CN108299520A - 提升提取橙皮苷纯度的方法以及橙皮苷 - Google Patents

Abstract

本发明涉及药物提取领域，具体而言，涉及一种提升提取橙皮苷纯度的方法以及橙皮苷。提升提取橙皮苷纯度的方法，包括以下步骤：将将枳实粗粉利用碱性物质将所述枳实粗粉的pH调至8‑9后浸泡1‑1.2小时后，过滤去除母液，对过滤得到的滤渣进行提取得到橙皮苷。其通过对枳实粗粉内添加碱性物质，能够大量去除枳实提取物内的杂质，提升橙皮苷的纯度，但是不会影响提取橙皮苷的提取效率。该方法可以大规模应用于工业生产。

Description

提升提取橙皮苷纯度的方法以及橙皮苷

技术领域

本发明涉及药物提取领域，具体而言，涉及一种提升提取橙皮苷纯度的方法以及橙皮苷。

背景技术

橙皮苷又称川陈皮素，二氢黄酮苷，其为芸香科柑桔属植物甜橙、柠檬的提取物，其可以作为维生素P类药，用于增强毛细血管的韧性。提取橙皮苷一般是对枳实进行多次提取，提取后混合每次提取的提取物，继而再纯化得到最后的橙皮苷。但是从甜橙和柠檬等植物中提取橙皮苷时，每次提取得到的提取物内均含有大量的杂质，得到纯度较高的橙皮苷需要进行多次纯化，纯化过程中必然会造成橙皮苷的损耗，继而降低橙皮苷的提取率。特别是枳实的第一提取得到的提取物为黑色，说明其中杂质含量极高，不易提纯。

发明内容

本发明提供了一种提升提取橙皮苷纯度的方法，其不仅仅可以快速对枳实的提取物进行纯化，减少纯化的次数，能够同时保证橙皮苷具有较高的提取率和纯度。

本发明还提供一种橙皮苷，该橙皮苷杂质含量少，纯度高。

本发明是这样实现的：

一种提升提取橙皮苷纯度的方法，包括以下步骤：

将枳实粗粉利用碱性物质将所述枳实粗粉的pH调至8-9后浸泡1-1.2小时后，过滤去除母液，对过滤得到的滤渣进行提取得到橙皮苷。

一种橙皮苷，其通过上述提升提取橙皮苷纯度的方法制备得到。

本发明的有益效果是：本发明的通过对枳实粗粉内添加碱性物质后能够大量去除初级枳实提取物内的杂质，提升橙皮苷的纯度，但是不会影响提取橙皮苷的提取效率。该方法可以大规模应用于工业生产。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，以下将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍。

图1为橙皮苷标准品的高效液相分析图谱；

图2为实施例1中初次提取得到的初级枳实提取物的高效液相分析图谱；

图3为对比例2中初次提取得到的橙皮苷的高效液相分析图谱。

具体实施方式

为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。

下面对本发明实施例的提升提取橙皮苷纯度的方法以及橙皮苷进行具体说明。

现有技术中对提取物的提纯，一般是对原料进行提取后，对提取得到的物质进行各种分离操作，继而实现对应物质的提纯，但是提取后的提取物质内已经含有大量的所需提取物，进行提纯，容易造成所需提取物的大量损耗，且操作繁琐。对原料的处理一般仅为粉碎、除霉等基本操作，而基本不会在一开始就利用提取的方式对原料进行除杂。

一种提升提取橙皮苷纯度的方法，包括以下步骤：

S1、除杂；

首先，将枳实进行粉碎，增加枳实与溶剂的接触面积和时间，便于枳实发胀，并便于橙皮苷溶出，同时减少枳实和枳实之间的空隙，提升每次提取的枳实的数量，便于工业化。

枳实粉碎后通过80-120目筛得到枳实粗粉，控制枳实粗粉的粒径有利于提取过程中枳实粗粉的放置。

而后将枳实粗粉与水混合得到第一混合物，并用保鲜膜密封，使得枳实粗粉能够吸水膨胀，继而有利于多糖、蛋白质等溶解在后续的提纯溶液中，而进行保鲜密封能够提升第一混合物的温度，加速枳实粗粉的膨胀。其中，枳实粗粉和水的质量比为1:1-1.2，浸泡时间为8-10小时。

进一步地，将第一混合物利用碱性物质将所述枳实粗粉的pH调至8-9，具体地，碱性物质为氢氧化钠或者氢氧化钾，且碱性物质的浓度为0.08-0.12mol/L，添加的碱性物质的量为枳实初级提取物和水的混合物的8-9倍。

通过调节将pH调至上述范围枳实粗粉内大部分的多糖和蛋白质等杂质能够溶解在上述溶液中，而橙皮苷则溶解较少，使得后续提取得到橙皮苷中基本不含有杂质。

进一步地，调节pH后浸泡1-1.2小时，使得碱液能够充分与枳实粗粉中的杂质反应。浸泡完成后进行过滤，得到的母液中含有大量的多糖和蛋白质，因此，将母液直接倾倒掉，滤渣内含有大量的橙皮苷，下一步对滤渣进行提取。

S2、初次提取；

对过滤得到的滤渣进行提取得到橙皮苷，具体地，对所述滤渣进行提取是将利用碱提酸沉法提取所述滤渣。碱提酸沉法是将所述滤渣与所述碱液混合使得所述滤渣与所述碱液的混合物的pH为11.5-12.5，使得橙皮苷能够形成钠盐，继而溶解在溶液中，继而实现橙皮苷的初步提取。

进一步地，使用的碱液为强碱溶液，优选为氢氧化钠或者氢氧化钾溶液，进一步强碱溶液的浓度为0.8-1.2。

进一步地，滤渣与强碱溶液混合浸泡提取的时间为2.5-3.5小时，且每隔1小时便测一次第一混合物与强碱溶液的混合物的pH值，保证pH值的稳定，若pH发生变化，及时调整混合物的pH值，继而保证橙皮苷的提取。

进一步地，提取完成后进行固液分离，固液分离后得到的第一提取滤液进行后续的沉降处理，继而得到橙皮苷，而第一提取滤渣则可以重新进行提取，提升提取效率。

具体地，固液分离是先进行粗分离，再对粗分离得到的滤液进行离心分离。粗分离是将滤渣与第一提取液进行初步分离，而离心分离能够保证第一提取液中尽可能的不含有固体杂质，继而提升橙皮苷的纯度。

而后对第一提取滤液进行沉降得到橙皮苷，具体地，是酸液进行沉降，利用酸液将第一提取滤液的pH值由原来的11.5-12.5调至3-4，此时，溶于第一提取滤液中的橙皮苷盐与酸液提供的氢发生质子交换，继而得到橙皮苷，而后从第一提取滤液中析出。

进一步地，酸液为强酸溶液，所述强酸为浓盐酸，且调节第一提取滤液的pH值后，将第一提取滤液静置8-12小时，便于第一提取滤液中的所有物质均能发生反应，继而能够保证橙皮苷的提取效率。

进一步地，沉降完成后进行离心，离心的转速为3500-4500r/min，离心时间为10-15分钟，保证离心效果。

进一步地，离心完成后对沉降得到的固体物质即初级枳实提取物进行洗涤，使得其为中性，洗涤是为了去除固体物质表面可能残留的酸、碱或者其他物质，继而减少橙皮苷的杂质。

S3、重复提取；

第一提取滤渣内仍含有大量的橙皮苷，需要对第一提取滤渣进行重复提取得到其内部含有的橙皮苷，继而保证橙皮苷的提取效率。

提取第一提取滤渣内的橙皮苷的方式与初次提取的方式基本一致。

每次提取得到的橙皮苷的纯度均通过高效液相分析进行检测，其中，色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱，流动相为甲醇：水(50:50)，且用1％磷酸溶液调节pH值至3，检测波长为284nm，柱温为50℃，流速为1.00mL/min。

本发明实施例还提供一种橙皮苷，其通过上述提升提取橙皮苷纯度的方法制备得到。

以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。

实施例1

本实施例提供一种提升提取橙皮苷纯度的方法，包括以下步骤：

S1、除杂；

称取100g枳实，将枳实进行粉碎，枳实粉碎后通过100目筛得到枳实粗粉。将枳实粗粉与100g水混合得到第一混合物，并用保鲜膜密封浸泡10小时。

将第一混合物与氢氧化钠溶液混合，使得第一混合物与氢氧化钠溶液的混合物的pH为8，氢氧化钠溶液的浓度为0.12mol/L。

浸泡时间为1小时，浸泡完成后进行过滤，去除过滤得到的母液，收集过滤得到的滤渣。

S2、初次提取；

将所述滤渣与所述碱液混合使得所述滤渣与所述碱液的混合物的pH为11.5，氢氧化钠溶液的浓度为0.8mol/L。

浸泡时间为3小时，且每隔1小时便测一次pH值。

提取完成后进行固液分离，得到第一提取滤液和第一提取滤渣。固液分离是先进行初步分离，而后再对滤液进行离心分离。

利用盐酸溶液将第一提取滤液的pH值由原来的11.5调至3，并静置10小时，沉降完成后进行离心，离心的转速为4000r/min，离心时间为15分钟，而后对沉降得到的固体物质即初级枳实提取物进行洗涤，使得其为中性。

S3、重复提取；

对第一提取滤渣进行第二次提取，其提取步骤与初次提取的步骤基本一致。此次，提取物的纯度符合要求。

本实施例还提供一种橙皮苷，其通过上述提升提取橙皮苷纯度的方法制备得到。

实施例2-3

实施例2-3提供一种提升提取橙皮苷纯度的方法，实施例2-4与实施例1的基本操作一致，区别在于操作条件发生变化。

实施例2

S1、除杂；

枳实粉碎后通过80目筛，与水混合，水为120g，浸泡时间为8小时。使用的碱性物质为氢氧化钾，浓度为0.12mol/L，pH值为8.5，调节pH值后浸泡1.2小时。

S2、初次提取；

使用的碱液为氢氧化钾，浓度为1mol/L，pH值为12，浸泡时间为2.5小时，浓盐酸调节pH值为3.5，第一提取滤液静置时间为12小时。离心的转速为4000r/min，离心时间为10分钟。

实施例3

S1、除杂；

枳实粉碎后通过120目筛，与水混合，水为80g，浸泡时间为9小时。使用的碱液为氢氧化钾，浓度为0.08mol/L，pH值为8，浸泡时间为1.5小时。

S2、初步提取；

使用的碱液为氢氧化钾，浓度为1.2mol/L，pH值为12，浸泡时间为3.5小时，浓盐酸调节pH值为4，第一滤液静置时间为11小时。离心的转速为4500r/min，离心时间为13分钟。

S3、重复提取；

对第一滤渣再进行二次提取，两次重复提取得到的提取物的纯度符合要求。

对比例1；市购橙皮苷的标准品

对比例2：按照实施例1提供的方法提取枳实，区别在于未进行除杂。

实验例

对对比例1、实施例1中初次提取得到的初级枳实提取物、以及对比例2中初次提取得到的枳实提取物分别进行高效液相分析，具体检测结果参见图1-3。

其中，图1为橙皮苷标准品的高效液相分析图谱，图2为实施例1中初次提取得到初级枳实提取物的高效液相分析图谱，图3为对比例2中初次提取得到的橙皮苷的高效液相分析图谱。根据图1-图3的结果可知，经过提纯后的橙皮苷杂质含量大幅度降低，且含量基本与标准品一致。

实验例2

分别测定660nm处的吸光度处对比例1、实施例1中初次提取得到的初级枳实提取物、对比例2初次提取得到的提取得到的枳实提取物的吸光度值，结果参见表1。

表1吸光度值

	对比例1	对比例2	实施例1
				吸光度	0.179	0.620	0.064

通过表1可知，通过本发明实施例提供的方法能够大幅降低枳实提取物中的杂质，且该操作简单。

实验例3

检测实施例1-3以及对比例2提取得到的提取物的量，结果参见表2。

表2提取率

	对比例2	实施例1	实施例2	实施例3
					提取物(g)	19.83	19.67	19.35	20.07

根据表2可知，采用本发明实施例提供的提纯方法对于橙皮苷的提取率影响不大，说明该提纯过程中基本未造成橙皮苷的损失。

综上所述，本发明的通过对枳实粗粉内添加碱性物质后能够大量去除初级枳实提取物内的杂质，提升橙皮苷的纯度，但是不会影响提取橙皮苷的提取效率。该方法可以大规模应用于工业生产。

以上所述仅为本发明的优选实施方式而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种提升提取橙皮苷纯度的方法，其特征在于，包括以下步骤：

将枳实粗粉利用碱性物质将所述枳实粗粉的pH调至8-9后浸泡1-1.2小时后，过滤去除母液，对过滤得到的滤渣进行提取得到橙皮苷。

2.根据权利要求1所述的提升提取橙皮苷纯度的方法，其特征在于，对所述滤渣进行提取是将利用碱提酸沉法提取所述滤渣。

3.根据权利要求2所述的提升提取橙皮苷纯度的方法，其特征在于，碱提酸沉法是将所述滤渣与碱液混合使得所述滤渣与所述碱液的混合物的pH为11.5-12.5而后利用酸液进行沉降后得到的提取物。

4.根据权利要求3所述的提升提取橙皮苷纯度的方法，其特征在于，利用所述酸液进行沉降前进行固液分离，而后将固液分离得到的滤渣再与所述碱液混合进行二次提取。

5.根据权利要求4所述的提升提取橙皮苷纯度的方法，其特征在于，固液分离是先进行粗分离，再对粗分离得到的滤液进行离心分离。

6.根据权利要求3所述的提升提取橙皮苷纯度的方法，其特征在于，利用酸液进行沉降是利用酸液将所述混合物的pH调至3-4。

7.根据权利要求3所述的提升提取橙皮苷纯度的方法，其特征在于，所述枳实粗粉是将枳实粉碎后过80-120目筛得到的粉末。

8.根据权利要求6所述的提升提取橙皮苷纯度的方法，其特征在于，所述酸液为强酸溶液，所述强酸为浓盐酸。

9.根据权利要求8所述的提升提取橙皮苷纯度的方法，其特征在于，利用酸液沉降后对沉降得到的固体物质进行洗涤。

10.一种橙皮苷，其特征在于，其通过权利要求1-9任意一项所述的提升提取橙皮苷纯度的方法制备得到。