CN101724667A - 运用生物工程酶技术提取石斛多糖的工艺及其制品和应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种石斛多糖的提取工艺及其制品和应用，所述生产工艺包括以下工艺步骤：粉碎石斛(干品)植物；加水混合；加入纤维素酶；调节pH值并酶解；水提；浓缩；醇沉烘干。以获得含量达21.7％的高纯度石斛多糖提取物。这种石斛多糖提取物制品，包括石斛多糖和添加剂。所述石斛多糖采用上述方法制成；所述添加剂为免疫球蛋白、氨基酸、中草药、生物制剂、生长因子、各类乳品(含婴幼儿配方奶粉)之一或其组合；所述产品形态可以为片剂、胶囊及口服液。其质量百分比分别为，石斛多糖15～85％，添加剂15～85％。所述作用指本发明可用于：1、经常熬夜、用脑、用眼、作息不正常、烟酒过度，体虚乏力的人群；2、生活紧张、压力过大、应酬频繁，经常感到身心疲惫的人群；3、经常抽烟、饮酒、应酬频繁4、饮食不均衡，爱吃肉类或甜食的糖尿病、心脑血管疾病人群；5、免疫力低下、体弱多病及咽喉疾病、肠胃疾病、白内障人群；6、久病大病、手术后及癌症放化疗后患者。本发明的最终产品的添加剂科学合理，针对性强。

Description

运用生物工程酶技术提取石斛多糖的工艺及其制品和应用

技术领域

本发明属于运用生物工程酶技术从中国传统中草药石斛中，分离提取石斛多糖的技术领域。

背景技术

一、酶技术提取植物多糖的发展现状

酶技术早已广泛地应用于食品、饲料工业以及天然产物的提取，在20世纪90年代中期以后我国也陆续有研究报道该技术已用于中药的提取制备中，取得了一定的效果。

我们通常在提取药用植物有效成分过程中，有效成分向提取介质扩散时，必须克服细胞壁及细胞间质的双重阻力。植物细胞壁是由纤维素、半纤维素、果胶质、木质素等物质构成的致密结构。选用适当的酶作用于药用植物材料，如纤维素酶、果胶酶等，可以破坏细胞壁的致密构造，从而有利于有效成分的溶出。另一方面，选择适当的酶类，可有效地使目标物溶出，同时控制非目标物的溶出，在提高溶出效率的同时，为后续的提取液的精制创造了有利条件。

酶技术是近年来广泛应用到有效成份提取中的一项生物技术，特别在多糖的提取过程中，使用酶可降低提取条件，在比较温和的条件中分解植物组织，加速多糖的释放或提取。此外，使用酶还可分解提取液中淀粉果胶、蛋白质等非目的产物，从而提高其提取率。因此，本专利选用纤维素酶提取石斛多糖，取得了较为满意的结果。

二、酶技术提取植物多糖在医药工业中的应用

我们知道中药制剂(提取过程这产生)的杂质大多为淀粉、果胶、蛋白质等，针对杂质可选用合适的酶予以分解除去。酶反应较温和地将植物组织分解，可以较大幅度提高收率，酶解是一种最大限度从植物体内提取有效成分的方法之一。在国内，上海中药一厂首先应用酶法成功地制备了生脉饮口服液。目前已经有纤维素酶、果胶酶和木瓜、蛋白酶以及复合酶等多种酶用于中药有效成分的提取。

三、石斛及其石斛多糖的作用简介

石斛为珍稀名贵中药，有“千金草”、“软黄金”、“药界大熊猫”之美称，而大别山霍山又是石斛家庭中的极品，也是我国著名的传统地道药材及出口商品。位列“中华九大仙草”之首。中华九大仙草为：霍山石斛、天山雪莲、三两人参、百二十年首乌、花甲茯苓、苁蓉、深山灵芝、海底珍珠、冬虫夏草等。目前保健品市场推崇备至的保健极品冬虫夏草仅排列最后。我国的药学巨著《神农本草经》将霍山石斛列为上品，它具有滋阴养胃、清热生津的功能。近代医学研究证明，霍山石斛对增强免疫力、抗疲劳、延缓衰老、美颜养肌、降低血糖、抑制肿瘤等有明显作用。为国家重点保护的名贵药用植物，是中药石斛中的上品。还有“救命仙草、还魂草”的美誉。

而石斛中含有人体所需的多种有益成分，其富含的石斛多糖、生物碱以及其菲类物质等都有提高机体免疫力、降低血糖含量等多种生物活性，不仅有清音润喉、滋阴清肺、生津止渴等的特效，还可用于降低心律、血压、减慢呼吸、扩张血管及血小板凝集，具有抗肿瘤、抗衰老、增强机体免疫力等作用，对人肺癌、胃癌、卵巢癌等肿瘤细胞和肝脏细胞中的胆固醇合成具有很强的抑制作用。

石斛历史上一直贵为皇室专用，皇帝们为了长生不老而用霍山石斛炼制长生丹。现在成为贵族们争先到原产地抢购的养生保健佳品。进入80年代，我国不少医药学者和科研机构对石斛的药效进行研究，作了以下阐述；1985年，中山医科大学的研究表明：石斛具有增强T细胞、B细胞、NK细胞和巨噬细胞的作用，对治疗鼻咽癌、何杰金病、非何杰金淋巴瘤等多种癌症有非常好的疗效，是一类前景可喜的中药免疫增强剂，可作为新的抗癌药物。1992年，福建中医学院研究发现，石斛有抗衰老功能，能大幅度提高动物体内SOD(延缓衰老的主要物质)水平，从而增强其抗衰老的功能，李时珍所言的″轻身延年″得到了现代科技的验证。1993年，浙江医科大学进行药理测试证实，石斛有显著提高机体免疫功能，抗衰老，刺激唾液分泌、抗疲劳、耐缺氧等方面的作用。1996年，中科院华南植物研究所和中山医科大学肿瘤研究所通过动物实验，证实石斛多糖能显著提高外周白细胞数和促进淋巴细胞移动抑制因子，强有力地清除实验条件下免疫抑制剂环磷酰胺的加入所引发的副作用，因此它能提高机体免疫功能，是一种很有价值的中药类免疫增强剂。2000年，经浙江卫生防疫站检测表明有辅助抑制肿瘤的作用。对经常熬夜、用脑、烟酒过度，体虚乏力的人群，经常饮用起到抗衰老、消除疲劳的作用非常适宜。台湾阳明大学新药研究中心等科研机构，经过多年研究表明，霍山石斛的确有明目作用，以霍山石斛为主的眼科用药有较高的临床应用价值，霍山石斛医治了全国很多失音，吵哑的政府官员、教师和演艺界人士。

现代药理研究表明：石解对咽喉疾病、糖尿病、肠胃疾病、白内障、心血管疾病和抑制肿瘤生长都具有显著疗效，对增强免疫力、抗疲劳、耐缺氧、提高人体应激能力、延缓衰老、养颜美发有明显作用。特别是对人的肺癌细胞具有极大的抑制作用和疗效，抑制率高达74.7％-97.2％。对于我国上千万咽喉炎、气管炎、肺癌患者、4千多万糖尿病患者来说是极好的保健良药。传统的多糖提取方法多为水提醇沉法，采用此法提取多糖，温度高，成本高，提取率低，多糖含量仅为7％-8％。而本专利选用纤维素酶用生物工程酶技术就可以比较温和地将石斛细胞壁充分溶胀，可以使多糖结构在不被破坏的情况下加速有效成分多糖的释放，同时还提高了多糖的提取率使多糖含量增至21.7％，比水提醇沉法提高了近3倍。

发明内容

本发明提供一种运用酶技术从中草药石斛中提取分离石斛多糖的提取工艺。

为达上述目的，本发明采用如下技术方案：

1、粉碎石斛(干品)植物；

2、加水混合；

3、加入纤维素酶；

4、调节pH值并酶解；

5、水提；

6、浓缩；

7、醇沉烘干。

具体实施例

以下结合一个石斛多糖的提取工艺实施例说明本发明。该提取工艺实施例中均与下述工艺步骤相同。

石斛取物石斛多糖的提取工艺，包括以下步骤：

1、将风干后的石斛植物粉碎；

2、将粉碎后的石斛粉末置于方型不锈钢容器中，并加入10倍量的水混合；

3、在混合液中加入2％的纤维素酶；

4、调节pH至6，并将水温恒定在40℃，酶解2小时；

5、酶解后水提3次，每次1小时

6、将上述三次水提液过滤后混合，置反应罐中旋转蒸发浓缩至1∶2；

7、醇沉：在上述浓缩液中缓缓加入纯度为70～80％的乙醇，不断搅拌，使含醇量达75％，静置至沉淀完全(约12小时)，取其沉淀60℃烘干；

通过上述实施例可获得高纯度(含量达21.7％)的石斛多糖提取物。

8、由于上述生产工艺实施例均可作为制品的主料，在此作为制品实施例的主料，通过加入添加剂制成制品。其中所述的添加剂可以是免疫球蛋白、氨基酸、中草药、生物制剂、各类乳品。以下举九个制品实施例列表说明人体母乳(含初乳)冻干粉制品。

表一

实施例	主料石斛多糖质量百分比	免疫球蛋白质量百分比(注1)	氨基酸质量百分比(注2)	中草药质量百分比(注3)	生物制剂质量百分比(注4)	各类乳品质量百分比(注5)
							例一	75％	5％	5％	5％	5％	5％
例二	75％	5％	15％	0％	0％	5％
							例三	75％	5％	0％	15％	0％	5％
例四	75％	5％	0％	0％	15％	5％
							例五	15％	85％	0％	0％	0％	5％
例六	80％	5％	5％	5％	0％	5％
							例七	80％	5％	0％	5％	5％	5％
例八	80％	5％	5％	5％	0％	5％
							例九	50％	35％	3％	4％	3％	5％

上述九个实施例的最终产品添加剂科学合理，针对性强。

[注一]所述的免疫球蛋白可以是IgA、IgG。可以是血清型，也可以是分泌型。

[注二]所述的氨基酸可以是牛黄酸、十八种人体必需氨基酸之一或其组合。

[注三]中草药可以是人参、黄芪、芦荟、枸杞子。可以是原药也可以是提取物。

[注四]生物制剂可以是各类生长因子、双岐或乳酸杆菌、抗生素、抗病毒药物。

[注五]所述的各类乳品可以是牛初乳粉剂、动植物蛋白粉剂。

Claims (12)

1.根据权利要求1所述的中草药石斛，其特征在于系霍山石斛、铁皮石斛；

2.根据权利要求1所述的酶解，其特征在于：所述的酶解为在10∶1的混合液中加入2％的纤维素酶；

3.根据权利要求1所述的酶技术工艺，其特征在于：所述的操作工艺技术参数为：酶解时间为2小时、酶解温度40℃、pH为6；水提3次，每次1小时。

4.根据权利要求1所述的醇沉其特征在于：所述的醇沉液为70～80％的乙醇，含醇量达到75％，醇沉后，60℃烘干。

5.一种石斛多糖制品，包括石斛多糖和添加剂，其特征在于：

所述石斛多糖采用权利要求1至4中权利要求所述方法制成，所述添加剂可以为免疫球蛋白、氨基酸、中草药、生物制剂、各类乳制品之一或其组合，其质量百分比分别为石斛多糖15～85％，添加剂15～85％。

6.根据权利要求5所述的石斛多糖制品，其特征在于：所述的免疫球蛋白可以是IgA、IgG；可以是血清型，也可以是分泌型。

7.根据权利要求5所述的石斛多糖制品，其特征在于：所述的氨基酸可以是牛磺酸、或十八种人体必需氨基酸之一或组合。

8.根据权利要求5所述的石斛多糖制品，其特征在于：所述的中草药可以是人参、黄芪、芦荟、枸杞子。可以是原药也可以是提取物。

9.根据权利要求5所述的石斛多糖制品，其特征在于：所述的生物制剂可以各类生长因子、双岐或乳酸杆菌、抗生素、抗病毒药物。

10.根据权利要求5所述的石斛多糖制品，其特征在于：所述的各类乳品可以是牛初乳粉剂、婴幼儿奶粉及动植物蛋白粉剂。

11.根据权利要求5所述的石斛多糖制品，其特征在于：所述的添加剂中，各组分的质量百分比分别为免疫球蛋白5～85％，氨基酸0～15％，中草药0～15％，生物制剂0～15％，各类乳品0～15％。

12.根据权利要求5所述的石斛多糖制品作用为：

a、经常熬夜、用脑、用眼、作息不正常、烟酒过度，体虚乏力的人群；

b、生活紧张、压力过大、应酬频繁，经常感到身心疲惫的人群；

c、经常抽烟、饮酒、应酬频繁

d、饮食不均衡，爱吃肉类或甜食的糖尿病、心脑血管疾病人群；

e、免疫力低下、体弱多病及咽喉疾病、肠胃疾病、白内障人群；

f、久病大病、手术后及癌症放化疗后患者。