛋白、连接蛋白-43以及催产素和前列腺素的受体协调表达的结果。一般来说，引起钙进入细胞内存储或细胞内存储释放钙的受体会刺激收缩。不过，与如环单磷酸腺苷(cAMP)之类环状核苷酸的产生相关联的受体会使子宫松弛。举例来说，催产素和前列腺素F(FP)受体是刺激性的，而与cAMP形成相关联的β2肾上腺素受体和前列腺素E2受体是抑制性的。

经显示，在子宫组织中，前列腺素E2(PGE2)和F2α(PGF2α)诱导子宫颈变化并引起子宫收缩，这是分娩和娩出生理过程中的两个关键事件。人类子宫肌层中的FP受体受PGF2α活化而引起细胞内钙浓度升高，细胞内钙浓度升高继而引起子宫平滑肌细胞收缩(Abramovitz等人,《生物化学杂志(J.Biol.Chem.)》269:2632-2636(1994)及Senior等人,《英国药理学杂志(Br.J.Pharmacol.)》108:501-506(1993))。子宫组织中FP受体上调直至足月(Al-Matubsi等人,《生殖生物学(Biol.Reprod.)》65:1029-1037(2001))。前列腺素合成抑制剂(如吲哚美辛(indomethacin)和尼美舒利(nimesulide))显示出一定宫缩抑制作用，但也具有不能避免的副作用，而且其未被许可用于临床提出了有关胚胎安全性的问题(Norton等人,《新英格兰医学杂志(New Engl.J.Med.)》329:1602-1067(1993)及Peruzzi等人,《新英格兰医学杂志》354:1615(1999))。仍需要开发出具有子宫肌层选择性的治疗剂，这些治疗剂允许持续抑制导致分娩的子宫收缩并延长妊娠至胚胎成熟度增加以提高存活几率的阶段。

发明内容

本发明涵盖能够拮抗前列腺素F2α(PGFF2α)与前列腺素F受体之间的相互作用的羟丙基噻唑烷羧酰胺衍生物的α-氨基酯以及其盐。这些化合物可以被施用给受试者，如怀孕的人类女性受试者，以治疗或预防早产。本发明还提供了合成这些化合物的方法，以及用于制备其晶体形式的方法。

在第一方面，本发明提供了一种由式(I)表示的化合物，

(3S)-3-({[(2S)-3-(联苯-4-基磺酰基)-1,3-噻唑烷-2-基]羰基}-氨基)-3-(4-氟苯基)丙基L-缬氨酸酯或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，所述化合物是由式(III)表示，即(3S)-3-({[(2S)-3-(联苯-4-基磺酰基)-1,3-噻唑烷-2-基]羰基}-氨基)-3-(4-氟苯基)丙基L-缬氨酸酯盐酸盐。

在一些实施方案中，所述化合物以约1nM的亲和力结合人类前列腺素F2α受体。本发明的化合物展示相对于其它前列腺素受体亚型，选择性结合前列腺素F受体如前列腺素F2α的能力。举例来说，本发明的化合物对于前列腺素F2α受体展现的亲和力比所观察到的对于前列腺素E2受体的亲和力高约10倍。此外，本发明的化合物对于前列腺素F2α受体展现的亲和力比对于其它前列腺素受体亚型如前列腺素E1、E3、E4、D1、D2、I1及I2受体亚型的亲和力高约100倍或更高(例如约100倍至约1,000倍，如约100倍、110倍、120倍、130倍、140倍、150倍、160倍、170倍、180倍、190倍、200倍、210倍、220倍、230倍、240倍、250倍、260倍、270倍、280倍、290倍、300倍、310倍、320倍、330倍、340倍、350倍、360倍、370倍、380倍、390倍、400倍、410倍、420倍、430倍、440倍、450倍、460倍、470倍、480倍、490倍、500倍、510倍、520倍、530倍、540倍、550倍、560倍、570倍、580倍、590倍、600倍、610倍、620倍、630倍、640倍、650倍、660倍、670倍、680倍、690倍、700倍、710倍、720倍、730倍、740倍、750倍、760倍、770倍、780倍、790倍、800倍、810倍、820倍、830倍、840倍、850倍、860倍、870倍、880倍、890倍、900倍、910倍、920倍、930倍、940倍、950倍、960倍、970倍、980倍、990倍、1,000倍或更高倍数)。在一些实施方案中，所述化合物可溶于水溶液中达到约300μg/mL至约500μg/mL的浓度，如约380μg/mL的浓度。

在一些实施方案中，所述化合物抑制细胞中如哺乳动物细胞中三磷酸肌醇的合成。在一些实施方案中，哺乳动物细胞是人类细胞，如子宫肌层细胞。在一些实施方案中，子宫肌层细胞是子宫肌细胞。在一些实施方案中，在向受试者施用所述化合物之后，所述化合物诱导受试者体内子宫收缩幅度降低。举例来说，相对于在施用之前记录的受试者的子宫收缩幅度测量值，所述化合物可以诱导降低约40％至约50％。在一些实施方案中，在向受试者施用所述化合物之后，所述化合物在受试者体内展现约1至约4小时的半衰期。在一些实施方案中，在向受试者施用所述化合物之后，所述化合物在约0.25至约2小时内于受试者体内达到最大血浆浓度。

在一些实施方案中，受试者是哺乳动物。在一些实施方案中，哺乳动物是人类。在一些实施方案中，哺乳动物是非人类，如犬科动物或大鼠。在一些实施方案中，所述化合物是经口施用给受试者。在一些实施方案中，所述化合物是经静脉内施用给受试者。

另一方面，本发明涵盖一种由式(III)表示的化合物

其中所述化合物呈结晶状态。

在一些实施方案中，所述化合物在约7.0°2θ、约8.1°2θ、约10.0°2θ、约20.1°2θ、约21.0°2θ及约23.5°2θ处展现特征性X射线粉末衍射峰。在一些实施方案中，所述化合物还在约12.0°2θ、约13.1°2θ、约14.1°2θ、约16.4°2θ、约18.4°2θ及约29.5°2θ处展现X射线粉末衍射峰。在一些实施方案中，所述化合物是以大体上如图19、22、29、45-49及54中的任一个中所描绘的X射线粉末衍射谱图表征。举例来说，在一些实施方案中，所述化合物以大体上如图49中所描绘的X射线粉末衍射谱图表征。

在一些实施方案中，所述化合物展现中心在约1.1ppm、约3.3ppm、约4.9ppm、约5.4ppm、约7.1ppm、约7.7ppm、约7.9ppm及约8.0ppm处的¹H核磁共振(NMR)峰。在一些实施方案中，所述化合物以大体上如图21中所描绘的¹H NMR谱图表征。

在一些实施方案中，如由差示扫描热量测定法所测量，所述化合物在约145℃至约147℃展现吸热。在一些实施方案中，如由差示扫描热量测定法所测量，所述化合物另外在约214℃展现吸热。在一些实施方案中，所述化合物以大体上如图20中所描绘的差示扫描热量测定曲线表征。在一些实施方案中，如由差示扫描热量测定法所测量，所述化合物另外在约228℃展现吸热。在一些实施方案中，所述化合物以大体上如图23中所描绘的差示扫描热量测定曲线表征。

在一些实施方案中，如由热解重量分析所测量，所述化合物当从25℃加热至100℃时展现约0.2％至约0.6％的重量减轻。在一些实施方案中，如由热解重量分析所测量，所述化合物当从100℃加热至160℃时展现约2.5％至约3.5％的重量减轻。在一些实施方案中，所述化合物展现大体上如图24中所描绘的热解重量分析曲线。

在另一个方面，本发明提供了一种药物组合物，该药物组合物含有上文所述方面中的任一个的化合物。所述药物组合物可以任选地含有一种或多种赋形剂。在一些实施方案中，如例如由高压液相色谱法(HPLC)或NMR波谱法所确定，所述化合物的纯度是至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或99.9％。在一些实施方案中，所述化合物和/或药物组合物被配制成供经口施用给受试者。在一些实施方案中，所述药物组合物是片剂、胶囊、软胶囊(gel cap)、散剂、液体溶液或液体悬浮液。在一些实施方案中，所述化合物和/或药物组合物被配制成供静脉内施用给受试者。

在一些实施方案中，所述药物组合物含有两种或更多种治疗剂，如本发明化合物(例如由式(I)表示的化合物或其药学上可接受的盐，如由式(III)表示的化合物)和另外的治疗剂。举例来说，所述药物组合物可以含有两种或更多种治疗剂彼此的混合物以共施用给患者，如用于治疗或预防早产。本发明的药物组合物可以被施用给受试者以使受试者分娩发作延迟例如一天或数天，或者一周或数周，如约1天至约16周(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30天，或约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15或16周)。在一些实施方案中，受试者正在经历早产。在一些实施方案中，所述药物组合物是在早产起始之前施用给受试者(例如人类受试者)。本发明的药物组合物可以被施用给受试者(例如人类受试者)以预防在剖腹产之前分娩。本发明的药物组合物可以被施用给受试者(例如人类受试者)以治疗或预防痛经。本发明的药物组合物可以被施用给受试者，如怀孕的女性人类受试者，以缓解与分娩有关的一种或多种症状，如阴道出血和子宫膜破裂。

在一些实施方案中，另外的治疗剂是另外的宫缩抑制剂。

在一些实施方案中，所述药物组合物包含由式(I)表示的化合物或其药学上可接受的盐，和另外的宫缩抑制剂。在一些实施方案中，所述药物组合物包含由式(III)表示的化合物和另外的宫缩抑制剂。

在一些实施方案中，所述另外的宫缩抑制剂是催产素受体拮抗剂，如阿托西班(atosiban)、瑞托西班(retosiban)、巴卢西班(barusiban)、亚泊西班(epelsiban)及诺拉西班(nolasiban)，或其一种或多种变化形式、配制物、结晶形式或衍生物。

在一些实施方案中，所述药物组合物包含由式(I)表示的化合物或其药学上可接受的盐，和阿托西班。在一些实施方案中，所述药物组合物包含由式(III)表示的化合物和阿托西班。在一些实施方案中，所述药物组合物包含由式(I)表示的化合物或其药学上可接受的盐，和阿托西班的变化形式，如美国专利第4,504,469号或第4,402,942号中所描述的变化形式，所述专利各自的公开内容以引用的方式并入本文中。在一些实施方案中，所述药物组合物包含由式(III)表示的化合物和阿托西班的变化形式，如美国专利第4,504,469号或第4,402,942号中所描述的变化形式。

在一些实施方案中，所述药物组合物包含由式(I)表示的化合物或其药学上可接受的盐，和瑞托西班。在一些实施方案中，所述药物组合物包含由式(III)表示的化合物和瑞托西班。在一些实施方案中，所述药物组合物包含由式(I)表示的化合物或其药学上可接受的盐，和瑞托西班的变化形式，如美国专利第7,514,437号、第8,367,673号、第8,541,579号、第8,071,594号、第8,357,685号、第8,937,179号或US 2016/0074413中所描述的变化形式，这些专利各自的公开内容以引用的方式并入本文中。在一些实施方案中，所述药物组合物包含由式(III)表示的化合物和瑞托西班的变化形式，如美国专利第7,514,437号、第8,367,673号、第8,541,579号、第8,071,594号、第8,357,685号、第8,937,179号或US 2016/0074413中所描述的变化形式。

在一些实施方案中，所述药物组合物包含由式(I)表示的化合物或其药学上可接受的盐，和巴卢西班。在一些实施方案中，所述药物组合物包含由式(III)表示的化合物和巴卢西班。在一些实施方案中，所述药物组合物包含由式(I)表示的化合物或其药学上可接受的盐，和巴卢西班的变化形式，如美国专利第6,143,722号、第7,091,314号、第7,816,489号或US 2016/0175283中所描述的变化形式，这些专利的公开内容以引用的方式并入本文中。在一些实施方案中，所述药物组合物包含由式(III)表示的化合物和巴卢西班的变化形式，如美国专利第6,143,722号、第7,091,314号、第7,816,489号或US 2016/0175283中所描述的变化形式。

在一些实施方案中，所述药物组合物包含由式(I)表示的化合物或其药学上可接受的盐，和亚泊西班。在一些实施方案中，所述药物组合物包含由式(III)表示的化合物和亚泊西班。在一些实施方案中，所述药物组合物包含由式(I)表示的化合物或其药学上可接受的盐，和亚泊西班的变化形式，如美国专利第7,514,437号、第8,367,673号、第8,541,579号、第7,550,462号、第7,919,492号、第8,202,864号、第8,742,099号、第9,408,851号、第8,716,286号或第8,815,856号中所描述的变化形式，这些专利各自的公开内容以引用的方式并入本文中。在一些实施方案中，所述药物组合物包含由式(III)表示的化合物和亚泊西班的变化形式，如美国专利第7,514,437号、第8,367,673号、第8,541,579号、第7,550,462号、第7,919,492号、第8,202,864号、第8,742,099号、第9,408,851号、第8,716,286号或第8,815,856号中所描述的变化形式。

在一些实施方案中，所述药物组合物包含由式(I)表示的化合物或其药学上可接受的盐，和诺拉西班。在一些实施方案中，所述药物组合物包含由式(III)表示的化合物和诺拉西班。在一些实施方案中，所述药物组合物包含由式(I)表示的化合物或其药学上可接受的盐，和诺拉西班的变化形式、配制物或结晶形式，如美国专利第7,115,754号或美国专利申请公开第2015/0073032号、第2015/0164859号或第2016/0002160号中所描述的变化形式、配制物或结晶形式，这些专利申请各自的公开内容以引用的方式并入本文中。在一些实施方案中，所述药物组合物包含由式(III)表示的化合物和诺拉西班的变化形式、配制物或结晶形式，如美国专利第7,115,754号或美国专利申请公开第2015/0073032号、第2015/0164859号或第2016/0002160号中所描述的变化形式、配制物或结晶形式。

在一些实施方案中，另外的宫缩抑制剂是β模拟剂，如特布他林(terbutaline)、利托君(ritodrine)、海索那林(hexoprenaline)、沙丁胺醇(albuterol)、非诺特罗(fenoterol)、尼利特林(nylidrin)或奥西那林(orciprenaline)。

在一些实施方案中，另外的宫缩抑制剂是钙通道抑制剂，如二氢吡啶。在一些实施方案中，钙通道抑制剂是硝苯地平(nifedipine)。在一些实施方案中，钙通道抑制剂是尼卡地平(nicardipine)。

在一些实施方案中，另外的宫缩抑制剂是镁盐，如硫酸镁。

在一些实施方案中，另外的宫缩抑制剂是一氧化氮供体，如硝酸甘油。

在一些实施方案中，另外的宫缩抑制剂是催产素受体拮抗剂，如阿托西班、瑞托西班、巴卢西班、亚泊西班、诺拉西班或其变化形式、配制物、结晶形式或衍生物，例如，如本文中所描述。

在一些实施方案中，由式(I)表示的化合物或其药学上可接受的盐被配制成供经口施用，并且另外的宫缩抑制剂被配制成供经口施用。在一些实施方案中，由式(I)表示的化合物或其药学上可接受的盐被配制成供静脉内施用，并且另外的宫缩抑制剂被配制成供静脉内施用。在一些实施方案中，由式(I)表示的化合物或其药学上可接受的盐被配制成供经口施用，并且另外的宫缩抑制剂被配制成供静脉内施用。在一些实施方案中，由式(I)表示的化合物或其药学上可接受的盐被配制成供静脉内施用，并且另外的宫缩抑制剂被配制成供经口施用。在一些实施方案中，由式(I)表示的化合物或其药学上可接受的盐被配制成供经口施用，并且另外的宫缩抑制剂被配制成供肌肉内施用。在一些实施方案中，由式(I)表示的化合物或其药学上可接受的盐被配制成供静脉内施用，并且另外的宫缩抑制剂被配制成供肌肉内施用。

在一些实施方案中，由式(III)表示的化合物被配制成供经口施用，并且另外的宫缩抑制剂被配制成供经口施用。在一些实施方案中，由式(III)表示的化合物被配制成供静脉内施用，并且另外的宫缩抑制剂被配制成供静脉内施用。在一些实施方案中，由式(III)表示的化合物被配制成供经口施用，并且另外的宫缩抑制剂被配制成供静脉内施用。在一些实施方案中，由式(III)表示的化合物被配制成供静脉内施用，并且另外的宫缩抑制剂被配制成供经口施用。在一些实施方案中，由式(III)表示的化合物被配制成供经口施用，并且另外的宫缩抑制剂被配制成供肌肉内施用。在一些实施方案中，由式(III)表示的化合物被配制成供静脉内施用，并且另外的宫缩抑制剂被配制成供肌肉内施用。

在一些实施方案中，另外的治疗剂是孕酮或其变化形式或衍生物，如17-α-羟基孕酮己酸盐。

在一些实施方案中，所述药物组合物包含由式(I)表示的化合物或其药学上可接受的盐，和孕酮或17-α-羟基孕酮己酸盐。在一些实施方案中，由式(I)表示的化合物或其药学上可接受的盐被配制成供经口施用并且孕酮或17-α-羟基孕酮己酸盐被配制成供阴道内施用。在一些实施方案中，由式(I)表示的化合物或其药学上可接受的盐被配制成供静脉内施用并且孕酮或17-α-羟基孕酮己酸盐被配制成供阴道内施用。在一些实施方案中，由式(I)表示的化合物或其药学上可接受的盐和孕酮或17-α-羟基孕酮己酸盐都被配制成供经口施用。在一些实施方案中，由式(I)表示的化合物或其药学上可接受的盐被配制成供静脉内施用并且孕酮或17-α-羟基孕酮己酸盐被配制成供经口施用。

在一些实施方案中，所述药物组合物包含由式(III)表示的化合物和孕酮或17-α-羟基孕酮己酸盐。在一些实施方案中，由式(III)表示的化合物被配制成供经口施用并且孕酮或17-α-羟基孕酮己酸盐被配制成供阴道内施用。在一些实施方案中，由式(III)表示的化合物被配制成供静脉内施用，并且孕酮或17-α-羟基孕酮己酸盐被配制成供阴道内施用。在一些实施方案中，由式(III)表示的化合物和孕酮或17-α-羟基孕酮己酸盐都被配制成供经口施用。在一些实施方案中，由式(III)表示的化合物被配制成供静脉内施用，并且孕酮或17-α-羟基孕酮己酸盐被配制成供经口施用。

在一些实施方案中，另外的治疗剂是皮质类固醇。在一些实施方案中，所述皮质类固醇是倍他米松(betamethasone)。在一些实施方案中，所述皮质类固醇是地塞米松(dexamethasone)。在一些实施方案中，所述皮质类固醇是氢化可的松(hydrocortisone)。在一些实施方案中，由式(I)表示的化合物或其药学上可接受的盐被配制成供经口施用并且皮质类固醇(例如倍他米松、地塞米松或氢化可的松)被配制成供肌肉内施用。在一些实施方案中，由式(I)表示的化合物或其药学上可接受的盐被配制成供静脉内施用并且皮质类固醇(例如倍他米松、地塞米松或氢化可的松)被配制成供肌肉内施用。在一些实施方案中，由式(I)表示的化合物或其药学上可接受的盐被配制成供经口施用并且皮质类固醇(例如倍他米松、地塞米松或氢化可的松)被配制成供经口施用。在一些实施方案中，由式(I)表示的化合物或其药学上可接受的盐被配制成供静脉内施用并且皮质类固醇(例如倍他米松、地塞米松或氢化可的松)被配制成供经口施用。在一些实施方案中，由式(III)表示的化合物被配制成供经口施用，并且皮质类固醇(例如倍他米松、地塞米松或氢化可的松)被配制成供肌肉内施用。在一些实施方案中，由式(III)表示的化合物被配制成供静脉内施用并且皮质类固醇(例如倍他米松、地塞米松或氢化可的松)被配制成供肌肉内施用。在一些实施方案中，由式(III)表示的化合物被配制成供经口施用，并且皮质类固醇(例如倍他米松、地塞米松或氢化可的松)被配制成供经口施用。在一些实施方案中，由式(III)表示的化合物被配制成供静脉内施用，并且皮质类固醇(例如倍他米松、地塞米松或氢化可的松)被配制成供经口施用。

另一方面，本发明提供了一种合成由式(I)表示的化合物或其药学上可接受的盐的方法

所述方法是通过使式(IV)表示的前体

与式(V)表示的前体反应

以形成氨基酯，其中X是保护基。在一些实施方案中，所述方法包括使氨基酯脱除保护基。在一些实施方案中，所述化合物由式(III)表示。

在一些实施方案中，所述方法包括使氨基酯与能够将氨基酯脱除保护基的试剂反应。在一些实施方案中，保护基选自由以下组成的组：叔丁氧基羰基、三苯甲基、4-单甲氧基三苯甲基、4-甲基三苯甲基、3,5-二甲氧基苯基异丙氧基羰基、2-(4-联苯)异丙氧基羰基、2-硝基苯基次磺酰基、9-芴基甲氧基羰基、2-(4-硝基苯基磺酰基)乙氧基羰基、(1,1-二氧代苯并[b]噻吩-2-基)甲氧基羰基、1-(4,4-二甲基-2,6-二氧代亚环己-1-亚基)-3-甲基丁基、2,7-二叔丁基-9-芴基甲氧基羰基、2-氟-9-芴基甲氧基羰基、2-单异辛基-9-芴基甲氧基羰基、2,7-二异辛基-9-芴基甲氧基羰基、四氯邻苯二甲酰基、2-[苯基(甲基)锍基]乙氧基羰基四氟硼酸酯、乙烷磺酰基乙氧基羰基、2-(4-磺基苯基磺酰基)乙氧基羰基、苯甲氧基羰基、烯丙基氧基羰基、邻硝基苯磺酰基、2,4-二硝基苯磺酰基、苯并噻唑-2-磺酰基、2,2,2-三氯乙氧基羰基、二硫杂琥珀酰基、对硝基苯甲氧基羰基、α-叠氮基酸、炔丙基氧基羰基、9-(4-溴苯基)-9-芴基、叠氮基甲氧基羰基、六氟丙酮、2-氯苯甲氧基羰基、三氟乙酰基、2-(甲基磺酰基)乙氧基羰基、苯基二硫基乙氧基羰基及2-吡啶基二硫基乙氧基羰基。

在一些实施方案中，所述试剂选自由以下组成的组：甲烷磺酸、盐酸、三氟乙酸、乙酸、哌啶、1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一-7-烯、吗啉、六亚甲基亚胺、氨、二乙胺、哌嗪、三(2-氨基乙基)胺、肼、1-甲基吡咯烷、碳酸氢钠、氢氧化钠、氢氧化钡、碳酸钠、分子氢、氢溴酸、三溴化硼、四(三苯基膦)钯、硫代苯酚、β-巯基乙醇、2-巯基乙酸、铝汞齐、锌、次磷酸、硼氢化钠、N-巯基乙酰胺、氯化锡(II)、三甲基膦、三丁基膦、三苯膦、四硫代钼酸苯甲基三乙基铵、乙酸钯(II)、氢氟酸、氯化三甲基硅烷、三氟甲烷磺酸三甲基硅烷及三氟甲烷磺酸。

在一些实施方案中，保护基是叔丁氧基羰基并且所述试剂选自由甲烷磺酸、盐酸及三氟乙酸组成的组，如甲烷磺酸。

在一些实施方案中，所述方法包括使氨基酯暴露于电磁辐射。在一些实施方案中，保护基选自由以下组成的组：邻硝基苯甲氧基羰基、4-硝基藜芦基氧基羰基、2-(2-硝基苯基)丙氧基羰基及2-(3,4-亚甲基二氧基-6-硝基苯基)丙氧基羰基。在一些实施方案中，电磁辐射以约300至约400nm波长为特征。

在一些实施方案中，所述方法包括使式(IV)表示的前体与式(V)表示的前体和二酰亚胺反应。在一些实施方案中，二酰亚胺选自由以下组成的组：1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺、N,N'-二异丙基碳二亚胺及N,N'-二环己基碳二亚胺。在一些实施方案中，二酰亚胺是1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺。在一些实施方案中，所述方法包括使式(IV)表示的前体与式(V)表示的前体和苯并三唑衍生物如选自由1-羟基苯并三唑、6-氯-1-羟基苯并三唑及1-羟基-7-氮杂苯并三唑组成的组的苯并三唑衍生物反应。在一些实施方案中，苯并三唑衍生物是1-羟基苯并三唑。

在一些实施方案中，所述方法包括使式(IV)表示的前体与式(V)表示的前体和碱如N,N-二甲氨基吡啶反应。

在一些实施方案中，所述方法包括通过使式(VI)表示的前体

与式(VII)表示的前体反应来合成式(IV)表示的前体

在一些实施方案中，所述方法包括使式(VI)表示的前体与式(VII)表示的前体和一种或多种碱反应。在一些实施方案中，所述一种或多种碱选自二异丙基乙胺、三乙胺及N,N-二甲氨基吡啶组成的组。

在一些实施方案中，所述方法包括使式(VI)表示的前体与式(VII)表示的前体、二异丙基乙胺及N,N-二甲氨基吡啶反应。

在另一个方面，本发明提供了一种制备由式(III)表示的化合物的方法

其中所述方法包括将由式(I)表示的化合物

与盐酸混合。

在一些实施方案中，盐酸是盐酸水溶液。盐酸水溶液可以例如通过在水，如蒸馏水或去离子水中稀释盐酸来制备。在一些实施方案中，所述方法包括制备呈结晶状态的由式(III)表示的化合物。

在一些实施方案中，所述方法包括将由式(I)表示的化合物溶解于乙醇中。在一些实施方案中，所述方法包括将盐酸与乙醇混合。在一些实施方案中，所述方法包括将盐酸与乙酸乙酯混合。在一些实施方案中，所述方法包括经约20至约30分钟时间将由式(I)表示的化合物添加至盐酸中以形成混合物。在一些实施方案中，所述方法包括在添加期间，将混合物的温度维持在约15℃至约25℃。在一些实施方案中，所述方法包括在添加之后将将混合物的温度降低至约5℃。在一些实施方案中，所述方法包括在降低之后，在约0℃至约5℃下搅拌混合物约50分钟至约70分钟。

在一些实施方案中，所述方法包括将由式(I)表示的化合物与盐酸以等摩尔量混合。

另一方面，本发明涵盖由上文所述方法中的任一种制造的化合物。

在另一个方面，本发明提供了一种通过向受试者施用治疗有效量的本发明上述方面中的任一个的化合物或药物组合物来治疗受试者早产的方法。

在另一个方面，本发明提供了一种通过向受试者施用治疗有效量的本发明上述方面中的任一个的化合物或药物组合物来预防受试者早产的方法。

另一方面，本发明提供了一种通过向受试者施用治疗有效量的本发明上述方面中的任一个的化合物或药物组合物来预防受试者在剖腹产之前分娩的方法。

另一方面，本发明提供了一种通过向受试者施用治疗有效量的本发明上述方面中的任一个的化合物或药物组合物来治疗或预防受试者痛经的方法。

另一方面，本发明提供了一种通过向受试者施用治疗有效量的本发明上述方面中的任一个的化合物或药物组合物来治疗或预防受试者子宫内膜异位的方法。

在一些实施方案中，受试者以约24至约34周孕龄为特征。在一些实施方案中，相对于在施用之前记录的受试者子宫收缩幅度测量值，受试者在施用之后展现子宫收缩幅度降低，如降低约40％至约50％(例如约40％、41％、42％、43％、44％、45％、46％、47％、48％、49％或50％)。在一些实施方案中，所述化合物在受试者体内展现的半衰期是约1至约4小时(例如约1小时、1.1小时、1.2小时、1.3小时、1.4小时、1.5小时、1.6小时、1.7小时、1.8小时、1.9小时、2.0小时、2.1小时、2.2小时、2.3小时、2.4小时、2.5小时、2.6小时、2.7小时、2.8小时、2.9小时、3.0小时、3.1小时、3.2小时、3.3小时、3.4小时、3.5小时、3.6小时、3.7小时、3.8小时、3.9小时或4.0小时)。在一些实施方案中，所述化合物在施用约0.25至约2小时(例如约0.25小时、0.3小时、0.4小时、0.5小时、0.6小时、0.7小时、0.8小时、0.9小时、1.0小时、1.1小时、1.2小时、1.3小时、1.4小时、1.5小时、1.6小时、1.7小时、1.8小时、1.9小时或2.0小时)内在受试者体内达到最大血浆浓度。在一些实施方案中，受试者是哺乳动物，如人类。

在一些实施方案中，所述方法包括向受试者经口施用所述化合物或药物组合物。在一些实施方案中，所述方法包括向受试者静脉内施用所述化合物或药物组合物。

在一些实施方案中，所述化合物是与另外的治疗剂组合施用给受试者。在一些实施方案中，所述化合物是与另外的宫缩抑制剂组合施用给受试者。

在一些实施方案中，所述化合物是与催产素受体拮抗剂组合施用给受试者。在一些实施方案中，所述方法包括向受试者经口施用催产素受体拮抗剂。在一些实施方案中，所述方法包括向受试者静脉内施用催产素受体拮抗剂。所述化合物可以在施用催产素受体拮抗剂的同时施用给受试者。在一些实施方案中，所述化合物是在向受试者施用催产素受体拮抗剂之前施用给受试者。在一些实施方案中，所述化合物是在向受试者施用催产素受体拮抗剂之后施用给受试者。在一些实施方案中，将所述化合物与催产素受体拮抗剂混合，并将这些药剂同时施用给受试者。在一些实施方案中，催产素受体拮抗剂是阿托西班、瑞托西班、巴卢西班、亚泊西班或诺拉西班，或其变化形式、配制物、结晶形式或衍生物。

在一些实施方案中，催产素受体拮抗剂是阿托西班或阿托西班的变化形式，如美国专利第4,504,469号或第4,402,942号中所描述的变化形式，这些专利各自的公开内容以引用的方式并入本文中。

在一些实施方案中，催产素受体拮抗剂是瑞托西班或瑞托西班的变化形式，如美国专利第7,514,437号、第8,367,673号、第8,541,579号、第8,071,594号、第8,357,685号、第8,937,179号或US 2016/0074413中所描述的变化形式，这些专利各自的公开内容以引用的方式并入本文中。

在一些实施方案中，催产素受体拮抗剂是巴卢西班或巴卢西班的变化形式，如美国专利第6,143,722号、第7,091,314号、第7,816,489号或US 2016/0175283中所描述的变化形式，这些专利各自的公开内容以引用的方式并入本文中。

在一些实施方案中，催产素受体拮抗剂是亚泊西班或亚泊西班的变化形式，如美国专利第7,514,437号、第8,367,673号、第8,541,579号、第7,550,462号、第7,919,492号、第8,202,864号、第8,742,099号、第9,408,851号、第8,716,286号或第8,815,856号中所描述的变化形式，这些专利各自的公开内容以引用的方式并入本文中。

在一些实施方案中，催产素受体拮抗剂是诺拉西班，或诺拉西班的变化形式、配制物或结晶形式，如美国专利第7,115,754号或美国专利申请公开第2015/0073032号、第2015/0164859号或第2016/0002160号中所描述的变化形式、配制物或结晶形式，各案的公开内容以引用的方式并入本文中。

在一些实施方案中，所述化合物是与β模拟剂，如特布他林、利托君、海索那林、沙丁胺醇、非诺特罗、尼利特林或奥西那林组合施用给受试者。在一些实施方案中，所述方法包括向受试者经口施用β模拟剂。在一些实施方案中，所述方法包括向受试者静脉内施用β模拟剂。所述化合物可以在施用β模拟剂的同时施用给受试者。在一些实施方案中，所述化合物是在向受试者施用β模拟剂之前施用给受试者。在一些实施方案中，所述化合物是在向受试者施用β模拟剂之后施用给受试者。在一些实施方案中，将所述化合物与β模拟剂混合，并将这些药剂同时施用给受试者。

在一些实施方案中，所述化合物是与钙通道抑制剂如二氢吡啶组合施用给受试者。在一些实施方案中，钙通道抑制剂是硝苯地平。在一些实施方案中，钙通道抑制剂是尼卡地平。在一些实施方案中，所述方法包括向受试者经口施用钙通道抑制剂。在一些实施方案中，所述方法包括向受试者静脉内施用钙通道抑制剂。所述化合物可以在施用钙通道抑制剂的同时施用给受试者。在一些实施方案中，所述化合物是在向受试者施用钙通道抑制剂之前施用给受试者。在一些实施方案中，所述化合物是在向受试者施用钙通道抑制剂之后施用给受试者。在一些实施方案中，将所述化合物与钙通道抑制剂混合，并将这些药剂同时施用给受试者。

在一些实施方案中，所述化合物是与镁盐如硫酸镁组合施用给受试者。在一些实施方案中，所述方法包括向受试者静脉内施用镁盐。在一些实施方案中，所述方法包括向受试者肌肉内施用镁盐。在一些实施方案中，所述方法包括向受试者经口施用镁盐。所述化合物可以在施用镁盐的同时施用给受试者。在一些实施方案中，所述化合物是在向受试者施用镁盐之前施用给受试者。在一些实施方案中，所述化合物是在向受试者施用镁盐之后施用给受试者。在一些实施方案中，将所述化合物与镁盐混合，并将这些药剂同时施用给受试者。

在一些实施方案中，所述化合物是与一氧化氮供体如硝酸甘油组合施用给受试者。在一些实施方案中，所述方法包括向受试者经口施用一氧化氮供体。在一些实施方案中，所述方法包括向受试者静脉内施用一氧化氮供体。所述化合物可以在施用一氧化氮供体的同时施用给受试者。在一些实施方案中，所述化合物是在向受试者施用一氧化氮供体之前施用给受试者。在一些实施方案中，所述化合物是在向受试者施用一氧化氮供体之后施用给受试者。在一些实施方案中，将所述化合物与一氧化氮供体混合，并将这些药剂同时施用给受试者。

在一些实施方案中，所述化合物是与孕酮或其变化形式或衍生物如17-α-羟基孕酮己酸盐组合施用给受试者。在一些实施方案中，所述方法包括向受试者经口施用孕酮或其变化形式或衍生物，如17-α-羟基孕酮己酸盐。在一些实施方案中，所述方法包括向受试者阴道内施用孕酮或其变化形式或衍生物，如17-α-羟基孕酮己酸盐。所述化合物可以在施用孕酮或其变化形式或衍生物如17-α-羟基孕酮己酸盐的同时施用给受试者。在一些实施方案中，所述化合物是在向受试者施用孕酮或其变化形式或衍生物如17-α-羟基孕酮己酸盐之前施用给受试者。在一些实施方案中，所述化合物是在向受试者施用孕酮或其变化形式或衍生物如17-α-羟基孕酮己酸盐之后施用给受试者。在一些实施方案中，将所述化合物与孕酮或其变化形式或衍生物，如17-α-羟基孕酮己酸盐混合(例如在口服配制物中等)，并将这些药剂同时施用给受试者。

在一些实施方案中，所述化合物是与皮质类固醇组合施用给受试者。在一些实施方案中，所述皮质类固醇是倍他米松。在一些实施方案中，所述皮质类固醇是地塞米松。在一些实施方案中，所述方法包括向受试者经口施用皮质类固醇。在一些实施方案中，所述方法包括向受试者肌肉内施用皮质类固醇。所述化合物可以在施用皮质类固醇的同时施用给受试者。在一些实施方案中，所述化合物是在向受试者施用皮质类固醇之前施用给受试者。在一些实施方案中，所述化合物是在向受试者施用皮质类固醇之后施用给受试者。在一些实施方案中，将所述化合物与皮质类固醇混合(例如在口服配制物中等)，并将这些药剂同时施用给受试者。

在一些实施方案中，本发明提供了一种试剂盒，该试剂盒含有本发明上述方面中的任一个的化合物或药物组合物以及药品说明书。在一些实施方案中，药品说明书指导试剂盒的使用者将所述化合物或药物组合物施用给发生早产或有发生早产风险的受试者，如出现本文所描述的早产的一种或多种症状的受试者。在一些实施方案中，受试者以约24至约34周孕龄为特征。在一些实施方案中，药品说明书指导试剂盒的使用者将所述化合物或药物组合物与水溶液混合。在一些实施方案中，药品说明书指导试剂盒的使用者向受试者经口施用所述化合物。在一些实施方案中，药品说明书指导试剂盒的使用者向受试者静脉内施用所述化合物。

在另一个方面，本发明提供了一种药物组合物，该药物组合物含有由式(II)表示的化合物，

即3-([1,1'-联苯]-4-基磺酰基)-N-[1-(4-氟苯基)-3-羟丙基]-1,3-噻唑烷-2-甲酰胺。在一些实施方案中，所述药物组合物含有由式(II)表示的化合物和另外的治疗剂。在一些实施方案中，所述药物组合物含有由式(II)表示的化合物和另外的宫缩抑制剂。所述药物组合物可以任选地含有一种或多种赋形剂。在一些实施方案中，如例如由高压液相色谱法(HPLC)或NMR波谱法所确定，由式(II)表示的化合物的纯度是至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或99.9％。在一些实施方案中，所述化合物和/或药物组合物被配制成供经口施用给受试者。在一些实施方案中，所述化合物和/或药物组合物是片剂、胶囊、软胶囊、散剂、液体溶液或液体悬浮液。在一些实施方案中，所述化合物和/或药物组合物被配制成供静脉内施用给受试者。

在一些实施方案中，所述药物组合物含有两种或更多种治疗剂，如由式(II)表示的化合物和另外的治疗剂。举例来说，所述药物组合物可以含有两种或更多种治疗剂彼此的混合物以共施用给患者，如用于治疗或预防早产。所述药物组合物可以施用给受试者以使受试者分娩发作延迟例如一天或数天，或者一周或数周，如约1天至约16周(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30天，或约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15或16周)。在一些实施方案中，受试者正在经历早产。在一些实施方案中，所述药物组合物是在早产起始之前施用给受试者(例如人类受试者)。所述药物组合物可以被施用给受试者(例如人类受试者)以预防在剖腹产之前分娩。所述药物组合物可以被施用给受试者(例如人类受试者)以治疗或预防痛经。所述药物组合物可以被施用给受试者，如怀孕的女性人类受试者，以缓解与分娩有关的一种或多种症状，如阴道出血和子宫膜破裂。

在一些实施方案中，另外的治疗剂是另外的宫缩抑制剂。

在一些实施方案中，所述另外的宫缩抑制剂是催产素受体拮抗剂，如阿托西班、瑞托西班、巴卢西班、亚泊西班及诺拉西班，或其一种或多种变化形式、配制物、结晶形式或衍生物。

在一些实施方案中，所述药物组合物包含由式(II)表示的化合物和阿托西班。在一些实施方案中，所述药物组合物包含由式(II)表示的化合物和阿托西班的变化形式，如美国专利第4,504,469号或第4,402,942号中所描述的变化形式，这些专利各自的公开内容以引用的方式并入本文中。

在一些实施方案中，所述药物组合物包含由式(II)表示的化合物和瑞托西班。在一些实施方案中，所述药物组合物包含由式(II)表示的化合物和瑞托西班的变化形式，如美国专利第7,514,437号、第8,367,673号、第8,541,579号、第8,071,594号、第8,357,685号、第8,937,179号或US 2016/0074413中所描述的变化形式，这些专利各自的公开内容以引用的方式并入本文中。

在一些实施方案中，所述药物组合物包含由式(II)表示的化合物和巴卢西班。在一些实施方案中，所述药物组合物包含由式(II)表示的化合物和巴卢西班的变化形式，如美国专利第6,143,722号、第7,091,314号、第7,816,489号或US 2016/0175283中所描述的变化形式，这些专利的公开内容以引用的方式并入本文中。

在一些实施方案中，所述药物组合物包含由式(II)表示的化合物和亚泊西班。在一些实施方案中，所述药物组合物包含由式(II)表示的化合物和亚泊西班的变化形式，如美国专利第7,514,437号、第8,367,673号、第8,541,579号、第7,550,462号、第7,919,492号、第8,202,864号、第8,742,099号、第9,408,851号、第8,716,286号或第8,815,856号中所描述的变化形式，这些专利各自的公开内容以引用的方式并入本文中。

在一些实施方案中，所述药物组合物包含由式(II)表示的化合物和诺拉西班。在一些实施方案中，所述药物组合物包含由式(II)表示的化合物和诺拉西班的变化形式、配制物或结晶形式，如美国专利第7,115,754号或美国专利申请公开第2015/0073032号、第2015/0164859号或第2016/0002160号中所描述的变化形式、配制物或结晶形式，这些专利申请各自的公开内容以引用的方式并入本文中。

在一些实施方案中，另外的宫缩抑制剂是β模拟剂，如特布他林、利托君、海索那林、沙丁胺醇、非诺特罗、尼利特林或奥西那林。

在一些实施方案中，另外的宫缩抑制剂是钙通道抑制剂，如二氢吡啶。在一些实施方案中，钙通道抑制剂是硝苯地平。在一些实施方案中，钙通道抑制剂是尼卡地平。

在一些实施方案中，另外的宫缩抑制剂是镁盐，如硫酸镁。

在一些实施方案中，由式(II)表示的化合物被配制成供经口施用，并且另外的宫缩抑制剂被配制成供经口施用。在一些实施方案中，由式(II)表示的化合物被配制成供静脉内施用，并且另外的宫缩抑制剂被配制成供静脉内施用。在一些实施方案中，由式(II)表示的化合物被配制成供经口施用，并且另外的宫缩抑制剂被配制成供静脉内施用。在一些实施方案中，由式(II)表示的化合物被配制成供静脉内施用，并且另外的宫缩抑制剂被配制成供经口施用。在一些实施方案中，由式(II)表示的化合物被配制成供经口施用，并且另外的宫缩抑制剂被配制成供肌肉内施用。在一些实施方案中，由式(II)表示的化合物被配制成供静脉内施用，并且另外的宫缩抑制剂被配制成供肌肉内施用。

在一些实施方案中，所述药物组合物包含由式(II)表示的化合物和孕酮或17-α-羟基孕酮己酸盐。在一些实施方案中，由式(II)表示的化合物被配制成供经口施用并且孕酮或17-α-羟基孕酮己酸盐被配制成供阴道内施用。在一些实施方案中，由式(II)表示的化合物被配制成供静脉内施用，并且孕酮或17-α-羟基孕酮己酸盐被配制成供阴道内施用。在一些实施方案中，由式(II)表示的化合物和孕酮或17-α-羟基孕酮己酸盐都被配制成供经口施用。在一些实施方案中，由式(II)表示的化合物被配制成供静脉内施用，并且孕酮或17-α-羟基孕酮己酸盐被配制成供经口施用。

在一些实施方案中，另外的治疗剂是皮质类固醇。在一些实施方案中，所述皮质类固醇是倍他米松。在一些实施方案中，所述皮质类固醇是地塞米松。在一些实施方案中，所述皮质类固醇是氢化可的松。在一些实施方案中，由式(II)表示的化合物被配制成供经口施用，并且皮质类固醇(例如倍他米松、地塞米松或氢化可的松)被配制成供肌肉内施用。在一些实施方案中，由式(II)表示的化合物被配制成供静脉内施用并且皮质类固醇(例如倍他米松、地塞米松或氢化可的松)被配制成供肌肉内施用。在一些实施方案中，由式(II)表示的化合物被配制成供经口施用，并且皮质类固醇(例如倍他米松、地塞米松或氢化可的松)被配制成供经口施用。在一些实施方案中，由式(II)表示的化合物被配制成供静脉内施用，并且皮质类固醇(例如倍他米松、地塞米松或氢化可的松)被配制成供经口施用。

在另一个方面，本发明提供了一种治疗受试者早产的方法，该方法是通过向受试者提供(例如施用)治疗有效量的根据本发明上述方面中的任一个的由式(II)表示的化合物，

即3-([1,1'-联苯]-4-基磺酰基)-N-[1-(4-氟苯基)-3-羟丙基]-1,3-噻唑烷-2-甲酰胺，或含有所述由式(II)表示的化合物的药物组合物实现。

在另一个方面，本发明提供了一种通过向受试者提供(例如施用)治疗有效量的根据本发明上述方面中的任一个的由式(II)表示的化合物或含有所述由式(II)表示的化合物的药物组合物来预防受试者早产的方法。

另一方面，本发明提供了一种通过向受试者提供(例如施用)治疗有效量的根据本发明上述方面中的任一个的由式(II)表示的化合物或含有所述由式(II)表示的化合物的药物组合物来预防受试者在剖腹产之前分娩的方法。

另一方面，本发明提供了一种通过向受试者提供(例如施用)治疗有效量的根据本发明上述方面中的任一个的由式(II)表示的化合物或含有所述由式(II)表示的化合物的药物组合物来治疗或预防受试者痛经的方法。

另一方面，本发明提供了一种通过向受试者提供(例如施用)治疗有效量的根据本发明上述方面中的任一个的由式(II)表示的化合物或含有所述由式(II)表示的化合物的药物组合物来治疗或预防受试者子宫内膜异位的方法。

在一些实施方案中，由式(II)表示的化合物是与另外的治疗剂组合提供给受试者。在一些实施方案中，所述化合物是与另外的宫缩抑制剂组合提供给受试者。在一些实施方案中，所述化合物是通过向受试者施用所述化合物而提供给受试者。在一些实施方案中，所述化合物是通过向受试者施用在体内代谢产生由式(II)表示的化合物的前药而提供给受试者。

在一些实施方案中，由式(II)表示的化合物是与催产素受体拮抗剂组合提供给受试者。在一些实施方案中，所述方法包括向受试者经口施用催产素受体拮抗剂。在一些实施方案中，所述方法包括向受试者静脉内施用催产素受体拮抗剂。由式(II)表示的化合物可以在施用催产素受体拮抗剂的同时提供给受试者。在一些实施方案中，由式(II)表示的化合物是在向受试者施用催产素受体拮抗剂之前提供给受试者。在一些实施方案中，由式(II)表示的化合物是在向受试者施用催产素受体拮抗剂之后提供给受试者。在一些实施方案中，将由式(II)表示的化合物或其前药与催产素受体拮抗剂混合，并将这些药剂同时施用给受试者。在一些实施方案中，催产素受体拮抗剂是阿托西班、瑞托西班、巴卢西班、亚泊西班或诺拉西班，或其变化形式、配制物、结晶形式或衍生物。

在一些实施方案中，由式(II)表示的化合物是与β模拟剂如特布他林、利托君、海索那林、沙丁胺醇、非诺特罗、尼利特林或奥西那林组合提供给受试者。在一些实施方案中，所述方法包括向受试者经口施用β模拟剂。在一些实施方案中，所述方法包括向受试者静脉内施用β模拟剂。由式(II)表示的化合物可以在施用β模拟剂的同时提供给受试者。在一些实施方案中，由式(II)表示的化合物是在向受试者施用β模拟剂之前提供给受试者。在一些实施方案中，由式(II)表示的化合物是在向受试者施用β模拟剂之后提供给受试者。在一些实施方案中，将由式(II)表示的化合物或其前药与β模拟剂混合，并将这些药剂同时施用给受试者。

在一些实施方案中，由式(II)表示的化合物是与钙通道抑制剂如二氢吡啶组合提供给受试者。在一些实施方案中，钙通道抑制剂是硝苯地平。在一些实施方案中，钙通道抑制剂是尼卡地平。在一些实施方案中，所述方法包括向受试者经口施用钙通道抑制剂。在一些实施方案中，所述方法包括向受试者静脉内施用钙通道抑制剂。由式(II)表示的化合物可以在施用钙通道抑制剂的同时提供给受试者。在一些实施方案中，由式(II)表示的化合物是在向受试者施用钙通道抑制剂之前提供给受试者。在一些实施方案中，由式(II)表示的化合物是在向受试者施用钙通道抑制剂之后提供给受试者。在一些实施方案中，将由式(II)表示的化合物或其前药与钙通道抑制剂混合，并将这些药剂同时施用给受试者。

在一些实施方案中，由式(II)表示的化合物是与镁盐如硫酸镁组合提供给受试者。在一些实施方案中，所述方法包括向受试者静脉内施用镁盐。在一些实施方案中，所述方法包括向受试者肌肉内施用镁盐。在一些实施方案中，所述方法包括向受试者经口施用镁盐。由式(II)表示的化合物可以在施用镁盐的同时提供给受试者。在一些实施方案中，由式(II)表示的化合物是在向受试者施用镁盐之前提供给受试者。在一些实施方案中，由式(II)表示的化合物是在向受试者施用镁盐之后提供给受试者。在一些实施方案中，将由式(II)表示的化合物或其前药与镁盐混合，并将这些药剂同时施用给受试者。

在一些实施方案中，由式(II)表示的化合物是与一氧化氮供体如硝酸甘油组合提供给受试者。在一些实施方案中，所述方法包括向受试者经口施用一氧化氮供体。在一些实施方案中，所述方法包括向受试者静脉内施用一氧化氮供体。由式(II)表示的化合物可以在施用一氧化氮供体的同时提供给受试者。在一些实施方案中，由式(II)表示的化合物是在向受试者施用一氧化氮供体之前提供给受试者。在一些实施方案中，由式(II)表示的化合物是在向受试者施用一氧化氮供体之后提供给受试者。在一些实施方案中，将由式(II)表示的化合物或其前药与一氧化氮供体混合，并将这些药剂同时施用给受试者。

在一些实施方案中，由式(II)表示的化合物是与孕酮或其变化形式或衍生物如17-α-羟基孕酮己酸盐组合提供给受试者。在一些实施方案中，所述方法包括向受试者经口施用孕酮或其变化形式或衍生物，如17-α-羟基孕酮己酸盐。在一些实施方案中，所述方法包括向受试者阴道内施用孕酮或其变化形式或衍生物，如17-α-羟基孕酮己酸盐。由式(II)表示的化合物可以在施用孕酮或其变化形式或衍生物如17-α-羟基孕酮己酸盐的同时提供给受试者。在一些实施方案中，由式(II)表示的化合物是在向受试者施用孕酮或其变化形式或衍生物如17-α-羟基孕酮己酸盐之前提供给受试者。在一些实施方案中，由式(II)表示的化合物是在向受试者施用孕酮或其变化形式或衍生物如17-α-羟基孕酮己酸盐之后提供给受试者。在一些实施方案中，将由式(II)表示的化合物或其前药与孕酮或其变化形式或衍生物如17-α-羟基孕酮己酸盐混合(例如在口服配制物中等)，并将这些药剂同时施用给受试者。

在一些实施方案中，由式(II)表示的化合物是与皮质类固醇组合提供给受试者。在一些实施方案中，所述皮质类固醇是倍他米松。在一些实施方案中，所述皮质类固醇是地塞米松。在一些实施方案中，所述方法包括向受试者经口施用皮质类固醇。在一些实施方案中，所述方法包括向受试者肌肉内施用皮质类固醇。由式(II)表示的化合物可以在施用皮质类固醇的同时提供给受试者。在一些实施方案中，由式(II)表示的化合物是在向受试者施用皮质类固醇之前提供给受试者。在一些实施方案中，由式(II)表示的化合物是在向受试者施用皮质类固醇之后提供给受试者。在一些实施方案中，将由式(II)表示的化合物或其前药与皮质类固醇混合(例如在口服配制物中等)，并将这些药剂同时施用给受试者。

在一些实施方案中，受试者以约24至约34周孕龄为特征。在一些实施方案中，相对于在施用之前记录的受试者子宫收缩幅度测量值，受试者在施用之后展现子宫收缩幅度降低，如降低约40％至约50％(例如约40％、41％、42％、43％、44％、45％、46％、47％、48％、49％或50％)。在一些实施方案中，受试者是哺乳动物，如人类。

定义

如本文所使用，术语“约”是指一个值在大于或小于所述值10％的范围内。

如本文所使用，术语“亲和力”是指两个分子，如配体与受体之间结合相互作用的强度。如本文所使用，术语“K_i”意图指拮抗剂对于所关注特定分子的抑制常数，并且以摩尔浓度(M)表示。有关拮抗剂-靶相互作用的K_i值可以例如使用本领域中确定的方法测定。可以用于测定拮抗剂对分子靶的K_i的方法包括竞争性结合实验，如例如US8,415,480中所描述的竞争性放射性配体结合分析。如本文所使用，术语“K_d”意图指解离常数，它可以例如由两个分子的解离速率常数(k_d)与两个分子的缔合速率常数(k_a)的比率获得并且以摩尔浓度(M)表示。有关受体-配体相互作用的K_d值可以例如使用本领域中确定的方法测定。可以用于测定受体-配体相互作用的K_d的方法包括通过例如使用生物传感器系统如系统进行的表面等离子共振。

如本文所使用，术语“皮质类固醇”是指由肾上腺皮质或其合成等效物制造的任何类固醇激素。示例性皮质类固醇包括倍他米松、地塞米松及氢化可的松等，以及其变化形式。与本文所描述的组合物和方法结合使用的皮质类固醇包括能够诱导胎儿肺成熟，例如以便预防早产婴儿发展呼吸窘迫综合症的那些。与本文所描述的组合物和方法结合使用的示例性皮质类固醇包括Jobe等人,《美国妇产科学杂志(Am.J.Obstet.Gynecol.)》190:878-881(2004)和Miracle等人,《围产期医学(Perinat.Med.)》36:191-196(2008)中所描述的那些，这些参考文献各自的公开内容以引用的方式并入本文中。

如本文所使用，术语“结晶”或“结晶形式”意思指呈原子、离子、分子或分子组合的规则三维阵列的一种物理状态。结晶形式具有由称为非对称单元的结构单元形成的晶格阵列，这些结构单元根据明确确定的对称性布置成三维重复的单位单元。相比之下，术语“非晶形”或“非晶形式”是指一种无组织(无序)的结构。治疗化合物的物理状态可以利用示例性技术，如X射线衍射、偏光显微镜检查和/或差示扫描热量测定法测定。

如本文所使用，术语“内源性”描述天然地存在于特定生物体(例如人类)中或生物体内的特定位置(例如器官、组织或细胞，如人类细胞)中的分子(例如多肽、核酸或辅因子)。

如本文所使用，术语“外源性”描述并非天然存在于特定生物体(例如人类)中或生物体内的特定位置(例如器官、组织或细胞，如人类细胞)中的分子(例如多肽、核酸或辅因子)。外源性物质包括由外部来源提供至生物体的物质或自生物体提取的培养物质。

如本文所使用，术语“孕龄”描述特定妊娠的时间，或从怀孕雌性受试者最后一次月经周期的第一天到当前日期所测量的时间。如本文所使用，术语“分娩”(也可以称为出生)是指胎儿和胎盘从怀孕雌性受试者的子宫排出。对于正常妊娠，分娩可以在约40周的孕龄时发生。如本文所使用，“早产”是指分娩在典型地为约40周的完整妊娠期之前超过三周开始的一种情况。也就是说，早产是在例如38周妊娠之前的任何阶段时发生。如果不作治疗，则早产典型地导致分娩的发生，或导致与怀孕雌性受试者分娩有关的生理变化。早产可能伴随或可能不伴随阴道出血或子宫膜破裂。早产也可以称为过早分娩。避免受试者早产将延长妊娠期并因此避免过早分娩，由此降低新生儿死亡和发病的风险。

如本文所使用，术语“IC₅₀”是指如例如在竞争性配体结合分析中所测量的使参考激动剂的功效或生物靶的组成性活性降低50％的物质(拮抗剂)浓度。示例性竞争性配体结合分析包括本领域中已知的竞争性放射性配体结合分析、竞争性酶联免疫吸附分析(ELISA)及基于荧光各向异性的分析等。

如本文所使用，在向受试者提供或施用两种或更多种治疗剂的情况下，短语“组合”是指例如同时或在不同时间向受试者(例如哺乳动物受试者，如人类受试者)递送两种或更多种治疗剂。举例来说，向受试者组合施用一种治疗剂与另一种治疗剂可以通过如以单一药物组合物形式或以同步(例如通过不同施用途径)施用给受试者的独立组合物形式，向受试者同时施用两种治疗剂实现。在另一实例中，向受试者组合施用一种治疗剂与另一种治疗剂可以通过用相同或不同施用途径，先向受试者施用一种治疗剂，随后施用另一治疗剂来实现。

如本文所使用，术语“诺拉西班”是指由以下结构式表示的(3Z,5S)-5-(羟甲基)-1-[(2'-甲基-1,1'-联苯-4-基)羰基]吡咯烷-3-酮O-甲基肟：

诺拉西班的变化形式、配制物及结晶形式描述于例如美国专利第7,115,754号和美国专利申请公开第2015/0073032号、第2015/0164859号及第2016/0002160号中，这些专利申请各自的公开内容以引用的方式并入本文中。

如本文所使用，术语“口服生物利用率”是指施用给受试者如哺乳动物(例如人类)的化合物中到达受试者的体循环而不是在非靶器官中或不经胃肠道吸收而排泄的部分。所述术语是指在一定时间内积分的血浆浓度并且典型地以经口施用的剂量的百分含量表示。

如本文所使用，术语“催产素受体拮抗剂”或“催产素拮抗剂”是指能够抑制催产素与催产素受体之间的相互作用，例如由此抑制催产素信号转导级联中一个或多个下游信号传导分子的活性的化合物。与本文所描述的组合物和方法一起使用的催产素拮抗剂包括结合并抑制催产素受体的化合物，如阿托西班、瑞托西班、巴卢西班、亚泊西班及诺拉西班，以及其变化形式、配制物、结晶形式和衍生物，包括本文所描述的那些等。

如本文所使用，术语“药学上可接受”是指这些化合物、材料、组合物和/或剂型适于与受试者如哺乳动物(例如人类)的组织接触，而无过度毒性、刺激、过敏反应及其它问题并发症并且与合理的效益/风险比相称。

如本文所使用，术语“药物组合物”意思指欲施用给受试者，如哺乳动物，例如人类以预防、治疗或控制影响哺乳动物的特定疾病或病况，如早产或痛经等(例如，如本文中所描述)的含有治疗化合物的混合物。

如本文所使用，术语“保护基”是指当结合至官能团时使该官能团对一个或多个化学反应呈惰性的化学部分。此类反应可以改变化合物的一个或多个并且在无保护基存在下，可能使所关注部分(例如氨基、羟基、羧基或羧酰胺部分)发生不希望有的化学改性(例如亲电子加成、溶剂分解、氧化、还原或官能团相互转化)。适当时，保护基可以发生化学反应以使原始官能团再生。可以选择的保护基的属性以便与分子的其余部分相容，例如使得保护基在其它合成步骤或分子改性期间不被去除，并且任选地，使得用于去除保护基的反应条件不会去除位于分子上其它取代基处的不同保护基。示例性保护基包括可以共价结合至例如氨基取代基如α-氨基酯的氨基的保护基。一个化学部分的保护基的后续去除，在本文中被称作“脱除保护基”，可以使用本领域中已知的试剂和条件实现。保护基的实例包括但不限于，苯甲基、乙酰基、氧基乙酰基、羧基苯甲基、9-芴基氧基羰基、2-氯-1-茚满基甲氧基-羰基、苯并[f]茚-3-甲氧羰基、2-(叔丁基磺酰基)-2-丙烯基氧基羰基、苯并噻吩砜-2-甲基羰基、叔丁氧基羰基、叔戊氧羰基、β-三甲基硅烷基乙氧羰基、金刚烷氧羰基、1-甲基环丁氧基羰基、2-(对联苯基)丙基-2-氧基羰基、2-(对苯基偶氮基苯基)丙基-2-氧基羰基、2-2-二甲基-3,5-二甲氧基苯甲氧基羰基、2-苯丙基-2-氧基羰基、苯甲氧羰基、对甲苯磺酰基氨基羰基、邻硝基苯次磺酰基、二硫杂琥珀酰基、邻苯二甲酰基、哌啶氧基羰基、甲酰基、三氟乙酰基、2,4,6-三甲氧基苯甲基、2,3,6-三甲基-4甲氧基苯磺酰基、叔丁氧基甲基、五甲基色满磺酰基、金刚烷基、β-三甲基硅烷基乙基、β-三甲基硅烷基乙氧基羰基、叔丁基、叔丁基苯甲基、环戊基、三苯甲基、苯甲氧羰基、甲酰基及三氟乙酰基等。保护基可以适用于特定化学取代基。举例来说，羟基保护基的实例包括但不限于，苯甲基、对甲氧基苯甲基、对硝基苯甲基、烯丙基、三苯甲基、二烷基硅烷基醚如二甲基硅烷基醚，和三烷基硅烷基醚如三甲基硅烷基醚、三乙基硅烷基醚及叔丁基二甲基硅烷基醚；酯如苯甲酰基、乙酰基、苯乙酰基、甲酰基、单卤代乙酰基、二卤代乙酰基及三卤代乙酰基，如氯乙酰基、二氯乙酰基、三氯乙酰基、三氟乙酰基；以及碳酸酯，如甲基、乙基、2,2,2-三氯乙基、烯丙基、苯甲基及对硝基苯基。保护基的其它实例可以见于例如Greene和伍兹,《有机合成中的保护基(ProtectiveGroups in Organic Synthesis)》,第2版,1991,John Wiley&Sons以及McOmie,《有机化学中的保护基(Protective Groups in Organic Chemistry)》,1975,Plenum Press中，这些文献各自的公开内容以引用的方式并入本文中。保护基的其它实例描述于例如美国专利第3,835,175号、第4,508,657号、第3,839,396号、第4,581,167号、第4,460,501号及第4,108,846号中，这些专利各自的公开内容以引用的方式并入本文中。

如本文所使用，在治疗性治疗的情况下，术语“提供(provide/providing)”是指将治疗剂递送给需要治疗的受试者(例如哺乳动物受试者，如人类)，如经历早产或有发生早产风险的受试者。治疗剂可以例如通过将治疗剂直接施用给受试者，或通过施用前药而提供给有需要的受试者，当向受试者施用前药时，前药在体内转化成所述治疗剂。示例性前药包括但不限于，酯、磷酸酯及当施用给受试者时易于水解的其它化学官能团。前药包括本领域中已知的前药，如例如Vig等人,《先进药物递送评论(Adv.Drug Deliv.Rev.)》65:1370-1385(2013)及Huttunen等人,《药理学评论(Pharmacol.Rev.)》63:750-771(2011)中描述的那些，这些文献各自的公开内容以引用的方式并入本文中。

如本文所使用，术语“样品”是指从受试者分离的试样(例如血液、血液成分(例如血清或血浆)、尿液、唾液、羊膜液、脑脊髓液、组织(例如胎盘或皮肤)、胰液、绒毛膜绒毛样品及细胞)。

如本文所使用，短语“特异性结合”和“结合”是指确定异质蛋白质和其它生物分子群中由例如特征性配体识别的特定蛋白质的存在的结合反应。特异性结合至蛋白质的配体(例如蛋白质、蛋白聚糖或葡糖胺聚糖)将例如以小于100nM的K_D结合至所述蛋白质。举例来说，特异性结合至蛋白质的配体可以按至多100nM(例如在1pM至100nM之间)的K_D结合至所述蛋白质。不展现与蛋白质或其结构域的特异性结合的配体对所述特定蛋白质或其结构域展现的K_D将大于100nM(例如大于200nM、300nM、400nM、500nM、600nM、700nM、800nM、900nM、1μM、100μM、500μM或1mM)。可以使用多种分析形式测定配体对特定蛋白质的亲和力。举例来说，常规地使用固相ELISA分析鉴别特异性结合靶蛋白的配体。有关可以用于确定特异性蛋白质结合的分析形式和条件的说明，参见例如Harlow和Lane,《抗体实验指南(Antibodies,A Laboratory Manual)》,Cold Spring Harbor Press,纽约(New York)(1988)及Harlow和Lane,《抗体技术实验指南(Using Antibodies,A Laboratory Manual)》,Cold SpringHarbor Press,纽约(1999)。

如本文所使用，术语“受试者”和“患者”可互换并且意思指接受针对如本文中所描述的特定疾病或病况(如早产或痛经)的治疗或根据本文所描述的方法被诊断为患有疾病或病况的生物体。受试者和患者的实例包括接受针对疾病或病况，例如在早期孕龄(例如24-34周)早产的治疗的哺乳动物，如人类。

本文所描述的化合物、盐形式、晶体多晶型物、治疗剂或其它组合物可以称为以“大体上如图中所描绘”的图形数据表征。这些数据可以包括但不限于，粉末X射线衍射图、NMR谱、差示扫描热量测定曲线及热解重量分析曲线等。如本领域中所知，这些图形数据可以提供另外的技术信息以进一步确定化合物、盐形式、晶体多晶型物、治疗剂或其它组合物。本领域的技术人员应了解，数据的这种图形表示可能例如由于如仪器响应的变化以及样品浓度和纯度的变化之类因素而存在峰相对强度和峰位置的较小变化。尽管如此，本领域的技术人员仍能够容易地比较本文各图中的图形数据与化合物、盐形式、晶体多晶型物、治疗剂或其它组合物所产生的图形数据相比较，并确定两组图形数据是表征相同材料还是两种不同的材料。举例来说，在本文中被称作以“大体上如图中所描绘”的图形数据表征的(3S)-3-({[(2S)-3-(联苯-4-基磺酰基)-1,3-噻唑烷-2-基]羰基}-氨基)-3-(4-氟苯基)丙基L-缬氨酸酯盐酸盐的晶体形式因此应理解为包括以图形数据表征且任选具有一个或多个较小变化，例如以上描述或本领域的技术人员已知的一个或多个变化的(3S)-3-({[(2S)-3-(联苯-4-基磺酰基)-1,3-噻唑烷-2-基]羰基}-氨基)-3-(4-氟苯基)丙基L-缬氨酸酯盐酸盐的任何晶体形式。

如本文所使用，术语“治疗(treat/treatment)”是指治疗性治疗，其中目的是预防或减慢不希望有的生理变化或病症，如在早期孕龄(例如24-34周)早产的进展。有益的或希望的临床结果包括但不限于，如阴道出血或膜破裂之类症状的缓解，及分娩的延迟或减慢。需要治疗的受试者包括例如已经历早产的怀孕的雌性受试者，以及有发展此病况的倾向的受试者。

如本文所使用，术语“宫缩抑制剂”是指能够延迟受试者(例如哺乳动物受试者，如人类受试者)分娩发作的物质。宫缩抑制剂可以通过例如增加细胞质cAMP含量并抑制细胞内Ca²⁺的动员而起到抑制子宫收缩的作用。示例性宫缩抑制剂描述于例如Haas等人,《国际妇女健康杂志(Int.J.Womens Health.)》6:343-349(2014)，其公开内容以引用的方式并入本文中。与本文所描述的组合物和方法结合使用的宫缩抑制剂包括但不限于下表1中所列的物质。

表1.示例性宫缩抑制剂

附图说明

图1是展示化合物II和化合物III在静脉内施用之后对孕晚期大鼠的自发子宫收缩的作用的图。

图2是显示化合物I对孕晚期大鼠自发子宫收缩的剂量依赖性可逆作用的图。

图3是展示化合物II和化合物III在经口施用之后对孕晚期大鼠的自发子宫收缩的作用的图。

图4是概述用于产生化合物I的游离碱的各种方法以及关于由各方法产生的化合物I的物理特性和NMR谱的观察结果的表。

图5是概述用于产生化合物I的盐的各种方法，以及关于由各方法产生的这些盐的物理特性和NMR谱的观察结果的表。

图6是概述化合物I的各种盐的物理特性以及X射线粉末衍射(XRPD)谱的表。

图7是概述用于产生各种化合物I盐的晶体形式的方法，以及关于各晶体形式的物理特性和XRPD谱图的观察结果的表。

图8是概述各种化合物I盐于水溶液中的溶解度的表。

图9是概述各种化合物I盐的晶体形式在指定相对湿度(RH)下的稳定性的表。

图10是概述如通过X射线粉末衍射法(XRPD)、差示扫描热量测定(DSC)、热解重量(TG)分析、吸湿/解吸(MB)及¹H核磁共振(NMR)所测定的化合物III的各种特性的表。

图11是概述如通过X射线粉末衍射法(XRPD)、差示扫描热量测定(DSC)、热解重量(TG)分析及¹H核磁共振(NMR)所测定的化合物I的硫酸氢盐的各种特性的表。

图12显示化合物I的甲磺酸盐的XRPD谱图。

图13显示化合物I的甲磺酸盐的¹H NMR谱图。

图14显示化合物I的游离碱的XRPD谱图。

图15显示化合物I的游离碱的¹H NMR谱图。

图16显示化合物I的游离碱的拉曼红外线光谱(Raman infrared spectrum)。

图17显示化合物I的甲磺酸盐的¹H NMR谱图。甲磺酸盐是通过将甲烷磺酸添加至化合物I的游离碱于乙醚中的溶液中来制备。

图18显示在同核去偶实验期间记录的化合物I的游离碱的一系列¹H NMR谱。

图19显示如由丙酮浆液(顶图)、由蒸发二氯甲烷:乙醚混合物(从顶部计第二图)及由缓慢蒸发1:1的丙酮:甲苯混合物(从底部计第二图和底图)制备的化合物I的氯化物盐的一系列XRPD谱。

图20显示记录的由丙酮浆液制备的化合物I的氯化物盐的差示扫描热量测定曲线(范围从约-0.5至约1.3W/g)和热解重量分析曲线(以重量计范围从约0％至约100％)的覆盖图。

图21显示由1:1的丙酮:甲苯混合物制备的化合物I的氯化物盐的¹H NMR谱图。

图22显示由丙酮浆液制备(顶图)以及在约50℃下真空干燥1天之后(底图)的化合物I的氯化物盐的一系列XRPD谱。

图23显示记录的化合物I的氯化物盐在约50℃下真空干燥1天之后的差示扫描热量测定曲线(范围从约-1.0至约0.2W/g)和热解重量分析曲线(以重量计范围从约30％至约100％)的覆盖图。

图24显示由丙酮浆液制备(顶图)及在约50℃下真空干燥1天之后(底图)的化合物I的氯化物盐的热解重量分析曲线的覆盖图。

图25显示记录的由丙酮浆液制备(顶图)及在约50℃下真空干燥1天之后(底图)的化合物I的氯化物盐的差示扫描热量测定曲线的覆盖图。

图26显示记录的化合物I的氯化物盐的吸湿/解吸曲线。y轴上的值显示氯化物盐的重量随盐周围大气中的相对湿度(RH)而变化的变化百分比。

图27是报导由利用化合物I的氯化物盐进行的吸湿/解吸实验得到的数据的表。

图28显示记录的化合物I的氯化物盐的吸湿/解吸曲线。y轴上的值显示氯化物盐的重量随盐周围大气中相对湿度改变的时间而变化的变化百分比。

图29显示化合物I的氯化物盐在进行吸湿/解吸实验之后(顶图)和之前(底图)的XRPD谱图的覆盖图。

图30显示通过缓慢蒸发1:1甲醇:甲苯混合物制备的化合物I的反丁烯二酸酯盐的XRPD谱图(顶图)与反丁烯二酸的XRPD(底图)的覆盖图。

图31显示化合物I的二氢磷酸盐的XRPD谱图(顶图)与化合物I的硫酸氢盐的XRPD(底图)的覆盖图。

图32显示记录的化合物I的硫酸氢盐的差示扫描热量测定曲线(范围从约-1.9至约0W/g)和热解重量分析曲线(以重量计范围从约25％至约95％)的覆盖图。

图33显示化合物I的硫酸氢盐的¹H NMR谱图。

图34显示化合物I的硫酸盐的¹H NMR谱图。

图35显示化合物I的甲磺酸盐的XRPD谱图。

图36显示化合物I的柠檬酸盐的XRPD谱图。

图37显示化合物I的乙二磺酸盐的XRPD谱图。

图38显示化合物I的硫酸氢盐的XRPD谱图。

图39显示通过缓慢蒸发1:2的甲醇:甲苯混合物制备的化合物I的柠檬酸盐的XRPD谱图。

图40显示通过缓慢蒸发6:1的乙酸乙酯:庚烷混合物制备的化合物I的硫酸氢盐的XRPD谱图。

图41显示通过缓慢蒸发乙酸乙酯混合物制备的化合物I的硫酸氢盐的XRPD谱图。

图42显示通过缓慢蒸发1:2的甲醇:乙腈混合物制备的化合物I的二氢磷酸盐的XRPD谱图。

图43显示通过缓慢蒸发1:1的甲基乙基酮:乙酸正丁酯混合物制备的化合物I的二氢磷酸盐的XRPD谱图。

图44显示记录的由通过缓慢蒸发1:1的甲基乙基酮:乙酸正丁酯混合物制备的化合物I的二氢磷酸盐的双重复XRPD实验得到的XRPD谱图。

图45显示通过缓慢蒸发1:1的丙酮:甲苯混合物制备的化合物I的氯化物盐的XRPD谱图。

图46显示记录的由通过缓慢蒸发1:1的丙酮:甲苯混合物制备的化合物I的氯化物盐的双重复XRPD实验得到的XRPD谱图。

图47显示通过缓慢蒸发乙醚:二氯甲烷混合物制备的化合物I的氯化物盐的XRPD谱图。

图48显示由丙酮浆液制备的化合物I的氯化物盐的XRPD谱图。

图49显示在真空干燥之后的化合物I的氯化物盐的XRPD谱图。

图50显示通过缓慢蒸发1:1的甲醇:甲苯混合物制备的化合物I的反丁烯二酸盐的XRPD谱图。

图51显示通过缓慢蒸发1:1的甲醇:乙酸乙酯混合物制备的化合物I的反丁烯二酸盐的XRPD谱图。

图52显示通过真空干燥1:1的甲醇:甲苯混合物制备的化合物I的反丁烯二酸盐的XRPD谱图。

图53显示通过缓慢蒸发1:1:1的甲醇:甲基乙基酮:甲苯混合物制备的化合物I的乙二磺酸盐的XRPD谱图。

图54显示化合物I的氯化物盐在40℃和75％相对湿度下储存之前(底图)和之后(顶图)的XRPD谱的覆盖图。

图55是概述化合物I和化合物II的甲磺酸盐在用于Caco-2穿透实验中的缓冲液中的稳定性的表：汉克氏平衡盐溶液(Hank's Balanced Salt Solution，HBSS)缓冲液，2％的DMSO最终浓度。

图56a是报导由化合物I的甲磺酸盐从涂有Caco-2细胞单层的transwell的顶部到达底外侧隔室的能力分析得到的数据的表。将经过培养的Caco-2细胞与指定浓度的化合物I的甲磺酸盐一起在transwell的顶部隔室中培育，并且在指定取样时间从底外侧隔室取得等分试样以便确定化合物I或化合物II的存在。数据以指定初始浓度的化合物I的甲磺酸盐的百分含量报导底外侧隔室中化合物II的浓度。图56b是报导由化合物I的甲磺酸盐从涂有Caco-2细胞单层的transwell的底外侧到达顶部隔室的能力分析得到的数据的表。将经过培养的Caco-2细胞与指定浓度的化合物I的甲磺酸盐一起在transwell的底外侧隔室中培育，并且在指定取样时间从顶部隔室取得等分试样以便确定化合物I或化合物II的存在。数据以指定初始浓度的化合物I的甲磺酸盐的百分含量报导底外侧隔室中化合物II的浓度。图56c是以顶部隔室中初始浓度的化合物I的甲磺酸盐的百分含量显示底外侧隔室中化合物II的相对浓度的图。图56d是以底外侧隔室中初始浓度的化合物I的甲磺酸盐的百分含量显示顶部隔室中化合物II的相对浓度的图。在顶部隔室中培育60或120分钟之后，在底外侧隔室中未检测到化合物I。此外，在底外侧隔室中培育60或120分钟之后，在顶部隔室中也未检测到化合物I。实际上，在每种情况下都检测到化合物II。图56e是显示在培育120分钟之后顶部隔室中化合物I的回收率的表。初始化合物主要以去酯化变化形式即化合物II回收。

图57a是报导由化合物II从涂有Caco-2细胞单层的transwell的顶部到达底外侧隔室的能力分析得到的数据的表。将经过培养的Caco-2细胞与指定浓度的化合物II一起在transwell顶部隔室中培育，并在指定取样时间从底外侧隔室取得等分试样以便确定化合物II的存在。数据以指定初始浓度的化合物II的百分含量报导底外侧隔室中化合物II的浓度。图57b是报导由化合物II从涂有Caco-2细胞单层的transwell的底外侧到达顶部隔室的能力分析得到的数据的表。将经过培养的Caco-2细胞与指定浓度的化合物II一起在transwell底外侧隔室中培育，并在指定取样时间从顶部隔室取得等分试样以便确定化合物II的存在。数据以指定初始浓度的化合物II的百分含量报导底外侧隔室中化合物II的浓度。图57c是显示在底外侧隔室中培育60和120分钟之后顶部隔室中化合物II的回收率，以及化合物II穿过Caco-2细胞单层的渗透速率的表。图57d是以顶部隔室中初始浓度的化合物II的百分含量显示底外侧隔室中化合物II的相对浓度的图。图57e是以底外侧隔室中初始浓度的化合物II的百分含量显示顶部隔室中化合物II的相对浓度的图。

图58a是报导由化合物I的甲磺酸盐从涂有Caco-2细胞单层的transwell的顶部到达底外侧隔室的能力分析得到的数据的表。将经过培养的Caco-2细胞与指定浓度的化合物I的甲磺酸盐一起在transwell的顶部隔室中培育，并且在指定取样时间从底外侧隔室取得等分试样以便确定化合物I或化合物II的存在。数据以指定初始浓度的化合物I的甲磺酸盐的百分含量报导底外侧隔室中化合物II的浓度。在顶部隔室中培育60或120分钟之后，在底外侧隔室中未检测到化合物I。图58b是以顶部隔室中初始浓度的化合物I的甲磺酸盐的百分含量显示底外侧隔室中化合物II的相对浓度的图。图58c是显示在培育120分钟之后顶部隔室中化合物I的回收率的表。初始化合物主要以去酯化的化合物变化形式即化合物II回收。

图59是概述用于分析本文所描述的Caco-2细胞穿透实验中化合物I和化合物II的浓度的色谱和质谱参数的表。

图60a是说明在17天孕龄时用RU486或脂多糖(LPS)处理以诱导娩出的CD-1小鼠的后代的存活率的图。值表示平均值加/减平均值的标准误差。星号表示p值是p<0.05。统计分析是相对于相应组，使用曼-惠特尼测试(Mann-Whitney test)进行。图60b是说明在17天孕龄时用RU486或LPS处理以诱导娩出的CD-1小鼠的存活和未存活后代的数量的图。

图61a是说明在17天孕龄时用RU486或LPS处理以诱导娩出的CD-1小鼠从诱导到第一只幼鼠分娩的时间的图。值表示平均值加/减平均值的标准误差。图61b和61c是说明在17天孕龄时用RU486或LPS处理以诱导娩出的CD-1小鼠从诱导到完成分娩的时间的图。沿Y轴的值表示完成分娩的CD-1小鼠的比例。在各图中，星号表示p值是p<0.05。统计分析是相对于相应组，使用曼-惠特尼测试或对数秩测试进行。

图62a是展示阿托西班(300mg/kg，皮下施用)和硝苯地平(5mg/kg，经口施用)对在17天孕龄时用RU486或脂多糖(LPS)处理以诱导娩出的CD-1小鼠的后代的存活率的影响的图。值表示平均值加/减平均值的标准误差。星号表示p值是p<0.05；“ns”表示p值是p>0.05。统计分析是相对于相应媒剂组，使用曼-惠特尼测试或不成对t测试进行。图62b是展示阿托西班(300mg/kg，皮下施用)和硝苯地平(5mg/kg，经口施用)对在17天孕龄时用RU486或LPS处理以诱导娩出的CD-1小鼠的存活和未存活后代的数量的影响的图。

图63a是展示化合物III(10mg/kg、30mg/kg及100mg/kg，经口施用)对在17天孕龄时用RU486或LPS处理以诱导娩出的CD-1小鼠的后代的存活率的影响的图。值表示平均值加/减平均值的标准误差。“ns”表示p值是p>0.05。统计分析是相对于相应媒剂组，使用曼-惠特尼测试进行。图63b是展示化合物III(10mg/kg、30mg/kg及100mg/kg，经口施用)对在17天孕龄时用RU486或LPS处理以诱导娩出的CD-1小鼠的存活和未存活后代的数量的影响的图。

图64a是展示硝苯地平(5mg/kg，经口施用)、化合物III(100mg/kg，经口施用)及其组合对在17天孕龄时用RU486处理以诱导娩出的CD-1小鼠的后代的存活率的影响的图。值表示平均值加/减平均值的标准误差。“ns”表示p值相对于相应组是p>0.05；“NS”表示p值相对于相应媒剂组是p>0.05。统计分析是相对于相应所关注组，使用曼-惠特尼测试进行。图64b是展示硝苯地平(5mg/kg，经口施用)、化合物III(100mg/kg，经口施用)及其组合对在17天孕龄时用RU486处理以诱导娩出的CD-1小鼠的存活和未存活后代的数量的影响的图。

图65a是展示硝苯地平(5mg/kg，经口施用)、化合物III(100mg/kg，经口施用)及其组合对在17天孕龄时用RU486处理以诱导娩出的CD-1小鼠从诱导到第一只幼鼠分娩的时间的影响的图。值表示平均值加/减平均值的标准误差。三个星号表示p值相对于相应组是p<0.001；两个星号表示p值相对于相应组是p<0.01。硝苯地平、化合物III及组合组相对于仅用媒剂处理的组展现的p值分别是p＝0.0576、p＝0.0601及p<0.001(以“$$$”符号指示)。统计分析是相对于相应所关注组，使用曼-惠特尼测试或不成对t测试进行。图65b是展示硝苯地平(5mg/kg，经口施用)、化合物III(100mg/kg，经口施用)及其组合对在17天孕龄时用RU486处理以诱导娩出的CD-1小鼠从诱导到完成分娩的时间的影响的图。沿Y轴的值表示完成分娩的CD-1小鼠的比例。图65c是显示图65b中显示的媒剂组和组合组从诱导到完成后代分娩的时间的图。三个星号表示p值相对于相应组是p<0.001。统计分析是相对于相应所关注组，使用对数秩测试进行。图65d是显示图65b中显示的化合物III组和组合组从诱导到完成后代分娩的时间的图。三个星号表示p值相对于相应组是p<0.001。统计分析是相对于相应所关注组，使用对数秩测试进行。图65e是显示图65b中显示的硝苯地平组和组合组从诱导到完成后代分娩的时间的图。两个星号表示p值相对于相应组是p<0.01。统计分析是相对于相应所关注组，使用对数秩测试进行。

图66a是展示阿托西班(300mg/kg，皮下施用)、化合物III(100mg/kg，经口施用)及其组合对在17天孕龄时用RU486处理以诱导娩出的CD-1小鼠的后代的存活率的影响的图。值表示平均值加/减平均值的标准误差。“ns”表示p值相对于相应组是p>0.05；“NS”表示p值相对于相应媒剂组是p>0.05。统计分析是相对于相应所关注组，使用曼-惠特尼测试进行。图66b是展示阿托西班(300mg/kg，皮下施用)、化合物III(100mg/kg，经口施用)及其组合对在17天孕龄时用LPS处理以诱导娩出的CD-1小鼠的存活和未存活后代的数量的影响的图。

图67a是展示阿托西班(300mg/kg，皮下施用)、化合物III(100mg/kg，经口施用)及其组合对在17天孕龄时用RU486处理以诱导娩出的CD-1小鼠从诱导到第一只幼鼠分娩的时间的影响的图。值表示平均值加/减平均值的标准误差。“ns”表示p值相对于相应组是p>0.05；“NS”表示p值相对于相应媒剂组是p>0.05。阿托西班组、化合物III组及组合组相对于媒剂组展现的p值分别是p>0.05、p＝0.0601及p>0.05。统计分析是相对于相应所关注组，使用不成对t测试进行。图67b是展示阿托西班(300mg/kg，皮下施用)、化合物III(100mg/kg，经口施用)及其组合对在17天孕龄时用RU486处理以诱导娩出的CD-1小鼠从诱导到完成分娩的时间的影响的图。沿Y轴的值表示完成分娩的CD-1小鼠的比例。图67c是显示图67b中显示的媒剂组和组合组从诱导到完成后代分娩的时间的图。“ns”表示p值相对于相应组是p>0.05。统计分析是相对于相应所关注组，使用对数秩测试进行。图67d是显示图67b中显示的化合物III组和组合组从诱导到完成后代分娩的时间的图。组合组相对于化合物III组展现的p值是p＝0.0832。统计分析是相对于相应所关注组，使用对数秩测试进行。图67e是显示图67b中显示的阿托西班组和组合组从诱导到完成后代分娩的时间的图。“ns”表示p值相对于相应组是p>0.05。统计分析是相对于相应所关注组，使用对数秩测试进行。

图68a是展示硝苯地平(5mg/kg，经口施用)、化合物III(10mg/kg、30mg/kg及100mg/kg，经口施用)及其组合对在17天孕龄时用LPS处理以诱导娩出的CD-1小鼠的后代的存活率的影响的图。值表示平均值加/减平均值的标准误差。“ns”表示p值相对于相应组是p>0.05；“NS”表示p值相对于相应媒剂组是p>0.05。硝苯地平组相对于仅用媒剂处理的组展现的p值是p＝0.0859。统计分析是相对于相应所关注组，使用曼-惠特尼测试或不成对t测试进行。图68b是展示硝苯地平(5mg/kg，经口施用)、化合物III(10mg/kg、30mg/kg及100mg/kg，经口施用)及其组合对在17天孕龄时用LPS处理以诱导娩出的CD-1小鼠的后代的存活和未存活后代的数量的影响的图。

图69a是展示硝苯地平(5mg/kg，经口施用)、化合物III(10mg/kg、30mg/kg及100mg/kg，经口施用)及其组合对在17天孕龄时用LPS处理以诱导娩出的CD-1小鼠从诱导到第一只幼鼠分娩的时间的影响的图。值表示平均值加/减平均值的标准误差。两个星号表示相对于相应组，通过曼-惠特尼测试评估的p值相对于相应组是p<0.01；“ns”表示相对于相应组，通过曼-惠特尼测试评估的p值相对于相应组是p>0.05；“NS”表示相对于相应组，通过不成对t测试评估的p值相对于相应媒剂组是p>0.05；“未测试”表示对于指定对未进行统计测试。图69b是展示硝苯地平(5mg/kg，经口施用)、化合物III(10mg/kg，经口施用)及其组合对在17天孕龄时用LPS处理以诱导娩出的CD-1小鼠从诱导到完成分娩的时间的影响的图。图69c是展示硝苯地平(5mg/kg，经口施用)、化合物III(30mg/kg，经口施用)及其组合对在17天孕龄时用LPS处理以诱导娩出的CD-1小鼠从诱导到完成分娩的时间的影响的图。图69d是展示硝苯地平(5mg/kg，经口施用)、化合物III(100mg/kg，经口施用)及其组合对在17天孕龄时用LPS处理以诱导娩出的CD-1小鼠从诱导到完成分娩的时间的影响的图。图69e是显示图69b中显示的媒剂组和组合组从诱导到完成后代分娩的时间的图。“ns”表示p值相对于相应组是p>0.05。统计分析是相对于相应组，使用对数秩测试进行。图69f是显示图69b中显示的化合物III组和组合组从诱导到完成后代分娩的时间的图。两个星号表示p值相对于相应组是p<0.01。统计分析是相对于相应所关注组，使用对数秩测试进行。图69g是显示图69b中显示的硝苯地平组和组合组从诱导到完成后代分娩的时间的图。“ns”表示p值相对于相应组是p>0.05。统计分析是相对于相应组，使用对数秩测试进行。图69h是显示图69c中显示的媒剂组和组合组从诱导到完成后代分娩的时间的图。“ns”表示p值相对于相应组是p>0.05。统计分析是相对于相应组，使用对数秩测试进行。图69i是显示图69c中显示的化合物III组和组合组从诱导到完成后代分娩的时间的图。“ns”表示p值相对于相应组是p>0.05。统计分析是相对于相应组，使用对数秩测试进行。图69j是显示图69c中显示的硝苯地平组和组合组从诱导到完成后代分娩的时间的图。“ns”表示p值相对于相应组是p>0.05。统计分析是相对于相应组，使用对数秩测试进行。图69k是显示图69d中显示的媒剂组和组合组从诱导到完成后代分娩的时间的图。“ns”表示p值相对于相应组是p>0.05。统计分析是相对于相应组，使用对数秩测试进行。图69l是显示图69d中显示的化合物III组和组合组从诱导到完成后代分娩的时间的图。“ns”表示p值相对于相应组是p>0.05。统计分析是相对于相应组，使用对数秩测试进行。图69m是显示图69d中显示的硝苯地平组和组合组从诱导到完成后代分娩的时间的图。“ns”表示p值相对于相应组是p>0.05。统计分析是相对于相应组，使用对数秩测试进行。

图70a是展示阿托西班(300mg/kg，皮下施用)、化合物III(100mg/kg，经口施用)及其组合对在17天孕龄时用LPS处理以诱导娩出的CD-1小鼠的后代的存活率的影响的图。值表示平均值加/减平均值的标准误差。“ns”表示p值相对于相应组是p>0.05；“NS”表示p值相对于相应媒剂组是p>0.05。统计分析是相对于相应所关注组，使用曼-惠特尼测试或不成对t测试进行。图70b是展示阿托西班(300mg/kg，皮下施用)、化合物III(100mg/kg，经口施用)及其组合对在17天孕龄时用LPS处理以诱导娩出的CD-1小鼠的存活和未存活后代的数量的影响的图。

图71a是展示阿托西班(300mg/kg，皮下施用)、化合物III(100mg/kg，经口施用)及其组合对在17天孕龄时用LPS处理以诱导娩出的CD-1小鼠从诱导到第一只幼鼠分娩的时间的影响的图。值表示平均值加/减平均值的标准误差。“ns”表示p值相对于相应组是p>0.05；“NS”表示p值相对于相应媒剂组是p>0.05；“$”表示p值相对于相应媒剂组是p<0.05。组合组相对于仅用阿托西班处理的组展现的p值是p＝0.0909。统计分析是相对于相应所关注组，使用曼-惠特尼测试或不成对t测试进行。图71b是展示阿托西班(300mg/kg，皮下施用)、化合物III(100mg/kg，经口施用)及其组合对在17天孕龄时用LPS处理以诱导娩出的CD-1小鼠从诱导到完成分娩的时间的影响的图。图71c是显示图71b中显示的媒剂组和组合组从诱导到完成后代分娩的时间的图。两个星号表示p值相对于相应组是p<0.01。统计分析是相对于相应所关注组，使用对数秩测试进行。图71d是显示图71b中显示的化合物III组和组合组从诱导到完成后代分娩的时间的图。组合组相对于化合物III组展现的p值是p＝0.0964。统计分析是相对于相应所关注组，使用对数秩测试进行。图71e是显示图71b中显示的阿托西班组和组合组从诱导到完成后代分娩的时间的图。星号表示p值相对于相应组是p<0.05。统计分析是相对于相应所关注组，使用对数秩测试进行。

图72a是展示不同浓度的化合物II(6nM、60nM、600nM及6000nM)对N＝6个从进行剖腹产分娩的人类女性受试者收集的足月、分娩前子宫肌层活组织切片中PGF2α诱导平滑肌收缩的频率的影响的图。实验是使用DMT Myograph 800MS(ADINSTRUMENTS^TM)，在含氧克雷布氏溶液(oxygenated Kreb's solution)中以ADI Powerlab软件进行。一旦确定规律收缩至少20分钟，就记录下自发收缩频率的基线测量值。自发收缩频率的测量值在x轴上以“Spon.”表示。接着，将指定浓度的DMSO对照或化合物II添加至各子宫肌层样品中并测量在接下来的10分钟时间段内对照或化合物II对收缩频率的影响。这一时间点在x轴上以“化合物II”表示。随后，通过用递增浓度的PGF2α(1nM、10nM及100nM)以连续的10分钟时间间隔激发子宫肌层组织样品，测量在PGF2α存在下化合物II对收缩频率的影响。这些时间点在x轴上分别以“PGF2α 1nM”、“PGF2α 10nM”及“PGF2α 100nM”表示。沿y轴的值以自发基线收缩频率的百分比表示收缩频率。“#”符号表示p值相对于DMSO对照组是p<0.05。图72b是展示不同浓度的化合物II(6nM、60nM、600nM及6000nM)对N＝6个从进行剖腹产分娩的人类女性受试者收集的足月、分娩前子宫肌层活组织切片中PGF2α诱导平滑肌收缩的每次收缩的做功的影响的图。实验是使用DMT Myograph 800MS(ADINSTRUMENTS^TM)，在含氧克雷布氏溶液中以ADI Powerlab软件进行。一旦确定规律收缩至少20分钟，就记录下每次收缩的自发做功的基线测量值。每次收缩的自发做功的测量值在x轴上以“Spon.”表示。接着，将指定浓度的DMSO对照或化合物II添加至各子宫肌层样品中并测量在接下来的10分钟时间段内对照或化合物II对每次收缩的做功的影响。这一时间点在x轴上以“化合物II”表示。随后，通过用递增浓度的PGF2α(1nM、10nM及100nM)以连续的10分钟时间间隔激发子宫肌层组织样品，测量在PGF2α存在下化合物II对每次收缩的做功的影响。这些时间点在x轴上分别以“PGF2α1nM”、“PGF2α 10nM”及“PGF2α 100nM”表示。沿y轴的值以对于自发基线收缩，每次收缩的做功百分比表示每次收缩的做功。“#”符号表示p值相对于DMSO对照组是p<0.05。图72c是展示不同浓度的化合物II(6nM、60nM、600nM及6000nM)对N＝6个从进行剖腹产分娩的人类女性受试者收集的足月、分娩前子宫肌层活组织切片中PGF2α诱导平滑肌收缩的峰振幅的影响的图。实验是使用DMT Myograph 800MS(ADINSTRUMENTS^TM)，在含氧克雷布氏溶液中以ADIPowerlab软件进行。一旦确定规律收缩至少20分钟，就记录下自发收缩峰振幅的基线测量值。自发收缩峰振幅的测量值在x轴上以“Spon.”表示。接着，将指定浓度的DMSO对照或化合物II添加至各子宫肌层样品中并测量在接下来的10分钟时间段内对照或化合物II对收缩峰振幅的影响。这一时间点在x轴上以“化合物II”表示。随后，通过用递增浓度的PGF2α(1nM、10nM及100nM)以连续的10分钟时间间隔激发子宫肌层组织样品，测量在PGF2α存在下化合物II对收缩峰振幅的影响。这些时间点在x轴上分别以“PGF2α 1nM”、“PGF2α10nM”及“PGF2α 100nM”表示。沿y轴的值以自发基线收缩的峰振幅的百分比表示收缩峰振幅。“#”符号表示p值相对于DMSO对照组是p<0.05。图72d是展示不同浓度的化合物II(6nM、60nM、600nM及6000nM)对从N＝6个进行剖腹产分娩的人类女性受试者收集的足月、分娩前子宫肌层活组织切片中PGF2α诱导平滑肌收缩的持续时间的影响的图。实验是使用DMT Myograph800MS(ADINSTRUMENTS^TM)，在含氧克雷布氏溶液中以ADI Powerlab软件进行。一旦确定规律收缩至少20分钟，就记录下自发收缩持续时间的基线测量值。自发收缩持续时间的测量值在x轴上以“Spon.”表示。接着，将指定浓度的DMSO对照或化合物II添加至各子宫肌层样品中并测量在接下来的10分钟时间段内对照或化合物II对收缩持续时间的影响。这一时间点在x轴上以“化合物II”表示。随后，通过用递增浓度的PGF2α(1nM、10nM及100nM)以连续的10分钟时间间隔激发子宫肌层组织样品，测量在PGF2α存在下化合物II对收缩持续时间的影响。这些时间点在x轴上分别以“PGF2α 1nM”、“PGF2α 10nM”及“PGF2α 100nM”表示。沿y轴的值以自发基线收缩持续时间的百分比表示收缩持续时间。图72e是展示不同浓度的化合物II(6nM、60nM、600nM及6000nM)对从N＝6个进行剖腹产分娩的人类女性受试者收集的足月、分娩前子宫肌层活组织切片中PGF2α诱导平滑肌收缩的所有收缩的总功(所有收缩的曲线下面积的总和)的影响的图。实验是使用DMT Myograph 800MS(ADINSTRUMENTS^TM)，在含氧克雷布氏溶液中以ADI Powerlab软件进行。一旦确定规律收缩至少20分钟，就记录下所有自发收缩的总功的基线测量值。所有自发收缩的做功的测量值在x轴上以“Spon.”表示。接着，将指定浓度的DMSO对照或化合物II添加至各子宫肌层样品中并测量在接下来的10分钟时间段内对照或化合物II对所有后续收缩的总功的影响。这一时间点在x轴上以“化合物II”表示。随后，通过用递增浓度的PGF2α(1nM、10nM及100nM)以连续的10分钟时间间隔激发子宫肌层组织样品，测量在PGF2α存在下化合物II对收缩的总功的影响。这些时间点在x轴上分别以“PGF2α 1nM”、“PGF2α 10nM”及“PGF2α 100nM”表示。沿y轴的值以自发基线收缩的总功百分比表示收缩的总功。“#”符号表示p值相对于DMSO对照组是p<0.05。

图73a是展示不同浓度的化合物II(6nM、60nM、600nM及6000nM)对从N＝6个进行剖腹产分娩的人类女性受试者收集的足月、分娩前子宫肌层活组织切片中催产素(OT)诱导平滑肌收缩的频率的影响的图。实验是使用DMT Myograph 800MS(ADINSTRUMENTS^TM)，在含氧克雷布氏溶液中以ADI Powerlab软件进行。一旦确定规律收缩至少20分钟，就记录下自发收缩频率的基线测量值。自发收缩频率的测量值在x轴上以“Spon.”表示。接着，将指定浓度的DMSO对照或化合物II添加至各子宫肌层样品中并测量在接下来的10分钟时间段内对照或化合物II对收缩频率的影响。这一时间点在x轴上以“化合物II”表示。随后，通过用递增浓度的OT(1nM、10nM及100nM)以连续的10分钟时间间隔激发子宫肌层组织样品，测量在OT存在下化合物II对收缩频率的影响。这些时间点在x轴上分别以“OT 1nM”、“OT 10nM”及“OT100nM”表示。沿y轴的值以自发基线收缩频率的百分比表示收缩频率。星号表示p值相对于DMSO对照组是p<0.05。图73b是展示不同浓度的化合物II(6nM、60nM、600nM及6000nM)对N＝6个从进行剖腹产分娩的人类女性受试者收集的足月、分娩前子宫肌层活组织切片中OT诱导平滑肌收缩的每次收缩的做功(曲线下面积或“AUC”)的影响的图。实验是使用DMTMyograph 800MS(ADINSTRUMENTS^TM)，在含氧克雷布氏溶液中以ADI Powerlab软件进行。一旦确定规律收缩至少20分钟，就记录下每次收缩的自发做功的基线测量值。每次收缩的自发做功的测量值在x轴上以“Spon.”表示。接着，将指定浓度的DMSO对照或化合物II添加至各子宫肌层样品中并测量在接下来的10分钟时间段内对照或化合物II对每次收缩的做功的影响。这一时间点在x轴上以“化合物II”表示。随后，通过用递增浓度的OT(1nM、10nM及100nM)以连续的10分钟时间间隔激发子宫肌层组织样品，测量在OT存在下化合物II对每次收缩的做功的影响。这些时间点在x轴上分别以“OT 1nM”、“OT 10nM”及“OT 100nM”表示。沿y轴的值以对于自发基线收缩，每次收缩的做功百分比表示每次收缩的做功。图73c是展示不同浓度的化合物II(6nM、60nM、600nM及6000nM)对N＝6个从进行剖腹产分娩的人类女性受试者收集的足月、分娩前子宫肌层活组织切片中OT诱导平滑肌收缩的峰振幅的影响的图。实验是使用DMT Myograph 800MS(ADINSTRUMENTS^TM)，在含氧克雷布氏溶液中以ADIPowerlab软件进行。一旦确定规律收缩至少20分钟，就记录下自发收缩峰振幅的基线测量值。自发收缩峰振幅的测量值在x轴上以“Spon.”表示。接着，将指定浓度的DMSO对照或化合物II添加至各子宫肌层样品中并测量在接下来的10分钟时间段内对照或化合物II对收缩峰振幅的影响。这一时间点在x轴上以“化合物II”表示。随后，通过用递增浓度的OT(1nM、10nM及100nM)以连续的10分钟时间间隔激发子宫肌层组织样品，测量在OT存在下化合物II对收缩峰振幅的影响。这些时间点在x轴上分别以“OT 1nM”、“OT 10nM”及“OT 100nM”表示。沿y轴的值以自发基线收缩的峰振幅的百分比表示收缩峰振幅。星号表示p值相对于DMSO对照组是p<0.05。图73d是展示不同浓度的化合物II(6nM、60nM、600nM及6000nM)对从N＝6个进行剖腹产分娩的人类女性受试者收集的足月、分娩前子宫肌层活组织切片中OT诱导平滑肌收缩的持续时间的影响的图。实验是使用DMT Myograph 800MS(ADINSTRUMENTS^TM)，在含氧克雷布氏溶液中以ADI Powerlab软件进行。一旦确定规律收缩至少20分钟，就记录下自发收缩持续时间的基线测量值。自发收缩持续时间的测量值在x轴上以“Spon.”表示。接着，将指定浓度的DMSO对照或化合物II添加至各子宫肌层样品中并测量在接下来的10分钟时间段内对照或化合物II对收缩持续时间的影响。这一时间点在x轴上以“化合物II”表示。随后，通过用递增浓度的OT(1nM、10nM及100nM)以连续的10分钟时间间隔激发子宫肌层组织样品，测量在OT存在下化合物II对收缩持续时间的影响。这些时间点在x轴上分别以“OT1nM”、“OT10nM”及“OT 100nM”表示。沿y轴的值以自发基线收缩持续时间的百分比表示收缩持续时间。图73e是展示不同浓度的化合物II(6nM、60nM、600nM及6000nM)对从N＝6个进行剖腹产分娩的人类女性受试者收集的足月、分娩前子宫肌层活组织切片中OT诱导平滑肌收缩的所有收缩的总功(所有收缩的曲线下面积的总和)的影响的图。实验是使用DMTMyograph 800MS(ADINSTRUMENTS^TM)，在含氧克雷布氏溶液中以ADI Powerlab软件进行。一旦确定规律收缩至少20分钟，就记录下所有自发收缩的总功的基线测量值。所有自发收缩的做功的测量值在x轴上以“Spon.”表示。接着，将指定浓度的DMSO对照或化合物II添加至各子宫肌层样品中并测量在接下来的10分钟时间段内对照或化合物II对所有后续收缩的总功的影响。这一时间点在x轴上以“化合物II”表示。随后，通过用递增浓度的OT(1nM、10nM及100nM)以连续的10分钟时间间隔激发子宫肌层组织样品，测量在OT存在下化合物II对收缩的总功的影响。这些时间点在x轴上分别以“OT 1nM”、“OT 10nM”及“OT 100nM”表示。沿y轴的值以自发基线收缩的总功百分比表示收缩的总功。星号表示p值相对于DMSO对照组是p<0.05。

图74a是展示不同浓度的阿托西班(6nM、60nM及600nM)对从N＝6个进行剖腹产分娩的人类女性受试者收集的足月、分娩前子宫肌层活组织切片中PGF2α诱导平滑肌收缩的频率的影响的图。实验是使用DMT Myograph 800MS(ADINSTRUMENTS^TM)，在含氧克雷布氏溶液中以ADI Powerlab软件进行。一旦确定规律收缩至少20分钟，就记录下自发收缩频率的基线测量值。自发收缩频率的测量值在x轴上以“Spon.”表示。接着，将指定浓度的DMSO对照或阿托西班(“Ato”)添加至各子宫肌层样品中并测量在接下来的10分钟时间段内对照或阿托西班对收缩频率的影响。这一时间点在x轴上以“Ato”表示。随后，通过用递增浓度的PGF2α(1nM、10nM及100nM)以连续的10分钟时间间隔激发子宫肌层组织样品，测量在PGF2α存在下阿托西班对收缩频率的影响。这些时间点在x轴上分别以“PGF2α 1nM”、“PGF2α 10nM”及“PGF2α 100nM”表示。沿y轴的值以自发基线收缩频率的百分比表示收缩频率。星号表示p值相对于DMSO对照组是p<0.05。图74b是展示不同浓度的阿托西班(6nM、60nM及600nM)对N＝6个从进行剖腹产分娩的人类女性受试者收集的足月、分娩前子宫肌层活组织切片中PGF2α诱导平滑肌收缩的每次收缩的做功(曲线下面积或“AUC”)的影响的图。实验是使用DMTMyograph 800MS(ADINSTRUMENTS^TM)，在含氧克雷布氏溶液中以ADI Powerlab软件进行。一旦确定规律收缩至少20分钟，就记录下每次收缩的自发做功的基线测量值。每次收缩的自发做功的测量值在x轴上以“Spon.”表示。接着，将指定浓度的DMSO对照或阿托西班添加至各子宫肌层样品中并测量在接下来的10分钟时间段内对照或阿托西班对每次收缩的做功的影响。这一时间点在x轴上以“Ato”表示。随后，通过用递增浓度的PGF2α(1nM、10nM及100nM)以连续的10分钟时间间隔激发子宫肌层组织样品，测量在PGF2α存在下阿托西班对每次收缩的做功的影响。这些时间点在x轴上分别以“PGF2α 1nM”、“PGF2α 10nM”及“PGF2α100nM”表示。沿y轴的值以对于自发基线收缩，每次收缩的做功百分比表示每次收缩的做功。图74c是展示不同浓度的阿托西班(6nM、60nM及600nM)对从N＝6个进行剖腹产分娩的人类女性受试者收集的足月、分娩前子宫肌层活组织切片中PGF2α诱导平滑肌收缩的峰振幅的影响的图。实验是使用DMT Myograph 800MS(ADINSTRUMENTS^TM)，在含氧克雷布氏溶液中以ADI Powerlab软件进行。一旦确定规律收缩至少20分钟，就记录下自发收缩峰振幅的基线测量值。自发收缩峰振幅的测量值在x轴上以“Spon.”表示。接着，将指定浓度的DMSO对照或阿托西班添加至各子宫肌层样品中并测量在接下来的10分钟时间段内对照或阿托西班对收缩峰振幅的影响。这一时间点在x轴上以“Ato”表示。随后，通过用递增浓度的PGF2α(1nM、10nM及100nM)以连续的10分钟时间间隔激发子宫肌层组织样品，测量在PGF2α存在下阿托西班对收缩峰振幅的影响。这些时间点在x轴上分别以“PGF2α 1nM”、“PGF2α 10nM”及“PGF2α 100nM”表示。沿y轴的值以自发基线收缩的峰振幅的百分比表示收缩峰振幅。图74d是展示不同浓度的阿托西班(6nM、60nM及600nM)对从N＝6个进行剖腹产分娩的人类女性受试者收集的足月、分娩前子宫肌层活组织切片中PGF2α诱导平滑肌收缩的持续时间的影响的图。实验是使用DMT Myograph 800MS(ADINSTRUMENTS^TM)，在含氧克雷布氏溶液中以ADIPowerlab软件进行。一旦确定规律收缩至少20分钟，就记录下自发收缩持续时间的基线测量值。自发收缩持续时间的测量值在x轴上以“Spon.”表示。接着，将指定浓度的DMSO对照或阿托西班添加至各子宫肌层样品中并测量在接下来的10分钟时间段内对照或阿托西班对收缩持续时间的影响。这一时间点在x轴上以“Ato”表示。随后，通过用递增浓度的PGF2α(1nM、10nM及100nM)以连续的10分钟时间间隔激发子宫肌层组织样品，测量在PGF2α存在下阿托西班对收缩持续时间的影响。这些时间点在x轴上分别以“PGF2α 1nM”、“PGF2α 10nM”及“PGF2α 100nM”表示。沿y轴的值以自发基线收缩持续时间的百分比表示收缩持续时间。图74e是展示不同浓度的阿托西班(6nM、60nM及600nM)对从N＝6个进行剖腹产分娩的人类女性受试者收集的足月、分娩前子宫肌层活组织切片中PGF2α诱导平滑肌收缩的所有收缩的总功(所有收缩的曲线下面积的总和)的影响的图。实验是使用DMT Myograph 800MS(ADINSTRUMENTS^TM)，在含氧克雷布氏溶液中以ADI Powerlab软件进行。一旦确定规律收缩至少20分钟，就记录下所有自发收缩的总功的基线测量值。所有自发收缩的做功的测量值在x轴上以“Spon.”表示。接着，将指定浓度的DMSO对照或阿托西班添加至各子宫肌层样品中并测量在接下来的10分钟时间段内对照或阿托西班对所有后续收缩的总功的影响。这一时间点在x轴上以“Ato”表示。随后，通过用递增浓度的PGF2α(1nM、10nM及100nM)以连续的10分钟时间间隔激发子宫肌层组织样品，测量在PGF2α存在下阿托西班对收缩的总功的影响。这些时间点在x轴上分别以“PGF2α1nM”、“PGF2α 10nM”及“PGF2α 100nM”表示。沿y轴的值以自发基线收缩的总功百分比表示收缩的总功。星号表示p值相对于DMSO对照组是p<0.05。

图75a是展示不同浓度的阿托西班(6nM、60nM及600nM)对从N＝6个进行剖腹产分娩的人类女性受试者收集的足月、分娩前子宫肌层活组织切片中PGE2诱导平滑肌收缩的频率的影响的图。实验是使用DMT Myograph 800MS(ADINSTRUMENTS^TM)，在含氧克雷布氏溶液中以ADI Powerlab软件进行。一旦确定规律收缩至少20分钟，就记录下自发收缩频率的基线测量值。自发收缩频率的测量值在x轴上以“Spon.”表示。接着，将指定浓度的DMSO对照或阿托西班(“Ato”)添加至各子宫肌层样品中并测量在接下来的10分钟时间段内对照或阿托西班对收缩频率的影响。这一时间点在x轴上以“Ato”表示。随后，通过用递增浓度的PGF2(1nM、10nM及100nM)以连续的10分钟时间间隔激发子宫肌层组织样品，测量在PGF2存在下阿托西班对收缩频率的影响。这些时间点在x轴上分别以“PGF2 1nM”、“PGF2 10nM”及“PGF2100nM”表示。沿y轴的值以自发基线收缩频率的百分比表示收缩频率。三个星号表示p值相对于DMSO对照组是p<0.001。图75b是展示不同浓度的阿托西班(6nM、60nM及600nM)对N＝6个从进行剖腹产分娩的人类女性受试者收集的足月、分娩前子宫肌层活组织切片中PGF2诱导平滑肌收缩的每次收缩的做功(曲线下面积或“AUC”)的影响的图。实验是使用DMTMyograph 800MS(ADINSTRUMENTS^TM)，在含氧克雷布氏溶液中以ADI Powerlab软件进行。一旦确定规律收缩至少20分钟，就记录下每次收缩的自发做功的基线测量值。每次收缩的自发做功的测量值在x轴上以“Spon.”表示。接着，将指定浓度的DMSO对照或阿托西班添加至各子宫肌层样品中并测量在接下来的10分钟时间段内对照或阿托西班对每次收缩的做功的影响。这一时间点在x轴上以“Ato”表示。随后，通过用递增浓度的PGF2(1nM、10nM及100nM)以连续的10分钟时间间隔激发子宫肌层组织样品，测量在PGF2存在下阿托西班对每次收缩的做功的影响。这些时间点在x轴上分别以“PGF2 1nM”、“PGF2 10nM”及“PGF2100nM”表示。沿y轴的值以对于自发基线收缩，每次收缩的做功百分比表示每次收缩的做功。图75c是展示不同浓度的阿托西班(6nM、60nM及600nM)对从N＝6个进行剖腹产分娩的人类女性受试者收集的足月、分娩前子宫肌层活组织切片中PGF2诱导平滑肌收缩的峰振幅的影响的图。实验是使用DMT Myograph 800MS(ADINSTRUMENTS^TM)，在含氧克雷布氏溶液中以ADI Powerlab软件进行。一旦确定规律收缩至少20分钟，就记录下自发收缩峰振幅的基线测量值。自发收缩峰振幅的测量值在x轴上以“Spon.”表示。接着，将指定浓度的DMSO对照或阿托西班添加至各子宫肌层样品中并测量在接下来的10分钟时间段内对照或阿托西班对收缩峰振幅的影响。这一时间点在x轴上以“Ato”表示。随后，通过用递增浓度的PGF2(1nM、10nM及100nM)以连续的10分钟时间间隔激发子宫肌层组织样品，测量在PGF2存在下阿托西班对收缩峰振幅的影响。这些时间点在x轴上分别以“PGF2 1nM”、“PGF2 10nM”及“PGF2100nM”表示。沿y轴的值以自发基线收缩的峰振幅的百分比表示收缩峰振幅。星号表示p值相对于DMSO对照组是p<0.05。图75d是展示不同浓度的阿托西班(6nM、60nM及600nM)对从N＝6个进行剖腹产分娩的人类女性受试者收集的足月、分娩前子宫肌层活组织切片中PGF2诱导平滑肌收缩的持续时间的影响的图。实验是使用DMT Myograph 800MS(ADINSTRUMENTS^TM)，在含氧克雷布氏溶液中以ADI Powerlab软件进行。一旦确定规律收缩至少20分钟，就记录下自发收缩持续时间的基线测量值。自发收缩持续时间的测量值在x轴上以“Spon.”表示。接着，将指定浓度的DMSO对照或阿托西班添加至各子宫肌层样品中并测量在接下来的10分钟时间段内对照或阿托西班对收缩持续时间的影响。这一时间点在x轴上以“Ato”表示。随后，通过用递增浓度的PGF2(1nM、10nM及100nM)以连续的10分钟时间间隔激发子宫肌层组织样品，测量在PGF2存在下阿托西班对收缩持续时间的影响。这些时间点在x轴上分别以“PGF2 1nM”、“PGF2 10nM”及“PGF2 100nM”表示。沿y轴的值以自发基线收缩持续时间的百分比表示收缩持续时间。图75e是展示不同浓度的阿托西班(6nM、60nM及600nM)对从N＝6个进行剖腹产分娩的人类女性受试者收集的足月、分娩前子宫肌层活组织切片中PGF2诱导平滑肌收缩的所有收缩的总功(所有收缩的曲线下面积的总和)的影响的图。实验是使用DMT Myograph 800MS(ADINSTRUMENTS^TM)，在含氧克雷布氏溶液中以ADIPowerlab软件进行。一旦确定规律收缩至少20分钟，就记录下所有自发收缩的总功的基线测量值。所有自发收缩的做功的测量值在x轴上以“Spon.”表示。接着，将指定浓度的DMSO对照或阿托西班添加至各子宫肌层样品中并测量在接下来的10分钟时间段内对照或阿托西班对所有后续收缩的总功的影响。这一时间点在x轴上以“Ato”表示。随后，通过用递增浓度的PGF2(1nM、10nM及100nM)以连续的10分钟时间间隔激发子宫肌层组织样品，测量在PGF2存在下阿托西班对收缩的总功的影响。这些时间点在x轴上分别以“PGF2 1nM”、“PGF210nM”及“PGF2 100nM”表示。沿y轴的值以自发基线收缩的总功百分比表示收缩的总功。星号表示p值相对于DMSO对照组是p<0.05。三个星号表示p值相对于DMSO对照组是p<0.001。

图76a是展示不同浓度的化合物II(60nM和600nM)、阿托西班(6nM)及化合物II与阿托西班的组合对N＝3个从进行剖腹产分娩的人类女性受试者收集的足月、分娩前子宫肌层活组织切片中OT诱导平滑肌收缩的频率的影响的图。实验是使用DMT Myograph 800MS(ADINSTRUMENTS^TM)，在含氧克雷布氏溶液中以ADI Powerlab软件进行。一旦确定规律收缩至少20分钟，就记录下自发收缩频率的基线测量值。自发收缩频率的测量值在x轴上以“Spon.”表示。接着，将指定浓度的DMSO对照、化合物II和/或阿托西班添加至各子宫肌层样品中并测量在接下来的10分钟时间段内对照、化合物II和/或阿托西班对收缩频率的影响。这一时间点在x轴上以“ANT”表示。随后，通过用递增浓度的OT(1nM、10nM及100nM)以连续的10分钟时间间隔激发子宫肌层组织样品，测量在OT存在下化合物II和/或阿托西班对收缩频率的影响。这些时间点在x轴上分别以“OT 1nM”、“OT 10nM”及“OT 100nM”表示。沿y轴的值以自发基线收缩频率的百分比表示收缩频率。图76b是展示不同浓度的化合物II(60nM和600nM)、阿托西班(6nM)及化合物II与阿托西班的组合对N＝3个从进行剖腹产分娩的人类女性受试者收集的足月、分娩前子宫肌层活组织切片中OT诱导平滑肌收缩的每次收缩的做功(曲线下面积或“AUC”)的影响的图。实验是使用DMT Myograph 800MS(ADINSTRUMENTS^TM)，在含氧克雷布氏溶液中以ADI Powerlab软件进行。一旦确定规律收缩至少20分钟，就记录下每次收缩的自发做功的基线测量值。每次收缩的自发做功的测量值在x轴上以“Spon.”表示。接着，将指定浓度的DMSO对照、化合物II和/或阿托西班添加至各子宫肌层样品中并测量在接下来的10分钟时间段内对照、化合物II和/或阿托西班对每次收缩的做功的影响。这一时间点在x轴上以“ANT”表示。随后，通过用递增浓度的OT(1nM、10nM及100nM)以连续的10分钟时间间隔激发子宫肌层组织样品，测量在OT存在下化合物II和/或阿托西班对每次收缩的做功的影响。这些时间点在x轴上分别以“OT 1nM”、“OT 10nM”及“OT 100nM”表示。沿y轴的值以对于自发基线收缩，每次收缩的做功百分比表示每次收缩的做功。图76c是展示不同浓度的化合物II(60nM和600nM)、阿托西班(6nM)及化合物II与阿托西班的组合对N＝3个从进行剖腹产分娩的人类女性受试者收集的足月、分娩前子宫肌层活组织切片中OT诱导平滑肌收缩的峰振幅的影响的图。实验是使用DMT Myograph 800MS(ADINSTRUMENTS^TM)，在含氧克雷布氏溶液中以ADI Powerlab软件进行。一旦确定规律收缩至少20分钟，就记录下自发收缩峰振幅的基线测量值。自发收缩峰振幅的测量值在x轴上以“Spon.”表示。接着，将指定浓度的DMSO对照、化合物II和/或阿托西班添加至各子宫肌层样品中并测量在接下来的10分钟时间段内对照、化合物II和/或阿托西班对收缩峰振幅的影响。这一时间点在x轴上以“ANT”表示。随后，通过用递增浓度的OT(1nM、10nM及100nM)以连续的10分钟时间间隔激发子宫肌层组织样品，测量在OT存在下化合物II和/或阿托西班对收缩峰振幅的影响。这些时间点在x轴上分别以“OT 1nM”、“OT 10nM”及“OT 100nM”表示。沿y轴的值以自发基线收缩的峰振幅的百分比表示收缩峰振幅。图76d是展示不同浓度的化合物II(60nM和600nM)、阿托西班(6nM)及化合物II与阿托西班的组合对N＝3个从进行剖腹产分娩的人类女性受试者收集的足月、分娩前子宫肌层活组织切片中OT诱导平滑肌收缩的持续时间的影响的图。实验是使用DMT Myograph 800MS(ADINSTRUMENTS^TM)，在含氧克雷布氏溶液中以ADI Powerlab软件进行。一旦确定规律收缩至少20分钟，就记录下自发收缩持续时间的基线测量值。自发收缩持续时间的测量值在x轴上以“Spon.”表示。接着，将指定浓度的DMSO对照、化合物II和/或阿托西班添加至各子宫肌层样品中并测量在接下来的10分钟时间段内对照、化合物II和/或阿托西班对收缩持续时间的影响。这一时间点在x轴上以“ANT”表示。随后，通过用递增浓度的OT(1nM、10nM及100nM)以连续的10分钟时间间隔激发子宫肌层组织样品，测量在OT存在下化合物II和/或阿托西班对收缩持续时间的影响。这些时间点在x轴上分别以“OT 1nM”、“OT 10nM”及“OT 100nM”表示。沿y轴的值以自发基线收缩持续时间的百分比表示收缩持续时间。图76e是展示不同浓度的化合物II(60nM和600nM)、阿托西班(6nM)及化合物II与阿托西班的组合对N＝3个从进行剖腹产分娩的人类女性受试者收集的足月、分娩前子宫肌层活组织切片中OT诱导平滑肌收缩的所有收缩的总功(所有收缩的曲线下面积的总和)的影响的图。实验是使用DMT Myograph 800MS(ADINSTRUMENTS^TM)，在含氧克雷布氏溶液中以ADI Powerlab软件进行。一旦确定规律收缩至少20分钟，就记录下所有自发收缩的总功的基线测量值。所有自发收缩的做功的测量值在x轴上以“Spon.”表示。接着，将指定浓度的DMSO对照、化合物II和/或阿托西班添加至各子宫肌层样品中并测量在接下来的10分钟时间段内对照、化合物II和/或阿托西班对所有后续收缩的总功的影响这一时间点在x轴上以“ANT”表示。随后，通过用递增浓度的OT(1nM、10nM及100nM)以连续的10分钟时间间隔激发子宫肌层组织样品，测量在OT存在下化合物II和/或阿托西班对收缩的总功的影响。这些时间点在x轴上分别以“OT 1nM”、“OT 10nM”及“OT 100nM”表示。沿y轴的值以自发基线收缩的总功百分比表示收缩的总功。三个星号表示p值相对于DMSO对照组是p<0.001。两个“#”符号表示p值相对于用6nM浓度的阿托西班治疗是p<0.01。

图77a是展示不同浓度的硝苯地平(1nM、6nM、60nM、600nM及10μM)对从N＝2个进行剖腹产分娩的人类女性受试者收集的足月、分娩前子宫肌层活组织切片中OT诱导平滑肌收缩的频率的影响的图。实验是使用DMT Myograph 800MS(ADINSTRUMENTS^TM)，在含氧克雷布氏溶液中以ADI Powerlab软件进行。一旦确定规律收缩至少20分钟，就记录下自发收缩频率的基线测量值。自发收缩频率的测量值在x轴上以“Spon.”表示。接着，将指定浓度的DMSO对照或硝苯地平添加至各子宫肌层样品中并测量在接下来的10分钟时间段内对照或硝苯地平对收缩频率的影响。这一时间点在x轴上以“Nif”表示。随后，通过用递增浓度的OT(1nM、10nM及100nM)以连续的10分钟时间间隔激发子宫肌层组织样品，测量在OT存在下硝苯地平对收缩频率的影响。这些时间点在x轴上分别以“OT 1nM”、“OT 10nM”及“OT 100nM”表示。沿y轴的值以自发基线收缩频率的百分比表示收缩频率。图77b是展示不同浓度的硝苯地平(1nM、6nM、60nM、600nM及10μM)对N＝2个从进行剖腹产分娩的人类女性受试者收集的足月、分娩前子宫肌层活组织切片中OT诱导平滑肌收缩的每次收缩的做功(曲线下面积或“AUC”)的影响的图。实验是使用DMT Myograph 800MS(ADINSTRUMENTS^TM)，在含氧克雷布氏溶液中以ADI Powerlab软件进行。一旦确定规律收缩至少20分钟，就记录下每次收缩的自发做功的基线测量值。每次收缩的自发做功的测量值在x轴上以“Spon.”表示。接着，将指定浓度的DMSO对照或硝苯地平添加至各子宫肌层样品中并测量在接下来的10分钟时间段内对照或硝苯地平对每次收缩的做功的影响。这一时间点在x轴上以“Nif”表示。随后，通过用递增浓度的OT(1nM、10nM及100nM)以连续的10分钟时间间隔激发子宫肌层组织样品，测量在OT存在下硝苯地平对每次收缩的做功的影响。这些时间点在x轴上分别以“OT 1nM”、“OT 10nM”及“OT 100nM”表示。沿y轴的值以对于自发基线收缩，每次收缩的做功百分比表示每次收缩的做功。图77c是展示不同浓度的硝苯地平(1nM、6nM、60nM、600nM及10μM)对从N＝2个进行剖腹产分娩的人类女性受试者收集的足月、分娩前子宫肌层活组织切片中OT诱导平滑肌收缩的峰振幅的影响的图。实验是使用DMT Myograph 800MS(ADINSTRUMENTS^TM)，在含氧克雷布氏溶液中以ADI Powerlab软件进行。一旦确定规律收缩至少20分钟，就记录下自发收缩峰振幅的基线测量值。自发收缩峰振幅的测量值在x轴上以“Spon.”表示。接着，将指定浓度的DMSO对照或硝苯地平添加至各子宫肌层样品中并测量在接下来的10分钟时间段内对照或硝苯地平对收缩峰振幅的影响。这一时间点在x轴上以“Nif”表示。随后，通过用递增浓度的OT(1nM、10nM及100nM)以连续的10分钟时间间隔激发子宫肌层组织样品，测量在OT存在下硝苯地平对收缩峰振幅的影响。这些时间点在x轴上分别以“OT 1nM”、“OT10nM”及“OT 100nM”表示。沿y轴的值以自发基线收缩的峰振幅的百分比表示收缩峰振幅。图77d是展示不同浓度的硝苯地平(1nM、6nM、60nM、600nM及10μM)对从N＝2个进行剖腹产分娩的人类女性受试者收集的足月、分娩前子宫肌层活组织切片中OT诱导平滑肌收缩的持续时间的影响的图。实验是使用DMT Myograph 800MS(ADINSTRUMENTS^TM)，在含氧克雷布氏溶液中以ADI Powerlab软件进行。一旦确定规律收缩至少20分钟，就记录下自发收缩持续时间的基线测量值。自发收缩持续时间的测量值在x轴上以“Spon.”表示。接着，将指定浓度的DMSO对照或硝苯地平添加至各子宫肌层样品中并测量在接下来的10分钟时间段内对照或硝苯地平对收缩持续时间的影响。这一时间点在x轴上以“Nif”表示。随后，通过用递增浓度的OT(1nM、10nM及100nM)以连续的10分钟时间间隔激发子宫肌层组织样品，测量在OT存在下硝苯地平对收缩持续时间的影响。这些时间点在x轴上分别以“OT 1nM”、“OT 10nM”及“OT100nM”表示。沿y轴的值以自发基线收缩持续时间的百分比表示收缩持续时间。图77e是展示不同浓度的硝苯地平(1nM、6nM、60nM、600nM及10μM)对从N＝2个进行剖腹产分娩的人类女性受试者收集的足月、分娩前子宫肌层活组织切片中OT诱导平滑肌收缩的所有收缩的总功(所有收缩的曲线下面积的总和)的影响的图。实验是使用DMT Myograph 800MS(ADINSTRUMENTS^TM)，在含氧克雷布氏溶液中以ADI Powerlab软件进行。一旦确定规律收缩至少20分钟，就记录下所有自发收缩的总功的基线测量值。所有自发收缩的做功的测量值在x轴上以“Spon.”表示。接着，将指定浓度的DMSO对照或硝苯地平添加至各子宫肌层样品中并测量在接下来的10分钟时间段内对照或硝苯地平对所有后续收缩的总功的影响。这一时间点在x轴上以“Nif”表示。随后，通过用递增浓度的OT(1nM、10nM及100nM)以连续的10分钟时间间隔激发子宫肌层组织样品，测量在OT存在下硝苯地平对收缩的总功的影响。这些时间点在x轴上分别以“OT 1nM”、“OT 10nM”及“OT 100nM”表示。沿y轴的值以自发基线收缩的总功百分比表示收缩的总功。

图78a是展示不同浓度的化合物II(60nM和600nM)、硝苯地平(6nM)及化合物II与硝苯地平的组合对N＝5个从进行剖腹产分娩的人类女性受试者收集的足月、分娩前子宫肌层活组织切片中OT诱导平滑肌收缩的频率的影响的图。实验是使用DMT Myograph 800MS(ADINSTRUMENTS^TM)，在含氧克雷布氏溶液中以ADI Powerlab软件进行。一旦确定规律收缩至少20分钟，就记录下自发收缩频率的基线测量值。自发收缩频率的测量值在x轴上以“Spon.”表示。接着，将指定浓度的DMSO对照、化合物II和/或硝苯地平添加至各子宫肌层样品中并测量在接下来的10分钟时间段内对照、化合物II和/或硝苯地平对收缩频率的影响。这一时间点在x轴上以“ANT”表示。随后，通过用递增浓度的OT(1nM、10nM及100nM)以连续的10分钟时间间隔激发子宫肌层组织样品，测量在OT存在下化合物II和/或硝苯地平对收缩频率的影响。这些时间点在x轴上分别以“OT 1nM”、“OT 10nM”及“OT 100nM”表示。沿y轴的值以自发基线收缩频率的百分比表示收缩频率。图78b是展示不同浓度的化合物II(60nM和600nM)、硝苯地平(6nM)及化合物II与硝苯地平的组合对N＝5个从进行剖腹产分娩的人类女性受试者收集的足月、分娩前子宫肌层活组织切片中OT诱导平滑肌收缩的每次收缩的做功(曲线下面积或“AUC”)的影响的图。实验是使用DMT Myograph 800MS(ADINSTRUMENTS^TM)，在含氧克雷布氏溶液中以ADI Powerlab软件进行。一旦确定规律收缩至少20分钟，就记录下每次收缩的自发做功的基线测量值。每次收缩的自发做功的测量值在x轴上以“Spon.”表示。接着，将指定浓度的DMSO对照、化合物II和/或硝苯地平添加至各子宫肌层样品中并测量在接下来的10分钟时间段内对照、化合物II和/或硝苯地平对每次收缩的做功的影响。这一时间点在x轴上以“ANT”表示。随后，通过用递增浓度的OT(1nM、10nM及100nM)以连续的10分钟时间间隔激发子宫肌层组织样品，测量在OT存在下化合物II和/或硝苯地平对每次收缩的做功的影响。这些时间点在x轴上分别以“OT 1nM”、“OT 10nM”及“OT 100nM”表示。沿y轴的值以对于自发基线收缩，每次收缩的做功百分比表示每次收缩的做功。图78c是展示不同浓度的化合物II(60nM和600nM)、硝苯地平(6nM)及化合物II与硝苯地平的组合对N＝5个从进行剖腹产分娩的人类女性受试者收集的足月、分娩前子宫肌层活组织切片中OT诱导平滑肌收缩的峰振幅的影响的图。实验是使用DMT Myograph 800MS(ADINSTRUMENTS^TM)，在含氧克雷布氏溶液中以ADI Powerlab软件进行。一旦确定规律收缩至少20分钟，就记录下自发收缩峰振幅的基线测量值。自发收缩峰振幅的测量值在x轴上以“Spon.”表示。接着，将指定浓度的DMSO对照、化合物II和/或硝苯地平添加至各子宫肌层样品中并测量在接下来的10分钟时间段内对照、化合物II和/或硝苯地平对收缩峰振幅的影响。这一时间点在x轴上以“ANT”表示。随后，通过用递增浓度的OT(1nM、10nM及100nM)以连续的10分钟时间间隔激发子宫肌层组织样品，测量在OT存在下化合物II和/或硝苯地平对收缩峰振幅的影响。这些时间点在x轴上分别以“OT 1nM”、“OT 10nM”及“OT 100nM”表示。沿y轴的值以自发基线收缩的峰振幅的百分比表示收缩峰振幅。图78d是展示不同浓度的化合物II(60nM和600nM)、硝苯地平(6nM)及化合物II与硝苯地平的组合对N＝5个从进行剖腹产分娩的人类女性受试者收集的足月、分娩前子宫肌层活组织切片中OT诱导平滑肌收缩的持续时间的影响的图。实验是使用DMT Myograph 800MS(ADINSTRUMENTS^TM)，在含氧克雷布氏溶液中以ADI Powerlab软件进行。一旦确定规律收缩至少20分钟，就记录下自发收缩持续时间的基线测量值。自发收缩持续时间的测量值在x轴上以“Spon.”表示。接着，将指定浓度的DMSO对照、化合物II和/或硝苯地平添加至各子宫肌层样品中并测量在接下来的10分钟时间段内对照、化合物II和/或硝苯地平对收缩持续时间的影响。这一时间点在x轴上以“ANT”表示。随后，通过用递增浓度的OT(1nM、10nM及100nM)以连续的10分钟时间间隔激发子宫肌层组织样品，测量在OT存在下化合物II和/或硝苯地平对收缩持续时间的影响。这些时间点在x轴上分别以“OT 1nM”、“OT 10nM”及“OT 100nM”表示。沿y轴的值以自发基线收缩持续时间的百分比表示收缩持续时间。图78e是展示不同浓度的化合物II(60nM和600nM)、硝苯地平(6nM)及化合物II与硝苯地平的组合对N＝5个从进行剖腹产分娩的人类女性受试者收集的足月、分娩前子宫肌层活组织切片中OT诱导平滑肌收缩的所有收缩的总功(所有收缩的曲线下面积的总和)的影响的图。实验是使用DMT Myograph 800MS(ADINSTRUMENTS^TM)，在含氧克雷布氏溶液中以ADI Powerlab软件进行。一旦确定规律收缩至少20分钟，就记录下所有自发收缩的总功的基线测量值。所有自发收缩的做功的测量值在x轴上以“Spon.”表示。接着，将指定浓度的DMSO对照、化合物II和/或硝苯地平添加至各子宫肌层样品中并测量在接下来的10分钟时间段内对照、化合物II和/或硝苯地平对所有后续收缩的总功的影响这一时间点在x轴上以“ANT”表示。随后，通过用递增浓度的OT(1nM、10nM及100nM)以连续的10分钟时间间隔激发子宫肌层组织样品，测量在OT存在下化合物II和/或硝苯地平对收缩的总功的影响。这些时间点在x轴上分别以“OT 1nM”、“OT 10nM”及“OT 100nM”表示。沿y轴的值以自发基线收缩的总功百分比表示收缩的总功。星号表示p值相对于DMSO对照组是p<0.05。两个星号表示p值相对于DMSO对照组是p<0.01。三个星号表示p值相对于DMSO对照组是p<0.001。三个“+”符号表示p值相对于用60nM浓度的化合物II治疗是p<0.001。

图79a是显示催产素、诺拉西班及其组合对N＝6个从进行剖腹产分娩的人类女性受试者收集的足月、分娩前子宫肌层活组织切片中磷酸化p65(p-p65)、磷酸化p38(p-p38)及磷酸化细胞外信号调控激酶(p-ERK)的表达的影响的蛋白质印迹。样品未刺激(“NS”)、用催产素(“OT”)刺激、用1μM浓度的诺拉西班处理或用催产素和1μM浓度的诺拉西班一起处理指定时间段。针对β-肌动蛋白进行印迹作为对照。图79b是显示催产素和/或不同浓度的化合物II任选组合诺拉西班对N＝6个从进行剖腹产分娩的人类女性受试者收集的足月、分娩前子宫肌层活组织切片中p-p65、p-p38及p-ERK的表达的影响的蛋白质印迹。样品在存在和不存在1μM浓度的诺拉西班情况下未刺激(“NS”)、用催产素(“OT”)刺激、用3μM浓度的化合物II处理或用催产素和不同化合物II浓度的化合物II一起处理指定时间段。针对β-肌动蛋白进行印迹作为对照。图79c是显示催产素、诺拉西班及其组合对N＝6个从进行剖腹产分娩的人类女性受试者收集的足月、分娩前子宫肌层活组织切片中促炎性基因环加氧酶2(COX-2)和磷酸化钙依赖性磷脂酶A2(p-cPLA2)的表达的影响的蛋白质印迹。样品未刺激(“NS”)、用催产素(“OT”)刺激、用1μM浓度的诺拉西班处理或用催产素和1μM浓度的诺拉西班一起处理指定时间段。针对β-肌动蛋白进行印迹作为对照。图79d是显示催产素和/或不同浓度的化合物II任选组合诺拉西班对N＝6个从进行剖腹产分娩的人类女性受试者收集的足月、分娩前子宫肌层活组织切片中促炎性基因COX-2和p-cPLA2的表达的影响的蛋白质印迹。样品在存在和不存在1μM浓度的诺拉西班情况下未刺激(“NS”)、用催产素(“OT”)刺激、用3μM浓度的化合物II处理或用催产素和不同化合物II浓度的化合物II一起处理指定时间段。针对β-肌动蛋白进行印迹作为对照。图79e是定量图79a和79b中显示的p-p65的表达的图。图79f是定量图79a和79b中显示的p-p38的表达的图。图79g是定量图79a和79b中显示的p-ERK的表达的图。图79h是定量图79c和79d中显示的COX-2的表达的图。星号表示p值相对于未刺激的(“NS”)样品是p<0.05。两个星号表示p值相对于未刺激的样品是p<0.01。三个星号表示p值相对于未刺激的样品是p<0.001。三个“#”符号表示p值相对于催产素(OT)处理的样品是p<0.001。图79i是定量图79c和79d中显示的p-cPLA2的表达的图。星号表示p值相对于未刺激的(“NS”)样品是p<0.05。三个星号表示p值相对于未刺激的样品是p<0.001。

图80a是显示催产素、诺拉西班及其组合对N＝3个从进行剖腹产分娩的人类女性受试者收集的足月、分娩前羊膜活组织切片中p-p65、p-p38及p-ERK的表达的影响的蛋白质印迹。样品未刺激(“NS”)、用催产素(“OT”)刺激、用1μM浓度的诺拉西班处理或用催产素和1μM浓度的诺拉西班一起处理指定时间段。针对β-肌动蛋白进行印迹作为对照。图80b是显示催产素和/或不同浓度的化合物II任选组合诺拉西班对N＝3个从进行剖腹产分娩的人类女性受试者收集的足月、分娩前羊膜活组织切片中p-p65、p-p38及p-ERK的表达的影响的蛋白质印迹。样品在存在和不存在1μM浓度的诺拉西班情况下未刺激(“NS”)、用催产素(“OT”)刺激、用3μM浓度的化合物II处理或用催产素和不同化合物II浓度的化合物II一起处理指定时间段。针对β-肌动蛋白进行印迹作为对照。图80c是显示催产素、诺拉西班及其组合对N＝3个从进行剖腹产分娩的人类女性受试者收集的足月、分娩前羊膜活组织切片中促炎性基因COX-2和p-cPLA2的表达的影响的蛋白质印迹。样品未刺激(“NS”)、用催产素(“OT”)刺激、用1μM浓度的诺拉西班处理或用催产素和1μM浓度的诺拉西班一起处理指定时间段。针对β-肌动蛋白进行印迹作为对照。图80d是显示催产素和/或不同浓度的化合物II任选组合诺拉西班对N＝3个从进行剖腹产分娩的人类女性受试者收集的足月、分娩前羊膜活组织切片中促炎性基因COX-2和p-cPLA2的表达的影响的蛋白质印迹。样品在存在和不存在1μM浓度的诺拉西班情况下未刺激(“NS”)、用催产素(“OT”)刺激、用3μM浓度的化合物II处理或用催产素和不同化合物II浓度的化合物II一起处理指定时间段。针对β-肌动蛋白进行印迹作为对照。

具体实施方式

本发明提供了噻唑烷羧酰胺如(3S)-3-({[(2S)-3-(联苯-4-基磺酰基)-1,3-噻唑烷-2-基]羰基}-氨基)-3-(4-氟苯基)丙基L-缬氨酸酯的α-氨基酯，以及其盐形式和晶体多晶型物。这些化合物能够抑制前列腺素F受体(FP-R)家族的蛋白质，如前列腺素F2α(PGF2α)受体的活性。本文所描述的化合物、盐和晶体多晶型物可以用于在体外和体内抑制前列腺素F受体的活性，并且是用于治疗早产的有效治疗性组合物。本文所描述的化合物、盐和晶体多晶型物可以施用给发生早期孕龄分娩或有发生早期孕龄分娩的受试者(例如哺乳动物受试者，如人类)，所述早期孕龄例如在38周之前(例如约20至约37周，如约20周、21周、22周、23周、24周、25周、26周、27周、28周、29周、30周、31周、32周、33周、34周、35周、36周或37周孕龄，优选是约24至约34周，如约24周、25周、26周、27周、28周、29周、30周、31周、32周、33周或34周孕龄)。本发明还提供了合成(3S)-3-({[(2S)-3-(联苯-4-基磺酰基)-1,3-噻唑烷-2-基]羰基}-氨基)-3-(4-氟苯基)丙基L-缬氨酸酯的方法，以及用于制备其盐形式和晶体多晶型物的工艺。本发明还涵盖通过向需要治疗的受试者如经历早产的受试者或有发生早产风险的受试者施用本发明的α-氨基酯任选与一种或多种如本文中所描述另外的治疗剂的组合来治疗受试者早产的方法。

除上述外，本发明也涵盖与3-([1,1'-联苯]-4-基磺酰基)-N-[1-(4-氟苯基)-3-羟丙基]-1,3-噻唑烷-2-甲酰胺相关的组合物和方法。如本文中所描述，此化合物可以任选与一种或多种如本文中所描述的另外的治疗剂组合提供给发生早期孕龄分娩或有发生早期孕龄分娩风险的受试者(例如哺乳动物受试者，如人类)，所述早期孕龄例如是在38周之前(例如约20至约37周，如约20周、21周、22周、23周、24周、25周、26周、27周、28周、29周、30周、31周、32周、33周、34周、35周、36周或37周孕龄，优选是约24至约34周，如约24周、25周、26周、27周、28周、29周、30周、31周、32周、33周或34周孕龄)。

(3S)-3-({[(2S)-3-(联苯-4-基磺酰基)-1,3-噻唑烷-2-基]羰基}-氨基)-3-(4-氟苯基)丙基L-缬氨酸酯(化合物I)

本发明是基于发现化合物I(由下式I表示的(3S)-3-({[(2S)-3-(联苯-4-基磺酰基)-1,3-噻唑烷-2-基]羰基}-氨基)-3-(4-氟苯基)丙基L-缬氨酸酯)和其盐在体内转化成3-([1,1'-联苯]-4-基磺酰基)-N-[1-(4-氟苯基)-3-羟丙基]-1,3-噻唑烷-2-甲酰胺(由下式II表示)。先前在US 8,415,480中描述的化合物II是前列腺素F受体的拮抗剂，，因为如通过竞争性放射性配体结合分析所测定(可用于测定Ki值的竞争性放射性配体结合分析的实验详情描述于例如US 8,415,480实施例51中)，这种化合物对于人类FP-R展现的抑制常数(Ki)是6nM。在施用给受试者之后，发现化合物I由于内源性酯酶如胃肠道中存在的内源性酯酶的活性而在体内去酯化形成化合物II。

已发现，化合物I是前列腺素F受体的抑制剂，因为化合物I以1nM的Ki抑制人类FP-R。化合物I的若干物理化学特征，包括在水中以及在模拟进食(FeSSIF)和空腹(FaSSIF)状态下小肠内含物的介质中的溶解度相对于化合物II展现出改良。这些数据概述于下表2中。

表2.化合物I与化合物II的物理化学特性的比较

参数	化合物I	化合物II
			在水中的溶解度(μg/mL)	380	0.4
在FaSSIF(μg/mL)pH 6.5中的溶解度	70	0.4
			在FeSSIF(μg/mL)pH 5.0中的溶解度	90	10
人类FP-R Ki(nM)	1	6

除展现出增强的水溶性外，化合物I和其盐的特征还在于出人意料且有益的吸收机制。如以下实施例中所描述，化合物I在小肠中的环境酯酶作用下去酯化，随后被动地渗透小肠上皮细胞。意外的是，化合物I和其盐不是Pept1转运蛋白的底物，所述Pept1转运蛋白是介导肽养分吸收的质子偶合共转运蛋白。这一发现表示出乎意料并且在药理学上有益的特性。如例如Vig等人,《先进药物递送评论》65:1370-1385(2013)所描述，已知Pept1介导多种缬氨酸酯的吸收，所述文献的公开内容以引用的方式并入本文中。如由Pept1跨肠上皮细胞转运的化合物的结构多样性所证实，此蛋白质展现广泛的底物特异性。尽管存在缬氨酸酯官能团，但化合物I和其盐不依赖于此转运蛋白实现跨小肠上皮细胞吸收。这是一种有利的特性，因为化合物I和其盐(例如化合物III)由此不会与Pept1的天然底物，如肽养分竞争结合至此蛋白质并通过此蛋白质转运。实际上，化合物I和其盐在体内转化成以与能量和局部质子梯度无关的方式容易地吸收的形式。这种出乎意料的特性加上化合物I和其盐的高水溶性一起提供了有益的药物动力学特征，由于这种药物动力学特征，本发明的化合物容易地溶解于水性环境中并且继而转化成能够不依赖于转运蛋白吸收的形式。

(3S)-3-({[(2S)-3-(联苯-4-基磺酰基)-1,3-噻唑烷-2-基]羰基}-氨基)-3-(4-氟苯基)丙基L-缬氨酸酯盐酸盐(化合物III)

已发现，化合物I的氯化物盐((3S)-3-({[(2S)-3-(联苯-4-基磺酰基)-1,3-噻唑烷-2-基]羰基}-氨基)-3-(4-氟苯基)丙基L-缬氨酸酯盐酸盐，以下式III表示)易于使用若干独特的实验程序结晶，如以下实施例中所描述。化合物III当由多种介质并且在不同环境条件下结晶时呈现单一、可再现的晶体形式。此外，化合物III的这种晶体形式在环境条件下并且在较高相对湿度存在下展现出长期稳定性。如在下文呈现的实施例中更详细地描述，化合物III展现低吸湿性并因此不会展示出从局部大气吸收湿气的倾向。因此，化合物III展现出对如水解之类化学变化的抗性以及对杂质并入的抗性。举例来说，与大气水有关的杂质不易于整合至化合物III的结晶形式中。化合物III可以施用给受试者，如怀孕的女性人类受试者，以使受试者分娩的发作延迟例如一天或多天或者一周或数周，如约1天至约16周(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30天，或约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15或16周)。化合物III也可以被施用给受试者，如怀孕的女性人类受试者，以缓解与分娩有关的一种或多种症状，如阴道出血和子宫膜破裂。

化合物I，或其药学上可接受的盐，如化合物III可以单独施用或与一种或多种另外的药剂，如另外的治疗剂组合施用。示例性另外的治疗剂包括另外的宫缩抑制剂，如本文所描述的催产素受体拮抗剂，包括例如阿托西班、瑞托西班、巴卢西班、亚泊西班及诺拉西班，其为(3Z,5S)-5-(羟甲基)-1-[(2'-甲基-1,1'-联苯-4-基)羰基]吡咯烷-3-酮O-甲基肟，或其变化形式、配制物、结晶形式或衍生物。通过抑制催产素信号转导，催产素受体拮抗剂可以与本文所描述的前列腺素F2α受体拮抗剂协同作用以减慢或停止例如发生早产或有发生早产风险(例如出现一种或多种早产症状)的患者的子宫收缩。示例性另外的宫缩抑制剂包括β模拟剂，如特布他林、利托君、海索那林、沙丁胺醇、非诺特罗、尼利特林及奥西那林，这些可以用于通过上调cAMP而使肌球蛋白轻链激酶失活和/或耗尽子宫肌层Ca²⁺储备，由此抑制子宫收缩。钙通道抑制剂，如二氢吡啶(例如硝苯地平和尼卡地平)可以另外或替代地与本发明化合物结合施用以例如调节子宫肌层[Ca²⁺]并抑制Ca²⁺介导的肌球蛋白丝活化，由此引起子宫肌层收缩。镁盐，如硫酸镁可以另外或替代地与本发明化合物结合施用以例如使质膜超极化和/或与Ca²⁺竞争结合至肌球蛋白轻链。另外或替代地，一氧化氮供体，如硝酸甘油可以与本文所描述的化合物结合施用以例如增大子宫肌层环单磷酸鸟苷含量，由此使肌球蛋白轻链丝失活。

本发明化合物，如化合物I或其药学上可接受的盐，如化合物III可以另外或替代地与孕酮或其变化形式或衍生物，如17-α-羟基孕酮结合施用以抑制发生早产或有早产风险(例如呈递一种或多种早产症状)的受试者的子宫收缩。

另外或替代地，本发明化合物可以与本文所描述或本领域中已知的皮质类固醇结合施用以例如促进胎儿肺成熟，由此预防呼吸窘迫综合症等婴儿病症的发生。

此外，化合物III可以被配制成药物组合物，如按以下所描述配制的药物组合物。

治疗方法

化合物I以及其盐是前列腺素F受体的稳定抑制剂并且可以用于拮抗如前列腺素F2α之类前列腺素F家族成员与相应前列腺素F受体之间的体内相互作用以减弱子宫收缩。化合物I和其盐可以被施用给受试者，如怀孕的人类女性受试者，以治疗或预防早产。内源性前列腺素F2α是由子宫上皮细胞响应于催产素引发的信号转导级联而合成和释放。当PGF2α结合至在子宫肌细胞的细胞外表面上的PGF2α-R时，磷脂酶C使磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸(PIP₂)裂解而产生二酰甘油(DAG)和肌醇-1,4,5-三磷酸(IP₃)。IP₃继而增强细胞内钙(Ca²⁺)肌质网的释放。钙储存的突然增加最终引起子宫肌肉收缩及黄体(一种支撑发育胎儿的孕酮分泌结构)内皮细胞的坏死。由PGF2α分泌失调引起的子宫收缩的异常起始及黄体降解会导致早产。化合物I和其盐，如化合物III可以通过抑制PGF2α与PGF2αR的缔合来减少磷脂酶C介导的IP₃形成，以及随后细胞内钙储存的动员。因此，化合物I或其盐，如化合物III可以被施用给受试者，如怀孕的女性人类受试者以使受试者分娩的发作延迟例如一天或多天或者一周或数周，如约1天至约16周(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30天，或约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15或16周)。举例来说，化合物I或其盐，如化合物III可以被施用给受试者以预防在剖腹产之前分娩。此外，化合物I或其盐，如化合物III可以被施用给受试者以预防和/或治疗痛经。化合物I或其盐，如化合物III还可以被施用给受试者，如怀孕的女性人类受试者，以缓解与分娩有关的一种或多种症状，如阴道出血和子宫膜破裂。

此外，本发明的化合物可以用于治疗患者(例如人类患者)的子宫内膜异位。前列腺素F2α受体过度表达与异常子宫内膜生长相关。作为前列腺素F2α受体活性拮抗剂，本发明的化合物(例如化合物(I)或其盐，如化合物(III))可以被施用给患有子宫内膜异位的患者以治疗此适应症。本发明的化合物还可以被施用给患者以缓解子宫内膜异位的一种或多种症状，这些疼痛症状包括行经期间和/或经期外的痛经、性交疼痛、慢性骨盆疼痛、尿痛及排便困难。通过向患者施用本发明化合物成功治疗子宫内膜异位可以通过例如子宫内膜组织生长减慢和/或行经期间和/或经期外疼痛症状减轻证实。

除上述外，本发明还提供了通过向需要治疗本文所描述的病况的受试者提供化合物II进行治疗性治疗的方法。举例来说，化合物II可以被提供给受试者，如怀孕的人类女性受试者，以治疗或预防早产。化合物II是PGF2α受体的有效拮抗剂并因此可以抑制此受体与PGF2α的缔合。因此，化合物II可以被提供给受试者，如怀孕的女性人类受试者，以使受试者的分娩发作延迟例如一天或数天，或者一周或数周，如约1天至约16周(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30天，或约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15或16周)。举例来说，化合物II可以被提供给受试者以预防在剖腹产之前分娩。此外，化合物II可以被提供给受试者以预防和/或治疗痛经。化合物II也可以被提供给受试者，如怀孕的女性人类受试者，以缓解与分娩有关的一种或多种症状，如阴道出血和子宫膜破裂。

此外，化合物II可以被提供给受试者以治疗患者(例如人类患者)的子宫内膜异位。作为PGF2α受体拮抗剂，化合物II可以被提供给患有子宫内膜异位的患者以治疗此适应症。化合物II可以被提供给患者以缓解子宫内膜异位的一种或多种症状，这些疼痛症状包括行经期间和/或经期外的痛经、性交疼痛、慢性骨盆疼痛、尿痛及排便困难。通过向受试者提供化合物II成功治疗子宫内膜异位可以通过例如子宫内膜组织生长减慢和/或行经期间和/或经期外疼痛症状减轻证实。

组合疗法

虽然分娩发作所涉及的过程尚未完全确定，但越来越多的证据表明在足月分娩和早产中存在明显炎症。在分娩发作期间，包括前列腺素、细胞因子及锰超氧化物歧化酶在内的多种促炎性因子全身性增加。此外，炎症在很大程度上牵涉到感染驱动的早产。

据悉，催产素通过施加两种独特的作用来起动分娩：直接诱导子宫肌层收缩及增进收缩性前列腺素自子宫内膜/蜕膜的合成和释放。通过抑制催产素信号转导，可以实现催产素对子宫的直接(收缩)和间接(增进前列腺素合成)作用。此外，用催产素治疗人类蜕膜会刺激前列腺素F2α的产生。这表明在子宫组织中存在催产素信号传导的补充作用，由此催产素不仅可以与子宫肌层直接相互作用以刺激子宫收缩，而且还可以通过其它组织中前列腺素的形成与子宫肌层间接相互作用。

近期有证据表明收缩性前列腺素F受体的活性与分娩的发作及分娩进展过程存在关联。近期的报导也指示，催产素通过增强环加氧酶2(COX-2)来诱导人类子宫肌层细胞中前列腺素的产生。这种机制可以解释子宫组织中前列腺素的持续释放促进分娩。因此，包括前列腺素F2α受体拮抗剂如化合物I或其盐(例如化合物III)和催产素受体拮抗剂的组合疗法可以用于治疗和/或预防或早产。此外，催产素受体拮抗剂与前列腺素F2α受体拮抗剂的组合在治疗早产方面比当前的方案有效。由于当与前列腺素F受体拮抗剂组合施用时施用给患者的催产素受体拮抗剂的剂量可以低于施用给仅接受催产素受体拮抗剂的患者的剂量，故在预防作为早产基础的收缩和炎症性过程方面可以观察到协同作用并且此作用在本文中有描述。

化合物I或其盐，如化合物III可以与一种或多种另外的药剂，如催产素受体拮抗剂一起施用以减少子宫收缩的发生并延迟分娩发作。举例来说，化合物I或其盐，如化合物III可以与催产素受体拮抗剂同时施用、与催产素受体拮抗剂混合或与催产素受体拮抗剂分开施用。与本发明的组合物和方法结合使用的示例性催产素受体拮抗剂包括阿托西班、瑞托西班、巴卢西班、亚泊西班及诺拉西班，或其变化形式、配制物、结晶形式或衍生物。举例来说，化合物I或其盐，如化合物III可以在诺拉西班或其变化形式、配制物、结晶形式或衍生物之前、之后或同时施用，以使受试者的分娩发作延迟例如一天或数天，或者一周或数周，如约1天至约16周(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30天，或约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15或16周)。

另外或替代地，本发明化合物(例如化合物I或其药学上可接受的盐，如化合物III)可以与β模拟剂一起施用给发生早产或有早产风险(例如展示早产的一种或多种症状)的患者。β模拟剂，如特布他林、利托君、海索那林、沙丁胺醇、非诺特罗、尼利特林及奥西那林可以通过增强β-2肾上腺素能受体，由此上调cAMP并耗尽以其它方式用于刺激子宫收缩的细胞内Ca²⁺储备来发挥耗乏细胞内Ca²⁺含量(例如细胞内子宫肌层Ca²⁺含量)的作用。与本文所描述的组合物和方法结合使用的示例性β模拟剂，以及用于施用β模拟剂以及本文所描述的组合物和方法的示例性方法描述于例如Gyetvai等人,《妇产科学》94:869-877(1999)中，其公开内容以引用的方式并入本文中。

另外或替代地，本发明化合物(例如化合物I或其药学上可接受的盐，如化合物III)可以与钙通道抑制剂，如L型钙通道抑制剂一起施用给发生早产或有早产风险(例如展示早产的一种或多种症状)的患者。钙通道抑制剂，包括二氢吡啶，如硝苯地平和尼卡地平可以通过抑制Ca²⁺自肌质网释放，由此预防Ca²⁺动员而刺激子宫肌肉收缩来起作用。与本文所描述的组合物和方法结合使用的示例性钙通道抑制剂，以及用于施用钙通道抑制剂以及本文所描述的组合物和方法的示例性方法描述于例如Wojcieszek等人,《Cochrane系统评价数据库(Cochrane Database Syst.Rev.)》6:CD002255(2014)中，其公开内容以引用的方式并入本文中。

另外或替代地，本发明化合物(例如化合物I或其药学上可接受的盐，如化合物III)可以与镁盐，如硫酸镁一起施用给发生早产或有早产风险(例如展示早产的一种或多种症状)的患者。镁盐，如硫酸镁，可以通过多种机制，如通过诱导质膜超极化和/或通过与Ca²⁺竞争结合至肌球蛋白轻链，由此抑制子宫肌细胞中肌球蛋白丝收缩来调节子宫收缩性。

另外或替代地，本发明化合物(例如化合物I或其药学上可接受的盐，如化合物III)可以与一氧化氮供体一起施用给发生早产或有早产风险(例如展示早产的一种或多种症状)的患者。一氧化氮，作为维持正常平滑肌张力必不可少的血管舒张剂，是在多种细胞中产生的。一氧化氮是在L-精氨酸氧化成L-瓜胺酸期间合成。这一反应由一氧化氮合成酶催化，一氧化氮合成酶存在若干同功异型物。诱导性(2型)和脑(1型)一氧化氮合成酶在子宫肌层细胞和血管内皮细胞中表达，而内皮(3型)一氧化氮合成酶仅仅在血管内皮细胞中表达。一氧化氮与附近效应细胞中存在的可溶性鸟苷酰基环化酶之间相互作用是一种分布广泛的信号转导机制，这种机制将针对一氧化氮形成的不同细胞外刺激与靶细胞中环单磷酸鸟苷(cGMP)的合成相结合。平滑肌细胞，如子宫肌细胞中的cGMP含量增加使肌球蛋白轻链激酶失活，导致平滑肌松弛。一氧化氮供体，如硝酸甘油的宫缩抑制作用描述于例如Simhan等人,《新英格兰医学杂志》357:477-487(2007)中，其公开内容以引用的方式并入本文中。

另外或替代地，本发明化合物(例如化合物I或其药学上可接受的盐，如化合物III)可以与孕酮或其变化形式，如17-α-羟基孕酮己酸盐一起施用给发生早产或有早产风险(例如展示早产的一种或多种症状)的患者。孕酮是在约约8周妊娠之后由黄体以及胎盘分泌的类固醇激素。如例如Muglia等人,《新英格兰医学杂志》362:529-535(2010)；Simhan等人,《新英格兰医学杂志》357:477-487(2007)；Smith等人,《欧洲妇产科与生殖生物学杂志(Eur.J.Obstet.Gynecol.Reprod.Biol.)》142:3-11(2009)；Bernal.Sem.,《细胞发育生物学(Cell Dev.Biol.)》18:340-347(2007)；以及Hubinont等人,《妊娠杂志(J.Pregnancy.)》941057(2011)所描述，孕酮及其变化形式，如17-α-羟基孕酮己酸盐可以通过直接调节子宫肌层[Ca²⁺]和前列腺素合成来调控子宫静止状态，所述文献的公开内容以引用的方式并入本文中。

另外或替代地，本发明化合物(例如化合物I或其药学上可接受的盐，如化合物III)可以与皮质类固醇一起施用给发生早产或有早产风险(例如展示早产的一种或多种症状)的患者。产前皮质类固醇，如倍他米松、地塞米松及氢化可的松是可以施用给处于早产过程中的受试者，如怀孕的雌性受试者或施用给有早产风险的受试者(例如展现早产的一种或多种症状，如阴道出血和子宫膜破裂的受试者)以加速胎儿肺成熟的一类治疗剂。用产前皮质类固醇治疗使出生48小时内新生儿死亡、呼吸窘迫综合症、脑室内出血、坏死性小肠结肠炎、呼吸支持、进入重症监护及全身感染总体减少。此外，产前皮质类固醇疗法可有效用于胎膜早破(PROM)和患有妊娠相关高血压综合症的女性。有证据表明该疗法在较宽孕龄范围内，如尤其是从约26至约34周内具有益处(Miracle等人,《围产期医学杂志(J.Perinat.Med.)》36:191-196(2008)，其公开内容以引用的方式并入本文中)。

除上述外，根据本文所描述的方法，化合物II可以与一种或多种另外的药剂，如催产素受体拮抗剂一起提供(例如通过直接施用或通过施用其前药)给需要治疗的受试者(例如发生早产或有发生早产风险的人类受试者，或患有痛经或子宫内膜异位的人类受试者)，例如以减少子宫收缩的发生并延迟分娩发作。举例来说，化合物II可以与催产素受体拮抗剂同时提供、与催产素受体拮抗剂混合或与催产素受体拮抗剂分开提供。与本发明的组合物和方法结合使用的示例性催产素受体拮抗剂包括阿托西班、瑞托西班、巴卢西班、亚泊西班及诺拉西班，或其变化形式、配制物、结晶形式或衍生物。举例来说，化合物II可以在诺拉西班或其变化形式、配制物、结晶形式或衍生物之前、之后或同时提供，以使受试者分娩发作延迟例如一天或数天，或者一周或数周，如约1天至约16周(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30天，或约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15或16周)。

另外或替代地，化合物II可以与β模拟剂一起提供给发生早产或有早产风险(例如展示早产的一种或多种症状)的患者。如上文所描述，β模拟剂，如特布他林、利托君、海索那林、沙丁胺醇、非诺特罗、尼利特林及奥西那林可以通过增强β-2肾上腺素能受体，由此上调cAMP并耗尽以其它方式用于刺激子宫收缩的细胞内Ca²⁺储备来发挥耗乏细胞内Ca²⁺含量(例如细胞内子宫肌层Ca²⁺含量)的作用。与本文所描述的组合物和方法结合使用的示例性β模拟剂，以及用于施用β模拟剂以及本文所描述的组合物和方法的示例性方法描述于例如Gyetvai等人,《妇产科学》94:869-877(1999)中，其公开内容以引用的方式并入本文中。

另外或替代地，化合物II可以与钙通道抑制剂，如L型钙通道抑制剂一起提供给发生早产或有早产风险(例如展示早产的一种或多种症状)的患者。如上文所描述，钙通道抑制剂，包括二氢吡啶，如硝苯地平和尼卡地平可以通过抑制Ca²⁺自肌质网释放，由此预防Ca² ⁺动员而刺激子宫肌肉收缩来起作用。与本文所描述的组合物和方法结合使用的示例性钙通道抑制剂，以及用于施用钙通道抑制剂以及本文所描述的组合物和方法的示例性方法描述于例如Wojcieszek等人,《Cochrane系统评价数据库》6:CD002255(2014)中，其公开内容以引用的方式并入本文中。

另外或替代地，化合物II可以与镁盐，如硫酸镁一起提供给发生早产或有早产风险(例如展示早产的一种或多种症状)的患者。如上文所描述，镁盐，如硫酸镁，可以通过多种机制，如通过诱导质膜超极化和/或通过与Ca²⁺竞争结合至肌球蛋白轻链，由此抑制子宫肌细胞中肌球蛋白丝收缩来调节子宫收缩性。

另外或替代地，化合物II可以与一氧化氮供体一起提供给发生早产或有早产风险(例如展示早产的一种或多种症状)的患者。如上文所描述，一氧化氮，作为维持正常平滑肌张力必不可少的血管舒张剂，是在多种细胞中产生的，并且一氧化氮诱导平滑肌细胞，如子宫肌细胞中cGMP含量的增加使平滑肌松弛。一氧化氮供体，如硝酸甘油的宫缩抑制作用描述于例如Simhan等人,《新英格兰医学杂志》357:477-487(2007)中，其公开内容以引用的方式并入本文中。

另外或替代地，化合物II可以与孕酮或其变化形式，如17-α-羟基孕酮己酸盐一起提供给发生早产或有早产风险(例如展示早产的一种或多种症状)的患者。如上文所描述，如例如Muglia等人,《新英格兰医学杂志》362:529-535(2010)；Simhan等人,《新英格兰医学杂志》357:477-487(2007)；Smith等人,《欧洲妇产科与生殖生物学杂志》142:3-11(2009)；Bernal.Sem.,《细胞发育生物学)》18:340-347(2007)；以及Hubinont等人,《妊娠杂志》941057(2011)所描述，孕酮及其变化形式，如17-α-羟基孕酮己酸盐可以通过直接调节子宫肌层[Ca²⁺]和前列腺素合成来调控子宫静止状态，所述文献的公开内容以引用的方式并入本文中。

另外或替代地，化合物II可以与皮质类固醇一起提供给发生早产或有早产风险(例如展示早产的一种或多种症状)的患者。如上文所描述，产前皮质类固醇，如倍他米松、地塞米松及氢化可的松是可以施用给处于早产过程中的受试者，如怀孕的雌性受试者或施用给有早产风险的受试者(例如展现早产的一种或多种症状，如阴道出血和子宫膜破裂的受试者)以加速胎儿肺成熟的一类治疗剂，并且用产前皮质类固醇治疗使出生48小时内新生儿死亡、呼吸窘迫综合症、脑室内出血、坏死性小肠结肠炎、呼吸支持、进入重症监护及全身感染总体减少。

药物组合物

化合物I或其盐，如化合物III可以被配制成适于体内施用的生物相容性形式的药物组合物以施用给受试者，如怀孕的女性人类受试者。因此，在一个方面，本发明提供一种含有化合物I或其盐，如化合物III与适合稀释剂、载剂或赋形剂的混合物的药物组合物。化合物I或其盐，如化合物III可以例如经口或通过静脉内注射施用。

本发明还提供了含有化合物II的药物组合物。这些组合物可以包括化合物II与适合稀释剂、载剂或赋形剂的混合物。

在常规储存和使用条件下，药物组合物可以含有防腐剂，例如以防止微生物生长。用于选择和制备适合配制物的常规程序和成分描述于例如《雷明顿：医药科学和实践(Remington:The Science and Practice of Pharmacy)》(2012,第22版)和《美国药典：国家处方集(The United States Pharmacopeia:The National Formulary)》(2015,USP38NF33)中。

药物组合物可以包括无菌水溶液、分散液或例如用于临时制备无菌溶液或分散液的粉末。在所有情况下，所述形式可以使用本领域中已知的技术灭菌并且可以被流体化达到可以容易地施用给需要治疗的受试者的程度。

药物组合物可以单独或与本文所述的药学上可接受的载剂组合施用给受试者，例如人类受试者，其比例可以由化合物的溶解度和/或化学性质、所选施用途径及标准药学实践确定。

用于组合疗法的组合物

化合物I或其盐，如化合物III可以单独使用或与一种或多种本文所描述的可用于抑制子宫收缩和/或黄体溶解的另外的药剂，如阿托西班、瑞托西班、巴卢西班、亚泊西班及诺拉西班，或其变化形式、配制物、结晶形式或衍生物等其它治疗剂(例如宫缩抑制剂)组合使用。可以将化合物I或其盐，如化合物III与本文所描述的另外的活性剂，如催产素受体拮抗剂、β模拟剂、钙通道抑制剂、镁盐、一氧化氮供体、孕酮或或其变化形式，或皮质类固醇混合并以单一组合物形式施用给患者，或者化合物I或其盐，如化合物III可以与另外的活性剂分开施用给患者。举例来说，化合物I或其盐，如化合物III，及另外的活性剂可以依序施用给患者。

除上述外，化合物II可以单独或与一种或多种本文所描述的可用于抑制子宫收缩和/或黄体溶解的另外的药剂，如阿托西班、瑞托西班、巴卢西班、亚泊西班及诺拉西班，或其变化形式、配制物、结晶形式或衍生物等其它治疗剂(例如宫缩抑制剂)组合提供给受试者。可以将化合物II与本文所描述的另外的活性剂，如催产素受体拮抗剂、β模拟剂、钙通道抑制剂、镁盐、一氧化氮供体、孕酮或其变化形式，或皮质类固醇混合，并以单一组合物形式施用给患者，或者化合物II可以与另外的活性剂分开提供给患者。举例来说，可以例如通过向患者提供化合物II，随后向患者施用另外的活性剂，将化合物II和另外的活性剂依序提供给患者。

本文所描述的用于组合疗法的组合物，如本文所描述的药物组合物可以施用给受试者以使受试者分娩发作延迟例如一天或数天，或者一周或数周，如约1天至约16周(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30天，或约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15或16周)。在一些实施方案中，受试者正在经历早产。在一些实施方案中，所述药物组合物是在早产起始之前施用给受试者(例如人类受试者)。本发明的药物组合物可以被施用给受试者(例如人类受试者)以预防在剖腹产之前分娩。本发明的药物组合物可以被施用给受试者(例如人类受试者)以治疗或预防痛经。本发明的药物组合物可以被施用给受试者，如怀孕的女性人类受试者，以缓解与分娩有关的一种或多种症状，如阴道出血和子宫膜破裂。

用于组合疗法的组合物内存在的另外的治疗剂可以例如是另一宫缩抑制剂。所述另外的宫缩抑制剂可以是例如催产素受体拮抗剂，如阿托西班、瑞托西班、巴卢西班、亚泊西班及诺拉西班，以及其一种或多种变化形式、配制物、结晶形式或衍生物。举例来说，阿托西班和其变化形式描述于例如美国专利第4,504,469号和第4,402,942号中，这些专利各自的公开内容以引用的方式并入本文中。瑞托西班和其变化形式描述于例如美国专利第7,514,437号、第8,367,673号、第8,541,579号、第8,071,594号、第8,357,685号、第8,937,179号；以及US 2016/0074413中，这些专利各自的公开内容以引用的方式并入本文中。巴卢西班和其变化形式描述于例如美国专利第6,143,722号、第7,091,314号、第7,816,489号及US2016/0175283中，这些专利各自的公开内容以引用的方式并入本文中。亚泊西班和其变化形式描述于例如美国专利第7,514,437号、第8,367,673号、第8,541,579号、第7,550,462号、第7,919,492号、第8,202,864号、第8,742,099号、第9,408,851号、第8,716,286号及第8,815,856号中，这些专利各自的公开内容以引用的方式并入本文中。诺拉西班和其变化形式、配制物及结晶形式描述于例如美国专利第7,115,754号和美国专利申请公开第2015/0073032号、第2015/0164859号及第2016/0002160号中，这些专利申请各自的公开内容以引用的方式并入本文中。

在一些实施方案中，另外的宫缩抑制剂是β模拟剂，如特布他林、利托君、海索那林、沙丁胺醇、非诺特罗、尼利特林或奥西那林。在一些实施方案中，另外的宫缩抑制剂是钙通道抑制剂，如二氢吡啶，如硝苯地平和尼卡地平。在一些实施方案中，另外的宫缩抑制剂是镁盐，如硫酸镁。在一些实施方案中，另外的宫缩抑制剂是一氧化氮供体，如硝酸甘油。

在一些实施方案中，另外的治疗剂是皮质类固醇。在一些实施方案中，所述皮质类固醇是倍他米松。在一些实施方案中，所述皮质类固醇是地塞米松。在一些实施方案中，所述皮质类固醇是氢化可的松。

在组合治疗中，一种或多种治疗性化合物的剂量可以相对于单独施用时的标准剂量有所降低。举例来说，剂量可以由药物组合和排列凭经验确定，或可以由具有本领域技能的医师推断。

实施例

阐述以下实施例是为了向本领域普通技术人员提供有关如何使用、制备及评价本文所描述的的组合物和方法的说明，并且只打算作为本发明的示例，而不打算限制本发明人所认为的其发明的范围。

实施例1.制备化合物I和III

化合物I和其氯化物盐(化合物III)是根据下文显示的方案1制备。本实施例将描述合成化合物I所进行的各个阶段，称为阶段1-6。

方案1.制备化合物I和其氯化物盐

阶段1：制备2-[1-(4-氟苯基)-3-羟丙基氨甲酰基]噻唑烷-3-甲酸叔丁酯

向适当大小的烧瓶(容器A)中添加3-(丁氧基羰基)-1,3-噻唑烷-(2S)-甲酸(1wt)，随后添加四氢呋喃并且随后将烧瓶内含物冷却到-35℃至约-45℃。接着，将N-甲基吗啉(1.18vol)添加至烧瓶中，同时将温度维持在-30℃至-40℃之间。接着，将氯甲酸异丁酯(0.58vol)添加至烧瓶中，同时将温度维持在-30℃至40℃之间。

向独立容器(容器B)中添加(3S)-氨基-3-(4-氟苯基)丙-1-醇(0.76wt)和THF并充分混合容器，直至块状固体溶解。

将容器B中的(3S)-氨基-3-(4-氟苯基)丙-1-醇溶液添加至反应容器A中，同时将温度维持在-30℃至-40℃之间。接着，使烧瓶内含物经1小时至24小时的时间升温到15℃至25℃。在15℃至25℃下搅拌反应混合物，直至观察到反应完成。将反应混合物浓缩至干，随后将乙酸乙酯添加至残余物中，随后添加饱和氯化铵水溶液。分离有机相并用饱和氯化铵水溶液洗涤。接着，分离有机相并用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤。接着，有机相经硫酸钠干燥，过滤并且在35℃至40℃下浓缩滤液，直至乙酸乙酯含量以重量计(w/w)≤10％，得到2-[1-(4-氟苯基)-3-羟丙基氨甲酰基]噻唑烷-3-甲酸叔丁酯。

阶段2：制备3-(联苯-4-磺酰基)噻唑烷-2-甲酸[1-(4-氟苯基)-3-羟丙基]-酰胺

向适当大小的烧瓶(容器A)中添加2-[1-(4-氟苯基)-3-羟丙基氨甲酰基]噻唑烷-3-甲酸叔丁酯(1wt)，随后添加二氯甲烷。随后，将烧瓶内含物冷却到-15℃至-20℃。接着，将盐酸(3.3vol)添加至烧瓶中，同时将温度维持在-15℃至-20℃之间，直至观察到反应完成。接着，将反应混合物冷却到-35℃至-40℃，并将四氢呋喃添加至混合物中，同时将温度维持在-30℃至-40℃之间。接着，将N,N-二异丙基乙胺添加至混合物(8.16vol)中，同时将温度维持在-15℃至-45℃之间。接着，将4-二甲氨基吡啶(0.032wt)添加至容器中，同时将温度维持在-15℃至-45℃之间。

在独立容器(容器B)中，添加4-联苯磺酰基氯(0.85wt)，随后添加THF。

将来自容器B的4-联苯磺酰基氯溶液添加至反应容器A中，同时将温度维持在-15℃至-45℃之间。接着，经1小时至24小时的时间使反应混合物的内含物升温到15℃至25℃。随后将乙酸乙酯添加至烧瓶中，随后添加饱和氯化铵水溶液。分离有机相并用饱和氯化铵水溶液，随后饱和碳酸氢盐水溶液洗涤。接着，有机相经硫酸钠干燥并过滤。在35℃至40℃下浓缩滤液，直至获得固体残余物。接着，将二氯甲烷添加至残余物中并在30℃至35℃下混合。蒸发之后，接着将乙酸乙酯添加至残余物中，并将浆液转移至适合容器中。接着使经过搅拌的浆液升温至回流，接着将其冷却到0℃至5℃。通过过滤收集沉淀的固体。用乙酸乙酯随后叔丁基甲基醚洗涤滤饼并在氮气下将滤饼抽吸干燥1小时至24小时，得到3-(联苯-4-磺酰基)噻唑烷-2-甲酸[1-(4-氟苯基)-3-羟丙基]-酰胺。

阶段3A：制备2-叔丁氧基羰基氨基-3-甲基丁酸3-{[3-(联苯-4-磺酰基)噻唑烷-2-羰基]氨基}-3-(4-氟苯基)-3-丙酯

向适当大小的烧瓶(容器A)中添加Boc-L-缬胺酸(0.48wt)、二氯甲烷及N,N-二甲基甲酰胺，随后在氮气下，在15℃至25℃下搅拌混合物。接着，将1-羟基苯并三唑(HOBt，0.3wt)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDCl，0.42wt)添加至容器中，同时将温度维持在15℃至25℃。随后在15℃至25℃下搅拌混合物，直至块状固体溶解，得到溶液A。

向独立容器(容器B)中添加3-(联苯-4-磺酰基)噻唑烷-2-甲酸[1-(4-氟苯基)-3-羟丙基]酰胺(1.0wt)、二氯甲烷及N,N-二甲基甲酰胺，随后在氮气下，，在15℃至25℃下搅拌混合物。接着，将4-二甲氨基吡啶(0.27wt)添加至容器中，同时将温度维持在15℃至25℃之间。在此温度下搅拌混合物，直至块状固体溶解(典型地为5至15分钟)，得到溶液B。

接着，将溶液A添加至溶液B中，同时将温度维持在15℃至30℃之间。在此温度下搅拌混合物，直至观察到反应完成。浓缩反应混合物以去除挥发性溶剂。随后将乙酸乙酯添加至烧瓶中，随后添加10％w/w柠檬酸水溶液。分配水相并用乙酸乙酯萃取。添加10％w/w柠檬酸水溶液与饱和氯化钠水溶液的混合物洗涤合并的有机相，随后用饱和氯化铵水溶液、饱和碳酸氢钠水溶液及饱和氯化钠水溶液洗涤。接着，有机相经硫酸镁干燥，过滤并用乙酸乙酯洗涤滤饼。浓缩滤液直至获得固体残余物，得到粗2-叔丁氧基羰基氨基-3-甲基丁酸3-{[3-(联苯-4-磺酰基)噻唑烷-2-羰基]氨基}-3-(4-氟苯基)-3-丙酯。

阶段3B：纯化2-叔丁氧基羰基氨基-3-甲基丁酸3-{[3-(联苯-4-磺酰基)噻唑烷-2-羰基]氨基}-3-(4-氟苯基)-3-丙酯

为了纯化2-叔丁氧基羰基氨基-3-甲基丁酸3-{[3-(联苯-4-磺酰基)噻唑烷-2-羰基]氨基}-3-(4-氟苯基)-3-丙酯，在容器中混合粗产物(1wt)和二氯甲烷，直至块状固体溶解。接着将溶液装载至二氧化硅上，随后添加二氯甲烷。用乙酸乙酯:己烷洗脱产物。合并含有产物的洗脱份并在真空下，在35℃至40℃的水浴温度下将其浓缩至干，得到纯化的2-叔丁氧基羰基氨基-3-甲基丁酸3-{[3-(联苯-4-磺酰基)噻唑烷-2-羰基]氨基}-3-(4-氟苯基)-3-丙酯。

阶段4：制备2-氨基-3-甲基丁酸3-{[3-(联苯-4-磺酰基)噻唑烷-2-羰基]氨基}-3-(4-氟苯基)丙酯甲烷磺酸盐

向适当大小的烧瓶中添加2-叔丁氧基羰基氨基-3-甲基丁酸3-{[3-(联苯-4-磺酰基)噻唑烷-2-羰基]氨基}-3-(4-氟苯基)-3-丙酯(1wt)，随后添加1,4-二噁烷并在氮气下搅拌混合物。随后添加甲烷磺酸(0.18wt)，并将烧瓶内含物加热到68℃至73℃。在此温度下搅拌反应，直至通过¹H NMR分析观察到反应完成。随后将反应混合物冷却到35℃至40℃并在此温度下浓缩至干。接着，将残余物溶解于THF中并在35℃至40℃下浓缩至干。重复这一共沸干燥循环，直至1,4-二噁烷含量小于1.0％w/w，得到2-氨基-3-甲基丁酸3-{[3-(联苯-4-磺酰基)噻唑烷-2-羰基]氨基}-3-(4-氟苯基)丙酯甲烷磺酸盐。

阶段5：制备2-氨基-3-甲基丁酸3-{[3-(联苯-4-磺酰基)噻唑烷-2-羰基]氨基}-3-(4-氟苯基)丙酯(化合物I)

向适当大小的烧瓶中添加2-氨基-3-甲基丁酸3-{[3-(联苯-4-磺酰基)噻唑烷-2-羰基]氨基}-3-(4-氟苯基)丙酯甲烷磺酸盐(1wt)，随后添加二氯甲烷。随后将烧瓶内含物冷却到5℃至15℃。将碳酸氢钠水溶液添加至混合物中，同时将温度维持在5℃至25℃之间。随后分离各相，并将有机相再添加至容器中，随后添加饱和碳酸氢钠水溶液，同时将温度维持在5℃至25℃。接着分离水层与有机层，并且有机相经硫酸镁干燥，过滤并用二氯甲烷洗涤滤饼。接着，在40℃至45℃下将合并的有机层浓缩至干，直至二氯甲烷含量≤2％w/w，得到2-氨基-3-甲基丁酸3-{[3-(联苯-4-磺酰基)噻唑烷-2-羰基]氨基}-3-(4-氟苯基)丙酯(化合物I)。

阶段6：制备2-氨基-3-甲基丁酸3-{[3-(联苯-4-磺酰基)噻唑烷-2-羰基]氨基}-3-(4-氟苯基)丙酯盐酸盐(化合物III)

向适当大小的烧瓶中添加水(1.66vol)，随后添加盐酸(0.18vol)，并将混合物的温度调到15℃至25℃。接着过滤溶液，并将过滤后的溶液添加至适当大小的烧瓶(容器A)中，随后添加乙醇和乙酸乙酯。在氮气下，在15℃至25℃下搅拌所得混合物至少5分钟。

向适当大小的容器(容器B)中添加2-氨基-3-甲基丁酸3-{[3-(联苯-4-磺酰基)噻唑烷-2-羰基]氨基}-3-(4-氟苯基)丙酯(1wt)，随后添加乙醇。随后混合烧瓶的内含物以溶解块状固体并使溶液澄清。

接着，将容器B的溶液添加至容器A中，同时将温度维持在15℃至25℃。将经过搅拌的混合物冷却到0℃至5℃并在此温度下搅拌50至70分钟。通过过滤收集固体并在氮气下将滤饼抽吸干燥至少12小时，得到粗2-氨基-3-甲基丁酸3-{[3-(联苯-4-磺酰基)噻唑烷-2-羰基]氨基}-3-(4-氟苯基)丙酯盐酸盐。

实施例2.化合物I及其盐的药效学特性

非临床药理学

化合物I及其盐在胃肠道施用之后迅速地转化成化合物II。化合物II是正在开发的通过抑制过早子宫收缩来管理早产的一种可逆的竞争性前列腺素F2α受体拮抗剂(人类FP2α受体K_i＝6nM)。其功效药理学(宫缩抑制作用)在孕晚期大鼠自发子宫活动模型中已得到展示。

体外药理学

通过分析化合物I和化合物II对于HEK293-EBNA细胞中表达的重组FP受体的亲和力来评估这些化合物对前列腺素F2α受体的抑制效力。结果显示，化合物I和化合物II对人类受体具有较高结合亲和力(参见表2)。

测试化合物II针对全部八种前列腺素受体亚型的选择性。选择性是前列腺素E受体2(EP2)的约10倍并且比针对其它受体的选择性高100倍。测试1μM化合物II针对一组50种受体的作用，通道和酶结合位点对FP显示出高选择性。

在经过转染的HEK293-EBNA细胞中进行化合物II对人类FP的功能性表征。化合物II能够以剂量依赖性方式抑制IP3合成并且IC₅₀值是60nM。当单独添加至FP/HEK293-EBNA细胞中时，测试的高达10μM的化合物II并不诱导任何IP3合成，表明该化合物缺乏激动剂活性。

体内药理学

在孕晚期(妊娠19-21天)的麻醉怀孕大鼠自发子宫活动模型中研究化合物I和化合物II的宫缩抑制作用(Kawarabayashi等人,《美国妇产科学杂志》175:1348-1355(1996)和Shinkai等人,《药学与药理学杂志(J.Pharm.Pharmacol.)》52:1417-1423(2000))。简单点说，用氨基甲酸酯使孕晚期雌性大鼠麻醉。使一个怀孕的子宫角暴露出来并将在顶部带有填充生理盐水的乳胶气球的聚乙烯导管插入内腔中。将导管通过压力传感器连接至放大/记录系统。经口施用或通过10分钟静脉内输注来注射递增剂量的化合物I(呈甲磺酸盐形式)或化合物II。对于静脉内施用，通过计算在10分钟注射时间段期间的AUC来定量子宫收缩活动。

计算关于在施用各化合物之后观察到的自发子宫反应的AUC值相较于在施用第一次剂量之前记录的值(基线值)的变化百分比。通过比较治疗前后子宫腔压力值来评价化合物I或化合物II的作用。对于经口施用，在治疗之后的不同时间点应用相同的计算程序。通过使用单因素方差分析，随后图基检验(Tukey test)来测定在各时间点时各治疗组之间的统计差异。静脉内或经口施用的化合物都能够使自发子宫收缩明显减少约40-50％(静脉内途径在30mg/kg下并且口服途径在60mg/kg下获得最大作用)。静脉内活性与欧盟核准的宫缩抑制药物阿托西班的静脉内活性相当或略高。

经口施用之后的抑制性作用看起来是快速起始(在施用之后5-15分钟)并且保持着持久水平直至3小时的观察期结束。(图3)

利用单次口服剂量，在30mg/kg下实现对子宫收缩的明显抑制。

因此，体外药理学研究显示，化合物I和化合物II对于人类FP受体具有高亲和力。当在孕晚期(妊娠19-21天)麻醉怀孕大鼠自发子宫活动模型中研究时，在通过静脉内或口服途径施用情况下，这些化合物能够使自发子宫收缩明显减少约40-50％。

实施例3.化合物I盐的晶体筛选

本实施例描述用于产生和表征化合物I的结晶盐形式的实验。

概述

利用XRPD确定化合物I的甲磺酸盐是非晶型的。使所述物质结晶的尝试并不成功。由所述甲磺酸盐合成游离碱并使用其来制备多种盐。结晶硫酸氢盐是直接由盐合成获得。使用不同溶剂混合物和结晶技术结晶得到三种盐：盐酸盐、反丁烯二酸盐及二氢磷酸盐。盐酸盐看起来展现低吸湿性、在较高相对湿度(RH)下的长期稳定性并且当自多种不同的实验条件结晶时呈现单晶形式。

结晶HCl盐是在两个蒸发实验和一个浆液实验中获得。在每种情况下观察到相同的XRPD图。基于热数据，所述材料具有一些残留的溶剂；可能的熔点是约146-147℃。在熔融期间可能发生部分分解。基于水分平衡数据，盐酸盐不具有吸湿性。

结晶硫酸氢盐可能被溶剂化并且在高于约100℃下分解。所述材料在高达约65％的相对湿度下稳定。

结晶二氢磷酸盐和反丁烯二酸盐在约65％RH下具有吸湿性。由于实验室湿度较高，将这些盐按比例放大的尝试并未成功。因此，只能获得这些盐的部分特征数据。

盐酸盐、硫酸氢盐及反丁烯二酸盐显示相当的水溶性(小于1mg/mL，参见图8)。

实验

在Shimadzu XRD-6000X射线粉末绕射仪上，使用Cu Kα辐射进行本文所描述的X射线粉末衍射分析。所述仪器装备有较长的细聚焦X射线管。所述管的电压和电流量分别设置在40kV和40mA。发散和散射狭缝设置在1°并且接收狭缝设置在0.15mm。利用NaI闪烁检测器检测绕射辐射。使用以3°/min(0.4sec/0.02°步)进行的从2.5至40°2θ的θ-2θ连续扫描。每天分析硅标准品以检查仪器对准情况。用硅样品支架分析样品。

另外，在装备有2θ范围是120°的曲线位置敏感检测器的Inel XRG-3000绕射仪上进行本文所描述的X射线粉末衍射分析。使用Cu Kα辐射，从约4°2θ开始以0.03°2θ的分辨率收集实时数据。所述管的电压和电流量分别设置在40kV和30mA。单色器狭缝设置在5mm×160μm。展示从2.5至40°2θ的图案。通过将样品填入薄壁玻璃毛细管中来制备供分析的样品。将各毛细管安放在测角计的头部上，使其机动化以允许在数据采集期间毛细管旋转。分析样品5或10分钟。每天使用硅参考标准品进行仪器校准。

本文所描述的DSC分析是在TA Instruments差示扫描量热计2920上进行。使用铟作为参考材料对仪器进行校准。将样品放入标准铝制DSC盘中，将盘卷曲起来，并准确地记录重量。在25℃下平衡样品并在氮气净化下，以10℃/min速率将其加热至350℃。使用铟金属作为校准标准品。

本文所描述的TG分析是在TA Instruments 2950热解重量分析仪上进行。校准标准品是镍和ALUMEL^TM。将样品放入铝制样品盘中并插入TG炉中。样品先在25℃下平衡，接着在氮气流下以10℃/min的加热速率加热至350℃。

本文所描述的溶液¹H核磁共振(NMR)谱是在环境温度下用Varian UNITYINOVA-400波谱仪以399.8MHz的¹H拉莫尔频率(Larmor frequency)获得。将样品溶解于甲醇-d4、二氯甲烷-d2或氯仿-d3中。用7.8或8.6μs的¹H脉冲宽度、2.50秒采集时间、各扫描之间5秒的延迟时间、4095或6400Hz的波谱宽度和20474或32000个数据点，以及16或40的共附加扫描来获得谱图。使用Varian VNMR 6.1C软件，用65536个点和0.2Hz的指数谱线增宽因子处理自由感应衰减(free induction decay，FID)以改善信噪比。谱图是参照0.0ppm的内部四甲基硅烷(TMS)或残留溶剂峰。

本文所描述的FT-拉曼光谱是FT-Raman 960或860光谱仪(Thermo Nicolet)上获得。此光谱仪使用1064nm的激发波长。使用约0.5-0.7W的Nd:YVO₄激光功率照射样品。用砷化铟镓(InGaAs)检测器测量拉曼光谱。通过将材料放入玻璃毛细管中且接着放入附件中涂有金的毛细管支架中来制备供分析的样品。使用Happ-Genzel切趾法，以4cm-1的光谱分辨率收集从3600至100cm-1的总计256个样品扫描。使用硫和环己烷进行波长校准。

吸湿/解吸(MB)数据是在VTI SGA-100蒸气吸附分析仪上收集。在氮气净化下，以10％RH间隔收集在5％至95％相对湿度(RH)范围内的吸附和解吸数据。在分析之前，样品未经过干燥。用于分析的平衡标准是在5分钟内重量变化小于0.0100％，并且在不满足重量标准情况下，最大平衡时间是3小时。数据未针对样品的初始水分含量校正。使用NaCl和PVP作为校准标准品。

制备化合物I

进行多次尝试由甲磺酸盐产生化合物I的游离碱，其结果描述于图4中。起初，每当量盐使用1当量氢氧化钠。质子NMR指示存在甲烷磺酸峰。当将溶于二氯甲烷的甲磺酸盐与NaOH水溶液以1:2的盐:碱比率混合时，实现完全反应。在若干次洗涤和蒸发之后，分离有机层。在真空中干燥所得糊浆状或粘性油状物质，得到非晶型固体。通过¹H NMR和拉曼光谱法分析游离碱(分别参见图15和图16)。后续盐筛选研究使用游离碱作为起始物质(概述于图5-7中)。

化合物I的盐筛选

制备化合物I的十二种盐。通过将约25摩尔过量的硫酸添加至游离碱的丙酮溶液中来使结晶硫酸氢盐沉淀。由合成步骤得到的其它盐通过显微镜检查是非双折射的或通过XRPD确定是非晶型的(图5-7)。通过质子NMR分析苯磺酸盐、柠檬酸盐、乙烷磺酸盐、盐酸盐、硫酸氢盐及硫酸盐。

有关化合物I盐的结晶实验概述于图5-7中。以下盐结晶：盐酸盐、反丁烯二酸盐及二氢磷酸盐。

使氯化物盐自1:1的丙酮:甲苯混合物、二氯甲烷:乙醚混合物及丙酮浆液结晶。在所有实验中观察到相同XRPD图并且指定为形式A(图7)。结晶反丁烯二酸盐是通过缓慢蒸发1:1的甲醇:甲苯溶液获得。X射线图指定为图案B。硫酸氢盐和二氢磷酸盐展现极

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其类似的XRPD图(指定为图案X)。平衡离子HSO₄ ^-和H₂PO₄的大小类似并且比游离碱分子要小，因此，硫酸氢盐和二氢磷酸盐可能有类似的晶体结构。使甲磺酸盐结晶的尝试得到粘性或玻璃状固体材料。

化合物I的游离碱和甲磺酸盐的表征

游离碱的质子NMR谱图显示在约1ppm处有对应于缬氨酸片段的甲基的两个二重峰。这些甲基在手性碳中心并因此，在质子NMR中不是等效的。以下化合物I盐观察到有关甲基的两个二重峰：苯磺酸盐、柠檬酸盐、乙磺酸盐、硫酸氢盐(较多重叠)及硫酸盐(较多重叠)。在甲磺酸盐和氯化物盐的¹H NMR谱图中，在约1ppm处对应于六个氢原子的二重峰是由甲基的两个二重峰完全重叠而产生(图13和图21)。

有关游离碱的同核去偶¹H NMR实验确定在约2ppm处的次甲基(CH)氢多重峰(图18)。在无照射前任一甲基存在下记录的游离碱的¹H NMR谱图显示于图18的底部。照射各甲基(顶图、中间图)产生具有相同线数量(5个)的简化的次甲基多重峰。如果两个二重峰对应于不同的非对映异构体，则会观察到两种类型的多重峰，即原始多重峰和简化的多重峰。

化合物I的氯化物盐(化合物III)的表征

通过热技术、¹H NMR及自动吸湿/解吸分析来分析结晶氯化物盐。在DSC中在约147℃下的吸热曲线看来比典型地关于熔融吸热所观察到曲线的要宽。从25至160℃观察到约4％的重量减轻(丙酮浆液样品分析，图20)。氯化物盐的¹H NMR与结构相符(图21)。然而，由于分析的样品不同(缓慢蒸发1:1的丙酮:甲苯混合物)，这些数据无法与热分析中的重量减轻相关联。在约50℃下真空干燥由丙酮浆液得到的氯化物盐1天。通过XRPD测定，所得样品与原始盐类似(图22)。热数据呈现于图23中。基于热数据比较，干燥后的材料在25至100℃之间(0.2％相对于原始氯化物盐的0.6％)及100至160℃之间(2.5％相对于3.5％)有较低重量减轻(图24)。由此指示通过真空干燥去除了部分溶剂。然而，在DSC中在约146-147℃下的吸热曲线仍较宽(图25)。在熔融期间很可能会发生部分分解(在TG中观察到降解基线和相应重量减轻)。

在约95％RH下2天之后，化合物I的氯化物盐并未潮解。吸湿/解吸数据概述于图27中并且展示于图26和28中。在5％RH下，在平衡时观察到极小重量减轻。从5至95％相对湿度，吸附曲线出现约0.9％的重量增加。样品展示在解吸时有约0.7％重量减轻。有关MB后样品的XRPD分析展现与起始物质类似的X射线图案(图29)。

化合物I的硫酸氢盐和硫酸盐的表征

制备化合物I的硫酸氢盐和硫酸盐。通过添加约25摩尔过量的硫酸，使硫酸氢盐自游离碱的丙酮溶液沉淀。通过XRPD发现所述沉淀是结晶(图38)。关于硫酸氢盐的热数据提供于图32中。在约68℃下较宽的吸热曲线对应于约1％的重量减轻并且可能是由去溶剂化(脱水)引起。在较高温度下发生分解。它在约65％RH下3天之后并未潮解(图32)。硫酸盐是每一当量酸使用两当量的游离碱制备。使化合物I的硫酸盐结晶的尝试未取得成功(图5-7)。通过质子NMR分析硫酸氢盐和硫酸盐(图33和图34)。观察到NMR谱图的差异。举例来说，缬氨酸片段的甲基看来具有不同的偶合。

化合物I的二氢磷酸盐的表征

使二氢磷酸盐自1:1甲基乙基酮:乙酸正丁酯混合物结晶(图5-7)。该盐展现与硫酸氢盐类似的X射线图(图43)。由于在分析期间样品损失，故二氢磷酸盐的表征局限于XRPD。制备额外量的结晶盐的尝试并不成功。在第一次尝试期间，产生低结晶物质(图5-7)。使所述低结晶盐再结晶，得到粘性固体。所述材料在真空中干燥之后仍保持粘性。在按比例放大结晶期间，实验室湿度是约62％RH，并且由于材料的吸湿性，该材料很有可能受到影响。未再进一步尝试使二氢磷酸盐结晶。

化合物I的反丁烯二酸盐的表征

使少量反丁烯二酸盐自甲醇:甲苯的1:1混合物结晶(图5-7)。在约62％RH的实验室湿度下，尝试使结晶盐按比例放大，但未取得成功。得到主要呈油状的材料，不过通过显微镜检查存在部分结晶固体。在真空中干燥粘性固体，得到主要呈非晶型的材料。使用最初制备的结晶盐进行接种实验。不过，未产生结晶材料。在相对湿度研究中确定反丁烯二酸盐的吸湿性。

反丁烯二酸盐看来对湿气敏感。所述结晶盐在约43％和53％相对湿度下稳定，并且在约65％RH下，在第一天内开始潮解。在65％RH下3天之后形成黄色油状物(水分增加约4％)。

结论

通过XRPD发现化合物I的甲磺酸盐是非晶型的。使材料结晶的尝试并不成功。

由甲磺酸盐合成化合物I的游离碱并使用其制备12种盐。结晶硫酸氢盐是直接由盐合成获得。使用不同溶剂混合物和结晶技术结晶得到三种盐：盐酸盐、反丁烯二酸盐及二氢磷酸盐。氯化物盐看来是用于进一步研究的最佳候选物。结晶硫酸氢盐可能被溶剂化并且在高于约100℃下分解。所述材料在高达约65％的相对湿度下稳定。结晶HCl盐是在两个蒸发实验和一个浆液实验中获得。观察到相同的XRPD图。基于热数据，所述材料具有一些残留的溶剂；可能的熔点是约146-147℃。在熔融期间可能发生部分分解。基于水分平衡数据，氯化物盐不具有吸湿性。结晶二氢磷酸盐和反丁烯二酸盐在约65％RH下具有吸湿性。由于实验室湿度较高，将这些盐按比例放大的尝试并未成功。因此，只能获得这些盐的部分特征数据。

实施例4.监测化合物I的甲磺酸盐的Caco-2细胞渗透性

经口施用的药物的生物利用率在很大程度上取决于其跨肠屏障转运的能力。J.Fogh确定来源于人类结肠腺癌的Caco-2细胞能够实现较高程度的肠上皮细胞分化，可以被用作研究药物转运穿过肠上皮细胞的体外模型。这些细胞当在涂有胶原蛋白的聚碳酸酯膜上生长时，形成极化上皮细胞单层。分化细胞单层是小肠上皮细胞的相关模型。从细胞汇合开始的分化过程使得形成具有发育良好的微绒毛的刷状缘、紧密的顶部连接以及包括酶、受体、转运系统、离子通道及脂质分子在内的膜组分的极化分布。

研究的目的是在第一步骤中，在Caco-2细胞测试系统(无细胞)中评估化合物I的非特异性结合并且在第二步骤中，评估化合物I向化合物II的转化并确定化合物I跨Caco-2细胞单层转运是否是由PepT1转运蛋白介导。

材料

Caco-2细胞系(人类结肠腺癌细胞)是从控制性细胞库(controlled cell Banks)(意大利杰伦扎诺(Gerenzano-Italy)的Biosearch S.p.A)获得。杜尔贝科氏改良型伊格氏培养基(Dulbecco's modified Eagles's Medium，DMEM)、胎牛血清、非必需氨基酸溶液、L-谷氨酰胺200mM、青霉素/链霉素溶液、不含钙和镁的胰蛋白酶-EDTA溶液是购自Celbio(意大利米兰(Milan,Italy))。HEPES、汉克氏平衡盐溶液(Hank's Balanced Salt Solution，HBSS)、杜尔贝科氏磷酸盐缓冲生理盐水(PBS)、二甲基亚砜(DMSO)、甘氨酸-肌氨酸(Gly-Sar)是购自Sigma(意大利米兰)。

实验

在补充有10％胎牛血清、2％L-谷氨酰胺200mM及1％非必需氨基酸溶液的DMEM中培养Caco-2细胞。

在液氮下，将细胞以1mL体积的细胞于含有10％DMSO的胎牛血清中的悬浮液形式冷冻储存于冷冻管中。实验中所用细胞将保持培养不超过一个月。

必要时，在水浴中，在37℃下通过轻轻地涡流至半完全解冻，将Caco-2细胞冷冻小瓶迅速地解冻。接着，将细胞悬浮液逐滴添加至10mL培养基中。然后，以900-1000rpm离心细胞悬浮液7分钟，去除上清液并使细胞团在培养基中复原并将其分布于75cm²含有培养基的烧瓶中。在37℃下，在5％CO₂气氛中培育烧瓶。当获得接近汇合的单细胞层时，对细胞进行连续传代培养。去除各烧瓶中的培养基并用10-15mL杜尔贝科氏磷酸盐缓冲生理盐水(PBS)洗涤。

将胰蛋白酶-EDTA溶液添加至细胞单层中，在37℃下培育并以一定时间间隔轻轻地敲击以使细胞移位。通过显微镜检查确定细胞单层完全脱附和解聚集。接着，使细胞再悬浮于10mL完全培养基中并以900-1000rpm离心7分钟。丢弃上清液；使细胞再悬浮于培养基中并以2.5×10⁵个细胞/毫升涂铺于175cm²烧瓶中。

如上文所描述，通过用胰蛋白酶处理使具有接近汇合的培养物的烧瓶中的细胞脱附和解聚。使细胞再悬浮于培养基中并计数。用培养基稀释细胞悬浮液达到约1×10⁶个细胞/毫升并将300μL细胞悬浮液放到各Transwell(6.5mm直径、0.4μm孔径)的顶部隔室上。将600μL培养基放到底外侧隔室中。在37℃下，在含5％CO2的空气的潮湿气氛中培育板15-21天，每48-72小时更换培养基。

通过实验前和培育时间结束时的跨上皮电阻(TEER)来评价各Caco-2细胞单层的完整性。在Transwells中，使用Millicell-ERS(Millipore)测量TEER，以欧姆×cm²表示。当TEER值高于800欧姆×cm²时，认为所述单层是良好分化的。

在培育时间结束时，利用荧光黄评价各Caco-2细胞单层的完整性。实验后，用转运缓冲液(transport buffer)洗涤各Transwell两次。将200μL于HBSS中浓度是100μM的荧光黄分配于顶部隔室中，同时将400μL HBSS添加至底外侧隔室中。在37℃下将transwell培育1小时。使用微孔板光谱荧光计(EG&G WALLAC)，在535nm波长下针对相同生理盐水溶液中的标准荧光黄曲线定量底外侧隔室中的荧光黄的量。如果在底外侧隔室中检测到<1％荧光黄，则认为单层未被破坏。

评估与无细胞transwell的非特异性结合

评估整个无细胞transwell的非特异性结合和回收率。在无细胞transwell中一式两份测试1.5、3及6μM的化合物I。测试是在顶部与底外侧隔室之间的pH梯度下进行。顶部隔室(供体)的缓冲液pH值是6.5，而底外侧隔室(接收者)的缓冲液pH值是7.4。执行以下取样时间：对于底外侧隔室(接收者)是60和120分钟并且对于顶部隔室(供体)是120分钟。通过LC-MS分析获得的样品，监测化合物I和化合物II两种以评估回收率百分比。

评估化合物I和化合物II的稳定性

在测试期间，评估化合物I和化合物II的稳定性。将这些化合物溶解于HBSS缓冲液(1％DMSO最终浓度)中达到1.5、3及6μM浓度。在时间零(t＝0)时取得各溶液的等分试样以评估化合物的起始浓度。在37℃下培育溶液，持续转运实验的时间。在实验结束时(t＝120)取得各溶液的等分试样以评估化合物I和化合物II的最终浓度。通过LC-MS分析样品。

评估化合物I的双向渗透性

将化合物I溶解于HBSS缓冲液(1％DMSO最终浓度)中达到1.5、3及6μM浓度。一式两份孔执行各浓度/取样时间。测试按以下梯度pH值进行：顶部隔室(粘膜)的pH值是6.5，底外侧隔室(浆膜)的pH值是7.4。

顶部至底外侧(A→B，粘膜至浆膜)转运：将200μL各浓度的化合物I添加至顶部隔室中并将400μL HBSS添加至底外侧隔室中。在37℃下培育板。在60和120分钟(t＝60和t＝120)之后，取得底外侧隔室的等分试样。在起始时间(t＝0)和120分钟(t＝120)之后取得顶部隔室的等分试样。

底外侧至顶部(B→Α，浆膜至粘膜))转运：将400μL各浓度的化合物I添加至底外侧隔室中并将200μL HBSS添加至顶部隔室中。在37℃下培育板。在60和120分钟(t＝60和t＝120)之后，取得顶部隔室的等分试样。在起始时间(t＝0)和120分钟(t＝120)之后取得底外侧隔室的等分试样。通过LC/MS监测化合物I以及化合物II的外观来分析所有样品。

评估化合物II的双向渗透性

将化合物II溶解于HBSS缓冲液(1％DMSO最终浓度)中达到1.5、3及6μM浓度。一式两份孔执行各浓度/取样时间。测试按以下梯度pH值进行：顶部隔室(粘膜)的pH值是6.5，底外侧隔室(浆膜)的pH值是7.4。

顶部至底外侧(A→B，粘膜至浆膜)转运：将200μL各浓度的化合物II添加至顶部隔室中并将400μL HBSS添加至底外侧隔室中。在37℃下培育板。在60和120分钟(t＝60和t＝120)之后，取得底外侧隔室的等分试样。在起始时间(t＝0)和120分钟(t＝120)之后取得顶部隔室的等分试样。

底外侧至顶部(B→Α，浆膜至粘膜))转运：将400μL各浓度的化合物II添加至底外侧隔室中并将200μL HBSS添加至顶部隔室中。在37℃下培育板。在60和120分钟(t＝60和t＝120)之后，取得顶部隔室的等分试样。在起始时间(t＝0)和120分钟(t＝120)之后取得底外侧隔室的等分试样。通过LC/MS监测化合物II来分析所有样品。

抑制PepT1底物对化合物I的粘膜向浆膜转运(Gly-Sar)

用10mM Gly-Sar预处理分化的细胞30分钟，以阻断活性转运蛋白PepT1。

顶部至底外侧(A→B，粘膜至浆膜)转运：将200μL各浓度的化合物I添加至顶部隔室中并将400μL HBSS添加至底外侧隔室中。在37℃下培育板。在60和120分钟(t＝60和t＝120)之后，取得底外侧隔室的等分试样。在起始时间(t＝0)和120分钟(t＝120)之后取得顶部隔室的等分试样。通过LC/MS监测化合物I以及化合物II的外观来分析所有样品。

分析测定

利用附录(第7.1节)中报导的高效液相色谱/质谱(LC/MS)方法，无需任何进一步稀释，测定培育后样品中化合物II和化合物I的浓度。

结果

所用Caco-2细胞单层的实验前TEER值在850至1160Ω×cm²范围内，指示具有紧密连接的汇合单层。在实验结束时，TEER值平均降低170Ω×cm²(从680至990Ω×cm²)，并且不影响细胞单层的完整性。荧光黄测试确定实验后细胞单层的完整性，实际上，实验后在底外侧隔室中检测到的荧光黄的量在所有孔中始终<1％。图55报导在有关化合物I的非特异性结合测试中获得的数据。经证实，在测试条件下，在所有测试剂量下，化合物I在顶部隔室中得到回收。在任何测试剂量下，在底外侧隔室中都未检测到化合物I。排除化合物I的非特异性结合。在任何隔室中都未检测到化合物II。图55报导在有关化合物I和化合物II的稳定性测试中获得的数据。经证实，两种化合物在测试条件下稳定：HBSS缓冲液(2％DMSO最终浓度)，在37℃下60和120分钟。图56a-56e报导在有关化合物I的双向渗透性测试中获得的数据。此化合物无法穿过细胞单层。在顶部至底外侧测试中，在60和120分钟之后在接收隔室中未检测到化合物I，而在实验结束时，在底外侧隔室中检测到浓度递增的化合物II。化合物II的通过量百分比报导于表中。在顶部至底外侧实验结束时，在顶部隔室中观察到较低的化合物I回收率，但检测到浓度增加的化合物II(高回收率)。在120分钟之后顶部隔室中有浓度增加的化合物II可以通过Caco-2细胞中能够使化合物去酯化的细胞外和细胞内酯酶的存在说明(Kern等人,《农业与食品化学杂志(J.Agric.Food Chem.)》51:7884-7891(2003))。在底外侧至顶部测试中，在接收隔室中未检测到化合物I，但检测到较低浓度的化合物II。因此，化合物I很可能以化合物II形式转移和转运穿过Caco-2单层。图57a-57e报导在有关化合物II的双向渗透性测试中获得的数据。此化合物显示出顶部至底外侧的良好通过量百分比以及从底外侧至顶部隔室的低渗透率。由于供体隔室中的浓度是已知的，故计算出Papp。化合物II良好的被动穿过Caco-2单层。未检测到外排。图58a-58c报导在抑制测试中获得的数据，其中Caco-2细胞单层用10mM Gly-Sar预处理(以使PepT1转运蛋白饱和)。在接收隔室中未检测到化合物I，但观察到化合物II通过。在此测试中，通过量百分比不是线性的。

讨论

在本研究中，评价并排除了化合物I在Caco-2细胞测试系统(无细胞)中的非特异性结合。化合物I在测试条件下稳定。

在双向渗透性测试中评价并确定了化合物I向化合物II的转化。化合物I在测试条件下无法穿过细胞单层。因此，化合物I可能以去酯化的化合物II形式转移并转运穿过Caco-2细胞单层。

在双向渗透性测试中，化合物II显示良好地被动穿过Caco-2细胞单层。未发现化合物II可能作为外排转运蛋白的底物的迹象。

用Gly-Sar预处理(以使PepT1转运蛋白饱和)进行的测试显示无化合物I通过及化合物II的通过率。化合物I跨Caco-2细胞单层转运可能不是由PepT1介导。

这些实验表明，化合物I和其盐的肠吸收不是由Pept1转运蛋白介导的。实际上，前述结果展示，化合物I在小肠中的环境酯酶作用下去酯化，随后被动地渗透小肠上皮细胞。化合物I和其盐不其Pept1的底物代表一种出人意料并且在药理学上有益的特性。如例如Vig等人,《先进药物递送评论》65:1370-1385(2013)所描述，Pept1是已知会介导多种缬氨酸酯吸收的pH依赖性共转运蛋白，所述文献的公开内容以引用的方式并入本文中。如由Pept1跨肠上皮细胞转运的化合物的结构多样性所证实，此蛋白质展现广泛的底物特异性。出乎意料的是，尽管存在缬氨酸酯官能团，但化合物I和其盐不依赖于此转运蛋白实现跨小肠上皮细胞的吸收。这是一种有利的特性，因为化合物I和其盐由此不会与Pept1的天然底物，如肽养分竞争结合至此蛋白质并通过此蛋白质转运。实际上，化合物I和其盐在体内转化成以与能量和局部质子梯度无关的方式容易地吸收的形式。这种出乎意料的特性加上化合物I和其盐的高水溶性一起提供了有益的药物动力学特征，通过这种药物动力学特征，这些治疗剂容易地溶解于水性环境中并且继而转化成能够不依赖于转运蛋白吸收的形式。

实施例5.包括另外的宫缩抑制剂的组合疗法

化合物I或其盐，如化合物III可以与一种或多种另外的药剂，如催产素受体拮抗剂、β模拟剂、钙通道抑制剂、镁盐或一氧化氮供体组合施用给受试者，如人类受试者，例如以减少子宫收缩的发生并延迟分娩发作。

有本领域技能的医师可以将化合物I或其盐，如化合物III与催产素受体拮抗剂同时施用、以混合物形式施用或分开施用。与本发明的组合物和方法结合使用的示例性催产素受体拮抗剂包括阿托西班、瑞托西班、巴卢西班、亚泊西班及诺拉西班，或其变化形式、配制物、结晶形式或衍生物。举例来说，化合物I或其盐，如化合物III可以在诺拉西班或其变化形式、配制物、结晶形式或衍生物之前、之后或同时施用，以使受试者的分娩发作延迟例如一天或数天，或者一周或数周，如约1天至约16周(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30天，或约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15或16周)。

另外或替代地，有本领域技能的医师可以将化合物I或其盐，如化合物III与β模拟剂，如本文所描述的β模拟剂同时施用、以混合物形式施用或分开施用。举例来说，化合物I或其盐，如化合物III可以在本文所描述或本领域中已知的β模拟剂之前、之后或同时施用，以使受试者的分娩发作延迟例如一天或数天，或者一周或数周，如约1天至约16周(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30天，或约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15或16周)。

另外或替代地，有本领域技能的医师可以将化合物I或其盐，如化合物III与钙通道抑制剂，如本文所描述的钙通道抑制剂同时施用、以混合物形式施用或分开施用。举例来说，化合物I或其盐，如化合物III可以在本文所描述或本领域中已知的钙通道抑制剂之前、之后或同时施用，以使受试者的分娩发作延迟例如一天或数天，或者一周或数周，如约1天至约16周(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30天，或约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15或16周)。

另外或替代地，有本领域技能的医师可以将化合物I或其盐，如化合物III与镁盐，如硫酸镁同时施用、以混合物形式施用或分开施用。举例来说，化合物I或其盐，如化合物III可以在硫酸镁之前、之后或同时施用，以使受试者的分娩发作延迟例如一天或数天，或者一周或数周，如约1天至约16周(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30天，或约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15或16周)。

另外或替代地，有本领域技能的医师可以将化合物I或其盐，如化合物III与一氧化氮供体，如硝酸甘油同时施用、以混合物形式施用或分开施用。举例来说，化合物I或其盐，如化合物III可以在硝酸甘油之前、之后或同时施用，以使受试者的分娩发作延迟例如一天或数天，或者一周或数周，如约1天至约16周(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30天，或约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15或16周)。

另外或替代地，有本领域技能的医师可以将化合物I或其盐，如化合物III与孕酮或其衍生物或变化形式，如本文所描述或本领域中已知的衍生物或变化形式同时施用、以混合物形式施用或分开施用。举例来说，化合物I或其盐，如化合物III可以在孕酮或本文所描述或本领域中已知的其变化形式或衍生物之前、之后或同时施用，以使受试者的分娩发作延迟例如一天或数天，或者一周或数周，如约1天至约16周(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30天，或约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15或16周)。

实施例6.在早产小鼠模型中化合物I和其药学上可接受的盐与硝苯地平和阿托西班的组合的宫缩抑制作用

为了研究化合物I与钙通道阻断剂或催产素受体拮抗剂的组合在早产动物模型中的治疗作用，在17天的早期孕龄时用确定的分娩诱导剂处理初次怀孕的CD-1小鼠，随后单独或与硝苯地平(5mg/kg，经口施用)或阿托西班(300mg/kg，皮下施用)组合施用各种剂量的化合物I的氯化物盐(化合物III；10mg/kg、30mg/kg或100mg/kg，分别经口施用)。通过测量治疗组和对照组中各小鼠从诱导至第一只幼鼠分娩的时间、各组中所有小鼠间从诱导至完全分娩的时间及各组中小鼠间后代的存活情况来评估宫缩抑制作用。本研究中使用的早产诱导剂是RU486(又称米非司酮(mifepristone))，即促进子宫颈扩张并引起增强的子宫收缩和对前列腺素的敏感性的一种类固醇抗孕激素；和脂多糖(LPS)，即一种炎症介体。

为了诱导在早期孕龄分娩，对各小鼠皮下施用2.5mg/kg的单次剂量的RU486(t＝0)。对用LPS处理的小鼠单次腹膜内注射2mg/kg的LPS(t＝0)。通过在两个不同部位皮下注射，将300mg/kg阿托西班施用给CD-1小鼠。这些注射是在用诱导剂RU486或LPS处理之后5小时(t＝5)和29小时(t＝29)时进行。在用诱导剂RU486或LPS处理之后5小时(t＝5)、19小时(t＝19))29小时(t＝29)及43小时(t＝43)，对CD-1小鼠经口施用5mg/kg的硝苯地平。在用诱导剂RU486或LPS处理之后5小时(t＝5)、19小时(t＝19))29小时(t＝29)及43小时(t＝43)，对CD-1小鼠经口施用10mg/kg、30mg/kg或100mg/kg的化合物III。在用RU486或LPS诱导且随后施用阿托西班、硝苯地平和/或化合物III之后，对各小鼠组进行连续视觉监测以评估各小鼠在诱导与第一只幼鼠分娩之间经过的时间，以及各组中随时间变化而经历分娩的小鼠的比例。通过盖伦流体静力性肺检验(galenic hydrostatic pulmonary docimasy)评估各组中分娩的幼鼠的存活情况。

用RU486处理17天孕龄的CD-1小鼠引起诱导后约21小时的平均分娩时间(t＝21；计算的平均值＝21±1.00小时)，而用LPS处理17天孕龄的CD-1小鼠展现诱导后约26小时的平均分娩时间(t＝26；计算的平均值＝26±2.34小时)，由此证实了RU486和LPS诱导早产的能力。相比之下，CD-1小鼠在约19天至约21天的孕龄足月分娩，比第17天妊娠长50小时。在由RU486处理的小鼠分娩的幼鼠中，有96％在分娩时是存活的，并且由LPS处理的小鼠分娩的幼鼠中有48％在分娩时是存活的(图60和61)。用RU486处理的小鼠中有3％因在研究期间死亡或处死而排除在本研究之外；用LPS处理的小鼠中有34％因在研究期间死亡或处死而排除在本研究之外。

在研究期间，观察到仅用硝苯地平治疗使RU486处理的小鼠的平均分娩时间相较于媒剂明显延长(23.53±0.99小时相对于21.19±1.00小时；图65)。另外，相较于媒剂，仅用硝苯地平治疗LPS处理的小鼠促进分娩时间的延长和后代存活率的明显增加(90.39％±5.34％相对于48.20％±16.45％；图68和69)。在LPS处理的小鼠中施用阿托西班类似地使分娩时间延长(图70)。

发现化合物III促进RU486处理的小鼠的分娩时间相较于媒剂增加(图65和67)。确切地说，经口施用30mg/kg和100mg/kg化合物III的RU486处理的小鼠展现分娩时间相对于媒剂增加(分别为p＝0.0871和p＝0.0601)。此外，对LPS处理的小鼠施用化合物III使后代存活率剂量依赖性增加(响应于100mg/kg化合物III观察到的69.41％±15.76％存活率相对于响应于媒剂观察到的48.20％±16.45％存活率；图68)。

硝苯地平和化合物III的组合引起特别明显的宫缩抑制作用(图65和69)。对RU486处理的小鼠经口施用硝苯地平(5mg/kg)和化合物III(100mg/kg)引起明显的协同作用，因为这一组合诱导分娩时间相对于媒剂(27.91±0.35小时相对于21.19±1.00小时)、相同剂量的单独硝苯地平(27.91±0.35小时相对于23.53±0.99小时)及相同剂量的单独化合物III(27.91±0.35小时相对于23.70±0.60小时)明显延长。此外，对LPS处理的小鼠经口施用硝苯地平(5mg/kg)和化合物III(10mg/kg)使分娩时间相对于用单独10mg/kg化合物III治疗的组明显延长(31.01±1.89小时相对于23.98±0.66小时)。经口施用10mg/kg化合物III与5mg/kg硝苯地平的组合也促进LPS处理的小鼠分娩的幼鼠的存活率相对于仅施用相同剂量的化合物III的小鼠(94.23％±3.68％相对于57.90％±14.89％)及相对于仅施用媒剂的小鼠(94.23％±3.68％相对于48.20％±16.45％)增加(图68)。

阿托西班与化合物III的组合也增强各单独使用的化合物的宫缩抑制作用。对LPS处理的小鼠皮下施用阿托西班(300mg/kg)并经口施用化合物III(100mg/kg)诱导分娩时间相对于仅施用媒剂的小鼠(33.23±2.95小时相对于26.17±1.98小时)及相对于仅施用相同剂量阿托西班的小鼠(33.23±2.95小时相对于28.41±2.99小时)明显延长(图71)。此组合还展现出使后代的存活率相较于仅用媒剂、仅用相同剂量的阿托西班或仅用相同剂量的化合物III治疗的小鼠增加的倾向(图70)。

本研究还说明了FP拮抗剂化合物I的盐在两个不同的早产动物模型中的宫缩抑制作用并且支持使用化合物I和其盐治疗和预防早产，不管潜在的生物化学病因如何。本研究也支持使用FP拮抗剂，如化合物I和其盐(例如化合物III)与钙通道拮抗剂和催产素受体拮抗剂中每一种的组合预防早产。使用化合物III与硝苯地平和阿托西班中每一种的组合明显超过个别组分的治疗作用，并且证实化合物I和其盐，如化合物III可以与另外的宫缩抑制剂协同作用。

实施例7.在人体组织样品中化合物II与硝苯地平、阿托西班及诺拉西班的组合的宫缩抑制作用

为了研究化合物II、化合物I和其盐的活性代谢物(如化合物III)与催产素受体拮抗剂和钙离子通道阻断剂的组合的治疗作用，从进行剖腹产分娩的足月、分娩前人类女性受试者获得子宫肌层活组织切片。本研究的目标是表征单独化合物II及其与另外的宫缩抑制剂的组合对子宫肌层收缩的频率、峰振幅及持续时间以及对每次收缩的做功和所有收缩的总功的影响。为此，使用含DMT Myograph 800MS(ADINSTRUMENTS^TM)，在含氧克雷布氏溶液中以ADI Powerlab软件进行，由此有助于同时平行测量多种肌肉制剂。

通过使平滑肌收缩以确定基线值至少20分钟来起始子宫肌层活组织切片的实验。在这一时间段之后，记录下自发收缩频率、峰振幅、持续时间、每次收缩的做功及所有收缩的总功的基线测量值。随后，用DMSO对照、化合物II、阿托西班、硝苯地平、化合物II与阿托西班的组合，或化合物II与硝苯地平的组合处理子宫肌层活检样品。随后，在接下来的10分钟时间段内，测量这些药剂对子宫肌层收缩的频率、幅度及持续时间以及做功的影响。接着，在连续的10分钟时间间隔过程中，通过添加递增浓度的收缩刺激剂，如催产素、PGF2α或PGE2来激发子宫肌层样品，并因此测量收缩频率、峰振幅、持续时间、每次收缩的做功及所有收缩的总功。催产素、PGF2α及PGE分别是不同的子宫收缩及早产调节剂。催产素直接诱导子宫肌层收缩并增进收缩性前列腺素自子宫内膜和蜕膜合成和释放。催产素也涉及通过增强环加氧酶2(COX-2)促进人类子宫肌层细胞中前列腺素的产生。经显示，前列腺素PGF2α和PGE2诱导子宫颈变化并引起子宫收缩，这是分娩和娩出生理学中的两个关键事件。PGF2α活化人类子宫肌层中的FP受体使细胞内钙浓度升高，而细胞内钙浓度升高又引起子宫平滑肌细胞收缩。因此，本研究的另一目标是评价化合物II减弱通过三种不同的生物化学模式诱导的子宫收缩活动的能力。

这些实验的结果证实，单独化合物II能够以剂量依赖性方式PGF2α诱导和OT诱导的子宫肌层收缩(图72和73)。此外，目前已发现，化合物II当与催产素受体拮抗剂阿托西班(图76)和钙通道阻断剂硝苯地平(图78)组合使用时在降低子宫肌层收缩方面展现出出人意料的协同作用。意外的是，当在无另外的宫缩抑制剂存在下使用时展现较低的减少子宫肌层收缩的效力的化合物II剂量(如60nM，图72和73)当与阿托西班(图76)和硝苯地平(图78)组合时展现明显增加的抑制活性。类似地，当在无化合物II存在下使用时对减少子宫肌层收缩具有次佳作用的阿托西班剂量(6nM，图74和75)和硝苯地平剂量(6nM，图77)当与化合物II组合时展现出出乎意料的抗收缩效力增加(图76和78)。这些数据证实，化合物II能够与另外的宫缩抑制剂，如催产素受体拮抗剂和钙离子通道阻断剂协同作用，以抑制可能导致早产的子宫收缩活动。

除抑制子宫肌层收缩外，化合物II的宫缩抑制作用还表现在此药剂减弱人类子宫肌层和羊膜活组织切片中下游促炎性基因的表达的能力(图79和80)。进行蛋白质印迹分析以表征单独化合物II及其与另外的宫缩抑制剂的组合调节从进行剖腹产分娩的足月、分娩前人类女性受试者分离的子宫肌层和羊膜样品中各种蛋白质的表达的能力。这些研究的结果证实，化合物II能够减少各种促炎性蛋白质的表达，并且当与诺拉西班组合使用时在减少COX-2表达方面展现出出人意料的协同作用。

总的说来，由这些实验产生的数据证实，化合物II能够抑制由不同的子宫收缩调节剂诱导的可能导致早产的平滑肌活动。此外，化合物II当与催产素受体拮抗剂和钙离子通道阻断剂组合使用时对于减弱子宫收缩展现出出乎意料的协同作用。这种协同作用是以在平滑肌活动水平以及子宫肌层和羊膜活组织切片中促炎性基因表达的减少表现，并且展示出向需要治疗的受试者，如发生早产或有发生早产风险的受试者提供化合物II与一种或多种另外的宫缩抑制剂的组合的各种益处。

其它实施方案

本说明书中提到的的所有出版物、专利和专利申请都以引用的方式并入本文中，其引用的程度如同特定且个别地指示每个单独的出版物、专利或专利申请以引用的方式并入一般。

尽管已结合具体实施方案描述本发明，但应理解，其能够进一步修改并且本申请案打算涵盖本发明的任何变化、使用或修改，这些变化、使用或修改一般来说遵循本发明原理并且包括在本发明所属领域内的已知或惯用实践范围内的与本发明有所偏离的一些内容，并且可以应用于上文阐述和在所附权利要求书的范围中的基本特征。

其它实施方案在权利要求书范围内。

Claims

1.一种由式(I)表示的化合物，

或其药学上可接受的盐。

2.根据权利要求1所述的化合物，其中所述化合物是由式(III)表示

3.根据权利要求1或2所述的化合物，其中所述化合物以约1nM的亲和力结合人类前列腺素F2α受体。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的化合物，其中所述化合物可溶于水溶液中达到约300μg/mL至约500μg/mL的浓度。

5.根据权利要求4所述的化合物，其中所述化合物可溶于水溶液中达到约380μg/mL浓度。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的化合物，其中所述化合物抑制细胞中三磷酸肌醇的合成。

7.根据权利要求6所述的化合物，其中所述细胞是哺乳动物细胞。

8.根据权利要求7所述的化合物，其中所述哺乳动物细胞是人类细胞。

9.根据权利要求8所述的化合物，其中所述人类细胞是子宫肌层细胞。

10.根据权利要求9所述的化合物，其中所述子宫肌层细胞是子宫肌细胞。

11.根据权利要求1至10中任一项所述的化合物，其中在向受试者施用所述化合物之后，所述化合物诱导所述受试者的子宫收缩幅度降低。

12.根据权利要求11所述的化合物，其中相对于在所述施用之前记录的所述受试者的子宫收缩幅度测量值，所述降低是约40％至约50％。

13.根据权利要求1至12中任一项所述的化合物，其中在向受试者施用所述化合物之后，所述化合物在所述受试者体内展现约1小时至约4小时的半衰期。

14.根据权利要求1至13中任一项所述的化合物，其中在向受试者施用所述化合物之后，所述化合物在约0.25小时至约2小时内在所述受试者体内达到最大血浆浓度。

15.根据权利要求11至14中任一项所述的化合物，其中所述受试者是哺乳动物。

16.根据权利要求15所述的化合物，其中所述哺乳动物是人类。

17.根据权利要求15所述的化合物，其中所述哺乳动物是犬科动物。

18.根据权利要求15所述的化合物，其中所述哺乳动物是大鼠。

19.根据权利要求11至18中任一项所述的化合物，其中所述施用是经口施用。

20.根据权利要求11至18中任一项所述的化合物，其中所述施用是静脉内施用。

21.一种由式(III)表示的化合物

其中所述化合物呈结晶状态。

22.根据权利要求21所述的化合物，其中所述化合物在约7.0°2θ、约8.1°2θ、约10.0°2θ、约20.1°2θ、约21.0°2θ及约23.5°2θ处展现特征性X射线粉末衍射峰。

23.根据权利要求22所述的化合物，其中所述化合物还在约12.0°2θ、约13.1°2θ、约14.1°2θ、约16.4°2θ、约18.4°2θ及约29.5°2θ处展现X射线粉末衍射峰。

24.根据权利要求21至23中任一项所述的化合物，其中所述化合物以大体上如图19、22、29、45-49及54中的任一个所描绘的X射线粉末衍射谱图表征。

25.根据权利要求24所述的化合物，其中所述化合物以大体上如图49中所描绘的X射线粉末衍射谱图表征。

26.根据权利要求21至25中任一项所述的化合物，其中所述化合物展现中心在约1.1ppm、约3.3ppm、约4.9ppm、约5.4ppm、约7.1ppm、约7.7ppm、约7.9ppm及约8.0ppm处的¹H核磁共振(NMR)峰。

27.根据权利要求21至26中任一项所述的化合物，其中所述化合物以大体上如图21中所描绘的¹H NMR谱图表征。

28.根据权利要求21至27中任一项所述的化合物，其中如由差示扫描热量测定法所测量，所述化合物在约145℃至约147℃展现吸热。

29.根据权利要求28所述的化合物，其中如由差示扫描热量测定法所测量，所述化合物另外在约214℃展现吸热。

30.根据权利要求29所述的化合物，其中所述化合物以大体上如图30中所描绘的差示扫描热量测定曲线表征。

31.根据权利要求28所述的化合物，其中如由差示扫描热量测定法所测量，所述化合物另外在约228℃展现吸热。

32.根据权利要求31所述的化合物，其中所述化合物以大体上如图33中所描绘的差示扫描热量测定曲线表征。

33.根据权利要求21至32中任一项所述的化合物，其中如由热解重量分析所测量，所述化合物当从25℃加热至100℃时展现约0.2％至约0.6％的重量减轻。

34.根据权利要求21至33中任一项所述的化合物，其中如由热解重量分析所测量，所述化合物当从100℃加热至160℃时展现约2.5％至约3.5％的重量减轻。

35.根据权利要求21至34中任一项所述的化合物，其中所述化合物展现大体上如图24中所描绘的热解重量分析曲线。

36.一种药物组合物，包含根据权利要求1到35中任一项所述的化合物。

37.根据权利要求36所述的药物组合物，其中所述药物组合物包含一种或多种赋形剂。

38.根据权利要求36或37所述的药物组合物，其中所述化合物的纯度是至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或99.9％。

39.根据权利要求38所述的药物组合物，其中所述纯度是利用高压液相色谱法(HPLC)测定。

40.根据权利要求36至39中任一项所述的药物组合物，其中所述化合物或药物组合物被配制成供受试者经口施用。

41.根据权利要求36至40中任一项所述的药物组合物，其中所述化合物或药物组合物是片剂、胶囊、软胶囊、散剂、液体溶液或液体悬浮液。

42.根据权利要求36至39中任一项所述的药物组合物，其中所述化合物或药物组合物被配制成供受试者静脉内施用。

43.一种合成由式(I)表示的化合物或其药学上可接受的盐的方法

所述方法包括使由式(IV)表示的前体

与由式(V)表示的前体反应

以形成氨基酯，其中X是保护基，并且其中所述方法还包括使所述氨基酯脱除保护基。

44.根据权利要求43所述的方法，其中所述化合物是由式(III)表示

45.根据权利要求43或44所述的方法，所述方法包括使所述氨基酯与能够使所述氨基酯脱除保护基的试剂反应。

46.根据权利要求43至45中任一项所述的方法，其中所述保护基选自由以下组成的组：叔丁氧基羰基、三苯甲基、4-单甲氧基三苯甲基、4-甲基三苯甲基、3,5-二甲氧基苯基异丙氧基羰基、2-(4-联苯)异丙氧基羰基、2-硝基苯基次磺酰基、9-芴基甲氧基羰基、2-(4-硝基苯基磺酰基)乙氧基羰基、(1,1-二氧代苯并[b]噻吩-2-基)甲氧基羰基、1-(4,4-二甲基-2,6-二氧代亚环己-1-亚基)-3-甲基丁基、2,7-二叔丁基-9-芴基甲氧基羰基、2-氟-9-芴基甲氧基羰基、2-单异辛基-9-芴基甲氧基羰基、2,7-二异辛基-9-芴基甲氧基羰基、四氯邻苯二甲酰基、2-[苯基(甲基)锍基]乙氧基羰基四氟硼酸酯、乙烷磺酰基乙氧基羰基、2-(4-磺基苯基磺酰基)乙氧基羰基、苯甲氧基羰基、烯丙基氧基羰基、邻硝基苯磺酰基、2,4-二硝基苯磺酰基、苯并噻唑-2-磺酰基、2,2,2-三氯乙氧基羰基、二硫杂琥珀酰基、对硝基苯甲氧基羰基、α-叠氮基酸、炔丙基氧基羰基、9-(4-溴苯基)-9-芴基、叠氮基甲氧基羰基、六氟丙酮、2-氯苯甲氧基羰基、三氟乙酰基、2-(甲基磺酰基)乙氧基羰基、苯基二硫基乙氧基羰基及2-吡啶基二硫基乙氧基羰基。

47.根据权利要求45或46所述的方法，其中所述试剂选自由以下组成的组：甲烷磺酸、盐酸、三氟乙酸、乙酸、哌啶、1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一-7-烯、吗啉、六亚甲基亚胺、氨、二乙胺、哌嗪、三(2-氨基乙基)胺、肼、1-甲基吡咯烷、碳酸氢钠、氢氧化钠、氢氧化钡、碳酸钠、分子氢、氢溴酸、三溴化硼、四(三苯基膦)钯、硫代苯酚、β-巯基乙醇、2-巯基乙酸、铝汞齐、锌、次磷酸、硼氢化钠、N-巯基乙酰胺、氯化锡(II)、三甲基膦、三丁基膦、三苯膦、四硫代钼酸苯甲基三乙基铵、乙酸钯(II)、氢氟酸、氯化三甲基硅烷、三氟甲烷磺酸三甲基硅烷及三氟甲烷磺酸。

48.根据权利要求47所述的方法，其中所述保护基是叔丁氧基羰基并且其中所述试剂选自由甲烷磺酸、盐酸及三氟乙酸组成的组。

49.根据权利要求48所述的方法，其中所述试剂是甲烷磺酸。

50.根据权利要求43或44所述的方法，所述方法包括使所述氨基酯暴露于电磁辐射。

51.根据权利要求43、44及50中任一项所述的方法，其中所述保护基选自由以下组成的组：邻硝基苯甲氧基羰基、4-硝基藜芦基氧基羰基、2-(2-硝基苯基)丙氧基羰基及2-(3,4-亚甲基二氧基-6-硝基苯基)丙氧基羰基。

52.根据权利要求50或51所述的方法，其中所述电磁辐射是以约300nm至约400nm的波长为特征。

53.根据权利要求43至52中任一项所述的方法，所述方法包括使所述由式(IV)表示的前体与所述由式(V)表示的前体和二酰亚胺反应。

54.根据权利要求53所述的方法，其中所述二酰亚胺选自由1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺和N,N'-二异丙基碳二亚胺组成的组。

55.根据权利要求54所述的方法，其中所述二酰亚胺是1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺。

56.根据权利要求43至55中任一项所述的方法，所述方法包括使所述由式(IV)表示的前体与所述由式(V)表示的前体和苯并三唑衍生物反应。

57.如权利要求56所述的方法，其中所述苯并三唑衍生物选自由以下组成的组：1-羟基苯并三唑、6-氯-1-羟基苯并三唑及1-羟基-7-氮杂苯并三唑。

58.根据权利要求57所述的方法，其中所述苯并三唑衍生物是1-羟基苯并三唑。

59.根据权利要求43至58中任一项所述的方法，所述方法包括使所述由式(IV)表示的前体与所述由式(V)表示的前体和碱反应。

60.根据权利要求59所述的方法，其中所述碱是N,N-二甲氨基吡啶。

61.根据权利要求43至60中任一项所述的方法，所述方法包括通过使由式(VI)表示的前体

与由式(VII)表示的前体反应来合成所述由式(IV)表示的前体

62.根据权利要求61所述的方法，所述方法包括使所述由式(VI)表示的前体与所述由式(VII)表示的前体和一种或多种碱反应。

63.根据权利要求62所述的方法，其中所述一种或多种碱选自由二异丙基乙胺、三乙胺及N,N-二甲氨基吡啶组成的组。

64.根据权利要求63所述的方法，所述方法包括使所述由式(VI)表示的前体与所述由式(VII)表示的前体、二异丙基乙胺及N,N-二甲氨基吡啶反应。

65.一种制备由式(III)表示的化合物的方法，

所述方法包括将由式(I)表示的化合物

与盐酸混合。

66.根据权利要求65所述的方法，其中所述盐酸是盐酸水溶液。

67.根据权利要求65或66所述的方法，所述方法包括制备呈结晶状态的所述由式(III)表示的化合物。

68.根据权利要求65至67中任一项所述的方法，所述方法包括将所述由式(I)表示的化合物溶解于乙醇中。

69.根据权利要求65至68中任一项所述的方法，所述方法包括将所述盐酸与乙醇混合。

70.根据权利要求69所述的方法，所述方法还包括将所述盐酸与乙酸乙酯混合。

71.根据权利要求65至70中任一项所述的方法，所述方法包括经约20分钟至约30分钟时间，将所述由式(I)表示的化合物添加至所述盐酸中以形成混合物。

72.根据权利要求71所述的方法，所述方法包括在所述添加期间，将所述混合物的温度维持在约15℃至约25℃。

73.根据权利要求72所述的方法，所述方法包括在所述添加之后，将所述混合物的温度降低至约5℃。

74.根据权利要求73所述的方法，所述方法包括在所述降低之后，在约0℃至约5℃下搅拌所述混合物约50分钟至约70分钟。

75.根据权利要求65至74中任一项所述的方法，其中所述由式(I)表示的化合物与所述盐酸是以等摩尔量混合。

76.一种由根据权利要求43至75中任一项所述的方法制造的化合物。

77.一种治疗或预防受试者早产的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的根据权利要求1至35中任一项所述的化合物或根据权利要求36至42中任一项所述的药物组合物。

78.一种预防受试者在剖腹产之前分娩的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的根据权利要求1至35中任一项所述的化合物或根据权利要求36至42中任一项所述的药物组合物。

79.一种治疗或预防受试者的痛经的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的根据权利要求1至35中任一项所述的化合物或根据权利要求36至42中任一项所述的药物组合物。

80.根据权利要求77至79中任一项所述的方法，其中所述受试者以约24周至约34周孕龄为特征。

81.根据权利要求77至80中任一项所述的方法，其中所述受试者在所述施用之后展现子宫收缩幅度降低。

82.根据权利要求81所述的方法，其中相对于在所述施用之前记录的所述受试者的子宫收缩幅度测量值，所述降低是约40％至约50％。

83.根据权利要求77至82中任一项所述的方法，其中所述化合物在所述受试者体内展现约1小时至约4小时的半衰期。

84.根据权利要求77至83中任一项所述的方法，其中所述化合物在所述施用的约0.25小时至约2小时内在所述受试者体内达到最大血浆浓度。

85.根据权利要求77至84中任一项所述的方法，其中所述受试者是哺乳动物。

86.根据权利要求85所述的方法，其中所述哺乳动物是人类。

87.根据权利要求77至86中任一项所述的方法，所述方法包括向所述受试者经口施用所述化合物或药物组合物。

88.根据权利要求77至86中任一项所述的方法，所述方法包括向所述受试者静脉内施用所述化合物或药物组合物。

89.一种试剂盒，包含根据权利要求1至35中任一项所述的化合物或根据权利要求36至42中任一项所述的药物组合物和药品说明书。

90.根据权利要求89所述的试剂盒，其中所述药品说明书指导所述试剂盒的使用者向经历早产或有发生早产风险的受试者施用所述化合物或药物组合物。

91.根据权利要求90所述的试剂盒，其中所述受试者以约24周至约34周孕龄为特征。

92.根据权利要求89至91中任一项所述的试剂盒，其中所述药品说明书指导所述试剂盒的使用者将所述化合物或药物组合物与水溶液混合。

93.根据权利要求89至92中任一项所述的试剂盒，其中所述药品说明书指导所述试剂盒的使用者向所述受试者经口施用所述化合物或药物组合物。

94.根据权利要求89至92中任一项所述的试剂盒，其中所述药品说明书指导所述试剂盒的使用者向所述受试者静脉内施用所述化合物或药物组合物。