CN114196567B - 嗜热链球菌jmcc0031及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种嗜热链球菌JMCC0031及其应用,该菌是从新疆传统发酵乳中分离筛选出来的，已于2021年5月18日保藏于北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.22558；该菌可作为发酵剂的辅助菌株，在不改变原有发酵剂发酵曲线和后酸的基础上，实现改善发酵乳质构和口感的目的。本发明适用于分离嗜热链球菌JMCC0031，分离得到的嗜热链球菌JMCC0031，可以作为发酵剂的辅助菌株，改善发酵乳质构和口感。
Description
技术领域
本发明属于生物工程领域，涉及一种菌株，具体地说是嗜热链球菌 JMCC0031及其应用。
背景技术
在酸奶发酵过程中，酸奶的质构直接影响着酸奶的口感，当酸奶质构不佳时，表现为口感粗糙、粉感强、凝固型产品析水或搅拌型产品过稀，通过合规的添加剂能够改善相关产品性状，然而目前消费者对于健康的诉求逐渐提高，无添加酸奶逐渐成为市场主流，因此通过高性能发酵剂菌株的筛选来解决上述问题是更好的途径；
乳酸菌改善酸奶质构的能力，主要源自于其产生的胞外多糖，胞外多糖能够为发酵乳提供一定的质构特性，提高发酵乳的粘度、细腻度、拉丝程度以及持水力，同时，部分国外学者发现胞外多糖具有良好的益生功能；
但在实际生产应用中，单一的使用乳酸菌一般不能很好地满足生产需求，尤其在发酵乳发酵过程中，需要利用不同菌株之间复杂的协同关系来生产风味佳、质构好的发酵乳；
目前，嗜热链球菌(Streptococcus thermophiles)是我国规定的可用于食品中的常用益生菌菌株之一，可广泛应用于食品发酵、工业乳酸发酵、饲料行业和医疗保健等领域。
发明内容
本发明的目的，是要提供一种嗜热链球菌JMCC0031，以作为发酵剂的辅助菌株，实现改善发酵乳质构、提升发酵乳口感的目的；
本发明的另一个目的，是要提供上述嗜热链球菌JMCC0031的一种应用。
为了实现上述目的，本发明采用的技术方案是：
一种嗜热链球菌JMCC0031，它保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期为2021 年5月18日，保藏编号为CGMCC NO.22558，拉丁文名称为Streptococcus thermophiles。
作为一种限定，上述嗜热链球菌JMCC0031的16SrRNA基因序列如下：
ACCGACTTCGGGTGTTACAAACTCTCGTGGTGTGACGGGCGGTGTGTACAAGGCCCGGGAACGT ATTCACCGCGGCGTGCTGATCCGCGATTACTAGCGATTCCGACTTCATGTAGGCGAGTTGCAGCCTAC AATCCGAACTGAGATTGGCTTTAAGAGATTAGCTCGCCGTCACCGACTCGCAACTCGTTGTACCAACC ATTGTAGCACGTGTGTAGCCCAGGTCATAAGGGGCATGATGATTTGACGTCATCCCCACCTTCCTCCG GTTTATTACCGGCAGTCTCGCTAGAGTGCCCAACTGAATGATGGCAACTAACAATAGGGGTTGCGCTC GTTGCGGGACTTAACCCAACATCTCACGACACGAGCTGACGACAACCATGCACCACCTGTCACCGATG TACCGAAGTAACTTTCTATCTCTAGAAATAGCATCGGGATGTCAAGACCTGGTAAGGTTCTTCGCGTT GCTTCGAATTAAACCACATGCTCCACCGCTTGTGCGGGCCCCCGTCAATTCCTTTGAGTTTCAACCTT GCGGTCGTACTCCCCAGGCGGAGTGCTTAATGCGTTAGCTTCGGCACTGAATCCCGGAAAGGATCCAA CACCTAGCACTCATCGTTTACGGCGTGGACTACCAGGGTATCTAATCCTGTTCGCTCCCCACGCTTTC GAGCCTCAGCGTCAGTTACAGACCAGAGAGCCGCTTTCGCCACCGGTGTTCCTCCATATATCTACGCA TTTCACCGCTACACATGGAATTCCACTCTCCCCTTCTGCACTCAAGTTTGACAGTTTCCAAAGCGAAC TATGGTTGAGCCACAGCCTTTAACTTCAGACTTATCAAACCGCCTGCGCTCGCTTTACGCCCAATAAA TCCGGACAACGCTCGGGACCTACGTATTACCGCGGCTGCTGGCACGTAGTTAGCCGTCCCTTTCTGGT AAGCTACCGTCACAGTGGTGAACTTTCCACTCTCACACCCGTTCTTGACTTACAACAGAGCTTTACGA TCCGAAAACCTTCTTCACTCACGCGGCGTTGCTCGGTCAGGGTTGCCCCCATTGCCGAAGATTCCCTA CTGCTGCCTCCCGTAGGAGTCTGGGCCGTGTCTCAGTCCCAGTGTGGCCGATCACCCTCTCAGGTCGG CTATGTATCGTCGCCTAGGTGAGCCATTACCTCACCTACTAGCTAATACAACGCAGGTCCATCTTGTA GTGGAGCAATTGCCCCTTTCAAATAAATGACATGTGTCATCCATTGTTATGCGGTATTAGCTATCGTT TCCAATAGTTATCCCCCGCTACAAGGCAGGTTACCTACGCGTTACTCACCCGTTCGCAACTCATCCAA GAAGAGCAAGCTCCT。
作为另一种限定，上述嗜热链球菌JMCC0031的Phes基因序列如下：
CATACAAGTCCTGTCCAAGCTCGTACACTTGATAAACATGATTTTTCTAAAGGTCCTCTTAAGA TGATCTCACCAGGACGTGTTTTCCGTCGTGATACCGATGATGCGACTCACAGCCACCAGTTTCACCAA ATCGAAGGTTTGGTCGTTGGTAAAAACATCTCAATGGGTGATCTGAAGGGAACGCTTGAGATGATTAT TCAAAAATGTTTGGTGCAGAACGTCAAATCCGTTTGCGTCCTTCTTACTTCCCATTCACTGAACCTTC CGTTGAGGTTGACGTGTCATGCTTCAAGTGTGGTGGTAAAGGATGTAACGTATGCAAGAAGACAGGTT GGATTGAGATCCTTGGTGCTGGTATGGTTCACCCACAAGTGCTTGAGATGTCAGGTGTTGATTCTGAA GAATAT。
作为第三种限定，上述嗜热链球菌JMCC0031是从新疆传统发酵乳中分离筛选出来的。
本发明还提供了上述嗜热链球菌JMCC0031的一种应用，该菌用于制备发酵剂。
作为一种限定，所述发酵剂用于改善发酵乳的质构。
由于采用了上述技术方案，本发明与现有技术相比，所取得的技术进步在于：
本发明获得的嗜热链球菌JMCC0031，可以作为发酵剂的辅助菌株，在不改变原有发酵剂发酵曲线和后酸的基础上，达到改善发酵乳质构和口感的效果。
本发明适用于分离嗜热链球菌JMCC0031，分离得到的嗜热链球菌 JMCC0031，可以作为发酵剂的辅助菌株，改善发酵乳质构和口感。
附图说明
下面结合附图及具体实施例对本发明作更进一步详细说明：
图1为本发明实施例5中各菌株的发酵曲线图。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明做进一步详细说明，应当理解所描述的实施例仅用于解释本发明，并不限定本发明。
实施例1一种嗜热链球菌JMCC0031及其分离纯化方法
一、菌种信息
嗜热链球菌JMCC0031是从新疆传统发酵乳中分离筛选出来的，其菌株于2021年5月18日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC NO.22558，拉丁文名称是Streptococcusthermophiles。
二、嗜热链球菌JMCC0031的分离纯化方法
该分离纯化方法按照以下步骤依次进行：
S1.采集样品
以无菌采样勺，取新疆传统发酵乳20g，加入到100mL生理盐水中充分混匀，得到样品A；
S2.样品富集
取2mL样品A，加入到100mL的MRS液体培养基中，于37℃条件下培养72h，得到培养液B；
S3.菌株分离筛选
取1mL培养液B，用浓度为0.9％的无菌生理盐水以10倍梯度倍增稀释，依次为梯度稀释10-1、10-2、10-3、10-4、10-5倍，对应得到菌悬液C1～C5；
取MRS固体培养基，融化后，分别倒入第一～第五培养皿中，待冷却、完全凝固后，得培养基D1～D5，分别吸取菌悬液C1～C5各0.1mL，一一对应地涂布到培养基D1～D5上，然后倒置平板，置于37℃环境下培养72h，观察菌落生长情况；
待平板出现典型菌落后，挑选出典型的单菌落E；
S4.菌株纯化
挑取选中的单菌落E，将单菌落E培养物划线接种到MRS固体培养基上，37℃环境下培养72h；连续培养三次；得纯培养物F，即为所述嗜热链球菌JMCC0031；
S5.菌株的保存
将纯培养物F与无菌的质量份数为50％的甘油按照1:1的比例混合，在-75℃无菌环境下保存，同时接种至MRS固体培养基试管斜面用于临时保存；
其中，MRS液体培养基是取10g酪蛋白胨、10g牛肉膏、5g酵母膏、20g葡萄糖、5g乙酸钠、2g柠檬酸二胺，1g吐温-80、2g K2HPO4、0.2gMgSO4·7H2O、 0.05g MnSO4·7H2O及1000ml蒸馏水充分溶解后制得；
MRS固体培养基是取1000ml MRS液体培养基，加入15g琼脂融化混匀后，凝固而成。
实施例2嗜热链球菌JMCC0031的细菌学基本特征
本实施例为嗜热链球菌JMCC0031的细菌学基本特征，具体如表1所示：
表1嗜热链球菌JMCC0031的细菌学基本特征
| 实验项目 | 革兰氏染色 | 氧化酶 | 细胞形态 | 接触酶 |
| 实验结果 | 阳性 | - | 球状 | - |
注：“-”表示无相关基本特征。
实施例3嗜热链球菌JMCC0031的糖发酵特征
本实施例为嗜热链球菌JMCC0031的糖发酵特征，其糖发酵特性的实验方法为：挑取嗜热链球菌JMCC0031的单菌落进行平板划线，37℃条件下培养24h，传代培养一次后，取菌悬液分别接种至不同的糖发酵管(糖发酵管中具体内含物见表2)中，于37℃条件下培养48h，观察颜色变化，其糖发酵特征的鉴定结果如表2所示：
表2嗜热链球菌JMCC0031的糖发酵特征
注：“+”表示发酵利用；“-”表示不发酵利用。
实施例4嗜热链球菌JMCC0031的分子生物学鉴定
取嗜热链球菌JMCC0031进行分子生物学鉴定，通过DNA提取、PCR扩增、 16SrDNA、Phes基因测序，于NCBI网站blast最终确定为嗜热链球菌；
其16SrDNA测序结果如下：
ACCGACTTCGGGTGTTACAAACTCTCGTGGTGTGACGGGCGGTGTGTACAAGGCCCGGGAACGT ATTCACCGCGGCGTGCTGATCCGCGATTACTAGCGATTCCGACTTCATGTAGGCGAGTTGCAGCCTAC AATCCGAACTGAGATTGGCTTTAAGAGATTAGCTCGCCGTCACCGACTCGCAACTCGTTGTACCAACC ATTGTAGCACGTGTGTAGCCCAGGTCATAAGGGGCATGATGATTTGACGTCATCCCCACCTTCCTCCG GTTTATTACCGGCAGTCTCGCTAGAGTGCCCAACTGAATGATGGCAACTAACAATAGGGGTTGCGCTC GTTGCGGGACTTAACCCAACATCTCACGACACGAGCTGACGACAACCATGCACCACCTGTCACCGATG TACCGAAGTAACTTTCTATCTCTAGAAATAGCATCGGGATGTCAAGACCTGGTAAGGTTCTTCGCGTT GCTTCGAATTAAACCACATGCTCCACCGCTTGTGCGGGCCCCCGTCAATTCCTTTGAGTTTCAACCTT GCGGTCGTACTCCCCAGGCGGAGTGCTTAATGCGTTAGCTTCGGCACTGAATCCCGGAAAGGATCCAA CACCTAGCACTCATCGTTTACGGCGTGGACTACCAGGGTATCTAATCCTGTTCGCTCCCCACGCTTTC GAGCCTCAGCGTCAGTTACAGACCAGAGAGCCGCTTTCGCCACCGGTGTTCCTCCATATATCTACGCA TTTCACCGCTACACATGGAATTCCACTCTCCCCTTCTGCACTCAAGTTTGACAGTTTCCAAAGCGAAC TATGGTTGAGCCACAGCCTTTAACTTCAGACTTATCAAACCGCCTGCGCTCGCTTTACGCCCAATAAA TCCGGACAACGCTCGGGACCTACGTATTACCGCGGCTGCTGGCACGTAGTTAGCCGTCCCTTTCTGGT AAGCTACCGTCACAGTGGTGAACTTTCCACTCTCACACCCGTTCTTGACTTACAACAGAGCTTTACGA TCCGAAAACCTTCTTCACTCACGCGGCGTTGCTCGGTCAGGGTTGCCCCCATTGCCGAAGATTCCCTA CTGCTGCCTCCCGTAGGAGTCTGGGCCGTGTCTCAGTCCCAGTGTGGCCGATCACCCTCTCAGGTCGG CTATGTATCGTCGCCTAGGTGAGCCATTACCTCACCTACTAGCTAATACAACGCAGGTCCATCTTGTA GTGGAGCAATTGCCCCTTTCAAATAAATGACATGTGTCATCCATTGTTATGCGGTATTAGCTATCGTT TCCAATAGTTATCCCCCGCTACAAGGCAGGTTACCTACGCGTTACTCACCCGTTCGCAACTCATCCAA GAAGAGCAAGCTCCT
其Phes测序结果如下：
CATACAAGTCCTGTCCAAGCTCGTACACTTGATAAACATGATTTTTCTAAAGGTCCTCTTAAGA TGATCTCACCAGGACGTGTTTTCCGTCGTGATACCGATGATGCGACTCACAGCCACCAGTTTCACCAA ATCGAAGGTTTGGTCGTTGGTAAAAACATCTCAATGGGTGATCTGAAGGGAACGCTTGAGATGATTAT TCAAAAATGTTTGGTGCAGAACGTCAAATCCGTTTGCGTCCTTCTTACTTCCCATTCACTGAACCTTC CGTTGAGGTTGACGTGTCATGCTTCAAGTGTGGTGGTAAAGGATGTAACGTATGCAAGAAGACAGGTT GGATTGAGATCCTTGGTGCTGGTATGGTTCACCCACAAGTGCTTGAGATGTCAGGTGTTGATTCTGAA GAATAT。
实施例5嗜热链球菌JMCC0031的发酵性能
本实施例为嗜热链球菌JMCC0031发酵性能的检测，具体实验方法如下：
取活化后的JMCC0031菌株，按1×106CFU/mL的接种量接种于灭菌生牛乳，采用pH值在线监测的方式，对嗜热链球菌JMCC0031在灭菌乳中的pH值变化情况进行检测；
以嗜热链球菌JMCC0033作为参照菌株，验证嗜热链球菌JMCC0031对于发酵菌株嗜热链球菌JMCC0033发酵特性的影响，结果如图1所示；
由图1可知，嗜热链球菌JMCC0031发酵速度较慢，20h后pH值达到4.5 并趋于稳定；通过对比嗜热链球菌JMCC0033单菌和组合发酵菌剂(嗜热链球菌 JMCC0031与嗜热链球菌JMCC0033以1:1的生物量比例复配而成)的发酵曲线可以得知，嗜热链球菌JMCC0031对嗜热链球菌JMCC0033的发酵速度没有明显的影响，且对最终pH没有显著影响，由此可知，嗜热链球菌JMCC0031具有发酵速度慢、后酸弱，对其他菌株发酵不产生发酵影响的特性；
其中，嗜热链球菌JMCC0033单菌和组合发酵菌剂中嗜热链球菌JMCC0033 的接种浓度均为5×107CFU/mL；
嗜热链球菌JMCC0033，拉丁文名称是Streptococcusthermophiles，已于 2021年5月18日保藏至中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC NO.22560；
其中，嗜热链球菌JMCC0033的16SrRNA基因序列如下：
ACCGACTTCGGGTGTTACAAACTCTCGTGGTGTGACGGGCGGTGTGTACAAGGCCCGGGAACGT ATTCACCGCGGCGTGCTGATCCGCGATTACTAGCGATTCCGACTTCATGTAGGCGAGTTGCAGCCTAC AATCCGAACTGAGATTGGCTTTAAGAGATTAGCTCGCCGTCACCGACTCGCAACTCGTTGTACCAACC ATTGTAGCACGTGTGTAGCCCAGGTCATAAGGGGCATGATGATTTGACGTCATCCCCACCTTCCTCCG GTTTATTACCGGCAGTCTCGCTAGAGTGCCCAACTGAATGATGGCAACTAACAATAGGGGTTGCGCTC GTTGCGGGACTTAACCCAACATCTCACGACACGAGCTGACGACAACCATGCACCACCTGTCACCGATG TACCGAAGTAACTTTCTATCTCTAGAAATAGCATCGGGATGTCAAGACCTGGTAAGGTTCTTCGCGTT GCTTCGAATTAAACCACATGCTCCACCGCTTGTGCGGGCCCCCGTCAATTCCTTTGAGTTTCAACCTT GCGGTCGTACTCCCCAGGCGGAGTGCTTAATGCGTTAGCTGCGGCACTGAATCCCGGAAAGGATCCAA CACCTAGCACTCATCGTTTACGGCGTGGACTACCAGGGTATCTAATCCTGTTCGCTCCCCACGCTTTC GAGCCTCAGCGTCAGTTACAGACCAGAGAGCCGCTTTCGCCACCGGTGTTCCTCCATATATCTACGCA TTTCACCGCTACACATGGAATTCCACTCTCCCCTTCTGCACTCAAGTTTGACAGTTTCCAAAGCGAAC TATGGTTGAGCCACAGCCTTTAACTTCAGACTTATCAAACCGCCTGCGCTCGCTTTACGCCCAATAAA TCCGGACAACGCTCGGGACCTACGTATTACCGCGGCTGCTGGCACGTAGTTAGCCGTCCCTTTCTGGT AAGCTACCGTCACAGTGTGAACTTTCCACTCTCACACCCGTTCTTGACTTACAACAGAGCTTTACGAT CCGAAAACCTTCTTCACTCACGCGGCGTTGCTCGGTCAGGGTTGCCCCCATTGCCGAAGATTCCCTAC TGCTGCCTCCCGTAGGAGTCTGGGCCGTGTCTCAGTCCCAGTGTGGCCGATCACCCTCTCAGGTCGGC TATGTATCGTCGCCTAGGTGAGCCATTACCTCACCTACTAGCTAATACAACGCAGGTCCATCTTGTAG TGGAACAATTGCCCCTTTCAAATAAATGACATGTGTCATCCATTGTTATGCGGTATTAGCTATCGTTT CCAATAGTTATCCCCCGCTACAAGGCAGGTTACCTACGCGTTACTCACCCGTTCGCAACTCATCCAAG AAGAGCAAGCTCCTCTCTTCAGC
嗜热链球菌JMCC0033的Phes基因序列如下：
CTCATACAAGTCCTGTCCAAGCTCGTACACTTGATAAACATGATTTTTCTAAAGGTCCTCTTAA GATGATCTCACCAGGACGTGTTTTCCGTCCGTGATACCGATGATGCGACTCACAGCCACCAGTTTCAC CAAATCGAAGGTTTGGTCGTTGGTAAAAACATCTCAATGGGTGATCTGAAGGGAACGCTTGAGATGAT TATTCAAAAAATGTTTGGTGCAGAACGTCGAATCCGTTTGCGTCCTTCTTACTTCCCATTCACTGAAC CTTCCGTTGAGGTTGACGTGTCATGCTTCAAGTGTGGTGGTAAAGGATGTAACGTATGCAAGAATACA GGTTGGATTGAGATCCTTGGTGCTGGTATGGTTCACCCACAAGTGCTTGAGATGTCAGGTGTTGATTC TGAAGAATATTC。
实施例6嗜热链球菌JMCC0031对发酵乳质构改善的检测
本实施例为嗜热链球菌JMCC0031对发酵乳质构改善的检测，具体实验方法如下：
S1.取70kg的生牛乳和4.9kg的白砂糖混合均匀，制得发酵基料，将发酵剂料平均分为7份，得发酵基料A-G；
S2.按照3％体积比的接种量，分别向发酵基料A-G中依次接入嗜热链球菌JMCC0031、嗜热链球菌JMCC0032、嗜热链球菌JMCC0033、发酵剂JLB-1510、复配发酵剂X、复配发酵剂Y和复配发酵剂Z，42℃条件下发酵至pH值为4.5，用搅拌器破乳后，在4℃条件下放置12h，得酸奶a-g；
S3.酸奶a-g于25℃放置4h后，使用粘度计分别测量酸奶a-g的粘度，结果如表3所示；
其中，发酵剂JLB-1510购自河北一然生物科技有限公司；复配发酵剂X 由生物量比为1:1的发酵剂JLB-1510与嗜热链球菌JMCC0031复配而成；复配发酵剂Y由生物量比为1:2的发酵剂JLB-1510与嗜热链球菌JMCC0031复配而成；复配发酵剂Z由生物量比为1:3发酵剂JLB-1510与嗜热链球菌JMCC0031 复配而成；
表3酸奶a-g黏度测试结果
由表3可知，嗜热链球菌JMCC0031具有良好的发酵粘度，同时在与发酵剂 JLB-1510辅助发酵时，显著的提高了JLB-1510发酵乳的粘度，从而对发酵乳的质构起到了改善作用，并且添加量由1：1增加至1:3时，对于粘度的提高并没有明显的影响。
实施例7嗜热链球菌JMCC0031对发酵乳口感的改善效果
本实施例为嗜热链球菌JMCC0031对发酵乳口感改善的检测，具体实验方法如下：
S1.取70kg的生牛乳和4.9kg的白砂糖混合均匀，制得发酵基料，将发酵剂料平均分为7份，得发酵基料A1-G1；
S2.按照60g/t的接种量，分别向发酵基料A1-G1中依次接入嗜热链球菌JMCC0031、嗜热链球菌JMCC0032、嗜热链球菌JMCC0033、发酵剂JLB-1510、复配发酵剂X、复配发酵剂Y和复配发酵剂Z,接种量均为600mg，42℃条件下发酵5.5h，降温至4℃并放置24h，得酸奶a1-g1；
S3.召集专家级感官评价人员10人对酸奶a1-g1的感官进行综合评价；感官评价方法中，感官特性用10点强度标度法(10→0表示极强→察觉不到) 进行标示，采用此方法对酸奶a1-g1进行口中粘度、粉感、顺滑度、粘聚性评价，结果如表4所示；
表4酸奶a1-g1感官评价结果
| 酸奶 | 口中黏度 | 粉感 | 顺滑度 | 粘聚性 |
| a1 | 6.10 | 2.20 | 6.06 | 7.10 |
| b1 | 4.09 | 3.10 | 5.37 | 5.27 |
| c1 | 3.00 | 5.45 | 3.29 | 5.38 |
| d1 | 5.12 | 4.78 | 5.56 | 5.20 |
| e1 | 6.20 | 3.17 | 5.50 | 6.77 |
| f1 | 6.15 | 3.09 | 5.51 | 6.79 |
| g1 | 6.17 | 3.03 | 5.45 | 6.80 |
由表4可知，嗜热链球菌JMCC0031作为发酵剂的辅助菌株，具有改善酸奶质构和口感的作用；
其中，发酵剂JLB-1510购自河北一然生物科技有限公司；复配发酵剂X 由生物量比为1:1的发酵剂JLB-1510与嗜热链球菌JMCC0031复配而成；复配发酵剂Y由生物量比为1:2的发酵剂JLB-1510与嗜热链球菌JMCC0031复配而成；复配发酵剂Z由生物量比为1:3发酵剂JLB-1510与嗜热链球菌JMCC0031 复配而成；
嗜热链球菌JMCC0032，拉丁文名称是Streptococcusthermophiles，已于 2021年5月18日保藏至中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC NO.22559；
其中，嗜热链球菌JMCC0032的16SrRNA基因序列如下：
ACCGACTTCGGGTGTTACAAACTCTCGTGGTGTGACGGGCGGTGTGTACAAGGCCCGGGAACGT ATTCACCGCGGCGTGCTGATCCGCGATTACTAGCGATTCCGACTTCATGTAGGCGAGTTGCAGCCTAC AATCCGAACTGAGATTGGCTTTAAGAGATTAGCTCGCCGTCACCGACTCGCAACTCGTTGTACCAACC ATTGTAGCACGTGTGTAGCCCAGGTCATAAGGGGCATGATGATTTGACGTCATCCCCACCTTCCTCCG GTTTATTACCGGCAGTCTCGCTAGAGTGCCCAACTGAATGATGGCAACTAACAATAGGGGTTGCGCTC GTTGCGGGACTTAACCCAACATCTCACGACACGAGCTGACGACAACCATGCACCACCTGTCACCGATG TACCGAAGTAACTTTCTATCTCTAGAAATAGCATCGGGATGTCAAGACCTGGTAAGGTTCTTCGCGTT GCTTCGAATTAAACCACATGCTCCACCGCTTGTGCGGGCCCCCGTCAATTCCTTTGAGTTTCAACCTT GCGGTCGTACTCCCCAGGCGGAGTGCTTAATGCGTTAGCTTCGGCACTGAATCCCGGAAAGGATCCAA CACCTAGCACTCATCGTTTACGGCGTGGACTACCAGGGTATCTAATCCTGTTCGCTCCCCACGCTTTC GAGCCTCAGCGTCAGTTACAGACCAGAGAGCCGCTTTCGCCACCGGTGTTCCTCCATATATCTACGCA TTTCACCGCTACACATGGAATTCCACTCTCCCCTTCTGCACTCAAGTTTGACAGTTTCCAAAGCGAAC TATGGTTGAGCCACAGCCTTTAACTTCAGACTTATCAAACCGCCTGCGCTCGCTTTACGCCCAATAAA TCCGGACAACGCTCGGGACCTACGTATTACCGCGGCTGCTGGCACGTAGTTAGCCGTCCCTTTCTGGT AAGCTACCGTCACAGTGTGAACTTTCCACTCTCACACCCGTTCTTGACTTACAACAGAGCTTTACGAT CCGAAAACCTTCTTCACTCACGCGGCGTTGCTCGGTCAGGGTTGCCCCCATTGCCGAAGATTCCCTAC TGCTGCCTCCCGTAGGAGTCTGGGCCGTGTCTCAGTCCCAGTGTGGCCGATCACCCTCTCAGGTCGGC TATGTATCGTCGCCTAGGTGAGCCATTACCTCACCTACTAGCTAATACAACGCAGGTCCATCTTGTAG TGGAGCAATTGCCCCTTTCAAATAAATGACATGTGTCATCCATTGTTATGCGGTATTAGCTATCGTTT CCAATAGTTATCCCCCGCTACAAGGCAGGTTACCTACGCGTTACTCACCCGTTCGCAACTCATCCAAG AAGAGCAAGCTCCTCTCTT
嗜热链球菌JMCC0032的Phes基因序列如下：
CATACAAGTCCTGTCCAAGCTCGTACACTTGATAAACATGATTTTTCTAAAGGTCCTCTTAAGA TGATCTCACCAGGACGTGTTTTCCGTCGTGATACCGATGATGCGACTCACAGCCACCAGTTTCACCAA ATCGAAGGTTTGGTCGTTGGTAAAAACATCTCAATGGGTGATCTGAAGGGAACGCTTGAGATGATTAT TCAAAAAATGTTTGGTGCAGAACGTCAAATCCGTTTGCGTCCTTCTTACTTCCCATTCACTGAACCTT CCGTTGAGGTTGACGTGTCATGCTTCAAGTGTGGTGGTAAAGGATGTAACGTATGCAAGAAGACAGGT TGGATTGAGATCCTTGGTGCTGGTATGGTTCACCCACAAGTGCTTGAGATGTCAGGTGTTGATTCTGA AGAATATTC。
SEQUENCE LISTING
<110> 石家庄君乐宝乳业有限公司
<120> 嗜热链球菌JMCC0031及其应用
<130> 1018
<160> 6
<170> PatentIn version 3.3
<210> 1
<211> 1371
<212> DNA
<213> 嗜热链球菌JMCC0031（Streptococcus thermophiles）
<400> 1
accgacttcg ggtgttacaa actctcgtgg tgtgacgggc ggtgtgtaca aggcccggga 60
acgtattcac cgcggcgtgc tgatccgcga ttactagcga ttccgacttc atgtaggcga 120
gttgcagcct acaatccgaa ctgagattgg ctttaagaga ttagctcgcc gtcaccgact 180
cgcaactcgt tgtaccaacc attgtagcac gtgtgtagcc caggtcataa ggggcatgat 240
gatttgacgt catccccacc ttcctccggt ttattaccgg cagtctcgct agagtgccca 300
actgaatgat ggcaactaac aataggggtt gcgctcgttg cgggacttaa cccaacatct 360
cacgacacga gctgacgaca accatgcacc acctgtcacc gatgtaccga agtaactttc 420
tatctctaga aatagcatcg ggatgtcaag acctggtaag gttcttcgcg ttgcttcgaa 480
ttaaaccaca tgctccaccg cttgtgcggg cccccgtcaa ttcctttgag tttcaacctt 540
gcggtcgtac tccccaggcg gagtgcttaa tgcgttagct tcggcactga atcccggaaa 600
ggatccaaca cctagcactc atcgtttacg gcgtggacta ccagggtatc taatcctgtt 660
cgctccccac gctttcgagc ctcagcgtca gttacagacc agagagccgc tttcgccacc 720
ggtgttcctc catatatcta cgcatttcac cgctacacat ggaattccac tctccccttc 780
tgcactcaag tttgacagtt tccaaagcga actatggttg agccacagcc tttaacttca 840
gacttatcaa accgcctgcg ctcgctttac gcccaataaa tccggacaac gctcgggacc 900
tacgtattac cgcggctgct ggcacgtagt tagccgtccc tttctggtaa gctaccgtca 960
cagtggtgaa ctttccactc tcacacccgt tcttgactta caacagagct ttacgatccg 1020
aaaaccttct tcactcacgc ggcgttgctc ggtcagggtt gcccccattg ccgaagattc 1080
cctactgctg cctcccgtag gagtctgggc cgtgtctcag tcccagtgtg gccgatcacc 1140
ctctcaggtc ggctatgtat cgtcgcctag gtgagccatt acctcaccta ctagctaata 1200
caacgcaggt ccatcttgta gtggagcaat tgcccctttc aaataaatga catgtgtcat 1260
ccattgttat gcggtattag ctatcgtttc caatagttat cccccgctac aaggcaggtt 1320
acctacgcgt tactcacccg ttcgcaactc atccaagaag agcaagctcc t 1371
<210> 2
<211> 410
<212> DNA
<213> 嗜热链球菌JMCC0031（Streptococcus thermophiles）
<400> 2
catacaagtc ctgtccaagc tcgtacactt gataaacatg atttttctaa aggtcctctt 60
aagatgatct caccaggacg tgttttccgt cgtgataccg atgatgcgac tcacagccac 120
cagtttcacc aaatcgaagg tttggtcgtt ggtaaaaaca tctcaatggg tgatctgaag 180
ggaacgcttg agatgattat tcaaaaatgt ttggtgcaga acgtcaaatc cgtttgcgtc 240
cttcttactt cccattcact gaaccttccg ttgaggttga cgtgtcatgc ttcaagtgtg 300
gtggtaaagg atgtaacgta tgcaagaaga caggttggat tgagatcctt ggtgctggta 360
tggttcaccc acaagtgctt gagatgtcag gtgttgattc tgaagaatat 410
<210> 3
<211> 1375
<212> DNA
<213> 嗜热链球菌JMCC0032（Streptococcus thermophiles）
<400> 3
accgacttcg ggtgttacaa actctcgtgg tgtgacgggc ggtgtgtaca aggcccggga 60
acgtattcac cgcggcgtgc tgatccgcga ttactagcga ttccgacttc atgtaggcga 120
gttgcagcct acaatccgaa ctgagattgg ctttaagaga ttagctcgcc gtcaccgact 180
cgcaactcgt tgtaccaacc attgtagcac gtgtgtagcc caggtcataa ggggcatgat 240
gatttgacgt catccccacc ttcctccggt ttattaccgg cagtctcgct agagtgccca 300
actgaatgat ggcaactaac aataggggtt gcgctcgttg cgggacttaa cccaacatct 360
cacgacacga gctgacgaca accatgcacc acctgtcacc gatgtaccga agtaactttc 420
tatctctaga aatagcatcg ggatgtcaag acctggtaag gttcttcgcg ttgcttcgaa 480
ttaaaccaca tgctccaccg cttgtgcggg cccccgtcaa ttcctttgag tttcaacctt 540
gcggtcgtac tccccaggcg gagtgcttaa tgcgttagct tcggcactga atcccggaaa 600
ggatccaaca cctagcactc atcgtttacg gcgtggacta ccagggtatc taatcctgtt 660
cgctccccac gctttcgagc ctcagcgtca gttacagacc agagagccgc tttcgccacc 720
ggtgttcctc catatatcta cgcatttcac cgctacacat ggaattccac tctccccttc 780
tgcactcaag tttgacagtt tccaaagcga actatggttg agccacagcc tttaacttca 840
gacttatcaa accgcctgcg ctcgctttac gcccaataaa tccggacaac gctcgggacc 900
tacgtattac cgcggctgct ggcacgtagt tagccgtccc tttctggtaa gctaccgtca 960
cagtgtgaac tttccactct cacacccgtt cttgacttac aacagagctt tacgatccga 1020
aaaccttctt cactcacgcg gcgttgctcg gtcagggttg cccccattgc cgaagattcc 1080
ctactgctgc ctcccgtagg agtctgggcc gtgtctcagt cccagtgtgg ccgatcaccc 1140
tctcaggtcg gctatgtatc gtcgcctagg tgagccatta cctcacctac tagctaatac 1200
aacgcaggtc catcttgtag tggagcaatt gcccctttca aataaatgac atgtgtcatc 1260
cattgttatg cggtattagc tatcgtttcc aatagttatc ccccgctaca aggcaggtta 1320
cctacgcgtt actcacccgt tcgcaactca tccaagaaga gcaagctcct ctctt 1375
<210> 4
<211> 413
<212> DNA
<213> 嗜热链球菌JMCC0032（Streptococcus thermophiles）
<400> 4
catacaagtc ctgtccaagc tcgtacactt gataaacatg atttttctaa aggtcctctt 60
aagatgatct caccaggacg tgttttccgt cgtgataccg atgatgcgac tcacagccac 120
cagtttcacc aaatcgaagg tttggtcgtt ggtaaaaaca tctcaatggg tgatctgaag 180
ggaacgcttg agatgattat tcaaaaaatg tttggtgcag aacgtcaaat ccgtttgcgt 240
ccttcttact tcccattcac tgaaccttcc gttgaggttg acgtgtcatg cttcaagtgt 300
ggtggtaaag gatgtaacgt atgcaagaag acaggttgga ttgagatcct tggtgctggt 360
atggttcacc cacaagtgct tgagatgtca ggtgttgatt ctgaagaata ttc 413
<210> 5
<211> 1379
<212> DNA
<213> 嗜热链球菌JMCC0033（Streptococcus thermophiles）
<400> 5
accgacttcg ggtgttacaa actctcgtgg tgtgacgggc ggtgtgtaca aggcccggga 60
acgtattcac cgcggcgtgc tgatccgcga ttactagcga ttccgacttc atgtaggcga 120
gttgcagcct acaatccgaa ctgagattgg ctttaagaga ttagctcgcc gtcaccgact 180
cgcaactcgt tgtaccaacc attgtagcac gtgtgtagcc caggtcataa ggggcatgat 240
gatttgacgt catccccacc ttcctccggt ttattaccgg cagtctcgct agagtgccca 300
actgaatgat ggcaactaac aataggggtt gcgctcgttg cgggacttaa cccaacatct 360
cacgacacga gctgacgaca accatgcacc acctgtcacc gatgtaccga agtaactttc 420
tatctctaga aatagcatcg ggatgtcaag acctggtaag gttcttcgcg ttgcttcgaa 480
ttaaaccaca tgctccaccg cttgtgcggg cccccgtcaa ttcctttgag tttcaacctt 540
gcggtcgtac tccccaggcg gagtgcttaa tgcgttagct gcggcactga atcccggaaa 600
ggatccaaca cctagcactc atcgtttacg gcgtggacta ccagggtatc taatcctgtt 660
cgctccccac gctttcgagc ctcagcgtca gttacagacc agagagccgc tttcgccacc 720
ggtgttcctc catatatcta cgcatttcac cgctacacat ggaattccac tctccccttc 780
tgcactcaag tttgacagtt tccaaagcga actatggttg agccacagcc tttaacttca 840
gacttatcaa accgcctgcg ctcgctttac gcccaataaa tccggacaac gctcgggacc 900
tacgtattac cgcggctgct ggcacgtagt tagccgtccc tttctggtaa gctaccgtca 960
cagtgtgaac tttccactct cacacccgtt cttgacttac aacagagctt tacgatccga 1020
aaaccttctt cactcacgcg gcgttgctcg gtcagggttg cccccattgc cgaagattcc 1080
ctactgctgc ctcccgtagg agtctgggcc gtgtctcagt cccagtgtgg ccgatcaccc 1140
tctcaggtcg gctatgtatc gtcgcctagg tgagccatta cctcacctac tagctaatac 1200
aacgcaggtc catcttgtag tggaacaatt gcccctttca aataaatgac atgtgtcatc 1260
cattgttatg cggtattagc tatcgtttcc aatagttatc ccccgctaca aggcaggtta 1320
cctacgcgtt actcacccgt tcgcaactca tccaagaaga gcaagctcct ctcttcagc 1379
<210> 6
<211> 416
<212> DNA
<213> 嗜热链球菌JMCC0033（Streptococcus thermophiles）
<400> 6
ctcatacaag tcctgtccaa gctcgtacac ttgataaaca tgatttttct aaaggtcctc 60
ttaagatgat ctcaccagga cgtgttttcc gtccgtgata ccgatgatgc gactcacagc 120
caccagtttc accaaatcga aggtttggtc gttggtaaaa acatctcaat gggtgatctg 180
aagggaacgc ttgagatgat tattcaaaaa atgtttggtg cagaacgtcg aatccgtttg 240
cgtccttctt acttcccatt cactgaacct tccgttgagg ttgacgtgtc atgcttcaag 300
tgtggtggta aaggatgtaa cgtatgcaag aatacaggtt ggattgagat ccttggtgct 360
ggtatggttc acccacaagt gcttgagatg tcaggtgttg attctgaaga atattc 416
Claims (3)
1. 一种嗜热链球菌 JMCC0031，其特征在于：所述嗜热链球菌 JMCC0031保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期为2021年5月18日，保藏编号为CGMCC NO.22558。
2.根据权利要求1所述的嗜热链球菌JMCC0031在制备发酵剂中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述发酵剂用于改善发酵乳的质构。
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