CN102920946A

CN102920946A - 一种防治猪传染病的中草药活性发酵液的制备方法

Info

Publication number: CN102920946A
Application number: CN2012104944427A
Authority: CN
Inventors: 蒋常德; 胡艳晖; 蒋常银
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2012-11-28
Filing date: 2012-11-28
Publication date: 2013-02-13

Abstract

本发明提供了以有益菌群发酵中草药作为饲料添加剂来防治猪传染病的一种方法。所述中草药包含黄芪、大青叶、黄柏、金银花、连翘、桑叶、杭菊花、桔梗、牛蒡子、竹叶、芦根、薄荷、甘草、神曲等。上述中草药经粉碎、浸泡、加热保温、利用益生菌发酵而制得防治猪传染病的中草药活性发酵液，在发酵过程中使用益生菌种主要为酵母菌，乳酸菌，双歧杆菌，光合细菌，芽孢杆菌等。本发明的中草药活性发酵液具有防治猪传染病兼具促生长、增强免疫力、改变猪肠道菌群的功效，并具有易于使用，中草药用量少，活菌含量高以及具有无残留、无耐药性等优点。

Description

一种防治猪传染病的中草药活性发酵液的制备方法

技术领域

本发明属于微生物发酵中草药技术领域，特别是涉及一种利用益生菌发酵植物中草药制成的具有防治猪传染病的高效活性保健液的制备方法。

背景技术

目前饲料市场上的饲料添加剂种类繁多，虽然对猪能催肥、增重，但这些添加剂中一般都含有化学药品或激素类的药物，同样影响猪肉的质量和药物残留造成食品的污染，而且上述饲料添加剂均不能防治猪的圆环病毒Ⅱ型、猪瘟、猪肺疫及变异混感高热病、皮肤发红、耳朵变蓝、后肢无力、行走困难、粪便干燥、呕吐、咳嗽、气喘、呼吸困难、免疫力低下等疾病，饲养过程仍需定时注射各种疫苗，不能从根本上解决猪肉污染问题。而中药可以抗猪传染病已被临床和实验所证实，能抗猪传染病毒的中草药多属于解表药和清热药。中草药可以通过发汗、解热、镇静镇痛、镇咳祛痰平喘、抗炎、抗过敏、抗菌、抗病毒及促进机体免疫功能（解表药）和抗病原微生物、抗细菌毒素、解热抗炎、促进机体免疫功能及抗血凝、抗DIC、改善血液流变性、保肝利胆（清热药）等药理作用达到防治猪传染病的目的。现有防治禽流感的专利基本上都是将中草药或直接加入饲料中或进行煎取提取，但都存在有效成份利用率低，添加量高等缺点。将中国传统的中医药配方与生物技术相结合，直接利用益生菌群发酵中草药，能破坏中草药的细胞壁，大大提高中草药的有效成份的利用率，并在发酵过程中产生多种促生长因子与新的活性物质，能够防治猪传染病，有效改善肉质，提高抗病力，增强免疫力改善猪的肠道群菌的功效，并具有易于使用，中草药用量少，活菌含量高以及具有无残留、无耐药性等优点。

发明内容

本发明的目的是提供具有防治猪传染病效果的中草药活性发酵保健液的一种制备方法。本发明的另外一个目的提高中草药的有效成份的利用率，减少中草药的用量。

本发明用于防治猪传染病的中草药活性发酵保健液是在大量调查及研究的基础上，根据产品的设计功用要求对180多种中草药进行筛选，依据传统的中药的君臣佐使、七情配伍、十八反、十九畏等理论，逐个筛选并对筛选出的中草药有效成份、抑菌作用进行提取、验证，最终确定配方。再从400多种有益微生物中筛选出5种能够共生共存，大大提高中草药的有效成份的利用率，并在发酵过程中产生多种促生长因子的益生菌。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：一种的防治猪传染病的中草药活性发酵液的制备方法，包括如下步骤：

⑴、将从市场上购买的各种中草药单独粉碎成100目细粉；

⑵、在发酵罐中依次加入：黄芪2-5份、大青叶2-5份、黄柏2-5份、金银花4-6份、连翘4-6份、桑叶2-5份、杭菊花2-5份、桔梗2-5份、牛蒡子4-6份、竹叶1-3份、芦根8-12份、甘草1-2份、糖蜜40-60份、盐2-4份、水850份。浸泡2小时后，加热至80度，保温30分钟，冷却至40度；

⑶、在步骤⑵制取的冷却液加入神曲2-5份、薄荷1-2份、60亿/毫升光合细菌5-15份、5亿/毫升酵母菌5-15份、100亿/毫升乳酸菌5-15份、10亿/毫升双歧杆菌5-15份、80亿/毫升枯草芽孢杆菌5-15份；

⑷、30-35度静止培养120-150小时，检测其pH低于3.8，活菌含量达到10⁸个/毫升，即可结束发酵；

⑸、放出菌液，包装成品。

在步骤⑶中的光合细菌、酵母菌、乳酸菌、双歧杆菌、枯草芽孢杆菌的生产可采用现有技术，本发明提供以下方法。

①、乳酸菌液体菌种的制备

取出菌种保藏管，用MRS固体培养基划平板进行复苏，37度厌氧培养48小时。在平板下挑取单个菌落接种50毫升MRS培养基中，在培养箱中37度厌氧培养24小时。种子采用5%的接种量，接种至10L大三角瓶中，37度厌氧培养20-28小时，检测其菌液浓度，菌含量超过100亿/毫升，即可作为乳酸菌液体菌种接种。其中所述的MRS培养基：蛋白胨10g/L，酵母提取物5 g/L，牛肉膏10 g/L，葡萄糖20 g/L，醋酸钠5 g/L，柠檬酸二铵2 g/L，吐温-80 1 ml/L，硫酸镁0.6 g/L，硫酸锰0.05 g/L，磷酸氢二钾2 g/L，琼脂20 g/L，碳酸钙20 g/L，固体培养基中加入琼脂2%。其中所述的乳酸菌种子培养基：葡萄糖5%，蛋白胨1.5%，牛肉膏0.75%，氯化钠0.1%，硫酸锰0.001%，硫酸镁0.02%，醋酸钠0.05%，碳酸钙5%，pH6.0。各培养基灭菌的条件为：0.10-0.15MPa，121℃灭菌30分钟。

②、酵母菌液体菌种的制备

取出菌种保藏管，用PDA固体培养基划平板进行复苏，30度培养48小时。在平板下挑取单个菌落接种50毫升PDA培养基中，在培养箱中30度震荡培养24小时。种子采用5%的接种量，接种至5L大三角瓶中，30度震荡培养20-28小时，检测其菌液浓度，菌含量超过5亿/毫升，即可作为酵母菌液体菌种接种。其中所述的PDA培养基：土豆200g，蔗糖20g，水1000mL，固体培养基中加入琼脂2%。其中所述的酵母菌种子培养基：葡萄糖10 g/L，酵母膏3 g/L，蛋白胨5 g/L，硫酸铵5 g/L，硫酸镁0.5 g/L。各培养基灭菌的条件为：0.10-0.15MPa，121℃灭菌30分钟。

③、枯草芽孢杆菌液体菌种的制备

取出菌种保藏管，用LB固体培养基划平板进行复苏，37度培养48小时。在平板下挑取单个菌落接种50毫升LB培养基中，在培养箱中37度震荡培养24小时。种子采用5%的接种量，接种至5L大三角瓶中，37度震荡培养20-28小时，检测其菌液浓度，芽孢含量超过80亿/毫升，即可作为枯草芽孢杆菌液体菌种接种。其中所述LB培养基：蛋白胨5g，牛肉膏3g，氯化钠5g，水1000mL，pH7.2，固体培养基中加入琼脂2%。其中所述枯草芽孢杆菌液体菌种培养基：葡萄糖10g/L，玉米粉8 g/L，豆粕粉25 g/L，硫酸镁0.5 g/L，硫酸锰0.5 g/L，磷酸二氢钠0.5 g/L，磷酸氢二钠2.3 g/L，pH7.2。各培养基灭菌的条件为：0.10-0.15MPa，121℃灭菌30分钟。

④、光合细菌液体菌种的制备

取出菌种保藏管，用光合细菌固体培养基划平板进行复苏，在光照培养箱中35度培养72小时。光照强度：1000lex-6000lex。在平板下挑取单个菌落接种50毫升光合细菌液体培养基中，在光照培养箱中35度厌氧培养120小时。种子采用10%的接种量，接种至5L大三角瓶，在光照培养箱中35度厌氧培养72-96小时，检测其菌液浓度，菌含量超过60亿/毫升，即可作为光合细菌液体菌种种子接种。其中所述光合细菌固体培养基：磷酸二氢钾1g，氯化钙0.1g，碳酸钠3g，醋酸钠1g，氯化镁0.5g，氯化铵1g，氯化钠1g，琼脂20g，pH7.5，水1000mL。其中所述光合细菌液体培养基：磷酸二氢钾1g，氯化钙0.1g，碳酸钠3g，醋酸钠1g，氯化镁0.5g，氯化铵1g，氯化钠1g， pH7.5，水1000mL。各培养基灭菌的条件为：0.10-0.15MPa，121℃灭菌30分钟。

⑤、双歧杆菌菌种的制备

取出菌种保藏管，用双歧杆菌固体培养基划平板进行复苏，37度厌氧培养72小时。在平板下挑取单个菌落接种50毫升双歧杆菌培养基中，在培养箱中37度厌氧培养48小时。种子采用5%的接种量，接种至10L大三角瓶中，37度厌氧培养20-28小时，检测其菌液浓度，菌含量超过10亿/毫升，即可作为双歧杆菌液体菌种接种。其中所述的双歧杆菌培养基：蛋白胨5.0g/L，酵母提取物5 g/L，牛肉膏5.0 g/L，胰蛋白胨10.0g/L，葡萄糖10.0 g/L，醋酸钠5.0 g/L，柠檬酸二铵2.0 g/L，吐温-80 1.0 ml/L，硫酸镁0.1 g/L，硫酸锌0.25 g/L，磷酸氢二钾2 g/L，固体培养基中加入琼脂2%。培养基灭菌的条件为：0.10-0.15MPa，121℃灭菌30分钟。

预防猪流感的使用方法为添加在日常猪饲料中搅拌均匀，添加比例控制在0.5-1%；配合饮水添加0.2-0.5%，效果更佳。

治疗猪流感的使用方法直接灌服，使用量为小猪10-20毫升每日，中猪30-50毫升每日，大猪50-80毫升每日。

本发明所述的防治猪传染病的中草药活性发酵液的制备方法具有以下优点：

⑴、益生菌发酵中草药，中草药的有效成份能完整提取出来，同时这些有效物质能够在发酵过程中大大增强其活性及功效，减少了中草药的使用量；

⑵、益生菌发酵中草药的过程中，以中草药为培养基，会合成一些新的中草药官能团活性因子以及促生长因子，以增强其治病，防病的效果；

⑶、益生菌发酵中草药过程中，还保留了大量活的益生菌、菌体分泌物及菌体自溶物，这些物质本身就具有增强猪的抵抗力与免疫力。

本发明的优异效果是：能有效预防猪呼吸道病、传染性胸膜肺炎、猪病毒性混感、猪高热病、猪瘟等传染病及其并发症，而且有很好的促生长的效果。本发明的技术方案通过多年的微生态研究以及养猪经验反复试验而成的，符合传统中医学的理论。本发明的中草药活性发酵保健液中的中草药的有效成份能完整提取出来，同时这些有效物能够在发酵过程中大大增强其活性及功效，含有发酵中草药过程中产生新的中草药官能团活性因子、多种促生长因子与益生菌，对猪的生长发育，能够有效改善肉质，提高抗病力，增强免疫力的功效，并具有易于使用，中草药用量少，活菌含量高以及具有无残留、无耐药性等优点。

具体实施方式

以下是本发明的一些实施个例，本发明的实际使用不局限于实施例。

实施例1，用于治疗猪传染病的益生菌中草药活性保健液的制备

一种的治疗猪传染病的中草药活性发酵液的制备方法，包括如下步骤：

⑴、将从市场上购买的各种中草药单独粉碎成100目细粉；

⑵、在1吨发酵罐中依次加入：黄芪3份、大青叶3份、黄柏3份、金银花5份、连翘5份、桑叶3份、杭菊花3份、桔梗3份、牛蒡子5份、竹叶2份、芦根10份、甘草1份、糖蜜50份、盐2份、水850份。浸泡2小时后，加热至80度，保温30分钟，冷却至40度；

⑶、在步骤⑵制取的冷却液加入神曲2份、薄荷1份、60亿/毫升光合细菌10份、5亿/毫升酵母菌10份、100亿/毫升乳酸菌10份、10亿/毫升双歧杆菌10份、80亿/毫升枯草芽孢杆菌10份；

⑷、30-35度静止培养120-150小时，检测其pH低于3.8，活菌含量达到10⁸个/毫升，即可结束发酵。

使用方法：治疗猪流感的使用方法直接灌服,使用量为小猪15毫升每日，,中猪40毫升每日，大猪80毫升每日，连服三日。根据实验，在30头发病小猪，三日治愈25头，五日治愈29头；在23头发病中大猪身上，饲喂一日后效果非常明显，三日全治愈。

实例2，用于预防猪传染病的益生菌中草药活性保健液的制备

预防猪传染病的中草药活性发酵液的制备方法，包括如下步骤：

⑴、将从市场上购买的各种中草药单独粉碎成100目细粉；

⑵、在1吨发酵罐中依次加入：黄芪2份、大青叶2份、黄柏4份、金银花6份、连翘6份、桑叶2份、杭菊花3份、桔梗3份、牛蒡子5份、竹叶1份、芦根8份、甘草1份、糖蜜50份、盐2份、水850份。浸泡2小时后，加热至80度，保温30分钟，冷却至40度；

⑶、在步骤⑵制取的冷却液加入神曲3份、薄荷2份、60亿/毫升光合细菌10份、5亿/毫升酵母菌10份、100亿/毫升乳酸菌10份、10亿/毫升双歧杆菌10份、80亿/毫升枯草芽孢杆菌10份；

⑸、放出菌液，包装成品。

预防猪流感的使用方法为添加在日常猪饲料中搅拌均匀，添加比例控制在0.5-1%；配合饮水添加0.2-0.5%，效果更佳。根据实验，在600头30日龄的猪饲料中添加100天，试验组比对照组每天平均增重55克（与对照组中正常猪对比），在传染病流行期间，试验组无一头猪发病，保护率100%，对照组发病53头，发病率为17.67%。

Claims

1.一种防治猪传染病的中草药活性发酵液的制备方法，其特征在由以下重量份的原料组成：黄芪2-5份、大青叶2-5份、黄柏2-5份、金银花4-6份、连翘4-6份、桑叶2-5份、杭菊花2-5份、桔梗2-5份、牛蒡子4-6份、竹叶1-3份、芦根8-12份、薄荷1-2份、甘草1-2份、神曲2-5份、糖蜜40-60份、盐2-4份、水850份、5亿/毫升酵母菌5-15份，100亿/毫升乳酸菌5-15份，60亿/毫升光合细菌5-15份，10亿/毫升双歧杆菌5-15份，80亿/毫升芽孢杆菌5-15份；将上述中草药经粉碎、浸泡、加热保温、发酵而制得防治猪传染病的中草药活性发酵液。

2.根据权利要求1所述的防治猪传染病的中草药活性发酵液的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

⑴、将从市场上购买的各种中草药单独粉碎成100目细粉；

⑵、在发酵罐中依次加入：黄芪2-5份、大青叶2-5份、黄柏2-5份、金银花4-6份、连翘4-6份、桑叶2-5份、杭菊花2-5份、桔梗2-5份、牛蒡子4-6份、竹叶1-3份、芦根8-12份、甘草1-2份、糖蜜40-60份、盐2-4份、水850份；浸泡2小时后，加热至80度，保温30分钟，冷却至40度；

⑸、放出菌液，包装成品。

3.一种防治猪传染病的中草药活性发酵液的制备方法，其特征在预防猪流感的使用方法为添加在日常猪饲料中搅拌均匀，添加比例控制在0.5-1%；配合饮水添加0.2-0.5%，效果更佳。

4.一种防治猪传染病的中草药活性发酵液的制备方法，其特征在治疗猪流感的使用方法直接灌服，使用量为小猪10-20毫升每日，中猪30-50毫升每日，大猪50-80毫升每日。