CN102366025B - 一种含中药活性益生菌的草鱼饲料添加剂的制造方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种含中药活性益生菌的草鱼饲料添加剂的制造方法，包括：分别对草鱼用活性益生菌的原菌株进行单菌种菌株数量扩充培养；将相等重量的每种草鱼用活性益生菌的一级种子液进行混合，并接种到种子罐培养基中进行多菌种混合培养，然后接种到中药液体培养基中进行首次中药发酵；将多菌种混合中药发酵液与等体积的玉米芯粉混合制成固态发酵种子，再接种到中药固体培养基中进行二次中药发酵。本发明实施例的实施能够大幅提高草鱼饲料添加剂中活性益生菌的菌株活性和在肠道中的定植性能，并且使制得的草鱼饲料添加剂富含中药成分，还能使中药成分中起到药理作用的活性成分充分发挥，从而提高草鱼饲料添加剂的强体治病性能和促生长性能，有效治疗和预防“草鱼四病”，进而完全取代抗生素的使用。

Description

一种含中药活性益生菌的草鱼饲料添加剂的制造方法

技术领域

本发明涉及水产养殖领域，尤其涉及一种含中药活性益生菌的草鱼饲料添加剂的制造方法。

背景技术

草鱼是我国诸多淡水鱼中的一种，它以其肉质细嫩、个体大、肌间刺少等优点而备受消费者的喜爱。但是，草鱼抗病能力差，成活率低，在养殖过程中极易受到“草鱼四病（草鱼四病即赤皮病、烂鳃病、肠炎病和出血病）”的侵害，因此草鱼的规模化养殖受到了很大的制约。长期的生产实践证明，向草鱼注射抗生素能够预防“草鱼四病”；但是，这些抗生素会随着人们食用各种鱼肉制品进入人体，这就间接导致了抗生素的滥用，有可能引发多种药源性疾病，甚至会产生新的“超级耐药菌”，因而这种草鱼养殖方式严重威胁着人类的生命健康。

为了避免或减少在草鱼养殖过程中注射抗生素，鱼用微生态饲料添加剂应运而生。所谓鱼用微生态饲料添加剂是将对鱼有益无害的活性益生菌经过特殊工艺制成的活性益生菌制剂。鱼用微生态饲料添加剂作为一种功能性鱼饲料添加辅料，能够在无毒副作用、无耐药性、无病原性的前提下有效预防和治疗“草鱼四病”，不仅可以调节草鱼肠道微生态平衡、提高草鱼生长率、提高饲料利用率、而且可以抑制肠道有害微生物的繁殖、提高草鱼健康水平、增强草鱼免疫力。目前，在现有的草鱼养殖中，常见的鱼用微生态饲料添加剂的种类有乳酸菌制剂（包括嗜酸乳酸菌、双歧乳杆菌、粪链球菌等）、芽孢杆菌制剂（包括枯草杆菌、蜡样芽孢杆菌、地衣杆菌等）、真菌制剂（包括米曲霉菌等）、酵母菌制剂（包括啤酒酵母等）等近百种。在现有的鱼用微生态饲料添加剂生产过程中，大多仅使用蛋白质类物质和/或糖类物质作为活性益生菌的培养基，虽然菌株数量上可以满足需求，但大多数菌株的活性不高，在肠道中的定植性能较弱，因此活性益生菌作为畜禽饲料所应发挥的作用受到很大的限制；同时，活性益生仅能在一定程度上增强草鱼的体质，并不能有效治疗和预防“草鱼四病”，因此，现有的草鱼微生态饲料添加剂并不能完全取代抗生素的使用。

发明内容

本发明实施例提供了一种含中药活性益生菌的草鱼饲料添加剂的制造方法，以便于大幅提高草鱼饲料添加剂中活性益生菌的菌株活性和在肠道中的定植性能，并且使制得的草鱼饲料添加剂富含中药成分，还能使中药成分中起到药理作用的活性成分充分发挥，从而提高草鱼饲料添加剂的强体治病性能和促生长性能，有效治疗和预防“草鱼四病”，进而完全取代抗生素的使用。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

一种含中药活性益生菌的草鱼饲料添加剂的制造方法，包括：

步骤A：选取相等菌株数量的多种草鱼用活性益生菌的原菌株，并分别对每种草鱼用活性益生菌的原菌株进行单菌种菌株数量扩充培养，从而获得每种草鱼用活性益生菌的一级种子液；

其中，所述的多种草鱼用活性益生菌包括枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、啤酒酵母、产朊假丝酵母、黑曲霉、米根霉、干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌和双歧杆菌中的至少两种；

步骤B：将相等重量的每种草鱼用活性益生菌的一级种子液进行混合，从而获得多菌种混合一级种子液；

步骤C：将多菌种混合一级种子液接种到种子罐培养基中进行多菌种混合培养，从而获得多菌种混合二级种子液；

步骤D：将多菌种混合二级种子液接种到中药液体培养基中进行首次中药发酵，从而获得多菌种混合中药发酵液；

其中，所述的中药液体培养基包括5%～8%的红糖、2%～3%的中药组分、0.2%～0.3%的磷酸二氢钾、0.3%～0.5%的酵母膏和余量的水；所述的中药组分由黄芩、黄柏、当归、大黄、大清叶、甘草、红景天和葛根组成，其各成分占中药组分总量的重量份数为：

黄芩：60～80份，黄柏：60～80份，当归：40～60份，大黄：60～80份，

大清叶：60～80份，甘草：30～50份，红景天：80～100份，葛根：40～60份。

步骤E：按照重量份数计，将80～100份的多菌种混合中药发酵液、10～20份的淀粉和20～40份的糊精进行混合，并搅拌均匀；

步骤F：将步骤E搅拌均匀的混合物放入高速离心喷雾干燥塔进行干燥，从而制得含中药活性益生菌的喷雾干燥粉；

步骤G：按照重量份数计，在50～70份的所述喷雾干燥粉中混入30～50份的无水葡萄糖，从而制得含中药活性益生菌的草鱼饲料添加剂。

由上述本发明提供的技术方案可以看出，本发明实施例提供的含中药活性益生菌的草鱼饲料添加剂的制造方法采用多味中药来培养对草鱼生长和抗病能力有良好促进作用的活性益生菌，从而使中药中的活性成分充分发挥药理作用，并且使所培养出的活性益生菌的活性远高于普通培养基培养出的活性益生菌，同时还增强了活性益生菌在肠道中的定植能力；由于中药和活性益生菌对免疫系统有协同作用，因此将以中药繁殖出的活性益生菌作为草鱼用饲料添加剂，可以大大增强草鱼的免疫能力。我们通过将现代微生态学原理同中医相结合，用中药组分培养活性益生菌，从而生产出一种完全取代抗生素的无药残、防病促生长、成本低廉的草鱼用饲料添加剂。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域的普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动行的前提下，还可以根据这些附图获得其他附图。

图1为本发明实施例所提供的含中药活性益生菌的草鱼饲料添加剂的制造方法的流程示意图。

具体实施方式

下面面结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明的保护范围。

首先，需要说明的是，本申请文件中所称的份均是指重量份，下面对本发明实施例所提供的含中药活性益生菌的草鱼饲料添加剂的制造方法作一详细描述。

如图1所示，一种含中药活性益生菌的草鱼饲料添加剂的制造方法，具体可以包括以下步骤：

步骤A：选取相等菌株数量的多种草鱼用活性益生菌的原菌株，并分别对每种草鱼用活性益生菌的原菌株进行单菌种菌株数量扩充培养，从而获得每种草鱼用活性益生菌的一级种子液；

其中，所述的多种草鱼用活性益生菌包括枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、啤酒酵母、产朊假丝酵母、黑曲霉、米根霉、干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌和双歧杆菌中的至少两种；

具体地，相应的选取相等菌株数量的多种草鱼用活性益生菌的原菌株，并分别对每种草鱼用活性益生菌的原菌株进行单菌种菌株数量扩充培养，从而获得每种草鱼用活性益生菌的一级种子液可以包括：

（1）将分离提纯后的枯草芽孢杆菌的原菌株种子斜面接种到枯草芽孢杆菌培养基的三角瓶中，并振荡培养24小时，从而获得枯草芽孢杆菌的一级种子液；枯草芽孢杆菌培养基包括3份的牛肉膏、10份的蛋白胨、5份的氯化钠、20份的琼脂和1000份的水；其中，该培养基的PH值应当在7.0～7.2的范围内才能进行接种，以保证菌株活性和菌株生存状态不会遭到破坏。需要说明的是，枯草芽孢杆菌的接种比例为每500mL的枯草芽孢杆菌培养基中接种100mL的枯草芽孢杆菌。

和/或，

（2）将分离提纯后的纳豆芽孢杆菌的原菌株种子斜面接种到纳豆芽孢杆菌培养基的三角瓶中，并振荡培养24小时，从而获得纳豆芽孢杆菌的一级种子液；纳豆芽孢杆菌培养基包括3份的牛肉膏、10份的蛋白胨、5份的氯化钠、20份的琼脂和1000份的水；该培养基的PH值应当在7.0～7.2的范围内才能进行接种，以保证菌株活性和菌株生存状态不会遭到破坏。需要说明的是，纳豆芽孢杆菌的接种比例为每500mL的纳豆芽孢杆菌培养基中接种100mL的纳豆芽孢杆菌。

和/或，

（3）将分离提纯后的地衣芽孢杆菌的原菌株种子斜面接种到地衣芽孢杆菌培养基的三角瓶中，并振荡培养24小时，从而获得地衣芽孢杆菌的一级种子液；地衣芽孢杆菌培养基包括3份的牛肉膏、10份的蛋白胨、5份的氯化钠、20份的琼脂和1000份的水；该培养基的PH值应当在7.0～7.2的范围内才能进行接种，以保证菌株活性和菌株生存状态不会遭到破坏。需要说明的是，地衣芽孢杆菌的接种比例为每500mL的地衣芽孢杆菌培养基中接种100mL的地衣芽孢杆菌。

和/或，

（4）将分离提纯后的啤酒酵母的原菌株种子斜面接种到啤酒酵母培养基的三角瓶中，并振荡培养48小时，从而获得啤酒酵母的一级种子液；啤酒酵母培养基包括200份的土豆、20份的蔗糖、3份的磷酸二氢钾、1.5份的硫酸镁、20份的琼脂和1000份的水。需要说明的是，啤酒酵母的接种比例为每500mL的啤酒酵母培养基中接种100mL的啤酒酵母。

和/或，

（5）将分离提纯后的产朊假丝酵母的原菌株种子斜面接种到产朊假丝酵母培养基的三角瓶中，并振荡培养48小时，从而获得产朊假丝酵母的一级种子液；产朊假丝酵母培养基包括200份的土豆、20份的蔗糖、3份的磷酸二氢钾、1.5份的硫酸镁、20份的琼脂和1000份的水。需要说明的是，产朊假丝酵母的接种比例为每500mL的产朊假丝酵母培养基中接种100mL的产朊假丝酵母。

和/或，

（6）将分离提纯后的黑曲霉的原菌株种子斜面接种到黑曲霉培养基的三角瓶中，并振荡培养48小时，从而获得黑曲霉的一级种子液；黑曲霉培养基包括200份的土豆、20份的蔗糖、3份的磷酸二氢钾、1.5份的硫酸镁、20份的琼脂和1000份的水。需要说明的是，黑曲霉的接种比例为每500mL的黑曲霉培养基中接种100mL的黑曲霉。

和/或，

（7）将分离提纯后的米根霉的原菌株种子斜面接种到米根霉培养基的三角瓶中，并振荡培养48小时，从而获得米根霉的一级种子液；米根霉培养基包括200份的土豆、20份的蔗糖、3份的磷酸二氢钾、1.5份的硫酸镁、20份的琼脂和1000份的水。需要说明的是，米根霉的接种比例为每500mL的米根霉培养基中接种100mL的米根霉。

和/或，

（8）将分离提纯后的干酪乳杆菌的原菌株种子斜面接种到干酪乳杆菌培养基的克氏瓶中，并在37℃下培养48小时，从而获得干酪乳杆菌的一级种子液；干酪乳杆菌培养基包括20份的葡萄糖、10份的蛋白胨、10份的牛肉膏、5份的酵母膏、5份的柠檬酸钠、2份的磷酸二氢钠、5份的乙酸钠、0.2份的七水硫酸镁、0.25份的四水硫酸锰、1份的吐温80（吐温80的分子式是C₆₄H₁₂₄O₂₆，英文名称是POLYSORBATE 80，中文同义词是聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯或乳化剂T80，易溶于水、乙醇、甲醇和醋酸乙酯，主要用于做注射液及口服液的增溶剂或乳化剂，胶囊剂的分散剂，软膏剂的乳化剂和基质，栓剂的基质或是食品工业中的乳化剂）和1000份的水；该培养基的PH值应当在6.2～6.4的范围内才能进行接种，从而保证菌株能够具有较大的活性，并且保证菌株存活状态不会遭到破坏。需要说明的是，干酪乳杆菌的接种比例为每500mL的干酪乳杆菌培养基中接种100mL的干酪乳杆菌。

和/或，

（9）将分离提纯后的嗜酸乳杆菌的原菌株种子斜面接种到嗜酸乳杆菌培养基的克氏瓶中，并在37℃下培养48小时，从而获得嗜酸乳杆菌的一级种子液；嗜酸乳杆菌培养基包括20份的葡萄糖、10份的蛋白胨、10份的牛肉膏、5份的酵母膏、5份的柠檬酸钠、2份的磷酸二氢钠、5份的乙酸钠、0.2份的七水硫酸镁、0.25份的四水硫酸锰、1份的吐温80和1000份的水；该培养基的PH值应当在6.2～6.4的范围内才能进行接种，从而保证菌株能够具有较大的活性，并且保证菌株存活状态不会遭到破坏。需要说明的是，嗜酸乳杆菌的接种比例为每500mL的嗜酸乳杆菌培养基中接种100mL的嗜酸乳杆菌。

和/或，

（10）将分离提纯后的双歧杆菌的原菌株种子斜面接种到双歧杆菌培养基的克氏瓶中，并在37℃下培养48小时，从而获得双歧杆菌的一级种子液；双歧杆菌培养基包括20份的葡萄糖、10份的蛋白胨、10份的牛肉膏、5份的酵母膏、5份的柠檬酸钠、2份的磷酸二氢钠、5份的乙酸钠、0.2份的七水硫酸镁、0.25份的四水硫酸锰、1份的吐温80和1000份的水；该培养基的PH值应当在6.2～6.4的范围内才能进行接种，从而保证菌株能够具有较大的活性，并且保证菌株存活状态不会遭到破坏。需要说明的是，双歧杆菌的接种比例为每500mL的双歧杆菌培养基中接种100mL的双歧杆菌。

步骤B：将相等重量的每种草鱼用活性益生菌的一级种子液进行混合，从而获得多菌种混合一级种子液；

具体地，在实际应用中，最好从步骤A所述的10种草鱼用活性益生菌的一级种子液中均选取出相同重量一级种子液，然后进行混合，从而使最终制得的草鱼饲料添加剂兼具有这10种益生菌。

步骤C：将多菌种混合一级种子液接种到种子罐培养基中进行多菌种混合培养，从而获得多菌种混合二级种子液；

其中，相应的种子罐培养基包括3%～8%的红糖、0.2%～0.5%的磷酸二氢钾、0.3%～0.5%的酵母膏、0.3%～0.5%的蛋白胨和余量的水，此处描述的种子罐培养基的各组分含量均为质量百分数；

具体地，在实际生产使用中，为了综合制作成本和使用性能等多方面因素，该种子罐培养基的各成分占总的质量比可选用如下表1中的方案，其中该表中的实施例一为最优选方案：

表1：

实施例

红糖

磷酸二氢钾

酵母膏

蛋白胨

水

实施例一	8％	0.22％	0.5％	0.3％	余量
						实施例二	6％	0.25％	0.3％	0.5％	余量
实施例三	7％	0.2％	0.4％	0.4％	余量
						实施例四	5％	0.25％	0.5％	0.3％	余量

进一步地，相应的将多菌种混合一级种子液接种到种子罐培养基中进行多菌种混合培养，从而获得多菌种混合二级种子液可以包括以下步骤：

步骤C1：制备种子罐培养基；

步骤C2：在115℃～121℃下对种子罐培养基灭菌25分钟，再冷却至30℃；

具体地，在实际应用中，最好选用在121℃下对种子罐培养基灭菌25分钟，以保证种子罐培养基中的有害菌能完全被杀灭。

步骤C3：将多菌种混合一级种子液按照3％～5％的接种比例接种到种子罐培养基中（此处的按照3％～5％的接种比例是指每100个单位体积的种子罐培养基中接种3至5个单位体积的多菌种混合一级种子液）；

步骤C4：对接种完的种子罐培养基进行厌氧发酵，发酵装置的转速为180r/min，发酵温度为32℃，直至种子罐培养基中的PH值达到4.8时发酵完成，即获得多菌种混合二级种子液。一般情况下，种子罐培养基的厌氧发酵一般可以在48～72小时内完成，发酵完成后，活性益生菌的数目可以达到每毫升15亿株。

步骤D：将多菌种混合二级种子液接种到中药液体培养基中进行首次中药发酵，从而获得多菌种混合中药发酵液；

其中，所述的中药液体培养基包括5%～8%的红糖、2%～3%的中药组分、0.2%～0.3%的磷酸二氢钾、0.3%～0.5%的酵母膏和余量的水，此处描述的中药液体培养基的各组分含量均为质量百分数；所述的中药组分由黄芩、黄柏、当归、大黄、大清叶、甘草、红景天和葛根组成，其各成分占中药组分总量的重量份数为：

黄芩：60～80份，黄柏：60～80份，当归：40～60份，大黄：60～80份，

大清叶：60～80份，甘草：30～50份，红景天：80～100份，葛根：40～60份。

具体地，在实际生产使用中，为了综合制作成本和使用性能等多方面因素，该中药液体培养基的各成分占总的质量比可选用如下表2中的优选方案，其中该表中的实施例3为最优选实施方案：

表2：

实施例

红糖

中药组分

磷酸二氢钾

酵母膏

水

实施例1	5％	2％	0.2％	0.3％	余量
						实施例2	6％	2.5％	0.2％	0.4％	余量
实施例3	6％	3％	0.2％	0.5％	余量
						实施例4	7％	2.5％	0.3％	0.4％	余量
实施例5	8％	3％	0.3％	0.5％	余量

与之相对应的，相应的中药组分的成分，及其各成分占中药组分总量的重量份数可选用如下表3中的优选方案，其中该表中的单位均为重量份，实施例a为最优选实施方案：

表3：

中药成分名称	实例a	实例b	实例c	实例d
					黄芩	80	75	75	70
黄柏	80	75	75	80
					当归	50	60	55	50
大黄	60	65	60	60
					大清叶	60	65	60	65
甘草	40	30	30	40
					红景天	100	90	80	100
葛根	50	60	50	40

进一步地，相应的将多菌种混合二级种子液接种到中药液体培养基中进行首次中药发酵，从而获得多菌种混合中药发酵液可以包括以下步骤：

步骤D1：制备中药液体培养基；

步骤D2：在115℃～121℃下对中药液体培养基灭菌20分钟，再冷却至30℃；

具体地，在实际应用中，最好选用在121℃下对中药液体培养基灭菌20分钟，以保证中药液体培养基中的有害菌能完全被杀灭。

步骤D3：将多菌种混合二级种子液按照5％～10％的接种比例接种到中药液体培养基中（此处的按照5％～10％的接种比例是指每100个单位体积的中药液体培养基中接种5至10个单位体积的多菌种混合二级种子液）；

步骤D4：对接种完的中药液体培养基进行厌氧发酵，发酵装置的转速为180r/min，发酵温度为32℃，直至中药液体培养基中的PH值达到5.0时发酵完成，即获得多菌种混合中药发酵液；一般情况下，中药液体培养基的厌氧发酵一般可以在48～72小时内完成，发酵完成后，活性益生菌的数目可以达到每毫升20亿株。

步骤E：按照重量份数计，将80～100份的多菌种混合中药发酵液、10～20份的淀粉和20～40份的糊精进行混合，并搅拌均匀；

步骤F：将步骤E搅拌均匀的混合物放入高速离心喷雾干燥塔进行干燥，从而制得含中药活性益生菌的喷雾干燥粉；

具体地，在实际应用中，高速离心喷雾干燥塔的进风口温度最好在100℃～115℃之间，其出风口温度最好在67℃～72℃之间，其离心机的转速最好为每分钟12000转。本发明中所述的高速离心喷雾干燥塔可以为现有技术中可通过商业手段轻易购得的各种高速离心喷雾干燥塔，其干燥工艺也可以为现有技术中适合高速离心喷雾干燥塔的各种干燥工艺，本申请文件中对高速离心喷雾干燥塔及其干燥工艺不再详细描述。

步骤G：按照重量份数计，在50～70份的所述喷雾干燥粉中混入30～50份的无水葡萄糖，从而制得含中药活性益生菌的草鱼饲料添加剂。

在上述技术方案中，本发明所述的中药组分的各成分的功效为：黄芩——主要活性成分为黄芩甙，抗真菌、抗病毒；黄柏——含小蘖碱具有较强的抑菌功能；当归——味甘性温，既能补血，又能活血，其活性成分阿魏酸钠能激活巨噬细胞，起到免疫功能；大黄——活性成分为大黄蒽醌衍生物，其抑菌作用强；大青叶——活性成分为靛玉红，其作用抗病毒和增强免疫力；红景天——主要活性成分为黄酮和红景天苷不仅能提高机体免疫力并使机体抗缺氧；葛根——活性成分为大豆苷元和葛根素，能促进机体微循环、耐低氧；甘草——具有清热解毒，调和诸药，其活性成分甘草酸是细胞免疫调节剂。本发明所提及的中药组分是根据草鱼的生长特点、“草鱼四病”的治疗和预防机理以及草鱼养殖过程中的养殖需求，分别选取能够增强草鱼机体免疫力、能够提高草鱼抗病能力的几味中药配制而成——首先选用当归、红景天、葛根提高动物机体免疫力,并能够耐低氧，预防草鱼在低氧条件下浮头死亡：同时选用黄芩、黄柏、大黄、大青叶提高其抗菌抗病毒能力；最后选用甘草不仅能够清热解毒而且还能调和其余诸药。由此可见，本发明所提供的中药组分不仅能够提升草鱼的生长速度，提高草鱼免疫力，而且能够增强草鱼的防病抗病能力，因而能够有效治疗和预防“草鱼四病”。

需要说明的是，本发明所使用的菌株培养设备以及未详细描述的菌株培养工艺均可以采用现有技术中通用的菌株培养设备和菌株培养工艺，在本申请中不再作详细描述。本发明中所述的各种中药在各大中药药房中均可轻易购得，因此对此不再详述。本发明中所述的各种活性益生菌菌的原菌株均可以从中国普通微生物菌种保藏管理中心（CGMCC）或农业微生物菌种保藏管理中心（ACCC）引进，以确保各菌种的存活状态和存活质量。

可见，本发明实施例的实施能够大幅提高草鱼饲料添加剂中活性益生菌的菌株活性和在肠道中的定植性能，并且使制得的草鱼饲料添加剂富含中药成分，还能使中药成分中起到药理作用的活性成分充分发挥，有效治疗和预防“草鱼四病”，从而提高草鱼饲料添加剂的强体治病性能和促生长性能，进而完全取代抗生素的使用。

以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到的变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应该以权利要求书的保护范围为准。

Claims (5)

1.一种含中药活性益生菌的草鱼饲料添加剂的制造方法，其特征在于，包括：

步骤A：选取相等菌株数量的多种草鱼用活性益生菌的原菌株，并分别对每种草鱼用活性益生菌的原菌株进行单菌种菌株数量扩充培养，从而获得每种草鱼用活性益生菌的一级种子液；

其中，所述的多种草鱼用活性益生菌包括枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、啤酒酵母、产朊假丝酵母、黑曲霉、米根霉、干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌和双歧杆菌中的至少两种；

步骤B：将相等重量的每种草鱼用活性益生菌的一级种子液进行混合，从而获得多菌种混合一级种子液；

步骤C：将多菌种混合一级种子液接种到种子罐培养基中进行多菌种混合培养，从而获得多菌种混合二级种子液；

步骤D：将多菌种混合二级种子液接种到中药液体培养基中进行首次中药发酵，从而获得多菌种混合中药发酵液；

其中，所述的中药液体培养基包括5%～8%的红糖、2%～3%的中药组分、0.2%～0.3%的磷酸二氢钾、0.3%～0.5%的酵母膏和余量的水；所述的中药组分由黄芩、黄柏、当归、大黄、大清叶、甘草、红景天和葛根组成，其各成分占中药组分总量的重量份数为：

黄芩：60～80份，黄柏：60～80份，当归：40～60份，大黄：60～80份，

大清叶：60～80份，甘草：30～50份，红景天：80～100份，葛根：40～60份；

步骤E：按照重量份数计，将80～100份的多菌种混合中药发酵液、10～20份的淀粉和20～40份的糊精进行混合，并搅拌均匀；

步骤F：将步骤E搅拌均匀的混合物放入高速离心喷雾干燥塔进行干燥，从而制得含中药活性益生菌的喷雾干燥粉；

步骤G：按照重量份数计，在50～70份的所述喷雾干燥粉中混入30～50份的无水葡萄糖，从而制得含中药活性益生菌的草鱼饲料添加剂。

2.根据权利要求1所述的含中药活性益生菌的草鱼饲料添加剂的制造方法，其特征在于，所述的选取相等菌株数量的多种草鱼用活性益生菌的原菌株，并分别对每种草鱼用活性益生菌的原菌株进行单菌种菌株数量扩充培养，从而获得每种草鱼用活性益生菌的一级种子液包括： 

将分离提纯后的枯草芽孢杆菌的原菌株种子斜面接种到枯草芽孢杆菌培养基的三角瓶中，并振荡培养24小时，从而获得枯草芽孢杆菌的一级种子液；枯草芽孢杆菌培养基包括3份的牛肉膏、10份的蛋白胨、5份的氯化钠、20份的琼脂和1000份的水；

和/或，

将分离提纯后的纳豆芽孢杆菌的原菌株种子斜面接种到纳豆芽孢杆菌培养基的三角瓶中，并振荡培养24小时，从而获得纳豆芽孢杆菌的一级种子液；纳豆芽孢杆菌培养基包括3份的牛肉膏、10份的蛋白胨、5份的氯化钠、20份的琼脂和1000份的水；

和/或，

将分离提纯后的地衣芽孢杆菌的原菌株种子斜面接种到地衣芽孢杆菌培养基的三角瓶中，并振荡培养24小时，从而获得地衣芽孢杆菌的一级种子液；地衣芽孢杆菌培养基包括3份的牛肉膏、10份的蛋白胨、5份的氯化钠、20份的琼脂和1000份的水；

和/或，

将分离提纯后的啤酒酵母的原菌株种子斜面接种到啤酒酵母培养基的三角瓶中，并振荡培养48小时，从而获得啤酒酵母的一级种子液；啤酒酵母培养基包括200份的土豆、20份的蔗糖、3份的磷酸二氢钾、1.5份的硫酸镁、20份的琼脂和1000份的水；

和/或，

将分离提纯后的产朊假丝酵母的原菌株种子斜面接种到产朊假丝酵母培养基的三角瓶中，并振荡培养48小时，从而获得产朊假丝酵母的一级种子液；产朊假丝酵母培养基包括200份的土豆、20份的蔗糖、3份的磷酸二氢钾、1.5份的硫酸镁、20份的琼脂和1000份的水；

和/或，

将分离提纯后的黑曲霉的原菌株种子斜面接种到黑曲霉培养基的三角瓶中，并振荡培养48小时，从而获得黑曲霉的一级种子液；黑曲霉培养基包括200份的土豆、20份的蔗糖、3份的磷酸二氢钾、1.5份的硫酸镁、20份的琼脂和1000份的水；

和/或，

将分离提纯后的米根霉的原菌株种子斜面接种到米根霉培养基的三角瓶中，并振荡培养48小时，从而获得米根霉的一级种子液；米根霉培养基包括200份的土豆、20份的蔗糖、3份的磷酸二氢钾、1.5份的硫酸镁、20份的琼脂和1000份的水；

和/或，

将分离提纯后的干酪乳杆菌的原菌株种子斜面接种到干酪乳杆菌培养基的克氏瓶中， 并在37℃下培养48小时，从而获得干酪乳杆菌的一级种子液；干酪乳杆菌培养基包括20份的葡萄糖、10份的蛋白胨、10份的牛肉膏、5份的酵母膏、5份的柠檬酸钠、2份的磷酸二氢钠、5份的乙酸钠、0.2份的七水硫酸镁、0.25份的四水硫酸锰、1份的吐温80和1000份的水；

和/或，

将分离提纯后的嗜酸乳杆菌的原菌株种子斜面接种到嗜酸乳杆菌培养基的克氏瓶中，并在37℃下培养48小时，从而获得嗜酸乳杆菌的一级种子液；嗜酸乳杆菌培养基包括20份的葡萄糖、10份的蛋白胨、10份的牛肉膏、5份的酵母膏、5份的柠檬酸钠、2份的磷酸二氢钠、5份的乙酸钠、0.2份的七水硫酸镁、0.25份的四水硫酸锰、1份的吐温80和1000份的水；

和/或，

将分离提纯后的双歧杆菌的原菌株种子斜面接种到双歧杆菌培养基的克氏瓶中，并在37℃下培养48小时，从而获得双歧杆菌的一级种子液；双歧杆菌培养基包括20份的葡萄糖、10份的蛋白胨、10份的牛肉膏、5份的酵母膏、5份的柠檬酸钠、2份的磷酸二氢钠、5份的乙酸钠、0.2份的七水硫酸镁、0.25份的四水硫酸锰、1份的吐温80和1000份的水。

3.根据权利要求1或2所述的含中药活性益生菌的草鱼饲料添加剂的制造方法，其特征在于，所述的将多菌种混合一级种子液接种到种子罐培养基中进行多菌种混合培养，从而获得多菌种混合二级种子液包括以下步骤：

步骤C1：制备种子罐培养基；

其中，所述的种子罐培养基包括3%～8%的红糖、0.2%～0.5%的磷酸二氢钾、0.3%～0.5%的酵母膏、0.3%～0.5%的蛋白胨和余量的水；

步骤C2：在115℃～121℃下对种子罐培养基灭菌25分钟，再冷却至30℃；

步骤C3：将多菌种混合一级种子液按照3％～5％的接种比例接种到种子罐培养基中；

步骤C4：对接种完的种子罐培养基进行厌氧发酵，发酵装置的转速为180r/min，发酵温度为32℃，直至种子罐培养基中的PH值达到4.8时发酵完成，即获得多菌种混合二级种子液。

4.根据权利要求1或2所述的含中药活性益生菌的草鱼饲料添加剂的制造方法，其特征在于，所述的将多菌种混合二级种子液接种到中药液体培养基中进行首次中药发酵，从而获得多菌种混合中药发酵液包括以下步骤：

步骤D1：制备中药液体培养基； 

步骤D2：在115℃～121℃下对中药液体培养基灭菌20分钟，再冷却至30℃；

步骤D3：将多菌种混合二级种子液按照5％～10％的接种比例接种到中药液体培养基中；

步骤D4：对接种完的中药液体培养基进行厌氧发酵，发酵装置的转速为180r/min，发酵温度为32℃，直至中药液体培养基中的PH值达到5.0时发酵完成，即获得多菌种混合中药发酵液。

5.根据权利要求1或2所述的含中药活性益生菌的草鱼饲料添加剂的制造方法，其特征在于，所述的将步骤E搅拌均匀的混合物放入高速离心喷雾干燥塔进行干燥，从而制得含中药活性益生菌的喷雾干燥粉包括：

高速离心喷雾干燥塔的进风口温度在100℃～115℃之间，其出风口温度在67℃～72℃之间，其离心机的转速为每分钟12000转。 

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