CN108208370A - 一种利用紫苏提高产奶期奶牛免疫力的饲料添加剂及其制备方法 - Google Patents

一种利用紫苏提高产奶期奶牛免疫力的饲料添加剂及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明属于饲料添加剂技术领域，尤其涉及一种利用紫苏提高产奶期奶牛免疫力的饲料添加剂及其制备方法。本发明所述饲料添加剂包括紫苏抗菌肽、发酵苜蓿粉、中药提取物制剂和复合酶制剂，其中紫苏抗菌肽由紫苏籽榨油后剩余的紫苏籽粕制备而来，紫苏抗菌肽与饲料添加剂中具有抗菌消炎功效的紫苏叶、蒲公英、金银花、双黄连、连翘和板蓝根提取物共同作用能够有效治疗和预防奶牛乳腺炎，提高产奶期奶牛的免疫力。本发明饲料添加剂中发酵苜蓿粉、中药提取物添加剂和复合酶制剂为奶牛提供了更丰富均衡的营养基础，能够有效促进乳汁分泌、提高牛奶产量和品质，得到无激素、无抗生素、无化学残留的绿色牛奶。

Description

一种利用紫苏提高产奶期奶牛免疫力的饲料添加剂及其制备 方法
技术领域
本发明属于饲料添加剂技术领域，尤其涉及一种利用紫苏提高产奶期奶牛免疫力的饲料添加剂及其制备方法。
背景技术
近年来奶牛养殖业发展迅速，养殖规模不断扩大，规模增大带来的直接影响是养殖密度过高，奶牛生长环境差，特别容易患病，而且疾病的传染率很高，动物的自身免疫水平越来越低。规模化工厂式饲养，养殖密度过大，高生产性能等应激使奶牛处于低免疫水平和亚健康转台，导致动物高发病率和高死亡率，给养殖户带来了大量的经济损失，严重影响了养殖效益。
奶牛乳腺炎，尤其是隐性乳腺炎是奶牛养殖业中一种常见的疾病，患有隐性乳腺炎的奶牛在牛奶或乳房的外观上没有肉眼可见的变化，但会出现牛奶产量下降，乳成分被改变等情况。这种疾病不仅影响奶牛的使用年限、产奶数量和乳品品质，而且有碍于食品卫生和人类健康。历年来由于抗生素在治疗奶牛乳腺炎的过程中造成药物残留致使病原菌产生抗药性而使治疗效果下降，另外，由于长期使用，奶源中的抗生素水平超标，影响人体健康。为了使奶牛生产绿色牛奶，研究人员将研究重点放到了提高奶牛乳腺自身免疫力上，而中药制剂的研究就是其中一个领域。
中药具有配方灵活，功能复合、副作用少、来源容易、经济方便、无残留等优点，用作奶牛饲料添加剂，不但能提高奶牛自身免疫力，防止产奶期奶牛乳腺炎的发生，还能刺激奶牛泌乳，而且不会产生药物有害残留，更不会产生耐药性的问题。
目前养殖业通常使用的中药制剂饲料添加剂是由中药全药制备而成的，中药全药需要通过奶牛消化才能吸收其中的有效药物成分，药物利用率低，见效慢；为了实现其提高奶牛免疫力的药效，往往需要增加中药制剂饲料添加剂的用量，这不仅增加了成本，还产生了人畜争药的危机。
发明内容
为解决上述现有技术的不足，本发明提供了一种利用紫苏提高产奶期奶牛免疫力的饲料添加剂及其制备方法。
本发明的技术方案：
一种利用紫苏提高产奶期奶牛免疫力的饲料添加剂，包括紫苏抗菌肽、发酵苜蓿粉、中药提取物制剂和复合酶制剂，所述紫苏抗菌肽由如下步骤制得：
步骤一、紫苏籽粕清洗除杂：
将榨取紫苏籽油后剩余的紫苏籽粕晾干后粉碎至50目，以固液比为1g：5mL向紫苏籽粕粉中加入乙酸乙酯，在温度为30～40℃条件下搅拌30min后过滤并收集滤渣，以固液比1g：3mL向滤渣中加入质量浓度为95％乙醇，在温度为30～40℃条件下搅拌30min后过滤，滤渣即为洗掉残余脂肪的紫苏籽粕，将清洗后的紫苏籽粕晾干备用；
步骤二、提取紫苏籽粕粗蛋白：
以固液比1g：5mL向步骤一得到的清洗后的紫苏籽粕中加入10-5mol/L氢氧化钠溶液，在温度为30～40℃条件下搅拌60min以提取紫苏籽粕中的粗蛋白，4000r/min离心10min收集上清液，将离心沉淀重复上述步骤再进行提取两次，将三次离心上清液合并得到粗蛋白提取液；用质量浓度为0.01％的盐酸将粗蛋白提取液的pH值调至4.5后静置12h使提取液中的粗蛋白充分沉淀，4000r/min离心10min收集离心沉淀，得到紫苏籽粕粗蛋白；
步骤三、酶解紫苏籽粕粗蛋白：
将步骤二得到的紫苏籽粕粗蛋白配成质量浓度为10％的粗蛋白溶液，将粗蛋白溶液pH值调至中性后加入蛋白酶，所述蛋白酶的添加量为紫苏籽粕粗蛋白质量的5～10％；在温度为40～60℃条件下酶解6～8h后将溶液温度升至85～95℃使蛋白酶失活，得到紫苏籽粕粗蛋白酶解液；
步骤四、分离纯化紫苏抗菌肽：
将步骤三得到的紫苏籽粕粗蛋白酶解液采用截留相对分子量1000Da的超滤膜进行膜过滤，收集截留液；将所述截留液采用截留相对分子量为2000Da的超滤膜进行膜过滤，收集透过液；将所述透过液进行真空干燥，即得到分子量为1000～2000的紫苏抗菌肽。
进一步的，所述饲料添加剂中各组分重量份如下：紫苏抗菌肽10～20份、发酵苜蓿粉30～50份、中药提取物制剂10～20份、复合酶制剂10～15份。
进一步的，所述发酵苜蓿粉由如下方法制得：将新鲜苜蓿草晾干后粉碎至50目，按重量份称取100份苜蓿粉、5份糖蜜、3份酵母膏和200份水，混合后进行121℃高压灭菌20分钟得到无菌的苜蓿粉物料；将活菌数为1×109CFU的酿酒酵母种子液和活菌数为1×1010CFU的乳酸菌种子液分别以5％的体积百分数接入所述苜蓿粉物料，37℃下发酵36～48h，将发酵产物过滤除去水分，得到发酵苜蓿粉。
进一步的，所述中药提取物制剂由紫苏叶、蒲公英、金银花、双黄连、连翘、板蓝根、通草、王不留行、川芎、益母草、枸杞、大枣提取制备而成。
进一步的，所述中药提取物制剂由如下步骤制得：
步骤一、按重量份称取紫苏叶10～20份、蒲公英10～20份、金银花10～20份、双黄连10～15份、连翘10～15份、板蓝根10～15份、王不留行5～10份、通草5～10份、川芎5～10份、益母草5～10份、枸杞5～10份和大枣5～10份；
步骤二、将步骤一称取的中草药分别粉碎至50目并混合均匀，按质量体积比1g：10mL向中草药混合粉末中加入质量浓度为60％的乙醇溶液，在80～90℃下提取60～90min，过滤后收集滤液；按质量体积比1g：10mL向滤渣中加入质量浓度为60％的乙醇溶液，在80～90℃下提取60～90min，过滤后收集滤液；
步骤三、将步骤二收集的滤液合并，40～50℃条件下真空浓缩至溶液无酒精味，将所得溶液喷雾干燥制得粉状中药提取物制剂。
进一步的，所述复合酶制剂中包括：木聚糖酶、纤维素酶、半纤维素酶、淀粉酶、酸性蛋白酶和果胶酶，其中木聚糖酶含量为3000U/g，纤维素酶含量为6000U/g，半纤维素酶含量为3000U/g，淀粉酶含量为1000U/g，酸性蛋白酶含量为5000U/g，果胶酶含量为2000U/g；复合酶制剂还含有载体，所述载体为紫苏茎粉，含量为200mg/g。
进一步的，所述饲料添加剂中还包括重量份为5～10份的微量元素与维生素复合制剂，所述微量元素与维生素复合制剂由微量元素制剂和维生素制剂按重量比1:1混合制成，所述微量元素制剂由如下重量份原料混合制成：硫酸铜1份、硫酸锌2份、硫酸亚铁8份、硫酸锰1份、硫酸镁1份、脱脂骨粉15份、亚硒酸钙0.05份；所述维生素制剂含有以下成分：维生素A 5000IU/kg，维生素E 100IU/kg，维生素D3 1000IU/kg，维生素K3 5mg/kg，维生素B15mg/kg，维生素B6 3mg/kg。
本发明利用紫苏提高产奶期奶牛免疫力的饲料添加剂的制备方法为将各原料按重量份配比进行混合，向混合原料中加水至浸没混合原料，搅拌均匀后依次进行造粒和风干，得到颗粒状饲料添加剂。
本发明的有益效果：
一、本发明产奶期奶牛饲料添加剂中添加了具有抑菌活性的小分子紫苏抗菌肽，产奶期奶牛通过食用紫苏抗菌肽可获得其对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌生长的抑制作用，紫苏抗菌肽与饲料添加剂中具有抗菌消炎功效的紫苏叶、蒲公英、金银花、双黄连、连翘和板蓝根提取物的共同作用能够有效治疗和预防奶牛乳腺炎。
本发明起主要抑菌作用的紫苏抗菌肽由紫苏籽榨油后剩余的紫苏籽粕进行深加工制得，提高了紫苏籽粕的经济价值和药用价值，避免了人畜争药的危机。本发明制备的紫苏抗菌肽使产奶期奶牛在不服用抗生素的情况下即可治疗和预防奶牛乳腺炎，获得无药物残留的绿色牛奶。
二、本发明产奶期奶牛饲料添加剂中添加的发酵苜蓿粉营养丰富，易于消化、适口性好。与新鲜苜蓿草饲料相比，本发明通过酿酒酵母和乳酸菌的发酵将苜蓿草所含的丰富蛋白质分解为氨基酸，使产奶期奶牛饲料添加剂中总氨基酸以及必需氨基酸含量均有所提高，更利于产奶期奶牛消化吸收，提高了饲料转化率和牛奶品质。
三、本发明产奶期奶牛饲料添加剂中添加的中药提取物制剂中紫苏叶、蒲公英、金银花、双黄连、连翘和板蓝根具有抗菌消炎、清热解毒的效用，王不留行、通草、益母草具有活血通乳、增加乳汁分泌的效用，川芎、枸杞和大枣具有行气开郁、补血养血、增强免疫力的效用。本发明选用的中药材较为常见，价格低廉，为提高中药有效成分的利用率，本发明利用简单易行、成本低的提取方法将中药进行提取浓缩，不仅利于奶牛吸收利用中药有效成分、快速实现药效，同时还避免了因对中药全药消化吸收不彻底造成的浪费和大量添加中药全药造成的高成本。
四、本发明产奶期奶牛饲料添加剂中添加的复合酶制剂能有效水解饲料中的非淀粉多糖，促进奶牛对营养物质的吸收，使饲料代谢能和饲料转化率提高，降低饲料成本，具有显著的经济效益；微量元素和维生素复合制剂为奶牛补充了必须微量元素和维生素，使其可以提供营养更丰富的牛奶。
五、本发明产奶期奶牛饲料添加剂在为奶牛提供均衡营养的同时，能够治疗和预防奶牛产奶期常见的乳腺炎，增强奶牛肌体免疫力，促进乳汁分泌，提高牛奶产量和品质，得到无激素、无抗生素、无化学残留的绿色牛奶。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明的技术方案做进一步的说明，但并不局限于此，凡是对本发明技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的精神和范围，均应涵盖在本发明的保护范围中。
实施例1
一种利用紫苏提高产奶期奶牛免疫力的饲料添加剂，包括紫苏抗菌肽、发酵苜蓿粉、中药提取物制剂和复合酶制剂。所述饲料添加剂的制备方法为将各原料按重量份配比进行混合，向混合原料中加水至浸没混合原料，搅拌均匀后依次进行造粒和风干，得到颗粒状饲料添加剂。
饲料添加剂中紫苏抗菌肽由如下步骤制得：
步骤一、紫苏籽粕清洗除杂：
将榨取紫苏籽油后剩余的紫苏籽粕晾干后粉碎至50目，以固液比为1g：5mL向紫苏籽粕粉中加入乙酸乙酯，在温度为30～40℃条件下搅拌30min后过滤并收集滤渣，以固液比1g：3mL向滤渣中加入质量浓度为95％乙醇，在温度为30～40℃条件下搅拌30min后过滤，滤渣即为洗掉残余脂肪的紫苏籽粕，将清洗后的紫苏籽粕晾干备用；
步骤二、提取紫苏籽粕粗蛋白：
以固液比1g：5mL向步骤一得到的清洗后的紫苏籽粕中加入10-5mol/L氢氧化钠溶液，在温度为30～40℃条件下搅拌60min以提取紫苏籽粕中的粗蛋白，4000r/min离心10min收集上清液，将离心沉淀重复上述步骤再进行提取两次，将三次离心上清液合并得到粗蛋白提取液；用质量浓度为0.01％的盐酸将粗蛋白提取液的pH值调至4.5后静置12h使提取液中的粗蛋白充分沉淀，4000r/min离心10min收集离心沉淀，得到紫苏籽粕粗蛋白；
步骤三、酶解紫苏籽粕粗蛋白：
将步骤二得到的紫苏籽粕粗蛋白配成质量浓度为10％的粗蛋白溶液，将粗蛋白溶液pH值调至中性后加入蛋白酶，所述蛋白酶的添加量为紫苏籽粕粗蛋白质量的5～10％；在温度为40～60℃条件下酶解6～8h后将溶液温度升至85～95℃使蛋白酶失活，得到紫苏籽粕粗蛋白酶解液；
步骤四、分离纯化紫苏抗菌肽：
将步骤三得到的紫苏籽粕粗蛋白酶解液采用截留相对分子量1000Da的超滤膜进行膜过滤，收集截留液；将所述截留液采用截留相对分子量为2000Da的超滤膜进行膜过滤，收集透过液；将所述透过液进行真空干燥，即得到分子量为1000～2000的紫苏抗菌肽。
实施例2
本实施例与实施例1的区别在于，本实施例饲料添加剂中各组分重量份如下：紫苏抗菌肽10～20份、发酵苜蓿粉30～50份、中药提取物制剂10～20份、复合酶制剂10～15份。
实施例3
本实施例与实施例1和实施例2的区别在于，本实施例饲料添加剂中发酵苜蓿粉由如下方法制得：将新鲜苜蓿草晾干后粉碎至50目，按重量份称取100份苜蓿粉、5份糖蜜、3份酵母膏和200份水，混合后进行121℃高压灭菌20分钟得到无菌的苜蓿粉物料；将活菌数为1×109CFU的酿酒酵母种子液和活菌数为1×1010CFU的乳酸菌种子液分别以5％的体积百分数接入所述苜蓿粉物料，37℃下发酵36～48h，将发酵产物过滤除去水分，得到发酵苜蓿粉。
实施例4
本实施例与实施例1-3的区别在于，本实施例饲料添加剂中中药提取物制剂由如下步骤制得：
步骤一、按重量份称取紫苏叶10～20份、蒲公英10～20份、金银花10～20份、双黄连10～15份、连翘10～15份、板蓝根10～15份、王不留行5～10份、通草5～10份、川芎5～10份、益母草5～10份、枸杞5～10份和大枣5～10份；
步骤二、将步骤一称取的中草药分别粉碎至50目并混合均匀，按质量体积比1g：10mL向中草药混合粉末中加入质量浓度为60％的乙醇溶液，在80～90℃下提取60～90min，过滤后收集滤液；按质量体积比1g：10mL向滤渣中加入质量浓度为60％的乙醇溶液，在80～90℃下提取60～90min，过滤后收集滤液；
步骤三、将步骤二收集的滤液合并，40～50℃条件下真空浓缩至溶液无酒精味，将所得溶液喷雾干燥制得粉状中药提取物制剂。
实施例5
本实施例与实施例1-4的区别在于，本实施例饲料添加剂中所述复合酶制剂中包括：木聚糖酶、纤维素酶、半纤维素酶、淀粉酶、酸性蛋白酶和果胶酶，其中木聚糖酶含量为3000U/g，纤维素酶含量为6000U/g，半纤维素酶含量为3000U/g，淀粉酶含量为1000U/g，酸性蛋白酶含量为5000U/g，果胶酶含量为2000U/g；复合酶制剂还含有载体，所述载体为紫苏茎粉，含量为200mg/g。
实施例6
本实施例与实施例1-5的区别在于，本实施例饲料添加剂中还包括重量份为5～10份的微量元素与维生素复合制剂，所述微量元素与维生素复合制剂由微量元素制剂和维生素制剂按重量比1:1混合制成，所述微量元素制剂由如下重量份原料混合制成：硫酸铜1份、硫酸锌2份、硫酸亚铁8份、硫酸锰1份、硫酸镁1份、脱脂骨粉15份、亚硒酸钙0.05份；所述维生素制剂含有以下成分：维生素A 5000IU/kg，维生素E 100IU/kg，维生素D3 1000IU/kg，维生素K3 5mg/kg，维生素B1 5mg/kg，维生素B6 3mg/kg。
实施例7
一种利用紫苏提高产奶期奶牛免疫力的饲料添加剂，包括15份紫苏抗菌肽、40份发酵苜蓿粉、15份中药提取物制剂和12份复合酶制剂。所述饲料添加剂的制备方法为将各原料按重量份配比进行混合，向混合原料中加水至浸没混合原料，搅拌均匀后依次进行造粒和风干，得到颗粒状饲料添加剂。
本实施例饲料添加剂中紫苏抗菌肽制备方法与实施例1相同；发酵苜蓿粉制备方法与实施例3相同；中药提取物制剂中各中药组分的重量份如下：紫苏叶15份、蒲公英15份、金银花15份、双黄连12份、连翘12份、板蓝根12份、王不留行8份、通草8份、川芎8份、益母草8份、枸杞8份和大枣8份；中药提取物制剂的制备方法与实施例4相同；复合酶制剂所含成分与实施例5相同。
实施例8
一种利用紫苏提高产奶期奶牛免疫力的饲料添加剂，包括20份紫苏抗菌肽、50份发酵苜蓿粉、20份中药提取物制剂、15份复合酶制剂和10份微量元素与维生素复合制剂，所述饲料添加剂的制备方法为将各原料按重量份配比进行混合，向混合原料中加水至浸没混合原料，搅拌均匀后依次进行造粒和风干，得到颗粒状饲料添加剂。
本实施例饲料添加剂中紫苏抗菌肽制备方法与实施例1相同；发酵苜蓿粉制备方法与实施例3相同；中药提取物制剂中各中药组分的重量份如下：紫苏叶20份、蒲公英20份、金银花20份、双黄连15份、连翘15份、板蓝根15份、王不留行10份、通草10份、川芎10份、益母草10份、枸杞10份和大枣10份；中药提取物制剂的制备方法与实施例4相同；复合酶制剂所含成分与实施例5相同；微量元素与维生素复合制剂所含成分与实施例6相同。
对比例1
对比例1与实施例8的区别仅在于，对比例1饲料添加剂中包括20份紫苏抗菌肽、50份发酵苜蓿粉、15份复合酶制剂和10份微量元素与维生素复合制剂。
对比例2
对比例2与实施例8的区别仅在于，对比例2饲料添加剂中包括50份发酵苜蓿粉、20份中药提取物制剂、15份复合酶制剂和10份微量元素与维生素复合制剂。
对比例3
对比例3与实施例8的区别仅在于，对比例3饲料添加剂中包括20份紫苏抗菌肽、50份发酵苜蓿粉和10份微量元素与维生素复合制剂。
对比例4
对比例4与实施例8的区别仅在于，对比例4饲料添加剂中包括20份紫苏抗菌肽、20份中药提取物制剂和10份微量元素与维生素复合制剂。
对比例5
对比例5与实施例8的区别仅在于，对比例5饲料添加剂中包括20份紫苏抗菌肽、15份复合酶制剂和10份微量元素与维生素复合制剂。
对比例6
对比例6与实施例8的区别仅在于，对比例6饲料添加剂中包括20份紫苏抗菌肽、50份发酵苜蓿粉和20份中药提取物制剂。
对比例7
对比例7与实施例8的区别仅在于，对比例7饲料添加剂中包括20份紫苏抗菌肽、20份中药提取物制剂和15份复合酶制剂。
对比例8
对比例8与实施例8的区别仅在于，对比例8饲料添加剂中包括20份紫苏抗菌肽、20份中药提取物制剂和10份微量元素与维生素复合制剂。
验证试验一：紫苏抗菌肽抗菌性能。
试验方法：将经黄色葡萄球菌和大肠杆菌作为受试菌，分别接种于LB液体培养基中，37℃恒温培养24h，将实施例1制备的紫苏抗菌肽样品1.7g、实施例8制备的饲料添加剂10g用10mL蒸馏水溶解，取100μL，加LB培养基30μL和受试菌菌液70μL(菌液浓度为5×103CFU/mL)并混匀，37℃，150r/min摇床培养1h，取100μL涂布于LB平板，37℃培养12小时，计算菌落数。以蒸馏水为对照组，计算抑菌率。实验重复3次，计算平均值。抑菌率％＝(对照组菌落数-实验组菌落数)/对照组菌落数×100。本发明实施例1制备的紫苏抗菌肽和实施例8制备的饲料添加剂的抑菌率见表1，
表1
由表1数据可知，本发明制备的紫苏抗菌肽对引起产奶期奶牛乳腺炎的常见菌革兰氏阳性金黄色葡萄球菌和革兰氏阴性菌大肠杆菌的生长具有较强的抑菌作用。添加有紫苏抗菌肽的饲料添加剂对于金黄色葡萄球菌和大肠杆菌也具有较强的抑菌作用。
验证试验二：本发明饲料添加剂治疗奶牛乳腺炎的效果。
试验方法：选用160头4岁、体重和产犊日期相近、产奶量为26±1.50Kg的奶牛随机分成4组，每组40头，分别为对照组-饲料中不加添加剂、添加剂组-按5‰向饲料中添加实施例8制得的饲料添加剂、对比组1-按5‰向饲料中添加对比例1制得的饲料添加剂和对比组2-按5‰向饲料中添加对比例2制得的饲料添加剂，试验期为90天，于试验第0、30、60和90天取每头奶牛的牛奶检测其体细胞数，结果如表2所示：
表2：
牛奶中的体细胞数是衡量奶牛乳房健康状况和牛奶质量的一项指标，正常情况下，牛奶中的体细胞数一般在2～3×105/mL，如果牛奶中体细胞超过正常值，则表示产奶奶牛的乳房患有乳腺炎。由表2中数据对比可知，添加剂组奶牛所产牛奶中体细胞数在90天内由75.98×104/mL降至20.63×104/mL，添加有紫苏抗菌肽而没加中药提取物制剂的对比组1和没加紫苏抗菌肽而添加了中药提取物制剂的对比组2也有效降低了牛奶中的体细胞数，但效果没有添加剂组显著，这说明本发明饲料添加剂通过紫苏抗菌肽和中药提取物制剂中具有抗菌消炎功效的紫苏叶、蒲公英、金银花、双黄连、连翘和板蓝根提取物协同作用能够更有效的治疗奶牛乳腺炎。
验证试验三：本发明饲料添加剂预防奶牛乳腺炎的效果。
试验方法：选用160头4岁、体重和产犊日期相近、产奶量为26±1.50Kg的健康无乳腺炎的奶牛随机分成4组，每组40头，分别为对照组-饲料中不加添加剂、添加剂组-按5‰向饲料中添加实施例8制得的饲料添加剂、对比组1-按5‰向饲料中添加对比例1制得的饲料添加剂和对比组2-按5‰向饲料中添加对比例2制得的饲料添加剂，试验期为90天，于试验第0、30、60和90天检查奶牛是否患有乳腺炎，结果如表3所示：
表3
由表3数据可知，这说明本发明饲料添加剂通过紫苏抗菌肽和中药提取物制剂中具有抗菌消炎功效的紫苏叶、蒲公英、金银花、双黄连、连翘和板蓝根提取物协同作用能够更有效的预防奶牛乳腺炎。
验证试验四：本发明添加剂提高奶牛产奶量的效果。
试验方法：选用200头4岁、体重、产犊日期和产奶量相近的健康无乳腺炎的奶牛随机分成5组，每组40头，分别为对照组-饲料中不加添加剂、添加剂组-按5‰向饲料中添加实施例8制得的饲料添加剂、对比组3-按5‰向饲料中添加对比例3制得的饲料添加剂、对比组4-按5‰向饲料中添加对比例4制得的饲料添加剂和对比组5-按5‰向饲料中添加对比例5制得的饲料添加剂，分三个时期取乳：在第二胎次产犊结束20天的泌乳盛期、第二胎次泌乳160天泌乳中期和第二胎次泌乳230天的泌乳后期，预饲期10天，每个取乳期为30天，挤奶时间为早上6点和下午6点，统计各取乳期内每头每日产奶量，计算日平均产奶量(kg/天·头)结果如表4所示：
表4
由表4数据可以看出，添加剂组对奶牛产奶量提高最多，在泌乳盛期比对照组提高了17.98％，泌乳中期比对照组提高了17.71％，泌乳后期比对照组提高了15.90％；对比组3、对比组4和对比组5也都提高了三个时期的产奶量，但效果没有添加剂组显著。这说明本发明添加剂中发酵苜蓿粉所含的丰富蛋白质以及复合酶制剂水解饲料中的非淀粉多糖所得产物为奶牛提供了丰富的更利于消化吸收的营养，奶牛在中药提取物制剂中王不留行、通草和益母草的活血通乳、增加乳汁分泌的作用下以上述丰富的营养物质为基础提高了产奶量，即本发明饲料添加剂中发酵苜蓿粉、中药提取物制剂和复合酶制剂通过相互协同作用可以更好的提高奶牛的产奶量。
验证试验五：本发明添加剂提高牛奶品质的效果。
试验方法：选用200头4岁、体重、产犊日期和产奶量相近的健康无乳腺炎的奶牛随机分成5组，每组40头，分别为对照组-饲料中不加添加剂、添加剂组-按5‰向饲料中添加实施例8制得的饲料添加剂、对比组6-按5‰向饲料中添加对比例6制得的饲料添加剂、对比组7-按5‰向饲料中添加对比例7制得的饲料添加剂和对比组8-按5‰向饲料中添加对比例8制得的饲料添加剂，在第二胎次泌乳160天泌乳中期取乳，预饲期10天，取乳期为30天，挤奶时间为早上6点和下午6点，以乳蛋白率和乳脂率作为牛奶的品质指标，测定方法采用GB/T5409和GB/T 5413.1执行，结果见表5；
表5
测试项 日均乳脂率(％) 日均乳蛋白率(％)
对照组 3.25±0.19 3.02±0.27
添加剂组 3.78±0.12 3.45±0.31
对比组6 3.53±0.29 3.31±0.21
对比组7 3.45±0.36 3.28±0.18
对比组8 3.31±0.11 3.10±0.23
通过表5的数据可以看出，本发明添加剂组对牛奶日均乳脂率和日均乳蛋白率提高最显著，这说明本发明添加剂中发酵苜蓿粉、复合酶制剂与微量元素和维生素复合制剂为奶牛提供了更均衡、全面的营养物质，从而全面提高了牛奶的品质。

Claims (8)

1.一种利用紫苏提高产奶期奶牛免疫力的饲料添加剂，其特征在于所述饲料添加剂包括紫苏抗菌肽、发酵苜蓿粉、中药提取物制剂和复合酶制剂，所述紫苏抗菌肽由如下步骤制得：
步骤一、紫苏籽粕清洗除杂：
将榨取紫苏籽油后剩余的紫苏籽粕晾干后粉碎至50目，以固液比为1g：5mL向紫苏籽粕粉中加入乙酸乙酯，在温度为30～40℃条件下搅拌30min后过滤并收集滤渣，以固液比1g：3mL向滤渣中加入质量浓度为95％乙醇，在温度为30～40℃条件下搅拌30min后过滤，滤渣即为洗掉残余脂肪的紫苏籽粕，将清洗后的紫苏籽粕晾干备用；
步骤二、提取紫苏籽粕粗蛋白：
以固液比1g：5mL向步骤一得到的清洗后的紫苏籽粕中加入10-5mol/L氢氧化钠溶液，在温度为30～40℃条件下搅拌60min以提取紫苏籽粕中的粗蛋白，4000r/min离心10min收集上清液，将离心沉淀重复上述步骤再进行提取两次，将三次离心上清液合并得到粗蛋白提取液；用质量浓度为0.01％的盐酸将粗蛋白提取液的pH值调至4.5后静置12h使提取液中的粗蛋白充分沉淀，4000r/min离心10min收集离心沉淀，得到紫苏籽粕粗蛋白；
步骤三、酶解紫苏籽粕粗蛋白：
将步骤二得到的紫苏籽粕粗蛋白配成质量浓度为10％的粗蛋白溶液，将粗蛋白溶液pH值调至中性后加入蛋白酶，所述蛋白酶的添加量为紫苏籽粕粗蛋白质量的5～10％；在温度为40～60℃条件下酶解6～8h后将溶液温度升至85～95℃使蛋白酶失活，得到紫苏籽粕粗蛋白酶解液；
步骤四、分离纯化紫苏抗菌肽：
将步骤三得到的紫苏籽粕粗蛋白酶解液采用截留相对分子量1000Da的超滤膜进行膜过滤，收集截留液；将所述截留液采用截留相对分子量为2000Da的超滤膜进行膜过滤，收集透过液；将所述透过液进行真空干燥，即得到分子量为1000～2000的紫苏抗菌肽。
2.根据权利要求1所述一种利用紫苏提高产奶期奶牛免疫力的饲料添加剂，其特征在于所述饲料添加剂中各组分重量份如下：紫苏抗菌肽10～20份、发酵苜蓿粉30～50份、中药提取物制剂10～20份、复合酶制剂10～15份。
3.根据权利要求1或2所述一种利用紫苏提高产奶期奶牛免疫力的饲料添加剂，其特征在于所述发酵苜蓿粉由如下方法制得：将新鲜苜蓿草晾干后粉碎至50目，按重量份称取100份苜蓿粉、5份糖蜜、3份酵母膏和200份水，混合后进行121℃高压灭菌20分钟得到无菌的苜蓿粉物料；将活菌数为1×109CFU的酿酒酵母种子液和活菌数为1×1010CFU的乳酸菌种子液分别以5％的体积百分数接入所述苜蓿粉物料，37℃下发酵36～48h，将发酵产物过滤除去水分，得到发酵苜蓿粉。
4.根据权利要求3所述一种利用紫苏提高产奶期奶牛免疫力的饲料添加剂，其特征在于所述中药提取物制剂由紫苏叶、蒲公英、金银花、双黄连、连翘、板蓝根、通草、王不留行、川芎、益母草、枸杞、大枣提取制备而成。
5.根据权利要求4所述一种利用紫苏提高产奶期奶牛免疫力的饲料添加剂，其特征在于所述中药提取物制剂由如下步骤制得：
步骤一、按重量份称取紫苏叶10～20份、蒲公英10～20份、金银花10～20份、双黄连10～15份、连翘10～15份、板蓝根10～15份、王不留行5～10份、通草5～10份、川芎5～10份、益母草5～10份、枸杞5～10份和大枣5～10份；
步骤二、将步骤一称取的中草药分别粉碎至50目并混合均匀，按质量体积比1g：10mL向中草药混合粉末中加入质量浓度为60％的乙醇溶液，在80～90℃下提取60～90min，过滤后收集滤液；按质量体积比1g：10mL向滤渣中加入质量浓度为60％的乙醇溶液，在80～90℃下提取60～90min，过滤后收集滤液；
步骤三、将步骤二收集的滤液合并，40～50℃条件下真空浓缩至溶液无酒精味，将所得溶液喷雾干燥制得粉状中药提取物制剂。
6.根据权利要求5所述一种利用紫苏提高产奶期奶牛免疫力的饲料添加剂，其特征在于所述复合酶制剂中包括：木聚糖酶、纤维素酶、半纤维素酶、淀粉酶、酸性蛋白酶和果胶酶，其中木聚糖酶含量为3000U/g，纤维素酶含量为6000U/g，半纤维素酶含量为3000U/g，淀粉酶含量为1000U/g，酸性蛋白酶含量为5000U/g，果胶酶含量为2000U/g；复合酶制剂还含有载体，所述载体为紫苏茎粉，含量为200mg/g。
7.根据权利要求6所述一种利用紫苏提高产奶期奶牛免疫力的饲料添加剂，其特征在于所述饲料添加剂中还包括重量份为5～10份的微量元素与维生素复合制剂，所述微量元素与维生素复合制剂由微量元素制剂和维生素制剂按重量比1:1混合制成，所述微量元素制剂由如下重量份原料混合制成：硫酸铜1份、硫酸锌2份、硫酸亚铁8份、硫酸锰1份、硫酸镁1份、脱脂骨粉15份、亚硒酸钙0.05份；所述维生素制剂含有以下成分：维生素A 5000IU/kg，维生素E 100IU/kg，维生素D3 1000IU/kg，维生素K3 5mg/kg，维生素B1 5mg/kg，维生素B63mg/kg。
8.一种如权利要求1-7任一所述利用紫苏提高产奶期奶牛免疫力的饲料添加剂的制备方法，其特征在于所述制备方法为将各原料按重量份配比进行混合，向混合原料中加水至浸没混合原料，搅拌均匀后依次进行造粒和风干，得到颗粒状饲料添加剂。
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