CN1081688A - 5，10-亚甲四氢叶酸-环糊精包合物 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及新颖的5，10-亚甲四氢叶酸的环糊 精包合物。这些化合物的惊人的良好稳定性首次使 它们药用成为可能。
本发明还涉及该物质的制备方法及它们在制药 中的用途。

Description

本发明涉及（6R）-，（6S）和（6R，S）-5，10-亚甲四氢叶酸的α-，β-，γ-，羟丙基-β-，羟丙基-γ-，二甲基-β-，二甲基-γ-环糊精包合物。这些化合物惊人的良好稳定性首次使它们应用为药物成为可能。
本发明还涉及该物质的制备方法以及它们在制药中的用途。
下面提到的羟丙基环糊精在每一种情况下可理解为指的是羟丙基环糊精（0.6），羟丙基环糊精（0.9），3-羟丙基环糊精，2，3-二羟丙基环糊精，特别是2-羟丙基环糊精。下面提到的5，10-亚甲四氢叶酸也可理解为指的是5，10-亚甲四氢叶酸盐，特别是碱金属和碱土金属盐。
四氢叶酸盐是叶酸的生物活性形式（叶酸辅助因素）。作为药物，四氢叶酸主要以5-甲酰-5、6、7、8-四氢叶酸（甲酰四氢叶酸）的钙盐形式使用，例如，用于提高5-氟尿嘧啶的治疗效果，或当氨甲蝶呤用于治疗癌症时作为补救物质。
在体内，（6s）-5-甲酰四氢叶酸被转化为（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸，后者作为辅助因素，形成了一种细胞抑制剂共价三元配合物，5-F-dUMP/TS/5，10-亚甲四氢叶酸，这种三元配合物包括由5-氟尿嘧啶形成的（5-F-dUMP）和胸苷酸合成酶（TS）。参见W.A.Bleyer，Cancer，March  15  Supplememt  1989：PP.995-1007和F.L.RStokstad，Folic  Acid  Metabolism  in  Health  and  Disease  1990（Wiley-Liss  Inc），Page  9.
所以最好直接应用辅助因素亚甲四氢叶酸而不用甲酰四氢叶酸（5-甲酰四氢叶酸）参见WO91/17660  Page5，24-35行。到目前为止，这项工作由于5，10-四氢叶酸及其盐的纯度和稳定性不足而失败。为此对比EPO，409，125;其中所描述的（6R，S）-5，10-亚甲四氢叶酸的纯度一般在85%到95%之间。仅由（6R，S）-5，10-亚甲四氢叶酸的钙盐和镁盐可制得纯度为96.5-98.8%的样品。但是盐溶液的稳定性是非常关键的。在pH值为9时，6小时后只有占起始量约85%的5，10-亚甲四氢叶酸仍然存在。参见EP0，409，125，表，P14。
溶液中的5，10-亚甲四氢叶酸与甲醛和四氢叶酸相平衡。参见L.J.Machlin，Handbook  of  Vitamins，2nd  Ed.（Marcel  Decker  Inc.，N.Y./Basle），T.Brody  Page  457;M.J.Osborn等，J.Am.Chem.Soc.82，4921（1960），R.G.kallen等，J.Biol.Chem.，241，5851（1966），Moran等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA  76，1456-1460（1979）。这个平衡妨碍了5，10-四氢叶酸的胃肠外用。同时在WO  91/17660中，较深入细致地研究了应用5，10-亚甲四氢叶酸较之应用其它四氢叶酸衍生物的优越性，但结果没有显示5，10-亚甲四氢叶酸稳定的可能性。然而，这种稳定性正是首先使5，10-四氢叶酸的药用成为可能的基础。以往已知的工艺，比如通过加入抗坏血酸，对羟基苯甲酸酯类、巯基醇类或者氨基丁三醇来稳定5-甲酰四氢叶酸，参见EP0，416，232，或者通过加入碱土金属离子的络合剂来稳定5-甲酰四氢叶酸的钙盐，参见EP0，401，895，这些已知的工艺对5，10-亚甲四氢叶酸不适用或者说只能起有限的作用，例如，可以延迟四氢叶酸及其衍生物的氧化降解。但上述这些方法都不能影响5，10-亚甲四氢叶酸与四氢叶酸和游离甲醛之间的平衡。
显然，以β-环糊精稳定二氢叶酸〔可用作在氨甲蝶呤（JP58-48933  昭）的生物化学分析中的基质物〕和以环糊精稳定甲酰四氢叶酸（EP0，427，078）也明显基于抑制氧化降解的目的。
目前令人惊喜的发现是四氢叶酸在环糊精的存在下还和甲醛发生缩合反应，特别是在水溶液中反应之后得到了5，10-亚甲四氢叶酸在相应的环糊精中的稳定包合物，因而，5，10-亚甲四氢叶酸在水溶液中发挥治疗作用首次成为可能。
稳定性的提高格外引人注目，因为以往的实验结果给出的结论是实际上在四氢叶酸和环糊精之间没有相互作用。参见D.W.Armstrong等，Science，232，1132-5，（1986），尤其是P134，2栏，2行。  通过内部测量可能证实环糊精不与5-甲酰四氢叶酸相互作用，而只与5-亚甲四氢叶酸发生极弱的相互作用。就化学降解而言，但是还就在游离甲醛和四氢叶酸的平衡中间5，10-亚甲四氢叶酸转移而言，5，10-亚甲四氢叶酸的稳定因而未被预料。
环糊精包合物优选通过在相应环糊精存在下与甲醛反应，从（6S）-，（6R）-和（6R，S）-四氢叶酸的硫酸盐或磺酸盐制得，而这些盐依照欧洲专利申请EP-0，495，204可以就地或经预先分离之后或释出并纯化之后而容易地制得。对于四氢叶酸的定量反应，只需甲醛至多10-20%的较少摩尔过量。反应优选在PH值在8到9之间的范围内进行。但是，该包合物也可以通过将（6R）-，（6S）-，或（6R，S）-5，10-亚甲四氢叶酸引入环糊精溶液或环糊精悬浮液中而制得，或者也可以通过将固态的（6R）-，（6S）-，或（6R，S）-5，10-亚甲四氢叶酸和环糊精研成粉末来制得。得到的产物在室温下在溶液中是稳定的。这些产物适于用作胃肠外药剂的组分或者作为生产口服药剂的原材料。口服和非胃肠的药物形式都是适合的，例如，用于癌症的治疗，用于治疗某些形式的贫血症，自身免疫的疾病以及神经紊乱。
本发明涉及新颖的（6R）-，（6S）-和（6R，S）-5，10-亚甲四氢叶酸的α-，β-，γ-，羟丙基-β-，羟丙基-γ-，二甲基-β-和二甲基-γ-环糊精的包合物。这些产物在水溶液中是稳定的。它们也适合于非胃肠用药的制备，比如用于治疗癌症。
由于其高溶解度和生理上良好的承受能力，5，10-亚甲四氢叶酸的碱金属或碱土金属盐，尤其是钠、锂、钙或镁盐，特别适合于这些化合物的制备。在与钙盐相近的纯度下，5，10-亚甲四氢叶酸的镁盐具有的溶解度大约高出10倍，而钠盐和锂盐的溶解度还要高一些。所以尤其要强调这些物质在制药中的应用。
优选的化合物是：
（6R）-和（6S）-5，10-亚甲四氢叶酸的碱金属或碱土金属盐和β-环糊精
（6R）-和（6S）-5，10-亚甲四氢叶酸的碱金属或碱土金属盐和羟丙基-β-环糊精
（6R）-和（6S）-5，10-亚甲四氢叶酸的碱金属或碱土金属盐和羟丙基-γ-环糊精
（6R）-和（6S）-5，10-亚甲四氢叶酸的碱金属或碱土金属盐和γ-环糊精
（6R）-和（6S）-5，10-亚甲四氢叶酸的碱金属或碱土金属盐和二甲基-β-环糊精
其中在每一种情况下，5，10-亚甲四氢叶酸的天然的（6R）-型更适于此种包合物的制备。
本发明进一步涉及5，10-亚甲四氢叶酸的稳定的环糊精包合物的制备方法，其特征在于5，10-亚甲四氢叶酸或5，10-亚甲四氢叶酸的一种衍生物与α-，β-或γ-环糊精或α-，β-，γ-环糊精的一种衍生物反应，或者四氢叶酸或四氢叶酸的一种盐优选与相应的环糊精反应，如果需要的话可以转化为另一种盐或该酸被释放出来，然后就可以通过加入甲醛就地制备5，10-亚甲四氢叶酸-环糊精包合物，并且，如果需要的话，5，10-亚甲四氢叶酸-环糊精包合物可以分离出来。
在这里，5，10-亚甲四氢叶酸或四氢叶酸的优选的盐组分是药理上可承受的阳离子如钠离子，锂离子，镁离子或钙离子，或者阴离子如硫酸根、磺酸根或卤离子。
优选的环糊精包合物是与环糊精如β-，羟丙基-β-，二甲基-β-，γ-，羟丙基-γ-或二甲基-γ-环糊精形成的。优选使用环糊精与5，10-亚甲四氢叶酸的摩尔比至少为1∶1或2∶1。这里使用高浓度的环糊精溶液是理想的。也可以使用各种环糊精的混合物。按照预定应用，一种特定的5，10-亚甲四氢叶酸的盐，一种特定的环糊精或者5，10-亚甲四氢叶酸与环糊精的一种特定比例也可以是优选的。最优化条件可以通过简单的实验来确定。
在环糊精存在下，四氢叶酸与甲醛的反应在由水组成的溶剂或水混溶性有机溶剂如低级脂肪族羧酸或低级醇中进行。
由于四氢叶酸对氧化的敏感性，建议采用防止氧化的保护措施。
环糊精包合物的分离可以采用已知的工艺进行，例如，在真空下，在升高的温度下蒸除溶剂，结晶，冻干或者通过加入一种有机溶剂沉淀析出。
通过研碎固态的5，10-亚甲四氢叶酸以及环糊精也可以制备环糊精包合物。
本发明也涉及（6R-），（6S）-或（6R，S）-5，10-亚甲四氢叶酸或它的盐在α-，β-或γ-环糊精中作为包合物或其衍生物作为一种组分或作为一种起始原料在制药中的用途。
实施例
实施例1
5，10-亚甲四氢叶酸及其盐的环糊精包合物在溶液中的稳定性
a）在23℃下，磷酸盐缓冲溶液中，（6R）-和（6S）-5，10-亚甲四氢叶酸的钠盐溶液和钙盐溶液的稳定性
星期
1  2  4  5  7  14
(6R)-CH2-THF的钠盐
不加环糊精、在N2下 91.1 64.4 30.5 18.1 16.7 -
(6R)-CH2-THF的钠盐
β-环糊精  -  92.3  -  -  -  88.5
(6S)-CH2-THF的钠盐
β-环糊精  100.0  84.8  -  75.0  -  -
(6R)-CH2-THF的钠盐
100.0  95.8  94.3  83.2  78.5  73.0
α-+β环糊精(1:1:1)
(6R)-CH2-THF的钙盐
-  80.2  57.3  50.2  47.4  44.0
α-+β-环糊精(1:1:1)
CH2-THF＝5，10-亚甲四氢叶酸
b）.在60℃/应力试验中，在磷酸盐缓冲溶液中，（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸的钠盐溶液的稳定性
小时
3  6  18  24  30  48
不加环糊精  77.7  34.4  2.8  -  0.8  -
α-环糊精  -  84.1  -  -  -  12.6
β-环糊精  91.2  -  -  75.2  -  -
二甲基-β-环糊精  88.9  -  -  31.5  -  -
羟丙基-β-环糊精  90.4  -  -  70.5  -  -
γ-环糊精  95.4  -  -  63.5  -  -
羟丙基-γ-环糊精  97.4  -  -  73.7  -  -
c）.在60℃/应力试验中磷酸盐缓冲溶液中，（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸的钙盐溶液的稳定性
小时
3  6  18  24  30  48
不加环糊精  74.4  53.8  -  7.7  2.6  0.1
α-环糊精  74.5  56.4  -  7.8  3.8  0.8
羟丙基-α-环糊精(0.6)  75.3  57.1  -  7.8  2.7  0.7
β-环糊精  87.7  77.8  -  42.0  33.3  14.8
二甲基-β-环糊精(1.8)  80.2  69.1  -  29.6  22.2  7.4
羟丙基-β-环糊精(0.6)  83.8  71.2  -  28.8  22.5  6.2
羟丙基-β-环糊精(0.9)  83.5  69.6  -  29.1  21.5  7.6
γ-环糊精  81.2  66.2  -  16.2  8.8  1.2
羟丙基-γ-环糊精(0.6)  95.1  81.4  -  13.6  6.8  1.0
d）在60℃/应力试验中，磷酸盐缓冲溶液中，（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸的镁盐溶液的稳定性
小时
3  6  18  24  30
不加环糊精  72.7  53.4  -  7.6  2.4
α-环糊精  76.5  58.8  -  12.9  4.9
羟丙基-α-环糊精(0.6)  80.2  67.4  -  14.0  6.3
β-环糊精  79.1  61.6  -  26.7  17.4
二甲基-β-环糊精(1.8)  73.6  56.3  -  19.5  11.5
羟丙基-β-环糊精(0.6)  83.3  64.3  -  25.0  14.3
羟丙基-β-环糊精(0.9)  82.6  65.1  -  24.4  12.8
γ-环糊精  82.1  64.3  -  20.2  10.8
羟丙基-γ-环糊精(0.6)  81.2  64.7  -  17.6  8.9
上面各表中给出的值在每一种情况下是对应于5，10-亚甲四氢叶酸起始值（t＝0）的百分含量。
对于稳定性的测定，采用5，10-亚甲四氢叶酸浓度约为4%，PH值为7的溶液，依据实施例3-20制备。这些实验的目的是在每种情形下获得可与那些在表a，b，c或d之一中的实验结果相对比的实验结果。在最佳选择的条件下，包合物的稳定性明显地高，最佳条件可以通过改变5，10-亚甲四氢叶酸或者环糊精的浓度或通过改变它们的浓度比或通过选择5，10-亚甲四氢叶酸的盐或通过选择溶剂。而由简单的实验容易地确定。
在下面实施例中，采用具有下列含水量的环糊精制备各种物质：
α-环糊精11.5%，β-环糊精15.6%，二甲基-β-环糊精12.7%，羟丙基-β-环糊精6.4%，γ-环糊精9.8%，二甲基-γ-环糊精9.2%，羟丙基-γ-环糊精6.0%（所有这些值都可以通过热重分析的方法确定）。
实施例2
5，10-亚甲四氢叶酸的环糊精包合物相对于环糊精和5-甲酰四氢叶酸的混合物的化学位移
由于与β-环糊精形成包合物，在PH9下、在水溶液中测得5，10-亚甲四氢叶酸的13C信号或5-甲酰四氢叶酸的13C信号和5，10-亚甲四氢叶酸的1H信号的屏蔽（△ppm）变化
13C谱 △ppm
5,10-亚甲四氢叶酸  C-7  +0.532
C-9  +0.908
C-11  +1.301
13C谱 △ppm
5-甲酰四氢叶酸  C-7  +0.013
C-9  +0.013
C-11  -0.007
1H谱
△ppm
5,10-亚甲四氢叶酸 H2-7 +0.20
H-3″/H-5″-0.15
H-2″/H-6″+0.07
H2-γ-Glu-0.08
从5-甲酰四氢叶酸的13C谱的△ppm值，可以清楚地看出环糊精不与这种物质发生相互作用。与此相反，5，10-亚甲四氢叶酸的13C谱和1H谱的△ppm值则表明了其与环糊精间极强的相互作用，尤其在分子中的蝶啶部分。
实施例3
（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸的β-环糊精包合物
在室温，氮气保护下，将22.7gβ-环糊精与4.88g（6S）-四氢叶酸悬浮于2000ml水中。然后滴加36.2%的福尔马林溶液1.3ml。缓慢加热悬浊液至约40℃，就可以得到实际上透明的溶液，经过澄清过滤后，在20℃/1mbar下，于旋转式汽化器中浓缩干燥。
可得到25.8g（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸的β-环糊精的包合物，其中含（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸13.3%（以HPLC的方法测定）。
实施例4
（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸钠盐的β-环糊精包合物
a）将22.7gβ-环糊精悬浮于650ml水中。在室温、氮气保护下加入4.8g（6S）-四氢叶酸。在此过程中，悬浮液的pH值保持在7-9之间（16.3ml的1N  NaoH）。然后滴加福尔马林溶液（36.2%）0.93ml。得到的溶液经过澄清过滤后，在继续反应20分钟后，在室温、20℃/1mbar下浓缩至干燥。
最后可得到26.3g的（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸钠盐的β-环糊精包合物，其中含17.9%的（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸（以HPLC的方法测定）。
b）通过将10g湿的β-环糊精和2.6g（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸钠盐研成细的粉末可得到如实施例4a）所述相似的产物。
固体的稳定性：经113天/-25℃后，含（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸100%，经63天/+23℃后含98.2%。
实施例5
（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸钙盐的β-环糊精的包合物
将5.78g的β-环糊精和320mg氢氧化钙悬浮于30ml水中。在氮气保护下，加入1.97g的（6S）-四氢叶酸。然后再加28ml水和0.37ml福尔马林溶液（36.2%）。得到的溶液澄清过滤后，在0℃下，以300ml乙醇将包合物从滤液中沉淀出来。产物用乙醇/水洗涤，在20℃下干燥。
可得到7.7g（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸钙盐的β-环糊精包合物，其中含25.6%的（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸（由HPLC的方法测定）。
实施例6
（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸钾盐的β-环糊精包合物
（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸钾盐的β-环糊精包合物通过类似实施例4所述的方法制备。
实施例7
（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸镁盐的β-环糊精包合物
（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸镁盐的β-环糊精包合物通过类似实施例5所述的方法制备。
实施例8
（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸钙盐的α-和β-环糊精包合物
将α-环糊精10.85g，β-环糊精12.9g，氢氧化钙744mg悬浮于100ml水中。在氮气下，加入4.93g（6S）-四氢叶酸，再加31mg的氢氧化钙，并加入0.92ml福尔马林溶液（36.2%）。在另外20分钟的反应时间后，将溶液澄清过滤，然后在0℃下以750ml乙醇从滤液中沉析出包合物，包合物经乙醇/水洗涤后，在20℃下干燥。
可得到（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸的α-/β-环糊精包合物29.2g，其中含16.5%的（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸（以HPLC的方法测定）。
实施例9
（6S）-5，10-亚甲四氢叶酸钠盐的β-环糊精包合物
将β-环糊精2.27g悬浮于100ml水中。在室温、氮气保护下，加入608mg（6S）-5，10-亚甲四氢叶酸。在此过程中，悬浮液的pH值保持在7-9之间（1N  NaoH溶液2.7ml）。所得溶液经澄清过滤后，冻干。
可得到（6S）-5，10-亚甲四氢叶酸钠盐的β-环糊精包合物2.75g，其中含16.0%的（6S）-5，10-亚甲四氢叶酸（以HPLC的方法测定）。
固体稳定性：经156天/-25℃后，含（6S）-5，10-亚甲四氢叶酸-THF100%。
实施例10
从硫酸盐制得的（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸钠盐的β-环糊精包合物
将22.7gβ-环糊精悬浮于1130ml水中。在室温、氮气保护下，加入（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸硫酸盐5.4g。在此过程中，悬浮液的pH值保持在7-9之间（1N  NaoH溶液33ml）。所得溶液经澄清过滤后，冻干。
可得（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸钠盐的β-环糊精包合物28.4g，其中含15.3%的（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸（以HPLC方法测定）。
固体稳定性：经154天/-25℃后，含（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸钠盐99.5%。
实施例11
从溶液中制取（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸的β-环糊精包合物
在25℃下，将2.27gβ-环糊精溶解在150ml水中。在氮气保护下（pH3.7）加入（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸608mg。得到的溶液经澄清过滤后，将滤液冷冻干燥。
可得（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸的β-环糊精包合物2.7g，其中含15.5%的（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸（以HPLC的方法测定）。
固体稳定性：经158天/-25℃后，含（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸100.0%。
实施例12
（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸硫酸盐的β-环糊精包合物
类似实施例11，使用（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸硫酸盐540mg，可制得（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸硫酸盐的β-环糊精包合物2.65g，其中含15.2%的（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸（以HPLC方法测定）。
固体稳定性：经157天/-25℃后，含（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸硫酸盐99.0%。
实施例13
（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸苯磺酸盐的β-环糊精包合物
类似实施例11，使用（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸苯磺酸盐603mg，可制得（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸苯磺酸盐的β-环糊精包合物2.94g，其中含13.1%的（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸（以HPLC的方法测定）。
固体稳定性：经72天/-25℃后，含（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸100.0%。
实施例14
（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸钙盐的β-环糊精包合物
类似实施例11，使用（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸钙盐610mg，可得到（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸钙盐的β-环糊精包合物2.65g，其中含15.6%的（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸（以HPLC的方法测定）。
实施例15
（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸镁盐的β-环糊精包合物
类似实施例11，使用（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸镁盐600mg，可得到（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸镁盐的β-环糊精包合物2.69g，其中含13.1%的（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸（以HPLC方法测定）。
固体稳定性：经155天/-25℃后，含99.5%的（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸镁盐。
实施例16
（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸钠盐的二甲基-β-环糊精包合物
将26.2g二甲基-β-环糊精溶解在100ml水中。在室温、氮气保护下，加入（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸硫酸盐5.6g。在此过程中，溶液的pH值保持在7-9（1N  NaoH溶液37ml）。得到的溶液经澄清过滤后，冷冻干燥。
可制得（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸钠盐的二甲基-β-环糊精包合物32.6g，其中含14.3%的（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸（以HPLC方法测定）。
固体稳定性：经56天/-25℃后，含（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸钠盐100%;经56天/+25℃后，含97.5%。
实施例17
（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸硫酸盐的二甲基-β-环糊精包合物
将2.62g二甲基-β-环糊精溶解在10ml水中。在室温、氮气保护下，加入（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸硫酸盐560mg，再加入140ml水。所得溶液经澄清过滤后，冷冻干燥。
可得到（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸硫酸盐的二甲基-β-环糊精包合物3.29g，其中含13.6%的（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸（以HPLC方法测定）。
实施例18
（6R）或（6S）-5，10-亚甲四氢叶酸的羟丙基-β-环糊精包合物
（6R）或（6S）-5，10-亚甲四氢叶酸及其盐的羟丙基-β-环糊精包合物可使用羟丙基-β-环糊精通过类似实施例3-17的方法制得。
实施例19
（6R）或（6S）-5，10-亚甲四氢叶酸的羟丙基-γ-环糊精包合物
（6R）或（6S）-5，10-亚甲四氢叶酸及其盐的羟丙基-γ-环糊精包合物可使用羟丙基-γ-环糊精通过类似实施例3-17的方法制得。
实施例20
（6R）或（6S）-5，10-亚甲四氢叶酸的二甲基-γ-环糊精包合物
（6R）或（6S）-5，10-亚甲四氢叶酸及其盐的二甲基-γ-环糊精包合物可使用二甲基-γ-环糊精通过类似实施例3-17的方法制得。

Claims (11)

1、稳定的含水组合物，包括：
i)(6R)-，(6S)-或(6R，S)-5，10-亚甲四氢叶酸或(6R)-，(6S)-或(6R，S)-5，10-亚甲四氢叶酸的一种盐，和
iia)α-，β-或γ-环糊精或α-，β-或γ-环糊精的一种衍生物，或者
iib)α-，β-或γ-环糊精的混合物，或者α-，β-或γ-环糊精的衍生物的混合物，或者α-，β-或γ-环糊精和α-，β-或γ-环糊精的一种衍生物的混合物。
2、根据权利要求1的组合物，其中采用（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸或者（6R）-5，10-亚甲四氢叶酸的一种药理上可承受的盐以及β-或γ-环糊精或β-或γ-环糊精的一种药理上可承受的衍生物。
3、根据权利要求1或2的组合物，其中所采用的药理上可接受的5，10-亚甲四氢叶酸的盐是碱金属或碱土金属盐，优选钠、镁或钙盐，以及所采用的药理上可接受的环糊精的衍生物是羟烷基化或烷基化的β-或γ-环糊精，优选羟丙基-β-，羟丙基-γ-或二甲基-β-环糊精。
4、（6R）-或（6S）-5，10-亚甲四氢叶酸或其盐的α-，β-或γ-环糊精包合物。
5、（6R）-或（6S）-5，10-亚甲四氢叶酸或其盐的羟烷基-β-或羟烷基-γ-环糊精包合物。
6、（6R）-或（6S）-5，10-亚甲四氢叶酸或其盐的羟丙基-β-或羟丙基-γ-环糊精包合物。
7、（6R）-或（6S）-5，10-亚甲四氢叶酸或其盐的烷基-β-或烷基-γ-环糊精包合物。
8、（6R）-或（6S）-5，10-亚甲四氢叶酸或其盐的二甲基-β-或二甲基-γ-环糊精包合物。
9、通过加入α-，β-或γ-环糊精或α-，β-或γ-环糊精的一种衍生物而使（6R）-，（6S）-或（6R，S）-5，10-亚甲四氢叶酸及其盐的水溶液稳定的方法。
10、制备（6R）-，（6S）-或（6R，S）-5，10-亚甲四氢叶酸及其盐的稳定溶液的方法，其特征在于（6S）-，（6R）-或（6R，S）-四氢叶酸或相应的四氢叶酸的盐，在α-，β-或γ-环糊精或α-，β-或γ-环糊精的一种衍生物的存在下，与甲醛反应;如果需要的话，还可以转化为另一种盐，并且如果需要的话，制得的5，10-亚甲四氢叶酸-环糊精包合物可以分离出来。
11、（6R）-，（6S）或（6R，S）-5，10-亚甲四氢叶酸或其盐在α-，β-，或γ-环糊精中作为包合物或它们的衍生物作为一种成分或一种起始原料用于制药。
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