CN108740294A - 一种复合菌种发酵胃肠活的制备方法 - Google Patents

一种复合菌种发酵胃肠活的制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明属于微生物繁殖过程中添加中药的发酵技术，尤其涉及一种复合菌种发酵胃肠活的制备方法；取胃肠活组方采用复合菌种固态发酵菌种进行发酵，凝结芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌存在协同作用，而且均能产酸共同促进胃肠活中纤维素的降解，野甘草拟盘多毛孢菌和大黄欧文氏菌都是胃肠活主要成分的内生菌，均能大幅提升有效成分的含量，提高胃肠活的疗效，四种菌共同发酵胃肠活大幅胃肠活提升了药效，解决了原来纯中药难于治疗的疾病，带来了丰厚的经济效益，更适应市场需求。

Description

一种复合菌种发酵胃肠活的制备方法
技术领域
本发明属于微生物繁殖过程中添加中药的发酵技术，尤其涉及一种复合菌种发酵胃肠活的制备方法。
背景技术
胃肠活主要由黄芪、绞股蓝、山药、甘草、山楂、大黄、牵牛子等中药组成，这几种中药都是植物性药材，富含纤维素，尤其是黄芪，主要成分黄芪多糖均镶嵌在纤维素中，有部分黄芪多糖和纤维形成了结合态，极难溶出，而且禽类消化系统无法充分消化纤维素，造成中药中的有效成分难于利用，严重影响胃肠活的药效。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术中存在的不足，而提供的复合菌种发酵胃肠活的制备方法。
本发明的目的是这样实现的：一种复合菌种发酵胃肠活的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：
步骤1）、取胃肠活组方中的黄芪1～50份、绞股蓝1～50份、山药1～50份、甘草1～50份、山楂1～50份、大黄1～50份、牵牛子1～50份；水洗后烘干、然后粉碎成粉末，粉末大小为40-80目；得到中药粉剂，备用；
步骤2）、采用复合菌种固态发酵菌种进行发酵，采用的复合菌种固态发酵菌种分别为：凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、野甘草拟盘多毛孢菌、大黄欧文氏菌；
步骤3）、使用培养基分别对凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、野甘草拟盘多毛孢菌、大黄欧文氏菌进行培养，分别获得凝结芽孢杆菌原菌液、枯草芽孢杆菌原菌液、野甘草拟盘多毛孢菌原菌液、大黄欧文氏菌原菌液；然后对提纯后的凝结芽孢杆菌原菌液、枯草芽孢杆菌原菌液、野甘草拟盘多毛孢菌原菌液、大黄欧文氏菌原菌液从斜面接入三角瓶中，振荡培养45-50小时；
步骤4）、取红糖、磷酸二氢钾、氯化钠、黄腐酸、豆粕、中药粉剂制作培养基，成分重量份数及加入比例是：红糖3～5%、磷酸二氢钾0.2～0.5%、氯化钠0.4～0.6%、黄腐酸0.4～0.6%、豆粕5～10%、中药粉剂40～50％，余量为水；
步骤5）、将步骤4）获得的培养基加热至35℃时接种，将步骤3）振荡培养后得到的凝结芽孢杆菌原菌液、枯草芽孢杆菌原菌液、野甘草拟盘多毛孢菌原菌液、大黄欧文氏菌原菌液分别接种到培养基中，接种量为4％；
步骤6）、采用好氧发酵，温度35℃，发酵时间48~72小时，当PH值达到5.0时完成发酵，发酵完成以后晒干即得所述的复合菌种发酵胃肠活。
所述的步骤3）所述的培养基为：红糖和水。
所述的步骤5）中凝结芽孢杆菌原菌液、枯草芽孢杆菌原菌液、野甘草拟盘多毛孢菌原菌液、大黄欧文氏菌原菌液的接种比例为：1：1：1：1。
本发明将现代生物工程技术与传统的中药制剂方法相结合，将生物菌发酵技术应用到中药应用中，分解纤维素，让有效成分易于溶出，同时药物有效成分变成小分子更易被吸收，更易到达靶器官发挥作用，从而提高了中药的药效和生物利用度。应用益生菌发酵生产的中药制剂中，不仅含有中药有效作用的生理活性成分，而且还富含有菌种和基质在发酵制备过程中产生的多种抗菌肽、丰富的有机酸及多种有益的氨基酸。这些成分组分合理，极易被机体吸收和利用。同时微生物在繁殖过程中加入了中药，对微生物进行了定向筛选，让微生物及其副产物表达出一部分中药的特性。凝结芽孢杆菌是兼性厌氧菌，能够产生的L-乳酸能降低肠道pH 值，抑制有害菌，并能促进双歧杆菌等有益菌的生长和繁殖，治疗因肠道菌群失调引起的急、慢性腹泻、慢性便秘、腹胀和消化不良等症。枯草芽孢杆菌能够有效抑制致病菌，促进有益厌氧菌生长，并产生乳酸等有机酸类，降低肠道PH值，间接抑制其它致病菌生长。提高免疫球蛋白和抗体水平，增强细胞免疫和体液免疫功能，提高群体免疫力。野甘草拟盘多毛孢菌是甘草的一种内生菌，它的繁殖可以增加甘草皂苷的含量，增强甘草效果；大黄欧文氏菌是从大黄中分离的一种内生菌，它能够形成大黄素类似物，加强大黄药效；这四种菌，凝结芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌存在协同作用，而且均能产酸共同促进胃肠活中纤维素的降解，野甘草拟盘多毛孢菌和大黄欧文氏菌都是胃肠活主要成分的内生菌，均能大幅提升有效成分的含量，提高胃肠活的疗效，四种菌共同发酵胃肠活大幅胃肠活提升了药效，解决了原来纯中药难于治疗的疾病，带来了丰厚的经济效益，更适应市场需求。
具体实施方式
实施例1：一种复合菌种发酵胃肠活的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：
步骤1）、取胃肠活组方中的黄芪1～50份、绞股蓝1～50份、山药1～50份、甘草1～50份、山楂1～50份、大黄1～50份、牵牛子1～50份；水洗后烘干、然后粉碎成粉末，粉末大小为40-80目；得到中药粉剂，备用；
步骤2）、采用复合菌种固态发酵菌种进行发酵，采用的复合菌种固态发酵菌种分别为：凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、野甘草拟盘多毛孢菌、大黄欧文氏菌；
步骤3）、使用培养基分别对凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、野甘草拟盘多毛孢菌、大黄欧文氏菌进行培养，培养基为：红糖和水；分别获得凝结芽孢杆菌原菌液、枯草芽孢杆菌原菌液、野甘草拟盘多毛孢菌原菌液、大黄欧文氏菌原菌液；然后对提纯后的凝结芽孢杆菌原菌液、枯草芽孢杆菌原菌液、野甘草拟盘多毛孢菌原菌液、大黄欧文氏菌原菌液从斜面接入三角瓶中，振荡培养45-50小时；
步骤4）、取红糖、磷酸二氢钾、氯化钠、黄腐酸、豆粕、中药粉剂制作培养基，成分重量份数及加入比例是：红糖3～5%、磷酸二氢钾0.2～0.5%、氯化钠0.4～0.6%、黄腐酸0.4～0.6%、豆粕5～10%、中药粉剂40～50％，余量为水；
步骤5）、将步骤4）获得的培养基加热至35℃时接种，将步骤3）振荡培养后得到的凝结芽孢杆菌原菌液、枯草芽孢杆菌原菌液、野甘草拟盘多毛孢菌原菌液、大黄欧文氏菌原菌液分别接种到培养基中，接种量为4％；凝结芽孢杆菌原菌液、枯草芽孢杆菌原菌液、野甘草拟盘多毛孢菌原菌液、大黄欧文氏菌原菌液的接种比例为：1：1：1：1；
步骤6）、采用好氧发酵，温度35℃，发酵时间48~72小时，当PH值达到5.0时完成发酵，发酵完成以后晒干即得所述的复合菌种发酵胃肠活。
本发明，所述的各种菌的原菌种，均从农业微生物菌种保藏管理中心（ACCC）引进，或者本公司实验室自己分离。确保了各菌种的存活和质量。
对比实验：
选取28头胎次、体重相近的10千克左右的三元杂交猪，随机分成2组，以圈为单位进行饲养，试验期为115天。以玉米-豆粕为基础日粮，试验组在基础日粮中添加复合菌种发酵胃肠活，对照组基础日粮和试验组一致，在基础日粮的基础上添加未发酵的胃肠活。各猪只饲养管理条件一致，自由采食和饮水，按猪场常规程序进行驱虫和免疫。
1、对育肥猪生长性能的影响
试验开始和结束时以圈为单位分别测定猪体重，计算平均日增重，并每天记录猪采食量，进而计算料肉比。结果如表1所示。
表1 对育肥猪生长性能的影响
由表1可知，试验组能显著提高育肥猪的生长性能，明显优于对照组。
2、对血清生化指标的影响
在试验结束时，选取试验组和对照组屠宰前每个重复随机选取1头猪，前腔静脉采血10mL，室温下倾斜放置30min，3600r/min离心10min，分离血清于-20 ℃保存，用分析仪及试剂盒测定血清尿素氮（SUN）含量。结果如表2所示。
表2对血清生化指标的影响
试验组 对照组
SUN/（mmol/L） 3.24±0.96a 4.06±0.68b
由表2可知，试验组中血清尿素氮（SUN）显著低于对照组，说明试验组大幅提升了氮的利用率，降低了氮的排放量，将饲料中的氮转化为蛋白质，提高了经济效益。
具体案例1
2017年10月，新乡市获嘉县张某养殖肉鸡4000只，15龄，鸡体消瘦，采食量下降，粪便稀薄，而且发白，用水冲后，有很多未消化的饲料出现．问诊时，该养殖户说前几天鸡群得了球虫病，治愈后，就出现了这种情况。经诊断可以确定为鸡群经过球虫病后，鸡的肠道没有恢复正常所致。
取本发明1000克拌料500斤，连用5天，5天后鸡群恢复正常，采食量迅速上升，粪便颜色变黑，用水冲粪便几乎见不到饲料。
具体案例2
2017年11月，洛阳市偃师市张某饲养了3000只蛋鸡，常规饲养．按正常的免疫程序进行免疫。7月龄时，鸡群突然发生慢性呼吸道病并发大肠杆菌病，经过7天药物治疗疾病基本痊愈，病前产蛋率在96.5%，治愈一周后鸡群采食量偏低，产蛋率维持在72%左右，而且上升缓慢。
取本发明1000克拌料500斤，配合饮水。5天后鸡群采食量恢复到正常，10天后产蛋率已逐步回升到93%。
具体案例3
2017年8月，南阳市新野县刘某饲养560头育肥猪，有一半猪得了病毒性腹泻，经过10天治疗，基本痊愈。猪群采食量迟迟不能恢复，同时猪的粪便不成型，背毛杂乱。粪便中发现大量没有消化的玉米粒。
取本发明1000克拌料300斤， 5天后猪群采食量迅速上升，粪便已然发黑成型，10后脊背发红，背毛光亮，猪群恢复健康。

Claims (3)

1.一种复合菌种发酵胃肠活的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：
步骤1）、取胃肠活组方中的黄芪1～50份、绞股蓝1～50份、山药1～50份、甘草1～50份、山楂1～50份、大黄1～50份、牵牛子1～50份；水洗后烘干、然后粉碎成粉末，粉末大小为40-80目；得到中药粉剂，备用；
步骤2）、采用复合菌种固态发酵菌种进行发酵，采用的复合菌种固态发酵菌种分别为：凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、野甘草拟盘多毛孢菌、大黄欧文氏菌；
步骤3）、使用培养基分别对凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、野甘草拟盘多毛孢菌、大黄欧文氏菌进行培养，分别获得凝结芽孢杆菌原菌液、枯草芽孢杆菌原菌液、野甘草拟盘多毛孢菌原菌液、大黄欧文氏菌原菌液；然后对提纯后的凝结芽孢杆菌原菌液、枯草芽孢杆菌原菌液、野甘草拟盘多毛孢菌原菌液、大黄欧文氏菌原菌液从斜面接入三角瓶中，振荡培养45-50小时；
步骤4）、取红糖、磷酸二氢钾、氯化钠、黄腐酸、豆粕、中药粉剂制作培养基，成分重量份数及加入比例是：红糖3～5%、磷酸二氢钾0.2～0.5%、氯化钠0.4～0.6%、黄腐酸0.4～0.6%、豆粕5～10%、中药粉剂40～50％，余量为水；
步骤5）、将步骤4）获得的培养基加热至35℃时接种，将步骤3）振荡培养后得到的凝结芽孢杆菌原菌液、枯草芽孢杆菌原菌液、野甘草拟盘多毛孢菌原菌液、大黄欧文氏菌原菌液分别接种到培养基中，接种量为4％；
步骤6）、采用好氧发酵，温度35℃，发酵时间48~72小时，当PH值达到5.0时完成发酵，发酵完成以后晒干即得所述的复合菌种发酵胃肠活。
2.根据权利要求1所述的复合菌种发酵胃肠活的制备方法，其特征在于：所述的步骤3）所述的培养基为：红糖和水。
3.根据权利要求1所述的复合菌种发酵胃肠活的制备方法，其特征在于：所述的步骤5）中凝结芽孢杆菌原菌液、枯草芽孢杆菌原菌液、野甘草拟盘多毛孢菌原菌液、大黄欧文氏菌原菌液的接种比例为：1：1：1：1。
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