CN106822172A - 一种提高猴头菇多糖肠道吸收的纳米化方法 - Google Patents

一种提高猴头菇多糖肠道吸收的纳米化方法 Download PDF

Info

Publication number
CN106822172A
CN106822172A CN201611190005.0A CN201611190005A CN106822172A CN 106822172 A CN106822172 A CN 106822172A CN 201611190005 A CN201611190005 A CN 201611190005A CN 106822172 A CN106822172 A CN 106822172A
Authority
CN
China
Prior art keywords
polysaccharide
dichloromethane
solution
hericium erinaceum
acetone
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201611190005.0A
Other languages
English (en)
Inventor
秦韬
黄帆
黄一帆
李健
马玉芳
黄小红
俞道进
任喆
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Fujian Agriculture and Forestry University
Original Assignee
Fujian Agriculture and Forestry University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Fujian Agriculture and Forestry University filed Critical Fujian Agriculture and Forestry University
Priority to CN201611190005.0A priority Critical patent/CN106822172A/zh
Publication of CN106822172A publication Critical patent/CN106822172A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/10—Alcohols; Phenols; Salts thereof, e.g. glycerol; Polyethylene glycols [PEG]; Poloxamers; PEG/POE alkyl ethers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/14—Esters of carboxylic acids, e.g. fatty acid monoglycerides, medium-chain triglycerides, parabens or PEG fatty acid esters
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/34—Macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyesters, polyamino acids, polysiloxanes, polyphosphazines, copolymers of polyalkylene glycol or poloxamers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0053—Mouth and digestive tract, i.e. intraoral and peroral administration
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/06—Fungi, e.g. yeasts
    • A61K36/07—Basidiomycota, e.g. Cryptococcus

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Abstract

本发明提供一种提高猴头菇多糖肠道吸收的纳米化方法，按将纯化猴头菇多糖与PEG 溶液混合，预冻12 小时；冻好的样品放到真空冷冻干燥机中冻干24 h。用二氯甲烷洗涤冻干的粉末，干燥后得到多糖纳米颗粒。将多糖纳米颗粒和PLGA溶解于二氯甲烷与丙酮的混合液中，超声得到混悬液，加入到5%的普朗尼克水溶液中，溶液置于旋转蒸发仪中，直至二氯甲烷与丙酮挥发完全，离心，微球沉降析出；收集沉降的微球，用蒸馏水洗涤，真空冷冻干燥，即得成品。本发明首次采用纳米扩散法包裹纯化多糖，明确了药物构成，提高了药物药效。

Description

一种提高猴头菇多糖肠道吸收的纳米化方法
技术领域
本发明属于医药技术领域，具体涉及一种提高猴头菇多糖肠道吸收的纳米化方法。
背景技术
猴头菇多糖是从优质猴头菇子实体中提取的有效活性成分，猴头菇的主要成分是多糖类和猴头菌素，经热水提取的猴头菇多糖对小白鼠肉瘤180和艾氏腹水癌有明显的抑制作用，同时具有助消化、利五脏的功能，对慢性胃炎、十二指肠溃疡等多种消化道疾病均有较好的疗效，能提高人体免疫能力。
目前针对的猴头菇多糖的纳米化方法包括了PLGA溶剂扩散法，但其存在三个问题：1.直接将多糖与PLGA混合不利于多糖的包裹，降低了包封率。2..用二氯甲烷作为有机相不利于形成较小的纳米粒子。3. 将该混悬液滴加到明胶水溶液容易造成水溶性药物从聚合物相的泄漏。4.猴头菇浸膏所含物质复杂，不利于有效成分的确定和提高药效。
发明内容
本发明的目的在于提供一种提高猴头菇多糖肠道吸收的纳米化方法。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种提高猴头菇多糖肠道吸收的纳米化方法，所述方法包括如下：
（1）将纯化的猴头菇多糖配成5wt.%的溶液置于烧杯中，然后将5wt.%PEG 溶液按照猴头菇多糖溶液：PEG 溶液体积比为1：40的量加入，磁力搅拌机2000 rpm 搅拌10 min，静置待表面气泡基本消失后，置于-20℃的冰箱预冻12 小时；
（2）冻好的样品放到真空冷冻干燥机中冻干24 h；用二氯甲烷洗涤冻干的粉末，经涡旋使PEG 充分溶解后用12000 rpm 离心5 min，除去上清液，加入新的二氯甲烷，重复3次，放入真空干燥箱过夜，得到干燥的多糖纳米颗粒；
（3）将多糖纳米颗粒和PLGA溶解于二氯甲烷与丙酮的混合液中，多糖纳米颗粒和PLGA的质量比为1:5，超声得到混悬液，边搅拌边加入到5wt.%的普朗尼克水溶液中，溶液置于旋转蒸发仪中，温度为60℃，直至二氯甲烷与丙酮挥发完全，离心，微球沉降析出；收集沉降的微球，用蒸馏水洗涤，真空冷冻干燥，即得成品。
二氯甲烷与丙酮的体积比例为2.2:1。
本发明的优点在于：
本发明通过使用分段式的制备，将多糖与PEG混合后再与PLGA混合提高了纳米多糖的包封率和载药量。将二氯甲烷与丙酮以2.2：1混合，促进聚合物的分散，容易形成较小的粒子。将该混悬液滴加到明胶水溶液容易造成水溶性药物从聚合物相的泄漏，本发明通过三甘油脂代替明矾水溶液解决了此类问题。猴头菇浸膏所含物质复杂，不利于有效成分的确定，本发明首次采用纳米扩散法包裹纯化多糖，明确了药物构成，提高了药物药效。
附图说明
图1 不同猴头菇多糖的转运量。
图2不同猴头菇多糖的转运率。
具体实施方式
实施例1
一种提高猴头菇多糖肠道吸收的纳米化方法，所述方法包括如下：
（1）将纯化的猴头菇多糖配成5wt.%的溶液置于烧杯中，然后将5wt.%PEG 溶液按照猴头菇多糖溶液：PEG 溶液体积比为1：40的量加入，磁力搅拌机2000 rpm 搅拌10 min，静置待表面气泡基本消失后，置于-20℃的冰箱预冻12 小时；
（2）冻好的样品放到真空冷冻干燥机中冻干24 h；用二氯甲烷洗涤冻干的粉末，经涡旋使PEG 充分溶解后用12000 rpm 离心5 min，除去上清液，加入新的二氯甲烷，重复3次，放入真空干燥箱过夜，得到干燥的多糖纳米颗粒；
（3）将多糖纳米颗粒和PLGA溶解于二氯甲烷与丙酮的混合液中，多糖纳米颗粒和PLGA的质量比为1:5，超声得到混悬液，边搅拌边加入到5wt.%的普朗尼克水溶液中，溶液置于旋转蒸发仪中，温度为60℃，直至二氯甲烷与丙酮挥发完全，离心，微球沉降析出；收集沉降的微球，用蒸馏水洗涤，真空冷冻干燥，即得成品。
使用该制备方法后，纳米多糖的包封率从传统方法的44%提高到56%，载药量从4.15%提高到6.64%。
实施例2
1. 鸡肠上皮原代细胞的制备
无菌取鸡胚肠组织，PBS反复洗涤，剔除肠系膜，剪成小于1 mm3的组织块，Ⅰ型中性蛋白酶和Ⅺ型胶原酶联合消化，在37 ℃水浴箱中，80 r/min搅拌30 min。消化完成后以1000 r/min离心10 min，向细胞沉淀中加入少量DMEM培养基悬浮细胞，离心洗涤3次后，收集的细胞用含10% FBS的细胞培养液DMEM 12 g/L +20 μg/L 表皮生长因子+100 mg/L 肝素钠+110mg/L 丙酮酸钠+2.5 mg /L胰岛素+200 mmol/L 谷氨酸氨+100 U/L 青霉素+100 μg/L 链霉素悬浮，种植到玻璃细胞瓶中。
2. 鸡小肠上皮细胞单层模型的建立
将对数生长期细胞按 1×105/cm2 利用Transwell 12孔板上培养，倒置显微镜观察培养后第2、5、12、20 d的生长情况，并通过透射电镜对生长20 d的细胞进行超微结构观察，确定鸡小肠上皮细胞从形态学上看已形成完整的细胞单层。
3. 纳米猴头菇多糖在鸡小肠上皮细胞上的跨膜转运
鸡小肠上皮细胞在Transwell 12孔板上培养成单层细胞后，设2个试验组（37 ℃，pH值7.4），分别是猴头菇多糖和纳米猴头菇多糖。各组从AP→BL侧的转运时，将多糖加入到细胞AP侧（0.4 mL），在BL侧加入不含药物的HBSS液（0.6 mL），每组重复 4 孔。放置37℃恒温摇床中孵育，根据实验需要，不同时间点从BL侧取样检测转运量。
4.结果
从图1-2可以看出，纳米猴头菇多糖的转运量与转运率优于猴头菇多糖。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰，皆应属本发明的涵盖范围。

Claims (2)

1.一种提高猴头菇多糖肠道吸收的纳米化方法，其特征在于：所述方法包括如下：
（1）将纯化的猴头菇多糖配成5wt.%的溶液置于烧杯中，然后将5wt.%PEG 溶液按照猴头菇多糖溶液：PEG 溶液体积比为1：40的量加入，磁力搅拌机2000 rpm 搅拌10 min，静置待表面气泡基本消失后，置于-20℃的冰箱预冻12 小时；
（2）冻好的样品放到真空冷冻干燥机中冻干24 h；用二氯甲烷洗涤冻干的粉末，经涡旋使PEG 充分溶解后用12000 rpm 离心5 min，除去上清液，加入新的二氯甲烷，重复3次，放入真空干燥箱过夜，得到干燥的多糖纳米颗粒；
（3）将多糖纳米颗粒和PLGA溶解于二氯甲烷与丙酮的混合液中，多糖纳米颗粒和PLGA的质量比为1:5，超声得到混悬液，边搅拌边加入到5wt.%的普朗尼克水溶液中，溶液置于旋转蒸发仪中，温度为60℃，直至二氯甲烷与丙酮挥发完全，离心，微球沉降析出；收集沉降的微球，用蒸馏水洗涤，真空冷冻干燥，即得成品。
2.根据权利要求1所述的一种提高猴头菇多糖肠道吸收的纳米化方法，其特征在于：氯甲烷与丙酮的体积比例为2.2:1。
CN201611190005.0A 2016-12-21 2016-12-21 一种提高猴头菇多糖肠道吸收的纳米化方法 Pending CN106822172A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201611190005.0A CN106822172A (zh) 2016-12-21 2016-12-21 一种提高猴头菇多糖肠道吸收的纳米化方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201611190005.0A CN106822172A (zh) 2016-12-21 2016-12-21 一种提高猴头菇多糖肠道吸收的纳米化方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN106822172A true CN106822172A (zh) 2017-06-13

Family

ID=59140463

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201611190005.0A Pending CN106822172A (zh) 2016-12-21 2016-12-21 一种提高猴头菇多糖肠道吸收的纳米化方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN106822172A (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115553469A (zh) * 2022-09-27 2023-01-03 六安益普罗科技有限公司 一种胃黏膜粘附的益生菌缓释微球、制备方法及用于制备抗幽门螺旋杆菌或缓解胃炎的食品

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102370622A (zh) * 2010-08-24 2012-03-14 浙江大学 一种载药物纳米粒及其制备方法和应用
CN102885784A (zh) * 2012-09-26 2013-01-23 复旦大学附属金山医院 纳米颗粒混悬液包油－油包纳米药物制备微球的方法
CN104403021A (zh) * 2014-11-28 2015-03-11 哈尔滨墨医生物技术有限公司 一种高活性猴头菇多糖的提取方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102370622A (zh) * 2010-08-24 2012-03-14 浙江大学 一种载药物纳米粒及其制备方法和应用
CN102885784A (zh) * 2012-09-26 2013-01-23 复旦大学附属金山医院 纳米颗粒混悬液包油－油包纳米药物制备微球的方法
CN104403021A (zh) * 2014-11-28 2015-03-11 哈尔滨墨医生物技术有限公司 一种高活性猴头菇多糖的提取方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
杜雄伟等: "黄芪多糖MPEG-PLA嵌段共聚纳米微球制备及体外释放研究", 《中兽医学杂志》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115553469A (zh) * 2022-09-27 2023-01-03 六安益普罗科技有限公司 一种胃黏膜粘附的益生菌缓释微球、制备方法及用于制备抗幽门螺旋杆菌或缓解胃炎的食品
CN115553469B (zh) * 2022-09-27 2023-10-03 六安益普罗科技有限公司 一种胃黏膜粘附的益生菌缓释微球、制备方法及用于制备抗幽门螺旋杆菌或缓解胃黏膜炎的药物

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104558117B (zh) 一种乙酰胆碱受体介导靶向的d构型多肽及其应用
CN104788670B (zh) 一种双响应性葡聚糖‑聚氨基酸嵌段共聚物及其制备方法和载药胶束
CN104436205B (zh) 一种以海洋硫酸多糖制备的纳米载体及纳米复合体与应用
CN105999299B (zh) 一种小分子胶束纳米载药系统及其制备方法与应用
CN109288819B (zh) 一种含槲皮素和益生因子的结肠靶向纳米纤维膜及其制备方法和应用
CN103768024B (zh) 人参皂苷Rh2白蛋白复合纳米粒及其制备方法
CN106265514B (zh) 一种盐酸阿霉素磁性纳米粒及其制备方法
CN107375217A (zh) 一种碳酸钙‑(聚鸟氨酸/岩藻聚糖)4自组装载体及制备方法
CN104434791A (zh) 一种改性白芨多糖衍生物纳米载体的制备及应用
CN101658484B (zh) 胆固醇甲酰氯修饰的壳聚糖共聚物载药胶束的制备方法和应用
CN109260177A (zh) 一种盐酸小檗碱复合物纳米粒的制备方法及其应用
CN104208704B (zh) 一种pH敏感的碳纳米管靶向递药体系的制备方法
CN107048349A (zh) 一种复方羊肚菌菌丝体多糖颗粒剂
CN110025593A (zh) 细胞微囊、载有抗癌药物的细胞微囊、其制备方法和应用
CN106822172A (zh) 一种提高猴头菇多糖肠道吸收的纳米化方法
CN101874781B (zh) 疏水改性葡聚糖修饰的长循环脂质体及其制备方法
CN104983695B (zh) 一种盐酸头孢噻呋脂质体冻干剂及其制备方法
CN104857502B (zh) 一种载血管内皮生长因子纳米控释复合物及其制备方法
CN114224839A (zh) 一种细胞膜修饰脂质体的方法
CN109568271A (zh) 一种pH敏感的肿瘤靶向的重组高密度脂蛋白、制备方法及应用
CN109200021A (zh) 一种溶酶体靶向的pH敏感性纳米粒及其制备方法与应用
CN103524639B (zh) 一种壳寡糖/吲哚美辛接枝物的合成方法及其应用
CN106466300B (zh) 一种装载难溶性药物的复合壳聚糖纳米粒制剂及其制备方法和应用
CN102210655B (zh) 一种头孢匹胺钠微球及其制备方法
CN107595778A (zh) 一种紫杉醇口服功能化脂质体及其制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20170613

RJ01 Rejection of invention patent application after publication