CN106806380A - 一种具有降低血糖功效的药物组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种具有降低血糖功效的药物组合物，它由以下重量份数的成分组成：β‑葡聚糖100～300份、白藜芦醇5～20份、京尼平苷10～40份、人参皂苷5～20份。本发明药物组合物能显著降低糖尿病小鼠的空腹血糖，提高糖耐量，提高血清胰岛素水平，提高胰岛素敏感指数，同时，本发明还能平稳持续地降低血糖，糖尿病小鼠停止给药30天后血糖值也能维持在理想水平，表明本发明能减少血糖反弹，治疗糖尿病更加持久。

Description

一种具有降低血糖功效的药物组合物
技术领域
本发明涉及一种具有降低血糖功效的药物组合物。
背景技术
随着经济高速发展和工业化进程的加速，生活方式的改变和老龄化进程的加速，使我国糖尿病患病率正呈快速上升的趋势，成为继心脑血管疾病、肿瘤之后另一个严重危害人民健康的重要慢性非传染性疾病。
2型糖尿病的特征是胰岛素抵抗和胰岛β细胞进行性衰竭，后者是糖尿病进展和恶化的决定性因素。不论是1型还是2型糖尿病，最终在多因素损害下均会导致β细胞衰竭，β细胞的分泌缺陷和数量缺失可导致胰岛素供给缺乏，机体代谢障碍。糖尿病早期，β细胞功能损害可以部分可逆，但到了晚期，由于胰岛数量和β细胞总量减少，功能衰退发展为不可逆。因此，保护β细胞功能是有效和持久控制血糖从而减少糖尿病慢性并发症的根本措施。
由于糖尿病诱因复杂，单一成分无法真正延缓糖尿病病程进展，因此需要多种药物联合并以合适比例配伍，才能发挥更好的降糖作用。本发明针对糖尿病的发病特点，采用科学、系统的方法，从中国传统食药两用类药材的活性成分中筛选出β-葡聚糖、白藜芦醇、京尼平苷和人参皂苷，并将这四种成分进行合适比例的配伍，从而用于控制血糖从而治疗糖尿病。
发明内容
本发明的目的是提供一种药物组合物，该组合物具有保护胰岛β细胞、降低血糖、提高免疫力等功效，适合于糖耐量异常、血糖值高的糖尿病人。
为解决上述技术问题，本发明首先通过细胞实验，从中国传统药食两用药材的活性成分中筛选出四种具有保护胰岛β细胞功效的成分：β-葡聚糖、白藜芦醇、京尼平苷和人参皂苷，并将这四种成分进行合适比例的配伍组成组合物。所述组合物按重量份数由下述组分组成：β-葡聚糖100～300份、白藜芦醇5～20份、京尼平苷10～40份、人参皂苷5～20份。
其中，所述β-葡聚糖是青稞、燕麦或大麦中的活性成分；所述白藜芦醇是虎杖、花生、葡萄、桑葚中的活性成分；所述京尼平苷是栀子中的活性成分。
优选地，组合物按重量份数由下述组分组成：β-葡聚糖200份、白藜芦醇15份、京尼平苷25份、人参皂苷12份。
然后通过动物实验观察组合物降血糖效果，结果显示与高血糖模型组相比，本发明药物组合物能显著降低糖尿病小鼠的空腹血糖，提高糖耐量，提高血清胰岛素水平，提高胰岛素敏感指数，同等剂量下组合物改善糖尿病小鼠体重降低、提高糖耐量和提高空腹胰岛素的能力显著优于四种单一组分(P＜0.05)，表明四种成分配伍能显著提高疗效。同时，本发明还能通过保护胰岛β细胞，恢复胰岛功能，平稳持续地降低血糖，糖尿病小鼠停止给药30天后血糖值也能维持在理想水平，表明本发明能减少血糖反弹，治疗糖尿病更加持久。
附图说明
图1：β-葡聚糖对INS-1细胞四氧嘧啶损伤LDH活力的影响；
图2：白藜芦醇对INS-1细胞四氧嘧啶损伤LDH活力的影响；
图3：京尼平苷对INS-1细胞四氧嘧啶损伤LDH活力的影响；
图4：人参皂苷对INS-1细胞四氧嘧啶损伤LDH活力的影响。
具体实施方式
为了更好地解释本发明，以下结合具体实施例进一步阐明本发明的主要内容，但本发明的内容不仅仅局限于以下实施例。
实施例1.利用细胞实验筛选具有保护胰岛细胞作用的物质
INS-1细胞购自中国医学科学院基础研究所细胞资源中心，用完全培养基(含10％FBS和100U青链霉素溶液的RPMI-1640培养基)于37℃、5％CO2饱和湿度培养。
取对数生长期的INS-1细胞，0.25％胰蛋白酶消化，用完全培养基吹打，制备成单个细胞悬液，将细胞浓度调整为1×105个/ml，接种于96孔板中，100μl/孔，置于5％CO2、37℃培养箱中培养24h。根据实验需求分组，处理组细胞给予24mmol/L的四氧嘧啶损伤，同时分别给与不同浓度的候选药物，每个浓度设置6个复孔，37℃继续培养24h；另外还设立正常对照组(不给予任何药物处理)、模型组(仅给予24mmol/L的四氧嘧啶损伤)、阳性对照组(在四氧嘧啶处理的基础上加入40mmol/L茶多酚)。处理结束后取上清，移至另一96孔板中，按照南京建成生物科技公司乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒的要求操作，按下面公式计算各组细胞培养上清中LDH的活力：
所有数据用SPSS 16.0软件进行统计分析，实验所得数据均以平均数加减标准误(X±SEM)表示，各组均数之间均用单因素方差检验进行差异性比较，其中P<0.05表示差异具有显著性。
结果如图1-4所示，#P<0.05，##P<0.01，与正常对照组相比有显著性差异；*P<0.05，与四氧嘧啶组模型组相比有显著性差异。
实验发现四氧嘧啶损伤细胞后，细胞培养上清中的LDH活力与正常对照组相比显著升高，而处理组和阳性对照组均能降低细胞培养上清中LDH活力，说明β-葡聚糖、白藜芦醇、京尼平苷、人参皂苷在一定浓度范围内对四氧嘧啶诱导的INS-1大鼠胰岛细胞损害有显著保护性作用。
实施例2.组合物辅助降血糖作用研究
选用清洁级昆明小鼠，体重18～20g，四氧嘧啶160mg/kg单次腹腔注射造模后，选取血糖值稳定在成模水平(10-25mmol/L)的小鼠随机分为模型组，组合物组(灌胃320mg/kg的组合物)，β-葡聚糖组(灌胃320mg/kg的β-葡聚糖)、白藜芦醇组(灌胃320mg/kg的白藜芦醇)、京尼平苷组(灌胃320mg/kg的京尼平苷)和人参皂苷组(灌胃320mg/kg的人参皂苷)，同时另设正常组，灌胃生理盐水。
在造模后及灌胃30、45天时，测定空腹血糖水平、血糖曲线下面积(反应糖耐量)及血清胰岛素水平，所有数据用SPSS 16.0软件进行统计分析，实验所得数据均以平均数加减标准误(X±SEM)表示，各组均数之间均用单因素方差检验(one-way ANOVA)进行差异性比较，其中P<0.05表示差异具有显著性。结果如表1～4所示。与模型组相比，β-葡聚糖、白藜芦醇、京尼平苷和人参皂苷具有改善糖尿病小鼠体重降低的症状、降低小鼠的空腹血糖，提高糖耐量，提高血清胰岛素水平的趋势，同时，组合物能显著改善糖尿病小鼠体重降低的症状、显著降低小鼠的空腹血糖，提高糖耐量，提高血清胰岛素水平，与模型组相比均有显著差异(P＜0.05)，组合物改善糖尿病小鼠体重降低、提高糖耐量和提高空腹胰岛素的能力优于四种组分单一给药(P＜0.05)，表明组合物有很好的辅助降血糖功效，且作用效果优于同等剂量的单一组分。
表1动物实验各组体重变化(g)
组别 30天体重变化量 45天体重变化量
正常组 6.33±2.74 8.51±2.72
模型组 2.14±1.54* 0.58±3.26*
组合物组 5.94±1.97 7.26±1.48#
β-葡聚糖组 4.61±1.03 4.58±1.18#&
白藜芦醇 3.52±1.31 3.85±2.36#&
京尼平苷 3.14±2.80 3.25±1.89#&
人参皂苷 2.98±1.67 3.11±2.373#&
与同期正常组比较，*P<0.05，与同期模型组比较，#P<0.05，与同期组合物组比较，&P<0.05，n＝8～10。
表2动物试验各组血糖变化(mmol/L)
组别 0天 30天 45天
正常组 5.28±0.42 4.86±0.74 5.88±0.52
模型组 17.84±0.98* 22.21±1.79* 20.16±1.66*
组合物组 18.18±1.16* 14.13±0.88*# 12.24±1.36*#
β-葡聚糖组 17.58±1.16* 17.13±0.88*# 16.24±1.36*#&
白藜芦醇 18.12±1.21* 15.65±1.03*# 16.78±1.25*#&
京尼平苷 18.74±1.89* 16.21±1.80*# 18.00±1.89*&
人参皂苷 18.28±0.86* 18.02±0.97*& 18.79±1.37*&
与同期正常组比较，*P<0.05，与同期模型组比较，#P<0.05，与同期组合物组比较，&P<0.05，n＝8～10。
表3动物试验各组血糖曲线下面积(反应糖耐量)变化(mmol/L)
组别 0天 30天 45天
正常组 14.08±0.57 13.63±0.78 14.23±1.85
模型组 45.32±1.77* 46.43±2.47* 44.01±1.52*
组合物组 43.08±1.96* 32.37±1.89*# 30.06±1.71*#
β-葡聚糖组 44.08±1.96* 38.27±1.89*#& 33.06±1.71*#
白藜芦醇 43.36±2.20* 37.20±2.42*#& 32.49±2.73*#
京尼平苷 42.83±1.68* 36.72±1.86*#& 35.62±2.09*#&
人参皂苷 45.54±2.29* 38.76±2.52*#& 37.39±1.88*#&
与同期正常组比较，*P<0.05，与同期模型组比较，#P<0.05，与同期组合物组比较，&P<0.05，n＝8～10。
表4动物试验各组空腹胰岛素和胰岛素敏感指数变化
组别 空腹胰岛素(mU/L) 胰岛素敏感指数(ISI)
正常组 15.62±0.54 -4.52±0.30
模型组 9.99±0.68 -5.30±0.61*
组合物组 14.29±0.78*# -4.91±0.13*#
β-葡聚糖组 9.29±0.78*& -5.06±0.20*
白藜芦醇 10.37±0.88*& -5.16±0.20*&
京尼平苷 11.86±0.63*& -5.11±0.21*
人参皂苷 11.92±0.48*& -5.18±0.14*&
与同期正常组比较，*P<0.05，与同期模型组比较，#P<0.05，与同期组合物组比较，&P<0.05，n＝8～10
实施例3.组合物维持血糖调控作用研究
选用清洁级昆明小鼠，体重18～20g，四氧嘧啶160mg/kg单次腹腔注射造模后，选取血糖值稳定在成模水平(10-25mmol/L)的小鼠随机分为模型组，组合物组(灌胃320mg/kg的组合物)，β-葡聚糖组(灌胃320mg/kg的β-葡聚糖)、白藜芦醇组(灌胃320mg/kg的白藜芦醇)、京尼平苷组(灌胃320mg/kg的京尼平苷)和人参皂苷组(灌胃320mg/kg的人参皂苷)，同时另设正常组，灌胃生理盐水。灌胃45天后各组停止灌胃，正常饮食饲养30天，测定空腹血糖水平及血糖曲线下面积(反应糖耐量)，所有数据用SPSS 16.0软件进行统计分析，各组均数之间均用单因素方差检验进行差异性比较，其中P<0.05表示差异具有显著性。结果如表5所示。与模型组相比，组合物、β-葡聚糖、白藜芦醇、京尼平苷和人参皂苷都可以显著改善糖尿病小鼠体重降低的症状，但在降低小鼠的空腹血糖，提高糖耐量方面，只有组合物组与模型组相比有显著差异，同等剂量下组合物改善糖尿病小鼠体重降低、降低空腹血糖和提高糖耐量的能力优于四种组分单一给药(P＜0.05)，表明本发明组合物降血糖效力平稳持久，糖尿病小鼠即使停止喂养服药，血糖值也能维持在理想水平。
表5动物试验各组体重、空腹血糖和血糖曲线下面积(反应糖耐量)变化
与正常组比较，*P<0.05，与模型组比较，#P<0.05，与组合物组比较，&P<0.05，n＝8～10。

Claims (2)

1.一种具有降低血糖功效的药物组合物，其特征在于由以下重量份数的成分组成：β-葡聚糖100～300份、白藜芦醇5～20份、京尼平苷10～40份、人参皂苷5～20份。
2.如权利要求1所述的具有降低血糖功效的药物组合物，其特征在于由以下重量份数的成分组成：β-葡聚糖200份、白藜芦醇15份、京尼平苷25份、人参皂苷12份。
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