CN103451144B - 微生物生长促进剂、其制备方法及用途 - Google Patents

Abstract

本发明是有关于一种微生物生长促进剂、其制备方法及用途，其中该微生物生长促进剂是以可作中药的杜仲叶为原料，具无毒、无残留等特点，将其用于培养益生菌时，可显著增加活性菌的数量，缩短发酵时间。本发明的应用大大提高了我国益生菌的发酵技术水平，同时也有力地促进我国益生菌产业的发展。

Description

微生物生长促进剂、其制备方法及用途

技术领域

本发明涉及一种纯天然的微生物生长促进剂，尤其涉及一种无毒、无残留、生态型微生物生长促进剂、其制备方法及用途。

背景技术

生物技术是我国十二五发展规划七大重点发展产业之一，也是全球性优先发展领域。美国专家预言，二十一世纪是益生菌世界，而生物技术的切入点就是益生菌，益生菌（Probiotics）又称益生素，是指投入后通过改善宿主肠道菌群生态平衡而发挥有益作用，达到提高宿主（人和动物）健康水平佳态的活菌制剂及其代谢产物。

当人类面临感染的威胁时，抗生素被发现，它的应用为人类的保健事业和动植物病虫害防治发挥了巨大的作用，伴随着耐药性病原体的出现使抗生素抵抗耐药性病原体的能力不断下降，因此抗生素的替代疗法已迫在眉睫，益生菌便是最有前景的抗生素替代疗法之一。

1905年俄国科学家梅奇尼科夫发现高加索地区居民长寿者较多，原因是由于食用酸奶，提出“酸奶长寿说”。到上世纪70年代，对肠道微生态系统研究的不断发展，直到上世纪90年代，分子生物学对益生菌功效机理进行了阐明，经过一个多世纪的经验证明益生菌具有重要的生理功能。主要作用体现在它能够使人体或动物肠道的正常菌群通过黏附功能，产生短链脂肪酸及特殊酸系等方式帮助宿主发挥正常生理功能，使其能够主动防御，控制病原体感染。临床应用已有大量益生菌制剂用于治疗腹泻、便秘和增强免疫的报道。其中，人用药品乳酶生就是一种乳酸肠链球菌的活菌制剂。国家标准规定，乳酶生含活性肠链球菌数每克不得少于1000万个，粉剂有效期二年，片剂有效期一年半，该品种在我国的生产历史长达40年余年，至今仍然畅销不衰。据生产企业介绍，乳酶生产量的80%，都被大量用于畜禽当作饲料添加剂使用，且应用效果良好，预防和治疗畜禽肠道疾病以及促进畜禽生长发育效果十分显著。

然而，益生菌制剂发挥作用的前提是活菌数量，活菌数量的多少直接关系到具有重要功能代谢产物的多少，代谢产物越丰富，使最终制剂的质量越好，产品的发酵液中活菌浓度越高经济和社会效益就越显著。因此如何优化传统几十年不变的活菌制剂培养配方及方法，研究生产高浓度、高活力的活菌制剂的发酵技术亟待解决。

发明内容

本发明的主要目的在于提供一种微生物生长促进剂，其以可作中药的杜仲叶为原料，具无毒、无残留等特点，将其用于培养益生菌时，可显著增加活性菌的数量，缩短发酵时间。

本发明的另一目的在于提供一种制备上述微生物生长促进剂的方法。

本发明的再一目的在于提供一种上述微生物生长促进剂在培养益生菌方面的用途。

本发明的目的及解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的。依据本发明提出的微生物生长促进剂，其制备原料为杜仲叶片。

本发明的目的及解决其技术问题还可采用以下技术措施进一步实现。

较优地，前述的微生物生长促进剂，其包括以下含量的成分：总糖含量≥15%，绿原酸含量≥0.4%，总黄酮含量≥1.8%,京尼平苷酸含量≥1.8%，桃叶珊瑚甙含量≥0.8%，蛋白质含量≥1.2%，水分≤6.0%。。

较优地，前述的微生物生长促进剂，其制备方法包括以下步骤：

a.原料预处理：将去杂干净的采摘于每年9～10月份的新鲜杜仲叶片按照中国药典的质量要求，经检验合格后，进行干燥处理；

b.纯水浸泡阶段：将杜仲干叶和水按照1:6～1:8的比例混合，放置于多功能提取罐，搅拌均匀后，浸泡1～4h；

c.加热提取：将步骤b中杜仲叶和水的混合物通蒸汽加热至70～80℃，循环提取1～3h，将提取液经过粗滤，泵至贮液罐，二次提取时，水与杜仲叶按2～4倍的比例混合，提取温度和时间与第一次相同；

d.浓缩干燥阶段：将步骤c中的提取液，经过膜分离浓缩调整，并控制膜分离循环泵进口压力保持0.5MPa，出口压力0.2～0.3MPa，浓缩液密度为1.10～1.15g/mL时，打入真空泵；再经喷雾干燥制备成成品，进行离心喷雾干燥时，控制进风温度为160～180℃，出风温度60～80℃。

本发明的目的及解决其技术问题还采用以下技术方案来实现。依据本发明提出的前述的微生物生长促进剂的制备方法，其包括以下步骤：

a.原料预处理：将去杂干净的杜仲叶片按照中国药典的质量要求，经检验合格后，进行干燥处理；

b.纯水浸泡阶段：将杜仲干叶和水混合，搅拌均匀后，浸泡；

c.加热提取：将步骤b中的杜仲叶，进行提取；

d.浓缩干燥阶段：将步骤c中的提取液，进行浓缩、干燥制备成成品。

本发明的目的及解决其技术问题还可采用以下技术措施进一步实现。

较优地，前述的微生物生长促进剂的制备方法，步骤a中所述的杜仲叶片是每年9～10月份采摘的新鲜叶片，经太阳暴晒或经高温瞬间杀毒干燥。

较优地，前述的微生物生长促进剂的制备方法，步骤b中所述的水与杜仲叶片按照6～8倍的比例混合，浸泡1～4h。

较优地，前述的微生物生长促进剂的制备方法，步骤c中，杜仲叶和水的混合物通蒸汽加热至温度70～80℃，循环提取1～3h，将提取液经过粗滤，泵至贮液罐，二次提取时，水与杜仲叶按2～4倍的比例混合，提取温度和时间相同于第一次。

较优地，前述的微生物生长促进剂的制备方法，其特征在于步骤d中杜仲叶水提取液，经过膜分离浓缩调整，并控制膜分离循环泵进口压力保持0.5MPa，出口压力0.2～0.3MPa，浓缩液密度为1.10～1.15g/mL时，打入真空泵。

较优地，前述的微生物生长促进剂的制备方法，步骤d中浓缩液进行离心喷雾干燥，控制进风温度为160～180℃，出风温度60～80℃。

本发明的目的及解决其技术问题另外再采用以下技术方案来实现。依据本发明提出的前述的微生物生长促进剂在培养益生菌方面的用途。

本发明的目的及解决其技术问题还可采用以下技术措施进一步实现。

较优地，前述的微生物生长促进剂在培养益生菌方面的用途，其中所述的微生物生长促进剂适应益生菌培养基配方的使用菌种包括：乳酸菌、枯草芽孢杆菌和酵母菌，加入量按培养基配方0.5～1.0%的比例加入到乳酸菌、枯草芽孢杆菌和酵母菌培养基配方中。

借由上述技术方案，本发明至少具有下列优点及有益效果：其以可作中药的杜仲叶为原料，具无毒、无残留等特点，将其用于培养益生菌时，可显著增加活性菌的数量，缩短发酵时间，例如：将本发明的微生物生长促进剂加入量按培养基配方0.5～1.0%的比例增加到乳酸菌、枯草芽孢杆菌和酵母菌培养基配方中，经过实际生产应用后，结果表明乳酸菌、枯草芽孢杆菌和酵母菌在发酵条件不变的情况下，活性菌剂分别增加40%～100%，发酵时间缩短14%～29%。本发明的应用大大提高了我国益生菌的发酵技术水平，同时也有力地促进我国益生菌产业的发展。

上述说明仅是本发明技术方案的概述，为了能够更清楚了解本发明的技术手段，而可依照说明书的内容予以实施，并且为了让本发明的上述和其他目的、特征和优点能够更明显易懂，以下特举较佳实施例，详细说明如下。

具体实施方式

为更进一步阐述本发明为达成预定发明目的所采取的技术手段及功效,以下结合较佳实施例，对依据本发明提出的微生物生长促进剂、其制备方法及用途其具体实施方式、方法、步骤、特征及其功效，详细说明如后。

实施例1：

a.原料预处理：将9～10月份采摘的新鲜、去杂后的杜仲叶片，按照中国药典的质量要求，经检验合格后，进行太阳暴晒或经高温瞬间杀毒干燥。

b.纯水浸泡阶段：将步骤a中预处理后的杜仲叶与水按照1：8比例混合，放置于多功能提取罐，搅拌均匀后，浸泡1小时。

c.低温加热提取：将步骤b中杜仲叶和水的混合物通蒸汽加热至温度70℃，循环提取4小时，将提取液经过粗滤，泵至贮液罐，二次提取时，杜仲叶与水按照1：4的比例混合，提取温度和时间相同于第一次。

d.浓缩干燥阶段：将步骤c中的提取液，经过膜分离浓缩调整，并控制膜分离循环泵进口压力保持0.5MPa，出口压力0.2～0.3MPa，浓缩液密度为1.10～1.15g/mL时，打入真空泵，进行离心喷雾干燥，控制进风温度160～180℃，出风温度60～80℃，收集杜仲叶干燥品送检。

e.产品后处理阶段：将步骤d中的成品，经检验合格后，用内包为双层聚乙烯包装袋，外包防潮纸箱，进行包装，每袋10g。其所述的产品其主要成分含量：总糖含量≥15%，绿原酸含量≥0.4%，总黄酮含量≥1.8%,京尼平苷酸含量≥1.8%，桃叶珊瑚甙含量≥0.8%，蛋白质含量≥1.2%，水分≤6.0%。

f.产品应用阶段：其所述的产品按培养基配方0.5%的比例增加到乳酸菌、枯草芽孢杆菌和酵母菌培养基配方中，经过实际生产应用后，结果表明乳酸菌、枯草芽孢杆菌和酵母菌在发酵条件不变的情况下，活性菌剂分别增加40%，发酵时间缩短14%。

实施例2：

a.原料预处理：将9～10月份采摘的新鲜、去杂后的杜仲叶片，按照中国药典的质量要求，经检验合格后，进行太阳暴晒或经高温瞬间杀毒干燥。

b.纯水浸泡阶段：将步骤a中预处理后的杜仲叶与水按照1：6比例混合，放置于多功能提取罐，搅拌均匀后，浸泡4小时。

c.低温加热提取：将步骤b中杜仲叶和水的混合物通蒸汽加热至温度70℃，循环提取1小时，将提取液经过粗滤，泵至贮液罐，二次提取时，杜仲叶与水按照1：2的比例混合，提取温度和时间相同于第一次。

d.浓缩干燥阶段：将步骤c中的提取液，经过膜分离浓缩调整，并控制膜分离循环泵进口压力保持0.5MPa，出口压力0.2～0.3MPa，浓缩液密度为1.10～1.15g/mL时，打入真空泵，进行离心喷雾干燥，控制进风温度160～180℃，出风温度60～80℃，收集杜仲叶干燥品送检。

e.产品后处理阶段：将步骤d中的成品，经检验合格后，用内包为双层聚乙烯包装袋，外包防潮纸箱，进行包装，每袋10g。其所述的产品其主要成分含量：总糖含量≥15%，绿原酸含量≥0.4%，总黄酮含量≥1.8%,京尼平苷酸含量≥1.8%，桃叶珊瑚甙含量≥0.8%，蛋白质含量≥1.2%，水分≤6.0%。

f.产品应用阶段：其所述的产品按培养基配方0.6%的比例增加到乳酸菌、枯草芽孢杆菌和酵母菌培养基配方中，经过实际生产应用后，结果表明乳酸菌、枯草芽孢杆菌和酵母菌在发酵条件不变的情况下，活性菌剂分别增加53%，发酵时间缩短18%。

实施例3：

a.原料预处理：将9～10月份采摘的新鲜、去杂后的杜仲叶片，按照中国药典的质量要求，经检验合格后，进行太阳暴晒或经高温瞬间杀毒干燥。

b.纯水浸泡阶段：将步骤a中预处理后的杜仲叶与水按照1：7比例混合，放置于多功能提取罐，搅拌均匀后，浸泡4小时。

c.低温加热提取：将步骤b中杜仲叶和水的混合物通蒸汽加热至温度80℃，循环提取3小时，将提取液经过粗滤，泵至贮液罐，二次提取时，杜仲叶与水按照1：2的比例混合，提取温度和时间相同于第一次。

d.浓缩干燥阶段：将步骤c中的提取液，经过膜分离浓缩调整，并控制膜分离循环泵进口压力保持0.5MPa，出口压力0.2～0.3MPa，浓缩液密度为1.10～1.15g/mL时，打入真空泵，进行离心喷雾干燥，控制进风温度160～180℃，出风温度60～80℃，收集杜仲叶干燥品送检。

e.产品后处理阶段：将步骤d中的成品，经检验合格后，用内包为双层聚乙烯包装袋，外包防潮纸箱，进行包装，每袋10g。其所述的产品其主要成分含量：总糖含量≥15%，绿原酸含量≥0.4%，总黄酮含量≥1.8%,京尼平苷酸含量≥1.8%，桃叶珊瑚甙含量≥0.8%，蛋白质含量≥1.2%，水分≤6.0%。

f.产品应用阶段：其所述的产品按培养基配方0.7%的比例增加到乳酸菌、枯草芽孢杆菌和酵母菌培养基配方中，经过实际生产应用后，结果表明乳酸菌、枯草芽孢杆菌和酵母菌在发酵条件不变的情况下，活性菌剂分别增加64%，发酵时间缩短22%。

实施例4：

a.原料预处理：将9～10月份采摘的新鲜、去杂后的杜仲叶片，按照中国药典的质量要求，经检验合格后，进行太阳暴晒或经高温瞬间杀毒干燥。

b.纯水浸泡阶段：将步骤a中预处理后的杜仲叶与水按照1：8比例混合，放置于多功能提取罐，搅拌均匀后，浸泡2小时。

c.低温加热提取：将步骤b中杜仲叶和水的混合物通蒸汽加热至温度70℃，循环提取2小时，将提取液经过粗滤，泵至贮液罐，二次提取时，杜仲叶与水按照1：3的比例混合，提取温度和时间相同于第一次。

d.浓缩干燥阶段：将步骤c中的提取液，经过膜分离浓缩调整，并控制膜分离循环泵进口压力保持0.5MPa，出口压力0.2～0.3MPa，浓缩液密度为1.10～1.15g/mL时，打入真空泵，进行离心喷雾干燥，控制进风温度160～180℃，出风温度60～80℃，收集杜仲叶干燥品送检。

e.产品后处理阶段：将步骤d中的成品，经检验合格后，用内包为双层聚乙烯包装袋，外包防潮纸箱，进行包装，每袋10g。其所述的产品其主要成分含量：总糖含量≥15%，绿原酸含量≥0.4%，总黄酮含量≥1.8%,京尼平苷酸含量≥1.8%，桃叶珊瑚甙含量≥0.8%，蛋白质含量≥1.2%，水分≤6.0%。

f.产品应用阶段：其所述的产品按培养基配方0.8%的比例增加到乳酸菌、枯草芽孢杆菌和酵母菌培养基配方中，经过实际生产应用后，结果表明乳酸菌、枯草芽孢杆菌和酵母菌在发酵条件不变的情况下，活性菌剂分别增加40%，发酵时间缩短25%。

实施例5：

a.原料预处理：将9～10月份采摘的新鲜、去杂后的杜仲叶片，按照中国药典的质量要求，经检验合格后，进行太阳暴晒或经高温瞬间杀毒干燥。

b.纯水浸泡阶段：将步骤a中预处理后的杜仲叶与水按照1：7比例混合，放置于多功能提取罐，搅拌均匀后，浸泡4小时。

c.低温加热提取：将步骤b中杜仲叶和水的混合物通蒸汽加热至温度80℃，循环提取3小时，将提取液经过粗滤，泵至贮液罐，二次提取时，杜仲叶与水按照1：2的比例混合，提取温度和时间相同于第一次。

d.浓缩干燥阶段：将步骤c中的提取液，经过膜分离浓缩调整，并控制膜分离循环泵进口压力保持0.5MPa，出口压力0.2～0.3MPa，浓缩液密度为1.10～1.15g/mL时，打入真空泵，进行离心喷雾干燥，控制进风温度160～180℃，出风温度60～80℃，收集杜仲叶干燥品送检。

e.产品后处理阶段：将步骤d中的成品，经检验合格后，用内包为双层聚乙烯包装袋，外包防潮纸箱，进行包装，每袋10g。其所述的产品其主要成分含量：总糖含量≥15%，绿原酸含量≥0.4%，总黄酮含量≥1.8%,京尼平苷酸含量≥1.8%，桃叶珊瑚甙含量≥0.8%，蛋白质含量≥1.2%，水分≤6.0%。

f.产品应用阶段：其所述的产品按培养基配方1%的比例增加到乳酸菌、枯草芽孢杆菌和酵母菌培养基配方中，经过实际生产应用详细效果如下表：

微生物生长促进剂在生产实际应用中的效果

由以上实验结果可知，将本发明的微生物生长促进剂增加到乳酸菌、枯草芽孢杆菌和酵母菌培养基配方中，可以使乳酸菌发酵后菌数提高103%，缩短发酵周期29%；枯草芽孢杆菌发酵后菌数提高57%，缩短发酵周期21%；酵母菌发酵后菌数提高41.8%，缩短发酵周期14.8%。

需说明的是，以上各实施例中，本发明的微生物生长促进剂的制备方法并不仅限于此，一些步骤或操作方法可由本领域技术人员得知的其他惯用步骤或方法所替换以实现本发明，例如步骤c中进行提取的次数并不限于两次，也可以为一次或多次。

以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非对本发明作任何形式上的限制，虽然本发明已以较佳实施例揭露如上，然而并非用以限定本发明，任何熟悉本专业的技术人员,在不脱离本发明技术方案范围内，当可利用上述揭示的方法及技术内容作出些许的更动或修饰为等同变化的等效实施例，但凡是未脱离本发明技术方案的内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与修饰，均仍属于本发明技术方案的范围内。

Claims (4)

1.一种微生物生长促进剂，其特征在于其制备原料为杜仲叶片，且其包括以下含量的成分：总糖含量≥15％，绿原酸含量≥0.4％，总黄酮含量≥1.8％,京尼平苷酸含量≥1.8％，桃叶珊瑚甙含量≥0.8％，蛋白质含量≥1.2％，水分≤6.0％；且其制备方法包括以下步骤：

a.原料预处理：将去杂干净的采摘于每年9～10月份的新鲜杜仲叶片按照中国药典的质量要求，经检验合格后，进行干燥处理；

b.纯水浸泡阶段：将杜仲干叶和水按照1:6～1:8的比例混合，放置于多功能提取罐，搅拌均匀后，浸泡1～4h；

c.加热提取：将步骤b中杜仲叶和水的混合物通蒸汽加热至70～80℃，循环提取1～3h，将提取液经过粗滤，泵至贮液罐，二次提取时，水与杜仲叶按2～4倍的比例混合，提取温度和时间与第一次相同；

d.浓缩干燥阶段：将步骤c中的提取液，经过膜分离浓缩调整，并控制膜分离循环泵进口压力保持0.5MPa，出口压力0.2～0.3MPa，浓缩液密度为1.10～1.15g/mL时，打入真空泵；再经喷雾干燥制备成成品，进行离心喷雾干燥时，控制进风温度为160～180℃，出风温度60～80℃。

2.一种微生物生长促进剂的制备方法，其特征在于其包括以下步骤：

a.原料预处理：将去杂干净的杜仲叶片按照中国药典的质量要求，经检验合格后，进行干燥处理；所述的杜仲叶片是每年9～10月份采摘的新鲜叶片，经太阳暴晒或经高温瞬间杀毒干燥；

b.纯水浸泡阶段：将杜仲干叶和水混合，搅拌均匀后，浸泡；所述的水与杜仲叶片按照6～8倍的比例混合，浸泡1～4h；

c.加热提取：将步骤b中的杜仲叶，进行提取；杜仲叶和水的混合物通蒸汽加热至温度70～80℃，循环提取1～3h，将提取液经过粗滤，泵至贮液罐，二次提取时，水与杜仲叶按2～4倍的比例混合，提取温度和时间相同于第一次；

d.浓缩干燥阶段：将步骤c中的提取液，进行浓缩、干燥制备成成品；其中，经过膜分离浓缩调整，并控制膜分离循环泵进口压力保持0.5MPa，出口压力0.2～0.3MPa，浓缩液密度为1.10～1.15g/mL时，打入真空泵；浓缩液进行离心喷雾干燥，控制进风温度为160～180℃，出风温度60～80℃。

3.如权利要求1所述的微生物生长促进剂在培养益生菌方面的用途。

4.如权利要求3所述的微生物生长促进剂在培养益生菌方面的用途，其特征在于所述的微生物生长促进剂适应益生菌培养基配方的使用菌种包括：乳酸菌、枯草芽孢杆菌和酵母菌，加入量按培养基配方0.5～1.0％的比例加入到乳酸菌、枯草芽孢杆菌和酵母菌培养基配方中。