CN101914472A - 一种杜仲叶提取物及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明属于植物有效成分提取领域，特别涉及一种杜仲叶提取物及其制备方法和应用。所述杜仲叶提取物由下法制得：将杜仲叶用水煎煮并过滤，调整滤液pH为5.5-7.5，即得所述的杜仲叶提取物。本发明杜仲叶提取物制备方法简单、应用于乳酸菌发酵培养促进剂可以显著提高发酵液含活性菌数量，效果显著。

Description

一种杜仲叶提取物及其制备方法和应用

(一)技术领域

本发明属于植物有效成分提取领域，特别涉及一种杜仲叶提取物及其制备方法和应用。

(二)背景技术

随着人类生活水平的提高，人们越来越重视生活质量的提高以及疾病的预防和保健。其中，以乳酸菌为主的各种益生菌被广泛应用到药品、食品、奶制品以及动物饲料添加剂等各个领域。

目前乳酸菌的饮用广泛盛行于世界各国，但其稳定性不好，为了克服这种缺点，现在多用乳酸菌纯培养品(培养基一种是牛奶，另一种是蛋白胨，牛肉膏，氯化钠为主要营养成分的人工培养基)配以奶粉、乳糖、淀粉等辅料和赋形剂加工成各种各样形态的活性乳酸菌产品，又称“益生菌”产品。临床应用上，随着抗生素的长期使用，人们也越来越认识到使用抗生素的负面影响。因此，抗生素的替代疗法已迫在眉睫，而益生菌便是最有前景的抗生素替代疗法之一，目前已有大量益生菌用于治疗腹泻、便秘、增强免疫。

由于益生菌发挥作用的前提是活菌数量，因此所有乳酸菌产品的制造商最关心的问题，莫过于乳酸菌的培养条件，培养条件的好坏直接关系到发酵水平的好坏，最终又直接影响到产品的质量和制造成本。因此研发一种新的乳酸菌培养基的营养物质，以促进乳酸菌的生长繁殖，从而提高培养效果，改善产品品质是本发明的立足点。

2300年前，我国第一部药书《神农本草经》中记载杜仲“久服，轻身，耐劳”。现代科学分析，杜仲叶含有21种有机物，17种氨基酸，以及杜仲有机酸，杜仲苷，松脂素苷，绿原酸等自身独有的天然有效生物活性成分，其中蛋白质含量高达14.5％，碳水化合物含量高达51％，另外还含有维生素和硒锌等15种含量均衡的微量元素。如何充分利用这些有效成分也是一个研究的方向。

(三)发明内容

本发明的目的在于提供一种杜仲叶提取物，将其应用于乳酸菌培养过程中，以更好的促进乳酸菌培养过程中的消化吸收和合成代谢。

本发明采用的技术方案如下：

一种杜仲叶提取物，由下法制得：将杜仲叶用水煎煮并过滤，调整滤液pH为5.5-7.5，即得所述的杜仲叶提取物。

较好的，杜仲叶在使用前按1∶1的比例加水拌匀，浸泡湿润2小时。

进一步，煎煮提取杜仲叶时，将杜仲叶煎煮提取2-4次。

更具体的，将杜仲叶煎煮提取三次，第一次的加水量为杜仲叶质量的7-10倍，提取时间为50-60min，提取温度98-100℃；第二、三次的加水量为杜仲叶质量的2-7倍，煎煮提取时间分别为40-50min和30-40min，提取温度98-100℃，合并3次煎煮提取液。

合并煎煮提取液后，过滤除去提取液中不溶解于水的杂质。

滤液pH值优选调整为6.0-6.5。

进一步，调整滤液pH值后，为了换算方便，可以调整滤液密度为1.20-1.25g/cm³，此密度时每毫升滤液相当于0.5g杜仲叶中所含营养成分；之后还可喷雾干燥制成粉。

具体的，调整密度时可采用真空减压浓缩，真空度为0.06-0.07Mpa，温度为55-60℃。

浓缩液还可经转速为16000转/min的筒式离心机高速离心过滤进一步除杂。

获得杜仲叶提取液后经检验合格可直接分装入库，亦可继续干燥制成粉粒状营养物质分装入库。

杜仲树是非常古老的树种，被称为“活化石植物”，后被引种到世界各地。现代研究表明，杜仲叶的主要营养成分和保健功能与杜仲树皮不相上下，特别在促进人体血管循环和微循环方面的作用，杜仲叶还优于杜仲皮。在资源开发利用方面，采集树皮无疑会对杜仲树的生长造成伤害，采摘杜仲叶可循环再生，资源量大。杜仲叶的最佳采摘时期为每年的9-10月份，杜仲鲜叶在使用前及时经阳光晾晒或低温60-80℃干燥后除杂包装入库通风贮藏以防止霉烂变质。

所述的杜仲叶提取物作为乳酸菌发酵培养促进剂有很好的应用。

具体应用时，杜仲叶提取物的添加量按其中所含杜仲叶的重量计为乳酸菌培养基重量的0.5-2.0％。

例如上述制备成密度为1.20-1.25g/cm³的滤液时，由于此密度时每毫升滤液相当于0.5g杜仲叶中所含营养成分，因此每100g乳酸菌培养基只需加入1-4ml滤液即可。

杜仲叶中含有的营养成分既是人体保健强身的重要营养物质，恰好又是乳酸菌发酵和生长繁殖重要的氮源，碳源，无机盐和微量元素的营养支持，这些重要的纯天然性质的营养成分，非常有利于乳酸菌培养过程中的消化吸收和合成代谢。

通常乳酸菌生长繁殖需要的营养物质主要有牛奶，其次有蛋白胨，牛肉膏，酵母膏，乳糖，葡萄糖，氯化钠和碳酸钙等。

本发明以杜仲叶为原料来源，在作为乳酸菌营养促进剂应用时具有绿色天然的优势。在乳酸菌培养基配方中，杜仲叶提取液或粉与其他乳酸菌常规营养物质配合使用，可减少常规营养物质用量，其中蛋白胨用量减少1-2％，牛肉膏减少0.1-0.2％，葡萄糖减少1-2％。在其他发酵条件不变的情况下，可以使乳酸菌生长繁殖更加旺盛，培养液每毫升中所含活性乳酸菌增加20-30亿，乳酸菌培养效果提高20-30％。

杜仲叶提取液与其他乳酸菌培养时添加营养物质相比较，主要优点体现在以下几个方面：

1)杜仲叶资源十分丰富，每亩每年可采摘杜仲叶1000kg；

2)加工提取杜仲叶的生产工艺简单易行；

3)杜仲叶提取液的营养成分，不但丰富而且非常全面均衡，尤其可贵的是含有人体必需的八种游离氨基酸，特别有利于乳酸菌培养过程中的营养需求；

4)杜仲叶提取液丰富的营养成分，明显增强了乳酸菌的活力，发酵液含活性菌数量增高，发酵水平显著提高；

5)乳酸菌培养基成分中，增加杜仲提取液(或粉粒状营养物质)，可以减少其他价格相对比较昂贵的蛋白胨，牛肉膏，乳糖等营养物质的用量，因此可以降低益生菌产品的制造成本。

杜仲叶提取设备无严格要求，无论是在实验室阶段的玻璃仪器、放大初试的20L提取浓缩热回流机组还是最后扩大到3立方的多功能提取设备和500L单效真空减压浓缩设备以及离心和压力喷雾干燥设备，提取工艺参数和杜仲叶提取液的终端产品的质量都是一致的。

本发明制得的杜仲叶提取液(密度为1.20-1.25g/cm³)的性能参数如下：

项目	单位	指标
			外观		深棕色澄清液
PH值		6.0-6.5
			比重	g/ml	1.20-1.25
蛋白质含量	g/100ml	3.5
			碳水化合物含量	g/100ml	12.5
总黄酮含量	g/100ml	0.125
			杜仲醇含量	g/100ml	1.25

本发明相对于现有技术，有以下优点：

本发明杜仲叶提取物制备方法简单、应用于乳酸菌发酵培养促进剂可以显著提高发酵液含活性菌数量，效果显著。

(四)具体实施方式：

以下以具体实施例来说明本发明的技术方案，但本发明的保护范围不限于此：

实施例1

称取杜仲叶400g，第一次加水3200ml(1∶8)控制煎煮提取温度98℃，煎煮提取时间1小时，收集提取液，叶渣第二次加水2400ml(1∶6)，煎煮提取温度98℃，煎煮提取时间为45分钟，收集提取液，叶渣第三次加水2400ml，煎煮提取温度98℃，煎煮提取时间为30分钟，合并三次煎煮提取液，过滤，除去不溶解于水的杂质，再浓缩至密度1.20-1.25g/cm³，体积约800ml，调整滤液PH值6.4，最后经过精滤，即得每毫升相当于杜仲叶0.5g的提取液。本实施例是在实验室玻璃仪器中进行的。

实施例2

使用设备20L提取浓缩热回流机组，称取杜仲叶1500g，加水15kg，控制煎煮提取内温98℃，加热过程中启动搅拌将杜仲叶与水充分混匀，升温时间约1.5小时，最高内温98℃，启动真空，开始真空浓缩，设定内胆温度75℃，夹套温度80℃，进入正常浓缩时控制内胆温度58℃，实际温度54-55℃，真空度0.09MPa，真空减压浓缩全程时间2小时，放料过程除去杂质，滤液调整PH6.0-6.5，最后进行精滤和调整浓度，热测比重1.20-1.25，获取3200ml杜仲叶提取液(此液每毫升相当于杜仲叶0.5g)。

实施例3

称取杜仲叶净重208.34kg，置3立方多功能提取罐内，第一次加水量1600kg，提取温度98-100℃，提取时间1小时，第二次加水500kg，提取温度98℃，提取时间45分钟，第三次加水500kg，提取温度98℃，提取时间30分钟。合并三次煎煮提取液，过滤后的提取液总重为2250kg，将2250kg提取液分次泵入真空减压浓缩器内(单效浓缩器)控制内罐真空压力0.08-0.086MPa，温度控制58℃，夹层蒸汽压力0.2MPa，浓缩至原体积的一半时，料液重量1125kg，热测比重1.12，调整PH6.4，进行精滤后，再减压浓缩至料液重量约500kg(实际重420kg)，热测比重1.20，每毫升该杜仲叶提取液相当于杜仲叶0.5g。将此液用蠕动泵泵入25型离心喷雾干燥机，控制进风温度180-240℃，出风温度60-80℃，制成含水量6％粉粒状的固体营养物质。

实施例4

在原乳酶生生产发酵培养基中加入营养促进剂，加入后培养基的重量百分组成为：杜仲叶提取液(每毫升相当于杜仲叶0.5g)0.75％，蛋白胨3％，牛肉膏0.3％，氯化钠(食盐)0.5％，葡萄糖3％，碳酸钙1％，猪肝浸液2.2％，纯净水89.25％。

在1.5万毫升的圆底烧瓶中配置1个9公斤的生产发酵培养基，其实际操作方法如下：依次称取杜仲叶提取液135ml，蛋白胨270g，牛肉膏27g，氯化钠(食盐)45g，葡萄糖270g，碳酸钙90g，除葡萄糖和碳酸钙之外，其余成分放入一不锈钢加热容器中，再加入配方用量约1/2的纯净水，加热到90℃搅拌使其全部溶解后，并加入猪肝浸液200ml，以20％的氢氧化钠溶液调PH至7.2-7.4，置于先加入葡萄糖和碳酸钙的1.5万毫升的圆底烧瓶中，并补充纯净水至9公斤，再以防潮纸和棉塞包扎瓶口，再放入高压灭菌容器内，控制容器内压力0.1-0.11MPa，温度121℃，灭菌时间30分钟，取出降温至40℃，按培养基体积的4％接种量将预先准备好的肠链球菌菌液，在无菌室内按无菌操作程序，将菌种液接入上述培养基内，然后在37±2℃的恒温培养箱进行发酵培养，每隔1小时启动摇床或人工摇床一次，详细做好记录，发酵培养16小时后，观察碳酸钙消失情况(同时取样进行镜检计数，用培养方法进行化验)。

对比数据：

作为对照的加入促进剂后的培养基组成(重量百分比)为：蛋白胨4％，牛肉膏0.5％，氯化钠(食盐)0.5％，葡萄糖4％，碳酸钙1％，猪肝浸液2.2％，纯净水87.8％。

配制与检测方法同上。

两者对比，培养液每毫升含活性肠链球菌菌数增加20-30亿，发酵率提高了20-30％。

Claims (10)

1.一种杜仲叶提取物，其特征在于，由下法制得：将杜仲叶用水煎煮并过滤，调整滤液pH为5.5-7.5，即得所述的杜仲叶提取物。

2.如权利要求1所述的杜仲叶提取物，其特征在于，调整滤液pH值后，喷雾干燥制成粉。

3.如权利要求1或2所述的杜仲叶提取物，其特征在于，将杜仲叶煎煮提取三次，第一次的加水量为杜仲叶质量的7-10倍，提取时间为50-60min，提取温度98-100℃；第二、三次的加水量为杜仲叶质量的2-7倍，煎煮提取时间分别为40-50min和30-40min，提取温度98-100℃；合并3次煎煮提取液。

4.权利要求1所述的杜仲叶提取物的制备方法，其特征在于，将杜仲叶用水煎煮并过滤，调整滤液pH为5.5-7.5，即得所述的杜仲叶提取物。

5.如权利要求4所述的杜仲叶提取物的制备方法，其特征在于，调整滤液pH值为6.0-6.5。

6.如权利要求4所述的杜仲叶提取物的制备方法，其特征在于，调整滤液pH值后喷雾干燥制成粉。

7.如权利要求4-6之一所述的杜仲叶提取物的制备方法，其特征在于，调整滤液pH后调整滤液密度为1.20-1.25g/cm³，调整密度时采用真空减压浓缩，真空度为0.06-0.07Mpa，温度为55-60℃。

8.如权利要求4-6之一所述的杜仲叶提取物的制备方法，其特征在于，将杜仲叶煎煮提取三次，第一次的加水量为杜仲叶质量的7-10倍，提取时间为50-60min，提取温度98-100℃；第二、三次的加水量为杜仲叶质量的2-7倍，煎煮提取时间分别为40-50min和30-40min，提取温度98-100℃；合并3次煎煮提取液。

9.权利要求1或2所述的杜仲叶提取物作为乳酸菌发酵培养促进剂的应用。

10.如权利要求9所述的杜仲叶提取物作为乳酸菌发酵培养促进剂的应用，其特征在于，杜仲叶提取物的添加量按其中所含杜仲叶的重量计为乳酸菌培养基重量的0.5-2.0％。