CN108159114A - 独一味总环烯醚萜苷提取物、提取方法及其应用 - Google Patents

独一味总环烯醚萜苷提取物、提取方法及其应用 Download PDF

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Abstract

本发明提供独一味为原料的总环烯醚萜苷提取物、含该提取物的药物组合物以及该提取物的制备方法及应用；本发明提取物中总环烯醚萜苷类化合物的含量大于等于70％，其中Phlorigidoside C、胡麻属苷、山栀子苷甲酯和8‑O‑乙酰山栀子苷甲酯在提取物中的含量分别为大于等于10％、大于等于7％、大于等于10％和大于等于15％；独一味总环烯醚萜苷提取物的制备方法简单，无需经聚酰胺吸附除去总黄酮类成分，通过优化大孔吸附树脂洗脱的极性有机溶剂浓度获得总环烯醚萜苷类化合物，且含量高；本发明独一味总环烯醚萜苷提取物可促进创伤愈合，可作为治疗手术损伤、意外创伤等疾病的有效活性成分而用于制备促进创伤愈合药物。

Description

独一味总环烯醚萜苷提取物、提取方法及其应用
技术领域
本发明涉及一种从中药中提取活性成分及其制备方法和应用，特别涉及一种具有促进创伤愈合作用的独一味为原料的总环烯醚萜苷提取物、含该提取物的药物组合物以及该提取物的制备方法及其用途。
背景技术
创伤是人们日常生活中比较常见的意外伤害，交通事故、厂矿事故、自然灾害及手术损伤等，均会给人们带来不同程度的伤害。目前，临床处理创伤的方法主要以缝合术、清创术及抗感染等治疗措施，但仍然缺乏加速创伤愈合的有效方法和安全有效刺激伤口修复的活性物质，虽然近年来研究报道多种生长因子可促进伤口愈合，但这些物质价格昂贵，剂量和安全问题难以把握；物理疗法如微波、红外线、激光等，存在色素沉着、过敏和疗效不明确等因素，不利于患者接受。
独一味为唇形科植物独一味Lamiophlomis rotata(Benth.)Kudo的干燥地上部分。是藏、蒙、纳西等民族广泛应用的民间草药,独一味制剂临床主要用于多种外科手术后的刀口创伤、出血等疾病的治疗，疗效确切，且安全性好。目前临床所用独一味单方制剂，多以独一味水提液浓缩后制成，组成成分复杂，含有黄酮、环烯醚萜和苯乙醇苷约50个成分，促进皮肤损伤的作用的活性成分物质基础不明确，相关产品粗、大、黑，难以进行活性成分的质量控制，更难以保障临床的安全性，有效性。鉴于上述原因，申请人对独一味提取物的不同提取组分进行了药理药效学研究，发现了独一味提取物具有促进创伤愈合作用的活性物质为其中的环烯醚萜苷类，进一步研究发现环烯醚萜苷提取物，可以促进新生毛细血管生成，显著提高创面组织血管内皮生长因子(VEGF)和表皮生长因子(EGF)表达的作用，从而能够快速促进创伤愈合。
申请号为200410011679.0公开了独一味中总环烯醚萜苷的提取方法，但提取方法复杂。申请号为201510061896.9和201210284046.1的专利公开了由独一味等10多味中药组成的中药复方用于促进创伤愈合；申请号为201410349693.5的专利公开了由独一味总环烯醚萜苷提取物在治疗便秘药物中的应用；申请号为201010275547.4的专利公开了由独一味提取物和氢溴酸高乌甲素为原料组成的用于抗炎镇痛作用的药物组合。但目前尚未有单独将独一味中以环烯醚萜苷类成分为活性成分用于快速促进创伤愈合的报道。
发明内容
鉴于此，本发明的目的之一是提供一种独一味总环烯醚萜苷提取物，所述提取物中的总环烯醚萜苷类化合物的含量大于等于70％，所述总环烯醚萜苷类化合物中的Phlorigidoside C、胡麻属苷、山栀子苷甲酯和8-O-乙酰山栀子苷甲酯在所述提取物中的含量分别为大于等于10％、大于等于7％、大于等于10％和大于等于15％；
优选地，总环烯醚萜苷类化合物的含量为70％-90％，Phlorigidoside C、胡麻属苷、山栀子苷甲酯和8-O-乙酰山栀子苷甲酯的含量分别为10％-20％、7％-14％、10％-20％和15％-30％。
本发明的目的之二是提供一种药物组合物，所述药物组合物含有上述独一味总环烯醚萜苷提取物为活性成分，加上药学上可接受的载体或辅助性成分制备而成的药剂，药剂的剂型为片剂、胶囊剂、散剂、丸剂、颗粒剂、蜜炼膏剂、外用制剂等。
本发明的目的之三是提供一种独一味总环烯醚萜苷提取物的制备方法，包括：将独一味药材粉碎，加入药材重量5-10倍的水，煎煮1-3次，每次0.5-3小时，过滤后合并滤液，静置8-24小时，取上清液通过处理的弱极性大孔吸附树脂吸附，先用吸附树脂床5-8倍量的水洗脱，再用5-50％的极性有机溶剂解析，收集解析液，回收溶剂，在65-90℃温度下浓缩后，干燥得到所述提取物；
依据2015版《中国药典》Ⅰ部附录项下紫外分光光度法以山栀苷甲酯为标准品测定通过该制备方法获得的独一味总环烯醚萜苷提取物中的总环烯醚萜苷类化合物的含量均大于等于70％(质量分数)；获得的提取物经高效液相色谱法(色谱条件：美国Agilent 1200高效液相色谱仪；层析柱：RP-18；流速：1.0ml/min；柱温：30℃；洗脱剂：甲醇-水)检测，HPLC指纹图谱显示均具有4个明显的特征峰，且特征峰的保留时间分别为11.82±0.2min、14.98±0.3min、19.92±0.1min和36.89±0.2min，分别对应的成分为环烯醚萜苷类单体化合物Phlorigidoside C、胡麻属苷、山栀子苷甲酯和8-O-乙酰山栀子苷甲酯，且PhlorigidosideC、胡麻属苷、山栀子苷甲酯和8-O-乙酰山栀子苷甲酯在提取物中的含量分别为大于等于10％、大于等于7％、大于等于10％和大于等于15％；
优选地，独一味药材粉碎，加入药材重量10倍的水，煎煮2次，每次2小时，过滤后合并滤液，静置12小时，取上清液通过处理的弱极性大孔吸附树脂吸附，先用吸附树脂床5倍量的水洗脱，再用40％的极性有机溶剂解析，收集解析液，回收溶剂，在90℃温度下浓缩后，干燥得到所述提取物；该优选的制备方法获得的提取物经检测(检测方法同上)，总环烯醚萜苷类化合物的含量在70％-90％，Phlorigidoside C、胡麻属苷、山栀子苷甲酯和8-O-乙酰山栀子苷甲酯在提取物中的含量分别在10％-20％、7％-14％、10％-20％和15％-30％；
优选地，所述吸附树脂为HPD100、HPD300、HPD700、D101、AB-8、XDA-1、H-20、HZ-841型号中的一种或几种混合的树脂；所述的极性有机溶剂为甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、正丁醇、丙酮中的一种或几种按一定比例组成的混合溶剂。
本发明的目的之四是还提供一种独一味总环烯醚萜苷提取物的制备方法，包括：将独一味药材粉碎，加入药材重量5-10倍量的10-80％乙醇(V/V),回流提取1-3次，每次0.5-3小时，收集合并提取液，回收至无醇味，加水至药材重量1-3倍体积，放置8-24小时，取上清液通过处理的弱极性大孔吸附树脂吸附，先用吸附树脂床5-8倍量的水洗脱，再用5-50％的极性有机溶剂解析，收集解析液，回收溶剂，在65-90℃温度下浓缩后，干燥得到所述提取物；
通过该制备方法获得的独一味总环烯醚萜苷提取物经检测(检测方法同上)，总环烯醚萜苷类化合物的含量仍大于等于70％(质量分数)，PhlorigidosideC、胡麻属苷、山栀子苷甲酯和8-O-乙酰山栀子苷甲酯在提取物中的含量仍分别为大于等于10％、大于等于7％、大于等于10％和大于等于15％，HPLC指纹图谱显示仍具有4个明显的特征峰，其保留时间分别为11.82±0.2min、14.98±0.3min、19.92±0.1min和36.89±0.2min，分别对应Phlorigidoside C、胡麻属苷、山栀子苷甲酯和8-O-乙酰山栀子苷甲酯；
优选地，将独一味药材粉碎，加入药材重量10倍量的15％乙醇，回流提取2次，每次2小时，收集合并提取液，回收至无醇味，加水至药材重量3倍体积，放置12小时，取上清液通过处理的弱极性大孔吸附树脂吸附，先用吸附树脂床5倍量的水洗脱，再用45％的极性有机溶剂解析，收集解析液，回收溶剂，在90℃温度下浓缩后，干燥得到所述提取物；该优选的制备方法获得的提取物经检测(检测方法同上)，总环烯醚萜苷类化合物的含量仍在70％-90％，Phlorigidoside C、胡麻属苷、山栀子苷甲酯和8-O-乙酰山栀子苷甲酯在提取物中的含量仍分别在10％-20％、7％-14％、10％-20％和15％-30％；
优选地，所述吸附树脂是HPD100、HPD300、HPD700、D101、AB-8、XDA-1、H-20、HZ-841型号中的一种或几种的混合树脂，所述的极性有机溶剂为甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、正丁醇、丙酮中的一种或几种按一定比例组成的混合溶剂。
本发明的目的之四是提供独一味总环烯醚萜苷提取物在促进创伤愈合中的应用，所述提取物为上述所描述的或所制备的任一独一味总环烯醚萜苷提取物，将该提取物和独一味胶囊分别独立应用于皮肤机械损伤的大鼠，实验表明，使用本发明提取物的大鼠的创伤愈合效果比使用独一味胶囊的效果好。当然，总环烯醚萜苷类化合物含量为70％-90％，Phlorigidoside C、胡麻属苷、山栀子苷甲酯和8-O-乙酰山栀子苷甲酯的含量分别为10％-20％、7％-14％、10％-20％和15％-30％的独一味总环烯醚萜苷提取物的愈合效果更好。由此表明，本发明独一味总环烯醚萜苷提取物具有促进创伤愈合的作用。
本发明与现有技术相比有以下优点：
本发明提取物的制备方法与国家发明专利(200410011679.0)相比较，更方便，无需经聚酰胺吸附除去总黄酮类成分，通过优化大孔吸附树脂洗脱的极性有机溶剂浓度，直接洗脱出纯度更高(纯度≥70％)的总环烯醚萜苷类化合物，更利于制备成临床上易于接受的各种剂型，也利于对对应制剂的质量控制；而且本发明制备方法获得的独一味总环烯醚萜苷提取物经活性成分经药效学动物实验，表明该提取物具有促进新生毛细血管生成，显著提高创面组织血管内皮生长因子(VEGF)和表皮生长因子(EGF)表达的作用，从而能够快速促进创伤愈合。因此该提取物可作为治疗手术损伤、意外创伤等疾病的有效活性成分，用于制备促进创伤愈合的药物。
附图说明
图1为独一味总环烯醚萜苷提取物HPLC指纹图谱。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明进一步说明，但本发明并不局限于这些实施例。在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干变型和改进，这些也应视为属于本发明的保护范围。
一、本发明独一味总环烯醚萜苷类提取物的制备方法实施例：
实验例1：
称取独一味药材5KG，粉碎，加入药材重量10倍体积的水，煎煮2次，每次2小时，过滤后合并滤液，静置12小时，取上清液通过处理的D101大孔吸附树脂吸附，先用吸附树脂床5倍量的水洗脱，再用40％的乙醇洗脱解析，收集解析液，回收溶剂，在90℃温度下浓缩后，干燥得到独一味总环烯醚萜苷提取物。
获得的提取物以山栀苷甲酯为标准品，通过紫外分光光度法测定其中总环烯醚萜苷类化合物的含量在70％-90％。
提取物经高效液相色谱法(色谱条件：美国Agilent 1200高效液相色谱仪；层析柱：RP-18；流速：1.0ml/min；柱温：30℃；洗脱剂：甲醇-水)检测，获得的HPLC指纹图谱如图1所示具有4个明显的特征峰，即保留时间为11.82±0.2min的F1峰，保留时间为14.98±0.3min的F2峰，保留时间为19.92±0.1min的F3峰，保留时间为36.89±0.2min的F4峰。其中Phlorigidoside C在提取物中的含量在10％-20％，胡麻属苷在提取物中的含量在7％-14％，山栀子苷甲酯在提取物中的含量在10％-20％，8-O-乙酰山栀子苷甲酯在提取物中的含量在15％-30％。
实验例2：
称取独一味药材5KG，粉碎，加入药材重量10倍体积的15％乙醇(V/V)，回流提取2次，每次2小时，过滤后合并滤液，回收至无醇味，加水至药材重量3倍体积，放置12小时，取上清液通过处理的HPD100大孔吸附树脂吸附，先用吸附树脂床5倍量的水洗脱，再用45％的乙醇洗脱解析，收集解析液，回收溶剂，在90℃温度下浓缩后，干燥得到独一味总环烯醚苷提取物。
获得的提取物以山栀苷甲酯为标准品，通过紫外分光光度法测定其中总环烯醚萜苷类化合物的含量在70％-90％。
提取物经高效液相色谱法检测，获得的HPLC指纹图谱仍具有保留时间分别为11.82±0.2min、14.98±0.3min、9.92±0.1min和36.89±0.2min的明显的特征峰。其中Phlorigidoside C在提取物中的含量在10％-20％，胡麻属苷在提取物中的含量在7％-14％，山栀子苷甲酯在提取物中的含量在10％-20％，8-O-乙酰山栀子苷甲酯在提取物中的含量在15％-30％。
二、独一味总环烯醚苷提取物促进创伤愈合实施例
实验例1：
1、试验方法将实验50只SD大鼠，雌雄各半，体重180-220g，SPF级大鼠，随机分为5组，分别为模型组、阳性对照组(独一味胶囊0.8g·kg-1)、独一味总环烯醚萜苷提取物(上述制备方法中的实施例1中获得)0.4、0.2、0.1g·kg-1(大、中、小剂量组)等5组。皮肤经消毒后，用特制打孔器在大鼠背部打一直径为1.0cm的圆形孔，切除创面全层皮肤至浅筋膜组织；止血，形成机械损伤动物模型，创面不用任何药物，常规单独词养。造模第2天灌胃给药，模型组给以生理盐水，阳性对照组给以独一味胶囊0.8g·kg-1，独一味提取物组分为高、中、低剂量组，给药浓度分别为0.4、0.2、0.1g·kg-1，给药容积为10ml·kg-1·d-1，连续给药14d。每天观察术后表皮、肉芽组织生长情况，用透明薄膜描记创面面积，与原创面面积比较，依据下列公式计算愈合率，评价创面愈合速度。
愈合率(％)＝(原创面面积-现创面面积)×100％/原创面面积。
2、试验结果
①促进机械损伤模型动物皮肤伤口愈合实验结果
实验结果如表1所示，独一味的总环烯醚萜苷提取物可明显促进机械损伤模型动物皮肤伤口愈合，给药10天后高剂量组(总环烯醚萜苷提取物0.4g·kg-1)与阳性对照组(独一味胶囊0.8g·kg-1)愈合率都有提高。各时间点比较发现，给药6、8天时创伤愈合率显著提高(P＜0.05)。第8天，阳性对照组、环烯醚萜苷高、中剂量组伤口干燥，多数结痂，伤口皮肤明显收缩，未见感染，模型组创口面积也有明显缩小，但创口新生组织较薄，容易再次损伤，个别大鼠创口有撕裂。第8天，对照组和环烯醚萜苷高、中剂量组已有个别脱痂，上皮细胞从创口周缘向中心移动，覆盖整个创面，创口周缘组织继续增厚，长出白色表皮。造模后第12天，对照组和环烯醚萜苷高、中剂量组分别约有50％、60％和52％的创面愈合，小剂量组约有43％创面愈合，模型组则未见完全愈合。各组大鼠在试验期间，体重增长正常，伤口对大鼠的生长无明显影响。
结论：第8、10天，环烯醚萜苷高、中剂量组的伤口愈合率明显高于阳性对照组，说明独一味的总环烯醚萜苷提取物促进伤口愈合明显优于独一味胶囊组。
表1各组大鼠皮肤损伤伤口愈合率
注:与空白组比较，*P＜0.05，**P＜0.01，与阳性对照组(独一味胶囊0.8g·kg-1)比较#P＜0.05。
②EGF和VEGF抗体表达的测定
选用免疫组化试剂盒，分别于创伤后2、4、6、8、10、12天切取两组小鼠的创面及创缘全层皮肤组织，其中1/2创面皮肤，用4％多聚甲醛固定，常规脱水，石蜡包埋，切片。脱蜡，3％H2O2-甲醇溶液浸泡10min，0.01mol·L-1枸橼酸钠缓冲液(pH6.0)微波抗原修复，BSA血清封闭液封闭10min，滴加一抗(VEGF、EGF稀释度均1：200)、4℃孵育过夜，二抗和SABC复合物于37℃下各孵育20min，DAB显色，苏木素轻度复染，镜检。各组均以PBS代替一抗作阴性对照。每张切片随机取5个高倍视野(40×10)，计数，并计算平均阳性细胞数。实验结果如表2所示，第4、6天，环烯醚萜苷高、中剂量干预组，使VEGF在伤口创面中表达明显增多，与独一味胶囊组比较，存在明显差异(P＜0.05)。同时，第6、8天，环烯醚萜苷高、中剂量环烯醚萜苷高、中剂量干预组，使EGF在伤口创面中表达明显增多，与独一味胶囊组比较，存在明显差异(P＜0.05)。说明独一味的总环烯醚萜苷提取物，可通过促进创伤部位中EGF、VEGF的表达，从而促进伤口愈合，且其效果明显优于独一味胶囊组。
表2大鼠皮肤损伤后，伤口创面不同时间的EGF和VEGF的表达(n＝10)
注:与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01，与阳性对照组(独一味胶囊0.8g·kg-1)比较#P＜0.05。
实验例2：
1、试验方法将实验50只SD大鼠，雌雄各半，体重180-220g，SPF级大鼠，随机分为5组，分别为模型组、阳性对照组(独一味胶囊0.8g·kg-1)、独一味总环烯醚萜苷提取物(上述制备方法中的实施例2中获得)0.4、0.2、0.1g·kg-1(大、中、小剂量组)等5组。皮肤经消毒后，用特制打孔器在大鼠背部打一直径为1.0cm的圆形孔，切除创面全层皮肤至浅筋膜组织；止血，形成机械损伤动物模型，创面不用任何药物，常规单独词养。造模第2天灌胃给药，模型组给以生理盐水，阳性对照组给以独一味胶囊0.8g·kg-1，独一味提取物组分为高、中、低剂量组，给药浓度分别为0.4、0.2、0.1g·kg-1，给药容积为10ml·kg-1·d-1，连续给药14d。每天观察术后表皮、肉芽组织生长情况，用透明薄膜描记创面面积，与原创面面积比较，依据下列公式计算愈合率，评价创面愈合速度。
愈合率(％)＝(原创面面积-现创面面积)×100％/原创面面积。
2、试验结果
①促进机械损伤模型动物皮肤伤口愈合实验结果
实验结果与上述促进创伤愈合实施例1相似，给药后每天观察，阳性对照组和环烯醚萜苷干预组均比模型组的愈合率高，给药6、8天时创伤愈合率显著提高(P＜0.05)。第8天，阳性对照组、环烯醚萜苷高、中剂量组伤口干燥，多数结痂，伤口皮肤明显收缩，未见感染，模型组创口面积也有明显缩小，但创口新生组织较薄，容易再次损伤，个别大鼠创口有撕裂。第8天，对照组和环烯醚萜苷高、中剂量组已有个别脱痂，上皮细胞从创口周缘向中心移动，覆盖整个创面，创口周缘组织继续增厚，长出白色表皮。造模后第12天，对照组和环烯醚萜苷高、中剂量组分别约有50％、62％和54％的创面愈合，小剂量组约有44％创面愈合，模型组则未见完全愈合。各组大鼠在试验期间，体重增长正常，伤口对大鼠的生长无明显影响。第8、10天，环烯醚萜苷高、中剂量组的伤口愈合率明显高于阳性对照组，说明独一味的总环烯醚萜苷提取物促进伤口愈合明显优于独一味胶囊组。
②EGF和VEGF抗体表达的测定
选用免疫组化试剂盒，分别于创伤后2、4、6、8、10、12天切取两组小鼠的创面及创缘全层皮肤组织，其中1/2创面皮肤，用4％多聚甲醛固定，常规脱水，石蜡包埋，切片。脱蜡，3％H2O2-甲醇溶液浸泡10min，0.01mol·L-1枸橼酸钠缓冲液(pH6.0)微波抗原修复，BSA血清封闭液封闭10min，滴加一抗(VEGF、EGF稀释度均1：200)、4℃孵育过夜，二抗和SABC复合物于37℃下各孵育20min，DAB显色，苏木素轻度复染，镜检。各组均以PBS代替一抗作阴性对照。每张切片随机取5个高倍视野(40×10)，计数，并计算平均阳性细胞数。实验结果与上述促进创伤愈合实施例1相似，第4、6天，环烯醚萜苷高、中剂量干预组，使VEGF在伤口创面中表达明显增多，与独一味胶囊组比较，存在明显差异(P＜0.05)。同时，第6、8天，环烯醚萜苷高、中剂量环烯醚萜苷高、中剂量干预组，使EGF在伤口创面中表达明显增多，与独一味胶囊组比较，存在明显差异(P＜0.05)。说明独一味的总环烯醚萜苷提取物，可通过促进创伤部位中EGF、VEGF的表达，从而促进伤口愈合，且其效果明显优于独一味胶囊组。
三、独一味总环烯醚萜苷提取物为活性成分的药物组合物制备
实施例1：独一味总环烯醚萜苷片剂的制备
独一味总环烯醚萜苷提取物200g，加入0.05倍即10g的羧甲基淀粉钠，0.01倍即2g的微晶纤维素，混匀，干燥后加入获得的混合物质量0.01倍的硬脂酸镁，然后用冲压装置将颗粒压制成片，共制得独一味总环烯醚萜苷986片，每片含总环烯醚萜苷提取物约0.2g。
实施例2：独一味总环烯醚萜苷软胶囊的制备
取独一味总环烯醚萜苷提取物200g，加入聚乙二醇-400 400g，置胶体磨中研匀，得胶囊内容物备用。取明胶250g，聚乙二醇-400 20g，甘油87.5g,氧化铁棕4.4g，一并加水浸泡2小时。然后加热至65℃，搅拌均匀，抽真空至无气泡，用目不锈钢筛网过滤，滤液至贮胶桶中放置3-4小时，保持温度在50℃，至气泡都浮在表面，取下面的胶作为囊壳材料备用。将上述的胶囊内容物和胶液经软胶囊机轧制软胶囊，制成每粒的软胶囊含总环烯醚萜苷提取物约0.2g。

Claims (10)

1.独一味总环烯醚萜苷提取物，其特征在于，所述提取物中的总环烯醚萜苷类化合物的含量大于等于70％，所述总环烯醚萜苷类化合物中的Phlorigidoside C、胡麻属苷、山栀子苷甲酯和8-O-乙酰山栀子苷甲酯在所述提取物中的含量分别为大于等于10％、大于等于7％、大于等于10％和大于等于15％。
2.如权利要求1所述的独一味总环烯醚萜苷提取物，其特征在于，总环烯醚萜苷类化合物的含量为70％-90％，Phlorigidoside C、胡麻属苷、山栀子苷甲酯和8-O-乙酰山栀子苷甲酯的含量分别为10％-20％、7％-14％、10％-20％和15％-30％。
3.一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物含有权利要求1或2的独一味总环烯醚萜苷提取物为活性成分，加上药学上可接受的载体或辅助性成分制备而成的药剂，药剂的剂型包括片剂、胶囊剂、散剂、丸剂、颗粒剂、蜜炼膏剂或外用制剂。
4.独一味总环烯醚萜苷提取物的制备方法，其特征在于，包括：将独一味药材粉碎，加入药材重量5-10倍的水，煎煮1-3次，每次0.5-3小时，过滤后合并滤液，静置8-24小时，取上清液通过处理的弱极性大孔吸附树脂吸附，先用吸附树脂床5-8倍量的水洗脱，再用5-50％的极性有机溶剂解析，收集解析液，回收溶剂，在65-90℃温度下浓缩后，干燥得到所述提取物。
5.如权利要求4所述的独一味总环烯醚萜苷提取物的制备方法，其特征在于，将独一味药材粉碎，加入药材重量10倍的水，煎煮2次，每次2小时，过滤后合并滤液，静置12小时，取上清液通过处理的弱极性大孔吸附树脂吸附，先用吸附树脂床5倍量的水洗脱，再用40％的极性有机溶剂解析，收集解析液，回收溶剂，在90℃温度下浓缩后，干燥得到所述提取物。
6.如权利要求5所述的独一味总环烯醚萜苷提取物的制备方法，其特征在于，所述吸附树脂为HPD100、HPD300、HPD700、D101、AB-8、XDA-1、H-20、HZ-841型号中的一种或几种混合的树脂；所述的极性有机溶剂为甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、正丁醇、丙酮中的一种或几种按一定比例组成的混合溶剂。
7.独一味总环烯醚萜苷提取物的制备方法，其特征在于，包括：将独一味药材粉碎，加入药材重量5-10倍量的10-80％乙醇，回流提取1-3次，每次0.5-3小时，收集合并提取液，回收至无醇味，加水至药材重量1-3倍体积，放置8-24小时，取上清液通过处理的弱极性大孔吸附树脂吸附，先用吸附树脂床5-8倍量的水洗脱，再用5-50％的极性有机溶剂解析，收集解析液，回收溶剂，在65-90℃温度下浓缩后，干燥得到所述提取物。
8.如权利要求7所述的独一味总环烯醚萜苷提取物的制备方法，其特征在于：将独一味药材粉碎，加入药材重量10倍量的15％乙醇，回流提取2次，每次2小时，收集合并提取液，回收至无醇味，加水至药材重量3倍体积，放置12小时，取上清液通过处理的弱极性大孔吸附树脂吸附，先用吸附树脂床5倍量的水洗脱，再用45％的极性有机溶剂解析，收集解析液，回收溶剂，在90℃温度下浓缩后，干燥得到所述提取物。
9.如权利要求8所述的独一味总环烯醚萜苷提取物的制备方法，其特征在于：所述吸附树脂为HPD100、HPD300、HPD700、D101、AB-8、XDA-1、H-20、HZ-841型号中的一种或几种混合的树脂；所述的极性有机溶剂为甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、正丁醇、丙酮中的一种或几种按一定比例组成的混合溶剂。
10.如权利要求1-9中任一所述独一味总环烯醚萜苷提取物在促进创伤愈合中的应用。
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