HU212665B - Process for producing stabile aquous compositions containing 5,10-methylene-tetrahydro-folic acid and process for producing 5,10-methylene-tetrahydro-folic acid/cyclodextrin inclusion compounds - Google Patents
Process for producing stabile aquous compositions containing 5,10-methylene-tetrahydro-folic acid and process for producing 5,10-methylene-tetrahydro-folic acid/cyclodextrin inclusion compounds Download PDFInfo
- Publication number
- HU212665B HU212665B HU9301990A HU9301990A HU212665B HU 212665 B HU212665 B HU 212665B HU 9301990 A HU9301990 A HU 9301990A HU 9301990 A HU9301990 A HU 9301990A HU 212665 B HU212665 B HU 212665B
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- methylene
- cyclodextrin
- tetrahydrofolic acid
- salt
- acid
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
- A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
- A61K47/40—Cyclodextrins; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
- A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/69—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit
- A61K47/6949—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit inclusion complexes, e.g. clathrates, cavitates or fullerenes
- A61K47/6951—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit inclusion complexes, e.g. clathrates, cavitates or fullerenes using cyclodextrin
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B82—NANOTECHNOLOGY
- B82Y—SPECIFIC USES OR APPLICATIONS OF NANOSTRUCTURES; MEASUREMENT OR ANALYSIS OF NANOSTRUCTURES; MANUFACTURE OR TREATMENT OF NANOSTRUCTURES
- B82Y5/00—Nanobiotechnology or nanomedicine, e.g. protein engineering or drug delivery
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Nanotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Ink Jet (AREA)
- Ink Jet Recording Methods And Recording Media Thereof (AREA)
Description
A találmány 5,10-metilén-tetrahidrofolsavat tartalmazó stabil vizes oldatok és 5,10-metilén-tetrahidrofolsav/ciklodextrin zárványvegyületek előállítására alkalmas eljárásra vonatkozik. A bejelentés tárgyát képezi az az eljárás is, amelynek alkalmazásával az 5,10-metilén-tetrahidrofolsavat - izomerek vagy racemát formájában - fel lehet használni gyógyszerkészítmények előállítására.
Részletesebben kifejtve: a találmány szerinti eljárással elő lehet állítani a (6R)-, a (6S)- és a (6R,S)5,10-metilén-tetrahidrofolsav α-, β-, γ-ciklodextrinnel vagy hidroxi-propil-, vagy dimetil-α-, -β vagy -γ-ciklodextrinnel képzett zárványvegyületeit, amelyeknek meglepően jó stabilitása révén először nyílik lehetőség az említett folsavszármazékok gyógyászati alkalmazására.
Ha a leírásban hidroxi-propil-ciklodextrin olvasható, minden esetben szó van a hidroxi-propil-ciklodextrin (0,6)-ról, a hidroxi-propil-ciklodextrin (0,9)-ről, a
3-hidroxi-propil-ciklodextrinről, a 2,3-dihidroxi-propil-ciklodextrinről és - mindenekelőtt - a 2-hidroxipropil-ciklodextrinről. Ehhez hasonlóan, ha 5,10-metilén-tetrahidrofolsav szerepel a leírásban, ennek a vegyületnek nemcsak egyes izomereire és racemátjára gondolunk, hanem a sóira is, mindenekelőtt az alkálifém- és az alkálifoldfémsókra.
A tetrahidrofolát-származékok a folsav (folsav-kofaktorok) biológiailag aktív formái. A tetrahidrofolátszármazékok közül gyógyászati célokra elsősorban az
5-formil-5,6,7,8-tetrahidrofolsav (leukovorin) kalciumsóját használják, például az 5-fluor-uracil gyógyhatásának fokozására vagy rákkezelés során „mentőanyag”-ként, ha metotrexátot alkalmaznak.
A (65)-5-formil-tetrahidrofolsav a szervezetben átalakul (6R)-5,10-metilén-tetrahidrofolsavvá, amely mint Cofaktor az 5-fluor-uracilból (5-FU) képződött 5-fluor-dezoxiuridin-monofoszfáttal (5-F-dUMP) és a timidilát-szintetázzal (TS) együtt egy citosztatikumként hatásos, kovalens temer komplexet képez: az 5-F-dUMP/TS/5,10-metilén-tetrahidrofolsavat. Ezzel kapcsolatban a következő szakirodalmi helyekre hivatkozunk:
- W. A. Bleyer: Cancer, az 1989. március 15-i melléklet 995-1007. oldalai; valamint
- E. L. R. Stockstad: Folic Acid Metabolism in
Health and Disease, Wiley-Liss Inc., 9. oldal.
Az előbbiek alapján előnyös lenne, ha a leukovorin (vagyis az 5-formil-tetrahidrofolsav) helyett közvetlenül a Co-faktort, az 5,10-metilén-tetrahidrofolsavat használnánk fel. Az ezzel kapcsolatos vállalkozások mind ez ideig zátonyra futottak, mert az 5,10-metiléntetrahidrofolsav, valamint annak sói nem voltak kielégítően tiszták és stabilak. Ezzel kapcsolatban hivatkozunk a 0 409 125 sz. európai szabadalmi leírásra, amely szerint az előállított (6R,S)-5,10-metilén-tetrahidrofolsav tisztasága általában 85-90 m% volt. A (6R,S)-5,10-metilén-tetrahidrofolsavat csak kalciumvagy magnéziumsójának alakjában sikerült 96,598,8%-os tisztaságban előállítani. A sóoldatok stabilitása azonban ennek ellenére nagyon kritikus volt: 9-es pH-érték esetén 6 óra elteltével az eredeti 5,10-metilén-tetrahidrofolsavnak már csak mintegy 85%-a volt jelen az oldatban. Ezzel kapcsolatban utalunk a 0 409 125 sz. európai szabadalmi leírás 14. oldalán található táblázatra.
Az 5,10-metilén-tetrahidrofolsav oldatban egyensúlyban van a formaldehiddel és a tetrahidrofolsavval. Az erre vonatkozó ismeretek megtalálhatók a következő szakirodalmi helyeken:
- L. J. Machlin: Handbook of Vitamins, 2. kiadás,
Marcel Decker Inc., New York - Bázel (T. Brody),
457. o.;
- M. J. Osbom és munkatársai: J. Am. Chem. Soc.,
82, 4921 (1960);
- R. G. Kálién és munkatársai: J. Bioi. Chem., 241,
5851 (1966); valamint
- Mórán és munkatársai: Proc. Natl. Acad. Sci. USA,
76, 1456-1460(1979).
Az említett egyensúly létezése akadályozza az
5,10-metilén-tetrahidrofolsav parenterális alkalmazását. A WO 91/17 660 nemzetközi közzétételi számú PCT-bejelentésben is az olvasható - pedig ez a bejelentés részletesen taglalja az 5,10-metilén-tetrahidrofolsav felhasználási előnyeit más tetrahidrofolsav-származékokkal szemben -, hogy nincs semmilyen lehetőség az
5,10-metilén-tetrahidrofolsav stabilizálására. Az 5,10metilén-tetrahidrofolsav gyógyászati felhasználásának viszont csak a stabilizálás megoldása teremtheti meg az alapját. A jelenleg ismert technológiák alkalmazásával vagy nem magát az 5,10-metilén-tetrahidrofolsavat lehet stabilizálni vagy csak korlátozott sikert lehet elérni, például a tetrahidrofol sav vagy a tetrahidrofolsavszármazékok oxidatív lebomlásának késleltetésével. Az egyik ilyen ismert megoldás szerint (0 416 323 sz. európai szabadalmi leírás) aszkorbinsav, parabének, merkaptoalkoholok vagy trometamol adagolásával stabilizálnak 5-formil-tetrahidrofolsavat. Egy másik ismert megoldással 5-formil-tetrahidrofolsav-kalcium-só stabilizálható olyan módon, hogy a sót tartalmazó oldathoz az alkáliföldfém-ionnak megfelelő komplexképző szert adagolnak.
Az ismert megoldások egyikével sem lehet azonban befolyásolni azt az egyensúlyt, amely az 5,10-metiléntetrahidrofolsav és a belőle felszabadult tetrahidrofolsav és formaldehid között fennáll.
Az 58-48 933 sz. japán leírásból ismeretes, hogy a metotrexát biokémiai analíziséhez szubsztrátumként alkalmazható dihidrofolsav stabilizálására - csak az oxidatív bomlás gátlása céljából - fel lehet használni adalékként β-ciklodextrint.
A 0 427 078 sz. európai szabadalmi leírás szerint a leukovorin stabilizálható ciklodextrin adagolásával.
Meglepetéssel tapasztaltuk, hogy a tetrahidrofolsav és a formaldehid között ciklodextrinek jelenlétében is lejátszódik a kondenzációs reakció, de mindenekelőtt az volt váratlan, hogy a reakciót követően vizes oldatban stabil zárvány vegyületek jönnek létre az 5,10-metilén-tetrahidrofolsavból a megfelelő ciklodextrinben, és így először vált lehetségessé az 5,10-metilén-tetrahidrofolsav gyógyászati alkalmazása vizes oldatok felhasználásával.
HU 212 665 Β
A stabilitás növekedése annál inkább meglepő, mert az eddigi mérések eredményeiből arra lehetett következtetni, hogy gyakorlatilag nem lép fel semmilyen kölcsönhatás a tetrahidrofolátok és a ciklodextrinek között [D. W. Armstrong és munkatársai: Science, 232, 1132-1135 (1986); mindenekelőtt az 1124. oldal
2. hasábjának 2. sora]. Saját méréseink alapján meg tudtuk erősíteni, hogy a ciklodextrinek 5-formil-tetrahidrofolsavval nem, 5-metil-tetrahidrofoIsavval pedig csak rendkívül kis mértékben lépnek kölcsönhatásba, így tehát nem lehetett azt várni, hogy az 5,10-metiléntetrahidrofolsav ilyen módon stabilizálható a kémiai bomlással szemben, azt meg végképp nem, hogy ugyanakkor eltolódik az egyensúly a szabad formaldehidtől és tetrahidrofolsavtól az 5,10-metilén-tetrahidrofolsav felé.
A fentiek alapján a találmány eljárás (6R)-, (6S>vagy (6R,S)-5,10-metilén-tetrahidrofolsavat vagy e savak valamilyen sóját tartalmazó stabil vizes oldatok előállítására. Az eljárás szerint α-, β- vagy γ-ciklodextrint vagy hidroxi-propil- vagy dimetil-α, -β- vagy -γciklodextrint vízben feliszapolunk vagy feloldunk, majd hozzáadjuk a (6R)-, (6S)- vagy (6R,S)-5,10-metilén-tetrahidrofolsavat vagy annak valamilyen sóját, ahol az 5,10-metilén-tetrahidrofolsavat a ciklodextrinre számítva 50-100 mol% arányban alkalmazzuk.
A találmány értelmében úgy is eljárhatunk, hogy a (6R)-, (6S)- vagy (6R,S)-5,10-metilén-tetrahidrofolsavat vagy e savak valamilyen sóját vízben feliszapoljuk vagy oldjuk és az így kapott oldathoz adjuk az α-, β-, vagy γ-ciklodextrint, ahol a ciklodextrint az 5,10-metilén-tetrahidrofolsavra számítva 100-200 mol% arányban alkalmazzuk.
A találmány egy további változata szerint a (6S)-, (6R)- vagy (6R,S)-5,10-metilén-tetrahidrofolsavat vagy e savaknak valamilyen sóját α-, β- vagy γ-ciklodextrin jelenlétében formaldehiddel reagáltatjuk, a keletkezett termékei kívánt esetben sóvá alakítjuk és ugyancsak kívánt esetben az előállított 5,10-metiléntetrahidrofolsav/ciklodextrin zárványvegyületet elkülönítjük, ahol a ciklodextrint az 5,10-metilén-tetrahidrofolsavhoz viszonyítva 100-200 mol% arányban, a formaldehidet pedig 100-120 mol% arányban, használjuk.
A ciklodextrint tartalmazó zárványvegyületeket célszerű a 0 495 204 sz. európai szabadalmi bejelentés szerint könnyen előállítható (6S)-, (6R)- és (6R,S)-tetrahidrofolsav-szulfát-sóból vagy -szulfonsav-sóból kiindulva elkészíteni, mégpedig olyan módon, hogy a keletkezett sókat in situ vagy előzetes elválasztás után, illetve az ezekből a sókból felszabadított savat előzetes tisztítás után a megfelelő ciklodextrin jelenlétében reagáltatjuk formaldehiddel. A tetrahidrofolsav kvantitatív átalakításához egyébként csak kis - legfeljebb 10-20 mol%-os - feleslegben kell alkalmazni a formaldehidet. A reakciót olyan közegben célszerű lejátszatni, amelynek pH-értéke 8 és 9 között van. A zárványvegyületet olyan módon állítjuk elő, hogy ciklodextrint tartalmazó oldathoz vagy zagyhoz (6R)-, (6S)- vagy (6R,S)-5,10-metiléntetrahidrofolsavat adunk, illetve szilárd (6R)-, (6S)vagy (6R,S)-metilén-tetrahidrofolsavat és ciklodextrint eldörzsölünk. így olyan tennék keletkezik, amely a környezet hőmérsékletén oldatban stabil. Az ilyen módon előállított termékeket fel lehet használni komponensként parenterális gyógyszerkészítményekben vagy kiindulási anyagként orálisan alkalmazható gyógyszerkészítmények előállításához. Mind az orálisan, mind a parenterálisan alkalmazható gyógyszerkészítmények felhasználhatók például a rákgyógyászatban, egyes vérszegénységi kórképek esetén, valamint az autoimmunrendszer betegségeinek és az idegrendszer zavarainak kezelésére.
A (6R)-, a (6S)- és a (6R,S)-5,10-metilén-tetrahidrofolsav α-, β-, γ-, hidroxi-propil-β-, hidroxi-propil-γ-, dimetil-β- és dimetil-Y-ciklodextrinnel képzett zárványvegyületei vizes oldatban stabilak. Ezekből a zárványvegyületekből és a vizes oldatokból előállíthatók például a rákgyógyászatban és az autoimmunrendszer betegségeinek kezelésére felhasználható, parenterálisan alkalmazható gyógyszerkészítmények. A zárványvegyületeket nem különítjük el, vagyis a vizes oldatot előállítása után közvetlenül felhasználjuk, ha vizes oldatot kívánunk alkalmazni.
A zárványvegyületek előállításához mindenekelőtt az 5,10-metilén-tetrahidrofolsav alkálifém- és alkáliföldfémsói - elsősorban a nátrium-, a kálium-, a magnézium- és a kalciumsó - használhatók fel, mert ezeknek a sóknak jó az oldhatóságuk, és fiziológiai szempontból jól tolerálhatók. Ugyanolyan tisztaság esetén az 5.10-metilén-tetrahidrofolsav magnéziumsójának vízoldhatósága a kalciumsóénak mintegy tízszerese, a nátrium- és a káliumsó vízoldhatósága pedig még a magnéziumsóénál is nagyobb. Ez az oka annak, hogy ezeknek a sóknak az alkalmazása nagyon gyakori gyógyszerkészítmények előállításakor. Különösen az alábbi komponensekből képzett zárványvegyületeket előnyös alkalmazni:
- a (6R)- vagy a (6S)-5,10-metilén-tetrahidrofolsav valamelyik alkálifém- vagy alkáliföldfémsója + βciklodextrin;
- a (6R)- vagy a (6S)-5,10-metilén-tetrahidrofolsav valamelyik alkálifém- vagy alkáliföldfémsója + hidroxi-propil^-ciklodextrin;
- a (6R)- vagy a (6S)-5,10-metilén-tetrahidrofolsav valamelyik alkálifém- vagy alkáliföldfémsója + hidroxi-propil-y-ciklodextrin;
- a (6R)- vagy a (6S)-5,10-metilén-tetrahidrofolsav valamelyik alkálifém- vagy alkáliföldfémsója + γciklodextrin; és
- a (6R)- vagy a (6S)-5,10-metilén-tetrahidrofolsav valamelyik alkálifém- vagy alkáliföldfémsója + dimetil^-ciklodextrin.
Ezzel a felsorolással kapcsolatban megjegyezzük, hogy minden esetben a természetben előforduló (6R)5,10-metilén-tetrahidrofolsav-izomert előnyös felhasználni a zárványvegyületek előállításához.
Azt is említettük már, hogy a találmány tárgyát képezi az 5,10-metilén-tetrahidrofolsav ciklodextrinekkel képzett stabil zárványvegyületeinek előállítására
HU 212 665 Β szolgáló eljárás, amely szerint 5,10-metilén-tetrahidrofolsavat vagy valamilyen 5,10-metilén-tetrahidrofolsav-származékot α-, β- vagy γ-ciklodextrinnel vagy ezeknek a ciklodextrineknek hidroxi-propil- vagy dimetil-származékával reagáltatunk, vagy célszerűen úgy járunk el, hogy tetrahidrofolsavat vagy valamilyen tetrahidrofolsavsót reagáltatunk a megfelelő ciklodextrinnel, a keletkezett terméket kívánt esetben sóvá alakítjuk, illetve a keletkezett sóból felszabadítjuk a savat, majd formaldehid in situ beadagolásával 5,10-metiléntetrahidrofolsav/ciklodextrin zárványvegyületet állítunk elő, amelyet kívánt esetben kinyerünk a reakcióelegyből.
A zárvány vegyületek előállításához olyan 5,10-metilén-tetrahidrofolsav-sókat, illetve tetrahidrofolsavsókat célszerű alkalmazni, amelyek gyógyászati szempontból elfogadható kationokat - például nátrium-, kálium-, magnézium- vagy kalciumkationt - vagy anionokat - például szulfát-, szulfonát- vagy halogenid-aniont - tartalmaznak.
A zárványvegyületek előállításához olyan ciklodextrineket előnyös felhasználni, mint a β-, a hidroxi-propilβ-, a dimetil-β-, a γ-, a hidroxi-propil-γ- vagy a dimetil-γciklodextrin. A ciklodextrineket és az 5,10-metilén-tetrahidrofolsavat legalább 1:1 vagy 2:1 mólarányban előnyös alkalmazni a zárványvegyületek előállításához. Célszerű ugyanakkor ciklodextrineket nagy koncentrációban tartalmazó oldatokat felhasználni. Különböző ciklodextrinek elegyei is felhasználhatók a zárványvegyületek előállításához, de - az alkalmazástechnikai céltól függően célszerű az 5,10-metilén-tetrahidrofolsavnak egy bizonyos sóját, egy bizonyos ciklodextrint és egy bizonyos
5,10-metilén-tetrahidrofolsav:ciklodextrin arányt alkalmazni. Az adott zárványvegyület előállításához optimális körülményeket egyszerű kísérletek elvégzése alapján meg lehet határozni.
A tetrahidrofolsavat ciklodextrin jelenlétében valamilyen - vízből vagy vízzel elegyedő szerves vegyületből álló - oldószerben, például rövid szénláncú alifás karbonsavban vagy rövid szénláncú alkoholban célszerű reagáltatni formaldehiddel.
Tekintettel arra, hogy a tetrahidrofolsav oxidatív hatásokra érzékeny, ajánlatos az oxidációval szemben védelmet nyújtó megoldásokat alkalmazni.
A ciklodexrint tartalmazó zárványvegyületeket ismert módszerekkel el lehet választani; például olyan módon, hogy az oldószert magasabb hőmérsékleten vákuumban ledesztilláljuk, a termékeket kikristályosítjuk, liofilizáljuk vagy valamilyen szerves oldószerrel kicsapjuk.
A ciklodextrint tartalmazó zárványvegyületeket szilárd alakban is előállíthatjuk, mégpedig olyan módon, hogy az 5,10-metilén-tetrahidrofolsavat és az adott ciklodextrint eldörzsöljük.
A találmány oltalmi köre kiterjed arra az eljárásra is, amely szerint a (6R)-, a (6S)~ vagy a (6R,S)-5,10metilén-tetrahidrofolsavból vagy ezek sóiból, továbbá α-, β- vagy γ-ciklodextrinből vagy ezeknek a ciklodextrineknek a hidroxi-propil- vagy dimetil-származékaiból előállított zárványvegyületeket komponensként vagy kiindulási vegyületként használjuk fel gyógyszerkészítmények előállításához.
A találmányt a következő példákkal ismertetjük.
1. példa
Ciklodextrinekből és 5,10-metilén-tetrahidnofolsavból vagy annak sóiból előállított zárványvegyületek stabilitásának vizsgálata oldatban
a) A (6R)- és a (6S)-5,10-metilén-tetrahidrofolsav nátriumsójából és kalciumsójából készített oldatok stabilitása foszfátpufferben 23 ’C-on
| Összetétel | 5,1O-Metilén-tetrahidrofolsav-tartalom, % | |||||
| 1 | 2 | 4 | 5 | 7 | 14 | |
| hét eltelte után** | ||||||
| (6R)-CH2-THF- Na-só* ciklodextrin nélkül nitrogénatmoszférában | 91,1 | 64,4 | 30,5 | 18,1 | 16,7 | - |
| (6R)-CH2-THFNa-só* β-ciklodextnn | - | 92,3 | - | - | - | 88,5 |
| (6S)-CH2-THFNa-só* β-ciklodextrin | 100,0 | 84,8 | - | 75,0 | - | - |
| (6R)-CH2-THFNa-só* α- + βciklodextnn (1:1:1) | 100,0 | 95.8 | 94,3 | 83,2 | 78,5 | 73,0 |
| (6R)-CH2-THFCa-só* α- + βciklodextrin (1:1:1) | - | 80,2 | 57,3 | 50,2 | 47,4 | 44,0 |
* ACH;-THF rövidítés jelentése: 5,10-metilén-tetrahidrofolsav. •A kiindulást mennyiségre vonatkoztatva (t = 0).
b) (6R)-5,10-metilén-tetrahidrofolsav-nátriumsót tartalmazó oldatok stabilitása 60 ’C-on (stresszvizsgálat foszfátpufferben)
| Összetétel | 5,10-Metilén-tetrahidrofolsav-tartalom, % | |||||
| 3 | 6 | 18 | 24 | 30 | 48 | |
| óra eltelte után* | ||||||
| Ciklodextrin nélkül | 77,7 | 34,4 | 2,8 | - | 0,8 | - |
| a-Ciklodextrinnel | - | 84,1 | - | - | - | 12,6 |
| β-Ciklodextrinnel | 91,2 | - | - | 75,2 | - | - |
| Dimetil^-ciklo- dextrinnel | 88,9 | - | - | 31,5 | - | - |
| Hidroxi-propil-β- ciklodextrinnel | 90,4 | - | - | 70,5 | - | - |
| γ-Ciklodextrinnel | 95,4 | - | - | 63,5 | - | - |
| Hidroxi-propil-γ- ciklodextrinnel | 97,4 | - | - | 73,7 | - | - |
*A kiindulási mennyiségre vonatkoztatva (t = 0).
HU 212 665 Β
c) (6R)-5,10-metilén-tetrahidrofolsav-kalcium-sót tartalmazó oldatok stabilitása 60 °C-on [stresszvizsgálat foszfátpufferben (PBS)]
| Összetétel | 5,10-Metilén-tetrahidrofolsav-tartalom, % | |||||
| 3 | 6 | 18 | 24 | 30 | 48 | |
| óra eltelte után* | ||||||
| Ciklodextrin nélkül | 74,4 | 53,8 | - | 7,7 | 2,6 | 0,1 |
| a-Ciklodextrinnel | 74,5 | 56,4 | - | 7,8 | 3,8 | 0,8 |
| Hidroxi-propil-a- ciklodextrinnel (0,6) | 75,3 | 57,1 | - | 7,8 | 2,7 | 0,7 |
| β-Ciklodextrinnel | 87,7 | 77,8 | - | 42,0 | 33,3 | 14,8 |
| Dimetil-P-ciklodextrinnel (1,8) | 80,2 | 69,1 | - | 29,6 | 22,2 | 7,4 |
| Hidroxi-propil-β- ciklodextrinnel (0,6) | 83,8 | 71,2 | - | 28,8 | 22,5 | 6,2 |
| Hidroxi-propil-γ- ciklodextrinnel (0,9) | 83,5 | 69,6 | - | 29,1 | 21,5 | 7,6 |
| γ-Ciklodextrinnel | 81,2 | 66,2 | - | 16,2 | 8,8 | 1,2 |
| Hidroxi-propil-γ- ciklodextrinnel (0,6) | 95,1 | 81,4 | - | 13,6 | 6,8 | 1,0 |
* A kiindulási mennyiségre vonatkoztatva (t = 0).
d) (6R)-5,10-metilén-tetrahidrofolsav-magnéziumsót tartalmazó oldatok stabilitása 60 °C-on [stresszvizsgálat foszfátpufferben (PBS)]
| Összetétel | 5,10-Metilén-ietrahidrofolsav-tartalom, % | ||||
| 3 | 6 | 18 | 24 | 30 | |
| óra eltelte után* | |||||
| Ciklodextrin nélkül | 72,7 | 53,4 | - | 7,6 | 2,4 |
| a-Ciklodextrinnel | 76,5 | 58,8 | - | 12,9 | 4,9 |
| Hidroxi-propil-a- ciklodextrinnel (0,6) | 80,2 | 67,4 | - | 14,0 | 6,3 |
| β-Ciklodextrinnel | 79,1 | 61,6 | - | 26,7 | 17,4 |
| Dimetil-β-ciklodextrinnel (1,8) | 73,6 | 56,3 | - | 19,5 | 11,5 |
| Hidroxi-pro ρίΐ-βciklodextrinnel (0,6) | 83,3 | 64,3 | - | 25,0 | 14,3 |
| Hidroxi-propil-β- ciklodextrinnel (0,9) | 82,6 | 65,1 | - | 24,4 | 12,8 |
| Összetétel | 5,10-Metilén-tetrahidrofolsav-tartalom, % | ||||
| 3 | 6 | 18 | 24 | 30 | |
| óra eltelte után* | |||||
| γ-Ciklodextrinnel | 82,1 | 64,3 | - | 20,2 | 10,8 |
| Hidroxi-propil-γ- ciklodextrinnel (0,6) | 81,2 | 64,7 | - | 17,6 | 8,9 |
* A kiindulási mennyiségre vonatkoztatva (t = 0).
A stabilitás meghatározásához olyan, 7-es pH-jú, mintegy 4 m% 5,10-metilén-tetrahidrofolsavat tartalmazó oldatokat használtunk fel, amelyeket a 3-20. példák szerint állítottunk elő. A vizsgálatok célja az volt, hogy megkapjuk az a), a b), a c) és a d) táblázatban szereplő, egymással összehasonlítható mérési adatokat. Ha optimális feltételek biztosításával állítjuk elő a zárványvegyületeket, határozottan nagyobb stabilitásra számíthatunk. Az optimális feltételeket egyszerű kísérletekkel könnyen meghatározhatjuk, ha változtatjuk az 5,10-metilén-tetrahidrofolsav, illetve a ciklodextrin koncentrációját vagy ennek a két említett komponensnek a koncentrációarányát, illetve különböző 5,10-metilén-tetrahidrofolsav-sókat vagy különböző oldószereket alkalmazunk.
A következő példák szerint előállított termékekhez felhasznált ciklodextrinek víztartalma a termogravimetriás mérések eredményei alapján: a-ciklodextrin:
11,5 m%, β-ciklodextrin: 15,6 m%, dimetil^-ciklodextrin: 12,7 m%, hidroxi-propil^-ciklodextrin:
6,4 m%, γ-ciklodextrin: 9,8 m%, dimetil-y-ciklodextrin: 9,2 m% és hidroxi-propil-y-ciklodextrin: 6,0 m%.
2. példa
Az 5,10-metilén-tetrahidmfolsav/ciklodextrin zárványvegyületeknél tapasztalt kémiai eltolódás a ciklodextrint és 5-formil-tetrahidrofolsavat tartalmazó elegynél mért értékkel összehasonlítva Az 5,10-metiIén-tetrahidrofolsavtól származó l3Cjelek, illetve az 5-formil-tetrahidrofolsavtól származó l3C-jelek, valamint az 5,10-metilén-tetrahidrofolsavtól származó Ή-jelek árnyékolásának változását (Δ ppm)
9-es pH-értéken mértük, miközben β-ciklodextrinnel képeztünk zárványvegyületet.
| l3C-spektrumok | Appm |
| 5,10-Metilén-tetrahidrofolsav C-7 | +0,532 |
| C-9 | +0,908 |
| C-l 1 | + 1,301 |
| 13C-spektrumok | Áppm |
| 5-Formil-tetrahidrofolsav C-7 | +0,013 |
| C-9 | +0,013 |
| C-l 1 | -0,007 |
HU 212 665 Β
| 'H-spektrumok | Áppm |
| 5,10-Metilén-tetrahidrofolsav H2-7 | +0,20 |
| H-37H-5' | -0,15 |
| H-27H-6' | +0,07 |
| H2-y-Glu | -0,08 |
Az 5-formil-tetrahidrofolsav 13C-spektrumainak Áppm-értékeiből világosan kitűnik, hogy a ciklodextrin ezzel a vegyülettel nem lép kölcsönhatásba. Ezzel ellentétben az 5,10-metilén-tetrahidrofolsav 13C-spektrumainak és 'H-spektrumainak Áppm-értékei kifejezetten erős kölcsönhatásra utalnak, különösen a pteridinmolekularésznél.
3. példa
Zárványvegyület előállítása $-ciklodextrinből és (6R)-5,10-metilén-tetrahidrOfolsavból
Nitrogénatmoszférában 22,7 g β-ciklodextrint és 4,88 g (6S)-tetrahidrofolsavat szuszpendálunk 200 ml vízben a környezet hőmérsékletén, majd az így keletkezett szuszpenzióhoz 1,3 ml 36,2 m%-os formaldehidoldatot csepegtetünk. A szuszpenziót ezután lassan felmelegítjük körülbelül 40 °C-ra. így gyakorlatilag tiszta oldatot kapunk, amelyet szűrést követően rotációs bepárlóban 20 °C-on, 100 Pa nyomáson szárazra párolunk.
Ilyen módon 25.8 g 3-ciklodextrin/(6R)-5,10-metilén-tetrahidrofolsav zárványvegyületet kapunk, amelynek HPLC-analízissel meghatározott (6R)-5,10-metilén-tetrahidrofolsav-tartalma 13,3 m%.
4. példa
Zárványvegyület előállítása $-ciklodextrinből és (6R)-5J O-metilén-tetrahidrofolsav nátriumsójából
a) 22,7 g β-ciklodextrint 650 ml vízben szuszpendálunk, majd a keletkezett szuszpenzióhoz a környezet hőmérsékletén nitrogénatmoszférában 4,8 g (6S)-tetrahidrofolsavat adunk, miközben a pH-értéket 16,3 ml 1 n nátrium-hidroxid-oldat beadagolásával 7 és 9 között tartjuk. A szuszpenzióhoz ezután 0,93 ml 36,2 m%-os formaldehidoldatot csepegtetünk, a keletkezett oldatot tisztára szűrjük és a környezet hőmérsékletén mintegy 20 percig állni hagyjuk, hogy a reakció teljesen lejátszódjék. Az oldatot ezt követően 20 ’C-on, 100 Pa nyomáson szárazra pároljuk.
Ilyen módon 26,3 g β-^ΚχΙεχίΓΪηΛόΚ^,ΙΟ-πκϋlén-tetrahidrofolsav-nátrium-só zárványvegyületet kapunk, amelynek HPLC-analízissel meghatározott (6R)5,10-metilén-tetrahidrofolsav-tartaIma 17,9 m%.
b) A 4. példa a) pontja szerinti termékhez hasonlót állítunk elő olyan módon, hogy intenzíven eldörzsölünk 10 g nedves β-ciklodextrint és 2,6 g (6R)-5,10metilén-tetrahidrofolsav-nátrium-sót.
A szilárd anyag stabilitása: a (6R)-5,10-metilén-tetrahidrofolsav-tartalom -25 ’C-on való 113 napos tárolást követően 100,0%, +23 ’C-on való 63 napos tárolás után 98,2%.
5. példa
Zárványvegyület előállítása $-ciklodextrinből és (6R)-5,10-metilén-tetrahidmfolsav-kalcium-sóból
5,78 g β-ciklodextrint és 320 mg kalcium-hidroxidot feliszapolunk 30 ml vízben, majd a keletkezett zagyhoz nitrogénatmoszférában 1,97 g (6S)-tetrahidrofolsavat adunk. A kapott elegyhez ezt követően hozzáadunk 28 ml vizet és 0,37 ml 36,2 m%-os formaldehidoldatot. Az így előállított oldatot tisztára szűrjük, és a benne levő zárványvegyületet a szűrletből 30 ml etanollal 0 ’C-on kicsapjuk. Az így kapott anyagot etanol és víz elegyével mossuk, majd 20 ’C-on megszárítjuk.
Ilyen módon 7,7 g β-ciklodextrin/(6R)-5,10-metίlén-tetrahidrofolsav-kalcium-só zárványvegyületet kapunk, amelynek HPLC-analízissel meghatározott (6R)5,10-metilén-tetrahidrofolsav-tartalma 25,6 m%.
6. példa
Zárványvegyület előállítása $-ciklodextrinből és (6R )-5, JO-metilén-tetrahidrofolsav-kálium-sóból
A p-ciklodextrin/(6R)-5,10-metilén-tetrahidrofolsav-kálium-só zárványvegyületet a 4. példában ismertetett megoldáshoz hasonló módon állítjuk elő.
7. példa
Zárványvegyület előállítása $-ciklodextrinből és (6R)-5, iO-metilén-tetrahidrofolsav-magnézium-sóból
A β-cik]odextrin/(6R)-5,10-metilén-tetΓahidrofolsav-magnézium-só zárványvegyületet az 5. példában ismertetett megoldáshoz hasonló módon állítjuk elő.
8. példa
Zárványvegyület előállítása a-és ^-ciklodextrin keverékéből és (6R)-5J0-metilén-tetrahidrofolsavkalcium-sóból
10,85 g a-ciklodextrint, 12,9 g β-ciklodextrint és 744 mg kalcium-hidroxidot feliszapolunk 100 ml vízben. Az így keletkezett zagyhoz nitrogénatmoszférában hozzáadunk 4,93 g (6S)-tetrahidrofolsavat, további 31 mg kalcium-hidroxidot és 0,92 ml 36,2%-os formaldehidoldatot. A mintegy 20 perces reakcióidő letelte után az oldatot tisztára szűrjük. A szűrletből 750 ml etanollal 0 ’C-on kicsapjuk a keletkezett zárványvegyületet, majd a csapadékot etanol és víz elegyével mossuk, és 20 ’C-on megszárítjuk.
Ilyen módon 29,2 g α+β-ciklodextrin/(6R)-5,10metilén-tetrahidrofolsav zárványvegyületet kapunk, amelynek HPLC-analízissel meghatározott (6R)-5,10metilén-telrahidrofolsav-tartalma 16,5 m%.
9. példa
Zárványvegyület előállítása $-ciklodextrinből és (6S)-5,10-metilén-tetrahidrofolsav-nátrium-sóból
2,27 g β-ciklodextrint 100 ml vízben szuszpendálunk, majd a keletkezett szuszpenzióhoz nitrogénatmoszférában hozzáadunk 608 mg (6S)-5,10-metilén-tetrahidrofolsavat a környezet hőmérsékletén, miközben a szuszpenzió pH-ját 2,7 ml 1 n nátrium-hidroxid-oldat beadagolásával 7 és 9 között tartjuk. Az így létrejött oldatot tisztára szűrjük, majd liofilizáljuk.
HU 212 665 Β
Ilyen módon 2,75 g [J-ciklodextrin/(6S)-5,10-metilén-tetrahidrofolsav-nátrium-só zárványvegyületet kapunk. amelynek HPLC-analízissel megállapított (6S)5.10- metilén-tetrahidrofoIsav-tartalma 16,0 m%.
A szilárd anyag stabilitása: a (6S)-5,10-metilén-tetrahidrofolsav-tartalom -25 ’C-on való 156 napos tárolás után 100,0%.
10, példa β-Ciklodextrint és (6R)-5,10-metilén-tetrahidrofolsav-nátrium-sót tartalmazó zárványvegyület előállítása szulfátsóból
22,7 g β-ciklodextrint 1130 ml vízben szuszpendálunk, ezután a keletkezett szuszpenzióhoz nitrogénatmoszférában hozzáadunk 5,4 g (6R)-5,10-metilén-tetrahidrofolsav-szulfátot a környezet hőmérsékletén, miközben a szuszpenzió pH-értékét 33 ml 1 n nátrium-hidroxid-oldat beadagolásával 7 és 9 között tartjuk. A kapott oldatot tisztára szűrjük, majd liofilizáljuk.
Ilyen módon 28,4 g 3-ciklodextrin/(6R)-5,10-metilén-tetrahidrofolsav-nátrium-só zárványvegyületet kapunk, amelynek HPLC-analízissel meghatározott (6R)5.10- metilén-tetrahidrofolsav-tartalma 15,3 m%.
A szilárd anyag stabilitása: a (6R)-5,10-metilén-tetrahidrofolsav-nátrium-só-tartalom -25 ’C-on való 154 napos tárolás után 99,5%.
77. példa β-Ciklodextrint és (6R)-5,10-metilén-tetrahidrofolsavat tartalmazó zárványvegyület előállítása oldatból
2,27 g β-ciklodextrint 25 ’C-on feloldunk 150 ml vízben, majd a keletkezett oldathoz - amelynek pH-ja
3,7 - nitrogénatmoszférában hozzáadunk 608 mg (6R)5,10-metilén-tetrahidrofolsavat. A kapott oldatot tisztára szűrjük, és a szűrletet liofilizáljuk.
Ilyen módon 2,7 g β-^^εχΐπη/(6Ρ)-5,10-metilén-tetrahidrofolsav zárványvegyületet kapunk, amelynek HPLC-analízissel meghatározott (6R)-5,10-metilén-tetrahidrofolsav-tartalma 15.5 m%.
A szilárd anyag stabilitása: a (6R)-5,10-metilén-tetrahidrofolsav-tartalom -25 “C-on való 158 napos tárolás után 100,0%.
72. példa
Zárványvegyület előállítása β-ciklodextrinből és (6R)-5,10-metilén-tetrahidrofolsav-szulfátsóból
A (6R)-5,10-metilén-tetrahidrofolsav kénsavas sójának 540 mg-jából all. példában ismertetett módon állítunk elő 2,65 g β-cik]odextrin/(6R)-5,10-metiléntetrahidrofolsalv-szulfát-só zárványvegyületet, amelynek HPLC-analízissel meghatározott (6R)-5,10-metilén-tetrahidrofolsav-tartalma 15,2 m%.
A szilárd anyag stabilitása: a (6R)-5,10-metilén-tetrahidrofolsav-szulfát-só-tartalom -25 ’C-on való 157 napos tárolást követően 99.0%.
13. példa
Zárványvegyület előállítása β-ciklodextrinből és (6R )-5,10-metilén-tetrahidmfolsav-benzolszulfonát-sóból
A (6R)-5,10-metilén-tetrahidrofolsav benzolszulfonsavas sójának 603 mg-jából all. példában ismertetett módon állítunk elő 2,94 g β-ciklodextrin/(6R)-5,10-metilén-tetrahidrofolsav-benzolszulfonát-só zárványvegyületet, amelynek HPLC-analízissel meghatározott (6R)5.10- metilén-tetrahidrofolsav-tartalma 13,1 m%.
A szilárd anyag stabilitása: a (6R)-5,10-metilén-tetrahidrofolsav-benzolszulfonát-só-tartalom -25 C-on való 72 napos tárolás után 100,0%.
14. példa
Zárványvegyület előállítása β-ciklodextrinből és (6R)-5,10-metilén-tetrahidrofolsav-kalcium-sóból
A (6R)-5,10-metilén-tetrahidrofolsav kalciumsójának 610 mg-jából all. példában ismertetett módon állítunk elő 2,65 g β-ciklodextrin/(6R)-5,10-metiléntetrahidrofolsav-kalcium-só zárványvegyületet, amelynek HPLC-analízissel meghatározott (6R>5,10-metilén-tetrahidrofolsav-tartalma 15,6 m%.
75. példa
Zárványvegyület előállítása β-ciklodextrinből és (6R)-5,10-metilén-tetrahidrofolsav-magnézium-sóból
600 mg (6R)-5,10-metilén-tetrahidrofolsav-magnézium-sóból all. példában ismertetett módon állítunk elő 2,69 g β-ciklodextrin/(6R)-5,10-metilén-tetrahidrofolsav-magnézium-só zárványvegyületet, amelynek HPLC-analízissel meghatározott (6R)-5,10-metiléntetrahidrofolsav-tartalma 13,1 m%.
A szilárd anyag stabilitása: a (6R)-5,10-metilén-tetrahidrofolsav-magnézium-só-tartalom -25 ’C-on való 155 napos tárolás után 99,5%.
16. példa
Zárványvegy ület előállítása dimetil-fi-ciklodextrinből és (6R)-5,10-metilén-tetrahidrofolsav-nátrium-sóból
26,2 g dimetil^-ciklodextrint feloldunk 100 ml vízben, majd a keletkezett oldathoz nitrogénatmoszférában
5,6 g (6R)-5,10-metilén-tetrahidrofolsav-szulfát-sót adunk a környezet hőmérsékletén, miközben az oldat pH-értékét 37 ml 1 n nátrium-hidroxid-oldat beadagolásával 7 és 9 között tartjuk. A keletkezett oldatot tisztára szüljük, és a szűrletet liofilizáljuk.
Ilyen módon 32,6 g dimetil^ciklodextrin/(6R)5.10- metilén-tetrahidrofolsav-nátrium-só zárványvegyületet kapunk, amelynek HPLC-analízissel meghatározott (6R)-5,10-metilén-tetrahidrofolsav-tartalma 14,3 m%.
A szilárd anyag stabilitása: a (6R)-5,10-metilén-tetrahidrofolsav-nátrium-só-tartalom -25 ’C-on való 56 napos tárolás után 100%, +25 ’C-on való 56 napos tárolás után 97,5%.
17. példa
Zárványvegyület előállítása dimetil-$-cikiodextrinből és (6R)-5,10-metilén-tetrahidmfolsav-szulfát-sóból 2,62 g dimetil^-ciklodextrint feloldunk 10 ml vízben,
HU 212 665 Β majd a keletkezett oldathoz nitrogénatmoszférában a környezet hőmérsékletén először 560 mg (6R)-5,10-metilén-tetrahidrofolsav-szulfát-sót, majd 140 ml vizet adunk. A keletkezett oldatot tisztára szűrjük, és a szűrletet liofilizáljuk.
Ilyen módon 3,29 g dimetil-|}-ciklodextrin/(6R)5,10-metilén-tetrahidrofolsav-szulfát-só zárvány vegyületet kapunk, HPLC-analízissel meghatározott (6R)-5,10-metilén-tetrahidrofolsav-tartalma 13,6 m%.
18. példa
Zárványvegyület előállítása hidroxi-propil-fi-ciklodextrinből és (6R)- vagy (6S)-5,10-metilén-tetrahidrofolsavból
Hidroxi-propil-3-ciklodextrin felhasználásával a 317. példákban ismertetett módon állítunk elő hidroxipropil-3-ciklodextrint és (6R)- vagy (6S)-5,10-metiléntetrahidrofolsavat vagy ezeknek a savaknak valamelyik sóját tartalmazó zárványvegyületeket.
19. példa
Zárványvegyületek előállítása hidroxi-propil-f-ciklodextrinből és (6R)- vagy (6S)-5,10-metilén-tetrahidrofolsavból
Hidroxi-propil-y-ciklodextrin felhasználásával a 317. példákban ismertetett módon állítunk elő hidroxipropil-y-ciklodextrint és (6R)- vagy (6S)-5,10-metiléntetrahidrofolsavat vagy ezeknek a savaknak valamelyik sóját tartalmazó zárványvegyületeket.
20. példa
Zárványvegyületek előállítása dimetil-y-ciklodextrinből és(6R)- vagy (6S)-5,10-metilén-tetrahidnjfolsavból Dimetil-y-ciklodextrin felhasználásával a 3-17.
példákban ismertetett módon állítunk elő dimetil-y-ciklodextrint és (6R)- vagy (6S)-5,10-metilén-tetrahidrofolsavat vagy ezeknek a savaknak valamelyik sóját tartalmazó zárványvegyületeket.
27. példa (6R)-5, lO-Metilén-tetrahidrofolsav-nátriumsó $-ciklodextrin-zárványvegyületének kioldása a szulfátból
22,7 g β-ciklodextrint szuszpendálunk 1130 ml vízben. Szobahőmérsékleten, nitrogénatmoszférában hozzáadunk 5,4 g (6R)-5,10-metilén-tetrahidrofolsav-szulfátot. Eközben a szuszpenzió pH-ját 33 ml IN nátriumhidroxid-oldat hozzáadásával 7 és 9 közötti értéken tartjuk. A kapott oldatot tisztára szűrjük.
hétig 25 °C-on végzett tárolás után a (6R)-5,10metilén-tetrahidrofolsav-tartalom az eredetileg hozzáadott mennyiségnek még a 92,0%-a.
22. példa (6R)-5,10-Metilén-tetrahidmfolsav nátriumsó $-ciklodextrin-zárványvegyületének kioldása a szulfátból 5 g (6R)-5,10-metilén-tetrahidrofolsav-szulfátot szobahőmérsékleten nitrogénatmoszférában feliszapolunk kevés vízben, majd hozzáadjuk 21 g β-ciklodextrin 1000 ml vízzel készített szuszpenzióját, miközben a pH-t 7 és 9 között tartjuk. A kapott oldatot tisztára szűrjük.
hétig 25 C-on végzett tárolás után a (6R)-5,10metilén-tetrahidrofolsav-tartalom az eredetileg hozzáadott mennyiségnek még a 89,0%-a.
Claims (2)
- SZABADALMI IGÉNYPONTOK1. Eljárás (6R)-, (6S)- vagy (6R,S)-5,10-metiléntetrahidrofolsav vagy e savak valamilyen sójának ciklodextrinnel képzett zárvány vegyületei és ilyen vegyületeket tartalmazó stabil vizes oldatok előállítására, azzal jellemezve, hogya) α-, β- vagy γ-ciklodextrint vagy hidroxi-propilvagy dimetil-α-, -β- vagy -γ-ciklodextrint vízben feliszapolunk vagy feloldunk és hozzáadjuk a (6R)-, (6S)- vagy (6R,S)-5,10-metilén-tetrahidrofoIsavat vagy e savak valamilyen sóját, ahol az 5,10-metilén-tetrahidrofolsavat a ciklodextrinre számítva 50100 mol% arányban alkalmazzuk; vagyb) (6R)-, (6S)- vagy (6R,S)-5,10-metilén-tetrahidrofolsavat vagy e savak valamilyen sóját vízben feliszapoljuk vagy oldjuk és α-, β- vagy γ-ciklodextrint vagy hidroxi-propil- vagy dimetil-α-, β- vagy γ-ciklodextrint adunk hozzá, ahol a ciklodextrint az5,10-metilén-tetrahidrofolsavra számítva 100200 mol% arányban alkalmazzuk; vagyc) (6S)-, (6R)- vagy (6R,S)-5,10-metilén-tetrahidrofolsavat vagy e savak valamilyen sóját α-, β- vagy γ-ciklodextrin vagy hidroxi-propil- vagy dimetil-α-, β- vagy γ-ciklodextrin jelenlétében formaldehiddel reagáltatjuk, ahol a ciklodextrint az 5,10-metiléntetrahidrofolsavhoz viszonyítva 100-200 mol% arányban, a formaldehidet pedig az 5,10-metiléntetrahidrofolsavhoz viszonyítva 100-120 mol% arányban használjuk;a keletkezett terméket kívánt esetben sóvá alakítjuk és ugyancsak kívánt esetben az előállított 5,10-metiléntetrahidrofolsav/ciklodextrin zárványvegyületet elkülönítjük.
- 2. Eljárás hatóanyagként (6R)-, (6S>- vagy (6R,S)5,10-metilén-tetrahidrofolsavat vagy e savak valamilyen sóját α-, β- vagy γ-ciklodextrinben vagy hidroxipropil- vagy dimetil-α-, β- vagy γ-ciklodextrinben zárványvegyületként tartalmazó, a rákterápiában, az immunrendszer megbetegedése és idegrendszeri zavarok esetén alkalmazható gyógyszerkészítmények előállítására, azzal jellemezve, hogy az 1. igénypont szerint előállított hatóanyagot a gyógyszerkészítésben szokásos vivőanyagok, hígítószerek és/vagy egyéb segédanyagok hozzáadásával a gyógyszerkészítésben szokásos módon gyógyszerkészítménnyé dolgozzuk el.Kiadja a Magyar Szabadalmi Hivatal, Budapest A kiadásért felel: Gyurcsekné Philipp Clarisse osztályvezető ARCANUM Databases - BUDAPEST
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CH2192/92A CH684644A5 (de) | 1992-07-13 | 1992-07-13 | 5,10-Methylentetrahydrofolsäure-Cyclodextrin-Einschlussverbindungen. |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| HU9301990D0 HU9301990D0 (en) | 1993-09-28 |
| HUT65714A HUT65714A (en) | 1994-07-28 |
| HU212665B true HU212665B (en) | 1996-09-30 |
Family
ID=4228046
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU9301990A HU212665B (en) | 1992-07-13 | 1993-07-09 | Process for producing stabile aquous compositions containing 5,10-methylene-tetrahydro-folic acid and process for producing 5,10-methylene-tetrahydro-folic acid/cyclodextrin inclusion compounds |
| HU95P/P00333P HU211484A9 (en) | 1992-07-13 | 1995-06-22 | 5,10-methylentetrahydrofolic acid-cyclodextrin inclusion compounds |
Family Applications After (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU95P/P00333P HU211484A9 (en) | 1992-07-13 | 1995-06-22 | 5,10-methylentetrahydrofolic acid-cyclodextrin inclusion compounds |
Country Status (18)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5455236A (hu) |
| EP (1) | EP0579996B1 (hu) |
| JP (1) | JP2667354B2 (hu) |
| KR (1) | KR100217788B1 (hu) |
| CN (1) | CN1032901C (hu) |
| AT (1) | ATE121949T1 (hu) |
| AU (1) | AU661591B2 (hu) |
| CA (1) | CA2100126C (hu) |
| CH (1) | CH684644A5 (hu) |
| DE (1) | DE59300176D1 (hu) |
| DK (1) | DK0579996T3 (hu) |
| ES (1) | ES2072163T3 (hu) |
| FI (1) | FI933151A (hu) |
| HU (2) | HU212665B (hu) |
| NO (1) | NO303715B1 (hu) |
| RU (1) | RU2135519C1 (hu) |
| TW (1) | TW379142B (hu) |
| ZA (1) | ZA934907B (hu) |
Families Citing this family (18)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5906981A (en) * | 1996-06-04 | 1999-05-25 | Troy Corporation | Halopropargyl inclusion complexes |
| CH693255A5 (de) * | 1997-06-13 | 2003-05-15 | Eprova Ag | Verwendung von Tetrahydrofolaten in der natürlichenstereoisomeren Form zur Herstellung einer pharmazeutischenZubereitung geeignet zur Beeinflussung des Homocystein-Spiegels. |
| CN1095472C (zh) * | 2000-04-17 | 2002-12-04 | 上海复康医药科技发展有限公司 | 叶酸－多聚糖复合物，其制备方法和以该复合物为活性成分的药物组合物 |
| DE602005026352D1 (de) * | 2004-09-15 | 2011-03-31 | Nipro Corp | Wässrige, stabile (6S)-Folinsäurelösung zur Injektion |
| EP2131849B1 (en) | 2007-03-02 | 2011-10-26 | The University Of Wollongong | Compositions and methods for delivery of anti-cancer agents |
| CN101235102B (zh) * | 2008-02-18 | 2010-11-03 | 南昌航空大学 | 一种叶酸偶联羟丙基壳聚糖纳米微粒的制备方法 |
| CN102000345A (zh) * | 2010-11-16 | 2011-04-06 | 广西大学 | 包合态的叶酸/β-环糊精组合物及其制备方法 |
| CN102258788B (zh) * | 2011-06-13 | 2012-11-07 | 南开大学 | 一种靶向传递阿霉素抗癌药的组装体及其制备方法 |
| EP2837631A1 (en) | 2013-08-14 | 2015-02-18 | Merck & Cie | New stable salt of 5,10-methylene-(6R)-tetrahydrofolic acid |
| RU2537246C1 (ru) * | 2013-10-17 | 2014-12-27 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научный центр клинической и эскпериментальной медицины" Сибирского отделения Российской академии медицинских наук ФГБУ "НЦКЭМ" СО РАМН | Способ получения биотинилированного производного окисленного декстрана |
| EP2878600B1 (en) | 2013-12-02 | 2018-06-27 | Cerbios-Pharma S.A. | Stable complexes of an alkaline earth metal salt of N5-methyl-tetrahydrofolic acid and a polyol |
| EP3668516B1 (en) | 2017-08-16 | 2021-09-22 | Merck Patent GmbH | Stable lyophilisates comprising 5,10-methylene-(6r)-tetrahydrofolic acid and a dicarboxylic acid |
| CN112089848A (zh) * | 2020-10-27 | 2020-12-18 | 浙江诺得药业有限公司 | 叶酸的环糊精包合物及其制备方法 |
| WO2023237482A1 (en) | 2022-06-08 | 2023-12-14 | Merck Patent Gmbh | Concentrated solutions comprising sodium 5,10-methylene-(6r)- tetrahydrofolate |
| WO2023237485A1 (en) | 2022-06-08 | 2023-12-14 | Merck Patent Gmbh | Stable lyophilisates comprising 5,10-methylene-(6r)-tetrahydrofolic acid |
| WO2023237480A1 (en) | 2022-06-08 | 2023-12-14 | Merck Patent Gmbh | Stable pharmaceutical compositions comprising 5,10-methylene-(6r)-tetrahydrofolic acid and nacl |
| WO2023237483A1 (en) | 2022-06-08 | 2023-12-14 | Merck Patent Gmbh | Concentrated solutions comprising 5,10-methylene-(6r)-tetrahydrofolic acid |
| CN117771389A (zh) * | 2023-12-28 | 2024-03-29 | 浙江圣达生物药业股份有限公司 | L-5-甲基四氢叶酸钙-γ-环糊精包合物及其制备方法 |
Family Cites Families (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3069468D1 (en) * | 1979-12-19 | 1984-11-22 | Nat Res Dev | Quinazoline derivatives, processes for their preparation, compositions containing them and their use as anti-cancer agents |
| US4350659A (en) * | 1981-07-30 | 1982-09-21 | Corning Glass Works | Stabilization of sensitive biologically active intermediate metabolites such as folic acid derivatives |
| JPS602775B2 (ja) | 1981-08-28 | 1985-01-23 | 富士通株式会社 | モニタ機能付大規模集積回路及びその製造方法 |
| JPS59175432A (ja) * | 1983-03-25 | 1984-10-04 | Yatoron:Kk | ジヒドロ葉酸溶液の安定化方法 |
| JPS62281855A (ja) * | 1986-05-29 | 1987-12-07 | Daikin Ind Ltd | ビタミン，ビタミン誘導体，またはホルモンを含有する包接化合物 |
| GB8621268D0 (en) * | 1986-09-03 | 1986-10-08 | Univ Strathclyde | Separation of substances |
| US4857530A (en) * | 1987-11-03 | 1989-08-15 | Warner-Lambert Company | Substituted quinazolinones as anticancer agents |
| NL8901432A (nl) * | 1989-06-06 | 1991-01-02 | Pharmachemie Bv | Bij koelkasttemperatuur stabiele waterige folinaatoplossing, alsmede werkwijze ter bereiding daarvan. |
| CA2021042A1 (en) | 1989-07-21 | 1991-01-22 | Fabrizio Marazza | Salts of n ,n -methylene-5,6,7,8-tetrahydrofolic acid |
| DK0416232T3 (da) | 1989-08-21 | 1995-09-18 | American Cyanamid Co | Stabil injicerbar farmaceutisk formulering med folsyre- og leukovorinsalte og fremgangsmåde |
| IT1237509B (it) | 1989-10-31 | 1993-06-08 | Magis Farmaceutici | Complessi con le ciclodestrine indicati per il trattamento di tutte leforme anemiche da carenza di folati, loro preparazione e relative composizioni farmaceutiche |
| CH680731A5 (hu) * | 1990-04-12 | 1992-10-30 | Sapec Fine Chemicals | |
| CA2082811C (en) | 1990-05-11 | 2004-11-16 | Colin P. Spears | 5,10-methylene-tetrahydrofolate as a modulator of a chemotherapeutic agent |
| US5153309A (en) * | 1990-07-27 | 1992-10-06 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Process of making tetrahydropteroylpoly-l-glutamic acid derivatives |
| CH681303A5 (hu) | 1991-01-16 | 1993-02-26 | Eprova Ag | |
| WO1992022552A1 (en) * | 1991-06-14 | 1992-12-23 | The Upjohn Company | IMIDAZO[1,5-a]QUINOXALINES |
-
1992
- 1992-07-13 CH CH2192/92A patent/CH684644A5/de not_active IP Right Cessation
-
1993
- 1993-06-30 TW TW082105224A patent/TW379142B/zh not_active IP Right Cessation
- 1993-07-02 EP EP93110567A patent/EP0579996B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1993-07-02 DE DE59300176T patent/DE59300176D1/de not_active Expired - Fee Related
- 1993-07-02 DK DK93110567.0T patent/DK0579996T3/da active
- 1993-07-02 ES ES93110567T patent/ES2072163T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1993-07-02 AT AT93110567T patent/ATE121949T1/de not_active IP Right Cessation
- 1993-07-06 RU RU93047800A patent/RU2135519C1/ru active
- 1993-07-08 ZA ZA934907A patent/ZA934907B/xx unknown
- 1993-07-08 CA CA002100126A patent/CA2100126C/en not_active Expired - Fee Related
- 1993-07-09 HU HU9301990A patent/HU212665B/hu not_active IP Right Cessation
- 1993-07-09 NO NO932517A patent/NO303715B1/no not_active IP Right Cessation
- 1993-07-09 FI FI933151A patent/FI933151A/fi unknown
- 1993-07-09 AU AU41870/93A patent/AU661591B2/en not_active Ceased
- 1993-07-10 KR KR1019930012965A patent/KR100217788B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1993-07-12 JP JP5171720A patent/JP2667354B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1993-07-12 US US08/090,688 patent/US5455236A/en not_active Expired - Fee Related
- 1993-07-12 CN CN93108018A patent/CN1032901C/zh not_active Expired - Fee Related
-
1995
- 1995-06-22 HU HU95P/P00333P patent/HU211484A9/hu unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| AU4187093A (en) | 1994-01-20 |
| KR100217788B1 (ko) | 1999-09-01 |
| CA2100126A1 (en) | 1994-01-14 |
| EP0579996B1 (de) | 1995-05-03 |
| KR940002301A (ko) | 1994-02-17 |
| US5455236A (en) | 1995-10-03 |
| RU2135519C1 (ru) | 1999-08-27 |
| JP2667354B2 (ja) | 1997-10-27 |
| EP0579996A1 (de) | 1994-01-26 |
| NO303715B1 (no) | 1998-08-24 |
| CN1032901C (zh) | 1996-10-02 |
| ZA934907B (en) | 1994-02-09 |
| JPH0718084A (ja) | 1995-01-20 |
| TW379142B (en) | 2000-01-11 |
| AU661591B2 (en) | 1995-07-27 |
| ES2072163T3 (es) | 1995-07-01 |
| HU211484A9 (en) | 1995-11-28 |
| NO932517D0 (no) | 1993-07-09 |
| HU9301990D0 (en) | 1993-09-28 |
| DK0579996T3 (da) | 1995-07-10 |
| FI933151A (fi) | 1994-01-14 |
| CH684644A5 (de) | 1994-11-15 |
| CA2100126C (en) | 1998-05-05 |
| FI933151A0 (fi) | 1993-07-09 |
| DE59300176D1 (de) | 1995-06-08 |
| ATE121949T1 (de) | 1995-05-15 |
| HUT65714A (en) | 1994-07-28 |
| NO932517L (no) | 1994-01-14 |
| CN1081688A (zh) | 1994-02-09 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| HU212665B (en) | Process for producing stabile aquous compositions containing 5,10-methylene-tetrahydro-folic acid and process for producing 5,10-methylene-tetrahydro-folic acid/cyclodextrin inclusion compounds | |
| HU206381B (en) | Process for producing new complexes consisting of gamma-cyclodextrin ether or mixed ether and active ingredient, as well as pharmaceutical compositions comprising such complexes | |
| US5608052A (en) | Inclusioin complexes of clavulanic acid and of alkali salts thereof with hydrophilic and hydrophobic beta-cyclodextrin derivatives, a process for the preparation thereof and the use thereof | |
| US6407079B1 (en) | Pharmaceutical compositions containing drugs which are instable or sparingly soluble in water and methods for their preparation | |
| US4518588A (en) | Process for the preparation of an inclusion complex of N-(1--phenylethyl)-3,3-diphenylpropylamine and the hydrochloride thereof respectively with cyclodextrin | |
| KR100702201B1 (ko) | 안정한결정질테트라하이드로엽산염 | |
| EP1641460B1 (de) | Stabile pharmazeutische zusammensetzungen von 5,10-methylentetrahydrofolat | |
| JPH03501970A (ja) | Ｓ‐アデノシル‐ｌ‐メチオニン（ｓａｍ）のアシル化タウリン誘導体との親油性塩 | |
| JP3509866B2 (ja) | 薬物等の疎水性化合物を溶解するために特に使用可能な新規シクロデキストリン誘導体およびその調製方法 | |
| US7812152B2 (en) | Amphiphilic cyclodextrin derivatives, method for preparation thereof and uses thereof | |
| CZ112978A3 (en) | Process for preparing d,1,5-methyltetrahydrofolic acid or salts thereof being acceptable from pharmaceutical point of view | |
| JP3434828B2 (ja) | Ｓｉｎ−１ａシクロデキストリン包接複合体 | |
| JPWO2008152764A1 (ja) | 医薬組成物 | |
| CA1340640C (en) | Regulation of enzymes which utilize tetrahydrobiopterin or tetrahydrofolate cofactors with 6,6-disubstituted-tetrahydropteridines | |
| US8481716B2 (en) | Process for preparing an alpha-lipoic acid/cyclodextrin complex and product prepared | |
| EP0477315B1 (en) | Inclusion complexes of n-ethoxycarbonyl-3-morpholino-sydnonimine or salts formed with cyclodextrin derivatives, preparation thereof and pharmaceutical compositions containing the same | |
| EP0427078A1 (en) | Folinic acid-cyclodextrin inclusion compound | |
| EP0406811A2 (en) | Novel clathrate compounds and a drug comprising them | |
| FI86507B (fi) | Foerfarande foer framstaellning av terapeutiska kompositioner innehaollande y-cyklodextrinderivat. | |
| WO2023237484A1 (en) | Compositions comprising disodium 5,10-methylene-(6r)-tetrahydrofolate | |
| EP1671653A1 (en) | Process for preparing an alpha lipoic acid/cyclodextrin complex and product prepared |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| HMM4 | Cancellation of final prot. due to non-payment of fee |