CN106963801A - 罗汉果提取物的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于天然物提取的技术领域,特别涉及一种罗汉果提取物的制备方法,包括以下制备步骤:1)将罗汉果粉碎,加入其重量份6~10倍的乙醇溶液,超高压处理,得到浆液;2)将浆液放入磁场中处理;3)超声波提取,得到粗提取液;4)将粗提取液过大孔吸附树脂柱层析,以乙醇溶液和乙酸乙酯为洗脱剂进行洗脱,收集洗脱液;5)洗脱液离心分离,浓缩,干燥,得到罗汉果提取物。通过本发明方法制备罗汉果提取物,得到的提取物具有显著的抗癌功效,拓宽罗汉果的应用,提高罗汉果的价值。
Description
技术领域
本发明属于天然物提取的技术领域,特别涉及一种罗汉果提取物的制备方法。
背景技术
罗汉果,葫芦科多年生藤本植物的果实。别名拉汗果、假苦瓜、光果木鳖、金不换、罗汉表、裸龟巴,被人们誉为“神仙果”,其叶心形,雌雄异株,夏季开花,秋天结果。主要产于广西壮族自治区桂林市永福县龙江乡、龙胜和百寿等镇,永福县和龙胜县是罗汉果之乡种植历史比较悠久,其中永福种植罗汉果已经有300多年历史,龙胜县种植罗汉果已经有200多年历史,中国百分之九十罗汉果产于永福县和龙胜县,罗汉果是桂林名贵的土特产,也是国家首批批准的药食两用材料之一,其主要功效是能止咳化痰。果实营养价值很高,含丰富的维生素C(每100克鲜果中含400毫克~500毫克)以及糖甙、果糖、葡萄糖、蛋白质、脂类等。
罗汉果味甘性凉,归肺、大肠经,有润肺止咳、生津止渴的功效、适用于肺热或肺燥咳嗽、百日咳及暑热伤津口渴等,此外还有润肠通便的功效。罗汉果为卫生部首批公布的药食两用名贵中药材,其所含罗汉果甜甙比蔗糖甜300倍,不产生热量,是饮料、糖果行业的名贵原料,是蔗糖的最佳替代品。常饮罗汉果茶,可防多种疾病,现代医学证明,罗汉果对支气管炎、高血压等疾病有显著疗效,还是起到防治冠心病、血管硬化、肥胖症的作用。营养价值高,有清热解暑、化痰止咳、凉血舒骨、清肺润肠和生津止渴等功效;可治急慢性气管炎、咽喉炎、支气管哮喘、百日咳、胃热、便秘、急性扁桃体炎等症,糖尿病患者亦宜服用。
罗汉果具有较多的保健功效,现在研究中,虽然发现罗汉果有抗癌成分,但是是含量非常微弱,因此导致罗汉果的抗癌功效不明显,也很少有人用来作为抗癌的药物,因此研究开发一种具有较强抗癌功效的罗汉果提取物非常有必要。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供罗汉果提取物的制备方法,得到的罗汉果提取物具有显著的抗癌功效。
为实现上述目的,本发明采用如下技术方案:
本发明提供罗汉果提取物的制备方法,包括以下制备步骤:
1)将罗汉果粉碎,加入其重量份6~10倍的乙醇溶液,超高压处理,得到浆液;
2)将浆液放入磁场中处理;
3)超声波提取,得到粗提取液;
4)将粗提取液过大孔吸附树脂柱层析,以乙醇溶液和乙酸乙酯为洗脱剂进行洗脱,收集洗脱液;
5)洗脱液离心分离,浓缩,干燥,得到罗汉果提取物。
本发明所述步骤1)中,粉碎至50~80目。罗汉果粉碎有利于有效物质的溶出,有利于后续步骤的进行。
本发明所述步骤1)中,在150~180MPa下超高压处理2~6min。在一定的压力范围内,有效成分的提取较高,当超过180MPa时,会破坏罗汉果的抗癌成分,且抗癌成分的提取率低,且抗癌效果下降。
本发明所述步骤1)中,乙醇溶液的体积浓度为40~50%。乙醇的体积浓度过高时,罗汉果提取物的总提取率降低,有效成分在乙醇中的溶解度降低,且部分蛋白质易凝结,一些脂溶性成分被提取出来,增大有效成分与提取溶剂的扩散阻力。
本发明所述步骤2)中,在0.4~0.8T的磁场中处理8~16min。将浆液放入磁场中处理,改变抗癌成分的导向,使抗癌成分更易溶出,同时也为了提高抗癌成分的提取率和纯度。
本发明所述步骤3)中,在45~75kHz频率下超声波提取30~70min。超声波的提取频率与罗汉果的抗癌成分密切相关,提高提取频率有利于抗癌成分的溶出,但是过高,不利于部分抗癌成分物质的溶出,降低提取率,增大损失。一般情况下,超声波提取时间越长越有利于提高提取率,但是过长,大分子物质大量进入粗提取物中,影响抗癌的纯度,在这个频率下,还有效保护罗汉果的抗癌成分不被破坏。
本发明所述步骤3)中,超声波提取时的温度为45~55℃。一定范围内,温度越高,越有利于罗汉果有效成分的溶出,提高提取率,但是温度过高会破坏有效成分,而在这样的温度范围内提取,条件温和,有效保护罗汉果有效成分的同时,有利于加快提取速度。
本发明所述步骤4)中,乙醇溶液的体积浓度为75~95%。当乙醇的体积浓度超过95%时,乙醇中的含水量减少,乙醇分子通透性发生变化,导致溶液中罗汉果的有效成分向树脂外扩散的难度增大,影响洗脱。
本发明所述步骤4)中,乙醇溶液与乙酸乙酯的重量比为3~8:1。使用混合的溶剂,有利于有效成分的洗脱,提高纯度。
本发明所述步骤5)中,在3400~4600r/min转速下离心分离4~8min。离心分离有利于罗汉果有效成分的纯化,提高提取率。
通过本发明方法制备罗汉果提取物,得到的提取物具有显著的抗癌功效,拓宽罗汉果的应用,提高罗汉果的价值,用于治疗已经注射小鼠肉瘤S180腹水型瘤株的小鼠,平均存活天数相比不使用药物治疗的已经注射小鼠肉瘤S180腹水型瘤株的小鼠多62~83天。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明作进一步说明,但本发明并不局限于这些实施例。
实施例1
罗汉果提取物的制备方法,包括以下制备步骤:
1)将罗汉果粉碎至50目,加入其重量份10倍体积浓度为40%的乙醇溶液,在150MPa下超高压处理2min,得到浆液;
2)将浆液放入0.8T的磁场中处理8min;
3)在70kHz频率下超声波提取30min,得到粗提取液;
4)将粗提取液过大孔吸附树脂柱层析,以重量比为8:1体积浓度为75%的乙醇溶液和乙酸乙酯为洗脱剂进行洗脱,收集洗脱液;
5)洗脱液在4600r/min转速下离心分离4min,浓缩,干燥,得到罗汉果提取物。
实施例2
罗汉果提取物的制备方法,包括以下制备步骤:
1)将罗汉果粉碎至60目,加入其重量份9倍体积浓度为45%的乙醇溶液,在180MPa下超高压处理3min,得到浆液;
2)将浆液放入0.7T的磁场中处理10min;
3)在75kHz频率下超声波提取40min,得到粗提取液;
4)将粗提取液过大孔吸附树脂柱层析,以重量比为6:1体积浓度为80%的乙醇溶液和乙酸乙酯为洗脱剂进行洗脱,收集洗脱液;
5)洗脱液在4300r/min转速下离心分离5min,浓缩,干燥,得到罗汉果提取物。
实施例3
罗汉果提取物的制备方法,包括以下制备步骤:
1)将罗汉果粉碎至70目,加入其重量份8倍体积浓度为50%的乙醇溶液,在170MPa下超高压处理4min,得到浆液;
2)将浆液放入0.6T的磁场中处理12min;
3)在65kHz频率下超声波提取50min,得到粗提取液;
4)将粗提取液过大孔吸附树脂柱层析,以重量比为5:1体积浓度为85%的乙醇溶液和乙酸乙酯为洗脱剂进行洗脱,收集洗脱液;
5)洗脱液在4000r/min转速下离心分离6min,浓缩,干燥,得到罗汉果提取物。
实施例4
罗汉果提取物的制备方法,包括以下制备步骤:
1)将罗汉果粉碎至80目,加入其重量份7倍体积浓度为40%的乙醇溶液,在160MPa下超高压处理5min,得到浆液;
2)将浆液放入0.5T的磁场中处理14min;
3)在55kHz频率下超声波提取60min,得到粗提取液;
4)将粗提取液过大孔吸附树脂柱层析,以重量比为4:1体积浓度为90%的乙醇溶液和乙酸乙酯为洗脱剂进行洗脱,收集洗脱液;
5)洗脱液在3700r/min转速下离心分离7min,浓缩,干燥,得到罗汉果提取物。
实施例5
罗汉果提取物的制备方法,包括以下制备步骤:
1)将罗汉果粉碎至50目,加入其重量份6倍体积浓度为50%的乙醇溶液,在150MPa下超高压处理6min,得到浆液;
2)将浆液放入0.4T的磁场中处理16min;
3)在45kHz频率下超声波提取70min,得到粗提取液;
4)将粗提取液过大孔吸附树脂柱层析,以重量比为3:1体积浓度为95%的乙醇溶液和乙酸乙酯为洗脱剂进行洗脱,收集洗脱液;
5)洗脱液在3400r/min转速下离心分离8min,浓缩,干燥,得到罗汉果提取物。
Claims (10)
1.罗汉果提取物的制备方法,其特征在于,包括以下制备步骤:
1)将罗汉果粉碎,加入其重量份6~10倍的乙醇溶液,超高压处理,得到浆液;
2)将浆液放入磁场中处理;
3)超声波提取,得到粗提取液;
4)将粗提取液过大孔吸附树脂柱层析,以乙醇溶液和乙酸乙酯为洗脱剂进行洗脱,收集洗脱液;
5)洗脱液离心分离,浓缩,干燥,得到罗汉果提取物。
2.根据权利要求1所述的罗汉果提取物的制备方法,其特征在于:所述步骤1)中,粉碎至50~80目。
3.根据权利要求2所述的罗汉果提取物的制备方法,其特征在于:所述步骤1)中,在150~180MPa下超高压处理2~6min。
4.根据权利要求1所述的罗汉果提取物的制备方法,其特征在于:所述步骤1)中,乙醇溶液的体积浓度为40~50%。
5.根据权利要求1所述的罗汉果提取物的制备方法,其特征在于:所述步骤2)中,在0.4~0.8T的磁场中处理8~16min。
6.根据权利要求1所述的罗汉果提取物的制备方法,其特征在于:所述步骤3)中,在45~75kHz频率下超声波提取30~70min。
7.根据权利要求6所述的罗汉果提取物的制备方法,其特征在于:所述步骤3)中,超声波提取时的温度为45~55℃。
8.根据权利要求1所述的罗汉果提取物的制备方法,其特征在于:所述步骤4)中,乙醇溶液的体积浓度为75~95%。
9.根据权利要求8所述的罗汉果提取物的制备方法,其特征在于:所述步骤4)中,乙醇溶液与乙酸乙酯的重量比为3~8:1。
10.根据权利要求1所述的罗汉果提取物的制备方法,其特征在于:所述步骤5)中,在3400~4600r/min转速下离心分离4~8min。
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