CN112852684B - 一株植物乳杆菌Lactobacillus plantarum菌株Y388及其应用 - Google Patents

一株植物乳杆菌Lactobacillus plantarum菌株Y388及其应用 Download PDF

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Abstract

本发明“一株植物乳杆菌Lactobacillus plantarum菌株Y388及其应用”属于微生物技术领域。所述植物乳杆菌Lactobacillus plantarum菌株Y388的保藏号为CGMCC No.21750。本发明提供的植物乳杆菌Lactobacillus plantarum菌株Y388能十分显著的产生胞外多糖，并对14种常见的抗生素敏感，同时对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和沙门氏菌都有较强的抑制作用，是一株安全、健康、营养的可高产胞外多糖的益生菌。

Description

一株植物乳杆菌Lactobacillus plantarum菌株Y388及其 应用
技术领域
本发明属于微生物技术领域，特别涉及一株植物乳杆菌Lactobacillusplantarum菌株Y388及其应用。
背景技术
植物乳杆菌是乳酸菌的一种，厌氧或者兼性厌氧，直杆或弯杆，通常为0.9～1.2μm×3.0～8.0μm，单个、成对或短链状，其最适生长温度为30～35℃，其最适pH值在6.5左右，pH值4.5～9.5是植物乳杆菌生长耐受pH值范围，植物乳杆菌可以忍受低pH值以及高浓度盐溶液，生长过程中利用碳源生成乳酸。植物乳杆菌是一种多功能性的益生菌，其大量存在于胃肠道中。在胃肠道中的植物乳杆菌以及其代谢产物可以产生特定生理功能，如免疫调节、功能屏障、降低心血管疾病发病概率等。
乳酸菌胞外多糖是乳酸菌在生长以及代谢的过程中产生并且分泌到细胞壁的外部的一类化合物，其目的是帮助微生物适应环境。胞外多糖具有抗氧化、抗突变、抗炎、抗过敏等生理功能，还可提高对肠道表面的非特异性粘附，调节免疫系统提高机体抗肿瘤作用。除此之外，乳酸菌胞外多糖还可作为食品添加剂，应用于发酵奶油、酸乳等发酵工业，其对于产品的口感、质地、风味以及产品稳定性都有着重要的作用，可以作为增稠剂、水合剂或稳定剂。目前在乳品工业生产中，需要添加其他稳定剂以提高酸奶的组织状态以及粘度，而乳酸菌胞外多糖可以作为一种天然的食品添加剂应用于乳品工业中，可以减少颗粒感和乳清析出，同时提高乳制品对热和物理应激的抵抗力，提高产品质量。
可高产胞外多糖的糖植物乳杆菌Lactobacillus plantarum，目前本领域尚未见报道。
发明内容
基于本领域的上述空白，本发明的提供一种从自然界中分离得到的高产胞外多糖的植物乳杆菌Lactobacillus plantarum菌株Y388及这株植物乳杆菌株Y388的应用。
本发明的技术方案如下：
一株植物乳杆菌Lactobacillus plantarum菌株Y388，其特征在于，其保藏号为CGMCC No.21750。
所述的一株植物乳杆菌Lactobacillus plantarum菌株Y388可产胞外多糖；
优选地，所述植物乳杆菌Lactobacillus plantarum菌株Y388的16S rDNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
保藏号为CGMCC No.21750的植物乳杆菌Lactobacillus plantarum菌株Y388在食品发酵方面的应用。
所述食品选自乳品；所述乳品优选发酵乳。
一种食品发酵剂，其特征在于，其发酵活性成分包括保藏号为CGMCC No.21750的植物乳杆菌Lactobacillus plantarum菌株Y388。
所述发酵活性成分还包括常规的发酵用菌株；优选地，所述常规的发酵用菌株选自：保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、酵母菌、乳酸菌、双歧杆菌、嗜酸乳杆菌，干酪乳杆菌，植物乳杆菌；
优选地，所述食品发酵剂为菌剂；
优选地，所述食品发酵剂还包括菌剂可接受的辅料；
优选地，所述菌剂可接受的辅料包括菌的培养基物质；所述菌的培养基物质包括但不限于：淀粉、蔗糖、蛋白胨、水。
一种食品发酵方法，其特征在于，采用食品发酵剂对食品原料进行发酵；所述食品发酵剂的发酵活性成分包括保藏号为CGMCC No.21750的植物乳杆菌Lactobacillusplantarum菌株Y388。
所述发酵活性成分还包括常规的发酵用菌株；优选地，所述常规的发酵用菌株选自：保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、酵母菌、乳酸菌、双歧杆菌、嗜酸乳杆菌，干酪乳杆菌，植物乳杆菌；
优选地，所述食品发酵剂为菌剂；
优选地，所述食品发酵剂还包括菌剂可接受的辅料；
优选地，所述菌剂可接受的辅料包括菌的培养基物质；所述菌的培养基物质包括但不限于：淀粉、蔗糖、蛋白胨、水。
一种发酵食品，其特征在于，采用食品发酵剂对食品原料进行发酵而得；
所述食品发酵剂的发酵活性成分包括保藏号为CGMCC No.21750的植物乳杆菌Lactobacillus plantarum菌株Y388。
优选地，所述发酵活性成分还包括常规的发酵用菌株；优选地，所述常规的发酵用菌株选自：保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、酵母菌、乳酸菌、双歧杆菌、嗜酸乳杆菌，干酪乳杆菌，植物乳杆菌；
优选地，所述食品发酵剂为菌剂；
优选地，所述食品发酵剂还包括菌剂可接受的辅料；
优选地，所述菌剂可接受的辅料包括菌的培养基物质；所述菌的培养基物质包括但不限于：淀粉、蔗糖、蛋白胨、水。
优选地，所述发酵食品选自：发酵乳、酸奶；
优选地，所述食品原料选自：鲜乳、乳制品、牛奶。
一种发酵乳，其特征在于，采用保藏号为CGMCC No.21750的植物乳杆菌Lactobacillus plantarum菌株Y388对原料乳发酵而得。
优选地，所述发酵包括，将含有所述植物乳杆菌Lactobacillus plantarum菌株Y388的发酵剂接种于原料乳中；
优选地，在发酵前将所述原料乳杀菌；优选地，所述杀菌指将原料乳95℃加热杀菌20min；
优选地，所述发酵指：将所述植物乳杆菌Lactobacillus plantarum菌株Y388接种于MRS液体培养基中，连续活化2代作为母发酵剂；将母发酵剂按体积比2％接种于灭菌乳中培养至凝乳得工作发酵剂，再将工作发酵剂按体积比2～4％加入杀菌后的原料乳中，同时按体积比2～4％加入发酵乳商品发酵剂，混匀后发酵至pH值低于4.5。
本发明提供一种植物乳杆菌Y388，该菌株保藏编号为CGMCC No.21750。所述的植物乳杆菌Y388的16S rDNA基因序列如附件1所示。对上述的植物乳杆菌Y388进行安全性评价，同时研究其在食品中的应用。
植物乳杆菌CGMCC No.21750在发酵乳中的用途。
所述发酵乳按照以下步骤制备：原料乳灭菌后冷却，加入2～4％(V/V)的CGMCCNo.21750工作发酵剂和2～4％(V/V)可共生的发酵乳商品发酵剂，混匀后发酵至pH值低于4.5，即得到含有所述植物乳杆菌的发酵乳。
其中，所述的灭菌方法为95℃加热杀菌20min，待灭菌乳冷却至37℃再加入所述的工作发酵剂。发酵温度为37-40℃。可共生的发酵乳商品发酵剂为常规商品发酵剂，如保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌。
本发明的有益效果：本发明从各地区发酵制品、胃肠道中采集样品，经过大量筛选得到一株高产胞外多糖的乳酸菌J3453。利用16s rDNA对该乳酸菌J3453进行鉴定，在分类上属于Lactobacillus plantarum，为植物乳杆菌，并将其命名为Y388。本发明提供的植物乳杆菌Lactobacillus plantarum菌株Y388能十分显著的产生胞外多糖，并对14种常见的抗生素敏感，同时对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和沙门氏菌都有较强的抑制作用，是一株安全、健康、营养的可高产胞外多糖的益生菌。
本发明的植物乳杆菌Lactobacillus plantarum菌株Y388的保藏信息如下：
命名：Y388
分类名称：植物乳杆菌
拉丁名称：Lactobacillus plantarum
保藏号：CGMCC No.21750
保藏机构：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心
保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号
保藏日期：2021年1月28日
是否存活：是。
附图说明
图1为本发明的Y388菌株的菌苔拉丝现象观察照片。
具体实施方式
下面结合附图和实施例对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此，也并以此限制本发明的保护范围。
生物材料的来源
实验例4使用的指示菌株：大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌可商购获得。
实验例6使用的发酵乳商品发酵剂中含有活菌，该发酵乳商品发酵剂为倍乐微康益生菌酸奶发酵剂，可商购获得。
本发明实验例中使用的培养基：
MRS固体培养基：蛋白胨10g、牛肉膏10g、酵母膏5g、柠檬酸氢二铵2g、葡萄糖20g、吐温80 1mL、乙酸钠5g、磷酸氢二钾2g、硫酸镁0.58g、硫酸锰0.25g、琼脂15g、蒸馏水1000mL，121℃灭菌20min，调节pH 6.8。
MRS液体培养基：蛋白胨10g、牛肉膏10g、酵母膏5g、柠檬酸氢二铵2g、葡萄糖20g、吐温80 1mL、乙酸钠5g、磷酸氢二钾2g、硫酸镁0.58g、硫酸锰0.25g、蒸馏水1000mL，121℃灭菌20min，调节pH 6.8。
LB培养基、哥伦比亚培养基均为商业培养基。
改良MRS固体培养基：将MRS固体培养基中葡萄糖浓度改为蔗糖60g/L。
如无特殊说明，本发明实施例和实验例中使用的各类试剂耗材均可商购获得，相关实验步骤均为本领域常见操作，具有本领域技术人员可常规理解的技术含义。
第1组实施例、本发明的菌株Y388
本组实施例提供一株植物乳杆菌Lactobacillus plantarum菌株Y388，其特征在于，其保藏号为CGMCC No.21750。
在一些实施例中，所述的一株植物乳杆菌Lactobacillus plantarum菌株Y388可产胞外多糖；
在具体的实施例中，所述植物乳杆菌Lactobacillus plantarum菌株Y388的16SrDNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
第2组实施例、本发明菌株Y388的应用
本组实施例提供保藏号为CGMCC No.21750的植物乳杆菌Lactobacillusplantarum菌株Y388在食品发酵方面的应用。
在具体的实施例中，所述食品选自乳品；所述乳品优选发酵乳。
第3组实施例、本发明的食品发酵剂
本组实施例提供一种食品发酵剂。本组所有的实施例都具备如下共同特征：所述食品发酵剂的发酵活性成分包括保藏号为CGMCC No.21750的植物乳杆菌Lactobacillusplantarum菌株Y388。
在进一步的实施例中，所述发酵活性成分还包括常规的发酵用菌株；优选地，所述常规的发酵用菌株选自：保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、酵母菌、乳酸菌、双歧杆菌、嗜酸乳杆菌，干酪乳杆菌，植物乳杆菌；
在优选的实施例中，所述食品发酵剂为菌剂；
在进一步的实施例中，所述食品发酵剂还包括菌剂可接受的辅料；
在更优选的实施例中，所述菌剂可接受的辅料包括菌的培养基物质；所述菌的培养基物质包括但不限于：淀粉、蔗糖、蛋白胨、水。
第4组实施例、本发明的食品发酵方法
本组实施例提供一种食品发酵方法。本组所有的实施例具备如下共同特征：采用食品发酵剂对食品原料进行发酵；所述食品发酵剂的发酵活性成分包括保藏号为CGMCCNo.21750的植物乳杆菌Lactobacillus plantarum菌株Y388。
在进一步的实施例中，所述发酵活性成分还包括常规的发酵用菌株；优选地，所述常规的发酵用菌株选自：保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、酵母菌、乳酸菌、双歧杆菌、嗜酸乳杆菌，干酪乳杆菌，植物乳杆菌；
优选地，所述食品发酵剂为菌剂；
优选地，所述食品发酵剂还包括菌剂可接受的辅料；
优选地，所述菌剂可接受的辅料包括菌的培养基物质；所述菌的培养基物质包括但不限于：淀粉、蔗糖、蛋白胨、水。
第5组实施例、本发明的发酵食品
本组实施例提供一种发酵食品。本组实施例的共同特征在于，采用食品发酵剂对食品原料进行发酵而得；所述食品发酵剂的发酵活性成分包括保藏号为CGMCC No.21750的植物乳杆菌Lactobacillus plantarum菌株Y388。
在进一步的实施例中，所述发酵活性成分还包括常规的发酵用菌株；优选地，所述常规的发酵用菌株选自：保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、酵母菌、乳酸菌、双歧杆菌、嗜酸乳杆菌，干酪乳杆菌，植物乳杆菌；
优选地，所述食品发酵剂为菌剂；
优选地，所述食品发酵剂还包括菌剂可接受的辅料；
优选地，所述菌剂可接受的辅料包括菌的培养基物质；所述菌的培养基物质包括但不限于：淀粉、蔗糖、蛋白胨、水。
优选地，所述发酵食品选自：发酵乳、酸奶、乳酸菌奶饮料；
优选地，所述食品原料选自：鲜乳、乳制品、牛奶。
第6组实施例、本发明的发酵乳
本组实施例提供一种发酵乳，其特征在于，采用保藏号为CGMCC No.21750的植物乳杆菌Lactobacillus plantarum菌株Y388对原料乳发酵而得。
在具体的实施例中，发酵具有本领域技术人员可通常理解的常规技术含义，具体地，所述发酵包括，将含有所述植物乳杆菌Lactobacillus plantarum菌株Y388的发酵剂接种于原料乳中；
在优选的实施例中，在发酵前将所述原料乳杀菌；优选地，所述杀菌指将原料乳95℃加热杀菌20min；
在更优选的实施例中，所述发酵指：将所述植物乳杆菌Lactobacillus plantarum菌株Y388接种于MRS液体培养基中，连续活化2代作为母发酵剂；将母发酵剂按体积比2％接种于灭菌乳中培养至凝乳得工作发酵剂，再将工作发酵剂按体积比2～4％加入杀菌后的原料乳中，同时按体积比2～4％加入发酵乳商品发酵剂，混匀后发酵至pH值低于4.5。
实验例1生物样品中产胞外多糖菌株的筛选
1、样品采集
从发酵食品(泡菜、奶酪、腐乳、酸奶等)、动物胃肠道、人体粪便等中取样。将收集到的样品装入样品管，并放置于有冰袋的泡沫盒子内，保持较低温度带回实验室，进行分离。
2、样品预处理
将采集到的生物样品进行标号，并标记；分别称取1g样品放入装有9mL无菌水的15mL离心管中，涡旋振荡器振荡3次，每次1min，间隔时间15s。
3、样品分离
震荡完成后立即吸取100μL悬液加入到900μL无菌水中，振荡混匀，则完成一次稀释；共稀释3次，获得4个稀释梯度，即0、10-1、10-2、10-3这4个梯度稀释液；取10-1、10-2、10-3三个梯度的稀释液各100μL，分别涂布于MRS固体培养基，而后将平板移入37℃恒温培养箱培养；将不同梯度平板上颜色、大小、质地、形态不相同的单菌落分别挑出，编号。并对挑出的菌株利用梯度稀释法进行纯化，获得纯培养体后，甘油保藏。
4、产胞外多糖菌株的筛选
(1)菌液制备：将纯化后得到的菌株分别接种到MRS液体培养基中，37℃恒温培养箱培养12h，再将菌液按1％(v/v)的接种量接种于新鲜培养基中，37℃恒温培养箱培养4-10h，待菌株达到对数生长后期、稳定前期时，收集菌液备用。
(2)将备用菌液震荡混匀，取2-10μL菌液点板于改良MRS固体培养基上，而后将平板移入37℃恒温培养箱培养48h，用牙签挑菌，记录菌株拉丝现象
(3)记录每个平板菌苔生长状况，并记录拉丝现象，制作拉丝现象表格，详情见表1。
表1本实施例中菌株产胞外多糖能力记录表
Figure BDA0003005757440000071
Figure BDA0003005757440000081
注：++++表示拉丝极其显著；+++表示拉丝显著；++表示拉丝明显；+表示有拉丝；-表示无拉丝。
通过实验发现，有8株实验菌株其菌落拉丝现象明显，分别为J2022、J3413、J3448、J3453、J3476、J4291、J4810、J5535。
实验例2产胞外多糖菌株的复筛
采用MRS液体培养基对筛选菌株进行发酵培养。取5mL发酵液加入离心管内，10000r/min、4℃离心15min，除去菌体后取上清液加入三氯乙酸至质量分数10％，反应12h后，10000r/min、4℃离心45min除去蛋白，于上清液中加入3倍体积的95％的乙醇溶液，4℃条件下浸提12h，10000r/min、4℃离心45min并收集沉淀，弃去上清液后，分别用丙酮、乙醚和无水乙醇洗涤一次后离心，将获得的最终沉淀用去离子水溶解定容即为粗多糖溶液；采用硫酸-苯酚法测定胞外多糖含量。实验结果见表2。
表2产胞外多糖菌株的复筛结果
Figure BDA0003005757440000091
从表中可以看出，菌株J3453的粗多糖产量相对较高，结合菌落拉丝性能，选取这株菌，命名为Y388。此菌株来源于泡菜。效果图见图1，选取该菌株进行下一步实验。同时将该菌株Y388送保藏，其保藏信息如下：
命名：Y388
分类名称：植物乳杆菌
拉丁名称：Lactobacillus plantarum
保藏号：CGMCC No.21750
保藏机构：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心
保藏日期：2021年1月28日。
实验例3菌株Y388的鉴定
菌株Y388基因组DNA提取方法：挑取纯化的Y388单菌落接种到1.5mL MRS液体培养基中，37℃培养12h后将菌液离心(8000g，2min)收集菌体。采用基因组DNA抽提试剂盒(TIANGEN公司)提取。PCR扩增采用两种合成的通用引物：上游引物27F：AGTTTGATCMTGGCTCAG(SEQ ID NO.2)；下游引物1492R：GGTTACCTTGTTACGACTT(SEQ IDNO.3)，PCR引物采用切胶回收试剂盒(BioFlux)回收，纯化后送金开瑞生物技术公司测序。
结果表明菌株Y388同源性最高菌株的是Lactobacillus plantarum，同源性为99.73％。测序结果如SEQ ID NO.1所示。
实验例4植物乳杆菌Y388对病原菌的抑制能力
指示菌悬液的制备：将大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌分别在平板培养基上活化，37℃培养24h，挑取菌苔至生理盐水制备菌悬液，调整菌液浓度至109CFU/mL。
植物乳杆菌发酵液制备：将植物乳杆菌按1％(V/V)接种至MRS液体培养基中，37℃培养12h。
抑菌实验：将含有1.5％琼脂的MRS肉汤培养基冷却至55℃左右，与指示菌悬液按一定比例混匀，使指示菌的活菌数在106CFU/mL数量级，然后迅速倾注于预先放置牛津杯的平板中，待培养基冷却凝固后，取出牛津杯，于每孔注入200μL植物乳杆菌发酵液(活菌数为108CFU/mL数量级)，37℃过夜培养后，测量抑菌圈直径。
表3植物乳杆菌发酵液对病原菌的抑制作用
Figure BDA0003005757440000101
表3结果表明，植物乳杆菌Y388对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和沙门氏菌都有较强的抑制作用，其中对沙门氏菌的抑制作用最为显著。
实验例5植物乳杆菌Y388对抗生素敏感性试验
将植物乳杆菌Y388在MRS固体平板上划线活化后，挑取菌苔至生理盐水中制备菌悬液，调整菌悬液浓度为108CFU/mL，取100μL菌悬液，用无菌棉签均匀涂布于MRS固体平板上，将抗生素药敏试纸片有序置于平板表面，置于厌氧条件下，37℃培养24-36h后，用游标卡尺测量抑菌圈直径。根据美国临床和实验标准协会CLSI的评价标准，判断抗生素对植物乳杆菌的耐药性，结果见表4。
表4植物乳杆菌对抗生素的敏感性
Figure BDA0003005757440000102
Figure BDA0003005757440000111
表4结果表明植物乳杆菌Y388对测试的14种常用抗生素均敏感，表明该菌株是具有开发应用潜力的安全益生菌。
实验例6、植物乳杆菌Y388工作发酵剂
将植物乳杆菌Y388的菌种接种于MRS液体培养基中，连续活化2代作为母发酵剂；将母发酵剂按2％(v/v)接种于灭菌乳中培养至凝乳，即为工作发酵剂。
应用实施例2含有植物乳杆菌Y388的发酵酸乳
将原料乳95℃加热杀菌20min，待灭菌乳冷却至37℃再按2～4％(v/v)的量加入应用实施例1中所得的工作发酵剂，同时加入2～4％(v/v)可共生的发酵乳商品发酵剂。该发酵剂为倍乐微康益生菌酸奶发酵剂，含有嗜热链球菌、长双歧杆菌、保加利亚乳杆菌、乳双歧杆菌、植物乳杆菌等，混匀后发酵至pH值低于4.5，冷藏至4℃并冷藏保存即得到含有所述植物乳杆菌的发酵乳。
SEQUENCE LISTING
<110> 湖北均瑶大健康饮品股份有限公司
<120> 一株植物乳杆菌Lactiplantibacillus plantarum菌株Y388及其应用
<130> P210036/JYD
<160> 3
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 1471
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 植物乳杆菌Lactiplantibacillus plantarum菌株Y388的16S rDNA
<400> 1
gcccgtgcgg ggtgctatac atgcagtcga acgaactctg gtattgattg gtgcttgcat 60
catgatttac atttgagtga gtggcgaact ggtgagtaac acgtgggaaa cctgcccaga 120
agcgggggat aacacctgga aacagatgct aataccgcat aacaacttgg accgcatggt 180
ccgagtttga aagatggctt cggctatcac ttttggatgg tcccgcggcg tattagctag 240
atggtggggt aacggctcac catggcaatg atacgtagcc gacctgagag ggtaatcggc 300
cacattggga ctgagacacg gcccaaactc ctacgggagg cagcagtagg gaatcttcca 360
caatggacga aagtctgatg gagcaacgcc gcgtgagtga agaagggttt cggctcgtaa 420
aactctgttg ttaaagaaga acatatctga gagtaactgt tcaggtattg acggtattta 480
accagaaagc cacggctaac tacgtgccag cagccgcggt aatacgtagg tggcaagcgt 540
tgtccggatt tattgggcgt aaagcgagcg caggcggttt tttaagtctg atgtgaaagc 600
cttcggctca accgaagaag tgcatcggaa actgggaaac ttgagtgcag aagaggacag 660
tggaactcca tgtgtagcgg tgaaatgcgt agatatatgg aagaacacca gtggcgaagg 720
cggctgtctg gtctgtaact gacgctgagg ctcgaaagta tgggtagcaa acaggattag 780
ataccctggt agtccatacc gtaaacgatg aatgctaagt gttggagggt ttccgccctt 840
cagtgctgca gctaacgcat taagcattcc gcctggggag tacggccgca aggctgaaac 900
tcaaaggaat tgacgggggc ccgcacaagc ggtggagcat gtggtttaat tcgaagctac 960
gcgaagaacc ttaccaggtc ttgacatact atgcaaatct aagagattag acgttccctt 1020
cggggacatg gatacaggtg gtgcatggtt gtcgtcagct cgtgtcgtga gatgttgggt 1080
taagtcccgc aacgagcgca acccttatta tcagttgcca gcattaagtt gggcactctg 1140
gtgagactgc cggtgacaaa ccggaggaag gtggggatga cgtcaaatca tcatgcccct 1200
tatgacctgg gctacacacg tgctacaatg gatggtacaa cgagttgcga actcgcgaga 1260
gtaagctaat ctcttaaagc cattctcagt tcggattgta ggctgcaact cgcctacatg 1320
aagtcggaat cgctagtaat cgcggatcag catgccgcgg tgaatacgtt cccgggcctt 1380
gtacacaccg cccgtcacac catgagagtt tgtaacaccc aaagtcggtg gggtaacctt 1440
ttaggaacca gccgctaagg tgaacagatg g 1471
<210> 2
<211> 18
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 上游引物 27F
<400> 2
agtttgatcm tggctcag 18
<210> 3
<211> 19
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 下游引物1492R
<400> 3
ggttaccttg ttacgactt 19

Claims (32)

1. 一株植物乳杆菌Lactobacillus plantarum菌株Y388，其特征在于，其保藏号为CGMCC No.21750。
2. 根据权利要求1所述的一株植物乳杆菌Lactobacillus plantarum菌株Y388，其特征在于，其可产胞外多糖。
3. 根据权利要求1所述的一株植物乳杆菌Lactobacillus plantarum菌株Y388，其特征在于，所述植物乳杆菌Lactobacillus plantarum菌株Y388的16S rDNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
4. 保藏号为CGMCC No.21750的植物乳杆菌Lactobacillus plantarum菌株Y388在食品发酵方面的应用。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述食品选自乳品。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述乳品为发酵乳。
7. 一种食品发酵剂，其特征在于，其发酵活性成分包括保藏号为CGMCC No.21750的植物乳杆菌Lactobacillus plantarum菌株Y388。
8.根据权利要求7所述的一种食品发酵剂，其特征在于，所述发酵活性成分还包括常规的发酵用菌株。
9.根据权利要求8所述的一种食品发酵剂，其特征在于，所述常规的发酵用菌株选自：保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、酵母菌、乳酸菌、双歧杆菌、嗜酸乳杆菌，干酪乳杆菌，植物乳杆菌。
10.根据权利要求7-9任一所述的一种食品发酵剂，其特征在于，所述食品发酵剂为菌剂。
11.根据权利要求10所述的一种食品发酵剂，其特征在于，所述食品发酵剂还包括菌剂可接受的辅料。
12.根据权利要求11所述的一种食品发酵剂，其特征在于，所述菌剂可接受的辅料包括菌的培养基物质；所述菌的培养基物质包括但不限于：淀粉、蔗糖、蛋白胨、水。
13. 一种食品发酵方法，其特征在于，采用食品发酵剂对食品原料进行发酵；所述食品发酵剂的发酵活性成分包括保藏号为CGMCC No.21750的植物乳杆菌Lactobacillus plantarum菌株Y388。
14.根据权利要求13所述的一种食品发酵方法，其特征在于，所述发酵活性成分还包括常规的发酵用菌株。
15.根据权利要求14所述的一种食品发酵方法，其特征在于，所述常规的发酵用菌株选自：保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、酵母菌、乳酸菌、双歧杆菌、嗜酸乳杆菌，干酪乳杆菌，植物乳杆菌。
16.根据权利要求13-15任一所述的一种食品发酵方法，其特征在于，所述食品发酵剂为菌剂。
17.根据权利要求16所述的一种食品发酵方法，其特征在于，所述食品发酵剂还包括菌剂可接受的辅料。
18.根据权利要求17所述的一种食品发酵方法，其特征在于，所述菌剂可接受的辅料包括菌的培养基物质；所述菌的培养基物质包括：淀粉、蔗糖、蛋白胨、水。
19.一种发酵食品，其特征在于，采用食品发酵剂对食品原料进行发酵而得；
所述食品发酵剂的发酵活性成分包括保藏号为CGMCC No.21750的植物乳杆菌Lactobacillus plantarum菌株Y388。
20.根据权利要求19所述的发酵食品，其特征在于，所述发酵活性成分还包括常规的发酵用菌株。
21.根据权利要求20所述的发酵食品，其特征在于，所述常规的发酵用菌株选自：保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、酵母菌、乳酸菌、双歧杆菌、嗜酸乳杆菌，干酪乳杆菌，植物乳杆菌。
22.根据权利要求19所述的发酵食品，其特征在于，所述食品发酵剂为菌剂。
23.根据权利要求22所述的发酵食品，其特征在于，所述食品发酵剂还包括菌剂可接受的辅料。
24.根据权利要求23所述的发酵食品，其特征在于，所述菌剂可接受的辅料包括菌的培养基物质；所述菌的培养基物质包括：淀粉、蔗糖、蛋白胨、水。
25.根据权利要求19-24任一所述的发酵食品，其特征在于，所述发酵食品选自：发酵乳、酸奶。
26.根据权利要求19所述的发酵食品，其特征在于，所述食品原料选自：鲜乳、乳制品、牛奶。
27. 一种发酵乳，其特征在于，采用保藏号为CGMCC No.21750的植物乳杆菌Lactobacillus plantarum菌株Y388对原料乳发酵而得。
28. 根据权利要求27所述的一种发酵乳，其特征在于，所述发酵包括，将含有所述植物乳杆菌Lactobacillus plantarum菌株Y388的发酵剂接种于原料乳中。
29.根据权利要求27所述的一种发酵乳，其特征在于，在发酵前将所述原料乳杀菌。
30.根据权利要求28所述的一种发酵乳，其特征在于，在发酵前将所述原料乳杀菌。
31.根据权利要求29或30所述的一种发酵乳，其特征在于，所述杀菌指将原料乳95℃加热杀菌20min。
32. 根据权利要求27-30任一所述的一种发酵乳，其特征在于，所述发酵指：将所述植物乳杆菌Lactobacillus plantarum菌株Y388接种于MRS液体培养基中，连续活化2代作为母发酵剂；将母发酵剂按体积比2%接种于灭菌乳中培养至凝乳得工作发酵剂，再将工作发酵剂按体积比2～4%加入杀菌后的原料乳中，同时按体积比2～4%加入发酵乳商品发酵剂，混匀后发酵至pH值低于4.5。
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