CN108004167B - 一株产胞外多糖的嗜热链球菌jmcc0019、其分离纯化方法及应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一株产胞外多糖的嗜热链球菌JMCC0019、其分享纯化方法及应用，该嗜热链球菌是从西藏传统发酵乳中分离筛选出来的具有很好发酵特性、肠细胞粘附性和产胞外多糖的菌株；该菌株已保存于中国科学院微生物研究所菌种保藏中心，保藏号为CGMCC NO.14426；本发明筛选出的嗜热链球菌与已有嗜热链球菌相比，对低pH值和高胆汁酸盐环境具有更好的耐受性，在人体消化道的极端环境的生存性更强，可以更好地发挥其益生作用；该菌株具有良好的发酵特性，可用于功能性乳制品的开发。
Description
技术领域
本发明属于生物工程领域，涉及一种菌株、其筛选方法及应用，具体地说，是一株产胞外多糖的嗜热链球菌JMCC0019、其分离纯化方法及应用。
背景技术
嗜热链球菌是制作酸奶的常用基础菌株之一，被认为是“公认安全性（GRAS）”成分，广泛用于发酵乳制品的制备，包括酸奶和奶酪。
研究表明，嗜热链球菌在发酵过程中，除进行产酸代谢外还可以产生丁二酮等酸奶特有的物质，增强酸奶的风味和口感。此外，嗜热链球菌也能够产生一些功能活性物质，如胞外多糖、细菌素和维生素。嗜热链球菌也具有潜在的益生特性，具有胃酸和胆盐耐受性、胃肠道粘附性、肠道致病菌抑制性等。因此，筛选具有明显功能的嗜热链球菌具有非常重要的现实意义。
中国发明专利CN102465108A“一种嗜热链球菌及其应用”，公开了一种嗜热链球菌MN-ZLW-002及其应用，该嗜热链球菌在调节肠道菌群平衡、降低胆固醇和抑制病原菌等方面具有较好效果，适用于制备乳制品及其他益生产品。中国发明专利CN102965318A“一种产胞外多糖的嗜热链球菌及其应用”，公开了一种产胞外多糖的嗜热链球菌TIMR0705-6，在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCC No.6646，该菌株最高可通过发酵产胞外多糖148mg/L。
发明内容
本发明要解决的技术问题，是提供一株产胞外多糖的嗜热链球菌JMCC0019（Streptococcus thermophiles）它是从西藏传统发酵乳中分离筛选出来的。
本发明的一株产胞外多糖的嗜热链球菌（Streptococcus thermophiles）JMCC0019，已于2017年07月14日，保存于中国科学院微生物研究所菌种保藏中心，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏号为CGMCC NO. 14426；
本发明的另外一个发明目的，是提供上述的一株产胞外多糖的嗜热链球菌JMCC0019的一种分离纯化方法；
本发明还有一个发明目的，是提供上述一株产胞外多糖的嗜热链球菌JMCC0019的一种应用。与已有嗜热链球菌相比，产胞外多糖的嗜热链球菌JMCC0019对低pH值和高胆汁酸盐环境具有更好的耐受性，在人体消化道的极端环境的生存性更强，可以更好地发挥其益生作用。
为达到上述目的，本发明的技术方案是：
一株产胞外多糖的嗜热链球菌JMCC0019，是从西藏传统发酵乳中分离筛选出来的；该菌菌株已于2017年07月14日，保存于中国科学院微生物研究所菌种保藏中心，保藏号为CGMCC NO. 14426。
作为本发明的一种限定，所述一株产胞外多糖的嗜热链球菌JMCC0019的16Sr DNA序列如下：
GTGGCTCAAAGGTTCCTCACCGACTTCGGGTGTTAAAACTCTCGTGGTGTGACGGGCGGTGTGTACAAGGCCCGGGAACGTATTCACCGCGGCGTGCTGATCCGCGATTACTAGCGATTCCGACTTCATGTAGGCGAGTTGCAGCCTACAATCCGAACTGAGATTGGCTTTAAGAGATTAGCTCGCCGTCACCGACTCGCAACTCGTTGTACCAACCATTGTAGCACGTGTGTAGCCCAGGTCATAAGGGGCATGATGATTTGACGTCATCCCCACCTTCCTCCGGTTTATTACCGGCAGTCTCGCTAGAGTGCCCAACTGAATGATGGCAACTAACAATAGGGGTTGCGCTCGTTGCGGGACTTAACCCAACATCTCACGACACGAGCTGACGACAACCATGCACCACCTGTCACCGATGTACCGAAGTAACTTTCTATCTCTAGAAATAGCATCGGGATGTCAAGACCTGGTAAGGTTCTTCGCGTTGCTTCGAATTAAACCACATGCTCCACCGCTTGTGCGGGCCCCCGTCAATTCCTTTGAGTTTCAACCTTGCGGTCGTACTCCCCAGGCGGAGTGCTTAATGCGTTAGCTGCGGCACTGAATCCCGGAAAGGATCCAACACCTAGCACTCATCGTTTACGGCGTGGACTACCAGGGTATCTAATCCTGTTCGCTCCCCACGCTTTCGAGCCTCAGCGTCAGTTACAGACCAGAGAGCCGCTTTCGCCACCGGTGTTCCTCCATATATCTACGCATTTCACCGCTACACATGGAATTCCACTCTCCCCTTCTGCACTCAAGTTTGACAGTTTCCAAAGCGAACTATGGTTGAGCCACAGCCTTTAACTTCAGACTTATCAAACCGCCTGCGCTCGCTTTACGCCCAATAAATCCGGACAACGCTCGGGACCTACGTATTACCGCGGCTGCTGGCACGTAGTTAGCCGTCCCTTTCTGGTAAGCTACCGTCACAGTGTGAACTTTCCACTCTCACACCCGTTCTTGACTTACAACAGAGCTTTACGATCCGAAAACCTTCTTCACTCACGCGGCGTTGCTCGGTCAGGGTTGCCCCCATTGCCGAAGATTCCCTACTGCTGCCTCCCGTAGGAGTCTGGGCCGTGTCTCAGTCCCAGTGTGGCCGATCACCCTCTCAGGTCGGCTATGTATCGTCGCCTAGGTGAGCCATTACCTCACCTACTAGCTAATACAACGCAGGTCCATCTTGTAGTGGAGCAATTGCCCCTTTCAAATAAATGACATGTGTCATCCATTGTTATGCGGTATTAGCTATCGTTTCCAATAGTTATCCCCCGCTACAAGGCAGGTTACCTACGCGTTACTCACCCGTTCGCAACTCATCCAAGAAGAGCAAGCTCCTCTCTTCAGCGTCTACTGCAG
作为本发明的另一种限定，所述一株产胞外多糖的嗜热链球菌JMCC0019的Phes基因序列如下：
TCGCAACTCTACAAGTCCTGTCCAAGCTCGTACACTTGATAAACATGATTTTTCTAAAGGTCCTCTTAAGATGATCTCACCAGGACGTGTTTTCCGTCGTGATACCGATGATGCGACTCACAGCCACCAGTTTCACCAAATCGAAGGTTTGGTCGTTGGTAAAAACATCTCAATGGGTGATCTGAAGGGAACGCTTGAGATGATTATTCAAAAAATGTTTGGTGCAGAACGTCGAATCCGTTTGCGTCCTTCTTACTTCCCATTCACTGAACCTTCCGTTGAGGTTGACGTGTCATGCTTCAAGTGTGGTGGTAAAGGATGTAACGTATGCAAGAATACAGGTTGGATTGAGATCCTTGGTGCTGGTATGGTTCACCCACAAGTGCTTGAGATGTCAGGTGTTGATTCTGAAGAATATTCAGGTTTTGTTTTGGGTTTAGGAAG
本发明也提供了上述一株产胞外多糖的嗜热链球菌JMCC0019的分离纯化方法，它按照以下步骤顺序进行：
①样品采集
取25mL西藏传统的发酵乳制品，加入225mL生理盐水中，充分混匀，得到样品；
②样品富集
取样品2mL①中样品，加入100mL的MRS液体培养基中，37℃培养72h，得到培养液；
③菌株分离
取培养液1mL，用0.9%（重量与体积的百分比）无菌的生理盐水稀释100000倍，分别为梯度稀释10-1、10-2、10-3、10-4、10-5倍，得到菌悬液；
取MRS固体培养基，融化后，倒入培养皿，待其冷却、完全凝固后，吸取0.1mL菌悬液涂布到培养基上；
置37℃环境下厌氧培养72h，观察菌落生长情况；
待平板出现典型菌落后，根据标准嗜热链球菌的菌落特征以及参考相关文献图片，挑选出相应的菌落，进行下一步的菌株纯化；
④菌株纯化
挑取选中的单菌落，将菌落培养物划线接种到MRS固体培养基上，37℃有氧环境培养72h；然后，再将培养皿上长出的单菌落，继续划线接种到MRS固体培养基上，37℃有氧环境培养72h；连续培养三次；
⑤将纯培养物置于无菌的20%甘油中在-70℃保存，同时接种MRS固体培养基试管斜面用于临时保存。
作为上述分离纯化方法的一种限定，所述MRS液体培养基具有以下组成：酪蛋白胨10g；牛肉膏 10g；酵母膏 5g；葡萄糖 20g；乙酸钠 5g；柠檬酸二胺 2g；吐温-80 1g；K2HPO42g；MgSO4·7H2O 0.2g；MnSO4·7H2O 0.05g；蒸馏水 1000mL；MRS固体培养基为1000mLMRS液体培养基添加15g琼脂。
本发明的一株产胞外多糖的嗜热链球菌JMCC0019细菌学特性如下：
（1）糖发酵特性实验
将上述所分离纯化出的菌株37℃培养48h，分别挑取一接种环菌株接入糖发酵管中进行37℃培养48h，观察颜色变化。
（2）分子生物学鉴定
将上述菌株进行分子生物学鉴定，通过DNA提取、PCR扩增，16SrDNA测序，NCBI网站blast最终确定为嗜热链球菌。
（3）肠细胞粘附特性实验
将肠上皮细胞Caco-2提前铺于细胞培养板中，用DMEM调整嗜热链球菌JMCC0019的菌浓度到1.0×108CFU/mL，铺于细胞上层，于5%CO2、95%空气培养箱中37℃下孵育2.5h。用无菌PBS洗涤除去未结合的乳酸菌，加入1mL1%（v/v）Triton X-100，充分捶打混匀，使粘附的菌体同细胞分离，梯度稀释后置于MRS固体培养基上培养并计数。
（4）胞外多糖检测实验
取嗜热链球菌JMCC0019的MRS培养液10mL，4℃、8000rpm离心10min；回收上清液，加入1/5体积10%三氯乙酸，4℃静置30min后取上清液加入3倍体积95%冷乙醇，4℃静置过夜后10000rpm离心10min；收集沉淀多糖物质，用蒸馏水溶解后，放入透析袋中4℃透析过夜。将透析后的多糖溶液用蒸馏水定容至10mL，取2mL样品于25mL比色管中，加入6%苯酚2mL后迅速加入10mL浓硫酸，静置冷却后于490nm处测定吸光度值，并在标准曲线上查的样品中的多糖含量。
（5）菌株发酵特性实验
取鲜牛奶75-100份，白砂糖2-20份，低聚果糖1-20份，调配均匀后，于60-65℃、15MPa下均质，95℃杀菌300s后，降温至35-40℃，接种JMCC0019 106CFU/mL，于37℃发酵24h，检测其pH为4.0-4.5之间时停止发酵，摇匀后得JMCC0019发酵乳。
作为本发明另外的一种限定，所述步骤③中的糖发酵管中包括48种碳水化合物，具体见实施例2。
本发明还提供了上述一株产胞外多糖的嗜热链球菌JMCC0019的一种应用，该一株产胞外多糖的嗜热链球菌JMCC0019应用于制备发酵乳制品。
由于采用了上述的技术方案，本发明与现有技术相比所取得的技术进步在于：
本发明的菌株具有很好的黏附肠道的作用，因此具有很好的整肠作用；本发明采用的菌株具有良好的产胞外多糖的能力和发酵特性，可将其用于发酵乳制品的开发。
本发明下面将结合具体实施例作进一步详细说明。
具体实施方式
以下实施例只用于说明本发明，而并不限定本发明。
实施例１ 一株产胞外多糖的嗜热链球菌JMCC0019及其分离纯化方法
一、菌种
一株产胞外多糖的嗜热链球菌JMCC0019，是从西藏传统发酵乳中分离筛选出来的，该菌株已于2017年07月14日，保存于中国科学院微生物研究所菌种保藏中心，保藏号为CGMCC NO. 14426。
二、上述一株产胞外多糖的嗜热链球菌JMCC0019的分离纯化方法
该分享纯化方法按照以下步骤顺序进行：
步骤1 样品采集
取25mL西藏拉萨市夺底乡牧民家中自制的传统发酵乳制品，加入到225mL生理盐水中，充分混匀，得到样品。
步骤2 样品的富集
取样品2mL，加入到100mL的MRS液体培养基中，37℃培养72h，得到培养液。
步骤3 菌株分离
取培养液1mL，用0.9%（重量与体积的百分比）无菌的生理盐水稀释100000倍，分别为梯度稀释10-1、10-2、10-3、10-4、10-5倍，得到菌悬液；
取0.1mL菌悬液涂布到MRS固体培养基上，置37℃环境下厌氧培养72h，观察菌落生长情况；
待平板出现典型菌落后，根据标准嗜热链球菌的菌落特征以及参考相关文献图片，挑选出相应的菌落，进行下一步的菌株纯化。
步骤4 菌株的纯化
挑取选中的单菌落，将菌落培养物划线接种到MRS固体培养基上，37℃有氧环境培养72h；然后，再将培养皿上长出的单菌落，继续划线接种到MRS固体培养基上，37℃有氧环境培养72h；连续培养三次；
步骤5 将纯培养物置于无菌的20%甘油中在-70℃保存，同时接种MRS固体培养基试管斜面用于临时保存。
实施例２ 实施例１中的一株产胞外多糖的嗜热链球菌JMCC0019的菌种细菌学特征
一．基本特征
实施例1所提供的一株产胞外多糖的嗜热链球菌JMCC0019基本特征如表1所示：
表1. 嗜热链球菌JMCC0019基本特征
二．糖发酵特性实验
将上述分离纯化菌株挑取单菌落进行平板划线，37℃培养24h，传代一次，取菌悬液接种至糖发酵管中，37℃培养48h，观察颜色变化。具体结果见表2。
表2. 产胞外多糖的嗜热链球菌JMCC0019的鉴定结果
注：“+”表示发酵利用；“-”表示不发酵利用。
三．分子生物学鉴定
将上述菌株进行分子生物学鉴定，通过DNA提取、PCR扩增，16SrDNA测序，NCBI网站blast最终确定为嗜热链球菌。
嗜热链球菌JMCC0019的16SrDNA测序结果如下：
GTGGCTCAAAGGTTCCTCACCGACTTCGGGTGTTAAAACTCTCGTGGTGTGACGGGCGGTGTGTACAAGGCCCGGGAACGTATTCACCGCGGCGTGCTGATCCGCGATTACTAGCGATTCCGACTTCATGTAGGCGAGTTGCAGCCTACAATCCGAACTGAGATTGGCTTTAAGAGATTAGCTCGCCGTCACCGACTCGCAACTCGTTGTACCAACCATTGTAGCACGTGTGTAGCCCAGGTCATAAGGGGCATGATGATTTGACGTCATCCCCACCTTCCTCCGGTTTATTACCGGCAGTCTCGCTAGAGTGCCCAACTGAATGATGGCAACTAACAATAGGGGTTGCGCTCGTTGCGGGACTTAACCCAACATCTCACGACACGAGCTGACGACAACCATGCACCACCTGTCACCGATGTACCGAAGTAACTTTCTATCTCTAGAAATAGCATCGGGATGTCAAGACCTGGTAAGGTTCTTCGCGTTGCTTCGAATTAAACCACATGCTCCACCGCTTGTGCGGGCCCCCGTCAATTCCTTTGAGTTTCAACCTTGCGGTCGTACTCCCCAGGCGGAGTGCTTAATGCGTTAGCTGCGGCACTGAATCCCGGAAAGGATCCAACACCTAGCACTCATCGTTTACGGCGTGGACTACCAGGGTATCTAATCCTGTTCGCTCCCCACGCTTTCGAGCCTCAGCGTCAGTTACAGACCAGAGAGCCGCTTTCGCCACCGGTGTTCCTCCATATATCTACGCATTTCACCGCTACACATGGAATTCCACTCTCCCCTTCTGCACTCAAGTTTGACAGTTTCCAAAGCGAACTATGGTTGAGCCACAGCCTTTAACTTCAGACTTATCAAACCGCCTGCGCTCGCTTTACGCCCAATAAATCCGGACAACGCTCGGGACCTACGTATTACCGCGGCTGCTGGCACGTAGTTAGCCGTCCCTTTCTGGTAAGCTACCGTCACAGTGTGAACTTTCCACTCTCACACCCGTTCTTGACTTACAACAGAGCTTTACGATCCGAAAACCTTCTTCACTCACGCGGCGTTGCTCGGTCAGGGTTGCCCCCATTGCCGAAGATTCCCTACTGCTGCCTCCCGTAGGAGTCTGGGCCGTGTCTCAGTCCCAGTGTGGCCGATCACCCTCTCAGGTCGGCTATGTATCGTCGCCTAGGTGAGCCATTACCTCACCTACTAGCTAATACAACGCAGGTCCATCTTGTAGTGGAGCAATTGCCCCTTTCAAATAAATGACATGTGTCATCCATTGTTATGCGGTATTAGCTATCGTTTCCAATAGTTATCCCCCGCTACAAGGCAGGTTACCTACGCGTTACTCACCCGTTCGCAACTCATCCAAGAAGAGCAAGCTCCTCTCTTCAGCGTCTACTGCAG
嗜热链球菌JMCC0019的Phes基因测序结果如下：
TCGCAACTCTACAAGTCCTGTCCAAGCTCGTACACTTGATAAACATGATTTTTCTAAAGGTCCTCTTAAGATGATCTCACCAGGACGTGTTTTCCGTCGTGATACCGATGATGCGACTCACAGCCACCAGTTTCACCAAATCGAAGGTTTGGTCGTTGGTAAAAACATCTCAATGGGTGATCTGAAGGGAACGCTTGAGATGATTATTCAAAAAATGTTTGGTGCAGAACGTCGAATCCGTTTGCGTCCTTCTTACTTCCCATTCACTGAACCTTCCGTTGAGGTTGACGTGTCATGCTTCAAGTGTGGTGGTAAAGGATGTAACGTATGCAAGAATACAGGTTGGATTGAGATCCTTGGTGCTGGTATGGTTCACCCACAAGTGCTTGAGATGTCAGGTGTTGATTCTGAAGAATATTCAGGTTTTGTTTTGGGTTTAGGAAG
四．肠细胞粘附特性实验
将肠上皮细胞Caco-2提前铺于细胞培养板中，用DMEM调整嗜热链球菌JMCC0019的菌浓度到1.0×108CFU/mL，铺于细胞上层，于5%CO2、95%空气培养箱中37℃下孵育2.5h。用无菌PBS洗涤除去未结合的乳酸菌，加入1mL1%（v/v）Triton×100，充分捶打混匀，使粘附的菌体同细胞分离，梯度稀释后置于MRS固体培养基上培养并计数，取3次实验的平均值表示细胞的粘附能力。嗜热链球菌JMCC0019对肠上皮细胞黏附实验结果如表3所示：
表3. 嗜热链球菌JMCC0019菌株对肠上皮细胞黏附实验
由上表可知，嗜热链球菌JMCC0019活性菌株对Caco-2细胞的黏附率为23.2±1.7个/细胞。
五．胞外多糖检测实验
将嗜热链球菌的MRS培养液用于胞外多糖提取，并于490nm处测定吸光度值。
表4.菌株JMCC0019胞外多糖的表达量
由表4可知，嗜热链球菌JMCC0019产胞外多糖的能力优良。
六．菌株发酵特性
取鲜牛奶75-100份，白砂糖2-20份，低聚果糖1-20份，调配均匀后，于60-65℃、15MPa下均质，95℃杀菌300s后，降温至35-40℃，接种JMCC0019 106CFU/mL，于37℃发酵24h，检测其pH为4.0-4.5之间是停止发酵，摇匀后对发酵样品进行感官品评，根据感官品评结果如表5所示：
表5.发酵特性
结论为：用嗜热链球菌JMCC0019发酵出的酸奶的风味优良。说明产胞外多糖的嗜热链球菌JMCC0019可应用于制备发酵乳制品。
序列表
<110> 石家庄君乐宝乳业有限公司
<120> 一株产胞外多糖的嗜热链球菌JMCC0019、其分离纯化方法及应用
<130> 2017.12.10
<160> 2
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 1407
<212> DNA
<213> Streptococcus thermophilus
<400> 1
gtggctcaaa ggttcctcac cgacttcggg tgttaaaact ctcgtggtgt gacgggcggt 60
gtgtacaagg cccgggaacg tattcaccgc ggcgtgctga tccgcgatta ctagcgattc 120
cgacttcatg taggcgagtt gcagcctaca atccgaactg agattggctt taagagatta 180
gctcgccgtc accgactcgc aactcgttgt accaaccatt gtagcacgtg tgtagcccag 240
gtcataaggg gcatgatgat ttgacgtcat ccccaccttc ctccggttta ttaccggcag 300
tctcgctaga gtgcccaact gaatgatggc aactaacaat aggggttgcg ctcgttgcgg 360
gacttaaccc aacatctcac gacacgagct gacgacaacc atgcaccacc tgtcaccgat 420
gtaccgaagt aactttctat ctctagaaat agcatcggga tgtcaagacc tggtaaggtt 480
cttcgcgttg cttcgaatta aaccacatgc tccaccgctt gtgcgggccc ccgtcaattc 540
ctttgagttt caaccttgcg gtcgtactcc ccaggcggag tgcttaatgc gttagctgcg 600
gcactgaatc ccggaaagga tccaacacct agcactcatc gtttacggcg tggactacca 660
gggtatctaa tcctgttcgc tccccacgct ttcgagcctc agcgtcagtt acagaccaga 720
gagccgcttt cgccaccggt gttcctccat atatctacgc atttcaccgc tacacatgga 780
attccactct ccccttctgc actcaagttt gacagtttcc aaagcgaact atggttgagc 840
cacagccttt aacttcagac ttatcaaacc gcctgcgctc gctttacgcc caataaatcc 900
ggacaacgct cgggacctac gtattaccgc ggctgctggc acgtagttag ccgtcccttt 960
ctggtaagct accgtcacag tgtgaacttt ccactctcac acccgttctt gacttacaac 1020
agagctttac gatccgaaaa ccttcttcac tcacgcggcg ttgctcggtc agggttgccc 1080
ccattgccga agattcccta ctgctgcctc ccgtaggagt ctgggccgtg tctcagtccc 1140
agtgtggccg atcaccctct caggtcggct atgtatcgtc gcctaggtga gccattacct 1200
cacctactag ctaatacaac gcaggtccat cttgtagtgg agcaattgcc cctttcaaat 1260
aaatgacatg tgtcatccat tgttatgcgg tattagctat cgtttccaat agttatcccc 1320
cgctacaagg caggttacct acgcgttact cacccgttcg caactcatcc aagaagagca 1380
agctcctctc ttcagcgtct actgcag 1407
<210> 2
<211> 444
<212> DNA
<213> Streptococcus thermophilus
<400> 2
tcgcaactct acaagtcctg tccaagctcg tacacttgat aaacatgatt tttctaaagg 60
tcctcttaag atgatctcac caggacgtgt tttccgtcgt gataccgatg atgcgactca 120
cagccaccag tttcaccaaa tcgaaggttt ggtcgttggt aaaaacatct caatgggtga 180
tctgaaggga acgcttgaga tgattattca aaaaatgttt ggtgcagaac gtcgaatccg 240
tttgcgtcct tcttacttcc cattcactga accttccgtt gaggttgacg tgtcatgctt 300
caagtgtggt ggtaaaggat gtaacgtatg caagaataca ggttggattg agatccttgg 360
tgctggtatg gttcacccac aagtgcttga gatgtcaggt gttgattctg aagaatattc 420
aggttttgtt ttgggtttag gaag 444
Claims (2)
1.一株产胞外多糖的嗜热链球菌（ Streptococcus thermophiles ） JMCC0019，它是从西藏传统发酵乳中分离筛选出来的；该菌菌株已保藏于中国科学院微生物研究所菌种保藏中心，保藏号为CGMCC NO. 14426；
所述产胞外多糖的嗜热链球菌JMCC0019的16Sr DNA序列如下：
GTGGCTCAAAGGTTCCTCACCGACTTCGGGTGTTAAAACTCTCGTGGTGTGACGGGCGGTGTGTACAAGGCCCGGGAACGTATTCACCGCGGCGTGCTGATCCGCGATTACTAGCGATTCCGACTTCATGTAGGCGAGTTGCAGCCTACAATCCGAACTGAGATTGGCTTTAAGAGATTAGCTCGCCGTCACCGACTCGCAACTCGTTGTACCAACCATTGTAGCACGTGTGTAGCCCAGGTCATAAGGGGCATGATGATTTGACGTCATCCCCACCTTCCTCCGGTTTATTACCGGCAGTCTCGCTAGAGTGCCCAACTGAATGATGGCAACTAACAATAGGGGTTGCGCTCGTTGCGGGACTTAACCCAACATCTCACGACACGAGCTGACGACAACCATGCACCACCTGTCACCGATGTACCGAAGTAACTTTCTATCTCTAGAAATAGCATCGGGATGTCAAGACCTGGTAAGGTTCTTCGCGTTGCTTCGAATTAAACCACATGCTCCACCGCTTGTGCGGGCCCCCGTCAATTCCTTTGAGTTTCAACCTTGCGGTCGTACTCCCCAGGCGGAGTGCTTAATGCGTTAGCTGCGGCACTGAATCCCGGAAAGGATCCAACACCTAGCACTCATCGTTTACGGCGTGGACTACCAGGGTATCTAATCCTGTTCGCTCCCCACGCTTTCGAGCCTCAGCGTCAGTTACAGACCAGAGAGCCGCTTTCGCCACCGGTGTTCCTCCATATATCTACGCATTTCACCGCTACACATGGAATTCCACTCTCCCCTTCTGCACTCAAGTTTGACAGTTTCCAAAGCGAACTATGGTTGAGCCACAGCCTTTAACTTCAGACTTATCAAACCGCCTGCGCTCGCTTTACGCCCAATAAATCCGGACAACGCTCGGGACCTACGTATTACCGCGGCTGCTGGCACGTAGTTAGCCGTCCCTTTCTGGTAAGCTACCGTCACAGTGTGAACTTTCCACTCTCACACCCGTTCTTGACTTACAACAGAGCTTTACGATCCGAAAACCTTCTTCACTCACGCGGCGTTGCTCGGTCAGGGTTGCCCCCATTGCCGAAGATTCCCTACTGCTGCCTCCCGTAGGAGTCTGGGCCGTGTCTCAGTCCCAGTGTGGCCGATCACCCTCTCAGGTCGGCTATGTATCGTCGCCTAGGTGAGCCATTACCTCACCTACTAGCTAATACAACGCAGGTCCATCTTGTAGTGGAGCAATTGCCCCTTTCAAATAAATGACATGTGTCATCCATTGTTATGCGGTATTAGCTATCGTTTCCAATAGTTATCCCCCGCTACAAGGCAGGTTACCTACGCGTTACTCACCCGTTCGCAACTCATCCAAGAAGAGCAAGCTCCTCTCTTCAGCGTCTACTGCAG；
所述产胞外多糖的嗜热链球菌JMCC0019的Phes基因序列如下：
TCGCAACTCTACAAGTCCTGTCCAAGCTCGTACACTTGATAAACATGATTTTTCTAAAGGTCCTCTTAAGATGATCTCACCAGGACGTGTTTTCCGTCGTGATACCGATGATGCGACTCACAGCCACCAGTTTCACCAAATCGAAGGTTTGGTCGTTGGTAAAAACATCTCAATGGGTGATCTGAAGGGAACGCTTGAGATGATTATTCAAAAAATGTTTGGTGCAGAACGTCGAATCCGTTTGCGTCCTTCTTACTTCCCATTCACTGAACCTTCCGTTGAGGTTGACGTGTCATGCTTCAAGTGTGGTGGTAAAGGATGTAACGTATGCAAGAATACAGGTTGGATTGAGATCCTTGGTGCTGGTATGGTTCACCCACAAGTGCTTGAGATGTCAGGTGTTGATTCTGAAGAATATTCAGGTTTTGTTTTGGGTTTAGGAAG。
2.如权利要求1所述的一株产胞外多糖的嗜热链球菌JMCC0019的应用，其特征在于：该嗜热链球菌应用于制备发酵乳制品。
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