CN102526387A - 一种治疗早期糖尿病足的药物组合物及制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种治疗早期糖尿病足的药物组合物及制备方法。具体地，本发明药物组合物由作为活性组分的药材以及任选的药学可接受的辅料制成，所述药材包括昆明山海棠、赤芍、独活、白芷、石菖蒲。本发明还涉及由所述组合物制成的凝胶剂、所述药物组合在制备用于治疗或预防糖尿病足的医药制品中的用途等。本发明组合物可用于治疗糖尿病足例如用于治疗早期糖尿病足。

Description

一种治疗早期糖尿病足的药物组合物及制备方法

技术领域

本发明属于中药技术领域，具体涉及一种治疗早期糖尿病足的药物组合物及制备方法。

背景技术

糖尿病足(Diabetic Foot，DF)，又称糖尿病肢端坏疽，是指糖尿病患者因合并神经病变及各种不同程度末梢血管病变造成的肢体供血不足，感觉障碍，合并感染，以肢端疼痛、溃疡形成和(或)深部组织的破坏为主要特征的一组疾病。糖尿病足是糖尿病常见的慢性并发症之一，也是糖尿病患者截肢致残、死亡和能力丧失的重要原因。

随着糖尿病发病率的不断上升，糖尿病足的发病率也逐年攀升。糖尿病人群每年有2.8～14.5％发展为糖尿病足。大约5～10％的患者需行截肢手术，截肢率约为非糖尿病患者的40倍。因此，对糖尿病足的治疗研究迫在眉睫，而早期治疗，阻断病程发展更是治疗糖尿病足的主要切入点。

糖尿病足早期无开放性病灶，临床表现为足感觉迟钝、麻木、疼痛、皮肤发凉等。目前西医外治侧重于对于糖尿病足感染性病灶的治疗和处理，对于早期糖尿病足无针对性的外用制剂。

未病先防、已病防变是中医治疗糖尿病足早期的治疗理念。但目前中医外治成方制剂多为针对热毒证及疮疡已溃的治疗方剂。而对于早期以缺血性疼痛、麻木、皮肤发凉为主要表现的疮疡阴证外用成方制剂尚属空白。

中药经皮给药是一种古老的给药方式，公元前二世纪已见于我国医学典籍《内经·素问》中，其起源甚至早于内治，宋代的《太平惠民和剂局方》已有可用于局部治疗或透皮吸收的膏药的出现，对我国人民疾病的预防和治疗发挥着重要作用。随着现代经皮给药系统研究的深入、制备工艺的逐渐成熟和新辅料的开发与利用，中药经皮给药已成为中药控释制剂研究的主要方向之一。尽管早期糖尿病足可以考虑采用局部治疗例如使用外用膏剂来治疗，但由于外用中药多为复方，有效成份的纷繁复杂，因此较之成分简单的化学药物制剂，中药局部外用制剂的制备面临更多的复杂性与不确定性。

本领域仍然需要的新的治疗糖尿病足例如早期糖尿病足的方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种治疗糖尿病足例如早期糖尿病足的新方法。本发明人发现，以昆明山海棠、赤芍、独活、白芷、石菖蒲组合配制成药物组合物，例如配制成可外用的药物组合物，可以有效地用于早期糖尿病足的治疗。本发明基于此发现而得以完成。

为此，本发明第一方面提供了一种药物组合物，其由作为活性组分的药材以及任选的药学可接受的辅料制成，所述药材包括昆明山海棠、赤芍、独活、白芷、石菖蒲。

根据本发明第一方面的药物组合物，其中所述药材的重量配比为：昆明山海棠15-60份、赤芍6-24份、独活9-36份、白芷3-12份、石菖蒲4-18份。

根据本发明第一方面的药物组合物，其中所述药材的重量配比为：昆明山海棠20-45份、赤芍8-20份、独活12-30份、白芷4-10份、石菖蒲6-15份。

根据本发明第一方面的药物组合物，其中所述药材的重量配比为：昆明山海棠25-40份、赤芍10-15份、独活15-24份、白芷5-8份、石菖蒲8-12份。

根据本发明第一方面的药物组合物，其中所述药材的重量配比为：昆明山海棠约30份、赤芍约12份、独活约18份、白芷约6份、石菖蒲约9份。

根据本发明第一方面的药物组合物，其中所述5种药材各自独立地是以粉碎细粉、单一药材提取物、和/或2种以上药材提取物加入到所述药物组合物中的。

根据本发明第一方面的药物组合物，其中所述5种药材各自独立地是以单一药材提取物、和/或2种以上药材提取物加入到所述药物组合物中的。

根据本发明第一方面的药物组合物，其中所述5种药材各自独立地是以单一药材提取物、2种以上药材提取物加入到所述药物组合物中的。

根据本发明第一方面的药物组合物，其中所述昆明山海棠是以其乙醇溶液提取物加入到该药物组合物中的。在一个实施方案中，所述昆明山海棠提取物是如下方法制备的：昆明山海棠以30-85％乙醇(优选40-75％乙醇，例如约50％乙醇)加热回流提取(例如1-3次，例如每次0.5-3小时)，提取液浓缩、干燥，即得。

根据本发明第一方面的药物组合物，其中所述赤芍是以其水提取物加入到该药物组合物中的。在一个实施方案中，所述赤芍提取物是如下方法制备的：赤芍用水煎煮(例如1-3次，例如每次0.5-3小时)，水提取液醇沉，上清液浓缩、干燥，即得。

根据本发明第一方面的药物组合物，其中所述独活、白芷、石菖蒲是三者一起以乙醇溶液提取所得提取物加入到该药物组合物中的。在一个实施方案中，所述独活、白芷、石菖蒲三者的提取物是如下方法制备的：独活、白芷、石菖蒲三味药用40-95％乙醇(例如50-90％乙醇，例如60-80％乙醇，例如约70％乙醇)渗漉提取，渗漉液减压浓缩，静置分层，分取上层油层，即得。

根据本发明第一方面的药物组合物，其为外用制剂。在一个实施方案中，本发明的药物组合物是凝胶剂。在一个实施方案中，本发明的药物组合物是软膏剂。在一个实施方案中，本发明的药物组合物是乳膏剂。一个实施方案中，本发明的药物组合物是巴布剂。在一个实施方案中，本发明的药物组合物是搽剂。在一个实施方案中，本发明的药物组合物是供外用的溶液剂。

本发明第二方面提供了一种凝胶剂，其由作为活性组分的药材以及药学可接受的辅料制成，所述药材包括昆明山海棠、赤芍、独活、白芷、石菖蒲。在一个实施方案中，所述辅料是凝胶剂可接受的辅料。在一个实施方案中，所述辅料包括但不限于：基质、保湿剂、任选的pH调节剂、任选的稳定剂、任选的防腐剂、水。

根据本发明第二方面的凝胶剂，其中所述药材的重量配比为：昆明山海棠15-60份、赤芍6-24份、独活9-36份、白芷3-12份、石菖蒲4-18份。

根据本发明第二方面的凝胶剂，其中所述药材的重量配比为：昆明山海棠20-45份、赤芍8-20份、独活12-30份、白芷4-10份、石菖蒲6-15份。

根据本发明第二方面的凝胶剂，其中所述药材的重量配比为：昆明山海棠25-40份、赤芍10-15份、独活15-24份、白芷5-8份、石菖蒲8-12份。

根据本发明第二方面的凝胶剂，其中所述药材的重量配比为：昆明山海棠约30份、赤芍约12份、独活约18份、白芷约6份、石菖蒲约9份。

根据本发明第二方面的凝胶剂，其中所述5种药材各自独立地是以粉碎细粉、单一药材提取物、和/或2种以上药材提取物加入到所述凝胶剂中的。

根据本发明第二方面的凝胶剂，其中所述5种药材各自独立地是以单一药材提取物、和/或2种以上药材提取物加入到所述凝胶剂中的。

根据本发明第二方面的凝胶剂，其中所述5种药材各自独立地是以单一药材提取物、2种以上药材提取物加入到所述凝胶剂中的。

根据本发明第二方面的凝胶剂，其中所述昆明山海棠是以其乙醇溶液提取物加入到所述凝胶剂中的。在一个实施方案中，所述昆明山海棠提取物是如下方法制备的：昆明山海棠以30-85％乙醇(优选40-75％乙醇，例如约50％乙醇)加热回流提取(例如1-3次，例如每次0.5-3小时)，提取液浓缩、干燥，即得。

根据本发明第二方面的凝胶剂，其中所述赤芍是以其水提取物加入到所述凝胶剂中的。在一个实施方案中，所述赤芍提取物是如下方法制备的：赤芍用水煎煮(例如1-3次，例如每次0.5-3小时)，水提取液浓缩后醇沉，上清液浓缩、干燥，即得。

根据本发明第二方面的凝胶剂，其中所述独活、白芷、石菖蒲是三者一起以乙醇溶液提取所得提取物加入到所述凝胶剂中的。在一个实施方案中，所述独活、白芷、石菖蒲三者的提取物是如下方法制备的：独活、白芷、石菖蒲三味药用40-95％乙醇(例如50-90％乙醇，例如60-80％乙醇，例如约70％乙醇)渗漉提取，渗漉液减压浓缩，静置分层，分取上层油层，即得。

根据本发明第二方面的凝胶剂，其每100重量份中包含：

药材和/或其提取物	8.5～50重量份，
		基质	0.1～30重量份，
保湿剂	5～40重量份，
		pH调节剂	适量，调pH至3.5～8，优选4.0～6.5，
稳定剂	0～10重量份(优选0.1-10重量份)，
		防腐剂	0～5重量份(优选0.1-5重量份)，
水	适量，加至100重量份。

根据本发明第二方面的凝胶剂，其中所述基质是亲水性凝胶基质。在一个实施方案中，所述亲水性凝胶基质选自卡波姆、羧甲基纤维素钠及其纤维素类衍生物、壳聚糖、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇、聚氧乙烯、海藻酸钠、黄原胶及其组合。在一个实施方案中，所述亲水性凝胶基质选自卡波姆、纤维素类衍生物、壳聚糖、或其组合。在一个实施方案中，所述亲水性凝胶基质是卡波姆；在一个实施方案中，卡波姆浓度为0.1～10％，优选1-5％。在一个实施方案中，所述亲水性凝胶基质是纤维素类衍生物(例如羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素钠)；在一个实施方案中，纤维素类衍生物浓度为0.1～30％，优选1-20％。在一个实施方案中，所述亲水性凝胶基质是壳聚糖；在一个实施方案中，壳聚糖浓度为0.2～10％，优选1-5％。在一个实施方案中，所述亲水性凝胶基质是聚乙烯醇；在一个实施方案中，聚乙烯醇浓度为0.2～15％，优选1-10％。在一个实施方案中，所述亲水性凝胶基质是聚氧乙烯；在一个实施方案中，聚氧乙烯浓度为0.5～10％，优选1-5％。在一个实施方案中，所述亲水性凝胶基质是海藻酸钠；在一个实施方案中，海藻酸钠浓度为0.2～7％，优选1-5％。在一个实施方案中，所述亲水性凝胶基质是黄原胶；在一个实施方案中，黄原胶浓度为0.2～6％，优选1-5％。

根据本发明第二方面的凝胶剂，其中所述保湿剂选自甘油、丙二醇、山梨醇及其组合。它们的量可以占凝胶剂总重量的5～40％，例如5～30％，例如10-20％。

根据本发明第二方面的凝胶剂，其中所述pH调节剂选自三乙醇胺、氢氧化钠、乙二胺、月桂胺、碳酸氢钠等，以及它们的组合。在一个实施方案中，所述的pH调节剂选自三乙醇胺、氢氧化钠。在一个实施方案中，pH调节剂的用量是使凝胶剂的pH调节到3.5～8，优选4.0～6.5。

根据本发明第二方面的凝胶剂，其中可以包含稳定剂。在一个实施方案中，所述稳定剂选自亚硫酸盐类、抗坏血酸、维生素E、丁羟基茴香醚、丁羟基甲苯、枸橼酸、酒石酸、EDTA等。在一个实施方案中，所述稳定剂选自亚硫酸盐类、EDTA。稳定剂的用量可以是本领域常规用于使药物稳定的量，例如0.01-10％，例如0.1-5％，例如0.2-5％。尽管在凝胶剂中加入适量稳定剂对于制剂的效期可以延长，然而本领域技术人员理解，本发明的核心实质在于提供一种可以用于治疗和/或预防糖尿病足的中药组合物，在本发明凝胶剂中不加入稳定剂亦是可以实现本发明上述目的的，因此在一些实施方案中，本发明凝胶剂可以不加入稳定剂。

根据本发明第二方面的凝胶剂，其中可以包含防腐剂。在一个实施方案中，所述防腐剂选自羟苯酯类、三氯叔丁醇、苯甲醇、苯乙醇、醋酸洗必泰、硫柳汞或季铵化合物类阳离子表面活性剂。在一个实施方案中，所述防腐剂是羟苯酯类，例如羟苯甲酯、羟苯乙酯、羟苯丙酯。防腐剂的用量可以是本领域常规用于使防腐的量，例如0.01-10％，例如0.01-5％，例如0.1-5％，例如0.1-2.5％。尽管在凝胶剂中加入适量防腐剂对于制剂的防腐是有利的，然而本领域技术人员理解，本发明的核心实质在于提供一种可以用于治疗和/或预防糖尿病足的中药组合物，在本发明凝胶剂中不加入防腐剂亦是可以实现本发明上述目的的，例如将本发明组合物配制成溶液剂后经热压灭菌，采用单剂量密封包装用于糖尿病足，因此在一些实施方案中，本发明凝胶剂可以不加入防腐剂。

本发明第三方面提供了作为活性组分的药材的组合在制备用于治疗或预防糖尿病足的医药制品中的用途，其中所述药材包括昆明山海棠、赤芍、独活、白芷、石菖蒲。

根据本发明第三方面的用途，其中所述药材的重量配比为：昆明山海棠15-60份、赤芍6-24份、独活9-36份、白芷3-12份、石菖蒲4-18份。

根据本发明第三方面的用途，其中所述药材的重量配比为：昆明山海棠20-45份、赤芍8-20份、独活12-30份、白芷4-10份、石菖蒲6-15份。

根据本发明第三方面的用途，其中所述药材的重量配比为：昆明山海棠25-40份、赤芍10-15份、独活15-24份、白芷5-8份、石菖蒲8-12份。

根据本发明第三方面的用途，其中所述药材的重量配比为：昆明山海棠约30份、赤芍约12份、独活约18份、白芷约6份、石菖蒲约9份。

根据本发明第三方面的用途，其中所述5种药材各自独立地是以粉碎细粉、单一药材提取物、和/或2种以上药材提取物加入到所述医药制品中的。

根据本发明第三方面的用途，其中所述5种药材各自独立地是以单一药材提取物、和/或2种以上药材提取物加入到所述医药制品中的。

根据本发明第三方面的用途，其中所述5种药材各自独立地是以单一药材提取物、2种以上药材提取物加入到所述医药制品中的。

根据本发明第三方面的用途，其中所述昆明山海棠是以其乙醇溶液提取物加入到所述医药制品中的。在一个实施方案中，所述昆明山海棠提取物是如下方法制备的：昆明山海棠以30-85％乙醇(优选40-75％乙醇，例如约50％乙醇)加热回流提取(例如1-3次，例如每次0.5-3小时)，提取液浓缩、干燥，即得。

根据本发明第三方面的用途，其中所述赤芍是以其水提取物加入到所述医药制品中的。在一个实施方案中，所述赤芍提取物是如下方法制备的：赤芍用水煎煮(例如1-3次，例如每次0.5-3小时)，水提取液浓缩后醇沉，上清液浓缩、干燥，即得。

根据本发明第三方面的用途，其中所述独活、白芷、石菖蒲是三者一起以乙醇溶液提取所得提取物加入到所述医药制品中的。在一个实施方案中，所述独活、白芷、石菖蒲三者的提取物是如下方法制备的：独活、白芷、石菖蒲三味药用40-95％乙醇(例如50-90％乙醇，例如60-80％乙醇，例如约70％乙醇)渗漉提取，渗漉液减压浓缩，静置分层，分取上层油层，即得。

根据本发明第三方面的用途，其中所述医药制品为外用制剂。在一个实施方案中，所述医药制品是凝胶剂。在一个实施方案中，所述医药制品是软膏剂。在一个实施方案中，所述医药制品是乳膏剂。一个实施方案中，所述医药制品是巴布剂。在一个实施方案中，所述医药制品是搽剂。在一个实施方案中，所述医药制品是供外用的溶液剂。

本发明第四方面提供了制备本发明第一方面所述药物组合物的方法，其包括对药材进行处理，接着将处理过的药材经常规方法制剂方法配制成药物组合物。

根据本发明第四方面的方法，其中所述对药材进行处理是指针对5种药材，各自独立地进行粉碎成细粉、对单一药材进行提取、和/或对2种以上药材进行提取。由此得到的处理物例如药材细粉或提取物接着配制成组合物。

根据本发明第四方面的方法，其中所述对药材进行处理是指针对5种药材，各自独立地对单一药材进行提取、和/或对2种以上药材进行提取。由此得到的处理物例如药材细粉或提取物接着配制成组合物。

根据本发明第四方面的方法，其中对昆明山海棠是以乙醇溶液提取进行处理的。在一个实施方案中，所述昆明山海棠是以其乙醇溶液提取物加入到该药物组合物中的。在一个实施方案中，所述昆明山海棠提取物是如下方法制备的：昆明山海棠以30-85％乙醇(优选40-75％乙醇，例如约50％乙醇)加热回流提取(例如1-3次，例如每次0.5-3小时)，提取液浓缩、干燥，即得。

根据本发明第四方面的方法，其中对赤芍是以水提取进行处理的。在一个实施方案中，所述赤芍是以其水提取物加入到该药物组合物中的。在一个实施方案中，所述赤芍提取物是如下方法制备的：赤芍用水煎煮(例如1-3次，例如每次0.5-3小时)，水提取液浓缩后醇沉，上清液浓缩、干燥，即得。

根据本发明第四方面的方法，其中对独活、白芷、石菖蒲是三者一起以乙醇溶液提取进行处理的。在一个实施方案中，所述独活、白芷、石菖蒲是三者一起以乙醇溶液提取所得提取物加入到该药物组合物中的。在一个实施方案中，所述独活、白芷、石菖蒲三者的提取物是如下方法制备的：独活、白芷、石菖蒲三味药用40-95％乙醇(例如50-90％乙醇，例如60-80％乙醇，例如约70％乙醇)渗漉提取，渗漉液减压浓缩，静置分层，分取上层油层，即得。

根据本发明第四方面的方法，其中所述药物组合物是外用制剂。在一个实施方案中，所述药物组合物是凝胶剂、软膏剂、乳膏剂、巴布剂、搽剂、供外用的溶液剂。在一个实施方案中，所述药物组合物是凝胶剂。

根据本发明第四方面的方法，其包括对药材进行处理，接着将处理过的药材经常规方法制剂方法配制成凝胶剂、软膏剂、乳膏剂、巴布剂、搽剂、或供外用的溶液剂。在一个实施方案中，所述方法包括对药材进行处理，接着将处理过的药材经常规方法制剂方法配制成本发明第二方面所述的凝胶剂。

本发明第五方面提供了在有需要的受试者中治疗或预防糖尿病足例如早期糖尿病足的方法，该方法包括给所述受试者施用治疗或预防有效量的本发明第一方面所述药物组合物或者本发明第二方面所述凝胶剂。

本发明任一方面的任一实施方案所具有的特征同样适用于该方面的其它任一实施方案，本发明任一方面或其任一实施方案所具有的特征同样适用于其它任一方面或该其它任一方面的任一实施方案，只要它们不会相互矛盾；当然在相互之间适用时，必要的话可对相应特征作适当修饰。

下面对本发明的各个方面和特点作进一步的描述。

本发明所引述的所有文献，它们的全部内容通过引用并入本文，并且如果这些文献所表达的含义与本发明不一致时，以本发明的表述为准。此外，本发明使用的各种术语和短语具有本领域技术人员公知的一般含义，即便如此，本发明仍然希望在此对这些术语和短语作更详尽的说明和解释，提及的术语和短语如有与公知含义不一致的，以本发明所表述的含义为准。

在本发明的任一方面，所述的组合物或凝胶剂用于发挥治疗和/或预防本发明所述疾病或病症的目的时，无论如何其是以治疗和/或预防有效量的剂量使用或配制的。例如对于本发明的药物组合物，其中的有效剂量可以根据本领域技术人员公知的医药情境作适当处理，例如对于单位剂量的药剂，对于每个单位剂量药剂中活性成分较少时，可以通过使用多个单位剂量药剂而得到期望的效果；又如在本发明提及的“有效量”，该有效量是这些物质以足以产生期待效果的量提供给所述哺乳动物。在本发明的一个实施方案中，达到有效的治疗和/或预防的剂量，不论给予的是何种形式的组合物，其折算成药材赤芍计，相当于药材0.01-20g/kg体重/天，优选0.1-15g/kg体重/天，更优选0.1-10g/kg体重/天。此外，临床医生会根据诸多因素来确定具体的使用剂量，这些因素例如年龄、性别、一般健康状况、疾病的种类和严重程度等。无论如何，本领域技术人员根据本发明公开可以容易地确定具体情况下的使用剂量。

如本文所述的，术语“有效量”是指可在受试者中实现治疗、预防、减轻和/或缓解本发明所述疾病或病症的剂量。

如本文所述的，术语“药物组合物”，是指可用于在受试者中实现治疗、预防、减轻和/或缓解本发明所述疾病、病症、症状的物质。在特别的实施方案中，该“药物组合物”可以与“组合物”互换使用。

如本文所述的，术语“受试者”可以指患者或者其它接受本发明组合物和提取物以治疗、预防、减轻和/或缓解本发明所述疾病、病症、症状的动物，特别是哺乳动物，例如人、狗、猴、牛、马等。

如本文所述的，术语“疾病或症状”是指所述受试者的一种身体状态，该身体状态与本发明所述疾病或症状有关。

如本文所述的，“％”，如未特别指明，是指重量/重量的百分比。

本发明药物组合物中使用的“药学可接受的辅料”可以是药物制剂领域中任何常规的载体。特定载体的选择将取决于用于治疗特定患者的给药方式或疾病类型和状态。用于特定给药模式的合适药物组合物的制备方法完全在药物领域技术人员的知识范围内。例如，可以作为药学可接受的载体包括药学领域常规的稀释剂、载体、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体和润滑剂等。必要时，还可以在药物组合物中加入香味剂、防腐剂和甜味剂等。

本发明的药物组合物可以制成片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊、口服液、膏剂、霜剂、注射乳剂(注射用无菌粉针)等多种形式。上述各种剂型的药物均可以按照药学领域的常规方法制备。特别地，本发明药物组合物可以制成外用制剂的形式，特别是例如凝胶剂、软膏剂、乳膏剂、巴布剂、搽剂、供外用的溶液剂等。

本发明的一个目的在于克服现有技术的不足，提供一种新中药组方，以用于治疗或预防糖尿病足例如早期糖尿病足。

本发明的第二个目的在于，提供一种治疗或预防糖尿病足例如早期糖尿病足的药物组合物。本发明的还另一目的是提供该药物组合物的制备方法。

本发明的第三个目的在于，提供一种治疗早期糖尿病足药物组合物的释药性好、载药量大、使用舒适、易于清洗、符合现代生活需求、患者用药依从性好，且稳定、有效的凝胶剂。

本发明的第四个目的在于，提供含有本发明的药物组合物的中药凝胶剂在治疗早期糖尿病足的药物方面的应用。

本发明组合物中使用的昆明山海棠(Tripterygium Hypoglaucum Hutch.)为卫矛科雷公藤属植物的根，又名金钢藤。化学成分主要含有萜类、生物碱、甙类、糖类、有机酸、齐墩果酸、果糖、β-谷甾醇等。

本发明组合物中使用的赤芍为毛茛科芍药(Paeonia lactiflora Pall.)或川赤芍(Paeonia veitchii Lynch.)的干燥根。化学成分主要含有芍药苷、羟基芍药苷、芍药内酯苷等成分。

本发明组合物中使用的独活为伞形科植物重齿毛当归(Angelica pubescens Maxim.f.biserrata Shan et Yuan)的干燥根。化学成分主要有：甲氧基欧芹素、二氢欧山芹醇乙酸酯、二氢欧山芹醇、二氢欧山芹素、3-蒈烯、间-聚伞花素、蛇床子素、β-水芹烯等、槲皮素、芦丁等。

本发明组合物中使用的白芷为伞形科植物白芷(Angelica dahurica.(Fisch.exHoffm.)Benth.et Hook.f)或杭白芷(Angelica dahurica.(Fisch.exHoffm.)Benth.et Hook.f.var.formosana(Boiss.)Shan et Yuan)的干燥根。化学成分主要有氧化前胡素、欧前胡素、异欧前胡素、甲基环癸烷、十四碳烯等。

本发明组合物中使用的石菖蒲为天南星科植物石菖蒲(Acorus tatarinowii Schott)的干燥根茎。含挥发油、糖类、有机酸、氨基酸等多种化学成分。挥发油中已经发现34种成分，其主要成分为β-细辛醚、α-细辛醚、石竹烯、欧细辛醚、石营醚、细辛醛等。

在本发明一个实施方案中，提供的凝胶剂由昆明山海棠、赤芍、独活、白芷、石菖蒲提取物与适宜基质、保湿剂、pH调节剂、抗氧剂、防腐剂、水制备而成。本发明制备的凝胶剂，具有质地均匀细腻、粘稠度适宜、稳定、安全、有效的特点。

总体而言，本发明的治疗早期糖尿病足的药物组合物由作为活性药材的昆明山海棠、赤芍、独活、白芷、石菖蒲制成。方中昆明山海棠，辛温行散，具有良好的活血祛瘀散结、解毒消肿止痛之效，为活血止痛之佳品，针对主症病机，故为方中君药。独活，善行血分，祛风行湿散寒，宜用于两足痛痹、湿痹。独活在本方中其用有二：其一，辛而微温，善温营卫之气，通达周身，可辅助君药增强散寒通络止痛之功；其二，苦泄之性，可辅助君药增强祛瘀行滞通脉之功，为方中臣药。赤芍，苦寒性降，走血分，善行血滞，佐助君药增强活血化瘀、消肿止痛之功，为方中佐药。白芷，辛温行散，善解表散寒，祛风止痛，燥湿消肿，佐助君药增强祛风除湿、消肿止痛之功，为方中佐药。石菖蒲，辛温行散、利气通窍之力强，辅助君药增强消肿止痛之功，是为使药。五药合用，以活血祛瘀为主，配伍通络散寒、清热凉血、消肿止痛之品，相互调和，使血动则经络疏通，血生则肌肉不死，用于糖尿病足初期，坚肿色淡，麻木疼痛，皮肤发凉，感觉迟钝或丧失等症。

在一个实施方案中，本发明的治疗早期糖尿病足的药物组合物，由下述重量配比的药材制成：昆明山海棠15～60份，赤芍6～24份，独活9～36份，白芷3～12份，石菖蒲4～18份。其中优选的比例为：昆明山海棠30份，赤芍12份，独活18份，白芷6份，石菖蒲9份。

在一个实施方案中，本发明的治疗早期糖尿病足的药物组合物的制备方法是按照以下步骤进行：

(1)昆明山海棠用50％乙醇加热回流提取，提取液减压浓缩，真空干燥，得昆明山海棠提取物，备用；

(2)赤芍用水煎煮，提取液减压浓缩，醇沉，静置过夜，倾出上清液，减压浓缩，真空干燥，得赤芍提取物，备用；

(3)独活、白芷、石菖蒲三味药，用70％乙醇渗漉提取，渗漉液减压浓缩，静置过夜。分出上层油层，即得三味药提取物，备用。

以上3个步骤制备的提取物接着可以按常规方法配制成药物组合物。

本发明的药物组合物可以不加药用辅料，直接将以上3个步骤制备的提取物混合均匀，直接用于糖尿病足的治疗或预防。本发明的药物组合物还可以加入药学可接受的辅料，例如加入赋形剂、稀释剂、填充剂等。

在一个实施方案中，本发明的药物组合物可以由以上3个步骤制备的提取物进一步配制成凝胶剂。在一个实施方案中，所述凝胶剂(以1000g计)，它含有(1)～(3)的提取物85～500g，基质1.0～300g，保湿剂50～400g，稳定剂0～100g(优选1.0～100g)，防腐剂0～50g(优选1.0～50g)，水加至1000g，pH调节剂调节pH值至3.5～8，优选4.0～6.5。

在一个实施方案中，本发明的凝胶剂可以采用以下方法制备：a)取处方量的基质，加适量水溶胀，配制凝胶基质。取稳定剂和/或防腐剂加水溶解。取昆明山海棠提取物、赤芍提取物置稳定剂和/或防腐剂水溶液中搅匀，加入凝胶基质中，搅拌均匀备用；b)取稳定剂和/或防腐剂溶解于保湿剂中，搅拌下加入独活、白芷、石菖蒲提取物，搅匀。在搅拌下缓慢加入步骤a)所得物料中，调节pH值至3.5～7.5，补水至总量，搅匀，即得。

本发明所涉及的中药凝胶剂凝胶基质，是凝胶剂形成的关键辅料，起到维持制剂性状及适宜粘度的作用。选自卡波姆、羧甲基纤维素钠及其纤维素类衍生物、壳聚糖、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇、聚氧乙烯、海藻酸钠或黄原胶中的一种或几种；其中纤维素类衍生物浓度为0.1～15％，壳聚糖浓度为0.2～10％，聚乙烯醇浓度为0.2～15％、聚氧乙烯浓度为0.5～10％，海藻酸钠浓度为0.2～7％，黄原胶浓度为0.2～8％，卡波姆浓度为0.1～10.0％。优选卡波姆、纤维素类衍生物、壳聚糖。

本发明所涉及的凝胶剂中提取物占凝胶剂的8.5％至50％(w/w)，优选8.5％至30％。

本发明所涉及的中药凝胶剂保湿剂，利于皮肤保湿、养护，保持皮肤含水量，对维持剂型稳定性也很重要。选自甘油、丙二醇、山梨醇及其他一些药学可接受的有保湿效果的溶剂中的一中或几种的组合。优选甘油、丙二醇，实例采用甘油。其用量为中药凝胶剂的5％至40％(w/w)，优选8％至20％(w/w)。

本发明所涉及的中药凝胶药物组合物pH值，需要满足制剂的稳定性要求、符合皮肤对酸碱的耐受条件。可以选用三乙醇胺、氢氧化钠、乙二胺、月桂胺、碳酸氢钠等。其中，三乙醇胺和氢氧化钠较为常用。中药凝胶剂中pH值为3.5-8是可以接受的，优选pH值4.0至6.5，实例采用三乙醇胺进行pH值的调节。pH值偏低例如低于3时，制剂黏度过低、不稳定；pH值过高，例如高于8时，其中的指标成分不稳定。选择一个合适的范围，能提高制剂的稳定性和患者的顺应性。

本发明所涉及的中药凝胶剂中的稳定剂，可使制剂的稳定性增加。可用于凝胶剂中的稳定剂包括亚硫酸盐类、抗坏血酸、维生素E、丁羟基茴香醚、丁羟基甲苯、枸橼酸、酒石酸、EDTA等中的一种或几种。优选亚硫酸盐类、EDTA。其用量为中药凝胶剂的0.1％至10％(w/w)。

本发明的治疗早期糖尿病足的药物组合物组方合理，具有活血通经、解毒散结、消肿止痛的功效。本发明的药物组合物提取工艺合理，可以提取出各药味抗炎镇痛的有效成分类型，例如昆明山海棠中的总生物碱、赤芍中的芍药苷类、独活和白芷中的香豆素和挥发油及石菖蒲中的挥发油。采用本发明的凝胶制剂工艺合理，具有良好的制剂稳定性。与生药粉入药的传统剂型相比，不仅提高了载药量、具有更好的涂布性、易清洗性及用药舒适性；具有明显改善的体外释药性和透皮吸收性能；另外与传统剂型比起效迅速，其镇痛有效性与抗炎镇痛经典化药相近，但其安全性明显更高。

另外，本发明的药物组合物对改善糖尿病足具有确定的药效作用，对小鼠、大鼠等动物模型，具有抗炎、镇痛、活血及对非缺血型、缺血型、神经变性型、感染型糖尿病足大鼠全身及局部作用。

具体实施方式

通过下面的实施例可以对本发明进行进一步的描述。然而，本发明的范围并不限于下述实施例。本领域的专业人员能够理解，在不背离本发明的精神和范围的前提下，可以对本发明进行各种变化和修饰。本发明对试验中所使用到的材料以及试验方法进行一般性和/或具体的描述。虽然为实现本发明目的所使用的许多材料和操作方法是本领域公知的，但是本发明仍然在此作尽可能详细描述。

A、提取物制备例部分

制备例1：制备用于本发明组合物的药材提取物

药材配比：昆明山海棠300g、赤芍120g、独活180g、白芷60g、石菖蒲90g。

制备方法：

步骤1：昆明山海棠以7倍量50％乙醇加热回流提取3次，每次1小时，提取液浓缩、干燥，即得昆明山海棠提取物19g。

步骤2：赤芍以10倍量水煎煮2次，每次2小时，合并的水提取液浓缩后加乙醇至54％使沉淀，上清液浓缩、干燥，即得赤芍提取物23克。

步骤3：独活、白芷、石菖蒲三味药用70％乙醇渗漉提取，渗漉液减压浓缩，静置分层，分取上层油层，即得三药材提取物14克。

三种提取物在用于配制组合物或者用于试验时，它们的取用量优选以上述配方和制法所得提取物比率的大致量称取。例如在一个例子中，用于配制1000g凝胶剂时，三种提取物的取用量可以分别是63g、76.4g、46.6g，提取物总计186g(药材提取物点凝胶剂总重量的18.6％)；又例如在另一个例子中，用于配制1000g凝胶剂时，三种提取物的取用量可以分别是126g、153g、93g，提取物总计372g(药材提取物点凝胶剂总重量的37.2％)。下面各提取物在使用时，或者用于配制本发明组合物时，它们的取用量和比率亦以此方式取样。

制备例2：制备用于本发明组合物的药材提取物

药材配比：昆明山海棠600g、赤芍60g、独活360g、白芷30g、石菖蒲180g。

参考制备例1的制备方法，不同之处是步骤1中使用85％乙醇提取1次1小时，步骤2中水煎煮2次每次0.5小时，步骤3中使用90％乙醇。得到三种提取物。

制备例3：制备用于本发明组合物的药材提取物

药材配比：昆明山海棠150g、赤芍240g、独活90g、白芷120g、石菖蒲40g。

参考制备例1的制备方法，不同之处是步骤1中使用30％乙醇提取1次1小时，步骤2中水煎煮3次每次3小时，步骤3中使用50％乙醇。得到三种提取物。

制备例4：制备用于本发明组合物的药材提取物

药材配比：昆明山海棠450g、赤芍200g、独活120g、白芷40g、石菖蒲150g。

参考制备例1的制备方法，得到三种提取物。

制备例5：制备用于本发明组合物的药材提取物

药材配比：昆明山海棠200g、赤芍80g、独活300g、白芷100g、石菖蒲60g。

参考制备例1的制备方法，得到三种提取物。

制备例6：制备用于本发明组合物的药材提取物

药材配比：昆明山海棠250g、赤芍150g、独活150g、白芷50g、石菖蒲120g。

参考制备例1的制备方法，得到三种提取物。

制备例7：制备用于本发明组合物的药材提取物

药材配比：昆明山海棠400g、赤芍100g、独活240g、白芷80g、石菖蒲80g。

参考制备例1的制备方法，得到三种提取物。

制备例8：制备用于本发明组合物的药材提取物

药材配比：昆明山海棠300g、赤芍150g、独活200g、白芷60g、石菖蒲100g。

5种药材分别以8倍量、6倍量、6倍量的70％乙醇加热回流提取3次，每次1小时，提取液浓缩、干燥，即得总提取物77g。

制备例9：制备用于本发明组合物的药材提取物

药材配比：昆明山海棠300g、赤芍150g、独活200g、白芷60g、石菖蒲100g。

5种药材分别以8倍量、6倍量、6倍量的50％乙醇加热回流提取3次，每次1小时，提取液浓缩、干燥，即得总提取物84g。

制备例10：制备用于本发明组合物的药材粉末

药材配比：昆明山海棠300g、赤芍150g、独活200g、白芷60g、石菖蒲100g。

5种药材分别粉碎成120目的细粉，混合，再继续粉碎成200目的细粉，即得，此药材粉末混合物可以理解为本发明提取物，尽管其未经提取处理。

制备例11：制备用于本发明组合物的药材提取物

药材配比：昆明山海棠300g、赤芍150g、独活200g、白芷60g、石菖蒲100g。

赤芍以9倍量水煎煮2次，每次1小时，合并的水提取液加乙醇至60％使沉淀，上清液浓缩、干燥，即得赤芍提取物28克。

其余4种药材分别以8倍量、7倍量、6倍量的70％乙醇加热回流提取3次，每次1小时，提取液浓缩、干燥，即得提取物63g。

二种提取物在用于配制组合物或者用于试验时，它们的取用量以上述配方下所得提取物比率称取。

对照制备例1：以紫荆皮代替昆明山海棠制备试验用药材提取物

参考制备例1，不同之处是用紫荆皮代替昆明山海棠。

B、组合物制备例部分

组合物例1：本发明凝胶剂的制备

取制备例1获得的三种提取物分别为6.3g、7.64g、4.66g。a)取卡波姆1.5g，加水溶胀；取亚硫酸氢钠0.15g加水溶解，将昆明山海棠和赤芍提取物加入亚硫酸氢钠水溶液中研匀，加入卡波姆基质中，搅拌均匀备用；b)取羟苯乙酯0.1g溶解，与独活、白芷、石菖蒲三味药提取物在搅拌下加入12g甘油中，搅匀，加入步骤a)所得物料中，三乙醇胺调节pH至5，加水至100克，配制成凝胶剂。

对照组合物例1：以紫荆皮代替昆明山海棠的药材提取物制备试验用凝胶剂

取对照制备例1获得的三种提取物，参考组合物例1的方法，制备作为试验用的对照组合物例1的凝胶剂，其药物浓度与“组合物例1”所得凝胶剂具有相等当量。该对照组合物是本发明人已在临床上使用5年以上的药剂。

组合物例2：本发明组合物的制备

取制备例2获得的三种提取物，混合均匀，即得。由此得到的组合物为粘稠的糊状物料，临用时可直接敷在病灶部位，也可加适量水调稀后敷在病灶部位。

组合物例3：本发明组合物的制备

取制备例3获得的三种提取物，混合均匀，加0.5％HPMC水溶液至1000g，混合均匀，即得。由此得到的组合物在临用时可直接涂敷在病灶部位。

组合物例4、本发明组合物的制备——凝胶剂

分别以不同的工艺制备的药材极细粉或提取物配制中药凝胶剂。

制备方法：

取处方量的卡波姆，加水溶胀；取亚硫酸氢钠加水溶解，取中药提取物或中药极细粉加入亚硫酸氢钠水溶液中研匀，加入卡波姆基质中，搅拌均匀备用；取羟苯乙酯溶解后在搅拌下加入甘油中；在搅拌下缓慢加入上述凝胶中，pH值调节剂三乙醇胺调节pH值，搅拌均匀即得本发明中药凝胶剂。

组合物例5、本发明组合物的制备——凝胶剂

分别以不同亲水凝胶材料配制中药凝胶剂。

制备方法：

取处方量的亲水性凝胶材料，加水溶胀；取亚硫酸氢钠加水溶解，取中药提取物加入亚硫酸氢钠水溶液中研匀，加入卡波姆基质中，搅拌均匀备用；取羟苯乙酯溶解后在搅拌下加入甘油中；在搅拌下缓慢加入上述凝胶中，pH值调节剂氢氧化钠调节pH值，搅拌均匀即得本发明中药凝胶剂。

组合物例6、本发明组合物的制备——凝胶剂

以卡波姆为亲水凝胶基质，以甘油、丙二醇、山梨醇为保湿剂，配制中药凝胶剂。

配方	处方4	处方5	处方6
				本发明提取物	40％(制备例5)	40％(制备例5)	40％(制备例5)

卡波姆	5％	5％	5％
				甘油	10％	----	----
丙二醇	----	10％	----
				山梨醇	----	----	10％
亚硫酸氢钠	0.2％	0.15％	0.25％
				羟苯乙酯	0.1％	0.1％	0.1％
pH值，调节至	5	5	5
				水，适量，加至	100％	100％	100％

制备方法：

取处方量的卡波姆，加水溶胀；取亚硫酸氢钠加水溶解，取中药提取物加入亚硫酸氢钠水溶液中研匀，加入卡波姆基质中，搅拌均匀备用；取羟苯乙酯溶解后在搅拌下加入保湿剂中；在搅拌下缓慢加入上述凝胶中，pH值调节剂三乙醇胺调节pH值，搅拌均匀即得本发明中药凝胶剂。

组合物例9、中药凝胶剂的制备

以卡波姆为亲水凝胶基质，甘油为保湿剂，亚硫酸氢钠、EDTA为稳定剂，制备中药凝胶剂。

配方	处方7	处方8
			本发明提取物	20％(制备例7)	20％(制备例7)
卡波姆	2％	2％
			甘油	10％	10％
亚硫酸氢钠	0.2％	----
			EDTA	----	0.5％
羟苯乙酯	0.1％	0.1％
			pH值，调节至	5	5
水，适量，加至	100％	100％

制备方法：

取处方量的卡波姆，加水溶胀；取稳定剂加水溶解，取本发明提取物加入亚硫酸氢钠或EDTA水溶液中研匀，加入卡波姆基质中，搅拌均匀备用；取羟苯乙酯溶解后在搅拌下加入甘油中；在搅拌下缓慢加入上述凝胶中，pH值调节剂氢氧化钠调节pH值，搅拌均匀即得本发明中药凝胶剂。

C、药效学试验例部分

在以下药效学试验例中，使用到的本发明组合物为试药时，如未另外说明，使用的是“组合物例1”制备的凝胶剂；使用到由紫荆皮、赤芍、独活、白芷、石菖蒲制备的中药制剂进行对照试验时，如未另外说明，使用的是“对照组合物例1”所得组合物，这些组合物的剂量折算成以中药材赤芍的量(g)计。

药效学实验例1：本发明药物对冰醋酸致小鼠扭体反应的影响

取昆明小鼠，按体重随机区组法分组，每组10只。分别为：模型对照组(系参考组合物例1方法制备但不含药材提取物的基质，亦可称为基质对照组，下同)、对照组合物例1组、组合物例1组。给药前一日剃除各组小鼠背毛(直径2cm)，每日涂药1次，连续7天。给药治疗期间各组小鼠每日均饲以普通饲料，自由进食、饮水。末次给药1h后，于小鼠腹腔内注射0.6％醋酸0.1ml/10g。观察并记录注射醋酸后15min内小鼠的扭体次数和第一次发生扭体反应的时间。扭体反应表现为腹部内凹、躯干与后肢伸张、臀部高起等。结果见表1。

表1本发明组合物对冰醋酸致小鼠扭体反应的影响

组别	剂量(g/kg)	扭体次数(次)	潜伏时间(min)
				模型对照组	#	32.6±14.0	3.69±0.92
对照组合物例1	##	30.8±11.8	4.27±1.96
				组合物例1	##	18.4±9.2＊	7.07±3.34＊＊

注：#表示与组合物例1所用剂量相当量的载药辅料配制成的基质；##表示所用剂量以赤芍计为2.5g/kg；与模型对照组相比P^＊＜0.05，P^＊＊＜0.01

结果表明本发明药物有镇痛作用，并有延迟疼痛发生的作用。

药效学实验例2：本发明药物对大鼠热辐射痛阈的影响

取雄性Wistar大鼠80只，适应性饲养后，用热辐射法测定大鼠基础痛阈值，选择在38W功率照射下，痛阈值在4～7s的Wistar大鼠，按基础痛阈值随机区组法分组，每组10只。分别为正常对照组、基质对照组(亦可称为模型对照组)、扶他林组、对照组合物例1组、组合物例1组。给药前用剃毛器、刀片将各组大鼠背毛剃净，每日涂药1次，连续7天。给药治疗期间各组大鼠每日均饲以普通饲料，自由进食、饮水。分组前，用热辐射法测基础痛阈值筛选大鼠，每只大鼠测定两次，取其平均值作为基础痛阈值；在38W功率照射下，大鼠正常痛阈值应在4～7秒，痛阈小于4秒或大于7秒者剔除。照射时间最长不超过16秒。末次给药0.5h、1h、2h、3h、4h后，将大鼠放在鼠尾光照测痛仪的测定台上，待动物安静后测定大鼠痛阈值，每只大鼠测定两次，取其平均值作为给药后痛阈值。通过比较给药后痛阈值与基础阈值的差异，评价本发明药物对痛阈的影响。结果见表2。

表2本发明药物对大鼠热辐射痛阈的影响

注：#表示与组合物例1所用剂量相当量的载药辅料配制成的基质；##表示所用剂量以赤芍计为2.5g/kg；与模型组相比P^＊＜0.05，P^＊＊＜0.01

结果表明本发明药物有明显的镇痛作用。

药效学实验例3：本发明药物对急性血瘀大鼠体表微循环的影响

取wistar大鼠，按体重随机区组法分组，每组10只。分别为正常组、模型对照组、云南白药酊对照组、对照组合物例1组、组合物例1组。给药前用剃毛器、刀片将各组大鼠背毛剃净，每日涂药1次，连续7天。给药治疗期间各组大鼠每日均饲以普通饲料，自由进食、饮水。第七天给药后1h，除正常组外各组大鼠按0.08ml/100g体重皮下注射盐酸肾上腺素(1mg/ml)，共2次，前后间隔4小时。在第1次注射肾上腺素2小时后将大鼠置0℃冰水中浸泡5分钟，然后禁食不禁水过夜。第8天早晨按1mL/100g体重腹腔注射3.5％水合氯醛麻醉大鼠。用激光多普勒仪测定大鼠背部给药部位的微循环灌注量(PU)。结果见表3。

表3本发明药物对急性血瘀大鼠体表微循环的影响

组别	剂量(g/kg)	背部微循环灌注量(PU)
			正常组	-	31.36±4.99＊＊
模型对照组	#	20.07±4.89
			云南白药组	2.7	23.49±4.56
对照组合物例1组	##	27.87±7.93＊
			组合物例1组	##	30.05±5.55＊＊

注：#表示与组合物例1所用剂量相当量的载药辅料配制成的基质；##表示所用剂量以赤芍计为2.5g/kg；与模型对照组相比P^＊＜0.05，P^＊＊＜0.01

结果表明本发明药物有一定的有改善体表微循环，增加体表微循环灌注量的作用。

药效学实验例4：本发明药物对急性血瘀大鼠足部微循环的影响

取wistar大鼠，按体重随机区组法分组，每组10只。分别为正常对照组、模型对照组、云南白药酊对照组、对照组合物例1组、组合物例1组。给药前用剃毛器、刀片将各组大鼠背毛剃净，每日涂药1次，连续7天。给药治疗期间各组大鼠每日均饲以普通饲料，自由进食、饮水。第七天给药后1h，除正常组外各组大鼠按0.08ml/100g体重皮下注射盐酸肾上腺素(1mg/ml)，共2次，前后间隔4小时。在第1次注射肾上腺素2小时后将大鼠置0℃冰水中浸泡5分钟，然后禁食不禁水过夜。第8天早晨按1mL/100g体重腹腔注射3.5％水合氯醛麻醉大鼠。用激光多普勒仪测定大鼠足底的微循环灌注量(PU)。

表4本发明药物对急性血瘀大鼠足部微循环的影响

注：#表示与组合物例1所用剂量相当量的载药辅料配制成的基质；##表示所用剂量以赤芍计为2.5g/kg；与模型组相比，P^＊＜0.05，P^＊＊＜0.01

结果表明本发明药物有一定的有改善足部微循环、增加足部微循环灌注量的作用。

药效学实验例5：大鼠镇痛作用药效试验

1、试验药物：空白组、基质对照组、扶他林组、对照组合物例1组、组合物例1组。

2、取Wistar大鼠，以热辐射基础痛阈值随机分组，每组10只。给药前用电剪快速剪去各组大鼠背毛，每日涂药1次连续8天。给药治疗期间各组大鼠每日均饲以普通饲料，自由进食、饮水。末次给药0.5h、1h、2h、3h、4h后，将大鼠放在鼠尾光照测痛仪的测定台上，待动物安静后测定大鼠痛阈值，每只大鼠测定两次，取其平均值作为给药后痛阈值。结果见表5。

表5本发明组合物对大鼠镇痛药效结果

注：#表示与组合物例1所用剂量相当量的载药辅料配制成的基质；##表示所用剂量以赤芍计为2.5g/kg；与模型组相比P^＊＜0.05，P^＊＊＜0.01

结果表明：对照组合物例1样品给药后4h才起效。本发明组合物例1样品与扶他林镇痛作用及起效时间相近，给药后的0.5h即产生了明显的镇痛作用，起效迅速，但毒副作用小，扶他林实验组中7只死亡，仅3只存活，本发明组合物例1样品组则全部存活，未出现明显毒副反应。

药效学实验例6：扩展的药效学试验

此外，分别用制备例2-8所得物料，照上文“组合物例1”所述方法制备本发明凝胶剂，得到7种凝胶剂分别为：凝胶剂-2、凝胶剂-3、凝胶剂-4、凝胶剂-5、凝胶剂-6、凝胶剂-7、凝胶剂-8。

另外，分别用参考制备例2-8但昆明山海棠替换为紫荆皮的配方所得物料，照上文“组合物例1”所述方法制备对照凝胶剂，得到7种凝胶剂分别为：对照凝胶剂-2、对照凝胶剂-3、对照凝胶剂-4、对照凝胶剂-5、对照凝胶剂-6、对照凝胶剂-7、对照凝胶剂-8。上文“组合物例1”所得凝胶剂可称为：凝胶剂-1，而与其对应的“对照组合物例1”可称为：对照凝胶剂-1。

以上述凝胶剂-2至凝胶剂-8以及对照凝胶剂-2至对照凝胶剂-8作为试药，分别照以上药效学实验例1的方法进行测试。结果在药效学实验例1中，凝胶剂-2至凝胶剂-8与模型对照组相比，在扭体次数和潜伏时间两个方面，均显示P＜0.01；而相应的对照凝胶剂在这两个参数方面与模型对照组相比未显示出差异或者仅有个别试药显示为P＜0.05。

以上述凝胶剂-2至凝胶剂-8以及对照凝胶剂-2至对照凝胶剂-8作为试药，分别照以上药效学实验例3的方法进行测试。结果在药效学实验例3中，凝胶剂-2至凝胶剂-8与模型对照组相比，在背部微循环灌注量(PU)方面，均显示P＜0.01；而相应的对照凝胶剂在这个参数方面与模型对照组相比多数仅显示出P＜0.05，个别试药甚至未显示出差异。

D、药学试验例部分

药学试验例1、芍药苷、蛇床子素含量测定方法

分别以芍药苷和蛇床子素为水溶性及脂溶性药物指标成分，使用高效液相色谱法对中药凝胶剂中的芍药苷、蛇床子素进行含量测定，色谱条件为，仪器：Agilent 1200；色谱柱：Phenomisl C18(150×4.6mm，5μm)柱；流速为1.0mL/min；柱温为35℃；检测波长为230nm和330nm；进样量为20μL；流动相：乙腈30％-水70％。混合对照品溶液：取芍药苷对照品、蛇床子素对照品适量，精密称定，加甲醇溶解并定量稀释制成每1mL中分别约含芍药苷250μg、蛇床子素125μg的混合溶液。在以上测试条件下使用外标法可以方便地测定本发明提取物、组合物等中芍药苷、蛇床子素的量，在需要时可以评价它们的内在质量。

药学试验例2、体外药物释放试验

取本发明组合物例1制备的凝胶剂，作为供试品，进行体外药物释放试验；另外，使用与该处方相同的提取物(即制备例1的提取物)作为活性组分，按常规方法配制成与上述供试品凝胶剂具有相同浓度的油膏剂，作为对照品，进行体外药物释放试验。

精密称取等生药量的以上供试品和对照品，置透析袋中(每只透析袋长6cm)，两头用线在一定距离处扎紧(除去袋内气泡)，置于溶出杯中。释放介质为乙醇-生理盐水(2/8)250mL，循环水温控在37±0.1℃，转桨速度为75r/min，分别于释放0.5、1、2、4、6、8、12、24h，取释放液2mL，及时补充等量新鲜的释放介质。取出的释放介质经0.45μm微孔滤膜过滤，取20μl进样分析测定释放介质中芍药苷和蛇床子素的含量。计算出各时间的芍药苷和蛇床子素的累积释放量，并绘制释放曲线。结果显示，在供试品中，蛇床子素在24小时内几乎呈0级释放，并且累积释放量达到2000ug；而在对照品中，蛇床子素在24小时内累积释放量约250ug。在供试品中，芍药苷在24小时内呈Higuchi释放，累积释放量达到14000ug；而在对照品中，蛇床子素在24小时内累积释放量约1000ug。与油膏剂相比，本发明凝胶剂中芍药苷和蛇床子素的释放速率和累积释放量均有显著提高。

药学试验例3、稳定性考察试验

对本发明“B、组合物制备例部分”制备的各种组合物通过加速试验(30±2℃，RH65±5％)0个月、1个月、2个月、3个月、6个月的稳定性考察，结果各样品的产品性状、有关物质、含量等无明显变化，6个月时芍药苷和蛇床子素的含量与0月含量相比均在95％～99％之间。

Claims (14)

1.一种药物组合物，其由作为活性组分的药材以及任选的药学可接受的辅料制成，所述药材包括昆明山海棠、赤芍、独活、白芷、石菖蒲。

2.根据权利要求1的药物组合物，其中所述药材的重量配比为：昆明山海棠15-60份、赤芍6-24份、独活9-36份、白芷3-12份、石菖蒲4-18份。

3.根据权利要求1的药物组合物，其中所述5种药材各自独立地是以粉碎细粉、单一药材提取物、和/或2种以上药材提取物加入到所述药物组合物中的。

4.根据权利要求1至3任一项的药物组合物，其特征在于以下(a)至(f)的任一项或多项：

(a)所述昆明山海棠是以其乙醇溶液提取物加入到该药物组合物中的；

(b)所述昆明山海棠提取物是如下方法制备的：昆明山海棠以30-85％乙醇加热回流提取，提取液浓缩、干燥，即得；

(c)所述赤芍是以其水提取物加入到该药物组合物中的；

(d)所述赤芍提取物是如下方法制备的：赤芍用水煎煮，水提取液醇沉，上清液浓缩、干燥，即得；

(e)所述独活、白芷、石菖蒲是三者一起以乙醇溶液提取所得提取物加入到该药物组合物中的；

(f)所述独活、白芷、石菖蒲三者的提取物是如下方法制备的：独活、白芷、石菖蒲三味药用40-95％乙醇渗漉提取，渗漉液减压浓缩，静置分层，分取上层油层，即得。

5.根据权利要求1至4任一项的药物组合物，其为外用制剂、凝胶剂、软膏剂、乳膏剂、巴布剂、搽剂、或供外用的溶液剂。

6.一种凝胶剂，其由作为活性组分的药材以及药学可接受的辅料制成，所述药材包括昆明山海棠、赤芍、独活、白芷、石菖蒲。

7.根据权利要求6的凝胶剂，其中所述辅料包括：基质、保湿剂、任选的pH调节剂、任选的稳定剂、任选的防腐剂、水。

8.根据权利要求6至7任一项的凝胶剂，其中所述药材的重量配比为：昆明山海棠15-60份、赤芍6-24份、独活9-36份、白芷3-12份、石菖蒲4-18份。

9.根据权利要求6至8任一项的凝胶剂，其中所述5种药材各自独立地是以粉碎细粉、单一药材提取物、和/或2种以上药材提取物加入到所述凝胶剂中的。

10.根据权利要求6至9任一项的药物组合物，其特征在于以下(a)至(f)的任一项或多项：

(a)所述昆明山海棠是以其乙醇溶液提取物加入到所述凝胶剂中的；

(b)所述昆明山海棠提取物是如下方法制备的：昆明山海棠以30-85％乙醇加热回流提取(例如1-3次，例如每次0.5-3小时)，提取液浓缩、干燥，即得；

(c)所述赤芍是以其水提取物加入到所述凝胶剂中的；

(d)所述赤芍提取物是如下方法制备的：赤芍用水煎煮(例如1-3次，例如每次0.5-3小时)，水提取液醇沉，上清液浓缩、干燥，即得；

(e)所述独活、白芷、石菖蒲是三者一起以乙醇溶液提取所得提取物加入到所述凝胶剂中的；

(f)所述独活、白芷、石菖蒲三者的提取物是如下方法制备的：独活、白芷、石菖蒲三味药用40-95％乙醇(例如50-90％乙醇，例如60-80％乙醇，例如约70％乙醇)渗漉提取，渗漉液减压浓缩，静置分层，分取上层油层，即得。

11.根据权利要求6至10任一项的药物组合物，其每100重量份中包含：

  药材和/或其提取物   8.5～50重量份   基质   0.1～30重量份   保湿剂   5～40重量份   pH调节剂   适量，调pH至3.5～8(优选4.0～6.5)   稳定剂   0～10重量份(优选0.1-10重量份)   防腐剂   0～5重量份(优选0.1-5重量份)   水   适量，加至100重量份

12.作为活性组分的药材的组合在制备用于治疗或预防糖尿病足的医药制品中的用途，其中所述药材包括昆明山海棠、赤芍、独活、白芷、石菖蒲。

13.根据权利要求12的用途，其中所述药材的重量配比为：昆明山海棠15-60份、赤芍6-24份、独活9-36份、白芷3-12份、石菖蒲4-18份。

14.根据权利要求12至13任一项的用途，其中所述5种药材各自独立地是以粉碎细粉、单一药材提取物、和/或2种以上药材提取物加入到所述医药制品中的；优选地，各药材是如说明书中所述处理方法处理后加入到所述医药制品中的。