CN109730192A - 利用甘蔗渣生产蛋白饲料的方法 - Google Patents

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梁晓君
淡明
王冬梅
黄梅华
黄振勇
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何全光
韦馨平
黄茂康
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Abstract

本发明公开了一种利用甘蔗渣生产蛋白饲料的方法,该蛋白饲料由甘蔗渣、糖蜜、玉米粉、豆粕、麸皮、米糠、中药材及复合发酵菌剂制备而成。本发明所用的的驯化菌来自于大自然,经过富集、筛选、驯化得到,具有超强的分解纤维素的能力,所制得的复合发酵菌剂,发酵高效,稳定性好,可以有效降低甘蔗渣、米糠等原料的粗纤维含量,将粗纤维、木质素等动物难以充分消化吸收的高分子碳水化合物转化成可吸收利用的低分子物质,提高动物的消化利用率,所制得的发酵饲料营养更加全面,饲料转化率高,并同时提高发酵饲料中粗蛋白的含量,提高饲料的营养性和适口性,发酵过程中可避免抗生素的使用,安全环保。

Description

利用甘蔗渣生产蛋白饲料的方法
技术领域
本发明涉及动物饲料技术领域,具体是利用甘蔗渣生产蛋白饲料的方法。
背景技术
纵观中国草食动物的发展现状,我国草食动物的饲养主要集中在北方,特别是西北地区,但这些地区已经出现了过度放牧、植被退化的现象;如今国家又鼓励向南方发展,虽然南方草地的总面积不少,但是连片的草地少,要形成规模化放牧养殖很难,这也是那么多年来,一直制约南方草食动物发展的因素之一。在南方想要形成大规模的养殖,就需要大量的饲料。随着中国养殖业的迅猛发展,动物饲料的需求量日愈增多,国内外对养殖用蛋白质饲料的研究日益深入,蛋白质饲料已大量用于各类配合饲料的生产中,并取得了大量研究成果。蛋白质饲料的蛋白质含量高,营养丰富,灰分含量高,钙磷丰富,且比例良好,利于饲养动物的吸收利用,不同程度地刺激生长和繁殖,是其他营养物质所不能代替的。
甘蔗(Saccharum of ficinarum L.)是一种多年生禾本科 (Gram ineae)蜀黍族高秆单子叶植 物,热带、亚热带地区广泛种植。甘蔗属于C4植物,具有很高的光能转化率,单位面积产量较高,是高效利用太阳能的一种经济作物。甘蔗中含有充足的水份、糖、蛋白质、脂肪、有机酸及各种维生素等,其作为一种重要的非粮饲料作物,可以有效缓解冬春季节饲料匮乏的难题。广西是甘蔗主产区,有着丰富的糖业副产物如甘蔗渣、甘蔗梢叶、糖蜜等,这些副产物具有来源广、数量大和价格低的特点,含有植物光合作用所积累的一半以上的能量,如能把这些糖业副产物饲料化,不但可以解决人畜争粮的尴尬局面,也为糖厂带来可观的经济收益。因此,甘蔗渣在反刍动物饲料应用方面具有很大的潜力。
甘蔗渣是一种植物纤维素类物质,是甘蔗糖厂最大的副产物,一般其产量约占原料甘蔗的24~27%,资料统计表明目前全国蔗渣每年产量约1000万吨,目前约90%的蔗渣被用作燃料,用于糖厂锅炉发电和供应蒸汽,剩余10%左右的蔗渣主要被用于造纸以及生产动物饲料等。虽然蔗渣直接燃烧是处理蔗渣最简洁快速的方法,但是蔗渣直接燃烧既浪费蔗渣资源,又会产生大量CO等温室气体,对空气和自然环境造成严重的污染,因此蔗渣资源的合理开发利用问题亟待解决。
发明内容
本发明的目的是提供一种利用甘蔗渣生产蛋白饲料的方法,该方法能够将粗纤维、木质素等动物难以充分消化吸收的高分子碳水化合物转化成可吸收利用的低分子物质,提高动物的消化利用率,所制得的发酵饲料营养更加全面,饲料转化率高,并同时提高发酵饲料中粗蛋白的含量,提高饲料的营养性和适口性,发酵过程中可避免抗生素的使用,安全环保。
本发明通过以下技术方案实现:
利用甘蔗渣生产蛋白饲料的方法,包括以下步骤:
(1)按照重量份数取以下原料:甘蔗渣70~90份,糖蜜20~30份,玉米粉7~9份,豆粕3~5份,麸皮2~4份,米糠2~4份,中药材10~20份,复合发酵菌剂0.2~0.4份;
(2)原料预处理:将甘蔗渣粉碎至粒度不超过5mm,干燥至水分含量不超过12%,备用;将新鲜的构树、鬼针草、蒲公英、山楂和陈皮分别粉碎后混合均匀,备用;
(3)接种发酵:将玉米粉、豆粕、麸皮、米糠与中药材按比例混合均匀,加入糖蜜和水,调节水分含量至45~60%,接种复合发酵菌剂,装桶密封发酵5~10天,即得发酵精料;
(4)密封发酵:将甘蔗渣、糖蜜加入到发酵精料中,压实密封继续发酵20~24天,其中发酵精料、甘蔗尾梢、糖蜜三者的重量比例为1:3:1,发酵至出现酸香略带酒香味,即得蛋白饲料。
所述的甘蔗渣为甘蔗经过榨糖之后剩下的甘蔗渣;所述的糖蜜是甘蔗糖厂蔗糖结晶白糖后产生的糖蜜;所述的中药材由以下重量份数的原料制成:构树2~5份,鬼针草2~4份,蒲公英2~4份,山楂1~3份,陈皮2~4份;
所述的复合发酵菌剂由以下重量份数的原料制成:驯化菌冻干粉15~30份,产朊假丝酵母冻干粉8~10份,植物乳杆菌冻干粉6~8份,枯草芽孢杆菌冻干粉8~10份,黑曲霉冻干粉4~6份,米曲霉冻干粉4~6份,绿色木霉冻干粉7~10份,纤维素酶冻干粉18~20份。
所述的复合发酵菌剂的制备方法为:
(1)取驯化菌扩大培养时达到稳定期的菌液,离心,取菌泥用无菌磷酸盐缓冲液洗涤,离心再重悬于无菌磷酸盐缓冲液,加入包埋剂,进行真空冷冻干燥,即得驯化菌冻干粉剂;
(2)将产朊假丝酵母接种于麦芽汁培养基中,于36~38℃、pH6.3~6.5条件下培养至稳定期,取菌液进行离心,弃去上清液,取菌泥用无菌磷酸盐缓冲液洗涤,离心再重悬于无菌磷酸盐缓冲液,加入包埋剂,进行真空冷冻干燥,即得产朊假丝酵母冻干粉剂;
(3)将植物乳杆菌接种于MRS培养基,于36~38℃、pH6.3~6.5条件下培养至稳定期,取菌液进行离心,弃去上清液,取菌泥用无菌磷酸盐缓冲液洗涤,离心再重悬于无菌磷酸盐缓冲液,加入包埋剂,进行真空冷冻干燥,即得植物乳杆菌冻干粉剂;
(4)将各菌分部接种于PCA液体培养基,于36~38℃、pH6.8~7.2条件下培养至稳定期,取菌液进行离心,弃去上清液,取菌泥用无菌磷酸盐缓冲液洗涤,离心再重悬于无菌磷酸盐缓冲液,加入包埋剂,进行真空冷冻干燥,即分别得到枯草芽孢杆菌冻干粉、黑曲霉冻干粉、米曲霉冻干粉、绿色木霉冻干粉、纤维素酶冻干粉。
(5)将上述制得的各冻干粉混合均匀,即得复合发酵菌剂。
所述的包埋剂由以下重量份数的原料制成:麦芽糊精8~10份,β-环糊精6~8份,淀粉10~12份,水8~20份。
所述的真空冷冻干燥参数为:冷阱温度﹣65℃,加热温度30~35℃,真空度≤60pa,干燥至菌剂的水分含量不超过7%。
所述的MRS培养基组成成分为:蛋白胨8~10份,牛肉膏8~10份,酵母膏4~6份,柠檬酸氢二铵1.5~2.2份,葡萄糖18~22份,吐温80 0.8~1.2份,乙酸钠4~6份,磷酸氢二钾1.5~2.5份,蒸馏水900~1000份;所述的PCA液体培养基,组成成分为:胰蛋白胨4~6份,酵母膏2~3.2份,葡萄糖1~2份,蒸馏水950~1000份。
所述驯化菌的驯化方法包括以下步骤:
(1)选取菌泥:选取半年以上甘蔗地土壤或甘蔗叶堆沤泥,或者糖厂甘蔗渣堆放区堆放半年以上形成的污泥,即得原始菌泥,将原始菌泥现场封存在无菌玻璃瓶内,带回实验室作为原始菌群进行培养;这些原始菌泥在长期的堆放环境中,由于生态环境的影响,逐渐形成了优势菌种,存活下来的大多是可分解甘蔗副产物纤维素的菌,这样的菌更容易被驯化,其降解纤维素的能力能够显著提高,并具有相对稳定性。
(2)一次驯化:取新鲜的甘蔗尾梢粉碎至100~200目,于121℃高压灭菌10~20min,冷却后加入到配制好的基础培养基混合均匀,甘蔗尾梢与基础培养基的重量比为1.0~1.5:1,即得一次驯化培养基;
根据甘蔗尾梢加入量的不同,设置5~6个梯度,制备几种甘蔗尾梢含量不同的一次驯化培养基,将步骤(1)中的原始菌泥接种到各培养基中,35~40℃、pH6.3~6.5条件下培养20~30天,每隔2~4天记录一次培养基中的情况,以甘蔗尾稍分解得最多为优,以菌液澄清、菌泥不发臭为优,综合各个培养基中的情况,选择最优的一组培养基,其菌液中存活的菌即为一次驯化菌;
(3)二次驯化:取新鲜的甘蔗尾梢粉碎至100~200目,于121℃高压灭菌10~20min,得A料;取榨汁之后的甘蔗渣粉碎至100~200目,于121℃高压灭菌10~20min,得B料;取糖厂中甘蔗渣喷淋水形成的污水,虑去杂物,得C料;
将上述A、B、C料分别进行两两组合或者三者组合,加入到基础培养基,制成多个二次驯化培养基,分别接种步骤(2)中一次驯化菌的菌液,于38~40℃条件下培养20天,每隔2~4天记录一次培养基中的情况,以甘蔗尾稍、甘蔗渣分解得最多为优,以污水澄清、不发臭为优,综合各个培养基中的情况,选择最优的一组培养基,其菌液即为二次驯化菌;
所述的基础培养基由以下重量份数的原料制成:蛋白胨10份,牛肉膏8份,酵母膏6份,麦芽汁10份,柠檬酸氢二铵2.0份,葡萄糖20份,吐温80 1.0份,乙酸钠5份,磷酸氢二钾1.8份,胰蛋白胨5份,酵母膏2.8份,葡萄糖1.5份,蒸馏水1000份。
(4)扩大培养:取步骤(3)得到的二次驯化菌的菌液进行扩大培养,培养基为二次驯化培养基最优情况时的培养基,培养40~50h;
(5)分装,保藏,即得驯化菌种子液,可将驯化菌种子液进行继续扩大培养,形成大量的优势菌种,以适应工业化生产。
本发明所述的驯化菌经过驯化之后,其分解纤维素的能力大大提升,尤其是分解甘蔗渣和甘蔗尾梢的能力,其在甘蔗副产物中的存活能力也得到了提升;驯化菌的主要成分包括:产朊假丝酵母、乳酸菌、枯草芽孢杆菌、黑曲霉、米曲霉和绿色木霉。
本发明所述的甘蔗尾梢白酒渣蛋白饲料适用对象为牛、羊等反刍动物,以及鸡、鸭、鹅等家禽。
蛋白质饲料是指自然含水率低于45%,干物质中粗纤维低于18%的饲料。按照主要来源不同,蛋白质饲料可分为植物性蛋白饲料、动物性蛋白饲料、单细胞蛋白饲料和非蛋白氮饲料四大类。物性蛋白质饲料含量高,营养丰富,利于饲养动物的吸收利用,不同程度地刺激生长和繁殖,是其他营养物质所不能代替的。
甘蔗渣化学成份主要由纤维素、半纤维素、木质素、果胶质组成,四种成分占干渣重的90%以上,其中纤维素45~55%,半纤维素20~30%,木质素16~22%,果胶质 1~2%,蛋白质2~3%。木质素是一组高分子量物质,是由四种醇单体(对香豆醇、松柏醇、5-羟基松柏醇、芥子醇)形成的一种复杂酚类聚合物,通常与纤维素、半纤维素结合在一起,由化学键联结,木质素的作用就象水泥在钢筋混凝土的作用,使甘蔗渣难于在动物体内消化吸收。由于木质素的影响,直接用作饲料饲喂动物可引起动物消化系统的损伤和紊乱;另外由于蔗渣中粗蛋白含量极低,且难于消化、适口性差,未经处理的甘蔗渣消化率和能量利用率较低,因此首先要对甘蔗渣进行适当的处理,改变蔗渣结构,提高动物体对其的利用率,同时也能够促进微生物菌体降解和利用蔗渣的效率。
所述的玉米粉是指将玉米干燥后粉碎制得。玉米在我国的栽培历史大约有470多年,由于产量高,品质好,适应性强,栽培面积发展很快,目前我国播种面积在3亿亩左右,仅次于稻、麦,在粮食作物中居第三位。世界上大约65-70%的玉米都用作饲料,发达国家高达80%,据报道,100千克玉米的饲用价值相当于135千克燕麦,120千克高粱或150千克籼米。玉米含有丰富的蛋 白质、 脂肪、 维生素、 微量元素、 纤维素等,是肉牛、奶牛、马、羊、猪、禽类等家禽的优质饲料。
豆粕是大豆提取豆油后得到的一种副产品,又称“大豆粕”。豆粕含有丰富的蛋白质及多种氨基酸,粗蛋白质含量高达30~50%,是动物蛋白饲料的主要蛋白来源。未经处理的豆粕中含有抗胰蛋白酶、尿毒酶、皂角苷、甲状腺肿诱发因子等,对动物及饲料的消化利用会产生不良影响,而本发明的豆粕经过特殊菌剂的发酵之后,可以去除这些不良影响,还能改善饲料的适口性,提高消化率,豆粕经发酵后产生大量具有独特生理活性功能的活性肽,易消化、吸收快、抗原性低,有效刺激肠道内有益菌的增殖,调节体内微生态菌群的结构,增加整个消化道对饲料营养物质的分解、合成、吸收和利用。
麸皮为小麦最外层的表皮,小麦被磨面机加工后,变成面粉和麸皮两部分,麸皮是小麦加工加工面粉后得到的副产品。麸皮含有丰富的膳食纤维及多种营养物质,经发酵后更有利于动物体的吸收。
米糠是稻谷加工的主要副产品,主要是由果皮、种皮、外胚乳、糊粉层和胚加工制成,一般可分为饲料级米糠和食品级米糠两种。米糠中富含各种营养素和生理活性物质,其蛋白质含量平均为15-18%,脂肪16-22%,米糠作为反刍动物经济而营养价值丰富的饲料原料,是主要的精料补充物。
构树(学名:Broussonetia papyrifera)别名褚桃等,为落叶乔木,高10~20m;树皮暗灰色;小枝密生柔毛,树冠张开,卵形至广卵形,树皮平滑,浅灰色或灰褐色,不易裂,全株含乳汁。其根和种子均可入药,树液可治皮肤病,嫩叶可喂猪。枝叶茂密且有抗性、生长快、繁殖容易,本发明用于制备蛋白饲料,发酵之后具有独特的清香味,牛喜吃,其饲料消化率可达85%以上。
鬼针草(学名:Bidens pilosa L.),一年生草本,茎直立,钝四棱形。茎下部叶较小,很少为具小叶的羽状复叶,两侧小叶椭圆形或卵状椭圆形。别称:鬼钗草、虾钳草、蟹钳草、对叉草、粘人草、粘连子、豆渣草。鬼针草为中国民间常用草药,性温,味苦,无毒,全草均可入药,具有清热、解毒、散瘀、消肿等功效,民间常用它治疗肠炎、痢疾等疾病。
蒲公英(拉丁学名:Taraxacum mongolicum Hand.-Mazz.)菊科,蒲公英属多年生草本植物,别名黄花地丁、婆婆丁、华花郎等。生蒲公英富含维生素A、维生素C及钾,也含有铁、钙、维生素B2、维生素B1、镁、维生素B6、叶酸及铜。蒲公英植物体中含有蒲公英醇、蒲公英素、胆碱、有机酸、菊糖等多种健康营养成分。性味甘,微苦,寒。归肝、胃经。有利尿、缓泻、退黄疸、利胆等功效,是药食兼用的植物。
山楂(学名:Crataegus pinnatifida Bunge),又名山里果、山里红,蔷薇科山楂属。核果类水果,核质硬,果肉薄,味微酸涩,具有降血脂、血压、强心、抗心律不齐等作用,同时也是健脾开胃、消食化滞、活血化痰的良药,对胸膈脾满、疝气、血淤、闭经等症有很好的疗效。山楂内的黄酮类化合物牡荆素,是一种抗癌作用较强的药物,其提取物对抑制体内癌细胞生长、增殖和浸润转移均有一定的作用。山楂含多种有机酸,可增强胃液酸度,提高胃蛋白酶活性,促进蛋白质的消化;山楂味酸,刺激胃黏膜促进胃液分泌;山楂中含脂肪酶,能促进脂肪的消化;山楂含有维生素C等成分,口服可增进食欲;山楂对胃肠运动功能具有调节作用,对痉挛状态的胃肠平滑肌有抑制作用,对松弛状态的平滑肌有兴奋作用。
陈皮为芸香科植物橘(Citrus reticulata Blanco)及其栽培变种的干燥成熟果皮。具有理气健脾、燥湿化痰的功效,可以增加胃液分泌,促进胃肠蠕动,健胃祛风。桔皮中含有硫胺素、核黄素、挥发油、黄酮类等,橘皮中的挥发油对消化道有刺激作用。黄酮有扩张冠状动脉,增加冠状动脉血流量的作用。此外,橘皮还有消炎、抗溃疡、抑菌及利胆等效果。橘皮中的维生素P还可加工提取制成注射液,对血管硬化症有显著疗效。
本发明所用的复合发酵菌剂,其活性成分包括产朊假丝酵母、植物乳杆菌、枯草芽孢杆菌、黑曲霉、米曲霉和绿色木霉,将来源于甘蔗地土壤、甘蔗叶堆沤或糖厂附近的土壤中的各个菌种分别进行富集、筛选和扩大培养,再添加包埋剂进行包埋处理,进行真空冷冻干燥,最后按照特定的比例混合混合形成菌剂粉。各个菌种相互协调配合,发酵高效,速度快,耗能低,转化率高,稳定性好,可以弥补单一菌种发酵的不足,还可以解决自然发酵菌种过于复杂、发酵过程可控制性差的问题。本发明的发酵菌剂在发酵过程中,通过微生物及其产生的多种生理代谢物质,可以有效杀灭各种病原菌,对饲料中原有的一些有害物质进行了降解和无害处理,避免了抗生素的使用。
产朊假丝酵母(Candida utilis)又叫产朊圆酵母或食用圆酵母。其蛋白质和维生素B的含量都比啤酒酵母高,它能以尿素和硝酸作为氮源,在培养基中不需要加入任何生长因子即可生长。它能利用五碳糖和六碳糖,有氧条件下不产酒精,既能利用造纸工业的亚硫酸废液,还能利用糖蜜、木材水解液等生产出人畜可食用的蛋白质。产朊假丝酵母的细胞呈圆形、椭圆形或腊肠形,大小为(3.5~4.5)μm×(7~13)μm。液体培养不产醭,管底有菌体沉淀。在麦芽汁琼脂培养基上,菌落乳白色,平滑,有或无光泽,边缘整齐或菌丝状。产朊假丝酵母可调节动物肠道微生态平衡,提高饲料消化率,增强动物机体力其细胞中富含维生素B和蛋白质,还能提供动物所需的部分营养物质。
植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)是乳酸菌的一种,圆端直杆菌,通常为0.9~1.2vtm×3.0~8.0μm,厌氧或兼性厌氧,菌种为直或弯的杆状,单个、有时成对或成链状,最适pH 6.5左右,属于同型发酵乳酸菌。此菌与其他乳酸菌的区别在于其活菌数比较高,能大量的产酸,使水中的PH值稳定不升高,而且其产出的酸性物质能降解重金属;能发酵戊糖或葡萄糖酸盐,终产物中85%以上是乳酸;在繁殖过程中能产出特有的乳酸杆菌素,乳酸杆菌素是一种生物型的防腐剂,具有一定的防腐作用。
枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)是芽孢杆菌属的一种,单个细胞0.7~0.8×2~3微米,需氧菌。菌落表面粗糙不透明,污白色或微黄色,在液体培养基中生长时,常形成皱醭。可利用蛋白质、多种糖及淀粉,分解色氨酸形成吲哚。枯草芽孢杆菌菌体生长过程中产生的枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽等活性物质,这些活性物质对致病菌或内源性感染的条件致病菌有明显的抑制作用。
黑曲霉(Aspergillus niger),半知菌亚门,丝孢纲,丝孢目,丛梗孢科,曲霉属真菌中的一个常见种。广泛分布于世界各地的粮食、植物性产品和土壤中,农业上用作生产糖化饲料的菌种。黑曲霉是重要的发酵工业菌种,可生产淀粉酶、酸性蛋白酶、纤维素酶、果胶酶、葡萄糖氧化酶、柠檬酸、葡糖酸和没食子酸等。
米曲霉(Aspergillus oryzae ( Asp.oryzae))属半知菌亚门,丝孢纲,丝孢目,从梗孢科,曲霉属真菌中的一个常见种,直径150~300μm。米曲霉可产生蛋白酶、淀粉酶、糖化酶、纤维素酶、植酸酶等。在淀粉酶的作用下,将原料中的直链、支链淀粉降解为糊精及各种低分子糖类,如麦芽糖、葡萄糖等;在蛋白酶的作用下,将不易消化的大分子蛋白质降解为蛋白胨、多肽及各种氨基酸,而且可以使辅料中粗纤维、植酸等难吸收的物质降解,提高营养价值、保健功效和消化率,广泛应用于食品、饲料、生产曲酸、酿酒等发酵工业。
绿色木霉(Trichoderma viride)是木霉菌的一种,在自然界分布广泛,常腐生于木材、种子及植物残体上。木霉菌属于半知菌亚门、丝孢纲、丝孢目,粘孢菌类。绿色木霉能产生多种具有生物活性的酶系,所产纤维素酶活性最高的菌株之一,所产生的纤维素酶对作物有降解作用。
纤维素酶(cellulase),又称β-1,4-葡聚糖-4-葡聚糖水解,是降解纤维素生成葡萄糖的一组酶的总称,是一种复合酶,主要由外切β-葡聚糖酶、内切β-葡聚糖酶和β-葡萄糖苷酶等组成,还有很高活力的木聚糖酶。在分解纤维素时起生物催化作用,可以将纤维素分解成寡糖或单糖的蛋白质,主要应用于饲料、酒精、纺织和食品等。
本发明的有益效果:
1、本发明所述的蛋白饲料,是以甘蔗渣、糖蜜为主要原料,再加入玉米粉、豆粕、麸皮、米糠和中药材等,发酵制备成适合肉牛食用的蛋白饲料,实现了甘蔗渣低成本、无二次污染的综合利用,生产过程中不产生“三废”,对环境友好;甘蔗渣化学成份主要由纤维素、半纤维素、木质素、果胶质组成,四种成分占干渣重的90%以上,经过发酵之后可以有效改善蔗渣的结构,降低粗纤维含量,提高肉牛对其的利用率,同时也能够促进微生物菌体降解和利用蔗渣的效率,加工成饲料后其营养价值高,并加入玉米粉、豆粕、麸皮、米糠等提高了饲料蛋白质的含量,饲料适口性好,用于饲养肉牛,增重快,肉质好,纤维细、色泽鲜、有韧性。
2、本发明所用的复合发酵菌剂,其活性成分包括驯化菌、产朊假丝酵母、植物乳杆菌、枯草芽孢杆菌、黑曲霉、米曲霉和绿色木霉,添加包埋剂进行包埋处理,进行真空冷冻干燥,最后按照特定的比例混合混合形成菌剂粉。各个菌种相互协调配合,发酵高效,速度快,耗能低,转化率高,稳定性好,可以弥补单一菌种发酵的不足,还可以解决自然发酵菌种过于复杂、发酵过程可控制性差的问题;还能够缩短饲料的发酵时间,所制得的蛋白饲料营养更加全面,饲料转化率高。
3、畜禽饲喂规模化发展过程中,长期连续使用抗生素造成动物体的耐药性,从而使人类病原菌也产生耐药性,危害人类的健康。本发明的发酵菌剂在发酵过程中,通过微生物及其产生的多种生理代谢物质,可以有效杀灭各种病原菌,对原料中原有的一些有害物质进行了降解和无害处理,避免了抗生素的使用,安全环保。
4、甘蔗渣是甘蔗糖厂的副产物,一直以来都是作为燃料或造纸原料,造成了资源的大量浪费。本发明以甘蔗渣、糖蜜为主要原料,将甘蔗副产物进行资源化利用,变废为宝,可以缓解人畜争粮的局面,能为糖厂带来可观的经济收益,还能促进动物养殖业的发展,降低养殖成本,具有很好的经济效益。
5、本发明所用的的驯化菌来自于大自然,经过富集、筛选、驯化得到,具有超强的繁殖与适应能力,能针对性地分解甘蔗渣、甘蔗尾梢等甘蔗副产物中的纤维素,可将粗纤维、木质素等动物难以充分消化吸收的高分子碳水化合物转化成可吸收利用的低分子物质,并同时提高了发酵饲料中粗蛋白的含量,提高饲料的营养性和适口性。
具体实施方式
为了使本发明的技术方案和优点更加清楚,下面结合本发明的实施例,对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述。
实施例1
利用甘蔗渣生产蛋白饲料的方法,包括以下步骤:
(1)按照重量份数取以下原料:甘蔗渣70份,糖蜜25份,玉米粉9份,豆粕5份,麸皮2份,米糠2份,中药材10份,复合发酵菌剂0.2份;
(2)原料预处理:将甘蔗渣粉碎至粒度不超过5mm,干燥至水分含量不超过12%,备用;将新鲜的构树、鬼针草、蒲公英、山楂和陈皮分别粉碎后混合均匀,备用;
(3)接种发酵:将玉米粉、豆粕、麸皮、米糠与中药材按比例混合均匀,加入糖蜜和水,调节水分含量至45%,接种复合发酵菌剂,装桶密封发酵5天,即得发酵精料;
(4)密封发酵:将甘蔗渣、糖蜜加入到发酵精料中,压实密封继续发酵24天,其中发酵精料、甘蔗尾梢、糖蜜三者的重量比例为1:3:1,发酵至出现酸香略带酒香味,即得蛋白饲料。
所述的甘蔗渣为甘蔗经过榨糖之后剩下的甘蔗渣;所述的糖蜜是甘蔗糖厂蔗糖结晶白糖后产生的糖蜜;所述的中药材由以下重量份数的原料制成:构树5份,鬼针草2份,蒲公英4份,山楂3份,陈皮4份;
所述的复合发酵菌剂由以下重量份数的原料制成:驯化菌冻干粉30份,产朊假丝酵母冻干粉8份,植物乳杆菌冻干粉6份,枯草芽孢杆菌冻干粉8份,黑曲霉冻干粉4份,米曲霉冻干粉4份,绿色木霉冻干粉7份,纤维素酶冻干粉20份。
所述的复合发酵菌剂的制备方法为:
(1)取驯化菌扩大培养时达到稳定期的菌液,离心,取菌泥用无菌磷酸盐缓冲液洗涤,离心再重悬于无菌磷酸盐缓冲液,加入包埋剂,进行真空冷冻干燥,即得驯化菌冻干粉剂;
(2)将产朊假丝酵母接种于麦芽汁培养基中,于37℃、pH6.4条件下培养至稳定期,取菌液进行离心,弃去上清液,取菌泥用无菌磷酸盐缓冲液洗涤,离心再重悬于无菌磷酸盐缓冲液,加入包埋剂,进行真空冷冻干燥,即得产朊假丝酵母冻干粉剂;
(3)将植物乳杆菌接种于MRS培养基,于37℃、pH6.4条件下培养至稳定期,取菌液进行离心,弃去上清液,取菌泥用无菌磷酸盐缓冲液洗涤,离心再重悬于无菌磷酸盐缓冲液,加入包埋剂,进行真空冷冻干燥,即得植物乳杆菌冻干粉剂;
(4)将各菌分部接种于PCA液体培养基,于37℃、pH7.0条件下培养至稳定期,取菌液进行离心,弃去上清液,取菌泥用无菌磷酸盐缓冲液洗涤,离心再重悬于无菌磷酸盐缓冲液,加入包埋剂,进行真空冷冻干燥,即分别得到枯草芽孢杆菌冻干粉、黑曲霉冻干粉、米曲霉冻干粉、绿色木霉冻干粉、纤维素酶冻干粉。
(5)将上述制得的各冻干粉混合均匀,即得复合发酵菌剂。
所述的包埋剂由以下重量份数的原料制成:麦芽糊精10份,β-环糊精6份,淀粉10份,水12份。
所述的真空冷冻干燥参数为:冷阱温度﹣65℃,加热温度30℃,真空度60pa,干燥至菌剂的水分含量不超过7%。
所述的MRS培养基组成成分为:蛋白胨9份,牛肉膏9份,酵母膏4份,柠檬酸氢二铵2.2份,葡萄糖22份,吐温80 1.2份,乙酸钠4.6份,磷酸氢二钾1.8份,蒸馏水1000份;所述的PCA液体培养基,组成成分为:胰蛋白胨6份,酵母膏3.2份,葡萄糖2份,蒸馏水1000份。
所述驯化菌的驯化方法包括以下步骤:
(1)选取菌泥:选取半年以上的甘蔗叶堆沤泥,糖厂甘蔗渣堆放区堆放半年以上形成的污泥,按照重量比1:1混合,即得原始菌泥,将原始菌泥现场封存在无菌玻璃瓶内,带回实验室作为原始菌群进行培养;
(2)一次驯化:取新鲜的甘蔗尾梢粉碎至200目,于121℃高压灭菌15min,冷却后加入到配制好的基础培养基混合均匀,得到一次驯化培养基,甘蔗尾梢与基础培养基的重量比为1.0~1.5:1;
根据甘蔗尾梢加入量的不同,设置6个梯度分别为:1.0:1,1.1:1,1.2:1,1.3:1,1.4:1,1.5:1,制得6种甘蔗尾梢含量不同的一次驯化培养基,每个梯度设置一组培养基,每组均有3个平行试验培养基;将步骤(1)中的原始菌泥接种到各培养基中,38℃、pH6.4条件下培养30天,每隔2~4天记录一次培养基中的情况,培养前12天每隔4天记录一次,第18~21天每隔3天记录一次,第21~30天每隔2天记录一次,根据每次记录的情况进行评分。
以甘蔗尾稍分解的百分率最多为优,满分为10分;以菌液澄清、菌泥不发臭为优,满分为10分,评分人为从事饲料生产研究相关的专业人士,人数50人,取平均分(保留两位数字)为最终的得分;按照上述评判标准,结合各组培养基中的情况,评出最优的一组为第四组,即甘蔗尾梢与基础培养基的重量比为1.3:1时驯化得到的一次驯化菌,为驯化合格的最优的一次驯化菌。
(3)二次驯化:取新鲜的甘蔗尾梢粉碎至100目,于121℃高压灭菌15min,得A料;取榨汁之后的甘蔗渣粉碎至200目,于121℃高压灭菌15min,得B料;取糖厂中甘蔗渣喷淋水形成的污水,虑去杂物,得C料;
将上述A、B、C料分别进行两两组合及三者组合,各料结合均是等重量的结合,且总重量相同,形成AB、AC、BC、ABC四组,分别加入到物料总重量四分之一的基础培养基,制成多个二次驯化培养基,每组均有3个平行试验的培养基;分别接种步骤(2)中甘蔗尾梢与基础培养基的重量比为1.3:1时驯化得到的一次驯化菌菌液,于40℃条件下培养20天,每隔2~3天记录一次培养基中的情况,培养前12天每隔3天记录一次,第12~20天每隔2天记录一次,根据每次记录的情况进行评分。
以甘蔗尾稍分解的百分率最多为优,满分为10分;以菌液澄清、菌泥不发臭为优,满分为10分;评分人为从事饲料生产研究相关的专业人士,人数50人,取平均分(保留两位数字)为最终的得分;按照上述评判标准,结合各组培养基中的情况,选择出最优的一组培养基,为ABC组,其菌液即为二次驯化菌。
所述的基础培养基由以下重量份数的原料制成:蛋白胨10份,牛肉膏10份,酵母膏5份,麦芽汁10份,柠檬酸氢二铵2份,葡萄糖20份,吐温80 1份,乙酸钠5份,磷酸氢二钾2份,胰蛋白胨5份,酵母膏2.5份,葡萄糖1.8份,蒸馏水1000份。
(4)扩大培养:取步骤(3)得到的二次驯化菌的菌液进行扩大培养,培养基为二次驯化培养基最优情况时的培养基,培养45h;
(5)分装,保藏,即得驯化菌种子液,可将驯化菌种子液进行继续扩大培养,形成大量的优势菌种,以适应工业化生产。
实施例2
利用甘蔗渣生产蛋白饲料的方法,包括以下步骤:
(1)按照重量份数取以下原料:甘蔗渣80份,糖蜜20份,玉米粉8份,豆粕4份,麸皮4份,米糠3份,中药材15份,复合发酵菌剂0.32份;
(2)原料预处理:将甘蔗渣粉碎至粒度不超过5mm,干燥至水分含量不超过12%,备用;将新鲜的构树、鬼针草、蒲公英、山楂和陈皮分别粉碎后混合均匀,备用;
(3)接种发酵:将玉米粉、豆粕、麸皮、米糠与中药材按比例混合均匀,加入糖蜜和水,调节水分含量至45~60%,接种复合发酵菌剂,装桶密封发酵8天,即得发酵精料;
(4)密封发酵:将甘蔗渣、糖蜜加入到发酵精料中,压实密封继续发酵21天,其中发酵精料、甘蔗尾梢、糖蜜三者的重量比例为1:3:1,发酵至出现酸香略带酒香味,即得蛋白饲料。
所述的甘蔗渣为甘蔗经过榨糖之后剩下的甘蔗渣;所述的糖蜜是甘蔗糖厂蔗糖结晶白糖后产生的糖蜜;所述的中药材由以下重量份数的原料制成:构树4份,鬼针草2份,蒲公英3份,山楂2份,陈皮4份;
所述的复合发酵菌剂由以下重量份数的原料制成:驯化菌冻干粉20份,产朊假丝酵母冻干粉9份,植物乳杆菌冻干粉7份,枯草芽孢杆菌冻干粉9份,黑曲霉冻干粉5份,米曲霉冻干粉5份,绿色木霉冻干粉7份,纤维素酶冻干粉19份。
所述的复合发酵菌剂的制备方法为:
(1)取驯化菌扩大培养时达到稳定期的菌液,离心,取菌泥用无菌磷酸盐缓冲液洗涤,离心再重悬于无菌磷酸盐缓冲液,加入包埋剂,进行真空冷冻干燥,即得驯化菌冻干粉剂;
(2)将产朊假丝酵母接种于麦芽汁培养基中,于37℃、pH6.4条件下培养至稳定期,取菌液进行离心,弃去上清液,取菌泥用无菌磷酸盐缓冲液洗涤,离心再重悬于无菌磷酸盐缓冲液,加入包埋剂,进行真空冷冻干燥,即得产朊假丝酵母冻干粉剂;
(3)将植物乳杆菌接种于MRS培养基,于37℃、pH6.4条件下培养至稳定期,取菌液进行离心,弃去上清液,取菌泥用无菌磷酸盐缓冲液洗涤,离心再重悬于无菌磷酸盐缓冲液,加入包埋剂,进行真空冷冻干燥,即得植物乳杆菌冻干粉剂;
(4)将各菌分部接种于PCA液体培养基,于37℃、pH7.0条件下培养至稳定期,取菌液进行离心,弃去上清液,取菌泥用无菌磷酸盐缓冲液洗涤,离心再重悬于无菌磷酸盐缓冲液,加入包埋剂,进行真空冷冻干燥,即分别得到枯草芽孢杆菌冻干粉、黑曲霉冻干粉、米曲霉冻干粉、绿色木霉冻干粉、纤维素酶冻干粉。
(5)将上述制得的各冻干粉混合均匀,即得复合发酵菌剂。
所述的包埋剂由以下重量份数的原料制成:麦芽糊精8份,β-环糊精8份,淀粉11份,水16份。
所述的真空冷冻干燥参数为:冷阱温度﹣65℃,加热温度35℃,真空度50pa,干燥至菌剂的水分含量不超过7%。
所述的MRS培养基组成成分为:蛋白胨8份,牛肉膏10份,酵母膏5份,柠檬酸氢二铵2.0份,葡萄糖20份,吐温80 1.0份,乙酸钠5份,磷酸氢二钾2.0份,蒸馏水900份;所述的PCA液体培养基,组成成分为:胰蛋白胨4份,酵母膏2份,葡萄糖1.5份,蒸馏水950份。
所述驯化菌的驯化方法与实施例1的相同。
实施例3
利用甘蔗渣生产蛋白饲料的方法,包括以下步骤:
(1)按照重量份数取以下原料:甘蔗渣90份,糖蜜30份,玉米粉7份,豆粕3份,麸皮4份,米糠4份,中药材20份,复合发酵菌剂0.4份;
(2)原料预处理:将甘蔗渣粉碎至粒度不超过5mm,干燥至水分含量不超过12%,备用;将新鲜的构树、鬼针草、蒲公英、山楂和陈皮分别粉碎后混合均匀,备用;
(3)接种发酵:将玉米粉、豆粕、麸皮、米糠与中药材按比例混合均匀,加入糖蜜和水,调节水分含量至45~60%,接种复合发酵菌剂,装桶密封发酵10天,即得发酵精料;
(4)密封发酵:将甘蔗渣、糖蜜加入到发酵精料中,压实密封继续发酵20天,其中发酵精料、甘蔗尾梢、糖蜜三者的重量比例为1:3:1,发酵至出现酸香略带酒香味,即得蛋白饲料。
所述的甘蔗渣为甘蔗经过榨糖之后剩下的甘蔗渣;所述的糖蜜是甘蔗糖厂蔗糖结晶白糖后产生的糖蜜;所述的中药材由以下重量份数的原料制成:构树2份,鬼针草4份,蒲公英2份,山楂1份,陈皮3份;
所述的复合发酵菌剂由以下重量份数的原料制成:驯化菌冻干粉15份,产朊假丝酵母冻干粉10份,植物乳杆菌冻干粉8份,枯草芽孢杆菌冻干粉10份,黑曲霉冻干粉6份,米曲霉冻干粉6份,绿色木霉冻干粉10份,纤维素酶冻干粉18份。
所述的复合发酵菌剂的制备方法为:
(1)取驯化菌扩大培养时达到稳定期的菌液,离心,取菌泥用无菌磷酸盐缓冲液洗涤,离心再重悬于无菌磷酸盐缓冲液,加入包埋剂,进行真空冷冻干燥,即得驯化菌冻干粉剂;
(2)将产朊假丝酵母接种于麦芽汁培养基中,于37℃、pH6.4条件下培养至稳定期,取菌液进行离心,弃去上清液,取菌泥用无菌磷酸盐缓冲液洗涤,离心再重悬于无菌磷酸盐缓冲液,加入包埋剂,进行真空冷冻干燥,即得产朊假丝酵母冻干粉剂;
(3)将植物乳杆菌接种于MRS培养基,于37℃、pH6.4条件下培养至稳定期,取菌液进行离心,弃去上清液,取菌泥用无菌磷酸盐缓冲液洗涤,离心再重悬于无菌磷酸盐缓冲液,加入包埋剂,进行真空冷冻干燥,即得植物乳杆菌冻干粉剂;
(4)将各菌分部接种于PCA液体培养基,于38℃、pH6.8条件下培养至稳定期,取菌液进行离心,弃去上清液,取菌泥用无菌磷酸盐缓冲液洗涤,离心再重悬于无菌磷酸盐缓冲液,加入包埋剂,进行真空冷冻干燥,即分别得到枯草芽孢杆菌冻干粉、黑曲霉冻干粉、米曲霉冻干粉、绿色木霉冻干粉、纤维素酶冻干粉。
(5)将上述制得的各冻干粉混合均匀,即得复合发酵菌剂。
所述的包埋剂由以下重量份数的原料制成:麦芽糊精9份,β-环糊精7份,淀粉12份,水20份。
所述的真空冷冻干燥参数为:冷阱温度﹣65℃,加热温度35℃,真空度58pa,干燥至菌剂的水分含量不超过7%。
所述的MRS培养基组成成分为:蛋白胨10份,牛肉膏8份,酵母膏6份,柠檬酸氢二铵1.5份,葡萄糖18份,吐温80 0.8份,乙酸钠4份,磷酸氢二钾1.5份,蒸馏水900份;所述的PCA液体培养基,组成成分为:胰蛋白胨4份,酵母膏3.2份,葡萄糖1份,蒸馏水1000份。
所述驯化菌的驯化方法与实施例1的相同。
对实施例1~3中制得的蛋白饲料进行营养成分检测,其结果如下:
实施例1 实施例2 实施例3
蛋白质(%) 20.10 20.08 20.12
活菌数(CFU/g×10<sup>10</sup>) 0.383 0.387 0.397
水分(%) 65.34 65.29 65.37
pH 3.71 3.70 3.62
中性洗涤纤维(%) 34.81 34.78 34.55
酸性洗涤木质素(%) 3.42 3.48 3.53
粗脂肪(%) 9.89 10.05 10.03
粗灰分(%) 10.65 10.58 10.52
应用实施例
将本发明实施例中制得的蛋白饲料对肉牛进行喂养试验,如下:
选择同一时期养殖的、身体状况相近的同一批肉牛200头,肉牛的品种为夏洛莱牛,试验初期年龄为5个月。将夏洛莱牛平均分为四组,每组50头,前三组分别投喂实施例1~3的蛋白饲料,对照组投喂含有甘蔗渣的普通青贮饲料,每组均为自由采食,试验期100天。试验结果如下表所示:
期初均重(kg) 期末均重(kg) 平均日增重(kg) 耗料增重比 发病率(%)
实施例1 242 372 1.30 6.5:1 2
实施例2 245 379 1.34 6.5:1 0
实施例3 251 386 1.35 6.6:1 0
对照组 245 324 0.79 10.1:1 6
上述结果表明,本发明制得的蛋白饲料喂养的肉牛与青贮饲料相比具有很好的增重效果,能够保证肉牛的健康成长,肉牛的发病率明显降低,耗料增重比降低。

Claims (9)

1.利用甘蔗渣生产蛋白饲料的方法,其特征在于:包括以下步骤:
(1)按照重量份数取以下原料:甘蔗渣70~90份,糖蜜20~30份,玉米粉7~9份,豆粕3~5份,麸皮2~4份,米糠2~4份,中药材10~20份,复合发酵菌剂0.2~0.4份;
(2)原料预处理:将甘蔗渣粉碎至粒度不超过5mm,干燥至水分含量不超过12%,备用;将新鲜的构树、鬼针草、蒲公英、山楂和陈皮分别粉碎后混合均匀,备用;
(3)接种发酵:将玉米粉、豆粕、麸皮、米糠与中药材按比例混合均匀,加入糖蜜和水,调节水分含量至45~60%,接种复合发酵菌剂,装桶密封发酵5~10天,即得发酵精料;
(4)密封发酵:将甘蔗渣、糖蜜加入到发酵精料中,压实密封继续发酵20~24天,其中发酵精料、甘蔗尾梢、糖蜜三者的重量比例为1:3:1,发酵至出现酸香略带酒香味,即得蛋白饲料。
2.根据权利要求1所述的利用甘蔗渣生产蛋白饲料的方法,其特征在于:所述的甘蔗渣为甘蔗经过榨糖之后剩下的甘蔗渣;所述的糖蜜是甘蔗糖厂蔗糖结晶白糖后产生的糖蜜;所述的中药材由以下重量份数的原料制成:构树2~5份,鬼针草2~4份,蒲公英2~4份,山楂1~3份,陈皮2~4份。
3.根据权利要求1所述的利用甘蔗渣生产蛋白饲料的方法,其特征在于:所述的复合发酵菌剂由以下重量份数的原料制成:驯化菌冻干粉15~30份,产朊假丝酵母冻干粉8~10份,植物乳杆菌冻干粉6~8份,枯草芽孢杆菌冻干粉8~10份,黑曲霉冻干粉4~6份,米曲霉冻干粉4~6份,绿色木霉冻干粉7~10份,纤维素酶冻干粉18~20份。
4.根据权利要求1所述的利用甘蔗渣生产蛋白饲料的方法,其特征在于:所述的复合发酵菌剂的制备方法为:
(1)取驯化菌扩大培养时达到稳定期的菌液,离心,取菌泥用无菌磷酸盐缓冲液洗涤,离心再重悬于无菌磷酸盐缓冲液,加入包埋剂,进行真空冷冻干燥,即得驯化菌冻干粉剂;
(2)将产朊假丝酵母接种于麦芽汁培养基中,于36~38℃、pH6.3~6.5条件下培养至稳定期,取菌液进行离心,弃去上清液,取菌泥用无菌磷酸盐缓冲液洗涤,离心再重悬于无菌磷酸盐缓冲液,加入包埋剂,进行真空冷冻干燥,即得产朊假丝酵母冻干粉剂;
(3)将植物乳杆菌接种于MRS培养基,于36~38℃、pH6.3~6.5条件下培养至稳定期,取菌液进行离心,弃去上清液,取菌泥用无菌磷酸盐缓冲液洗涤,离心再重悬于无菌磷酸盐缓冲液,加入包埋剂,进行真空冷冻干燥,即得植物乳杆菌冻干粉剂;
(4)将各菌分部接种于PCA液体培养基,于36~38℃、pH6.8~7.2条件下培养至稳定期,取菌液进行离心,弃去上清液,取菌泥用无菌磷酸盐缓冲液洗涤,离心再重悬于无菌磷酸盐缓冲液,加入包埋剂,进行真空冷冻干燥,即分别得到枯草芽孢杆菌冻干粉、黑曲霉冻干粉、米曲霉冻干粉、绿色木霉冻干粉、纤维素酶冻干粉;
(5)将上述制得的各冻干粉混合均匀,即得复合发酵菌剂。
5.根据权利要求3所述的利用甘蔗渣生产蛋白饲料的方法,其特征在于:所述驯化菌的驯化方法包括以下步骤:
(1)选取菌泥:选取半年以上甘蔗地土壤或甘蔗叶堆沤泥,或者糖厂甘蔗渣堆放区堆放半年以上形成的污泥,即得原始菌泥,将原始菌泥现场封存在无菌玻璃瓶内,带回实验室作为原始菌群进行培养;
(2)一次驯化:取新鲜的甘蔗尾梢粉碎至100~200目,于121℃高压灭菌10~20min,冷却后加入到配制好的基础培养基混合均匀,甘蔗尾梢与基础培养基的重量比为1.0~1.5:1,即得一次驯化培养基;
根据甘蔗尾梢加入量的不同,设置5~6个梯度,制备几种甘蔗尾梢含量不同的一次驯化培养基,将步骤(1)中的原始菌泥接种到各培养基中,35~40℃、pH6.3~6.5条件下培养20~30天,每隔2~4天记录一次培养基中的情况,以甘蔗尾稍分解得最多为优,以菌液澄清、菌泥不发臭为优,综合各个培养基中的情况,选择最优的一组培养基,其菌液中存活的菌即为一次驯化菌;
(3)二次驯化:取新鲜的甘蔗尾梢粉碎至100~200目,于121℃高压灭菌10~20min,得A料;取榨汁之后的甘蔗渣粉碎至100~200目,于121℃高压灭菌10~20min,得B料;取糖厂中甘蔗渣喷淋水形成的污水,虑去杂物,得C料;
将上述A、B、C料分别进行两两组合或者三者组合,加入到基础培养基,制成多个二次驯化培养基,分别接种步骤(2)中一次驯化菌的菌液,于35~42℃条件下培养15~30天,每隔2~4天记录一次培养基中的情况,以甘蔗尾稍、甘蔗渣分解得最多为优,以污水澄清、不发臭为优,综合各个培养基中的情况,选择最优的一组培养基,其菌液即为二次驯化菌;
(4)扩大培养:取步骤(3)得到的二次驯化菌的菌液进行扩大培养,培养基为二次驯化培养基最优情况时的培养基,培养40~50h;
(5)分装,保藏,即得驯化菌种子液,可将驯化菌种子液进行继续扩大培养,形成大量的优势菌种,以适应工业化生产。
6.根据权利要求4所述的利用甘蔗渣生产蛋白饲料的方法,其特征在于:所述的包埋剂由以下重量份数的原料制成:麦芽糊精8~10份,β-环糊精6~8份,淀粉10~12份,水8~20份。
7.根据权利要求4所述的利用甘蔗渣生产蛋白饲料的方法,其特征在于:所述的真空冷冻干燥参数为:冷阱温度﹣65℃,加热温度30~35℃,真空度≤60pa,干燥至菌剂的水分含量不超过7%。
8.根据权利要求4所述的利用甘蔗渣生产蛋白饲料的方法,其特征在于:所述的MRS培养基组成成分为:蛋白胨8~10份,牛肉膏8~10份,酵母膏4~6份,柠檬酸氢二铵1.5~2.2份,葡萄糖18~22份,吐温80 0.8~1.2份,乙酸钠4~6份,磷酸氢二钾1.5~2.5份,蒸馏水900~1000份;所述的PCA液体培养基,组成成分为:胰蛋白胨4~6份,酵母膏2~3.2份,葡萄糖1~2份,蒸馏水950~1000份。
9.根据权利要求5所述的利用甘蔗渣生产蛋白饲料的方法,其特征在于:所述的基础培养基由以下重量份数的原料制成:蛋白胨8~10份,牛肉膏8~10份,酵母膏4~6份,麦芽汁5~10份,柠檬酸氢二铵1.5~2.2份,葡萄糖18~22份,吐温80 0.8~1.2份,乙酸钠4~6份,磷酸氢二钾1.5~2.5份,胰蛋白胨4~6份,酵母膏2~3.2份,葡萄糖1~2份,蒸馏水900~1000份。
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