CN106074941A - 一种预防口蹄疫的中草药活性发酵液的制备方法 - Google Patents

一种预防口蹄疫的中草药活性发酵液的制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN106074941A
CN106074941A CN201610745874.9A CN201610745874A CN106074941A CN 106074941 A CN106074941 A CN 106074941A CN 201610745874 A CN201610745874 A CN 201610745874A CN 106074941 A CN106074941 A CN 106074941A
Authority
CN
China
Prior art keywords
radix
parts
chinese herbal
cfu
mouth disease
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201610745874.9A
Other languages
English (en)
Inventor
蒋常德
胡艳晖
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Foshan Yanhui Biotechnology Co Ltd
Original Assignee
Foshan Yanhui Biotechnology Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Foshan Yanhui Biotechnology Co Ltd filed Critical Foshan Yanhui Biotechnology Co Ltd
Priority to CN201610745874.9A priority Critical patent/CN106074941A/zh
Publication of CN106074941A publication Critical patent/CN106074941A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/48—Fabaceae or Leguminosae (Pea or Legume family); Caesalpiniaceae; Mimosaceae; Papilionaceae
    • A61K36/481—Astragalus (milkvetch)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A61K33/14—Alkali metal chlorides; Alkaline earth metal chlorides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/741—Probiotics
    • A61K35/742—Spore-forming bacteria, e.g. Bacillus coagulans, Bacillus subtilis, clostridium or Lactobacillus sporogenes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/06—Fungi, e.g. yeasts
    • A61K36/07—Basidiomycota, e.g. Cryptococcus
    • A61K36/076—Poria
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/19—Acanthaceae (Acanthus family)
    • A61K36/195—Strobilanthes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/23—Apiaceae or Umbelliferae (Carrot family), e.g. dill, chervil, coriander or cumin
    • A61K36/233—Bupleurum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/31—Brassicaceae or Cruciferae (Mustard family), e.g. broccoli, cabbage or kohlrabi
    • A61K36/315—Isatis, e.g. Dyer's woad
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/35—Caprifoliaceae (Honeysuckle family)
    • A61K36/355—Lonicera (honeysuckle)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/48—Fabaceae or Leguminosae (Pea or Legume family); Caesalpiniaceae; Mimosaceae; Papilionaceae
    • A61K36/484—Glycyrrhiza (licorice)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/53—Lamiaceae or Labiatae (Mint family), e.g. thyme, rosemary or lavender
    • A61K36/539—Scutellaria (skullcap)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/63—Oleaceae (Olive family), e.g. jasmine, lilac or ash tree
    • A61K36/634—Forsythia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/65—Paeoniaceae (Peony family), e.g. Chinese peony
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/70—Polygonaceae (Buckwheat family), e.g. spineflower or dock
    • A61K36/704—Polygonum, e.g. knotweed
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/71—Ranunculaceae (Buttercup family), e.g. larkspur, hepatica, hydrastis, columbine or goldenseal
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/71—Ranunculaceae (Buttercup family), e.g. larkspur, hepatica, hydrastis, columbine or goldenseal
    • A61K36/718—Coptis (goldthread)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/73—Rosaceae (Rose family), e.g. strawberry, chokeberry, blackberry, pear or firethorn
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/78—Saururaceae (Lizard's-tail family)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/80—Scrophulariaceae (Figwort family)
    • A61K36/804—Rehmannia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/85—Verbenaceae (Verbena family)
    • A61K36/855—Clerodendrum, e.g. glorybower
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/88—Liliopsida (monocotyledons)
    • A61K36/888—Araceae (Arum family), e.g. caladium, calla lily or skunk cabbage
    • A61K36/8888—Pinellia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/10—Preparation or pretreatment of starting material
    • A61K2236/19—Preparation or pretreatment of starting material involving fermentation using yeast, bacteria or both; enzymatic treatment

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明提供了一种预防口蹄疫的中草药活性发酵液及其制备方法；本发明以有益菌群发酵中草药作为饲料添加剂来预防口蹄疫的一种方法。所述中草药包含黄芪，黄芩，黄莲，二花，赤芍，甘草，鱼腥草，白头翁，生地，半夏，柴胡，枇杷叶，连翘，大青叶，板蓝根等。上述中草药经挑选、粉碎、浸泡、煎煮、发酵而制得预防口蹄疫的饲料添加剂，在发酵过程中使用有效益生菌种主要为布拉氏酵母菌，丁酸梭菌，胶质红假单胞菌，饲料类芽孢杆菌，苍黄链霉菌等。本发明的中草药活性发酵液具有预防口蹄疫兼具促生长、增强免疫力的功效，并具有易于使用，中草药用量少，活菌含量高以及具有无残留、无耐药性等优点。

Description

一种预防口蹄疫的中草药活性发酵液的制备方法
技术领域
本发明涉及到一种预防口蹄疫的中草药活性发酵液的制备方法及用途，特别是涉及一种利用有益生物菌群发酵植物中草药制成的具有预防口蹄疫效果的高效活性发酵液的制备方法及用途。
背景技术
口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的人畜共患的急性、热性、高度接触性传染病。本病具有流行快、传播快、发病急、危害大等流行病学特点，疫区发病率可达50%-100%，犊牛死亡率较高。现今，在世界各地主要都还是采用疫苗或西药洗涤二种方法防治牲畜口蹄疫。但是，疫苗种类有对应性，并且疫苗产生免疫力迟缓，维持免疫力时间有限，使用成本高。而西药洗涤治疗是治标不治本，对严重的流行性牲畜口蹄疫效果不好。而中药可以抗畜禽口蹄疫已被临床和实验所证实，能抗畜禽口蹄疫的中草药多属于解表药和清热药。中草药可以通过发汗、解热、镇静镇痛、镇咳祛痰平喘、抗炎、抗过敏、抗菌、抗病毒及促进机体免疫功能（解表药）和抗病原微生物、抗细菌毒素、解热抗炎、促进机体免疫功能及抗血凝、抗DIC、改善血液流变性、保肝利胆（清热药）等药理作用达到防治口蹄疫的目的。现有防治口蹄疫的方法基本上都是将中草药或直接加入饲料中或进行煎取提取，但都存在有效成份利用率低，添加量高等缺点。直接利用益生菌群发酵中草药，能破坏中草药的细胞壁，大大提高中草药的有效成份的利用率，并在发酵过程中产生多种促生长因子与益生菌，对畜禽的生长发育能够有效改善肉质，提高抗病力，增强免疫力的功效，并具有易于使用，中草药用量少，活菌含量高以及具有无残留、无耐药性等优点。
发明内容
本发明的目的是提供具有预防口蹄疫效果的中草药活性发酵液及其制备方法。
本发明的另外一个目的提高中草药的有效成份的利用率，减少中草药的用量。
本发明的另一个目的提供本发明中草药活性发酵液在预防口蹄疫的应用。
本发明用于预防禽流感的中草药活性发酵液是在大量调查及的基础上，根据产品的设计功用要求对140多种中草药进行筛选，依据传统的中药的君臣佐使、七情配伍、十八反、十九畏等理论，逐个筛选并对筛选出的中草药有效成份、抑菌作用进行提取、验证，最终确定配方。再从500多种有益微生物中筛选出5种能够共生共存的，能大大提高中草药的有效成份的利用率，并在发酵过程中产生多种促生长因子的益生菌。
为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：
一种预防口蹄疫的中草药活性发酵液，其特征在于，由以下重量份的原料制成：黄芪2-6份，黄芩2-6份，黄莲2-4份，二花3-7份，赤芍4-6份，甘草2-4份，鱼腥草1-3份，白头翁3-5份，生地2-4份，半夏2-4份，柴胡4-8份，枇杷叶4-8份，连翘2-6份，大青叶2-8份，板蓝根2-10份，盐2-4份、糖蜜40-60份，水850份、10亿CFU/ml布拉氏酵母菌5-15份，10亿CFU/ml丁酸梭菌5-15份，30亿CFU/ml胶质红假单胞菌5-15份，100亿CFU/ml饲料类芽孢杆菌5-15份，1亿CFU/ml苍黄链霉菌5-15份；将上述中草药经粉碎、浸泡、加热保温、发酵而制得预防口蹄疫的中草药活性发酵液。
其中，预防口蹄疫的中草药活性发酵液的制备方法，包括如下步骤：
⑴、将从市场上购买的各种中草药单独粉碎成100目细粉；
⑵、在发酵罐中依次加入：黄芪2-6份，黄芩2-6份，黄莲2-4份，二花3-7份，赤芍4-6份，甘草2-4份，鱼腥草1-3份，白头翁3-5份，生地2-4份，半夏2-4份，柴胡4-8份，枇杷叶4-8份，连翘2-6份，大青叶2-8份，板蓝根2-10份，盐2-4份，糖蜜40-60份，水850份。浸泡30分钟后，加热至85℃，保温两小时，冷却至30℃；
⑶、在步骤⑵制取的冷却液加入100亿CFU/ml饲料类芽孢杆菌5-15份，1亿CFU/ml苍黄链霉菌5-15份，10亿CFU/ml布拉氏酵母菌5-15份；30℃-33℃，开搅拌120-160r/min，每分钟通无菌空气量与发酵液体积比为1：1-1.5:1；发酵36小时后，再向发酵罐中加入10亿CFU/ml丁酸梭菌5-15份，30亿CFU/ml胶质红假单胞菌5-15份，30-35℃静止培养120-150小时，检测其pH低于4.0，活菌含量达到10亿CFU/ml，即可结束发酵；
⑷、放出菌液，包装成品。
其中，预防口蹄疫的使用方法为添加在日常饲料中搅拌均匀，添加比例控制在0.1%-0.2%。
其中，在步骤⑶中的饲料类芽孢杆菌、苍黄链霉菌、布拉氏酵母菌、丁酸梭菌、胶质红假单胞菌的生产可采用现有技术，本发明提供以下方法：
①、饲料类芽孢杆菌液体菌种的制备
取出菌种保藏管，用LB固体培养基划平板进行复苏，30℃培养48小时。在平板下挑取单个菌落接种50毫升LB培养基中，在培养箱中30℃震荡培养24小时。种子采用5%的接种量，接种至装有2L的饲料类芽孢杆菌液体菌种培养基的5L大三角瓶中，30℃震荡培养20-28小时，检测其菌液浓度，芽孢含量超过100亿CFU/ml，即可作为饲料类芽孢杆菌液体菌种接种。其中，所述LB固体培养基：蛋白胨5g，牛肉膏3g，氯化钠5g，琼脂20 g，水1000mL，pH7.2；其中所述饲料类芽孢杆菌液体菌种培养基：葡萄糖10g/L，玉米粉15 g/L， 豆粕粉35 g/L，硫酸镁0.5 g/L，硫酸锰0.5 g/L，磷酸二氢钾0.5 g/L，磷酸氢二钾1.5 g/L，pH7.2。各培养基灭菌的条件为：0.10-0.15MPa，121℃灭菌30分钟。
②、苍黄链霉菌菌种的制备
取出菌种保藏管，用PDA固体培养基划平板进行复苏，30℃培养48小时。在平板下挑取单个菌落划线至装有PDA固体培养基的茄子瓶中，在培养箱中30℃培养3-5天，待菌种，产生大量的孢子后，用无菌生理盐水刮下，调整苍黄链霉菌孢子浓度为1亿CFU/ml，即为苍黄链霉菌菌种。
③、布拉氏酵母菌液体菌种的制备
取出菌种保藏管，用PDA固体培养基划平板进行复苏，30℃培养48小时。在平板下挑取单个菌落接种50毫升PDA培养基中，在培养箱中30℃震荡培养24小时。种子采用5%的接种量，接种至装有布拉氏酵母菌种子培养基的5L大三角瓶中，每个装液量为2L，30℃震荡培养20-28小时，检测其菌液浓度，菌含量超过10亿CFU/ml，即可作为布拉氏酵母菌液体菌种接种。
其中，所述的PDA固体培养基：土豆200g，蔗糖20g，琼脂20 g，水1000mL。其中所述的布拉氏酵母菌种子培养基：葡萄糖20 g/L，酵母膏3 g/L，蛋白胨5 g/L，硫酸铵5 g/L，硫酸镁0.5 g/L。各培养基灭菌的条件为：0.10-0.15MPa，121℃灭菌30分钟。
④、丁酸梭菌液体菌种的制备
取-80℃甘油管保藏的菌种1mL接种于装有9mLRCM培养基的试管中，37℃条件下静态厌氧活化48h，将活化好的菌种按1%(v/v)的接种量转接到灭过菌的100L丁酸梭菌培养基中，37℃条件下静态厌氧培养24h~36h，菌含量超过10亿CFU/ml，即可作为丁酸梭菌液体菌种；
其中，所述的RCM培养基：胰蛋白陈10g/L，牛肉膏10g，酵母膏10g/L，葡萄糖5g/L，氯化钠5g/L，可溶性淀粉1g/L，半胱氨酸盐酸盐0.5克/L，醋酸钠3g/L，pH7.0，121℃灭菌20min；
其中，所述的丁酸梭菌培养基：:酵母膏15g/L，牛肉膏5g/L，KH2PO4 2g/L硫酸镁1g/L，半胱氨酸盐酸盐1g/L，NaHCO3 1g/L，CaCO3 1g/L，葡萄糖20g/L， PH7.0，121℃灭菌20min。
⑤、胶质红假单胞菌液体菌种的制备
取出胶质红假单胞菌种保藏管，用胶质红假单胞菌固体培养基划平板进行复苏，在光照培养箱中35℃培养72小时。光照强度：1000lex-6000lex。在平板下挑取单个菌落接种50毫升胶质红假单胞菌液体培养基中，在光照培养箱中35℃厌氧培养120小时。种子采用10%的接种量，接种至装有4.5L的胶质红假单胞菌液体培养基的5L大三角瓶，在光照培养箱中35℃厌氧培养72-96小时，检测其菌液浓度，菌含量超过30亿CFU/ml，即可作为胶质红假单胞菌液体菌种种子接种。其中所述胶质红假单胞菌固体培养基：磷酸二氢钾1g，氯化钙0.1g，碳酸钠3g，醋酸钠1g，氯化镁0.5g，氯化铵1g，氯化钠1g，琼脂20g，pH7.5，水1000mL。其中所述胶质红假单胞菌液体培养基：磷酸二氢钾1g，氯化钙0.1g，碳酸钠2g，醋酸钠4g，氯化镁0.5g，氯化铵1g，氯化钠1g， pH7.5，水1000mL。各培养基灭菌的条件为：0.10-0.15MPa，121℃灭菌30分钟。
本发明中的发酵液中含有丰富的活性布拉氏酵母菌，布拉氏酵母菌富含维生素B群，能有效改善畜禽体内消化道菌群平衡，增强机体免疫力，提供丰富的营养物质，从而达到防治消化道疾病和提高免疫等多重作用。畜禽胃肠道内寄生了大量的微生物，这些微生物在合适的营养底物下能够保持正常的生长代谢，这将有利于维护各菌系之间的代谢平衡，并为畜禽胃肠道消化吸收功能提供一个良好的微生态环境，使得进入畜禽的各种养分在胃肠道内能被充分吸收和利用，酵母菌为兼性厌氧菌，可在畜禽体内生长繁殖，能消耗肠道内的氧气形成厌氧环境，并辅助乳杆菌代谢产生乳酸等有机酸，有利于乳酸菌，双歧杆菌，等有益菌的生长，抑制大肠杆菌、沙门氏菌等有害菌的生长，从而改善胃肠道环境和菌群结构，促进胃肠对营养物质的消化、吸收和利用。酵母菌中含有超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽，而它们都是重要的抗氧化剂和自由基消除剂。酵母菌内的超氧化物歧化酶(SOD)可对抗与阻断因氧自由基对细胞造成的损害，并及时修复受损细胞。谷胱甘肽在酵母细胞内含量较高，可消除自由基，能起到强有力的保护作用。谷胱甘肽还具有整合解毒作用，能与体内的有毒化合物、重金属离子或致癌物质等相结合，并促进其排出体外，起到中和解毒作用。谷胱甘肽可阻止氧化血红蛋白，有利于酶活性的发挥，并且使酶重新恢复活性。酵母菌代谢能产生多种酶及多种代谢产物，降解中草药中的高分子物质，可降低肠道内的食糜黏度，促进胃肠对营养物质的消化、吸收和利用。酵母细胞富含畜禽生长需要的多种营养物质，蛋白质含量达到45%～60%，可以和大豆蛋白相媲美；氨基酸组成合理，畜禽必需的8种氨基酸含量均很高，富含B族维生素如烟酸、胆碱、核黄素、泛酸、叶酸等，畜禽对其吸收率可达60%以上，是一种理想的VB2补充源，为乳酸菌，双歧杆菌提供多种营养成分。
本发明的发酵液中含有苍黄链霉菌，苍黄链霉菌在发酵中草药过程中会产生丰富的纤维素酶，木聚糖酶，葡聚糖酶等非淀粉多糖酶以及淀粉酶，蛋白酶，破坏了中草药的细胞壁，能将中草药的有效成份的含量提高数倍，并在发酵过程中产生苍黄菌素（一种抗病毒的抗生素），具有较强抗口蹄疫病毒的活性，有机的结合了益生菌与中草药的功效，能极大促进畜禽的生长发育，能够有效改善肉质，提高抗病力，增强免疫力的功效。
本发明中含有饲料类芽孢杆菌，饲料类芽孢杆菌在自然界分布广泛，易分离培养，其能产丰富的淀粉酶，纤维素酶与蛋白酶，是一种具有广谱抑菌活性的细菌产生次生代谢产物的能力较强，其分泌的抗生素、抗菌蛋白或多肽类物质等起到较好的生物防治效果。饲料类芽孢杆菌作为一种益生菌，在其生长过程中可产生多种抑菌物质，如抑菌蛋白，脂肽类抗生素，多肽类物质。Wong等从饲料类芽孢杆菌中分离纯化得到对多种病菌具有抑制活性的抑菌蛋白baciamin，分子质量为50 ku，可以使病原真菌的膜通透性增加，降低人免疫缺陷病毒1型(HIV-1)逆转录酶的活性，同时对肝癌、乳腺癌、结肠癌细胞具有抑制作用。
饲料类芽孢杆菌发酵中草药的过程中，以中草药为培养基，会合成一些新的中草药官能团活性因子以及促生长因子，经检测，其抑菌蛋白与脂肽类抗生素，多肽类物质基本上比一般培养基提高了20%以上，增强其治病，防病的效果。
本发明中含有胶质红假单胞菌，是一种具有很高营养价值的古老菌体，个体极小，但营养成分非常丰富，它含有大量的蛋白质和氨基酸，是一种优质蛋白源，胶质红假单胞菌菌体含有蛋白质65.45%，脂肪7.18%，粗纤维2.78%，可溶性糖20.31%，灰分4.28%，每克干菌体相当于21KJ热量。光合细菌含有丰富的B族维生素，其质量分数（μg/g）：维生素B1 12，维生素B2 30，维生素B6 5，维生素B12 21（是酵母的200倍），烟酸125，，泛酸30，叶酸60，生物素65。光合细菌还含有辅酶Q10 ，其质量分数分别为酵母、菠菜叶和玉米幼芽的13.94和82倍。胶质红假单胞菌光合色素由细菌叶绿素（Bchl）和类胡萝卜素组成，现已发现的细菌叶绿素有a、b、c、d、e 5种，每种都有固定的光吸收波长；迄今已发现胶质红假单胞菌的类胡萝卜素有80多种，其中包括番茄红素、叶黄素等。它还含有锌、碘、硒等多种微量元素和多种酶类，产生并分泌多种促进生长因子、促免疫因子、抗病毒因子等。通过拌料或直接饮水的方式应用于畜禽，胶质红假单胞菌主要作用在于改善动物营养条件，促进畜禽生长发育，缩短生长周期，增强免疫力，提高防病抗病能力，提高成活率和产肉、产蛋、产奶率，并改善肉、蛋、奶品质，降解有害物质残留，提高饲料利用率，降低饲料用量。
本发明中含有丁酸梭菌，其在发酵过程中可以将中草药活性发酵液最终pH低于4，能起到酸化剂的作用，增加适口性。改善肠道微生态环境，促进畜禽肠道有益菌的增殖，阻止或抑制有害菌繁殖，纠正肠内菌群紊乱，调整肠道菌群平衡； 抑制腐败菌，防止肠道内有害物质的产生。改善和优化禽畜饲养生态环境，减少环境污染； 提高动物的抗应激能力；提高动物的免疫机能，有效地预防或减少细菌性疾病的发生； 提高动物饲料转化率，降低生产成本。促进动物生产和提高生产性能； 改善肉质，提高产品品位从而获得较高的经济效益。
本发明的优异效果是：
①、本发明的技术方案通过多年的微生态研究以及养殖经验反复试验而成的，符合传统中医学的理论；从发明中草药配方是从140多种中草药进行筛选，依据传统的中药的君臣佐使、七情配伍、十八反、十九畏等理论，逐个筛选并对筛选出的中草药有效成份、抑菌作用进行提取、验证，最终确定配方，通过益生菌发酵证明能有效预防口蹄疫及其并发症，而且有很好的促生长的效果。
②、本发明的中草药活性发酵液中的中草药在益生菌（苍黄链霉菌，饲料类芽孢杆菌，布拉氏酵母菌，丁酸梭菌，胶质红假单胞菌）的发酵作用下，破坏了中草药的细胞壁，能将中草药的有效成份的含量提高1-4倍，并在发酵过程中产生苍黄菌素（一种抗病毒的抗生素），具有较强抗口蹄疫病毒的活性，增强预防口蹄疫及其并发症的效果，并在发酵过程中产生多种促生长因子与益生菌，有机的结合了益生菌与中草药的功效，能极大促进畜禽的生长发育，能够有效改善肉质，提高抗病力，增强免疫力的功效并具有易于使用，中草药用量少，活菌含量高以及具有无残留、无耐药性等优点。
③、本发明中的各种益生菌是从500多种有益微生物中筛选出5种能够大大提高中草药的有效成份的利用率，并在发酵过程中可共生共存，互相促进。其在发酵过程中可以将中草药活性发酵液最终pH低于4，能起到酸化剂的作用，增加适口性。改善肠道微生态环境，促进畜禽肠道有益菌的增殖，阻止或抑制有害菌繁殖，纠正肠内菌群紊乱，调整肠道菌群平衡； 抑制腐败菌，防止肠道内有害物质的产生。改善和优化禽畜饲养生态环境，减少环境污染； 提高动物的抗应激能力； 提高动物的免疫机能，有效地预防或减少细菌性疾病的发生； 提高动物饲料转化率，降低生产成本。促进动物生产和提高生产性能； 改善肉质，提高产品品位从而获得较高的经济效益。
具体实施方式
以下是本发明的一些实施个例，本发明的实际使用不局限于实施例。
实施例1，用于预防口蹄疫的益生菌中草药活性发酵液的制备
用于预防口蹄疫的益生菌中草药活性发酵液的原料的重量配比范围为：黄芪4份，黄芩4份，黄莲3份，二花4份，赤芍5份，甘草4份，鱼腥草2份，白头翁4份，生地3份，半夏3份，柴胡6份，枇杷叶7份，连翘4份，大青叶4份，板蓝根8份，盐2份、糖蜜50份，水850份、10亿CFU/ml布拉氏酵母菌10份，10亿CFU/ml丁酸梭菌10份，30亿CFU/ml胶质红假单胞菌10份，100亿CFU/ml饲料类芽孢杆菌10份，1亿CFU/ml苍黄链霉菌10份；将上述中草药经粉碎、浸泡、加热保温、发酵而制得预防口蹄疫的中草药活性发酵液。
其中，所述的预防口蹄疫的中草药活性发酵液的制备方法，包括如下步骤：
⑴、将从市场上购买的各种中草药单独粉碎成100目细粉；
⑵、在发酵罐中依次加入：黄芪4份，黄芩4份，黄莲3份，二花4份，赤芍5份，甘草4份，鱼腥草2份，白头翁4份，生地3份，半夏3份，柴胡6份，枇杷叶7份，连翘4份，大青叶4份，板蓝根8份，盐2份、糖蜜50份，水850份。浸泡30分钟后，加热至85℃，保温两小时，冷却至30℃；
⑶、在步骤⑵制取的冷却液加入100亿CFU/ml饲料类芽孢杆菌10份，1亿CFU/ml苍黄链霉菌10份，10亿CFU/ml布拉氏酵母菌10份；30℃-33℃，开搅拌140r/min，每分钟通无菌空气量与发酵液体积比为1：2:1；发酵36小时后，再向发酵罐中加入10亿CFU/ml丁酸梭菌10份，30亿CFU/ml胶质红假单胞菌10份，30-35℃静止培养140小时，检测其pH为3.8，活菌含量为11亿CFU/ml，即结束发酵；
⑷、放出菌液，包装成品。
实例2，用于预防口蹄疫的益生菌中草药活性发酵液的制备
用于预防口蹄疫的益生菌中草药活性发酵液的原料的重量配比范围为：黄芪3份，黄芩5份，黄莲3份，二花6份，赤芍5份，甘草3份，鱼腥草2份，白头翁4份，生地3份，半夏3份，柴胡6份，枇杷叶6份，连翘4份，大青叶6份，板蓝根8份，盐3份、糖蜜50份，水850份、10亿CFU/ml布拉氏酵母菌10份，10亿CFU/ml丁酸梭菌10份，30亿CFU/ml胶质红假单胞菌10份，100亿CFU/ml饲料类芽孢杆菌10份，1亿CFU/ml苍黄链霉菌10份；将上述中草药经粉碎、浸泡、加热保温、发酵而制得预防口蹄疫的中草药活性发酵液。
其中，预防口蹄疫的中草药活性发酵液的制备方法，包括如下步骤：
⑴、将从市场上购买的各种中草药单独粉碎成100目细粉；
⑵、在发酵罐中依次加入：黄芪3份，黄芩5份，黄莲3份，二花6份，赤芍5份，甘草3份，鱼腥草2份，白头翁4份，生地3份，半夏3份，柴胡6份，枇杷叶6份，连翘4份，大青叶6份，板蓝根8份，盐3份、糖蜜50份，水850份。浸泡30分钟后，加热至85℃，保温两小时，冷却至30℃；
⑶、在步骤⑵制取的冷却液加入100亿CFU/ml饲料类芽孢杆菌10份，1亿CFU/ml苍黄链霉菌10份，10亿CFU/ml布拉氏酵母菌10份；30℃-33℃，开搅拌140r/min，每分钟通无菌空气量与发酵液体积比为1：4:1；发酵36小时后，再向发酵罐中加入10亿CFU/ml丁酸梭菌10份，30亿CFU/ml胶质红假单胞菌10份，30-35℃静止培养140小时，检测其pH为3.5，活菌含量为12亿CFU/ml，即结束发酵；
⑷、放出菌液，包装成品。
预防口蹄疫的使用方法为添加在日常饲料中搅拌均匀，添加比例控制在0.1%-0.2%。根据实验，在沧县大褚村400头羊饲料中添加70天，试验组比对照组（400头）平均每头增重1250克，在传染病流行期间，试验组无一头羊发病，保护率100%，对照组发病55头，发病率为13.75%。

Claims (3)

1.一种预防口蹄疫的中草药活性发酵液，其特征在于，由以下重量份的原料制成：黄芪2-6份，黄芩2-6份，黄莲2-4份，二花3-7份，赤芍4-6份，甘草2-4份，鱼腥草1-3份，白头翁3-5份，生地2-4份，半夏2-4份，柴胡4-8份，枇杷叶4-8份，连翘2-6份，大青叶2-8份，板蓝根2-10份，盐2-4份、糖蜜40-60份，水850份、10亿CFU/ml布拉氏酵母菌5-15份，10亿CFU/ml丁酸梭菌5-15份，30亿CFU/ml胶质红假单胞菌5-15份，100亿CFU/ml饲料类芽孢杆菌5-15份，1亿CFU/ml苍黄链霉菌5-15份；将上述中草药经粉碎、浸泡、加热保温、发酵而制得预防口蹄疫的中草药活性发酵液。
2.根据权利要求1所述的预防口蹄疫的中草药活性发酵液的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
⑴、将从市场上购买的各种中草药单独粉碎成100目细粉；
⑵、在发酵罐中依次加入：黄芪2-6份，黄芩2-6份，黄莲2-4份，二花3-7份，赤芍4-6份，甘草2-4份，鱼腥草1-3份，白头翁3-5份，生地2-4份，半夏2-4份，柴胡4-8份，枇杷叶4-8份，连翘2-6份，大青叶2-8份，板蓝根2-10份，盐2-4份，糖蜜40-60份，水850份，浸泡30分钟后，加热至85℃，保温两小时，冷却至30℃；
⑶、在步骤⑵制取的冷却液加入100亿CFU/ml饲料类芽孢杆菌5-15份，1亿CFU/ml苍黄链霉菌5-15份，10亿CFU/ml布拉氏酵母菌5-15份；30℃-33℃，开搅拌120-160r/min，每分钟通无菌空气量与发酵液体积比为1：1-1.5:1；发酵36小时后，再向发酵罐中加入10亿CFU/ml丁酸梭菌5-15份，30亿CFU/ml胶质红假单胞菌5-15份，30-35℃静止培养120-150小时，检测其pH低于4.0，活菌含量达到10亿CFU/ml，即可结束发酵；
⑷、放出菌液，包装成品。
3.根据权利要求1所述的一种预防口蹄疫的中草药活性发酵液，其特征在于，预防口蹄疫的使用方法为添加在日常饲料中搅拌均匀，添加比例控制在0.1%-0.2%。
CN201610745874.9A 2016-08-29 2016-08-29 一种预防口蹄疫的中草药活性发酵液的制备方法 Pending CN106074941A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610745874.9A CN106074941A (zh) 2016-08-29 2016-08-29 一种预防口蹄疫的中草药活性发酵液的制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610745874.9A CN106074941A (zh) 2016-08-29 2016-08-29 一种预防口蹄疫的中草药活性发酵液的制备方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN106074941A true CN106074941A (zh) 2016-11-09

Family

ID=57224478

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610745874.9A Pending CN106074941A (zh) 2016-08-29 2016-08-29 一种预防口蹄疫的中草药活性发酵液的制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN106074941A (zh)

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106901041A (zh) * 2017-03-24 2017-06-30 合肥慧谷农业科技有限公司 一种预治猪口蹄疫的饲料添加剂及其制备方法
CN108096386A (zh) * 2017-12-31 2018-06-01 长沙善道新材料科技有限公司 一种牛羊用抗口蹄疫病毒的药剂及其制备和使用方法
CN108853309A (zh) * 2018-07-28 2018-11-23 普定县冠辉种养殖专业合作社 一种治疗牛口蹄疫药物及其制备方法
WO2019102437A1 (en) * 2017-11-27 2019-05-31 Neilos S.r.l. Composition for preventing and/or curing gastrointestinal disorders
CN110960623A (zh) * 2019-12-31 2020-04-07 山西大禹生物工程股份有限公司 家禽用抗病毒发酵中药及其制备方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101297889A (zh) * 2007-08-31 2008-11-05 天津生机集团有限公司 治疗口蹄疫的中药制剂及其制备方法
CN102961640A (zh) * 2012-12-12 2013-03-13 衡阳县金峰生猪养殖有限公司 防治猪口蹄疫的药物及其制备方法

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101297889A (zh) * 2007-08-31 2008-11-05 天津生机集团有限公司 治疗口蹄疫的中药制剂及其制备方法
CN102961640A (zh) * 2012-12-12 2013-03-13 衡阳县金峰生猪养殖有限公司 防治猪口蹄疫的药物及其制备方法

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106901041A (zh) * 2017-03-24 2017-06-30 合肥慧谷农业科技有限公司 一种预治猪口蹄疫的饲料添加剂及其制备方法
WO2019102437A1 (en) * 2017-11-27 2019-05-31 Neilos S.r.l. Composition for preventing and/or curing gastrointestinal disorders
CN108096386A (zh) * 2017-12-31 2018-06-01 长沙善道新材料科技有限公司 一种牛羊用抗口蹄疫病毒的药剂及其制备和使用方法
CN108853309A (zh) * 2018-07-28 2018-11-23 普定县冠辉种养殖专业合作社 一种治疗牛口蹄疫药物及其制备方法
CN110960623A (zh) * 2019-12-31 2020-04-07 山西大禹生物工程股份有限公司 家禽用抗病毒发酵中药及其制备方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN102366024B (zh) 一种含中药活性益生菌的猪饲料添加剂的制造方法
CN102366021B (zh) 一种含中药活性益生菌的家禽饲料添加剂的制造方法
CN1969657B (zh) 猪用中益合生素饲料添加剂
CN102366023B (zh) 一种含中药活性益生菌的奶牛饲料添加剂的制造方法
CN102232998B (zh) 增强畜禽免疫力的中药微生态制剂及其制备方法
CN102894207B (zh) 一种提高机体免疫力复合中草药猪饲料添加剂及制备方法
CN102366025B (zh) 一种含中药活性益生菌的草鱼饲料添加剂的制造方法
CN103598447A (zh) 一种无抗乳猪教槽料及其制备方法
CN106074941A (zh) 一种预防口蹄疫的中草药活性发酵液的制备方法
CN103636946B (zh) 一种黄鳝用中草药免疫增强剂的制备方法及应用
CN101912042B (zh) 一种纯天然植物性防治仔猪腹泻的饲料添加剂及应用
CN105535387B (zh) 能改善畜禽肠道腹泻酵素及其制备方法
CN106591182A (zh) 一种枯草芽孢杆菌发酵黄芪的微生态制剂及其应用
CN102367418B (zh) 猪饲料用中药益生菌固体培养基、培养方法及饲料添加剂
CN103621825A (zh) 一种黄颡鱼用发酵型中草药免疫增强剂的制备方法及应用
CN102367416B (zh) 牛饲料用中药益生菌固体培养基、培养方法及饲料添加剂
CN102920946A (zh) 一种防治猪传染病的中草药活性发酵液的制备方法
CN110521785A (zh) 益生菌发酵功能性食品及其制备
CN110946907A (zh) 雏禽用的中药组合物、液态发酵的中药制剂及其制备方法
CN102367415A (zh) 猪饲料用中药益生菌液体培养基、培养方法及饲料添加剂
CN108402322A (zh) 一种提高仔猪抗腹泻能力的饲料及其制备方法
CN107821789A (zh) 一种提高鱼虾肠道健康度的生物酵素及其制备方法和应用
CN102367420B (zh) 牛饲料用中药益生菌液体培养基、培养方法及饲料添加剂
CN104839426A (zh) 一种生物发酵饲料及其制备方法
CN110193030A (zh) 一种犬用微生态制剂及其制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20161109