CN102367417B - 鱼饲料用中药益生菌液体培养基、培养方法及饲料添加剂 - Google Patents
鱼饲料用中药益生菌液体培养基、培养方法及饲料添加剂 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种鱼饲料用中药益生菌液体培养基、培养方法及饲料添加剂，其成分包括：红糖、中药组分、磷酸二氢钾、酵母膏和水；其各成分占总的质量比为：红糖，5％～8％；中药组分，2％～3％；磷酸二氢钾，0.2％～0.3％；酵母膏，0.3％～0.5％；余量为水。本发明实施例的实施能够大幅提高活性益生菌的菌株活性和在肠道中的定植性能，并且使由其制得的饲料添加剂富含中药成分，还能使中药成分中起到药理作用的活性成分充分发挥，从而提高鱼用微生态饲料添加剂的强体治病性能和促生长性能，有效治疗和预防“草鱼四病”，进而完全取代抗生素的使用。
Description
技术领域
本发明涉及水产养殖领域，尤其涉及一种鱼饲料用中药益生菌液体培养基、培养方法及饲料添加剂。
背景技术
草鱼是我国诸多淡水鱼中的一种，它以其肉质细嫩、个体大、肌间刺少等优点而备受消费者的喜爱。但是，草鱼抗病能力差，成活率低，在养殖过程中极易受到“草鱼四病（草鱼四病即赤皮病、烂鳃病、肠炎病和出血病）”的侵害，因此草鱼的规模化养殖受到了很大的制约。长期的生产实践证明，向草鱼注射抗生素能够预防“草鱼四病”；但是，这些抗生素会随着人们食用各种鱼肉制品进入人体，这就间接导致了抗生素的滥用，有可能引发多种药源性疾病，甚至会产生新的“超级耐药菌”，因而这种草鱼养殖方式严重威胁着人类的生命健康。
为了避免或减少在草鱼养殖过程中注射抗生素，鱼用微生态饲料添加剂应运而生。所谓鱼用微生态饲料添加剂是将对鱼有益无害的活性益生菌经过特殊工艺制成的活性益生菌制剂。鱼用微生态饲料添加剂作为一种功能性鱼饲料添加辅料，能够在无毒副作用、无耐药性、无病原性的前提下有效预防和治疗“草鱼四病”，不仅可以调节草鱼肠道微生态平衡、提高草鱼生长率、提高饲料利用率、而且可以抑制肠道有害微生物的繁殖、提高草鱼健康水平、增强草鱼免疫力。目前，在现有的草鱼养殖中，常见的鱼用微生态饲料添加剂的种类有乳酸菌制剂（包括嗜酸乳酸菌、双歧乳杆菌、粪链球菌等）、芽孢杆菌制剂（包括枯草杆菌、蜡样芽孢杆菌、地衣杆菌等）、真菌制剂（包括米曲霉菌等）、酵母菌制剂（包括啤酒酵母等）等近百种。在现有的鱼用微生态饲料添加剂生产过程中，大多仅使用蛋白质类物质和/或糖类物质作为活性益生菌的培养基，虽然菌株数量上可以满足需求，但大多数菌株的活性不高，在肠道中的定植性能较弱，因此活性益生菌作为畜禽饲料所应发挥的作用受到很大的限制；同时，活性益生仅能在一定程度上增强草鱼的体质，并不能有效治疗和预防“草鱼四病”，因此，现有的草鱼微生态饲料添加剂并不能完全取代抗生素的使用。
发明内容
本发明实施例提供了一种鱼饲料用中药益生菌液体培养基、培养方法及饲料添加剂，以便于大幅提高活性益生菌的菌株活性和在肠道中的定植性能，并且使由其制得的饲料添加剂富含中药成分，还能使中药成分中起到药理作用的活性成分充分发挥，从而提高鱼用微生态饲料添加剂的强体治病性能和促生长性能，有效治疗和预防“草鱼四病”，进而完全取代抗生素的使用。
本发明的目的是通过以下技术方案实现的：
一种鱼饲料用中药益生菌液体培养基，其成分包括：红糖、中药组分、磷酸二氢钾、酵母膏和水；其各成分占总的质量比为：
红糖，5％～8％；
中药组分，2％～3％；
磷酸二氢钾，0.2％～0.3％；
酵母膏，0.3％～0.5％；
余量为水；
其中，所述中药组分的成分包括：黄芩、黄柏、当归、大黄、大青叶、甘草、红景天和葛根；中药组分的各成分的重量份数为：
黄芩：60～80份，黄柏：60～80份，当归：40～60份，大黄：60～80份，
大青叶：60～80份，甘草：30～50份，红景天：80～100份，葛根：40～60份。
优选地，相应中药组分的各成分的重量份数为：
黄芩：80份，黄柏：80份，当归：50份，大黄：60份，
大青叶：60份，甘草：40份，红景天：100份，葛根：50份。
优选地，该鱼饲料用中药益生菌液体培养基的各成分占总的质量比为：
红糖，6％；
中药组分，3％；
磷酸二氢钾，0.2％；
酵母膏，0.5％；
余量为水。
一种鱼饲料用中药活性益生菌的培养方法，包括：
步骤A：按照上述技术方案中所述的鱼饲料用中药益生菌液体培养基的组成成分配制鱼饲料用中药益生菌液体培养基；
步骤B：在预定灭菌温度下对鱼饲料用中药益生菌液体培养基灭菌20分钟，再冷却至30℃；
步骤C：将活性益生菌浓度为每毫升15亿株的活性益生菌种子液，按预定接种比例接种到所述的鱼饲料用中药益生菌液体培养基中；
步骤D：对接种完活性益生菌的鱼饲料用中药益生菌液体培养基进行厌氧发酵，发酵装置的转速为180r/min，发酵温度为32℃，直至所述鱼饲料用中药益生菌液体培养基中的pH值达到5.0时发酵完成。
优选地，相应的预定接种比例为：活性益生菌种子液与鱼饲料用中药益生菌液体培养基的体积比在1∶20至1：10之间。
优选地，相应的预定接种比例为：活性益生菌种子液与鱼饲料用中药益生菌液体培养基的体积比为1∶20。
优选地，相应的预定灭菌温度在115℃～121℃。
优选地，相应的预定灭菌温度为121℃。
一种鱼饲料添加剂，包括：按照上述技术方案中所述的鱼饲料用中药活性益生菌的培养方法培育出的含中药活性益生菌。
由上述本发明提供的技术方案可以看出，本发明实施例提供的鱼饲料用中药益生菌液体培养基、培养方法及饲料添加剂采用十几味中药作为鱼饲料用中药益生菌液体培养基的重要组成部分，既提高中药中的活性成分药理作用的发挥，又使其所培养出的活性益生菌的活性高于其它培养基培养出的活性益生菌，并增强了有益菌在肠道中的定植能力。由于中药和活性益生菌对免疫系统的协同作用，因此以中药繁殖的活性益生菌作为鱼用饲料添加剂，其免疫能力远远超过其它类产品。我们通过将现代微生态学原理同中医相结合，用中药组分培养活性益生菌，从而生产出一种完全取代抗生素的无药残、防病促生长、成本低廉的鱼用中药微生态制剂。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域的普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其他附图。
图1为本发明实施例所提供的鱼饲料用中药活性益生菌的培养方法的流程示意图。
具体实施方式
下面面结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明的保护范围。
下面对本发明实施例所提供的鱼饲料用中药益生菌液体培养基、培养方法及饲料添加剂作一详细描述。
（一）鱼饲料用中药益生菌液体培养基
一种鱼饲料用中药益生菌液体培养基，其具体成分包括：红糖、中药组分、磷酸二氢钾、酵母膏和水；其各成分占总的质量比为：红糖，5%～8%；中药组分，2%～3%；磷酸二氢钾，0.2%～0.3%，酵母膏，0.3%～0.5%；余量为水。本发明中采用大量的水以及少量的红糖、中药组分、磷酸二氢钾和酵母膏作为活性益生菌的培养基，因此这是一种液体培养基，它的各组成成分来源丰富，成本低廉，非常适于大规模的工业化生产。
其中，相应的中药组分的成分包括：黄芩、黄柏、当归、大黄、大青叶、甘草、红景天和葛根；中药组分的各成分的重量份数为：
黄芩：60～80份，黄柏：60～80份，当归：40～60份，大黄：60～80份，
大青叶：60～80份，甘草：30～50份，红景天：80～100份，葛根：40～60份。
具体地，在实际生产使用中，为了综合制作成本和使用性能等多方面因素，该鱼饲料用中药益生菌液体培养基的各成分占总的质量比可选用如下表1中的方案，其中该表中的实施例三为最优选方案：
表1：
| 实施例 | 红糖 | 中药组分 | 磷酸二氢钾 | 酵母膏 | 水 |
| 实施例一 | 5％ | 2％ | 0.2％ | 0.3％ | 余量 |
| 实施例二 | 6％ | 2.5％ | 0.2％ | 0.4％ | 余量 |
| 实施例三 | 6％ | 3％ | 0.2％ | 0.5％ | 余量 |
| 实施例四 | 7％ | 2.5％ | 0.3％ | 0.4％ | 余量 |
| 实施例五 | 8％ | 3％ | 0.3％ | 0.5％ | 余量 |
在上述表格中，相应的中药组分的成分，及其各成分的重量份数可选用如下表2中的方案，其中该表中的单位均为重量份，实施例a为最优选方案：
表2：
| 中药成分名称 | 实例a | 实例b | 实例c | 实例d |
| 黄芩 | 80 | 75 | 75 | 70 |
| 黄柏 | 80 | 75 | 75 | 80 |
| 当归 | 50 | 60 | 55 | 50 |
| 大黄 | 60 | 65 | 60 | 60 |
| 大青叶 | 60 | 65 | 60 | 65 |
| 甘草 | 40 | 30 | 30 | 40 |
| 红景天 | 100 | 90 | 80 | 100 |
| 葛根 | 50 | 60 | 50 | 40 |
进一步地，本发明中所述的中药组分各药物的功效为：黄芩——主要活性成分为黄芩甙，抗真菌、抗病毒；黄柏——含小蘖碱具有较强的抑菌功能；当归——味甘性温，既能补血，又能活血，其活性成分阿魏酸钠能激活巨噬细胞，起到免疫功能；大黄——活性成分为大黄蒽醌衍生物，其抑菌作用强；大青叶——活性成分为靛玉红，其作用抗病毒和增强免疫力；红景天——主要活性成分为黄酮和红景天苷不仅能提高机体免疫力并使机体抗缺氧；葛根——活性成分为大豆苷元和葛根素，能促进机体微循环、耐低氧；甘草——具有清热解毒，调和诸药，其活性成分甘草酸是细胞免疫调节剂。本发明所提及的中药组分是根据草鱼的生长特点、“草鱼四病”的治疗和预防机理以及草鱼养殖过程中的养殖需求，分别选取能够增强草鱼机体免疫力、能够提高草鱼抗病能力的几味中药配制而成——首先选用当归、红景天、葛根提高动物机体免疫力,并能够耐低氧，预防草鱼在低氧条件下浮头死亡：同时选用黄芩、黄柏、大黄、大青叶提高其抗菌抗病毒能力；最后选用甘草不仅能够清热解毒而且还能调和其余诸药。由此可见，本发明所提供的中药组分不仅能够提升草鱼的生长速度，提高草鱼免疫力，而且能够增强草鱼的防病抗病能力，因而能够有效治疗和预防“草鱼四病”。
（二）鱼饲料用中药活性益生菌的培养方法
如图1所示，一种鱼饲料用中药活性益生菌的培养方法，具体包括如下的步骤：
步骤A：按照上述技术方案中所述的鱼饲料用中药益生菌液体培养基的组成成分配制鱼饲料用中药益生菌液体培养基；
步骤B：在预定灭菌温度下对鱼饲料用中药益生菌液体培养基灭菌20分钟，再冷却至30℃；
其中，相应的预定灭菌温度可以在115℃～121℃之间，但在实际应用中最好为121℃，从而保证鱼饲料用活性益生菌培养基中的有害菌能完全被杀灭。
步骤C：将活性益生菌浓度为每毫升15亿株的活性益生菌种子液，按预定接种比例接种到所述的鱼饲料用中药益生菌液体培养基中；
其中，相应的预定接种比例为：活性益生菌种子液与鱼饲料用中药益生菌液体培养基的体积比在1∶20至1：10之间，但在实际应用中最好为1：20；从而既不浪费活性益生菌种子液，又能让鱼饲料用活性益生菌培养基培育出数量质量俱佳的活性益生菌。
步骤D：对接种完活性益生菌的鱼饲料用中药益生菌液体培养基进行厌氧发酵，发酵装置的转速为180r/min，发酵温度为32℃，直至所述鱼饲料用中药益生菌液体培养基中的pH值达到5.0时发酵完成。此时的活性益生菌菌株数达到每毫升20亿株。一般来说，通常厌氧发酵48～72小时，其鱼饲料用活性益生菌培养基中的pH值均可以达到5.0。
具体地，本发明所提供的鱼饲料用中药活性益生菌的培养方法可以适用于对枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、啤酒酵母、产盶假丝酵母、黑曲霉、米根霉、干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌和双歧杆菌中的一种或多种进行培养。
（三）由鱼饲料用中药活性益生菌的培养方法制得的鱼饲料添加剂
一种鱼饲料添加剂，包括：按照上述技术方案所述的鱼饲料用中药活性益生菌的培养方法培育出的含中药活性益生菌。
其中，相应的鱼饲料添加剂中可以包括枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、啤酒酵母、产盶假丝酵母、黑曲霉、米根霉、干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌和双歧杆菌等活性益生菌。
需要说明的是，本发明所使用的菌株培养设备以及未详细描述的菌株培养工艺均可以采用现有技术中通用的菌株培养设备和菌株培养工艺，在本申请中不再作详细描述。本发明中所述的各种中药在各大中药药房中均可轻易购得，因此对此不再详述。本发明中所述的各种活性益生菌菌的原菌株均可以从中国普通微生物菌种保藏管理中心（CGMCC）或农业微生物菌种保藏管理中心（ACCC）引进，以确保各菌种的存活状态和存活质量。
可见，本发明实施例的实施能够大幅提高活性益生菌的菌株活性和在肠道中的定植性能，并且使由其制得的饲料添加剂富含中药成分，还能使中药成分中起到药理作用的活性成分充分发挥，从而提高鱼用微生态饲料添加剂的强体治病性能和促生长性能，有效治疗和预防“草鱼四病”，进而完全取代抗生素的使用。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到的变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应该以权利要求书的保护范围为准。
Claims (9)
1.一种鱼饲料用中药益生菌液体培养基，其特征在于，其成分包括：红糖、中药组分、磷酸二氢钾、酵母膏和水；其各成分占总的质量比为：
红糖，5％～8％；
中药组分，2％～3％；
磷酸二氢钾，0.2％～0.3％；
酵母膏，0.3％～0.5％；
余量为水；
其中，所述中药组分的成分包括：黄芩、黄柏、当归、大黄、大青叶、甘草、红景天和葛根；中药组分的各成分的重量份数为：
黄芩：60～80份，黄柏：60～80份，当归：40～60份，大黄：60～80份，
大青叶：60～80份，甘草：30～50份，红景天：80～100份，葛根：40～60份。
2.根据权利要求1所述的鱼饲料用中药益生菌液体培养基，其特征在于，所述中药组分的各成分的重量份数为：
黄芩：80份，黄柏：80份，当归：50份，大黄：60份，
大青叶：60份，甘草：40份，红景天：100份，葛根：50份。
3.根据权利要求1或2所述的鱼饲料用中药益生菌液体培养基，其特征在于，该鱼饲料用中药益生菌液体培养基的各成分占总的质量比为：
红糖，6％；
中药组分，3％；
磷酸二氢钾，0.2％；
酵母膏，0.5％；
余量为水。
4.一种鱼饲料用中药活性益生菌的培养方法，其特征在于，包括：
步骤A：按照权利要求1至3任一项所述的鱼饲料用中药益生菌液体培养基的组成成分配制鱼饲料用中药益生菌液体培养基；
步骤B：在预定灭菌温度下对鱼饲料用中药益生菌液体培养基灭菌20分钟，再冷却至30℃；
步骤C：将活性益生菌浓度为每毫升15亿株的活性益生菌种子液，按预定接种比例接种到所述的鱼饲料用中药益生菌液体培养基中；
步骤D：对接种完活性益生菌的鱼饲料用中药益生菌液体培养基进行厌氧发酵，发酵装置的转速为180r/min，发酵温度为32℃，直至所述鱼饲料用中药益生菌液体培养基中的pH值达到5.0时发酵完成。
5.根据权利要求4所述的鱼饲料用中药活性益生菌的培养方法，其特征在于，所述的预定接种比例为：活性益生菌种子液与鱼饲料用中药益生菌液体培养基的体积比在1∶20至1：10之间。
6.根据权利要求5所述的鱼饲料用中药活性益生菌的培养方法，其特征在于，所述的预定接种比例为：活性益生菌种子液与鱼饲料用中药益生菌液体培养基的体积比为1∶20。
7.根据权利要求4、5或6所述的鱼饲料用中药活性益生菌的培养方法，其特征在于，所述的预定灭菌温度在115℃～121℃。
8.根据权利要求7所述的鱼饲料用中药活性益生菌的培养方法，其特征在于，所述的预定灭菌温度为121℃。
9.一种鱼饲料添加剂，其特征在于，包括：按照权利要求4至8任一项所述的鱼饲料用中药活性益生菌的培养方法培育出的含中药活性益生菌。
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